2020 年 第 61 卷 第 8 期 1 5 0 3 收 稿 日 期 2 0 2 0 0 6 1 8 作 者 簡 介 曾 祥 亮 1 9 8 3 男 安 徽 阜 陽 人 本 科 從 事 植 物 保 護(hù) 工 作 E m a i l 2 7 6 7 4 1 2 4 4 q q c o m 文 獻(xiàn) 著 錄 格 式 曾 祥 亮 余 冬 冬 黃 星 鋒 等 辣 椒 煙 草 花 葉 病 毒 和 黃 瓜 花 葉 病 毒 的 脫 毒 方 法 J 浙 江 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 2 0 2 0 6 1 8 1 5 0 3 1 5 0 5 D O I 1 0 1 6 1 7 8 j i s s n 0 5 2 8 9 0 1 7 2 0 2 0 0 8 0 6 辣 椒 煙 草 花 葉 病 毒 和 黃 瓜 花 葉 病 毒 的 脫 毒 方 法 曾 祥 亮 1 2 余 冬 冬 1 黃 星 鋒 1 李 永 軍 1 1 龍 港 市 信 實(shí) 莊 稼 醫(yī) 院 浙 江 龍 港 3 2 5 8 0 0 2 浙 江 農(nóng) 藝 師 學(xué) 院 浙 江 杭 州 3 1 0 0 2 1 摘 要 辣 椒 病 毒 病 是 一 種 世 界 性 病 害 其 發(fā) 病 率 近 1 0 0 其 中 以 煙 草 花 葉 病 毒 T M V 病 和 黃 瓜 花 葉 病 毒 C M T 病 為 主 實(shí) 踐 證 明 種 子 繁 殖 或 化 學(xué) 防 治 無 法 脫 除 這 兩 大 病 毒 本 項(xiàng) 目 采 用 辣 椒 莖 尖 組 培 結(jié) 合 熱 處 理 獲 得 T M V 和 C M V 脫 毒 苗 實(shí) 現(xiàn) 防 治 辣 椒 病 毒 病 的 預(yù) 期 目 標(biāo) 關(guān) 鍵 詞 辣 椒 病 毒 病 脫 毒 熱 處 理 中 圖 分 類 號(hào) S 4 3 6 4 1 8 文 獻(xiàn) 標(biāo) 志 碼 B 文 章 編 號(hào) 0 5 2 8 9 0 1 7 2 0 2 0 0 8 1 5 0 3 0 3 辣 椒 是 中 國 五 大 蔬 菜 作 物 之 一 有 很 高 的 營 養(yǎng) 價(jià) 值 藥 用 價(jià) 值 和 經(jīng) 濟(jì) 價(jià) 值 辣 椒 病 毒 病 又 稱 辣 椒 花 葉 病 是 辣 椒 的 主 要 病 害 之 一 春 秋 兩 季 均 有 發(fā) 生 嚴(yán) 重 影 響 辣 椒 的 產(chǎn) 量 和 質(zhì) 量 引 起 辣 椒 病 毒 病 的 病 毒 有 多 種 但 主 要 為 煙 草 花 葉 病 毒 T M V 和 黃 瓜 花 葉 病 毒 C M V 患 病 辣 椒 主 要 表 現(xiàn) 為 花 葉 黃 化 矮 化 壞 死 畸 形 等 癥 狀 其 中 三 落 落 葉 落 花 落 果 現(xiàn) 象 最 為 嚴(yán) 重 據(jù) 不 完 全 統(tǒng) 計(jì) 每 年 因 病 毒 病 危 害 辣 椒 可 減 產(chǎn) 3 0 5 0 已 有 研 究 發(fā) 現(xiàn) 種 子 可 攜 帶 病 毒 辣 椒 煙 草 花 葉 病 毒 和 黃 瓜 花 葉 病 毒 的 鈍 化 溫 度 在 5 5 以 上 而 辣 椒 種 子 溫 湯 處 理 的 耐 溫 閾 限 在 55 以 下 常 規(guī) 熱 處 理 無 法 鈍 化 上 述 2 種 病 毒 常 規(guī) 種 子 消 毒 法 化 學(xué) 處 理 法 對(duì) 辣 椒 煙 草 花 葉 病 毒 和 黃 瓜 花 葉 病 毒 的 處 理 效 果 較 差 本 試 驗(yàn) 采 用 莖 尖 培 養(yǎng) 結(jié) 合 熱 處 理 旨 在 研 究 辣 椒 種 子 脫 毒 的 新 途 徑 1 材 料 與 方 法 1 1 材 料 試 驗(yàn) 辣 椒 品 種 為 大 果 早 豐 1 2 方 法 挑 選 粒 大 飽 滿 的 早 豐 1 號(hào) 辣 椒 種 子 浸 泡 6 8 h 用 自 來 水 沖 洗 1 2 h 75 的 酒 精 處 理 2 m i n 無 菌 水 沖 洗 2 3 次 0 1 氯 化 汞 消 毒 5 7 m i n 再 用 無 菌 水 沖 洗 5 6 次 播 于 1 2 M S 無 激 素 固 體 培 養(yǎng) 基 培 養(yǎng) 條 件 為 光 照 黑 暗 1 4 h 10 h 光 照 強(qiáng) 度 2 000 l ux 白 天 溫 度 26 1 夜 晚 溫 度 23 1 待 無 菌 苗 出 現(xiàn) 2 片 以 上 真 葉 時(shí) 用 汁 液 摩 擦 接 種 進(jìn) 行 指 示 法 病 毒 檢 測 無 菌 水 處 理 的 作 為 對(duì) 照 以 M S 為 基 本 培 養(yǎng) 基 加 入 3 的 蔗 糖 0 7 的 瓊 脂 p H 5 8 6 0 并 在 培 養(yǎng) 基 中 添 加 不 同 濃 度 的 生 長 調(diào) 節(jié) 劑 建 立 適 宜 辣 椒 生 長 的 離 體 培 養(yǎng) 技 術(shù) 體 系 1 取 病 毒 檢 測 為 陽 性 的 試 材 待 無 菌 苗 有 2 3 片 真 葉 時(shí) 切 取 其 上 端 接 種 在 上 述 培 養(yǎng) 基 上 進(jìn) 行 繼 代 增 殖 培 養(yǎng) 分 別 采 用 辣 椒 的 子 葉 胚 軸 真 葉 接 種 在 上 述 培 養(yǎng) 基 上 進(jìn) 行 誘 導(dǎo) 再 生 培 養(yǎng) 2 經(jīng) 初 代 培 養(yǎng) 后 根 據(jù) 分 化 程 度 配 不 同 的 繼 代 培 養(yǎng) 基 以 促 莖 葉 和 根 的 生 長 或 愈 傷 組 織 分 化 成 苗 將 培 養(yǎng) 獲 得 的 辣 椒 試 管 苗 移 栽 到 盛 有 消 毒 營 養(yǎng) 土 的 花 盆 中 上 扣 小 燒 杯 溫 室 內(nèi) 培 植 數(shù) 日 后 移 栽 防 蟲 網(wǎng) 室 采 用 植 物 指 示 檢 測 脫 毒 效 果 2 結(jié) 果 與 分 析 2 1 辣 椒 繼 代 培 養(yǎng) 影 響 因 素 以 辣 椒 無 毒 苗 切 段 每 節(jié) 至 少 1 個(gè) 腋 芽 為 外 殖 體 進(jìn) 行 快 速 繁 殖 找 出 適 宜 辣 椒 繼 代 增 殖 的 激 素 組 分 和 培 養(yǎng) 條 件 以 M S 培 養(yǎng) 基 為 基 本 培 養(yǎng) 基 在 其 中 分 別 添 加 吲 哚 乙 酸 I A A 吲 哚 丁 酸 I B A 奈 乙 酸 N A A 6 芐 基 氨 基 嘌 呤 6 B A 赤 霉 素 G A 等 不 同 生 長 激 素 如 表 1 所 示 培 養(yǎng) 基 中 僅 加 生 長 素 I A A N A A 或 添 加 高 濃 度 的 I A A 低 濃 度 B A 易 形 成 1 5 0 4 2020 年 第 61 卷 第 8 期 愈 傷 組 織 但 不 能 分 化 成 苗 說 明 生 長 素 在 適 宜 濃 度 區(qū) 間 可 以 促 進(jìn) 組 織 分 化 但 濃 度 過 大 時(shí) 便 會(huì) 抑 制 根 的 發(fā) 生 高 濃 度 B A 與 低 濃 度 I A A 有 利 于 誘 導(dǎo) 出 芽 但 伸 長 較 慢 且 生 根 也 很 慢 需 將 伸 長 的 苗 轉(zhuǎn) 到 根 誘 導(dǎo) 培 養(yǎng) 基 中 如 表 2 所 示 I B A 濃 度 越 高 越 容 易 形 成 愈 傷 組 織 同 時(shí) 也 促 進(jìn) 生 根 G A 的 濃 度 越 高 有 利 于 促 進(jìn) 芽 的 萌 發(fā) 培 養(yǎng) 基 中 加 入 0 2 5 m g L 1 G A 和 0 1 m g L 1 I B A 后 較 適 合 辣 椒 的 繼 代 增 殖 可 一 次 成 苗 成 苗 率 高 表 1 培 養(yǎng) 基 中 添 加 N A A I A A B A 對(duì) 辣 椒 切 斷 培 養(yǎng) 的 影 響 處 理 激 素 m g L 1 組 織 形 態(tài) N A A I A A B A 愈 傷 組 織 苗 根 1 5 0 5 0 0 很 旺 無 無 2 1 0 5 0 0 很 旺 無 無 3 5 0 1 0 0 很 旺 無 無 4 0 1 0 0 1 0 很 旺 無 無 5 0 0 5 1 0 0 少 強(qiáng) 壯 多 少 生 根 慢 6 0 2 0 1 0 0 少 強(qiáng) 壯 多 少 生 根 慢 7 0 0 5 1 2 0 少 強(qiáng) 壯 多 少 生 根 慢 8 0 0 5 8 0 少 強(qiáng) 壯 多 少 生 根 慢 表 2 培 養(yǎng) 基 中 添 加 G A I B A 對(duì) 辣 椒 切 斷 培 養(yǎng) 的 影 響 處 理 激 素 m g L 1 G A I B A 外 殖 體 數(shù) 個(gè) 側(cè) 芽 萌 發(fā) 數(shù) 個(gè) 側(cè) 芽 長 出 數(shù) 個(gè) 成 株 率 葉 色 增 殖 系 數(shù) 愈 傷 組 織 長 勢(shì) 1 0 0 8 7 6 6 2 5 綠 2 5 少 良 好 2 0 2 0 0 8 7 6 6 2 5 綠 2 5 少 良 好 3 0 1 0 0 0 5 8 8 6 6 2 8 綠 2 5 較 少 良 好 4 0 1 0 0 1 0 8 7 5 5 0 0 綠 2 0 較 少 一 般 5 0 1 0 0 1 5 8 5 雙 芽 4 3 7 5 綠 1 5 旺 盛 一 般 6 0 1 0 0 2 0 8 4 4 5 0 0 綠 2 0 較 多 一 般 7 0 2 5 0 0 5 8 8 7 5 0 0 淡 綠 2 5 較 少 一 般 8 0 2 5 0 1 0 8 8 7 8 7 5 綠 3 5 少 良 好 9 0 2 5 0 1 5 8 5 雙 芽 4 5 0 0 綠 2 0 較 多 差 1 0 0 2 5 0 2 0 8 4 4 5 0 0 淡 綠 1 5 較 多 一 般 2 2 植 物 生 長 調(diào) 節(jié) 劑 對(duì) 辣 椒 子 葉 離 體 培 養(yǎng) 的 影 響 如 表 3 所 示 6 B A I B A 在 1 1 25 1 2 5 時(shí) 器 官 分 化 率 較 高 6 B A I B A 在 1 1 7 15 時(shí) 器 官 分 化 率 較 低 表 3 不 同 6 B A I B A 濃 度 對(duì) 辣 椒 子 葉 器 官 分 化 的 影 響 處 理 激 素 m g L 1 6 B A I B A 外 殖 體 數(shù) 個(gè) 器 官 分 化 數(shù) 個(gè) 褐 變 數(shù) 個(gè) 器 官 分 化 率 褐 變 率 a 1 3 0 0 2 1 8 7 0 3 8 9 0 a 2 3 0 0 4 2 3 1 8 1 2 7 8 3 5 2 2 a 3 3 0 0 6 1 6 1 2 3 7 5 0 1 8 8 a 4 3 0 0 8 1 6 8 6 5 0 0 3 7 5 b 1 5 0 0 2 1 5 7 1 4 6 7 6 7 b 2 5 0 0 4 2 3 1 9 2 2 8 2 6 9 5 7 b 3 5 0 0 6 2 1 1 9 1 5 9 0 5 7 1 4 b 4 5 0 0 8 1 9 1 8 1 4 9 4 7 7 3 7 c 1 7 0 0 2 1 8 1 1 1 1 6 1 1 6 1 1 c 2 7 0 0 4 2 0 1 6 1 8 8 0 0 9 0 0 c 3 7 0 0 6 2 0 1 4 1 4 7 0 0 7 0 0 c 4 7 0 0 8 1 5 1 0 1 3 6 6 7 8 6 7 d 1 9 0 0 2 1 8 1 5 6 8 3 3 3 3 3 d 2 9 0 0 4 2 2 1 8 2 1 8 1 8 9 5 5 d 3 9 0 0 6 1 8 7 1 6 3 8 9 8 8 9 d 4 9 0 0 8 1 6 1 5 1 4 9 3 8 8 7 5 2 3 植 物 生 長 調(diào) 節(jié) 劑 對(duì) 辣 椒 胚 軸 離 體 培 養(yǎng) 的 影 響 采 用 大 果 早 豐 辣 椒 品 種 的 下 胚 軸 分 別 離 體 培 養(yǎng) 在 附 加 不 同 種 類 和 濃 度 的 植 物 生 長 調(diào) 節(jié) 劑 的 M S 培 養(yǎng) 基 上 研 究 其對(duì) 辣 椒 胚 軸 愈 傷 組 織 的 誘 導(dǎo) 及 再 生 情 況 3 試 驗(yàn) 結(jié) 果 顯 示 在 培 養(yǎng) 基 中 添 加 5 m g L 1 6 B A 和 0 8 m g L 1 I B A 后 培 養(yǎng) 基 對(duì) 芽 的 誘 導(dǎo) 率 較 高 表 4 表 4 不 同 6 B A I B A 濃 度 對(duì) 芽 誘 導(dǎo) 的 影 響 處 理 激 素 m g L 1 6 B A I B A 芽 個(gè) 葉 狀 體 比 例 根 個(gè) 褐 變 率 a 1 3 0 0 2 1 1 1 8 1 2 3 5 a 2 3 0 0 4 0 6 3 0 3 1 3 a 3 3 0 0 6 1 3 3 3 3 6 0 0 a 4 3 0 0 8 0 3 5 3 1 5 5 8 b 1 5 0 0 2 0 3 0 0 2 3 5 0 b 2 5 0 0 4 0 4 4 4 3 5 0 0 b 3 5 0 0 6 0 3 5 0 0 5 0 0 b 4 5 0 0 8 0 4 6 2 0 5 3 8 c 1 7 0 0 2 0 2 2 2 0 3 8 9 c 2 7 0 0 4 0 2 9 4 0 5 2 9 c 3 7 0 0 6 0 3 5 3 0 7 0 5 c 4 7 0 0 8 0 5 9 0 4 7 1 d 1 9 0 0 2 0 1 6 7 0 4 4 4 d 2 9 0 0 4 0 7 3 3 0 9 3 3 d 3 9 0 0 6 0 3 3 3 0 8 0 0 d 4 9 0 0 8 0 3 5 3 0 6 4 7 2 4 熱 處 理 溫 度 對(duì) 脫 毒 效 果 的 影 響 曾 祥 亮 等 辣 椒 煙 草 花 葉 病 毒 和 黃 瓜 花 葉 病 毒 的 脫 毒 方 法 1 5 0 5 如 表 5 所 示 隨 著 處 理 溫 度 的 增 加 和 處 理 時(shí) 間 的 延 長 處 理 植 株 的 成 活 率 逐 步 降 低 當(dāng) 溫 度 高 于 40 時(shí) 植 株 均 不 能 長 時(shí) 間 存 活 當(dāng) 溫 度 低 于 38 時(shí) 植 株 均 能 較 好 生 長 在 一 定 溫 度 范 圍 內(nèi) 溫 度 越 高 病 毒 的 鈍 化 效 果 越 好 在 不 影 響 辣 椒 存 活 的 前 提 下 隨 著 熱 處 理 溫 度 的 升 高 植 株 的 脫 毒 效 果 也 就 越 好 實(shí) 驗(yàn) 結(jié) 果 表 明 38 的 熱 處 理 4 6 周 時(shí) 辣 椒 脫 毒 效 果 最 佳 表 5 不 同 處 理 溫 度 對(duì) 植 株 成 活 率 的 影 響 處 理 溫 度 成 活 率 1 周 2 周 4 周 1 4 2 0 0 0 2 4 0 0 0 0 3 3 8 1 0 0 9 6 7 9 0 0 4 3 6 1 0 0 1 0 0 9 3 3 3 討 論 由 于 辣 椒 外 植 體 中 不 具 有 足 夠 的 內(nèi) 源 激 素 只 有 附 加 不 同 濃 度 的 激 素 才 能 促 進(jìn) 辣 椒 外 植 體 芽 分 化 和 芽 伸 長 4 培 養(yǎng) 基 中 添 加 的 激 素 種 類 不 同 激 素 配 比 及 其 他 生 長 因 子 對(duì) 辣 椒 外 植 體 分 化 和 再 生 芽 伸 長 影 響 較 大 已 有 研 究 發(fā) 現(xiàn) 培 養(yǎng) 基 中 添 加 4 6 m g L 1 6 B A 對(duì) 辣 椒 外 植 體 芽 誘 導(dǎo) 效 果 最 好 5 本 研 究 結(jié) 果 表 明 較 高 的 6 B A 與 I B A 比 值 有 利 于 不 定 芽 的 誘 導(dǎo) 和 分 化 影 響 辣 椒 再 生 植 株 的 關(guān) 鍵 問 題 是 分 化 的 芽 不 能 進(jìn) 一 步 伸 長 大 多 只 能 見 到 一 團(tuán) 葉 片 由 于 選 材 及 其 他 原 因 的 影 響 多 數(shù) 試 驗(yàn) 中 植 株 再 生 頻 率 低 不 定 芽 生 長 能 力 差 有 的 甚 至 停 留 在 芽 誘 導(dǎo) 階 段 不 能 進(jìn) 一 步 生 長 這 主 要 與 外 植 體 的 不 同 生 理 狀 態(tài) 及 培 養(yǎng) 基 成 分 有 關(guān) 隨 著 處 理 溫 度 的 增 加 和 處 理 時(shí) 間 的 延 長 處 理 植 株 的 成 活 率 逐 步 降 低 38 的 熱 處 理 4 6 周 時(shí) 辣 椒 脫 毒 效 果 最 佳 參 考 文 獻(xiàn) 1 鄧 明 華 劉 志 敏 辣 椒 子 葉 培 養(yǎng) 研 究 進(jìn) 展 J 中 國 辣 椒 2 0 0 2 1 3 6 2 王 玉 文 楊 美 珠 甜 椒 的 離 體 再 生 及 基 因 轉(zhuǎn) 化 J 植 物 學(xué) 報(bào) 英 文 版 1 9 9 1 3 3 1 0 7 8 0 7 8 6 3 繆 武 劉 志 敏 辣 椒 離 體 培 養(yǎng) 研 究 進(jìn) 展 J 辣 椒 雜 志 2 0 0 5 2 3 6 4 黎 定 軍 張 寶 璽 趙 開 軍 等 辣 椒 子 葉 高 效 植 株 再 生 體 系 的 建 立 J 園 藝 學(xué) 報(bào) 2 0 0 2 1 2 7 3 1 9 7 5 龍 鳳 張 金 文 辣 椒 子 葉 和 下 胚 軸 的 離 體 培 養(yǎng) 及 高 效 再 生 體 系 的 建 立 J 甘 肅 農(nóng) 業(yè) 大 學(xué) 學(xué) 報(bào) 2 0 0 5 1 3 2 3 8 責(zé) 任 編 輯 萬 晶 上 接 第 1 5 0 2 頁 治 重 點(diǎn) 提 升 村 容 村 貌 以 點(diǎn) 帶 面 將 大 徑 山 鄉(xiāng) 村 休 閑 旅 游 示 范 園 融 入 當(dāng) 地 優(yōu) 美 的 自 然 生 態(tài) 環(huán) 境 為 茶 旅 融 合 發(fā) 展 打 好 基 礎(chǔ) 4 2 激 發(fā) 閑 置 資 源 活 力 一 是 推 動(dòng) 制 度 創(chuàng) 新 試 點(diǎn) 土 地 承 包 經(jīng) 營 權(quán) 抵 押 在 農(nóng) 村 土 地 承 包 經(jīng) 營 權(quán) 確 權(quán) 登 記 頒 證 的 基 礎(chǔ) 上 落 實(shí) 土 地 經(jīng) 營 權(quán) 抵 押 貸 款 推 出 有 針 對(duì) 性 的 農(nóng) 業(yè) 綜 合 保 險(xiǎn) 政 策 鼓 勵(lì) 農(nóng) 業(yè) 經(jīng) 營 主 體 開 展 生 產(chǎn) 經(jīng) 營 活 動(dòng) 二 是 創(chuàng) 新 商 業(yè) 模 式 創(chuàng) 新 要 素 交 易 模 式 喚 醒 資 源 資 金 資 產(chǎn) 等 要 素 活 力 鼓 勵(lì) 農(nóng) 民 將 承 包 的 土 地 及 其 宅 基 地 等 以 資 產(chǎn) 形 式 入 股 參 與 農(nóng) 旅 項(xiàng) 目 開 發(fā) 經(jīng) 營 增 加 農(nóng) 民 財(cái) 產(chǎn) 性 收 益 4 3 促 進(jìn) 精 準(zhǔn) 招 商 服 務(wù) 把 握 自 然 優(yōu) 勢(shì) 區(qū) 位 優(yōu) 勢(shì) 和 數(shù) 字 經(jīng) 濟(jì) 等 優(yōu) 勢(shì) 擴(kuò) 大 招 才 引 智 吸 引 資 本 共 同 開 發(fā) 大 徑 山 區(qū) 塊 的 農(nóng) 業(yè) 與 文 創(chuàng) 融 合 農(nóng) 業(yè) 與 康 養(yǎng) 融 合 等 項(xiàng) 目 減 少 政 府 財(cái) 政 壓 力 做 好 可 行 性 評(píng) 估 在 人 才 與 項(xiàng) 目 落 地 后 做 好 相 關(guān) 服 務(wù) 保 障 和 配 套 獎(jiǎng) 勵(lì) 工 作 激 發(fā) 人 才 創(chuàng) 新 創(chuàng) 業(yè) 熱 情 參 考 文 獻(xiàn) 1 許 藝 娜 吳 娜 培 周 鷺 嵐 鄉(xiāng) 村 產(chǎn) 業(yè) 振 興 視 閾 下 安 溪 縣 茶 旅 產(chǎn) 業(yè) 融 合 模 式 及 策 略 研 究 J 福 建 茶 葉 2 0 1 9 4 1 7 1 1 0 1 1 1 2 張 洪 瑞 茶 葉 變 茶 業(yè) 茶 區(qū) 變 景 區(qū) 四 川 省 萬 源 市 探 索 茶 旅 融 合 新 路 子 記 J 經(jīng) 營 管 理 者 2 0 1 9 1 1 3 6 3 7 3 劉 劍 云 呂 鋒 劉 懿 等 漢 中 茶 旅 融 合 發(fā) 展 現(xiàn) 狀 存 在 問 題 及 對(duì) 策 建 設(shè) J 基 層 農(nóng) 技 推 廣 2 0 1 9 7 1 0 6 8 7 0 4 肖 正 廣 屯 堡 地 區(qū) 茶 旅 融 合 創(chuàng) 意 產(chǎn) 品 發(fā) 展 路 徑 初 探 基 于 舊 州 小 鍋 茶 的 發(fā) 展 J 蠶 桑 茶 葉 通 訊 2 0 1 9 5 2 8 3 0 責(zé) 任 編 輯 張 瑞 麟