NY/T 201中華人民共和國農(nóng)業(yè)部 發(fā)布-實(shí)施-發(fā)布植物新品種特異性、一致性和穩(wěn)定性測試指南 紫花苜蓿和雜花苜蓿Guidelines for the conduct of tests for distinctness, uniformity and stability Lucerne（Medicago sativa L. & Medicago varia Martyn）(UPOV:TG/6/5 ,Guidelines for the conduct of tests for distinctness, uniformity and stabilityLucerne, NEQ)(報(bào)批稿)NY/T 201中華人民共和國農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)國國家標(biāo)準(zhǔn)ICS 65.020.20B 05 1目 次前 言21 范圍32 規(guī)范性引用文件33 術(shù)語和定義34 符號35 繁殖材料的要求46 測試方法47 特異性、一致性和穩(wěn)定性結(jié)果的判定 58 性狀59 品種分組510 技術(shù)問卷5附 錄 A （規(guī)范性附錄）苜蓿性狀表6附 錄 B（規(guī)范性附錄）苜蓿性狀的解釋10附 錄 C（規(guī)范性附錄）苜蓿技術(shù)問卷18前 言本指南依據(jù)GB/T 1.12009給出的規(guī)則起草。本指南使用重新起草法非等效采用了國際植物新品種保護(hù)聯(lián)盟(UPOV)指南“UPOV:TG/6/5 Guidelines for the conduct of tests for distinctness, uniformity and stabilityLucerne”。 本指南對應(yīng)于UPOV指南TG/6/5，與TG/6/5的一致性程度為非等效。 本指南與UPOV指南TG/6/5相比存在技術(shù)性差異，主要差異如下：增加了“根：根蘗性”、“葉：中央小葉寬度”、“葉：中央小葉長度”、“葉：葉形”、 “莢：莢果主要類型”和“抗性：苜蓿霜霉病”共6個(gè)性狀；經(jīng)過試驗(yàn)確定了57個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品種，其中，UPOV標(biāo)準(zhǔn)品種31個(gè)，增加標(biāo)準(zhǔn)品種26個(gè)；刪除了“抗性：苜蓿黃萎病”、“抗性：苜蓿莖線蟲”、“抗性：苜蓿無網(wǎng)蚜”共3個(gè)性狀。本指南由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部科技教育司提出。本指南由全國植物新品種測試標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)（SAC/TC277）歸口。本指南起草單位:蘭州大學(xué)草地農(nóng)業(yè)科技學(xué)院、農(nóng)業(yè)部科技發(fā)展中心、農(nóng)業(yè)部牧草與草坪草種子質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測試中心(蘭州)。本指南主要起草人:王彥榮、余玲、孫建華、南志標(biāo)、曾彥軍、劉文獻(xiàn)、李世雄、唐浩、段廷玉、張吉宇、王玉青。植物新品種特異性、一致性和穩(wěn)定性測試指南紫花苜蓿和雜花苜蓿1 范圍本指南規(guī)定了紫花苜蓿和雜花苜蓿(Medicago sativa L.和 Medicago x varia Martyn)新品種特異性、一致性和穩(wěn)定性測試的技術(shù)要求和結(jié)果判定的一般原則。本指南適用于紫花苜蓿和雜花苜蓿新品種特異性、一致性和穩(wěn)定性測試和結(jié)果判定。2 規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T 19557.1 植物新品種特異性、一致性和穩(wěn)定性測試指南 總則3 術(shù)語和定義GB/T 19557.1界定的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1 群體測量 single measurement of a group of plants or parts of plants對一批植株或植株的某器官或部位進(jìn)行測量，獲得一個(gè)群體記錄。3.2 個(gè)體測量 measurement of a number of individual plants or parts of plants對一批植株或植株的某器官或部位進(jìn)行逐個(gè)測量，獲得一組個(gè)體記錄。3.3 群體目測 visual assessment by a single observation of a group of plants or parts of plants對一批植株或植株的某器官或部位進(jìn)行觀測，獲得一個(gè)群體記錄。3.4 個(gè)體目測 visual assessment by observation of individual plants or parts of plants對一批植株或植株的某器官或部位逐個(gè)觀測，獲得一組個(gè)體記錄。4 符號下列符號適用于本文件：MG：群體測量MS：個(gè)體測量VG：群體目測VS：個(gè)體目測QL：質(zhì)量性狀QN：數(shù)量性狀PQ：假質(zhì)量性狀*：標(biāo)注性狀為UPOV用于統(tǒng)一品種描述所需要的重要性狀，除非受環(huán)境條件限制性狀的表達(dá)狀態(tài)無法測試，所有UPOV成員都應(yīng)使用這些性狀。(a)-(c)：標(biāo)注內(nèi)容在B.2中進(jìn)行了詳細(xì)解釋。(+)：標(biāo)注內(nèi)容在B.3中進(jìn)行了詳細(xì)解釋。A、B、C：在表A.1中“觀測時(shí)期/方法/試驗(yàn)區(qū)”一欄，字母A、B、C分別表示穴播試驗(yàn)區(qū)、條播試驗(yàn)區(qū)和特殊試驗(yàn)。5 繁殖材料的要求5.1 繁殖材料以苜蓿種子形式提供。5.2 遞交的種子數(shù)量至少1 kg。5.3 遞交的繁殖材料外觀應(yīng)健康、活力好，未受到任何病蟲害的影響。繁殖材料的質(zhì)量至少達(dá)到質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的要求:凈度98，發(fā)芽率85（含硬實(shí)，但應(yīng)注明硬實(shí)率），含水量11%。5.4 遞交的繁殖材料不應(yīng)進(jìn)行任何影響品種性狀表達(dá)的處理。如果繁殖材料已處理，應(yīng)提供處理的詳細(xì)說明。5.5 來自國外的繁殖材料，應(yīng)符合中華人民共和國海關(guān)手續(xù),并滿足植物檢驗(yàn)檢疫的要求。6 測試方法6.1測試周期測試的周期至少為兩個(gè)完整的生長周期（從出苗或返青到種子成熟）。6.2 測試地點(diǎn)測試通常在一個(gè)地點(diǎn)進(jìn)行。如果某些性狀在該地點(diǎn)不能充分表達(dá)，可在其他符合條件的地點(diǎn)對其進(jìn)行觀測。6.3試驗(yàn)設(shè)計(jì)及管理6.3.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)申請品種和近似品種相鄰種植。試驗(yàn)應(yīng)在能保證植株正常生長的條件下進(jìn)行；試驗(yàn)區(qū)應(yīng)地勢平坦，土壤質(zhì)地及肥力等狀況應(yīng)基本一致。試驗(yàn)一般設(shè)有穴播、條播和特殊試驗(yàn)三種： 穴播試驗(yàn)區(qū)：測試品種植株總數(shù)不少于60株，每品種3個(gè)重復(fù)，每重復(fù)不少于20株，株行距均為60 cm； 條播試驗(yàn)區(qū)：每品種3個(gè)重復(fù)，每重復(fù)2行，行長不小于2 m，行距30 cm，密度200株/m左右； 特殊試驗(yàn)：對性狀評估的專項(xiàng)試驗(yàn),樣本大小依據(jù)測試性狀而定（見附錄A和附錄B）。6.3.2田間管理可按當(dāng)?shù)卮筇锷a(chǎn)管理方式進(jìn)行。6.4 性狀觀測6.4.1觀測時(shí)期性狀觀測應(yīng)按照表A.1和表A.2列出的生育階段進(jìn)行。生育階段描述見表B.1。6.4.2觀測方法除非另有要求，全部田間觀測應(yīng)在穴播試驗(yàn)區(qū)進(jìn)行。若同時(shí)也在條播試驗(yàn)區(qū)進(jìn)行，性狀的表達(dá)及其記錄方法可能同穴播的植株有所不同，因?yàn)闂l播難以進(jìn)行單株測試。性狀觀測應(yīng)按照表A.1和表A.2規(guī)定的觀測方法(VG、VS、MG、MS)進(jìn)行。部分性狀觀測方法見附錄B的B.2和B.3。6.4.3觀測數(shù)量除非另有說明，個(gè)體觀測性狀(VS、MS)植株取樣數(shù)量不少于60個(gè)，在觀測植株的器官或部位時(shí)，每個(gè)植株取樣數(shù)量應(yīng)為1個(gè)。群體觀測性狀(VG、MG)應(yīng)觀測整個(gè)小區(qū)或規(guī)定大小的混合樣本。6.5 附加測試為了特殊目的，可以開展附加測試。必要時(shí)，可選用表A.2中的性狀或本指南未列出的性狀進(jìn)行附加測試。7 特異性、一致性和穩(wěn)定性結(jié)果的判定 7.1 總體原則特異性、一致性和穩(wěn)定性的判定按照GB/T 19557.1確定的原則進(jìn)行。7.2 特異性的判定申請品種應(yīng)明顯區(qū)別于所有已知品種。在測試中，當(dāng)申請品種至少在一個(gè)性狀上與近似品種具有明顯且可重現(xiàn)的差異時(shí)，即可判定申請品種具備特異性。7.3 一致性的判定申請品種的一致性水平應(yīng)不低于同類品種的一致性水平。7.4 穩(wěn)定性的判定如果一個(gè)品種具備一致性，則可認(rèn)為該品種具備穩(wěn)定性。一般不對穩(wěn)定性進(jìn)行測試。必要時(shí)，可以種植該品種的下一代種子，與以前提供的繁殖材料相比，若性狀表達(dá)無明顯變化，則可判定該品種具備穩(wěn)定性。8 性狀表根據(jù)測試需要，性狀分為基本性狀和選測性狀?；拘誀钍菧y試中必須使用的性狀，基本性狀見表A.1，選測性狀見表A.2。8.1 概述性狀表列出了性狀名稱、表達(dá)類型、表達(dá)狀態(tài)及相應(yīng)的代碼和標(biāo)準(zhǔn)品種、觀測時(shí)期和方法等內(nèi)容。8.2 表達(dá)類型根據(jù)性狀表達(dá)方式，性狀分為質(zhì)量性狀、假質(zhì)量性狀和數(shù)量性狀三種類型。8.3 表達(dá)狀態(tài)和相應(yīng)代碼8.3.1 每個(gè)性狀劃分為一系列表達(dá)狀態(tài)，以便于定義性狀和規(guī)范描述；每個(gè)表達(dá)狀態(tài)賦予一個(gè)相應(yīng)的數(shù)字代碼，以便于數(shù)據(jù)記錄、處理和品種描述的建立與交流。8.3.2 對于質(zhì)量性狀和假質(zhì)量性狀，所有的表達(dá)狀態(tài)都應(yīng)當(dāng)在測試指南中列出；對于數(shù)量性狀，為了縮小性狀表的長度，偶數(shù)代碼的表達(dá)狀態(tài)可以不列出，偶數(shù)代碼的表達(dá)狀態(tài)可以前一個(gè)表達(dá)狀態(tài)到后一個(gè)表達(dá)狀態(tài)的形式來描述。8.4 標(biāo)準(zhǔn)品種性狀表中列出了部分性狀有關(guān)表達(dá)狀態(tài)可參考的標(biāo)準(zhǔn)品種，以助于確定相關(guān)性狀的不同表達(dá)狀態(tài)和校正環(huán)境因素引起的差異。9 品種分組9.1 使用分組性狀，可以將已知品種分組種植，從而選擇出近似品種，并在安排種植試驗(yàn)中，將這些近似品種種植在一起，以便于特異性判定。9.2 分組性狀的選擇和使用參照總則(GB/T 19557.1)和UPOV:TG/6/5文件的有關(guān)指導(dǎo)。9.3 品種分組性狀如下：a）根：根蘗性（表A.1中性狀4）；b) *花：出現(xiàn)紫色花的頻率（表A.1中性狀10）；c) *花：出現(xiàn)雜色花的頻率（表A.1中性狀11）；d）*花：出現(xiàn)乳白色、白色或黃色花的頻率（表A.1中性狀12）；10 技術(shù)問卷申請者應(yīng)按附錄C格式填寫苜蓿新品種技術(shù)問卷。附 錄 A（規(guī)范性附錄）苜蓿性狀表A.1苜?；拘誀钜姳鞟.1。表A.1 苜?；拘誀畋硇蛱栃?狀觀測時(shí)期/方法/試驗(yàn)區(qū)表達(dá)狀態(tài)標(biāo) 準(zhǔn) 品 種代 碼1植株：生長習(xí)性QN(+)02/VG/B直立新疆大葉苜蓿,甘農(nóng)3號苜蓿,蔚縣苜蓿1半直立隴東苜蓿,天水苜蓿,北疆苜蓿,準(zhǔn)格爾苜蓿3中間5半匍匐7匍匐Jindera92*植株：播種當(dāng)年秋季自然高度QN（a）02/MS或MG/A或B矮Jindera3中公農(nóng)2號苜蓿5高73*植株：播種當(dāng)年越冬前自然高度QN(a)03/MG/B矮Jindera3中公農(nóng)2號苜蓿,準(zhǔn)格爾苜蓿5高74根：根蘗性QL(+)04/VG/A無隴東苜蓿1有公農(nóng)3號苜蓿,甘農(nóng)2號苜蓿,潤布勒苜蓿95植株：第二年春季返青自然高度QN(a)(+)03/MS或MG/A或B矮關(guān)中苜蓿,無棣苜蓿,天水苜蓿,晉南苜蓿3中新牧1號苜蓿,甘農(nóng)3號苜蓿5高76*初花期QN(+)05/MS或MG/A或B早隴東苜蓿,無棣苜蓿，關(guān)中苜蓿3中龍牧803苜蓿，甘農(nóng)1號苜蓿，甘農(nóng)3號苜蓿5晚公農(nóng)1號苜蓿,圖牧1號苜蓿77葉：中央小葉長度QN(b)(+)05/MS/A短天水苜蓿,晉南苜蓿,龍牧803苜蓿3中圖牧1號苜蓿5長Prime78葉：中央小葉寬度QN(b)(+)05/MS/A窄天水苜蓿,北疆苜蓿3中甘農(nóng)3號苜蓿5寬新疆大葉苜蓿,Prime,SA3215279葉：形狀PQ(b)(+)05/VS/A中等倒卵圓形北疆苜蓿,公農(nóng)1號苜蓿,新牧2號苜蓿1闊倒卵圓形SA32152，新疆大葉苜蓿2倒披針形天水苜蓿,隴東苜蓿,圖牧2號苜蓿,蔚縣苜蓿3表A.1（續(xù)）序號性 狀觀測時(shí)期/方法/試驗(yàn)區(qū)表達(dá)狀態(tài)標(biāo) 準(zhǔn) 品 種代 碼10*花：出現(xiàn)紫色花的頻率QN(+)05/VS/A無或極低1低3中5高隴東苜蓿,天水苜蓿,隴中苜蓿711*花：出現(xiàn)雜色花的頻率QN(+)05/VS/A無或極低Symphonic1低Luzelle,Letizia3中Franken Neu,Karlu(M.v.)5高712*花：出現(xiàn)乳白色、白色或黃色花的頻率QN(+)05/VS/A無或很低1低甘農(nóng)3號苜蓿,甘農(nóng)2號苜蓿,公農(nóng)2號苜蓿,新牧1號苜蓿3中5高713*莖：最長莖稈長度QN(+)06/MS/A矮關(guān)中苜蓿,新牧1號苜蓿,新牧2號苜蓿,新疆大葉苜蓿3中天水苜蓿,隴東苜蓿,圖牧1號苜蓿,蔚縣苜蓿5高714植株：第一次刈割后3周自然高度QN07/MS或MG/A或B矮Jindera3中蔚縣苜蓿,陜北苜蓿,甘農(nóng)2號苜蓿5高Prime,Defi715植株：第二次刈割后3周自然高度QN08/MS或MG/A或B矮Jindera3中蔚縣苜蓿5高Prime,Defi716植株：第三次刈割后3周自然高度QN09/MS或MG/A或B矮Jindera3中蔚縣苜蓿,隴東苜蓿5高717植株：第四次刈割后3周自然高度QN10/MG/A矮Jindera3中蔚縣苜蓿5高718植株：第二年秋季自然高度QN(a)11/MG/B矮Jindera3中公農(nóng)2號苜蓿5高719植株：第二年越冬前自然高度QN(a)12/MG/B矮Jindera3中公農(nóng)2號苜蓿,準(zhǔn)格爾苜蓿5高7表A.1（續(xù)）序號性 狀觀測時(shí)期/方法/試驗(yàn)區(qū)表達(dá)狀態(tài)標(biāo) 準(zhǔn) 品 種代 碼20莢：莢果主要類型PQ(+)13/VG/A鐮刀形1單螺旋圈2雙螺旋圈隴東苜蓿,隴中苜蓿,甘農(nóng)3號苜蓿3三螺旋圈421*植株：秋眠性QN(+)10或11/MG或VG/ C1級Maverick12級Vernal23級Boja,Ranger34級Legend,Mercedes45級Archer56級Abi 700,Dorine67級Sutter,Oro78級Maricopa,Carmen89級CUF 101,Medina910級UC-18871011級UC-146511A.2苜蓿選測性狀見表A.2。表A.2苜蓿選測性狀表序號性 狀觀測時(shí)期和方法表達(dá)狀態(tài)標(biāo) 準(zhǔn) 品 種代 碼22抗性：霜霉病QN(c)(+)01/VS/C低3中隴東,新疆大葉,天水5高中蘭1號723抗性：炭疽病QN(c)(+)01/VS/C極低Saranac1低Venus3中5高Saranac AR7極高Arc924抗性：疫霉根腐病(c)(+)01/VS/C極低Hunterfield1低3中Trifecta5高7極高Aquarius925抗性：苜蓿彩斑蚜QN(c)(+)01/VS/C極低Hunter River1低3中Trifecta5高7極高Aurora9附 錄 B（規(guī)范性附錄）苜蓿性狀的解釋B.1 苜蓿生育階段見表B.1。表B.1 苜蓿生育階段表生育階段代碼描 述01幼苗期（從子葉展開到長出45片真葉）02播種當(dāng)年秋分（9月22日）后2周03播種當(dāng)年秋分后6周04返青期05初花期（穴播區(qū)觀測植株有3個(gè)花序開花的平均日期；條播區(qū)有25%的植株開花的平均日期）06盛花期（80%的植株開花）07第1次刈割（盛花期）后3周08第2次刈割（第1次刈割后3周）后3周09第3次刈割（第2次刈割后3周）后3周10第4次刈割（第3次刈割后3周）后3周11第二年秋分后2周12第二年秋分后6周13種子成熟期（60%的種子成熟）B.2 涉及多個(gè)性狀的解釋（a）秋分前2周刈割。量取地表至植株自然頂部不需人為拉直的垂直高度。（b）自第一花序枝條向下，主莖上的第3葉片。（c）整個(gè)試驗(yàn)期對全部供測幼苗進(jìn)行觀測。B.3 涉及單個(gè)性狀的解釋性狀分級和圖中代碼見表A.1。性狀1 植株：植株生長習(xí)性，見圖B.1。性狀4 根 根蘗性春季土壤解凍后返青前觀測。刨開根部土壤，目測水平根的有無。性狀5植株：第二年春季返青自然高度返青后約一個(gè)月，最早返青的品種生長至15 cm左右測量。性狀6 初花期計(jì)算時(shí)，統(tǒng)計(jì)申請品種與近似品種初花日期的天數(shù)差值。3 - 半直立 1 - 直立 9 - 匍匐 7- 半匍匐 5 - 中間圖B.1 植株生長習(xí)性圖示(引自加拿大苜蓿 DUS 測試性狀描述)性狀7 葉：中央小葉長度見圖B.2，測量中央小葉的最長部位，但不包括葉柄。中央小葉 圖B.2 中央小葉長度與寬度測量圖示性狀8葉：中央小葉寬度見圖B.2，測量中央小葉的最寬部位。性狀9葉：葉形見圖B.3，對中央小葉的葉形進(jìn)行描述。1闊倒卵圓形 2中等倒卵圓形 3倒披針形圖B.3 葉形圖示性狀10 花：出現(xiàn)紫色花的頻率見圖B.4，統(tǒng)計(jì)紫色花植株占供測植株的百分率。圖B.4 紫色花圖示性狀11 花：出現(xiàn)雜色花的頻率見圖B.5，統(tǒng)計(jì)雜色花植株占供測植株的百分率。白黃雜色花 黃紫雜色花圖B.5 雜色花圖示性狀12花：出現(xiàn)乳白色、白色或黃色花的頻率見圖B.6，統(tǒng)計(jì)乳白色、白色或黃色花植株占供測植株的百分率。乳白色 白色 黃色圖B.6 乳白色、白色或黃色花圖示性狀13 莖：最長莖稈長度量取最長莖稈（包括花序）的實(shí)際長度。性狀20莢：莢果主要類型，見圖B.7。1鐮刀形 2單螺旋圈 3雙螺旋圈 4三螺旋圈圖B.7 莢果形狀圖示性狀21植株：秋眠性在中國北方于秋季嚴(yán)重霜凍前測定。根據(jù)測試地點(diǎn)霜凍時(shí)間的早晚，刈割和測定時(shí)間可按照性狀18或性狀19規(guī)定進(jìn)行。測試地點(diǎn)如果符合試驗(yàn)條件即可直接在本指南的B區(qū)測定；否則應(yīng)另外選擇適宜地點(diǎn)進(jìn)行田間試驗(yàn)；具體試驗(yàn)設(shè)計(jì)、取樣數(shù)量和田間管理等同本指南B區(qū)。根據(jù)性狀18和性狀19的方法進(jìn)行測定，按表B.1進(jìn)行分級記載。表B.1 苜蓿秋眠性分級方法對照品種秋眠分級代碼Maverick11Vernal22Boja,Ranger33Legend,Mercedes44Archer55Abi 700,Dorine66Sutter,Oro77Maricopa,Carmen88CUF 101,Medina99UC-18871010UC-14651111性狀22植株：霜霉病 (1) 菌種的收集與保存 苜蓿霜霉菌（Peronospora aestivalis Syd.） 存在生理小種，應(yīng)廣泛地收集孢子用于篩選。在田間自然感病植株上收集的孢子易受細(xì)菌和真菌的污染，且萌發(fā)力較低，因此多以溫室培育的幼苗上產(chǎn)生的孢子用于抗病性測定。為了避免污染，可在每ml 接種物中加入50 g 制霉菌素(nystatin)和10 g 四環(huán)素。在進(jìn)行抗性測定時(shí)，應(yīng)額外多種幾盆苜蓿，采用高感品種、加大播量，以便收獲孢子供下次接種用。收獲前，應(yīng)對苜蓿盆加罩保濕12 h16 h，以促進(jìn)孢子形成。剪下帶病幼苗后，應(yīng)全部保存于水中以最大程度地保持孢子的萌發(fā)力。如果植物收獲過遲或孢子于干燥的空氣中暴露數(shù)秒種，分生孢子的生活力便迅速下降。將帶菌幼苗存于-20 ，可使少量孢子存活數(shù)周，而在液氮中貯藏，孢子的生活力可保持多年。(2) 分生孢子的配制與接種 制備分生孢子時(shí)，剪下帶孢子的幼苗或葉片，立即置于不含氯化物的水中用力振蕩，而后過濾孢子懸浮液，移去植株殘?bào)w。接種時(shí)噴灑孢子懸浮液，直至幼苗完全濕潤。 接種物應(yīng)含具生活力的孢子25 000個(gè)/ml，方可保證均勻染病。 (3) 培養(yǎng)與評價(jià)接種后的植物應(yīng)在20 黑暗、近于100%相對濕度條件下密封培養(yǎng)，除指定的黑暗期外，其余時(shí)間連續(xù)提供5 000 lux10 000 lux 的光照，建議采取如下步驟：第1 d：在盛細(xì)砂的盆中播種,播深1.5 cm左右，密度2粒3粒種子/cm，行距2.5 cm 。每盆一半播供測品種，另一半播標(biāo)樣品種，整個(gè)試驗(yàn)每品種至少需50棵4棵或25棵8棵幼株。 第3 d5 d：每天往盆中灑水2次，以使砂子緊貼種子，保證出苗一致。 第5 d：種苗出土且子葉已擴(kuò)展，噴灑接種物，罩封植物，至少每日12 h關(guān)閉光源。第6 d：移開罩子，開燈，鏟除自接種后新出的幼苗。第7 d10 d：繼續(xù)鏟除新出幼苗。 第11 d：蓋罩子并關(guān)閉光源12 h16 h（過夜），以誘發(fā)孢子形成。在臨罩住植物之前不必灑水，因?yàn)樵谧詠硭墟咦硬灰桩a(chǎn)生。第12 d：評價(jià)。計(jì)算各品種未感霜霉病植株占供測株數(shù)的百分率，并將供測品種與標(biāo)準(zhǔn)種進(jìn)行比較。性狀23植株 炭疽病具體方法如下：（1）育苗 取土壤混合物置于10 cm的塑料盒或托盤里，每重復(fù)50株，不少于4個(gè)重復(fù)。 播種后置于23 ，16 h光照的溫室中培養(yǎng)。定期施肥并采取必要的措施控制昆蟲。（2）菌株的收集和保存自感染的莖組織分離病原菌，于4 條件下，將菌株保存在土壤或硅膠中，保存壽命至多7年。（3）孢子懸浮液的制備與接種取23 條件下在燕麥培養(yǎng)基上生長7 d的菌株，以每升含有2滴吐溫的蒸餾水配制孢子懸浮液，濃度為2106/ml。在幼苗7 d14 d接種時(shí)噴灑孢子懸浮液，每盆3 ml10 ml, 直至幼苗完全濕潤。（4）培養(yǎng)與評價(jià)：接種后的植物在23 黑暗，近于100%濕度的保濕培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48 h，其余時(shí)間在23 的溫室中培養(yǎng)。接種后10 d14 d以幼苗存活率進(jìn)行抗性分級?？剐苑旨墭?biāo)準(zhǔn)如下：抗性級別 品種舉例高抗型（50%） Sequel HR抗型（3150%） Trifecta中抗型（1530%） 低抗型（6140%） Venus易感型（050%） Aquarius抗型（31%50%）中抗型（15%30%） Trifecta低抗型 （6%14%） 感病型（050%） Aurora抗型（3150%）中抗型（1530%） Trifecta低抗型（6140%）易感型（06%） Hunter River抗性分級： 12 抗 植株至少形成1個(gè)三葉結(jié)構(gòu)3 易感 感染期生長緩慢4 易感 植株存活但是不形成三葉結(jié)構(gòu)5 易感 植株死亡（總出苗1到4級）附錄 C （規(guī)范性附錄）苜蓿技術(shù)問卷申請?zhí)枺?申請日： 由審批機(jī)關(guān)填寫(申請人或代理機(jī)構(gòu)簽章)C.1品種暫定名稱：_C.2 植物學(xué)分類中文名： 拉丁名： C.3品種類型 在相符的類型 中打。C.3.1 育種方式育成品種 地方品種 引進(jìn)品種 野生栽培馴化品種 C.4 申請品種的具有代表性彩色照片品種照片粘貼處(如果照片較多，可另附頁提供)C.5 其它有助于辨別申請品種的信息(如品種用途、品質(zhì)和抗性，請?zhí)峁┰敿?xì)資料)C.6 品種種植或測試是否需要特殊條件？在相符的 中打。是 否 (如果回答是，請?zhí)峁┰敿?xì)資料)C.7 品種繁殖材料保存是否需要特殊條件？ 在相符的 中打。是 否 (如果回答是，請?zhí)峁┰敿?xì)資料)C.8 申請品種需要指出的性狀在表C.1中相符的代碼后 中打，若有測量值，請?zhí)顚懺诒鞢.1中。表C.1 申請品種需要指出的性狀序號性 狀表達(dá)狀態(tài)代 碼測量值1*植株：播種當(dāng)年秋季自然高度（性狀2）極矮1 極矮到矮2 矮3 矮到中4 中5 中到高6 高7 高到極高8 極高9 2*植株：播種當(dāng)年越冬前自然高度（性狀3）極矮1 極矮到矮2 矮3 矮到中4 中5 中到高6 高7 高到極高8 極高9 3根蘗性（性狀4）無1 有9 4*初花期(性狀6)極早1 極早到早2 早3 早到中4 中5 中到晚6 晚7 晚到極晚8 極晚9 表C.1（續(xù)）序號性 狀表達(dá)狀態(tài)代 碼測量值5*花：出現(xiàn)紫色花的頻率(性狀10)極低1 極低到低2 低3 低到中4 中5 中到高6 高7 高到極高8 極高9 6*花：出現(xiàn)雜色花的頻率(性狀11)極低1 極低到低2 低3 低到中4 中5 中到高6 高7 高到極高8 極高9 7*花：出現(xiàn)乳白色、白色或黃色花的頻率（性狀12)極低1 極低到低2 低3 低到中4 中5 中到高6 高7 高到極高8 極高9 8*莖：最長莖稈長度(性狀13)極矮1 極矮到矮2 矮3 矮到中4 中5 中到高6 高7 高到極高8 極高9 _21