蝴蝶蘭PhNAC1基因序列分析及對低溫脅迫的響應.pdf
NAC轉(zhuǎn)錄因子參與植物生長發(fā)育的諸多過程,在植物逆境應答中發(fā)揮重要的作用。本研究以蝴蝶蘭的葉片為材料,運用RT-PCR及RACE技術克隆得到一條蝴蝶蘭的NAC轉(zhuǎn)錄因子基因完整的cDNA序列,命名為PhNAC1(GenBank登錄號MF797909)。PhNAC1基因cDNA序列全長1442 bp,ORF全長942 bp,編碼313個氨基酸。預測其蛋白分子量35.22 kDa,等電點6.95,屬于穩(wěn)定親水性蛋白。二級結構預測表明,無規(guī)則卷曲和延伸鏈為該蛋白的主要結構元件,與三級結構預測結果基本相符。PhNAC1編碼的氨基酸序列與其他已登錄的蘭科植物NAC蛋白進行同源序列比對,表明與小蘭嶼蝴蝶蘭(XP0205763790)親緣關系較近,序列一致性達97%,其次為鐵皮石斛(XP020695081),一致性為84%。實時熒光定量PCR分析表明,PhNAC1基因在營養(yǎng)器官和生殖器官中均有表達,在蕊柱中的表達量最高。在11/6低溫條件下,PhNAC1基因的轉(zhuǎn)錄表達水平在前5天隨著處理時間逐漸升高,第7天下降;在4低溫條件下,PhNAC1基因的表達水平在處理0.5 h表達量有所下降,1 h后表達量上升至對照水平,之后無明顯變化,在處理24 h至48 h又逐漸升高,推測PhNAC1基因參與蝴蝶蘭低溫脅迫響應。實驗結果為研究NAC轉(zhuǎn)錄因子在蝴蝶蘭低溫脅迫響應中的分子調(diào)控機理提供理論基礎。