2018年第 6期 CHINA PLANT PROTECTION 20 1 8,VoI. 38 .No. 6 辣椒菌核病 （ Sclerotinia rot of pepper ） 是由子囊 菌門(mén)核盤(pán)菌屬核盤(pán)菌 Sclerotinia sclerotiorum （ Lib. ） de Bary 侵染引起的一種真菌病害 1 。 該病菌的寄主 范圍廣泛 ， 可侵染 75科 278屬 408種及 42亞種或 變種的植物 2 。 隨著設(shè)施辣椒種植面積逐年擴(kuò)大和 連茬種植 ， 辣椒菌核病發(fā)生和為害日趨嚴(yán)重 ， 一般年 份可引起近 30 保護(hù)地的辣椒成株死亡 ， 嚴(yán)重時(shí)高 達(dá) 50 以上 ， 目前 ， 已成為遼寧地區(qū)辣椒生產(chǎn)的重 要病害之一 ， 嚴(yán)重影響保護(hù)地辣椒種植業(yè)的持續(xù)發(fā) 展 3 -4 。 辣椒菌核病病菌子囊盤(pán)的形成條件研究 于舒怡 1 ， 劉志恒 2* ， 邵 丹 3 ， 劉長(zhǎng)遠(yuǎn) 1 （ 1. 遼寧省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所 ， 遼寧沈陽(yáng) 110161 ； 2. 沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院 ， 遼寧沈陽(yáng) 110866 ； 3. 安華農(nóng)業(yè)保險(xiǎn)股份有限公司沈陽(yáng)中心支公司 ， 遼寧沈陽(yáng) 110141） 摘要 ： 在室內(nèi)人工設(shè)置條件下 ， 采用平板培養(yǎng)方法研究了辣椒菌核病病菌子囊盤(pán)的發(fā)育歷程 ，探討了菌核大小 、 營(yíng)養(yǎng) 條件 、 溫度 、光照等因素對(duì)子囊盤(pán)形成的影響 。 結(jié)果表明 ， 辣椒菌核病病菌子囊盤(pán)的發(fā)育歷期可分為針狀期 、 膨大期 、 漏斗期和平盤(pán)期 ， 持續(xù)時(shí)間 1 30 d 。 菌核的大小是影響子囊盤(pán)直徑和發(fā)育歷期的內(nèi)在關(guān)鍵因素 。 前期 4 低溫處理 可顯著提高菌核萌發(fā)率 。 菌核在 15 25 范圍內(nèi)均可萌發(fā)產(chǎn)生子囊盤(pán) ， 最佳溫度為 20 。 菌核必須在光照下才可萌 發(fā)形成子囊盤(pán) ，但長(zhǎng)期光照亦會(huì)產(chǎn)生一定的抑制作用 。 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和紫外光照射無(wú)法有效促進(jìn)菌核萌發(fā)形成子囊盤(pán) 。 關(guān)鍵詞 ： 辣椒菌核病 ； 子囊盤(pán) ； 生物學(xué)特性 中圖分類(lèi)號(hào) ： S436.418.1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 ： A 文章編號(hào) ： 1672-6820 （ 2018） 06-0016-07 Study on deveIopment conditions for apothecium of Sclerotinia sclerotiorum on pepper Yu Shuyi 1 , Liu Zhiheng 2 , Shao Dan 3 , Liu Changyuan 1 （ 1.Institute of Plant Protection, Liaoning Academy of Agricultural Sciences, Shenyang Liaoning 110161, China; 2.College of Plant Protection, Shenyang Agricultural University, Shenyang Liaoning 110866, China; 3.Shenyang Central Sub-branch Company, Anhua Agricultural Insurance Company Ltd., Shenyang Liaoning 110141, China ） Abstract: Development of apothecia of Sclerotinia sclerotiorum on pepper was studied at artificial condition by plate methods in lab, and effects of sclerotial size, nutrients, temperature and light on apothecial development of S. sclerotiorum were investigated. The results showed that development of apothecia of S. sclerotiorum could be divided into four stages: needle -like stage, expanding stage, funnel stage and flat pan stage, and the duration ranged from 1 to 30 days. Sclerotial size was a critical factor affecting diameter and development period of the apothecia. Germination rate of the apothecium could be significantly promoted by low temperature treatment at 4 in prophase. Apothecia could grow at the temperature with the range from 15 to 25 , and 20 was the optimum temprature. Light was a necessary condition for apothecial development, while long time light brought inhibitory effect. Nutrients and ultraviolet light could not promote development of the apothecia. Key words: Sclerotinia sclerotiorum on pepper; apothecium; biological characteristics 收稿日期 ： 2018-04-11 作者簡(jiǎn)介 ： 于舒怡 ， 博士 ， 副研究員 ， 從事園藝作物病害研究 。 E- mail ： crea0115163 .com * 通訊作者 ： 劉志恒 ， 博士 ， 教授 ， 從事植物病理學(xué) 、 真菌學(xué)等教學(xué)與研究工作 。 E- mail ： lzzh1954163 .com 。 16 2018 年第 6 期 CHINA PLANT PROTECTION 20 18 ,VoI. 38 .No. 6 菌核是核盤(pán)菌在土壤或病殘?bào)w中的主要越冬形 態(tài)和初侵染源 ， 其形成的數(shù)量及存活狀態(tài)直接影響 著下茬作物或翌年辣椒菌核病的初侵染源基數(shù)和流 行程度 5 -7 。 子囊盤(pán)是核盤(pán)菌的有性世代 ， 明確子囊 盤(pán)發(fā)育歷期及其影響條件是辣椒菌核病精準(zhǔn)預(yù)測(cè)和 防治的基礎(chǔ) 。 目前 ， 關(guān)于核盤(pán)菌的遺傳多樣性 8 -11 、 生物學(xué)特性 3 ， 12 -13 、 子囊盤(pán)的消長(zhǎng)動(dòng)態(tài)與病害流行程 度之間的關(guān)系 6 ， 14 -15 、 利用核盤(pán)菌菌核上重寄生菌的 生物防治 15 -19 等方面均已開(kāi)展了系統(tǒng)研究 。 但尚未 見(jiàn)有關(guān)辣椒菌核病病菌在人工培養(yǎng)條件下子囊盤(pán)的 發(fā)育歷期及其影響因子的相關(guān)報(bào)道 。 本研究通過(guò)室內(nèi) 人工誘導(dǎo)試驗(yàn) ，明確了辣椒菌核病病菌子囊盤(pán)發(fā)育歷 期 ， 開(kāi)展了菌核大小 、 營(yíng)養(yǎng)條件及環(huán)境因素對(duì)辣椒菌 核病病菌子囊盤(pán)形成速度及成熟影響研究 ， 以期建立 辣椒菌核病病菌子囊盤(pán)和子囊孢子快速大量產(chǎn)生的 方法 ，為進(jìn)一步開(kāi)展子囊盤(pán)形成的分子調(diào)控機(jī)理和子 囊孢子侵染寄主致病機(jī)制的相關(guān)研究奠定基礎(chǔ) 。 1 材料與方法 1 .1 供試材料 供試菌株由沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)真菌實(shí)驗(yàn)室提供 ， 分 離自遼寧省北票市蒙古營(yíng)鄉(xiāng)躍進(jìn)示范園試驗(yàn)田的辣 椒病株 。 病原菌菌核的獲取 ： 采用基礎(chǔ)培養(yǎng)基 查氏 培養(yǎng)基 （ Czapek ）， 用等量的果糖替換蔗糖 ， 酵母浸 汁替換硝酸鉀 ， 培養(yǎng)溫度 25 ， pH 為 6。 在新培養(yǎng) 的病菌菌落邊緣打孔挑取菌餅 （ d =6. 5 mm ）， 置于該 培養(yǎng)基平板 （ d =90 mm ） 上 ， 培養(yǎng) 7 d 后即可獲得大 量菌核 3 。 1 .2 培養(yǎng)條件對(duì)菌核菌子囊盤(pán)形成的影響 1 .2 .1 營(yíng)養(yǎng)條件 在滅菌的 廣口瓶 （ d =5 cm ） 內(nèi) 鋪約 2 cm 厚細(xì)沙 （ 基建 河沙 過(guò) 60目 篩并干熱 滅菌 ）， 選擇 5粒 （ d =5 mm ） 成熟度一致的菌核分 別 置于 細(xì)沙 上 ， 分 別設(shè) 置 10 mL PD 培養(yǎng) 液 、 10 mL 2 蔗糖 溶液 和 10 mL 無(wú) 菌 水 3種處 理 。 再向 內(nèi)均 勻噴灑無(wú) 菌 水 ， 直 至細(xì)沙吸 水飽 和 ， 用 透氣 性 封口膜封住瓶口 。 每個(gè)處 理 10次 重 復(fù) 。 置于 20 下 保濕 培養(yǎng) ， 逐日觀(guān)察 、 記錄每個(gè) 菌 核上子囊盤(pán)的形成 情況 ， 并計(jì)算 菌核 萌 發(fā) 率 。 1 .2 .2 初始菌核大小 將 菌核 按 直 徑 大小分為 3個(gè)級(jí)別 ， 1級(jí) ： 菌核直 徑 5 mm ； 2級(jí) ： 3 mm 菌核直 徑 5 mm ； 3級(jí) ： 菌核 直 徑 3 mm 。 分 別選擇 5粒不同級(jí)別 ， 成熟度一致的 菌核置于 鋪滿(mǎn)細(xì)沙 的 廣口瓶 上 。 每個(gè)處 理 10次 重 復(fù) 。 置于 20 下 保濕 培養(yǎng) ， 逐日觀(guān)察 、 記錄每個(gè) 菌核 上子囊盤(pán)的形成 情況 ， 并計(jì)算 菌核 萌 發(fā) 率 。 1 .2 .3 前期低溫處理 將 50粒 （ d =5 mm ） 成熟度一致的菌核分 別經(jīng)低 溫 處 理 （ 4 ） 和室溫 處 理 （ 20 ） 7、 15 、 30 d 和 60 d 后 ， 再 置于 20 下 保濕 培養(yǎng) ， 培養(yǎng)條件 同 1. 2. 1， 逐 日觀(guān)察 、 記錄每個(gè) 菌核上子囊盤(pán)的形成 情況 ， 并計(jì)算 菌核 萌 發(fā) 率 。 1 .2 .4 紫外光照處理 將 50粒 （ d =5 mm ） 成熟度一致的菌核進(jìn)行 紫外 光照射 （ 額 定 功率 30 W ， 照射距 離 40 cm ）， 照射時(shí) 間分 別 為 10、 30、 60 min ， 以未 照射 的菌核為對(duì) 照 ， 再 置于 20 下 保濕 培養(yǎng) 。 培養(yǎng)條件 同 1. 2. 1， 逐日觀(guān) 察 、 記錄每個(gè) 菌核上子囊盤(pán)的形成 情況 ， 并計(jì)算 菌核 萌 發(fā) 率 。 1 .2 .5 培養(yǎng)溫度 選擇 5粒 （ d =5 mm ） 成熟度一致的菌核置于 鋪 滿(mǎn)細(xì)沙 的 廣口瓶 上 ， 分 別 置于 5、 10、 15、 20、 25 和 30 恒 溫 保濕 培養(yǎng) ， 每個(gè)處 理 10次 重 復(fù) ， 逐日觀(guān) 察 、 記錄每個(gè) 菌核上子囊盤(pán)的形成 情況 ， 并計(jì)算 菌核 萌 發(fā) 率 。 1 .2 .6 光照處理 將 50粒 （ d =5 mm ） 成熟度一致的菌核分 別 置于 全光照 、 全黑暗 、 12 h 光暗交 替 （ 500 lux ） 3種處 理 。 逐日觀(guān)察 、 記錄每個(gè) 菌核上子囊盤(pán)的形成 情況 ， 培養(yǎng) 條件 同 1. 2. 1， 并計(jì)算 菌核 萌 發(fā) 率 。 菌核 萌 發(fā) 率 （ ） =（ 萌 發(fā)菌核數(shù)量 /供試菌核數(shù) 量 ） 100 1 .3 子囊盤(pán)和子囊孢子形態(tài)測(cè)定 采用 游標(biāo)卡尺 測(cè)量子囊盤(pán) 柄 長(zhǎng)度和子囊盤(pán)直 徑 。 隨 機(jī) 選 取人工培養(yǎng)產(chǎn)生的成熟子囊盤(pán) ， 在 -25 條件下 包埋 制作 冷凍組織切片 。 應(yīng) 用 LEICA - CM1100 型冷凍切片 機(jī) 切片 ， 在 光 學(xué) 顯微鏡 下 觀(guān)察 記載 子囊盤(pán) 、 子囊孢子等形態(tài)特 征 ， 并 進(jìn)行 拍照 。 1 .4 數(shù)據(jù)處理 用 Excel 進(jìn)行原 始 數(shù) 據(jù)處 理 ， 用 SPSS 13 . 0統(tǒng) 計(jì) 軟 件進(jìn)行方 差 分 析 。 17 2018 年第 6 期 CHINA PLANT PROTECTION 20 1 8,VoI. 38 .No. 6 a b c d e f a.菌核萌發(fā)產(chǎn)生子囊盤(pán)柄 b-c. 子囊盤(pán)柄逐漸伸長(zhǎng) ， 并具有背地性 d.子囊盤(pán)柄頂端膨大呈碗狀 e.子囊盤(pán)柄逐漸展開(kāi) f.成熟子囊盤(pán) 圖 1 辣椒菌核病病菌子囊盤(pán)生長(zhǎng)過(guò)程 a. b. 子囊和子囊孢子 c. 子囊盤(pán)切面 圖 2 辣椒菌核病病菌子囊盤(pán) 、 子囊及子囊孢子形態(tài) 2 結(jié)果與分析 2 . 1 子囊盤(pán)發(fā)育歷程 觀(guān)察辣椒菌核病病菌子囊盤(pán)生長(zhǎng)過(guò)程 （ 圖 1）： 菌核萌發(fā)產(chǎn)生子囊盤(pán)可分為針狀期 （ 子囊盤(pán)直徑 0. 5 mm ）、 膨大期 （ 0. 5 mm 子囊盤(pán)直徑 1. 0 mm ）、 漏斗期 （ 子囊盤(pán)直徑 1. 0 mm ） 和平盤(pán)期 。 針狀期 ： 菌 核萌發(fā)初期 ， 產(chǎn)生芽狀白色至黃色突起 （ 子囊盤(pán)柄 ） （ 圖 1a ）， 頂端深褐色 ， 子囊盤(pán)柄逐漸伸長(zhǎng) ， 并具有背 地性和向光性 ， 為期 20 d 左右 （ 圖 1b c ）； 膨大期 ： 子囊盤(pán)頂端膨大呈碗狀 （ 圖 1d ）， 子囊盤(pán)初生色澤較 淺 ， 呈淺黃色至黃色 ， 逐漸變?yōu)闇\黃褐色或黃褐色 ， 為期 1 5 d ； 漏斗期 ： 子囊盤(pán)逐漸變大 ， 展開(kāi)呈漏斗 狀 （ 圖 1e ）， 為期 7 10 d ； 平盤(pán)期 ： 子囊盤(pán)平展為圓形 或不規(guī)則花瓣形的成熟子囊盤(pán) （ 圖 1f ）， 為期 5 7 d 。 單一菌核可同時(shí)產(chǎn)生 1 16 個(gè)子囊盤(pán)柄 。 菌核 萌發(fā)生產(chǎn)的初生子囊盤(pán)棕黃色 ， 成熟時(shí) ， 色澤略變 白 。 子囊盤(pán)存活時(shí)間變化較大 ， 為 1 30 d ， 而后逐漸 18 2018 年第 6 期 CHINA PLANT PROTECTION 20 18 ,VoI. 38 .No. 6 處理溫度 （ ） 處理時(shí)間 （ d ） 產(chǎn)盤(pán)持續(xù)時(shí)間 （ d ） 子囊盤(pán)柄數(shù)量 （ 個(gè) ） 子囊盤(pán)數(shù)量 （ 個(gè) ） 子囊盤(pán)直徑 （ mm ） 菌核萌發(fā)率 （ ） 4 7 （ 62.10 15.34） c （ 67.00 25.15） d （ 12.00 2.82） c （ 4.08 0.93 ） cd （ 14.00 4.89） d 4 15 （ 58.40 12.82） cd （ 71.00 21.86 ） c （ 11.00 1.86 ） c （ 4.22 1.58） c （ 18.00 5.74 ） c 4 30 （ 77.80 19.25 ） b （ 185.00 42.88） b （ 25.00 4.82） b （ 4.57 1.05） b （ 44.00 11.21） b 4 60 （ 84.20 18.59） a （ 215.00 50.31） a （ 31.00 6.57 ） a （ 5.82 1.57 ） a （ 50.00 15.52） a 20 7 （ 55.60 13.27 ） d （ 58.00 11.58） e （ 8.00 1.68 ） cd （ 4.16 0.82） c （ 12.00 3.58） d 20 15 （ 53.80 11.25） d （ 59.00 20.24） e （ 10.00 2.07 ） c （ 3.94 0.89） d （ 12.00 2.84） d 20 30 （ 54.20 9.57） d （ 62.00 18.59） de （ 8.00 1.49） cd （ 4.05 1.52） cd （ 8.00 1.35） e 20 60 （ 55.30 11.96） d （ 64.00 18.73 ） de （ 7.00 2.25） d （ 3.99 0.54） d （ 10.00 0.94） de 表 3 前期低溫處理對(duì)辣椒菌核病病菌子囊盤(pán)形成的影響 1） 1） 同列數(shù)據(jù)后不同小寫(xiě)字母表示差異顯著 （ P 0.05 ）。 培養(yǎng)條件 產(chǎn)盤(pán)持續(xù)時(shí)間 （ d ） 子囊盤(pán)柄數(shù)量 （ 個(gè) ） 子囊盤(pán)數(shù)量 （ 個(gè) ） 子囊盤(pán)直徑 （ mm ） 菌核萌發(fā)率 （ ） PD 培養(yǎng)液 - - - - - 2 蔗糖溶液 - （ 15.00 3.94 ） b - - （ 5.00 1.56 ） b 無(wú)菌水 （ 57.80 15.62 ） a （ 55.00 7.63 ） a （ 11.00 3.55） a （ 4.12 0.85） a （ 20.00 6.33） a 表 1 營(yíng)養(yǎng)條件對(duì)辣椒菌核病病菌子囊盤(pán)形成的影響 1） 1） - 為不產(chǎn)生 ； 同列數(shù)據(jù)后不同小寫(xiě)字母表示差異顯著 （ P 0.05 ）。 萎縮枯死 。 成熟子囊盤(pán)直徑 4 9 mm ， 子囊盤(pán)柄 7 20 mm 。 子囊著生于子囊盤(pán)上 ， 無(wú)色 ， 長(zhǎng)圓筒形 ， 頂部 鈍圓 ， 基部漸緩變細(xì) ， 大小 （ 90 139 ） m （ 6 11） m 。 子囊盤(pán)自漏斗期至平盤(pán)期 ， 經(jīng)輕微震動(dòng)即可自 行彈射白色漫霧狀子囊孢子 ， 為期 1 30 d 。 每個(gè)子 囊含 8個(gè)子囊孢子 。 子囊孢子無(wú)色 ， 橢圓形 ， 單胞 ， 大小 （ 6 14 ） m （ 3 7） m （ 圖 2）。 2 .2 營(yíng)養(yǎng)條件對(duì)子囊盤(pán)形成的影響 營(yíng)養(yǎng)條件對(duì)菌核萌發(fā)形成子囊盤(pán)有明顯差異 （ 表 1）。 其中 ， 菌核僅在細(xì)沙上能夠順利萌發(fā)產(chǎn)生子 囊盤(pán) ， 菌核萌發(fā)率為 20 ； 僅有 5 的菌核在 2 蔗 糖溶液的營(yíng)養(yǎng)條件上萌發(fā)產(chǎn)生少量子囊盤(pán)柄 ， 子囊 盤(pán)柄生長(zhǎng) 3 5 d 后逐漸枯萎失去繼續(xù)萌發(fā)的潛能 ； 而菌核在 PD 培養(yǎng)液的營(yíng)養(yǎng)條件上僅能產(chǎn)生大量菌 絲 ， 無(wú)法形成子囊盤(pán)柄和產(chǎn)生子囊盤(pán) 。 2 .3 不同菌核大小對(duì)子囊盤(pán)形成的影響 菌核的大小是影響子囊盤(pán)直徑和發(fā)育歷期長(zhǎng)短 的關(guān)鍵內(nèi)在因素 （ 表 2）， 隨著菌核直徑的增大 ， 菌核 萌發(fā)率明顯增高 、 子囊盤(pán)柄數(shù)量明顯增多 、 子囊盤(pán)直 徑和數(shù)量明顯增加 、 子囊盤(pán)產(chǎn)生持續(xù)期明顯增長(zhǎng) 。 然 而 ， 隨著單一菌核上產(chǎn)生子囊盤(pán) （ 柄 ） 數(shù)量的增加 ， 子 囊盤(pán)直徑和子囊盤(pán)產(chǎn)生持續(xù)期有所減少 。 2 .4 前期低溫處理對(duì)子囊盤(pán)形成的影響 菌核經(jīng)過(guò)低溫處理 （ 4 ） 可顯著促進(jìn)子囊盤(pán)的 形成 （ 表 3）。 其中 ， 低溫處理 60 d 后菌核萌發(fā)率可達(dá) 到 50 ，明顯高于其他處理 ， 且子囊盤(pán)柄數(shù)量 、 子囊盤(pán) 直徑和數(shù)量明顯增加 、 子囊盤(pán)產(chǎn)生持續(xù)期明顯增長(zhǎng) ； 隨著低溫處理的時(shí)間縮短 ， 菌核萌發(fā)率顯著下降 ， 低 溫處理 7 d的結(jié)果與室溫處理 7 60 d 的結(jié)果基本無(wú) 差異 。 可見(jiàn)前期的低溫處理 ，有利于子囊盤(pán)的形成 ， 且 菌核級(jí)別 （ d =mm ） 產(chǎn)盤(pán)持續(xù)時(shí)間 （ d ） 子囊盤(pán)柄數(shù)量 （ 個(gè) ） 子囊盤(pán)數(shù)量 （ 個(gè) ） 子囊盤(pán)直徑 （ mm ） 菌核萌發(fā)率 （ ） 1級(jí) （ d 5） （ 62.10 13.25） a （ 57.00 18.25） a （ 14.00 3.63） a （ 4.26 0.76 ） a （ 24.00 8.43） a 2 級(jí) （ 3 d 5） （ 47.50 8.59） b （ 35.00 7.86 ） b （ 10.00 3.98 ） b （ 3.26 0.28） b （ 18.00 7.55 ） b 3級(jí) （ d 3） （ 31.20 8.25） c （ 26.00 5.39 ） c （ 5.00 1.25） c （ 2.81 0.35） c （ 10.00 4.21） c 1） 同列數(shù)據(jù)后不同小寫(xiě)字母表示差異顯著 （ P 0.05 ）。 表 2 菌核大小對(duì)辣椒菌核病病菌子囊盤(pán)形成的影響 1） 19 2018 年第 6 期 CHINA PLANT PROTECTION 20 1 8,VoI. 38 .No. 6 光照處理 產(chǎn)盤(pán)持續(xù)時(shí)間 （ d ） 子囊盤(pán)柄數(shù)量 （ 個(gè) ） 子囊盤(pán)數(shù)量 （ 個(gè) ） 子囊盤(pán)直徑 （ mm ） 菌核萌發(fā)率 （ ） 全黑暗 - - - - - 全光照 （ 45.90 8.63） b （ 35.00 9.36） b （ 12.00 4.69） b （ 3.15 0.65） b （ 10.00 3.65） b 12 h 光暗交替 （ 62.20 13.52） a （ 65.00 15.28） a （ 21.00 8.33） a （ 4.04 0.87） a （ 22.00 9.57） a 1） - 為不產(chǎn)生 ； 同列數(shù)據(jù)后不同小寫(xiě)字母表示差異顯著 （ P 0.05 ）。 表 6 光照處理對(duì)辣椒菌核病病菌子囊盤(pán)形成的影響 1） 照射時(shí)間 （ min ） 產(chǎn)盤(pán)持續(xù)時(shí)間 （ d ） 子囊盤(pán)柄數(shù)量 （ 個(gè) ） 子囊盤(pán)數(shù)量 （ 個(gè) ） 子囊盤(pán)直徑 （ mm ） 菌核萌發(fā)率 （ ） 10 （ 58.40 12.68） a （ 53.00 15.23） a （ 12.00 3.58） a （ 4.11 2.68） a （ 18.00 4.51） a CK （ 未照射 ） （ 59.40 10.21） a （ 51.00 8.53） a （ 9.00 3.35） a （ 4.08 1.65） a （ 18.00 3.84） a 30 （ 59.20 18.58 ） a （ 50.00 13.47） a （ 8.00 2.54） b （ 4.02 1.21） a （ 16.00 3.38） a 60 （ 57.80 15.35） a （ 48.00 11.51） b （ 10.00 2.87） a （ 3.99 1.30） a （ 16.00 4.26） a 1） 同列數(shù)據(jù)后不同小寫(xiě)字母表示差異顯著 （ P 0.05 ）。 表 4 紫外光照處理對(duì)辣椒菌核病病菌子囊盤(pán)形成的影響 1） 培養(yǎng)溫度 （ ） 產(chǎn)盤(pán)持續(xù)時(shí)間 （ d ） 子囊盤(pán)柄數(shù)量 （ 個(gè) ） 子囊盤(pán)數(shù)量 （ 個(gè) ） 子囊盤(pán)直徑 （ mm ） 菌核萌發(fā)率 （ ） 5 - - - - - 30 - - - - - 10 （ 43.30 7.69） d （ 15.00 4.35） d - - （ 6.00 1.39） d 25 （ 51.60 10.32） c （ 22.00 5.57） c （ 8.00 2.12） c （ 2.53 0.53） c （ 14.00 3.36） c 20 （ 65.70 15.74） a （ 61.00 17.35） a （ 18.00 5.36） a （ 4.35 1.15） a （ 26.00 7.21） a 15 （ 58.20 11.53） b （ 35.00 11.36） b （ 11.00 3.64） b （ 3.97 0.93） b （ 20.00 4.38） b 1） - 為不產(chǎn)生 ； 同列數(shù)據(jù)后不同小寫(xiě)字母表示差異顯著 （ P 0.05 ）。 表 5 處理溫度對(duì)辣椒菌核病病菌子囊盤(pán)形成的影響 1） 隨著低溫處理時(shí)間的延長(zhǎng) ，菌核萌發(fā)率顯著提高 。 2 . 5 紫外光照處理對(duì)子囊盤(pán)形成的影響 菌核經(jīng)紫外光照射的各個(gè)處理與未經(jīng)照射處理 的產(chǎn)盤(pán)時(shí)間 、 產(chǎn)柄數(shù)量 、 產(chǎn)盤(pán)數(shù)量 、 子囊盤(pán)直徑 、 菌核 萌發(fā)率之間無(wú)明顯差異 （ 表 4）， 說(shuō)明紫外光照射無(wú) 法促進(jìn)菌核萌發(fā)產(chǎn)生子囊盤(pán) 。 2 . 6 培養(yǎng)溫度對(duì)子囊盤(pán)形成的影響 培養(yǎng)溫度對(duì)菌核萌發(fā)產(chǎn)生子囊盤(pán)有明顯的影響 。 在 15 25 范圍內(nèi)菌核均可萌發(fā)產(chǎn)生子囊盤(pán) 。 其中 ， 20 為菌核產(chǎn)生子囊盤(pán)的最適溫度 ， 產(chǎn)盤(pán)持續(xù)時(shí)間 可達(dá) 65.7 d ， 產(chǎn)生子囊盤(pán)柄 61個(gè) ， 子囊盤(pán) 18 個(gè) ， 萌發(fā) 率為 26 ； 在 10 條件下菌核萌發(fā)產(chǎn)生一定數(shù)量的 子囊盤(pán)柄 ， 并于 3 5 d 后逐漸枯萎 ， 失去繼續(xù)萌發(fā)形 成子囊盤(pán)的潛能 ； 當(dāng)溫度低于 5 或者高于 30 時(shí) ， 菌核僅能產(chǎn)生無(wú)性態(tài)菌絲 ， 不產(chǎn)生子囊盤(pán) （ 表 5）。 2 .7 光照處理對(duì)子囊盤(pán)形成的影響 不同光照處理對(duì)菌核萌發(fā)產(chǎn)生子囊盤(pán)有明顯的 影響 。 其中 ， 12 h 光暗交替條件下菌核萌發(fā)率為 22 ， 是供試 3種處理的最適光照條件 ， 全光照處理 的菌核萌發(fā)率僅為 10 ， 顯著低于 12 h 光暗交替條 件的處理 ； 在全黑暗條件下 ， 菌核則無(wú)法萌發(fā)形成子 囊盤(pán) （ 表 6）。 3 結(jié)論與討論 核盤(pán)菌菌核產(chǎn)生子囊盤(pán)的發(fā)育歷期受內(nèi)在 （ 菌 核成熟度和菌核大小 ） 和外在因素 （ 溫度 、 濕度 、 光照 等 ） 的共同影響 20 -23 ， 目前尚未見(jiàn)有關(guān)辣椒菌核病子 囊盤(pán)產(chǎn)生的詳盡報(bào)道 。 本研究表明 ， 辣椒菌核病病菌 子囊盤(pán)發(fā)育歷期一般為 1 30 d ， 分為針狀期 、 膨大 期 、 漏斗期和平盤(pán)期 。 成熟子囊盤(pán)直徑 4 9 mm ， 子 20 2018 年第 6 期 CHINA PLANT PROTECTION 20 18 ,VoI. 38 .No. 6 囊盤(pán)柄 7 20 mm 。 自漏斗期至平盤(pán)期子囊盤(pán)自行彈 射釋放子囊孢子 ， 為期 1 30 d 。 子囊著生于子囊盤(pán) 上 ， 大小 （ 90 139） m （ 6 11 ） m 。 每個(gè)子囊含 8個(gè) 子囊孢子 。 子囊孢子無(wú)色 ， 橢圓形 ， 單胞 ， 大小 （ 6 14 ） m （ 3 7） m 。 辣椒菌核病病菌菌核萌發(fā)形成子囊 盤(pán)的發(fā)育歷期 、 子囊盤(pán)和子囊孢子的形態(tài)與大豆 、 油 菜 、 黃瓜等其他寄主作物菌核病的各個(gè)指標(biāo)大體一 致 。 說(shuō)明核盤(pán)菌具有廣泛的寄主范圍 。 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)并非是菌核萌發(fā)形成子囊盤(pán)的必要因 素 ， 過(guò)量的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)反而不利于子囊盤(pán)的形成 23 。 菌 核的大小是影響子囊盤(pán)直徑和發(fā)育歷期長(zhǎng)短的內(nèi)在 關(guān)鍵因素 ， 較大的菌核具有較高的萌發(fā)率 ， 產(chǎn)生較多 子囊盤(pán)柄和較大子囊盤(pán)能力 ， 且產(chǎn)盤(pán)持續(xù)期長(zhǎng) 。 然 而 ， 隨著單一菌核上產(chǎn)生子囊盤(pán) （ 柄 ） 數(shù)量的增加 ， 子 囊盤(pán)直徑和子囊盤(pán)產(chǎn)生持續(xù)期有所減少 。 低溫處理 可顯著提高菌核萌發(fā)率近 3倍 ， 這一研究結(jié)果與 Bedi 和 Mylchreest 的研究一致 24 -25 。 說(shuō)明低溫處理 可大大促進(jìn)菌核萌發(fā)產(chǎn)生子囊盤(pán) ， 但并非是子囊盤(pán) 形成的必要條件 。 辣椒菌核病病菌核經(jīng) 90 min 紫外 光照射與未經(jīng)紫外光照射無(wú)明顯差異 ， 此結(jié)果與程 志明 26 報(bào)道的經(jīng)紫外光照射處理后可顯著提高大豆 菌核萌發(fā)產(chǎn)生子囊盤(pán)的結(jié)果存在一定差異 。 其原因 可能與菌株地點(diǎn)來(lái)源和寄主作物來(lái)源不同所導(dǎo)致 。 菌核在 15 25 范圍內(nèi)均可萌發(fā)產(chǎn)生子囊盤(pán) ， 20 為最適培養(yǎng)溫度 ， 過(guò)低或過(guò)高的培養(yǎng)溫度條件下菌 核萌發(fā)產(chǎn)生無(wú)性態(tài)菌絲 ， 不產(chǎn)生子囊盤(pán) 。 菌核無(wú)法在 黑暗條件下萌發(fā)形成子囊盤(pán) ， 但持續(xù)的光照也會(huì)產(chǎn) 生一定的抑制作用 22 。 本研究明確了辣椒菌核病病菌子囊盤(pán)的發(fā)育歷 期 ， 開(kāi)展了不同內(nèi)外在因素對(duì)子囊盤(pán)形成的影響研 究 ， 以期建立辣椒菌核病病菌子囊盤(pán)快速大量產(chǎn)生 的方法 ， 為辣椒菌核病的宏觀(guān)研究 （ 病害流行規(guī)律和 防治方法 ） 和微觀(guān)研究 （ 菌核形成和萌發(fā)的分子調(diào)控 機(jī)理和子囊孢子侵染寄主的致病機(jī)制 ） 提供了前期 基礎(chǔ)和理論依據(jù) 。 參考文獻(xiàn) 1 戴芳瀾 . 中國(guó)真菌總 匯 M . 北京 ： 科學(xué)出版社 ， 1979. 2 Boland G J ， Hall R . 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