GB 中華人民共和國農(nóng)業(yè)部 發(fā)布-實施施-發(fā)布植物新品種特異性、一致性和穩(wěn)定性測試指南 黃瓜Guidelines for the conduct of tests for distinctness, uniformity and stabilityCucumber(Cucumis sativus L.)（UPOV：TG/61/7，Guidelines for the conduct of tests for distinctness, uniformity and stabilityCucumber, gherkin，NEQ）NY/T 201中華人民共和國農(nóng)業(yè)行業(yè)標準ICS 65.020.20B 051NY/T 201目 次前 言II1 范圍12 規(guī)范性引用文件13 術(shù)語和定義14 符號15 繁殖材料的要求26 測試方法27 特異性、一致性和穩(wěn)定性結(jié)果的判定28 性狀表39 分組性狀310 技術(shù)問卷3附錄A（規(guī)范性附錄）黃瓜性狀表4附錄B（規(guī)范性附錄）黃瓜性狀表的解釋9附錄C（規(guī)范性附錄）黃瓜技術(shù)問卷格式17I前 言本標準依據(jù)GB/T 1.12009給出的規(guī)則起草。本標準使用重新起草法修改采用了國際植物新品種保護聯(lián)盟(UPOV)指南“TG/61/7， Guidelines for the conduct of tests for distinctness, uniformity and stabilityCucumber,gherkin”。本標準對應(yīng)于UPOV指南TG/61/7，本標準與TG/61/7的一致性程度為非等效。本標準與UPOV指南TG/61/7相比存在技術(shù)性差異，主要差異如下：增加了“子葉：形狀”、“子葉：大小”、“子葉：綠色程度”、“下胚軸：長度”、“植株：生長勢”、“主蔓：節(jié)間長度”、“主蔓：分枝性”、“主蔓：第一雌花節(jié)位”、“主蔓：雌花節(jié)率”、“葉片：形狀”、“子房：表面刺毛”、“收獲始期”、“果實：形狀”、“果實：瓜把長度/縱徑之比”、“果實：表面光澤度”、“果實：瘤數(shù)量”、“果實：果肉顏色”、“果實：苦味”、“果實：表面網(wǎng)紋（生理成熟期）”共19個性狀；在選測性狀表中增加了“抗性：枯萎病”、“抗性：細菌性角斑病”、“抗性：西瓜花葉病毒”共3個性狀；刪除了“植株：1節(jié)15節(jié)間總長度”、“葉片：姿態(tài)”、“葉片：葉尖長度/葉長之比”、“葉片：表面泡狀突起”、“葉片：邊緣波狀程度”、“第一雌花開放時間”、“果實：橫斷面形狀”、“白色果實品種除外的品種：果實：表面顏色深淺”、“果實：表面皺折的程度”、“果實：表面斑點所占區(qū)域的長度”、“果實：表面斑點的密度”、“果實：花梗長度”、“抗性：黑星病”、“抗性：CMV”、“抗性：褐斑病”、“抗性：黃瓜葉脈黃化病毒”、“抗性：南瓜花葉病毒”共17個性狀；調(diào)整了“植株：性型”、“莖節(jié)：最大單節(jié)雌花數(shù)”、“葉片：綠色程度”、“葉片：邊緣缺刻深度”、“果實：縱徑/橫徑之比”、“果實：刺密度”、“果實：刺顏色”共7個性狀的表達狀態(tài)。本標準由農(nóng)業(yè)部科技教育司提出。本標準由全國植物新品種測試標準化技術(shù)委員會(SAC/TC 277)歸口。本標準起草單位：天津科潤農(nóng)業(yè)科技股份有限公司黃瓜研究所、農(nóng)業(yè)部植物新品種測試（上海）分中心、農(nóng)業(yè)部科技發(fā)展中心、農(nóng)業(yè)部植物新品種測試（北京）分中心。本標準主要起草人：李加旺、陳海榮、張文珠、楊坤、張圣平、黃志城、哈玉潔、李淑菊、王疆、堵苑苑、呂波、唐浩。植物新品種特異性、一致性和穩(wěn)定性測試指南黃 瓜1 范圍本標準規(guī)定了黃瓜（Cucumis sativus L.）新品種特異性、一致性和穩(wěn)定性測試的技術(shù)要求和結(jié)果判定的一般原則。本標準適用于黃瓜新品種特異性、一致性和穩(wěn)定性測試和結(jié)果判定。2 規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T 19557.1 植物新品種特異性、一致性和穩(wěn)定性測試指南 總則3 術(shù)語和定義GB/T 19557.1 界定的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1 群體測量 single measurement of a group of plants or parts of plants對一批植株或植株的某器官或部位進行測量，獲得一個群體記錄。3.2 個體測量 measurement of a number of individual plants or parts of plants對一批植株或植株的某器官或部位進行逐個測量，獲得一組個體記錄。3.3 群體目測 visual assessment by a single observation of a group of plants or parts of plants對一批植株或植株的某器官或部位進行目測，獲得一個群體記錄。3.4 個體目測 visual assessment by observation of individual plants or parts of plants對一批植株或植株的某器官或部位進行逐個目測，獲得一組個體記錄。4 符號下列符號適用于本文件：MG：群體測量MS：個體測量VG：群體目測VS：個體目測QL：質(zhì)量性狀QN：數(shù)量性狀PQ：假質(zhì)量性狀*：標注性狀為UPOV 用于統(tǒng)一品種描述所需要的重要性狀，除非受環(huán)境條件限制性狀的表達狀態(tài)無法測試，所有UPOV成員都應(yīng)使用這些性狀。+：標注內(nèi)容在附錄B中進行了詳細解釋。_：本文件中下劃線是特別提示測試性狀的適用范圍。5 繁殖材料的要求5.1 繁殖材料以種子形式提供。5.2 提交的種子的數(shù)量至少為125g。5.3 提交的種子應(yīng)外觀健康，活力高，無病蟲侵害。種子的具體質(zhì)量要求如下： 凈度99%，發(fā)芽率85%，含水量7.5%。5.4 提交的種子一般不進行任何影響品種性狀正常表達的處理（如種子包衣處理）。如果已處理，應(yīng)提供處理的詳細說明。5.5 提交的種子應(yīng)符合中國植物檢疫的有關(guān)規(guī)定。6 測試方法6.1 測試周期測試周期至少為2個獨立的生長周期。6.2 測試地點測試通常在一個地點進行。如果某些性狀在該地點不能充分表達，可在其他符合條件的地點對其進行觀測。6.3 田間試驗6.3.1試驗設(shè)計申請品種和近似品種相鄰種植。采用育苗移栽，適齡定植。保護地栽培每個小區(qū)不少于20株，露地栽培每個小區(qū)不少于30株，適宜行株距，設(shè)2次重復(fù)。6.3.2 田間管理可按當(dāng)?shù)卮筇锷a(chǎn)管理方式進行。6.4 性狀觀測6.4.1觀測時期性狀觀測應(yīng)按照表A.1和表A.2列出的生育階段進行。生育階段描述見表B.1。6.4.2觀測方法性狀觀測應(yīng)按照表A.1和表A.2規(guī)定的觀測方法(VG、VS、MG、MS)進行。部分性狀觀測方法見B.2。6.4.3觀測數(shù)量除非另有說明，個體觀測性狀(VS、MS)植株取樣數(shù)量不少20個。在觀測植株的器官或部位時，每個植株取樣數(shù)量應(yīng)為1個。群體觀測性狀(VG、MG)應(yīng)觀測整個小區(qū)或規(guī)定大小的混合樣本。6.5 附加測試必要時，可選用表A.2中的性狀或本文件未列出的性狀進行附加測試。7 特異性、一致性和穩(wěn)定性結(jié)果的判定 7.1 總體原則特異性、一致性和穩(wěn)定性的判定按照GB/T 19557.1確定的原則進行。7.2 特異性的判定申請品種應(yīng)明顯區(qū)別于所有已知品種。在測試中，當(dāng)申請品種至少在一個性狀上與近似品種具有明顯且可重現(xiàn)的差異時，即可判定申請品種具備特異性。7.3 一致性的判定對于測試品種，一致性判定時，采用 1的群體標準和至少 95%的接受概率。 當(dāng)樣本大小為 20 株35株時，最多可以允許有 1個異型株。當(dāng)樣本大小為 36株60株時，最多可以允許有 2個異型株。7.4 穩(wěn)定性的判定如果一個品種具備一致性，則可認為該品種具備穩(wěn)定性。一般不對穩(wěn)定性進行測試。必要時，常規(guī)品種可以種植該品種的下一代種子，與以前提供的繁殖材料相比，若性狀表達無明顯變化，則可判定該品種具備穩(wěn)定性。8 性狀表根據(jù)測試需要，性狀分為基本性狀和選測性狀?；拘誀钍菧y試中必須使用的性狀，基本性狀見表A.1，選測性狀見表A.2。8.1 概述性狀表列出了性狀名稱、表達類型、表達狀態(tài)及相應(yīng)的代碼和標準品種、觀測時期和方法等內(nèi)容。8.2 表達類型根據(jù)性狀表達方式，性狀分為質(zhì)量性狀、假質(zhì)量性狀和數(shù)量性狀3種類型。8.3 表達狀態(tài)和相應(yīng)代碼8.3.1每個性狀劃分為一系列表達狀態(tài)，以便于定義性狀和規(guī)范描述；每個表達狀態(tài)賦予一個相應(yīng)的數(shù)字代碼，以便于數(shù)據(jù)記錄、處理和品種描述的建立與交流。8.3.2 對于質(zhì)量性狀和假質(zhì)量性狀，所有的表達狀態(tài)都應(yīng)當(dāng)在測試指南中列出；對于數(shù)量性狀，為了縮小性狀表的長度，偶數(shù)代碼的表達狀態(tài)可以不列出，偶數(shù)代碼的表達狀態(tài)可以前一個表達狀態(tài)到后一個表達狀態(tài)的形式來描述。8.4 標準品種性狀表中列出了部分性狀有關(guān)表達狀態(tài)可參考的標準品種，以助于確定相關(guān)性狀的不同表達狀態(tài)和校正環(huán)境因素引起的差異。9 分組性狀本文件中，品種分組性狀如下：a) *子葉：苦味(表A.1中性狀4)；b) *植株：性型(表A.1中性狀8)；c) *子房：表面刺毛顏色(表A.1中性狀20)；d) *果實：縱徑(表A.1中性狀23)； e) *果實：果皮顏色（商品收獲期）(表A.1中性狀30)；f) *單性結(jié)實(表A.1中性狀48)。10 技術(shù)問卷申請人應(yīng)按附錄C給出的格式填寫黃瓜技術(shù)問卷。附 錄 A（規(guī)范性附錄）黃瓜性狀表A.1黃瓜基本性狀見表A.1。表A.1黃瓜基本性狀表序號性 狀觀測時期和方法表達狀態(tài)標準品種代碼1子葉：形狀PQ13VG卵圓形京研迷你1號1橢圓形津研4號2長橢圓形32子葉：大小QN13VG小3中津研4號5大京研迷你1號73子葉：綠色程度QN13VG淺京研迷你1號3中長春密刺5深津雜4號74*子葉：苦味 QL (+)13VG無京研迷你1號1有中農(nóng)8號95下胚軸：長度QN13MS短長春密刺3中津研4號5長76*植株：生長類型QL(+)41VG有限1無限中農(nóng)8號27植株：生長勢QN29VG弱北京小刺3中津研4號5強津雜2號78*植株：性型QL(+)30VG普通型津春4號1強雌型2雌性型京研迷你1號3雌全株型4雄全株型5雌雄全株型6完全花型7雄性型89主蔓：節(jié)間長度QN(+)29MS極短1短長春密刺3中津研4號5長7極長910主蔓：分枝性QN29VG無或極弱1弱津研4號3中津雜2號5強7表A.1（續(xù)）序號性 狀觀測時期和方法表達狀態(tài)標準品種代碼11主蔓：第一雌花節(jié)位QN 30MS低中農(nóng)5號3中津研4號5高唐秋1號712主蔓：雌花節(jié)率QN(+)29MS低唐秋1號3中津研4號5高中農(nóng)5號713莖節(jié)：最大單節(jié)雌花數(shù)QN 29VG1個津研4號12個3個津優(yōu)5號23個以上314葉片：綠色程度 QN 30VG淺3中津研4號5深津春4號715葉片：形狀PQ(+)29VG近三角形1掌狀五角2心形五角3心形津春4號4近圓形516葉片：先端形狀 PQ(+)29VG銳角1直角2鈍角長春密刺3近圓形417葉片：邊緣缺刻深度QN 29VG淺3中津春4號5深718葉片：長度QN(+)29MS短津研4號3中中農(nóng)8號5長津優(yōu)2號719子房：表面刺毛PQ30VG無1僅有軟毛京研迷你1號2疏刺津美1號3密刺津春4號420*子房：表面刺毛顏色QL 31VG白色中農(nóng)8號1黑色221收獲始期QN31MG早中農(nóng)5號3中津研4號5晚722果實：形狀PQ(+)31VG球形1卵圓形2倒卵圓形3紡錘形4橢圓形5圓筒形早青2號6棒狀津春4號7線形823*果實：縱徑QN 31MS極小京研迷你1號1小早青2號3中北京小刺5大津春4號7極大中農(nóng)8號9表A.1（續(xù)）序號性 狀觀測時期和方法表達狀態(tài)標準品種代碼24果實：橫徑QN 31MS小京研迷你1號3中津春4號5大早青2號725*果實：縱徑/橫徑比QN 31MS小3中早青2號5大中農(nóng)8號726果實：頂端形狀PQ(+)31VG銳尖1鈍尖2圓3平截427*果實：瓜把形狀PQ (+)31VG瓶頸形津優(yōu)5號1溜肩形2鈍圓形早青2號328僅適用于瓶頸形的品種：果實：瓜把長度QN 31MS無或極短1短早青2號3中津研4號5長7極長929果實：瓜把長度/縱徑之比31MS極小1小3中5大7極大930*果實：果皮顏色（商品收獲期）PQ 31VG白色1黃白色2白綠色京研秋瓜1號3黃綠色4淺綠色唐秋1號5中等綠色6深綠色津春4號7墨綠色831果實：表面蠟粉QN (+)31VG無或極弱1弱3中5強7極強932果實：表面光澤度QN31VG無或弱1中2強333果實：表面黃線長度PQ31VG無或極短中農(nóng)8號1短3中津雜2號5長7極長934*果實：表面斑塊QL 31VG無1有935果實：表面斑塊分布PQ(+)31VG呈條帶分布1主要呈條帶分布2整個果實分布3表A.1（續(xù)）序號性 狀觀測時期和方法表達狀態(tài)標準品種代碼36*果實：棱QN(+)31VG無或極弱早青2號1弱2中津優(yōu)5號3強437*果實：縫合線QL(+)31VG無1有938*果實：表面皺折QL(+)31VG無1有939*果實：刺毛類型PQ(+)31VG僅有毛1毛和刺均有2僅有刺340果實：刺密度QN 31VG無或極疏京研迷你1號1疏津美1號3中津研4號5密津春4號741果實：刺顏色PQ 31VG白色津春4號1黃褐色中農(nóng)11012黑色京研秋瓜1號342*果實：瘤QN31VG無1有943果實：瘤數(shù)量31VG少3中5多744果實：瘤大小QN 31VG極小1小津研4號3中津春2號5大津春3號7極大945果實：果肉顏色PQ31VG白色1淺綠色津研4號2綠色3橙色446果實：心腔相對于果實橫徑大小QN31VG小早青2號3中津春4號5大747果實：苦味QN 31VG無或極弱1弱2強348*單性結(jié)實QL(+)31VG無1有中農(nóng)5號949果實：表面顏色（生理成熟期）PQ 41VG白色1黃色長春密刺2綠色3橙色4褐色京研秋瓜1號5表A.1（續(xù)）序號性 狀觀測時期和方法表達狀態(tài)標準品種代碼50果實：表面網(wǎng)紋（生理成熟期）PQ41VG無津美1號1有京研秋瓜1號9A.2黃瓜選測性狀見表A.2。表A.2黃瓜選測性狀表序號性狀類別觀測時期和方法表達狀態(tài)標準品種代碼51抗性：霜霉病QN(+)13VG高感1感3中抗津優(yōu)3號5抗津研4號7高抗津春4號952抗性：白粉病QN(+)13VG高感1感3中抗津優(yōu)3號5抗津研4號7高抗津春4號953抗性：枯萎病QN(+)13VG高感1感津研4號3中抗5抗津優(yōu)3號7高抗津雜4號954抗性：細菌性角斑病QN(+)13VG高感1感津雜2號3中抗5抗中農(nóng)13號7高抗955抗性：西瓜花葉病毒病QN(+)13VG高感1感3中抗5抗7高抗津春4號9附 錄 B(規(guī)范性附錄)黃瓜性狀表的解釋B.1 黃瓜生育階段見表B.1。表B.1 黃瓜生育階段表生育階段代碼描述131葉1心2925片真葉出現(xiàn)30幼瓜31商品瓜41種瓜生理成熟期B.2涉及單個性狀的解釋性狀分級和圖中代碼見表A.1。性狀4 子葉：苦味，子葉的苦味應(yīng)在第1片真葉展開前通過品嘗獲得。性狀6 植株：生長類型，有限生長是指該類型黃瓜在生長到一定時期后以自封頂形式停止頂端生長；無限生長是指黃瓜在條件適宜時可持續(xù)生長。性狀8 植株：性型，植株生長發(fā)育過程中雄花、雌花及兩性花的表現(xiàn)特性。普通型：也稱雌雄同株型。雌花和雄花節(jié)位在同一植株上交錯生長，雌花的著生密度因品種、環(huán)境的不同而異。另外上部的節(jié)位雖有隨著生長出現(xiàn)雌花節(jié)變密的傾向，但在一般栽培條件下很難產(chǎn)生連續(xù)雌花節(jié)。強雌型：先發(fā)生雄花節(jié)后，雌花節(jié)與雄花節(jié)混生，再往后轉(zhuǎn)變?yōu)檫B續(xù)雌花節(jié)。雌性型：全株均著生雌花的類型。雌全株型：完全花（兩性花）與雌花共生在一個植株上。完全花是同一朵花中兼有雌、雄兩種器官。雄全株型：完全花（兩性花）與雄花共生在一個植株上。雌雄全株型：完全花（兩性花）、雌花與雄花共生在一個植株上。完全花型：全株均著生完全花的類型。雄性型：全株均著生雄花的類型。性狀9 主蔓：節(jié)間長度，主蔓第10節(jié)15節(jié)間平均長度。性狀12 主蔓：雌花節(jié)率，主蔓上第1片真葉到第25片真葉之間雌花節(jié)數(shù)與總節(jié)數(shù)的比率。性狀15 葉片：形狀，見圖B.1。近三角形1掌狀五角2心形五角3心形4近圓形5圖B.1 葉片：形狀性狀16 葉片：先端形狀，見圖B.2、銳角1直角2鈍角3近圓形4圖B.2 葉片：先端形狀性狀18 葉片：長度，見圖B.3。圖B.3 葉片：長度性狀22 果實：形狀，見圖B.4。球形1卵圓形2倒卵形3紡錘形4橢圓形5圓筒形6棒狀7線形8圖B.4 果實：形狀性狀26 果實：頂部形狀，見圖B.5。銳尖 1 鈍尖2 圓 3平截4圖B.5 果實：頂部形狀性狀27 果實：瓜把形狀，見圖B.6。瓶頸形1溜肩形2鈍圓形3圖B.6 果實：瓜把形狀性狀31 果實：表面蠟粉，蠟粉是指果實表面可以擦除的白色的或灰色的蠟質(zhì)物質(zhì)。性狀35 果實：表面斑塊分布，見圖B.7。呈條帶分布1主要呈條帶分布2整個果實分布3圖B.7 果實：表面斑塊分布性狀36 果實：棱，見圖B.8。性狀37 果實：縫合線，見圖B.8。果實：棱果實：縫合線圖B.8 果實：棱、果實：縫合線性狀38 果實：表面皺折，見圖B.9。圖B.9 果實：表面皺折性狀39 果實：刺毛類型，見圖B.10。圖B.10 果實：刺毛類型性狀48 單性結(jié)實，不經(jīng)受精作用而形成正常果實的能力。性狀51 抗性：霜霉病栽培方法：黃瓜種子用0.1升汞消毒10min，清水沖洗干凈后放于28溫箱中催芽，出芽后播種于滅菌的蛭石營養(yǎng)缽中，于出苗后澆1次營養(yǎng)液，第1真葉展開后接種。 觀測時期：接種后5d7d調(diào)查病情指數(shù)。 觀測部位：葉片。 苗期人工接種抗病性鑒定： 接種體制備 采集新鮮的自然感病病葉或人工接種發(fā)病病葉，用自來水沖洗掉葉背面霉層，放入塑料袋中于室溫下保濕24h左右，待長出新的霉層后，用毛筆蘸水將霉層輕輕刷入水中，然后用紗布過濾，稀釋成濃度為4 000孢子囊/mL孢子囊懸浮液待用。 接種方法及接種后環(huán)境條件 接種采用噴霧接種法，用手持噴霧器將孢子囊懸浮液均勻噴于葉面，以霧滴布滿葉面但不流失為度，一般每株需孢子囊懸浮液約3 mL5mL。接種溫度為1620，接種后保濕24h左右，以后夜間適當(dāng)保濕。接種后5d7d調(diào)查病情指數(shù)。 病情分級標準 先將病斑分為抗病型病斑及感病型病斑兩種，然后再做分級。 0級：無病癥；1級：抗病型病斑占葉面積的 1/3 以下； 2級：抗病型病斑占葉面積的 1/31/2，或感病型病斑占葉面積的 1/3 以下； 3級：抗病型病斑占葉面積的 1/22/3，或感病型病斑占葉面積的 1/31/2； 4級：抗病型病斑占葉面積的 2/3 以上，或感病型病斑占葉面積的 1/22/3； 5級：感病型病斑占葉面積的 2/3 以上。 病情指數(shù)按式（B.1）計算：（sini）DI 1005N（B.1）式中：DI病情指數(shù)，單位為百分分率（%）；si 發(fā)病級別(i=0，1，2，3，4，5)；ni 相應(yīng)病級級別的株數(shù)；i 病情分級的各個級別；N 調(diào)查總株數(shù)。結(jié)合病情指數(shù)和標準品種進行分級。 性狀52 抗性：白粉病栽培方法：黃瓜種子用0.1升汞消毒10min，清水沖洗干凈后放于28溫箱中催芽，出芽后播種于滅菌的蛭石營養(yǎng)缽中，于出苗后澆1次營養(yǎng)液，待第1真葉展開后接種。 觀測時期：于接種后7d左右調(diào)查病情指數(shù)。 觀測部位：葉片。 苗期人工接種抗病性鑒定技術(shù)： 接種體制備 取田間自然感病病葉，吹去老孢子，于散光條件下保濕24h，待新孢子長出后，用毛筆刷入水中，并在水中加少量吐溫做分散劑，血球計數(shù)板計數(shù)后，配成濃度為20 000孢子/mL的孢子懸浮液待用。 接種方法及接種后環(huán)境條件 接種采用噴霧接種法。用手持噴霧器將孢子懸浮液均勻噴于葉面，以霧滴布滿葉面但不流失為度，一般每株需孢子懸浮液約3 mL5mL。接種溫度1525， 接種適當(dāng)保濕。于接種后 7天左右調(diào)查病情指數(shù)。 病害分級標準 0級：無病癥； 1級：少數(shù)抗病型病斑； 2級：多數(shù)抗病型病斑或感病型病斑占葉面積的 1/3 以下； 3級：感病型病斑占葉面積的 1/31/2； 4級：感病型病斑占葉面積的 1/22/3； 5級：感病型病斑面積超過葉面積的 2/3，葉片黃化嚴重，或干枯。 病情指數(shù)按式（B.2）計算。（sini）DI 1005N（B.2）式中：DI病情指數(shù)，單位為百分分率（%）；si 發(fā)病級別(i=0，1，2，3，4，5)；ni 相應(yīng)病級級別的株數(shù)；i 病情分級的各個級別；N 調(diào)查總株數(shù)。結(jié)合病情指數(shù)和標準品種進行分級。 性狀53 抗性：枯萎病栽培方法：黃瓜種子用 0.1升汞消毒10min，清水沖洗干凈后放于28溫箱中催芽，待胚根長至 0.5cm 左右時，選胚根長度基本一致的種子30粒待用。 觀測時期：接種后7d10 d調(diào)查病情指數(shù)。 觀測部位：下胚軸、子葉。 苗期人工接種抗病性鑒定技術(shù)： 接種體制備 用接種針挑取保存在PDA斜面上的黃瓜枯萎病菌，放入由馬鈴薯 （200g/1 000 mL）及乳糖（20g/1 000mL）配制的液體培養(yǎng)基中，然后于25條件下振蕩培養(yǎng)5d7d。用雙層紗布濾去菌絲后，于4 500 r/min下離心15min，棄去上清液，將剩下的孢子用無菌水稀釋后，用血球計數(shù)板計算孢子濃度，并稀釋至106孢子/mL待用。 接種方法 將各試材種子30粒分別放入紗網(wǎng)袋內(nèi)，然后浸泡于孢子懸浮液中（或?qū)⒎N子放入培養(yǎng)皿中，加入30mL孢子懸浮液），并振蕩使種子均勻接觸孢子懸浮液，半小時后取出，播種于滅菌的蛭石營養(yǎng)缽中。接種后放入25左右條件下，于接種后7d10d 調(diào)查病情指數(shù)。 病害分級標準 0級：無病癥； 1級：幼苗無可見癥狀出現(xiàn)但略有黃化或生長不正常； 2級：在幼苗下胚軸、子葉邊緣等出現(xiàn)可見病斑，或子葉局部黃化； 3級：下胚軸或葉腋處病斑明顯致幼苗畸形或一片子葉黃化； 4級：幼苗僵化、兩片子葉暗綠無光澤，或一片子葉枯萎，或兩片子葉黃化，或幼苗嚴重畸形； 5級：整株枯萎或爛籽。 病情指數(shù)按式（B.3）計算：（sini）DI 1005N（B.3）式中：DI病情指數(shù)，單位為百分分率（%）；si 發(fā)病級別(0，1，2，3，4，5)；ni 相應(yīng)病級級別的株數(shù)；i 病情分級的各個級別；N 調(diào)查總株數(shù)。結(jié)合病情指數(shù)和標準品種進行分級。 性狀54 抗性：細菌性角斑病栽培方法：黃瓜種子用0.1升汞消毒10分鐘，清水沖洗干凈后放于28溫箱中催芽，出芽后播種于滅菌的蛭石營養(yǎng)缽中，于出苗后澆1次營養(yǎng)液，待第1真葉展開后接種黃瓜細菌性角斑病病菌。 觀測時期：接種后5d7d查病情指數(shù)。 觀測部位：葉片。 苗期人工接種抗病性鑒定技術(shù)： 接種體制備 保存于PDA斜面或無菌水中的病菌，用接種針在PDA平板上畫線，于28溫箱中培養(yǎng)48h。然后加入無菌水使病菌懸浮，將懸浮液倒入PDA平板上，涂勻，于28溫箱中培養(yǎng)48h后加無菌水洗下病菌制成懸浮液。于450nm波長下測吸光值。 然后配成濃度為3108菌體/mL的懸浮液。 接種方法及接種后環(huán)境條件 接種采用噴霧接種法，用手持噴霧器將細菌懸浮液均勻噴于葉正、背面，以霧滴布滿葉面但不流失為度，一般每株需懸浮液約5mL左右。接種溫度為25左右，接種后保濕48h，以后夜間適當(dāng)保濕。于接種后5d7d調(diào)查病情指數(shù)。 病情分級 黃瓜細菌性角斑病在抗性不同品種上表現(xiàn)有所不同，抗病品種上病斑小，菌膿少，為抗病型病斑；感病品種上病斑大，菌膿多，為感病型病斑。 病害分級標準 0級：無病癥； 1級：有少數(shù)抗病型病斑。 2級：抗病型病斑占葉面積的 1/3 以下或少數(shù)感病型病斑； 3級：抗病型病斑占葉面積的 1/32/3 或感病型病斑占葉面積 1/3 以下； 4級：抗病型病斑占葉面積的 2/3 以上或感病型病斑占葉面積 1/32/3； 5級：感病型病斑占葉面積的 2/3 以上。 病情指數(shù)按式（B.4）計算：（sini）DI 1005N（B.4）式中：DI病情指數(shù)，單位為百分分率（%）；si 發(fā)病級別（i=0，1，2，3，4，5）；ni 相應(yīng)病級級別的株數(shù)；i 病情分級的各個級別；N 調(diào)查總株數(shù)。結(jié)合病情指數(shù)和標準品種進行分級。 性狀55 抗性：西瓜花葉病毒栽培方法：黃瓜種子用0.1升汞消毒10min，清水沖洗干凈后放于28溫箱中催芽，出芽后播種于滅菌的蛭石營養(yǎng)缽中，于出苗后澆1次營養(yǎng)液，待第2真葉展開后接種西瓜花葉病毒。 觀測時期：接種后10d15d調(diào)查病情指數(shù)。 觀測部位：葉片。 苗期人工接種抗病性鑒定技術(shù)： 接種方法 采摘田間新鮮病葉，每克鮮病葉加5mL的0.1M磷酸緩沖液研磨，經(jīng)雙層紗布過濾去渣，加適量600目金剛砂，于2片真葉期采用人工磨檫接種，10d15d顯病時調(diào)查病情指數(shù)。 分級標準 0級：無癥狀，或接種葉僅有壞死斑； 1級：心葉明脈或輕花葉； 3級：心葉和中、上部葉呈中度花葉，但無畸形； 5級：中、上部重花葉和畸形并輕度矮化； 7級：全株重花葉，有皰斑或厥葉，明顯矮化或莖上有條斑； 9級：嚴重畸形，叢枝矮化莖上有重條斑或生長點壞死，禿頂至全株枯死。 病情指數(shù)按式（B.5）計算：（sini）DI 1009N（B.5）式中：DI病情指數(shù)，單位為百分分率（%）；si 發(fā)病級別(i=0，1，3，5，7，9)；ni 相應(yīng)病級級別的株數(shù)；i 病情分級的各個級別；N 調(diào)查總株數(shù)。結(jié)合病情指數(shù)和標準品種進行分級。附 錄 C(規(guī)范性附錄)黃瓜技術(shù)問卷格式 黃瓜技術(shù)問卷申請?zhí)枺?申請日： 由審批機關(guān)填寫(申請人或代理機構(gòu)簽章)C.1品種暫定名稱：_C.2 植物學(xué)分類拉丁名： Cucumis sativus L. 中文名： 黃瓜 C.3 品種類型 在相符的類型 中打。C.3.1 生態(tài)類型華北型 華南型 歐洲型 其它 C.3.2 繁殖類型常規(guī)種 單交種 其他 C.3.3 栽培類型溫室專用 春大棚專用 秋大棚專用 露地專用 兼用 C.4 申請品種的具有代表性彩色照片（品種照片粘貼處）(如果照片較多，可另附頁提供)C.5 其它有助于辨別申請品種的信息(如品種用途、品質(zhì)和抗性，請?zhí)峁┰敿氋Y料)C.6 品種種植或測試是否需要特殊條件在相符的 中打。是 否 (如果回答是，請?zhí)峁┰敿氋Y料)C.7 品種繁殖材料保存是否需要特殊條件 在相符的 中打。是 否 (如果回答是，請?zhí)峁┰敿氋Y料)C.8 申請品種需要指出的性狀在表C.1中相符的代碼后 中打，若有測量值，請?zhí)顚懺诒鞢.1中。表C.1申請品種需要指出的性狀序號性 狀表達狀態(tài)代 碼測量值1子葉：苦味（性狀4）無1 有9 2植株：生長類型（性狀6）有限1 無限2 3植株：性型（性狀8）普通型1 強雌型2 雌性型3 雌全株型4 雄全株型5 雌雄全株型6 完全花型7 雄性型8 4子房：表面刺毛顏色（性狀20）白色1 黑色2 5果實：形狀（性狀22）球形1 卵圓形2 倒卵圓形3 紡錘形4 橢圓形5 圓筒形6 棒狀7 線形8 表C.1（續(xù)）