GB 中華人民共和國農(nóng)業(yè)部 發(fā)布-實施施-發(fā)布植物新品種特異性、一致性和穩(wěn)定性測試指南 番茄Guidelines for the conduct of tests for distinctness, uniformity and stabilityTomato(Lycopersicon esculentum Mill)（UPOV：TG/44/10，Guidelines for the conduct of tests for distinctness, uniformity and stability Tomato，NEQ）NY/T 201中華人民共和國農(nóng)業(yè)行業(yè)標準ICS 65.020.20B 05NY/T 201目 次前言II1 范圍12 規(guī)范性引用文件13 術(shù)語和定義14 符號15 繁殖材料的要求26 測試方法27 特異性、一致性和穩(wěn)定性結(jié)果的判定28 性狀表39 分組性狀310 技術(shù)問卷3附錄A（規(guī)范性附錄）番茄性狀表4附錄B（規(guī)范性附錄）番茄性狀表的解釋11附錄C（規(guī)范性附錄）番茄技術(shù)問卷格式18I前 言本標準依據(jù)GB/T 1.12009給出的規(guī)則起草。本標準使用重新起草法修改采用了國際植物新品種保護聯(lián)盟(UPOV)指南“TG/44/10，Guidelines for the conduct of tests for distinctness,uniformity and stabilityTomato”。本標準對應(yīng)于UPOV指南TG/44/10，本標準與TG/44/10的一致性程度為非等效。本標準與UPOV指南TG/44/10相比存在技術(shù)性差異，主要差異如下：增加了“植株：主莖第一花序著生節(jié)位數(shù)”、“僅適用于有限生長型品種：植株：高度”、“植株：生長習(xí)性”、“果實：果梗洼處木栓化大小”、“果實：果皮顏色”、“胎座：膠狀物顏色”共6個性狀；刪除了“葉：光澤度”、“葉：泡狀程度”、“葉：泡大小”、“花：柱頭絨毛”共4個性狀；調(diào)整了“果實：大小”、“果實：縱徑/橫徑比率”、“果實：縱切面形狀”、“果實：棱溝”、“果梗洼大小”、“果實：橫切面果心的大小”、“果實：心室數(shù)”、“果實：綠肩”、“果實：綠肩覆蓋范圍”、“果實：綠肩綠色程度”、“果實：成熟前果面綠色程度”、“果實：成熟時顏色”、“果實：果肉顏色”、“成熟期”共14個性狀的表達狀態(tài)；將“僅適用于有限生長型品種：植株：主莖花序數(shù)”；“莖：上部1/3處花青甙顯色強度”；“果實：果梗洼凹陷程度”；“果實：貨架壽命”；“果實：干物質(zhì)含量”；“銀敏感度”；“抗性：南方根結(jié)線蟲病”；“抗性：黃萎病”；“抗性：枯萎病”；“抗性：葉霉病”；“抗性：番茄花葉病毒”；“抗性：晚疫病”共12個性狀調(diào)整到選測性狀表。本標準由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部科技教育司提出。本標準由全國植物新品種測試標準化技術(shù)委員會(SAC/TC 277)歸口。本指南起草單位：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所、上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院、農(nóng)業(yè)部科技發(fā)展中心。本指南主要起草人：杜永臣、陳海榮、楊坤、高建昌、黃志城、高振華、馮蘭香、呂波、王孝宣。II21植物新品種特異性、一致性和穩(wěn)定性測試指南番茄1 范圍本指南規(guī)定了番茄（Lycopersicon esculantum Mill）新品種特異性、一致性和穩(wěn)定性測試的技術(shù)要求和結(jié)果判定的一般原則。本指南適用于番茄新品種特異性、一致性和穩(wěn)定性測試和結(jié)果判定。2 規(guī)范性引用文件下列文件對于本標準的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T 19557.1 植物新品種特異性、一致性和穩(wěn)定性測試指南 總則3 術(shù)語和定義GB/T 19557.1 界定的以及下列術(shù)語和定義適用于本標準。3.1 群體測量 single measurement of a group of plants or parts of plants對一批植株或植株的某器官或部位進行測量，獲得一個群體記錄。3.2 個體測量 measurement of a number of individual plants or parts of plants對一批植株或植株的某器官或部位進行逐個測量，獲得一組個體記錄。3.3 群體目測 visual assessment by a single observation of a group of plants or parts of plants對一批植株或植株的某器官或部位進行目測，獲得一個群體記錄。3.4 個體目測 visual assessment by observation of individual plants or parts of plants對一批植株或植株的某器官或部位進行逐個目測，獲得一組個體記錄。4 符號下列符號適用于本文件：MG：群體測量。MS：個體測量。VG：群體目測。VS：個體目測。QL：質(zhì)量性狀。QN：數(shù)量性狀。PQ：假質(zhì)量性狀。*：標注性狀為UPOV用于統(tǒng)一品種描述所需要的重要性狀，除非受環(huán)境條件限制性狀的表達狀態(tài)無法測試，所有UPOV成員都應(yīng)使用這些性狀。(a)、(b)：標注內(nèi)容在B.2中進行了詳細解釋。(+)：標注內(nèi)容在B.3中進行了詳細解釋。_：本文件中下劃線是特別提示測試性狀的適用范圍。5 繁殖材料的要求5.1 繁殖材料以種子形式提供。5.2 提交的種子數(shù)量至少25g。5.3 提交的種子應(yīng)外觀健康，活力高，無病蟲侵害。種子的具體質(zhì)量要求如下：凈度98%、發(fā)芽率85%、含水量8%。5.4 提交的種子一般不進行任何影響品種性狀正常表達的處理（如種子包衣處理）。如果已處理，應(yīng)提供處理的詳細說明。5.5 提交的種子應(yīng)符合中國植物檢疫的有關(guān)規(guī)定。6 測試方法6.1 測試周期測試周期至少為2個獨立的生長周期。6.2 測試地點測試通常在一個地點進行。如果某些性狀在該地點不能充分表達，可在其他符合條件的地點進行觀測。6.3 田間試驗6.3.1試驗設(shè)計申請品種和近似品種相鄰種植。種植方式采用育苗移栽，適宜行株距。保護地栽培每個小區(qū)不少于10株，露地栽培每個小區(qū)不少于20株，共設(shè)2次重復(fù)。6.3.2 田間管理可按當?shù)卮筇锷a(chǎn)管理方式進行。植株生長發(fā)育過程中應(yīng)及時整枝打叉，保證正常的生長發(fā)育。6.4 性狀觀測6.4.1觀測時期性狀觀測應(yīng)按照表A.1和表A.2列出的生育階段進行。生育階段描述見表B.1。6.4.2 觀測方法性狀觀測應(yīng)按照表A.1和表A.2規(guī)定的觀測方法(VG、VS、MG、MS)進行。部分性狀觀測方法見B.2和B.3。6.4.3觀測數(shù)量除非另有說明，個體觀測性狀(VS、MS)每個小區(qū)植株取樣數(shù)量不少于10個。在觀測植株的器官或部位時，每個植株取樣數(shù)量應(yīng)為1個。群體觀測性狀(VG、MG)應(yīng)觀測整個小區(qū)或規(guī)定大小的群體。6.5附加測試必要時，可選用表A.2中的性狀或本文件未列出的性狀進行附加測試。7 特異性、一致性和穩(wěn)定性結(jié)果的判定 7.1 總體原則特異性、一致性和穩(wěn)定性的判定按照GB/T 19557.1確定的原則進行。7.2 特異性的判定申請品種應(yīng)明顯區(qū)別于所有已知品種。在測試中，當申請品種至少在一個性狀上與近似品種具有明顯且可重現(xiàn)的差異時，即可判定申請品種具備特異性。7.3 一致性的判定對于測試品種，一致性判定時，采用1%的群體標準和至少95%的接受概率。當樣本大小為20株35株時，最多可以允許有1個異型株。當樣本大小為36株40株時，最多可以允許有2個異型株。7.4 穩(wěn)定性的判定如果一個品種具備一致性，則可認為該品種具備穩(wěn)定性。一般不對穩(wěn)定性進行測試。必要時，可以種植該品種的下一代種子。與以前提供的繁殖材料相比，若性狀表達無明顯變化，則可判定該品種具備穩(wěn)定性。雜交種的穩(wěn)定性判定，除直接對雜交種本身進行測試外，還可以通過對其親本系的一致性和穩(wěn)定性鑒定的方法進行判定。8 性狀表根據(jù)測試需要，性狀分為基本性狀和選測性狀?；拘誀钍菧y試中必須使用的性狀，基本性狀見表A.1，選測性狀見表A.2。8.1 概述性狀表列出了性狀名稱、表達類型、表達狀態(tài)及相應(yīng)的代碼和標準品種、觀測時期和方法等內(nèi)容。8.2 表達類型根據(jù)性狀表達方式，性狀分為質(zhì)量性狀、假質(zhì)量性狀和數(shù)量性狀三種類型。8.3 表達狀態(tài)和相應(yīng)代碼8.3.1 每個性狀劃分為一系列表達狀態(tài)，以便于定義性狀和規(guī)范描述；每個表達狀態(tài)賦予一個相應(yīng)的數(shù)字代碼，以便于數(shù)據(jù)記錄、處理和品種描述的建立與交流。8.3.2 對于質(zhì)量性狀和假質(zhì)量性狀，所有的表達狀態(tài)都應(yīng)當在測試指南中列出；對于數(shù)量性狀，為了縮小性狀表的長度，偶數(shù)代碼的表達狀態(tài)可以不列出，偶數(shù)代碼的表達狀態(tài)可以前一個表達狀態(tài)到后一個表達狀態(tài)的形式來描述。8.4 標準品種性狀表中列出了部分性狀有關(guān)表達狀態(tài)可參考的標準品種，以助于確定相關(guān)性狀的不同表達狀態(tài)和校正環(huán)境因素引起的差異。9 分組性狀本文件中，品種分組性狀如下：a) *植株：生長類型 (表A.1中性狀3)。b) *復(fù)葉：類型(表A.1中性狀10)。c) *果實：綠肩(表A.1中性狀17)。 d) *果梗：離層 (表A.1中性狀21)。e) *果實：縱切面形狀(表A.1中性狀25)。f) *果實：心室數(shù)量(表A.1中性狀36)。g) *果實：成熟時顏色 (表A.1中性狀37)。10 技術(shù)問卷申請人應(yīng)按附錄C給出的格式填寫番茄技術(shù)問卷。(規(guī)范性附錄)番茄性狀表A.1番茄基本性狀見表A.1。表A.1番茄基本性狀表序號性 狀觀測時期和方法表達狀態(tài)標 準 品 種代 碼1*幼苗：下胚軸花青甙顯色QL22VG無851-3161有中蔬4號92植株：主莖第一花序著生節(jié)位數(shù)QN312MS少早粉2號,Campbell 13271中3多53*植株：生長類型QL332VG有限早粉2號, Campbell 13271無限中蔬4號24僅適用于有限生長型品種：植株：高度QN434MS矮TinyTim3中早粉2號5高Campbell 132775僅適用于無限生長型品種：植株：高度QN(+)434MS矮3中5高76植株：生長習(xí)性PQ434VG直立齊研矮粉1半蔓生中蔬4號2蔓生秘魯番茄37*葉：姿態(tài)QN(a) 434VG半直立3水平5半下垂78*復(fù)葉：長度QN(a)434MS短齊研矮粉3中農(nóng)大23號5長中蔬5號79*復(fù)葉：寬度QN(a)434MS窄MAO-13中851-3165寬中蔬5號710*復(fù)葉：類型QL(a) (+)434VG羽狀復(fù)葉齊研矮粉1二回羽狀復(fù)葉美味櫻桃2表A.1（續(xù)）序號性 狀觀測時期和方法表達狀態(tài)標 準 品 種代 碼11復(fù)葉：小葉大小QN(a)(+)434VG小3中5大712葉：綠色程度QN(a)434VG淺橘黃嘉辰3中中蔬4號5深美味櫻桃713葉：小葉葉柄相對于主軸的姿態(tài)QN(a) (+)434VG半直立P98-5003水平中蔬4號5半下垂黃珍珠714*花：花序類型PQ(+)422VG單式花序為主中蔬4號1 中間型美味櫻桃2多歧花序為主315花：簇生QL (+)322VG無強豐19有寧農(nóng)1號, Marmande16*花：顏色PQ (+)322VG黃綠色綠寶石1黃色中蔬4號2橙色秘魯番茄317*果實：綠肩QL422VG無851-3161有中蔬4號918*果實：綠肩覆蓋范圍QN422VG小橘黃嘉辰3中中蔬4號5大FMTT271719*果實：綠肩綠色程度QN422VG淺橘黃嘉辰35中中蔬4號深FMTT271720*果實：成熟前果面綠色程度QN422VG淺NCX30323中中蔬4號5深721*果梗：離層QL(b) (+)424VG無NCX30321有中蔬4號9表A.1（續(xù)）序號性 狀觀測時期和方法表達狀態(tài)標 準 品 種代 碼22*僅適用于有離層品種：果柄：長度QN(b) (+)424MS短美味櫻桃, Campbell 13273中中蔬5號5長FMTT271, NCX3032723*果實：重量QN(b)424MS極小秘魯1極小到小美味櫻桃2小3小到中Roma NCX30324中農(nóng)大23號5中到大6大中蔬4號7大到極大單花番茄8極大寧農(nóng)1號924*果實：縱徑/橫徑比率QN(b)424MS極小寧農(nóng)1號1小中蔬6號3中中蔬4號5大NCX30327極大長形番茄925*果實：縱切面形狀PQ(b) (+)424VG扁平形1扁圓形2圓形3長方形4圓柱形5橢圓形6心形7倒卵圓形8卵圓形9梨形1026*果實：果梗端的棱QN(b)424VG無或極弱NCX30321弱中蔬4號3中pennred5強Marmande(D22)7極強寧農(nóng)1號927果實：橫切面形狀PQ(b)424VG不圓寧農(nóng)1號1圓中蔬4號2表A.1（續(xù)）序號性 狀觀測時期和方法表達狀態(tài)標 準 品 種代 碼28果實：果梗洼大小QN(b)424MS極小紅梨1小Hawaii79983中早粉2號5大中蔬6號7極大寧農(nóng)1號929果實：果梗洼處木栓化大小QN(b)424MS極小1小3中5大7極大930果實：果梗洼凹陷程度QN(b) (+)424VG弱3中5強731果實：果皮顏色QL(b)424VG無色中蔬4號1橙黃色中蔬6號232果實：果臍大小QN(b)424VG小1中2大333果實：臍端形狀QN(b) (+)424VG凹寧農(nóng)1號1凹到平Marmande2平中蔬4號3平到凸NCX30324凸長形番茄534果實：橫切面果心大小QN(b)424VG極小紅梨1小Hawaii79983中早粉2號5大中蔬6號7極大寧農(nóng)1號935果實：果肉厚度QN(b)424MS薄美味櫻桃3中中蔬4號5厚Ferline736*果實：心室數(shù)量QN(b)424VS僅2個12或3個23或4個34或5或6個46個以上5表A.1（續(xù)）序號性 狀觀測時期和方法表達狀態(tài)標 準 品 種代 碼37*果實：成熟時顏色PQ(b)424VG奶油色1綠色綠寶石2黃色黃珍珠3黃綠色4橙色橘黃嘉辰5粉紅色中蔬4號6紅色中蔬6號7粉紫色黑珍珠8棕紫色9多色1038*果實：果肉顏色PQ(b)424VG奶油色1綠色2黃色黃珍珠3橙色橘黃嘉辰4粉紅色中蔬4號5紅色Ferline6淺棕色739胎座：膠狀物顏色PQ(b)424VG黃色橘黃嘉辰1黃綠色毛粉8022綠色秘魯3粉紅色中蔬4號440果實：硬度QN(b) (+)424VG軟3中5硬741開花期QN(+)312MG極早1早美味櫻桃3中麗春5晚橘黃嘉辰7極晚942*成熟期QN(+)414MG極早1早美味櫻桃3中中蔬4號5晚橘黃嘉辰7極晚9A.2番茄選測性狀見表A.2。表A.2番茄選測性狀表序號性 狀觀測時期和方法表達狀態(tài)標 準 品 種代 碼43僅適用于有限生長品種：植株：主莖花序數(shù)量QNMS少3中5多744莖：花青甙顯色強度QN(+)322VG無或極弱1弱3中5強7極強945果實：貨架壽命QNMG極短1短3中5長7極長946果實：干物質(zhì)含量QNMG低黃珍珠3中中蔬4號5高Ferline747銀敏感度QLMG不敏感1敏感948抗性：斑枯病QL(+)MG感早粉2號1抗秘魯番茄949抗性：南方根結(jié)線蟲QL(+)MG感早粉2號1抗Anahu950抗性：黃萎病QL(+)MG感 麗春 1抗溫室桃太郎951抗性：枯萎病QL(+)MG感1抗952抗性：葉霉病QL(+)MG感1抗953抗性：黃瓜花葉病毒QL(+)MG感早粉2號1抗美味櫻桃9表A.2（續(xù)）序號性 狀觀測時期和方法表達狀態(tài)標 準 品 種代 碼54抗性：番茄花葉病毒QL(+)MG感1抗955抗性：晚疫病QL(+)MG感早粉2號 1抗L3708956抗性：黑霉病QL(+)MG感早粉2號 1抗L733957抗性：灰葉斑病QL(+)MG感早粉號1抗Fla.MH-1 VC82-L958抗性：細菌性斑點?。ǒ忦璨。㏎L(+)MG感早粉號1抗Hawaii7998959抗性：青枯病QL(+)MG感1抗960抗性：早疫病QL(+)MG感早粉2號1抗Floradel961抗性：黃花曲葉病毒QLMG感1抗9附錄B(資料性附錄)番茄性狀表的解釋B.1 番茄生育階段見表B.1。表B.1 番茄生育階段表代碼描述22展開4片真葉（拉大十字）312盛花期（70%植株第一花序2朵以上開花）322盛花期（70%植株第二花序2朵以上開花）332盛花期（70%植株第三花序2朵以上開花）414第一穗果成熟期422第二穗果白熟期424第二穗果成熟期425第二穗果完熟期434第三穗果成熟期444第四穗果成熟期B.2 涉及多個性狀的解釋(a) 植株中部1/3處的正常成熟葉。有限生長類型的植株在花、葉封頂時觀測；無限生長類型的植株在第五果穗坐果時觀測。(b) 第二或第三果穗的完全成熟果。B.3 涉及單個性狀的解釋性狀5 僅適用于無限生長型品種：植株：高度，從地面至第四果穗的高度。性狀10 復(fù)葉：類型，見圖B.1。羽狀復(fù)葉二回羽狀復(fù)葉2圖B.1 復(fù)葉：類型性狀11 復(fù)葉：小葉大小，圖 B.1 “二回羽狀復(fù)葉”中箭頭標注位置的小葉。性狀13 葉：小葉葉柄相對于主軸的姿態(tài)，見圖B.2。半直立水平半下垂357圖B.2 葉：小葉葉柄相對于主軸的姿態(tài)性狀14 花：花序類型，在第二、第三果穗座果后觀測。性狀15 花：簇生，在第二或第三花序開花時，觀測花序的第一花。性狀16 花：顏色，在第二或第三花序的花完全開放時觀測。性狀21 果梗：離層，見圖B.3。無有19圖B.3 果梗：離層性狀22 僅適用于有離層品種：果柄：長度，見圖B.4。圖B.4 僅適用于有離層品種：果柄：長度性狀25 果實：縱切面形狀，見圖B.5。扁平形扁圓形圓形123長方形圓柱形橢圓形心形4567倒卵圓形卵圓形梨形8910圖B.5 果實：縱切面形狀性狀30 果實：果梗洼凹陷程度，見圖B.6。無或極弱弱中強1357圖B.6 果實：果梗洼凹陷程度性狀33 果實：臍端形狀，見圖B.7。凹凹到平平平到凸凸12345圖B.7 果實：臍端形狀性狀40 果實：硬度。收獲時期：果實完全著色時采收。測試方法：對照標準品種用手感進行測試評價。性狀41 開花期，統(tǒng)計整個小區(qū)30%植株的第一花序的第1朵3朵花開放的時間，對照標準品種進行觀測。性狀42 成熟期，統(tǒng)計整個小區(qū)50%植株至少有一個果穗有可采收成熟果的時間，對照標準品種進行觀測。性狀44 莖：花青甙顯色強度，植株上部1/3處。性狀48 抗性：斑枯病。材料準備：設(shè)“秘魯番茄”為抗病對照，“早粉2號”番茄為感病對照。各測試品種用50溫水浸種30min，然后用清水沖洗干凈，置于28恒溫培養(yǎng)箱中催芽，每天用清水淋洗1次2次，出芽后播種于育苗筐內(nèi)，育苗基質(zhì)為草炭和蛭石（1：1），基質(zhì)經(jīng)高溫蒸汽滅菌。在日光溫室育苗，室內(nèi)溫度2028。每份測試品種重復(fù)3次，每一重復(fù)10株苗。保存的菌種分別在PDA培養(yǎng)基平板上培養(yǎng)，溫度25，約8d15d后，培養(yǎng)基表面長出酶層，用滅菌無離子水配制成106個孢子mL-1的接種液，立即用于接種。接種方法：當幼苗長至5片6片真葉時，用微噴霧器將接種液均勻噴霧到每一葉片的表面，直到滴落為止。接種后，將植株放在25、無光照、RH100%的生長室培養(yǎng)48h，以后RH調(diào)為96%以上，每天光照14h，強度為70Em-2s-1。病情調(diào)查與分級標準：接種后10d14d調(diào)查。性狀49 抗性：南方根結(jié)線蟲病。材料準備：設(shè)“Anahu”番茄為抗病對照，“早粉2號”番茄為感病對照。各測試品種用50溫水浸種30min，然后用清水沖洗干凈，置于28恒溫培養(yǎng)箱中催芽，每天用清水淋洗1次2次，出芽后播種于育苗筐內(nèi)，育苗基質(zhì)為草炭和蛭石（1：1），基質(zhì)經(jīng)高溫蒸汽滅菌。在日光溫室里育苗，室內(nèi)溫度2030。每份測試品種重復(fù)3次，每一重復(fù)10株苗。接種病源采用我國番茄線蟲病的主要種類南方根結(jié)線蟲，該線蟲在種植“早粉2號”番茄的土壤中保存與繁殖。接種前先將“早粉2號”番茄病根清洗后切碎，放入大型三角瓶中，加入適量的漂白水（NaOCl，有效成分0.5%），充分振蕩2 min 4 min，洗下卵，迅速以200目及500目細篩過濾（200目在上層），洗下的卵再立即用自來水清洗干凈，最后用蒸餾水稀釋成濃度為1000卵mL-1作為接種源，立即接種。接種方法：當供試番茄幼苗1葉2葉時，在每個育苗缽底部先放入少量基質(zhì)，再注入2mL接種源，然后移栽供試番茄幼苗。1缽1苗，置于2025的溫室內(nèi)或生長箱內(nèi)培養(yǎng)。病情調(diào)查與分級標準： 接種后6周7周調(diào)查番茄根部根結(jié)和卵塊數(shù)。性狀50 抗性：黃萎病。材料準備：設(shè)“溫室桃太郎”番茄為抗病對照，“麗春”番茄為感病對照。各測試品種經(jīng)1gL-1升汞溶液消毒浸種10min后，用清水沖洗，放入濕紗布包中，然后置于恒溫培養(yǎng)箱中28催芽，每天用清水淋洗1次2次，出芽后播種于育苗筐內(nèi)，育苗基質(zhì)為草炭和蛭石（1：2），在日光溫室里育苗，室內(nèi)溫度2030，幼苗2片真葉時，移入格式塑料育苗盤中，再將該盤放入盛有草炭和蛭石（體積比1：1）的普通塑料育苗盤中，基質(zhì)均經(jīng)高溫蒸汽滅菌。每份測試品種重復(fù)3次，每一重復(fù)10株苗。茄子黃萎病菌經(jīng)PDA培養(yǎng)基平板培養(yǎng)7d后，挑取其菌絲，接種于PL培養(yǎng)液中，在搖床以120r/min培養(yǎng)7d，培養(yǎng)液經(jīng)雙層紗布過濾，濾液以4000r/min離心10min，留取上清液，用滅菌蒸餾水配制成107個孢子mL-1的接種液，立即用于接種。接種方法：當格式塑料育苗盤中的幼苗長至4片真葉、根部長出底部的孔洞時，將格式塑料育苗盤輕輕提起（以傷根），放入盛有接種液的白瓷盤等容器中15 min，再將此盤放回原塑料育苗盤中。置于白天2528、晚間2022的溫室內(nèi)或生長箱內(nèi)培養(yǎng)。病情調(diào)查與分級標準： 接種后4周調(diào)查記載。性狀51 抗性：枯萎病。材料準備：設(shè)“強豐”、“Walter（瓦爾特）”番茄為抗病對照，“麗春”番茄為感病對照。各測試品種經(jīng)1gL-1升汞溶液消毒浸種10min后，用清水沖洗，放入濕紗布包中，然后置于恒溫培養(yǎng)箱中28催芽，每天用清水淋洗1次2次，出芽后播種于育苗筐內(nèi)，育苗基質(zhì)為草炭和蛭石（1：1），基質(zhì)經(jīng)高溫蒸汽滅菌，在日光溫室里育苗，室內(nèi)溫度2030。每份測試品種重復(fù)3次，每一重復(fù)10株苗。接種菌原為我國的番茄枯萎病的主流生理小種，即1號小種，在PDA培養(yǎng)基平板上培養(yǎng)，溫度2426，每天12h光照、12h黑暗。約一周后，培養(yǎng)基表面長滿孢子層，即大型分生孢子，用滅菌蒸餾水配制成106個孢子mL-1的接種液，立即用于接種。接種方法：當幼苗長至1片2片真葉時，將苗拔起，用水將根系沖洗干凈，剪去1/3根的長度，在接種液中浸泡2min，然后移入小塑料缽中，置于室溫2530、土溫2528的溫室內(nèi)或生長箱內(nèi)培養(yǎng)。病情調(diào)查與分級標準： 接種后10d左右調(diào)查記載。性狀52 抗性：葉霉病材料準備：分別設(shè)Cf1，2，3，4，5，7，9番茄為抗病對照，“cf0”、“麗春”、“Money maker”番茄為感病對照。各測試品種經(jīng)1gL-1升汞溶液消毒浸種10min后，用清水沖洗，放入濕紗布包中，然后置于恒溫培養(yǎng)箱中28催芽，每天用清水淋洗1次2次，出芽后播種于育苗筐內(nèi)，育苗基質(zhì)為草炭和蛭石（1：1），基質(zhì)經(jīng)高溫蒸汽滅菌，在日光溫室里育苗，室內(nèi)溫度2030。每份測試品種重復(fù)3次，每一重復(fù)10株苗。接種菌原為我國的番茄葉霉病的兩個主流生理小種，即1.2.3號小種和1.2.3.4號小種，分別在PDA培養(yǎng)基平板上培養(yǎng)，溫度24，約8d15d后，培養(yǎng)基表面長出霉層，用滅菌無離子水配制成106個孢子mL-1的接種液，立即用于接種。接種方法：當幼苗長至3片4片真葉時，用滅菌毛筆蘸取接種液涂抹或噴于真葉背面，然后置于室溫2225、RH100、光照5000 lx的生長箱內(nèi)培養(yǎng)。病情調(diào)查與分級標準： 接種后12d左右調(diào)查記載。性狀53 抗性：黃瓜花葉病毒。材料準備：設(shè)“美味櫻桃”番茄為抗病對照，“早粉2號”番茄為感病對照。各測試品種經(jīng)1gL-1升汞溶液消毒浸種10min后，用清水沖洗，放入濕紗布包中，然后置于恒溫培養(yǎng)箱中28催芽，每天用清水淋洗1次2次，出芽后播種于育苗筐內(nèi)，育苗基質(zhì)為草炭和蛭石（1：1,），基質(zhì)經(jīng)高溫蒸汽滅菌，在日光溫室里育苗，室內(nèi)溫度2030。每份測試品種重復(fù)3次，每一重復(fù)10株苗。接種毒原為危害我國番茄的黃瓜花葉病毒主流株系，即CMV重花葉株系，在心葉煙上繁殖，溫度2028，自然光照，約9d11d后，采摘發(fā)病葉片，加入5倍于鮮病葉重量的0.01molL-1磷酸緩沖液（pH7.0），搗碎后雙層紗布過濾，濾液立即用于接種。接種方法：當幼苗長至2片3片真葉時，葉面撒布一薄層600目的金鋼砂，用噴槍或人工摩擦接種。噴槍接種的接種壓為2.1 kgcm22.5kgcm2，噴槍嘴距葉片表面2 cm 3 cm。接種2次，間隔2d3d。后置于室溫2228、自然光照的溫室內(nèi)培養(yǎng)。病情調(diào)查與分級標準： 接種后14d18d調(diào)查記載。性狀54 抗性：番茄花葉病毒。材料準備：設(shè)“強豐”、“GCR237等系統(tǒng)”番茄為抗病對照，“麗春”、“GCR26”番茄為感病對照。各測試品種經(jīng)1gL1升汞溶液消毒浸種10min后，用清水沖洗，放入濕紗布包中，然后置于恒溫培養(yǎng)箱中28催芽，每天用清水淋洗1次2次，出芽后播種于育苗筐內(nèi)，育苗基質(zhì)為草炭和蛭石（11），基質(zhì)經(jīng)高溫蒸汽滅菌，在日光溫室里育苗，室內(nèi)溫度2030。每份測試品種重復(fù)3次，每一重復(fù)10株苗。接種毒原為我國的番茄花葉病毒的兩個主流株系ToMV 0株系和ToMV 1株系，均在普通煙“白煙”上繁殖，溫度2030，自然光照，約10d14d后采摘發(fā)病葉片，加入10倍于鮮病葉重量的0.01molL-1磷酸緩沖液（pH7.0），搗碎后雙層紗布過濾，濾液立即用于接種。接種方法：當幼苗長至2片3片真葉時，葉面撒布一薄層600目的金鋼砂，用噴槍或人工摩擦接種。噴槍接種的接種壓為2.1 kgcm22.5kgcm2，噴槍嘴距葉片表面2 cm 3 cm。接種2次，間隔2d3d。后置于室溫2030、自然光照的溫室內(nèi)培養(yǎng)。病情調(diào)查與分級標準： 接種后14d18d調(diào)查記載。性狀55 抗性：晚疫病。材料準備：設(shè)“L3708”番茄為抗病對照，“早粉2號”番茄為感病對照。各測試品種經(jīng)1gL-1升汞溶液消毒浸種10min后，用清水沖洗，放入濕紗布包中，然后置于恒溫培養(yǎng)箱中28催芽，每天用清水淋洗1次2次，出芽后播種于育苗筐內(nèi)，育苗基質(zhì)為草炭和蛭石（1：1），基質(zhì)經(jīng)高溫蒸汽滅菌，在日光溫室里育苗，室內(nèi)溫度2030。每份測試品種重復(fù)4次，每一重復(fù)6株8株苗。保存的番茄晚葉霉病菌（當?shù)鼗蛉珖膬?yōu)勢生理小種）在黑麥瓊脂培養(yǎng)基平板上繁殖約14d，20、黑暗培養(yǎng)，然后用滅菌無離子水配制成5104個孢子囊mL-1懸浮液，置12下2h，讓其釋放出游動孢子，立即用于接種。接種方法：當幼苗長至7片8片真葉時，用微噴霧器將接種液均勻噴霧到每一葉片的表面和莖部，直到滴落為止。接種后，將植株放在1822,無光照且RH100的生長室培養(yǎng)24h ，以后RH調(diào)為60%95%，每天光照14h，強度為70Em-2s-1。病情調(diào)查與分級標準： 接種后第7d和第10d調(diào)查記載。性狀56 抗性：黑霉病。材料準備：設(shè)“L733”番茄為抗病對照，“早粉2號”番茄為感病對照。各測試品種用50溫水浸種30min，然后用清水沖洗干凈，置于28恒溫培養(yǎng)箱中催芽，每天用清水淋洗1次2次，出芽后播種于育苗筐內(nèi)，育苗基質(zhì)為草炭和蛭石（1：1），基質(zhì)經(jīng)高溫蒸汽滅菌。在日光溫室里育苗，室內(nèi)溫度2030。每份測試品種重復(fù)3次，每一重復(fù)10株苗。保存的菌種在TOA培養(yǎng)基（番茄葉、燕麥片和瓊脂培養(yǎng)基）平板上培養(yǎng)，溫度28，每天光照12h，7d10d產(chǎn)孢后，用滅菌無離子水配制成104個孢子mL-1的接種液，立即用于接種。接種方法：當幼苗長至5片6片真葉時，用微噴霧器將接種液均勻噴霧到每一葉片的表面和莖部，直到滴落為止。接種后，將植株放在2630、無光照、RH100的生長室培養(yǎng)24h ，以后RH調(diào)為96以上，每天光照14h，強度為70Em-2s-1。病情調(diào)查與分級標準： 接種后14d左右調(diào)查記載。性狀57 抗性：灰葉斑病。材料準備：設(shè)“Fla.MH-1”或“VC82-L”番茄為抗病對照，“早粉2號”番茄為感病對照。各測試品種用50溫水浸種30min，然后用清水沖洗干凈，置于28恒溫培養(yǎng)箱中催芽，每天用清水淋洗1次2次，出芽后播種于育苗筐內(nèi)，育苗基質(zhì)為草炭和蛭石（1：1），基質(zhì)經(jīng)高溫蒸汽滅菌。在日光溫室里育苗，室內(nèi)溫度2030。每份測試品種重復(fù)3次，每一重復(fù)10株苗。保存的菌種在分別在PDA培養(yǎng)基平板上培養(yǎng)，溫度26，約8d15d后，培養(yǎng)基表面長出霉層，用滅菌無離子水配制成106個孢子mL-1的接種液，立即用于接種。接種方法：當幼苗長至5片6片真葉時，用微噴霧器將接種液均勻噴霧到每一葉片的表面和莖部，直到滴落為止。接種后，將植株放在2426、無光照、RH100的生長室培養(yǎng)24h ，以后RH調(diào)為96以上，每天光照14h，強度為70Em-2s-1。病情調(diào)查與分級標準： 接種后14d左右調(diào)查記載。