年 月第 卷第 期 收 稿 日 期 作 者 簡 介 馬偉東 男 河南省鎮(zhèn)平縣人 南陽市鎮(zhèn)平縣農(nóng)業(yè)推廣站高級農(nóng)藝師 主要研究方向為土壤肥料研究 與實踐 通 信 作 者 張俊杰 男 河南省汝州市人 鄭州輕工業(yè)大學(xué)副教授 博士 主要研究方向為功能微生物生態(tài)與 應(yīng)用 引 用 格 式 馬偉東 李碩 王晨晨 等 常見植物真菌性病害拮抗酵母菌的篩選與鑒定 輕 工學(xué)報 中 圖 分 類 號 文 獻(xiàn) 標(biāo) 識 碼 文 章 編 號 常 見 植 物 真 菌 性 病 害 拮 抗 酵 母 菌 的 篩 選 與 鑒 定 關(guān) 鍵 詞 植物真菌性病害 拮抗酵母菌 平板對峙法 馬偉東 李碩 王晨晨 劉溢彩 張暢 吳昊 田寅 張俊杰 南 陽 市 鎮(zhèn) 平 縣 農(nóng) 業(yè) 推 廣 站 河 南 南 陽 鄭 州 輕 工 業(yè) 大 學(xué) 食 品 與 生 物 工 程 學(xué) 院 河 南 鄭 州 摘 要 針對黃瓜枯萎病病原菌 黃瓜尖孢鐮刀菌 煙草赤星病病原菌 赤星霉 菌 和紫云英根腐病病原菌 紫云英根腐病菌 種常見植物真菌性病害 采用 平板對峙法 從已分離保存的 株酵母菌中篩選出具有較強拮抗作用的 株 酵母菌 通過形態(tài)學(xué)特征 生理生化特征 基因測序分析以確定其分類學(xué)地位 結(jié)果表明 酵母菌 對黃瓜尖孢鐮刀菌拮抗效果最好 其抑菌率為 該菌株被鑒定為 酵母菌 對赤星霉 菌拮抗效果最好 其抑菌率為 該菌株被鑒定為 酵 母菌 對紫云英根腐病菌拮抗效果最好 其抑菌率為 該菌 株被鑒定為 年 月第 卷第 期 前言 由真菌引起的植物病害在全球范圍內(nèi)都較 為常見 針對植物病害的主要防治手段是施 加化學(xué)農(nóng)藥 而這一措施會造成致病菌產(chǎn) 生抗藥性 農(nóng)藥殘留等問題 因此 生物防治 的理念越來越受到業(yè)界的重視 生物防治主要 是利用拮抗微生物及其代謝產(chǎn)物對植物病害病 原菌產(chǎn)生抑制作用 從而削弱病原菌致病力 達(dá) 到防治效果 生物防治由于具有不污染環(huán)境 不使致病菌產(chǎn)生抗藥性等優(yōu)點而成為近年來農(nóng) 作物病蟲害防治的研究熱點 果蔬等在生長 采摘 運輸 貯藏等過程中 若處理不當(dāng) 易腐爛變質(zhì) 而真菌性病原菌是引 起果蔬等腐爛的主導(dǎo)因素 黃瓜枯萎病是 由黃瓜尖孢鐮刀菌引起的土傳真菌性病害 可 嚴(yán)重影響黃瓜的水分含量 進而影響黃瓜的 品質(zhì)和產(chǎn)量 目前已報道的對黃瓜枯萎病病 原菌 黃瓜尖孢鐮刀菌 具有生物防治潛力的 微生物主要有假單胞菌屬 鏈霉菌 芽孢桿 菌 細(xì)菌 等 煙草赤星病 又稱赤斑病 是 一種由半知菌亞門鏈格孢屬赤星霉菌侵染引起 的主要危害煙葉的真菌性病害 目前已報 道的對煙草赤星病病原菌 赤星霉菌 具有生 物防治潛力的微生物主要有芽孢桿菌 放線菌 等 在田間 生物防治菌劑對煙草赤星病 已具有很好的應(yīng)用效果 紫云英根腐病是由 紫云英根腐病病原菌 紫云英根腐病菌 引起 的一種真菌性病害 是造成紫云英產(chǎn)量減少的 重要病癥之一 酵母菌對植物真菌性病原菌具有拮抗效 果 同時具有防治效果好 不污染環(huán)境 繁殖速 度快 遺傳穩(wěn)定 不威脅人類健康等優(yōu) 點 農(nóng)作物果實采摘后 使用酵母菌替 代化學(xué)農(nóng)藥防治植物真菌性病害 已成為二戰(zhàn) 后世界各國農(nóng)作物病蟲害防治的研究熱點之 一 拮抗酵母菌 植物真菌性病害病原菌與宿主 植物可相互影響 同時 拮抗酵母菌的生物防治 效果也是多種機制共同作用的結(jié)果 一是拮 抗酵母菌通過與病原菌展開空間與資源的競 爭 抑制病原菌的生長 二是拮抗酵母菌 通過誘導(dǎo)植物 產(chǎn)生抑制病原菌的拮抗物 質(zhì) 三是拮抗酵母菌自身也能產(chǎn)生具有抑菌 能力的代謝物質(zhì) 該代謝物質(zhì)具有重要的病 原菌拮抗作用 另外 不同酵母菌對不同植物真 菌性病害病原菌的拮抗效果也有所不同 張俊 杰等 從分離自葡萄果皮的酵母菌中 篩選出 一株對黃瓜尖孢鐮刀菌具有明顯拮抗作用的酵 母菌 并證明了該酵母菌對黃瓜尖孢鐮刀菌具 有潛在的生物防治效果 目前 鮮見拮抗酵母菌 對赤星霉菌和紫云英根腐病菌具有潛在的生物 防治效果的相關(guān)報道 近年來 由于分子生物學(xué)的快速發(fā)展 利用 鑒定菌株的技術(shù)被廣泛應(yīng)用于酵母菌的 馬 偉 東 等 常 見 植 物 真 菌 性 病 害 拮 抗 酵 母 菌 的 篩 選 與 鑒 定 分類鑒定 很多模式菌株的 區(qū) 區(qū)和 區(qū)的序列被公布 在 國際核酸序列中 這使得酵 母菌的分類鑒定更加快速和精確 也標(biāo)志著酵 母菌鑒定從傳統(tǒng)的表型性狀鑒定跨入現(xiàn)代遺傳 信息特性鑒定的新階段 基于此 本文擬選擇黃瓜尖孢鐮刀菌 赤星 霉菌和紫云英根腐病菌作為研究對象 采用平 板對峙法 從 株酵母菌中篩選出對 種常見 植物真菌性病原菌具有較強拮抗作用的酵母菌 菌株 通過形態(tài)學(xué)特征 生理生化特征 基因測 序分析確定其分類學(xué)地位 以期為植物真菌性 病害的生物防治提供參考 材料與方法 材 料 供 試 菌 株 黃瓜枯萎病病原菌 黃瓜尖 孢鐮刀菌 由河南農(nóng)業(yè)大學(xué)提供 煙草赤星病 病原菌 赤星霉菌 由鄭州輕工業(yè)大學(xué)提供 紫云英根腐病病原菌 紫云英根腐病菌 由中 國農(nóng)業(yè)大學(xué)提供 酵母菌 由鄭州輕工業(yè)大學(xué)食 品與生物工程學(xué)院微生物資源分類實驗室分離 并保存 主 要 試 劑 柱式基因組 抽提 試劑盒 酵母菌 引物 和 引物 和 以上 試劑均由上海生工生物工程股份有限公司提供 主 要 培 養(yǎng) 基 培養(yǎng)基 馬鈴薯 葡萄糖 瓊脂粉 去離子水定容 至 培養(yǎng)基 酵母粉 蛋白胨 葡 萄糖 去離子水定容至 其中 固 體培養(yǎng)基加瓊脂粉 鑒別培養(yǎng)基 酵母粉 胰蛋白胨 葡萄糖 瓊脂粉 溴甲酚綠 去離子水定容至 調(diào) 值至 以上培養(yǎng)基均在 條件下高壓蒸汽滅 菌 儀 器 與 設(shè) 備 型超凈工 作臺 蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司產(chǎn) 型恒溫水浴鍋 江蘇省金壇市醫(yī)療器械有限公 司產(chǎn) 型臺式離心機 上海安亭科學(xué) 儀器廠產(chǎn) 型生化培養(yǎng)箱 北京中興 偉業(yè)儀器有限公司產(chǎn) 型紫外分析儀 北 京君意東方電泳設(shè)備有限公司產(chǎn) 型聚 合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴增儀 美國 公司產(chǎn) 實 驗 方 法 酵 母 菌 的 活 化 與 純 化 將保存于鄭州 輕工業(yè)大學(xué)食品與生物工程學(xué)院微生物資源分 類實驗室菌庫 中的 株酵母菌 分 離自霞多麗葡萄果皮和葡萄酒釀造過程中 進 行活化 吸取 酵母菌菌液 置于 培 養(yǎng)基上 于 條件下培養(yǎng) 待菌落長出后 即為活化完成 挑取培養(yǎng)基中的單菌落 在 培養(yǎng)基上經(jīng)過 次劃線接種培養(yǎng) 獲得 純化后的酵母菌菌株 植 物 真 菌 性 病 害 病 原 菌 的 活 化 用直 徑 的打孔器在有黃瓜尖孢鐮刀菌的 培養(yǎng)基上打出菌塊 將菌塊倒扣在 培養(yǎng)基 的中央 使病原菌表面與培養(yǎng)基表面盡可能接 觸 于 條件下正向放置培養(yǎng) 再倒置培 養(yǎng) 待菌落長出后即為活化完成 赤星霉菌和紫 云英根腐病菌的活化方法同上 拮 抗 酵 母 菌 的 初 篩 借鑒參考文獻(xiàn) 的方法 分別在 個 培養(yǎng)基平板的背 面十字劃線 將每個平板分為 個相等的區(qū)域 取生長良好的 種病原菌菌餅 半徑為 年 月第 卷第 期 分別倒扣在 個 平板的十字交叉中心 并 在每個區(qū)域內(nèi)距中心菌餅 處劃線接種酵 母菌 使酵母菌生長區(qū)域保持一致 每個病原菌 做 次平行 同時以不接種酵母菌的 培養(yǎng) 基平板作陰性對照 將所有平板用密封條密封 好后 于 條件下正向培養(yǎng) 后 再倒置 培養(yǎng) 待培養(yǎng)結(jié)束后 與陰性對照組進行對 比 將對 種病原菌有抑制作用的酵母菌初步篩 選出來 用精度為 的游標(biāo)卡尺測量病原 菌直徑 對峙平板中的病原菌直徑越小 表明抑 制作用越強 酵母菌的拮抗作用越好 拮 抗 酵 母 菌 的 復(fù) 篩 進一步對初次篩 選得到的拮抗酵母菌進行復(fù)篩 以確定酵母菌 拮抗效果的強弱 根據(jù) 的方法 個平板 上只接種 株酵母菌 進行復(fù)篩 并計算抑菌 率 計算公式如下 抑菌率 對照組菌落直徑 實驗組菌落直徑 對照組菌落直徑 抑菌率越高 表明酵母菌抑菌作用越強 拮 抗作用越好 拮 抗 酵 母 菌 的 初 步 鑒 定 將復(fù)篩得到 的拮抗酵母菌 劃線接種至 鑒別培養(yǎng)基上 于 條件下暗培養(yǎng) 在暗室用白熾燈作 為唯一光源 以保證結(jié)果的一致性 觀察菌落 形態(tài)特征 菌落的大小 色澤等 對篩選 得到的酵母菌進行初步鑒定 挑取單菌落 接種 于 液體培養(yǎng)基中 于 條 件下培養(yǎng) 在 倍光學(xué)顯微鏡下觀察酵母 菌細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特征 拮 抗 酵 母 菌 的 基 因 測 序 將復(fù)篩得到 的拮抗酵母菌接種于 液體培養(yǎng)基中 于 條件下過夜培養(yǎng) 按照酵母菌 基因組 試劑盒的說明提取酵母菌基因組 區(qū)段使用正向引物 和 反向引物 進行擴增 區(qū)段使用正 向引物 和反向引物 進行擴增 體系和擴增程序 參見文獻(xiàn) 對 產(chǎn)物進行瓊脂糖 質(zhì)量 分?jǐn)?shù)為 凝膠電泳檢測 電泳參數(shù)為電壓 定時 初步判斷擴增片段的大小 和質(zhì)量 并將擴增后的 產(chǎn)物送上海生工生 物工程股份有限公司進行測序 拮 抗 酵 母 菌 的 系 統(tǒng) 發(fā) 育 分 析 用 軟件對 產(chǎn)物測序結(jié)果進行序列修正 在 數(shù)據(jù)庫中利用 工具對修正后的 區(qū)段序列和 區(qū)段 序列進行序列相似性比對 并下載序列相似性 最高的已知種群序列作為參比序列 建立系統(tǒng) 發(fā)育樹 結(jié)果與分析 拮 抗 酵 母 菌 的 篩 選 結(jié) 果 經(jīng)過初步篩選 從 株酵母菌中得到對黃 瓜尖孢鐮刀菌 赤星霉菌和紫云英根腐病菌具 有明顯拮抗作用的 株酵母菌 分別編號為 和 再用這 株酵母菌對 種 病原菌做平板對峙實驗 進行拮抗酵母菌的復(fù) 篩 抑菌效果見表 由表 可知 對黃瓜尖孢鐮刀菌拮抗效果 最佳的酵母菌是 其次是 和 對應(yīng)的抑菌率分別 為 和 對赤星霉菌拮抗 效果最佳的酵母菌是 其次是 和 對應(yīng)的抑菌 馬 偉 東 等 常 見 植 物 真 菌 性 病 害 拮 抗 酵 母 菌 的 篩 選 與 鑒 定 表 拮抗酵母菌對 種病原菌的抑菌效果 拮抗酵母菌 黃瓜尖孢鐮刀菌 平均直徑 抑菌率 赤星霉菌 平均直徑 抑菌率 紫云英根腐病菌 平均直徑 抑菌率 對照組 率分別為 和 對紫云英 根腐病菌拮抗效果最好的酵母菌是 其次是 和 對應(yīng)的抑菌率分別為 和 拮 抗 酵 母 菌 的 初 步 鑒 定 結(jié) 果 對篩選得到的 株拮抗酵母菌進行形態(tài) 學(xué)鑒定 其在 鑒定培養(yǎng)基上的菌落形態(tài)和 顯微細(xì)胞形態(tài)如圖 所示 表型聚類結(jié)果如表 所示 拮 抗 酵 母 菌 的 系 統(tǒng) 發(fā) 育 分 析 結(jié) 果 基 于 區(qū) 段 的 系 統(tǒng) 發(fā) 育 分 析 基于 區(qū)段的拮抗酵 母菌菌株系統(tǒng)發(fā)育樹如圖 所示 由圖 可以 看出 和 與 和 聚為同一分支 類似地 與 和 聚為同一分支 和 與 和 聚為同一分支 和 與 和 聚為同一分支 但以上 種拮抗酵母菌菌 W W110 9 W W110 9 W W10453 W W1045 W W10196 W W1045 W W103 1 W W10986 W W1114 W W10140 圖 拮抗酵母菌在 鑒定培養(yǎng)基上的 菌落形態(tài) 左 和顯微細(xì)胞形態(tài) 右 株均同時與不同的菌株聚為同一分支 因此不 能在種的水平上進行劃分 和 聚為同一分支 且序列相似性 年 月第 卷第 期 表 拮抗酵母菌在 鑒定培養(yǎng)基上的表型聚類結(jié)果 拮抗酵母菌 菌落顏色 菌落形態(tài) 顯微細(xì)胞形態(tài) 白邊 綠圈 白頂 光滑 有光澤 濕潤 突起 不透明 橢圓形 單生 單端芽殖 白邊 淺藍(lán)頂 光滑 有光澤 濕潤 突起 不透明 檸檬形 單生 兩端芽殖 白邊 綠圈 白頂 光滑 有光澤 濕潤 突起 不透明 梭形 單生 單端芽殖 白邊 綠圈 淺綠頂 光滑 有光澤 濕潤 突起 不透明 橢圓形 單生 單端芽殖 白邊 綠圈 淺綠頂 光滑 有光澤 濕潤 突起 不透明 橢圓形 單生 單端芽殖 白邊 深綠頂 光滑 有光澤 濕潤 突起 不透明 梭形 單生 單端芽殖 白邊 白頂 光滑 有光澤 濕潤 突起 不透明 橢圓形 單生 單端芽殖 白邊 白頂 光滑 有光澤 濕潤 突起 不透明 橢圓形 單生 單端芽殖 黃邊 深綠頂 光滑 有光澤 濕潤 突起 不透明 檸檬形 單生 單端芽殖 黃邊 綠圈 白頂 光滑 有光澤 濕潤 突起 不透明 橢圓形 單生 單端芽殖 O O 5O Hanseniaspora opuntiae YLLl 4 MF979222 Hanseniaspora guilliermondii YLL5 MF9792l 4 WYCCWl l O 29 WYCCWl l O 79 WYCCWl O 37l Hanseniaspora vineae 2O TASLl 5 KX42l 39l WYCCWl l l 42 WYCCWl O l 4O WYCCWl O 457 WYCCWl O 453 WYCCWl O 452 WYCCWl O l 96 WYCCWl O 986 Torulaspora delbrueckii WO GB52 DO 869O 79 Lachancea thermotolerans SLDY O 53 MH748632 Starmerella bacillaris SF2 2l O 2II4 MHO 4893 Candida zemplinina A9 4 5 EU386755 Kodamaea ohmenri 64 MKO 26222 Pichia terricola Y2 2O KY996739 Issatchenkia terricola KDLYH3 5 KJ5O 6735 l O O l O O l O O l O O l O O l O O 7l 99 63 圖 基于 區(qū)段的拮抗酵母菌菌株系統(tǒng)發(fā)育樹 為 因此 可將 鑒定為 基 于 區(qū) 段 的 系 統(tǒng) 發(fā) 育 分 析 基于 區(qū)段的拮抗酵母菌菌株系統(tǒng) 發(fā)育樹如圖 所示 由圖 可以看出 與 聚為同一分 支 序列相似性為 因此 可將 鑒定為 和 與 聚為同一分支 序列相似性為 因此 可將 和 鑒 定為 與 聚為同一分支 序列相似性為 因此 可將 鑒定為 和 與 聚為同一分支 序列相似性為 因此 可將 和 鑒定為 結(jié)論 本研究選取鄭州輕工業(yè)大學(xué)食品與生物工 程學(xué)院微生物資源分類實驗室分離篩選得到的 馬 偉 東 等 常 見 植 物 真 菌 性 病 害 拮 抗 酵 母 菌 的 篩 選 與 鑒 定 圖 基于 區(qū)段的拮抗酵母菌株系統(tǒng)發(fā)育樹 株酵母菌 經(jīng)過平板對峙法進行初篩和復(fù) 篩 得到 株對黃瓜尖孢鐮刀菌 赤星霉菌和 紫云英根腐病菌具有較好拮抗作用的酵母菌 其中 對黃瓜尖孢鐮刀菌拮抗效果最好的酵母 菌是 其抑菌率為 該菌 株被鑒定為 對赤星霉菌拮 抗效果最好的酵母菌是 其抑菌 率為 該菌株被鑒定為 對紫云英根腐病菌拮抗效果最好的酵母 菌是 其抑菌率為 該菌 株被鑒定為 該研究結(jié)果確定了酵母菌對上述 種植物 真菌性病原菌具有一定的生物防治效果 為發(fā) 展綠色農(nóng)業(yè)提供了一定的指導(dǎo) 然而 在大田中 需要考慮的因素眾多 對于拮抗酵母菌在土壤條 件下的抑菌效果 拮抗因子 尚需進行代謝產(chǎn)物 的分離檢測 以及相應(yīng)的盆栽和大田試驗 參 考 文 獻(xiàn) 杜 欣 誼 植 物 病 害 生 防 微 生 物 的 研 究 進 展 現(xiàn) 代 化 農(nóng) 業(yè) 王 倡 憲 王 艷 張 志 不 同 磷 濃 度 條 件 下 地 表 球 囊 霉 對 黃 瓜 枯 萎 病 抗 性 和 抗 氧 化 酶 活 性 的 影 響 江 蘇 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 馬 曉 鳳 黃 瓜 枯 萎 病 綜 合 防 控 西 北 園 藝 綜 合 劉 淼 四 霉 素 水 劑 防 治 黃 瓜 枯 萎 病 田 間 藥 效 試 驗 報 告 農(nóng) 民 致 富 之 友 王 芳 王 曉 倩 王 瑩 等 種 殺 菌 劑 對 黃 瓜 尖 孢 鐮 刀 菌 的 毒 力 測 定 試 驗 中 國 農(nóng) 學(xué) 通 報 朱 宇 航 黃 思 洋 陳 華 保 等 煙 草 赤 星 病 防 治 藥 劑 的 篩 選 煙 草 科 技 張 乃 芹 郝 明 慧 賈 海 慧 等 多 功 能 菌 劑 防 治 黃 瓜 枯 萎 病 及 對 黃 瓜 產(chǎn) 量 影 響 的 研 究 現(xiàn) 代 園 藝 楊 侃 侃 劉 曉 虹 陳 宸 等 黃 瓜 枯 萎 病 研 究 進 展 湖 南 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 張 林 堯 孟 祥 龍 王 午 可 等 生 物 菌 劑 對 蘋 果 枝 干 輪 紋 病 的 田 間 防 效 研 究 河 南 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 王 麗 麗 朱 詩 君 金 樹 權(quán) 等 黃 瓜 枯 萎 病 拮 抗 菌 株 的 篩 選 及 其 生 物 防 效 浙 江 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 施 河 麗 孫 立 廣 譚 軍 等 生 物 有 機 肥 對 煙 草 青 枯 病 的 防 效 及 對 土 壤 細(xì) 菌 群 落 的 影 響 年 月第 卷第 期 中 國 煙 草 科 學(xué) 宋 金 宇 劉 程 惠 胡 文 忠 等 拮 抗 酵 母 菌 對 果 蔬 病 害 防 治 的 研 究 進 展 保 鮮 與 加 工 裘 紀(jì) 瑩 王 未 名 陳 建 愛 等 拮 抗 菌 在 果 蔬 保 鮮 中 的 應(yīng) 用 研 究 進 展 食 品 工 業(yè) 科 技 郭 晉 云 胡 曉 峰 李 勇 等 黃 瓜 枯 萎 病 對 黃 瓜 光 合 和 水 分 生 理 特 性 的 影 響 南 京 農(nóng) 業(yè) 大 學(xué) 學(xué) 報 王 敏 土 傳 黃 瓜 枯 萎 病 致 病 生 理 機 制 及 其 與 氮 素 營 養(yǎng) 關(guān) 系 研 究 南 京 南 京 農(nóng) 業(yè) 大 學(xué) 魏 滟 潔 田 葉 韓 王 炎 峰 等 球 毛 殼 菌 與 枯 草 芽 孢 桿 菌 組 合 對 抗 黃 瓜 枯 萎 病 防 御 酶 活 性 的 影 響 山 東 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 祝 久 香 黃 瓜 枯 萎 病 拮 抗 細(xì) 菌 的 篩 選 發(fā) 酵 及 生 防 機 理 研 究 長 沙 中 南 林 業(yè) 科 技 大 學(xué) 唐 明 程 智 敏 向 金 友 等 烤 煙 赤 星 病 發(fā) 生 規(guī) 律 及 影 響 因 素 調(diào) 查 研 究 現(xiàn) 代 農(nóng) 業(yè) 科 技 楊 波 煙 草 赤 星 病 拮 抗 細(xì) 菌 篩 選 及 其 分 析 杭 州 浙 江 大 學(xué) 曾 琛 陳 慶 園 劉 洋 等 貴 州 省 興 義 市 煙 草 赤 星 病 發(fā) 生 情 況 調(diào) 查 河 南 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 宋 莉 莎 司 世 飛 龍 友 華 等 煙 草 赤 星 病 生 防 芽 孢 桿 菌 的 篩 選 鑒 定 及 其 生 長 條 件 研 究 河 南 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 司 世 飛 煙 草 赤 星 病 生 防 菌 篩 選 及 發(fā) 酵 條 件 優(yōu) 化 貴 陽 貴 州 大 學(xué) 司 世 飛 宋 莉 莎 任 靜 等 一 株 抗 煙 草 赤 星 病 解 淀 粉 芽 孢 桿 菌 的 篩 選 及 鑒 定 河 北 大 學(xué) 學(xué) 報 自 然 科 學(xué) 版 李 錫 宏 余 君 陳 守 文 等 防 治 煙 草 赤 星 病 的 生 防 菌 劑 田 間 對 比 試 驗 湖 北 植 保 劉 普 方 靜 凡 程 運 江 等 生 防 酵 母 菌 防 治 果 品 采 后 病 害 機 理 的 研 究 進 展 華 中 農(nóng) 業(yè) 大 學(xué) 學(xué) 報 高 云 慨 張 榮 意 鐘 利 文 等 株 新 分 離 拮 抗 酵 母 菌 株 對 芒 果 炭 疽 病 生 防 效 果 及 其 分 類 鑒 定 熱 帶 生 物 學(xué) 報 劉 椰 拮 抗 酵 母 新 種 鑒 定 及 其 對 柑 橘 果 實 采 后 主 要 病 害 的 防 治 機 理 研 究 重 慶 西 南 大 學(xué) 彭 景 賢 酵 母 菌 對 柑 橘 采 后 病 害 的 生 物 防 治 及 防 治 機 理 的 研 究 福 州 福 建 農(nóng) 林 大 學(xué) 關(guān) 鑫 三 株 生 防 酵 母 菌 對 番 茄 灰 霉 病 生 物 防 治 的 比 較 研 究 哈 爾 濱 東 北 農(nóng) 業(yè) 大 學(xué) 周 海 蓮 葡 萄 有 孢 漢 遜 酵 母 對 灰 霉 病 抑 制 機 理 的 探 討 南 京 南 京 農(nóng) 業(yè) 大 學(xué) 張 紅 印 羅 倫 隱 球 酵 母 對 水 果 采 后 病 害 的 生 物 防 治 及 其 防 治 機 理 研 究 杭 州 浙 江 大 學(xué) 溫 新 宇 拮 抗 酵 母 菌 的 篩 選 鑒 定 及 其 制 劑 對 枇 杷 貯 藏 保 鮮 的 影 響 鎮(zhèn) 江 江 蘇 大 學(xué) 張 俊 杰 尚 益 民 田 寅 等 株 黃 瓜 枯 萎 病 菌 拮 抗 酵 母 的 分 離 鑒 定 及 其 拮 抗 作 用 初 探 河 南 農(nóng) 業(yè) 大 學(xué) 學(xué) 報 楊 云 甜 菜 根 腐 病 拮 抗 菌 的 篩 選 鑒 定 與 抑 病 效 果 研 究 哈 爾 濱 黑 龍 江 大 學(xué) 薛 軍 俠 徐 艷 文 楊 瑩 等 培 養(yǎng) 基 在 釀 酒 酵 母 篩 選 中 的 應(yīng) 用 中 國 釀 造 王 紅 蘋 果 和 梨 果 表 面 酵 母 多 樣 性 及 其 食 用 安 全 性 研 究 濟 南 齊 魯 工 業(yè) 大 學(xué) 張 俊 杰 尚 益 民 陳 錦 永 等 河 南 不 同 地 區(qū) 赤 霞 珠 葡 萄 表 皮 酵 母 菌 多 樣 性 研 究 中 國 釀 造 張 俊 杰 尚 益 民 程 大 偉 等 河 南 安 陽 赤 霞 珠 葡 萄 果 表 酵 母 菌 的 分 離 與 鑒 定 輕 工 學(xué) 報 文 雨 婷 張媱 李 楊 等 棉 花 黃 萎 病 菌 拮 抗 酵 母 菌 篩 選 及 鑒 定 河 南 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué)