東方百合'Vivian'高效離體快繁體系的建立.pdf
研究簡報 東方百合 Vivian 高效離體快繁體系的建立 任君芳1 張利1 劉建霞1 單鳳嬌2 劉千里1 李昌玉3 1 阿壩州林業(yè)和草原科學(xué)技術(shù)研究所 四川 汶川 623000 2 阿壩州林業(yè)和草原局 四川 馬爾康 624000 3 汶川縣林業(yè)和草原局 四川 汶川 623000 2020 09 01 收稿 2020 10 22 網(wǎng)絡(luò)版發(fā)表 開放科學(xué) 資源服務(wù) 標識碼 OSID 基金項目 阿壩州州本級預(yù)算項目 岷江上游干旱河谷野生百合屬植物資源調(diào)查與保育技術(shù)研究 任君芳 1968 女 高級工程師 244648373 通訊作者 314241819 摘 要 以 東 方 百 合 Vivian 的 鱗 片 為 外 植 體 對 不 定 芽 的 誘 導(dǎo) 增 殖 小 鱗 莖 膨 大 及 生 根 等 進 行 系 統(tǒng) 研 究 建 立 了 高 效 離 體 快 繁 體 系 結(jié) 果 表 明 東 方 百 合 Vivian 的 最 佳 不 定 芽 誘 導(dǎo) 培 養(yǎng) 基為MS 1 0 mg L 1 6 BA 0 1 mg L 1 NAA 30 g L 1蔗 糖 6 0 g L 1瓊 脂 pH值為6 0 最 佳 不 定 芽 增 殖 培 養(yǎng) 基為MS 1 0 mg L 1 6 BA 0 15 mg L 1 NAA 60 g L 1蔗 糖 6 0 g L 1瓊 脂 pH值為6 0 最 佳 小 鱗 莖 膨 大 培 養(yǎng) 基為MS 90 g L 1蔗 糖 6 0 g L 1瓊 脂 pH 6 0 最 佳 生 根 培 養(yǎng) 基為1 2 MS 0 3 mg L 1NAA 60 g L 1蔗 糖 6 0 g L 1 瓊 脂 pH值 為 6 0 在 草 炭 與 蛭 石 比 例為1 1的 基 質(zhì) 中 的 組 培 苗 移 栽 苗 長 勢 健 壯 且 成 活 率 最 高達95 31 該 高 效 離 體 快 繁 體 系可為東方百合 Vivian 的規(guī)?;a(chǎn)提供技術(shù)保障 關(guān)鍵詞 東方百合 Vivian 組織培養(yǎng) 快速繁殖 百 合 是 百 合 科 百 合 屬 多 年 生 球 根 花 卉 是 世 界 重 要 的 切 花 具 有 極 高 的 觀 賞 價 值 和 經(jīng) 濟 價 值 近 些 年 來 東 方 百 合 Vivian 憑 借 其 花 大 色 艷 深 受 消 費 者 喜 歡 種 植 面 積 逐 年 提 高 市 場 對 其 種 球 的 需 求也與日俱增 分 球 繁 殖 和 鱗 片 扦 插 是 百 合 種 球 生 產(chǎn) 的 常 見 方 式 但 普 遍 存 在 繁 殖 系 數(shù) 較 低 1 3 以 及 病 毒 CMV LMoV和LSV等 真 細 菌 性 病 害 灰 霉 病 枯 萎 病 等 和 蟲 害 蚜 蟲 線 蟲 等 發(fā) 生 嚴 重 導(dǎo) 致 種 性 退 化 等 問 題 4 6 離 體 快 繁 技 術(shù) 因 其 繁 殖 系 數(shù) 高 而 且 通 過 莖 尖 脫 毒 可 以 獲 得 無 病 毒 植 株 等 優(yōu) 點 7 9 已 成 功 應(yīng) 用 于 百 合 黃 天 霸 水 晶 布 蘭 卡 和 Strawberry and Cream 等 品 種 的 種 球 繁 育 10 15 歐 洲 百 合 金 黃 花 滇 百 合 宜 昌 百 合 和 新 疆 百 合 等 野 生 百 合 資 源 保 存 2 4 16 以 及 百 合 新 品 種 培 育 研 究 中 本 研 究 以 東 方 百 合 Vivian 的 鱗 片 為 外 植 體 在 本 實 驗 室 已 有 的 離 體 快 繁 體 系 的 基 礎(chǔ) 對 不 定 芽 的 誘 導(dǎo) 增 殖 小 鱗 莖 膨 大 生 根 等 步 驟 進 行 系 統(tǒng) 研 究 旨 在 建 立 更 為 高 效 的 東 方 百 合 Vivian 離 體 快 繁 體 系 為 其 種 球 的 規(guī)?;a(chǎn)提供技術(shù)保障 1 材料與方法 1 1 試驗材料 東方百合 Vivian 無菌組培苗為本實驗室保存 1 2 試驗條件 基 本 培 養(yǎng) 基為MS或1 2 MS培 養(yǎng) 基 所 有 培 養(yǎng) 基的pH為6 0 瓊 脂 濃 度為6 0 g L 1 121 高 壓 滅菌20 min冷卻備用 培養(yǎng)溫度為25 1 3 試驗方法 1 3 1 不定芽的誘導(dǎo) 基 于 實 驗 室 前 期 的 不 定 芽 誘 導(dǎo) 配 方 MS 引用格式 任君芳 張利 劉建霞 等 東方百合 Vivian 高效離體快繁體系的建立 J 四川林業(yè)科技 2020 41 6 84 88 Ren J F Zhang L Liu J X et al Establishment of an efficient approach in vitro propagation for oriental hybrid lily cultivar Vivian J Journal of Sichuan Forestry Science and Technology 2020 41 6 84 88 doi 10 12172 202009010001 第 41 卷 第 6 期 四 川 林 業(yè) 科 技 Vol 41 No 6 2020 年 12 月 Journal of Sichuan Forestry Science and Technology Dec 2020 2020 四川林業(yè)科技 編輯部 0 5 mg L 1 6 BA 0 1 mg L 1 NAA 30 g L 1蔗 糖 6 0 g L 1瓊 脂 pH值 6 0 設(shè) 置 不 同 激 素 和 濃 度 組 合 6 BA 0 5 1 0 1 5 mg L 1 NAA 0 1 0 2 mg L 1 的 不 定 芽 誘 導(dǎo) 培 養(yǎng) 基 將 鱗 片 切成1 cm 1 cm的 方 塊 接 種 在 各 個 不 定 芽 誘 導(dǎo) 培 養(yǎng) 基 上 進 行 不 定 芽 誘 導(dǎo) 45 d后 觀 察 統(tǒng) 計 不 定 芽 誘 導(dǎo) 情 況 每 個 處理30個鱗片 生物重復(fù)3次 1 3 2 不定芽的增殖 基 于 實 驗 室 前 期 的 增 殖 培 養(yǎng) 基 配 方 MS 1 0 mg L 1 6 BA 0 1 mg L 1 NAA 60 g L 1蔗 糖 6 0 g L 1瓊 脂 pH值 6 0 設(shè) 置 不 同 激 素 和 濃 度 組 合 6 BA 0 8 1 0 1 2 mg L 1 NAA 0 1 0 15 mg L 1 的 增 殖 培 養(yǎng) 基 待 誘 導(dǎo) 出 的 不 定 芽 長 至 直徑1 cm左 右 后 將 不 定 芽 分 別 接 種 至 不 同 的 增 殖 培 養(yǎng) 基 中 進 行 增 殖 45 d后 觀 察 統(tǒng) 計 不 定 芽 增 殖 情 況 每個處理30個不定芽 生物重復(fù)3次 1 3 3 小鱗莖的膨大 將 直徑1 cm左 右 的 小 鱗 莖 轉(zhuǎn) 接 至表3不 同 濃 度 蔗 糖 的 培 養(yǎng) 基 中 進 行 小 鱗 莖 的 膨 大 培 養(yǎng) 30 d轉(zhuǎn) 接 一次 60 d后統(tǒng)計鱗莖的直徑 1 3 4 鱗莖的生根培養(yǎng) 將 直徑2 3 cm的 鱗 莖 轉(zhuǎn) 接 至表4的 不 同 生 根 培 養(yǎng) 基 中 蔗 糖 濃 度為60 g L 1 20 d后 觀 察 統(tǒng) 計 根 系生長情況 1 3 5 煉苗與移栽 待 鱗 莖 根 長到2 cm左 右 在 溫 室 中 開 瓶 煉 苗 3 5 d 將 組 培 苗 從 瓶 中 移 出 洗 凈 根 系 附 著 的 瓊 脂 移 入表5不 同 草 炭 與 蛭 石 比 例 的 基 質(zhì) 中 保持70 75 左 右 濕 度 60 d后 觀 察 生 長 情 況 并 統(tǒng) 計 成 活 率 2 結(jié)果與分析 2 1 不定芽的誘導(dǎo)培養(yǎng) 外 植 體 在 分 化 培 養(yǎng) 基 上 大概6 8 d開 始 進 行 分 化 鱗 片 表 面 出 現(xiàn) 凸 起 20 d左 右 逐 漸 分 化 出 不 定 芽 隨 后 逐 漸 發(fā) 育 成 小 鱗 莖 如表1和圖1A可 知 當NAA的 濃 度 不 變 時 不 定 芽 誘 導(dǎo) 系 數(shù) 隨著6 BA 的 濃 度 的 升 高 呈 現(xiàn) 先 升 高 后 下 降 的 趨 勢 當6 BA 為1 0 mg L 1 NAA為0 1 mg L 1時 不 定 芽 分 化 的 誘 導(dǎo) 系 數(shù)為3 65 比 實 驗 室 已 有 的 不 定 芽 誘 導(dǎo) 體 系 6 BA為0 5 mg L 1 NAA為0 1 mg L 1 的 誘 導(dǎo) 系數(shù)1 01高 出了2 64 此 濃 度 組 合 的 誘 導(dǎo) 率 最 高 并 且 不 定 芽 健 壯 因 此 此 激 素 濃 度 組 合 的 培 養(yǎng) 基 為 最佳不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基 2 2 不定芽的增殖培養(yǎng) 將 不 定 芽 轉(zhuǎn) 接 到 不 同 增 殖 培 養(yǎng) 基 后約7 9 d 在 鱗 莖 基 部 出 現(xiàn) 不 同 數(shù) 量 的 小 的 不 定 芽 隨 后 逐 漸 長 成 新 的 小 鱗 莖 由表2和圖1B可 知 不 同 激 素 組 合 培 養(yǎng) 基 中 不 定 芽 的 增 殖 情 況 差 異 較 大 當6 BA 為0 8 mg L 1 NAA為0 1 mg L 1時 增 殖 系 數(shù) 為 1 21 增 殖 情 況 最 差 當6 BA為1 0 mg L 1 NAA 為 0 15 mg L 1時 增 殖 效 果 最 好 增 殖 系 數(shù) 為 4 63 比 比 實 驗 室 已 有 的 不 定 芽 增 殖 體 系 6 BA為 0 5 mg L 1 NAA為0 1 mg L 1 的 誘 導(dǎo) 系數(shù)3 21高 出了1 42 因 此 此 激 素 濃 度 組 合 的 培 養(yǎng) 基 為 最 佳 不定芽增殖激素培養(yǎng)基 2 3 鱗莖的膨大培養(yǎng) 如表3和圖1C所 示 在 蔗 糖 濃 度為30 90 mg L 1 時 隨 著 蔗 糖 濃 度 的 不 斷 提 高 不 定 芽 的 膨 大 的 越 明 顯 當 蔗 糖 濃 度為90 mg L 1時 鱗 莖 膨 大 最 明 顯 而 當 蔗 糖 濃 度為120 mg L 1時 不 定 芽 的 膨 大 速度開始下降 2 4 鱗莖的生根培養(yǎng) 將 鱗 莖 接 種 至 不 同 濃 度 的 生 根 培 養(yǎng) 基中3 d左 右 開 始 從 鱗 莖 基 本 生 長 出 根 如表4和圖1D所 示 呈 現(xiàn) 出 低 濃度NAA促 進 根 的 發(fā) 生 而 高 濃度NAA抑 制 根 發(fā) 生 在NAA濃 度為0 0 0 3 mg L 1時 隨 著 濃 度 的 不 斷 提 高 生 根 系 數(shù) 不 斷 提 高 NAA濃 度 為 0 3 mg L 1時 生 根 系 數(shù) 最 高 達4 63 而當NAA 濃度為0 4 mg L 1 生根系數(shù)開始下降 2 5 練苗與移栽 組 培 苗 鱗 莖 移 栽 至 消 毒 完 全 的 不 同 基 質(zhì) 中 10 d 左 右 出 現(xiàn) 鱗 片 葉 同 時 有 新 根 產(chǎn) 生 由表5可 知 在 草 炭 與 蛭 石 比 例為1 1的 基 質(zhì) 中 的 組 培 苗 移 栽 苗 長勢健壯且成活率最高達95 31 表 1 不同濃度6 BA NAA對不定芽誘導(dǎo)的影響 Tab 1 Effects of different concentrations of 6 BA and NAA on adventitious bud induction 基本培養(yǎng)基 6 BA mg L 1 NAA mg L 1 誘導(dǎo)系數(shù) MS 0 5 0 1 1 01 0 43d 0 5 0 2 1 83 1 14c 1 0 0 1 3 65 0 31a 1 0 0 2 2 63 0 02b 1 5 0 1 2 34 0 04b 1 5 0 2 1 32 0 23d 任君芳 等 東方百合 Vivian 高效離體快繁體系的建立 研究簡報 85 3 結(jié)論與討論 在 百 合 組 培 快 繁 技 術(shù) 中 培 養(yǎng) 基 中 激 素 的 種 類 及 不 同 激 素 濃 度 配 比 是 核 心 17 18 研 究 表 明 以 MS為 基 本 培 養(yǎng) 基 用6 BA和NAA兩 種 激 素 可 以 實 現(xiàn) 東 方 百 合 Vivian 的 不 定 芽 誘 導(dǎo) 增 殖 小 鱗 莖 膨 大 及 生 根 培 養(yǎng) 最 佳 不 定 芽 誘 導(dǎo) 培 養(yǎng) 基為MS 1 0 mg L 1 6 BA 0 1 mg L 1 NAA 30 g L 1蔗 糖 最 佳 不 定 芽 增 殖 培 養(yǎng) 基為MS 1 0 mg L 1 6 BA 0 1 mg L 1 NAA 60 g L 1蔗 糖 最 佳 小 鱗 莖 膨 大 培 養(yǎng) 基為MS 90 g L 1蔗 糖 最 佳 生 根 培 養(yǎng) 基為1 2 MS 0 1 mg L 1 表 2 不同濃度6 BA NAA對不定芽增殖的影響 Tab 2 Effects of different concentrations of 6 BA and NAA on adventitious bud proliferation 基本培養(yǎng)基 6 BA mg L 1 NAA mg L 1 增殖系數(shù) MS 0 8 0 1 1 21 1 31d 0 8 0 15 2 53 2 12c 1 0 0 1 3 21 1 23b 1 0 0 15 4 63 0 21a 1 2 0 1 3 34 1 31b 1 2 0 15 1 16 0 21d 表 3 不同濃度蔗糖對鱗莖膨大的影響 Tab 3 Effecdts of different concentrations of sucrose on bulblet enlargement 基本培養(yǎng)基 蔗糖 g L 1 直徑 cm MS 30 0 91 0 08c 60 1 43 0 14b 90 1 95 0 21a 120 1 33 0 23b 表 4 不同濃度NAA對生根的影響 Tab 4 Effecdts of different concentrations of NAA on rooting 基本培養(yǎng)基 NAA mg L 1 生根系數(shù) 1 2MS 0 0 1 22 0 78d 0 1 2 76 1 31c 0 2 3 62 1 10b 0 3 4 63 0 39a 0 4 2 92 1 11c 表 5 不同基質(zhì)對試管苗移栽的影晌 Tab 5 Effecdts of different media on the survival of plantlets 基質(zhì) 成活率 草炭 蛭石 2 1 71 12 4 12b 草炭 蛭石 1 1 95 31 1 21a 草炭 蛭石 1 2 67 21 4 14c A C D B 1 cm 1 cm 1 cm 1 cm A 不定芽誘導(dǎo) B 不定芽增殖 C 小鱗莖膨大 D 鱗莖生根 標尺 1 cm A Adventitious bud induction B Adventitious bud proliferation C Bulblet enlargement D Bulblet rooting Bar 1 cm 圖 1 東方百合 Vivian 組織培養(yǎng)再生體系 Fig 1 In vitro propagation of Oriental hybrid lily cultivar Vivian 四川林業(yè)科技 2020 年 第41 卷 第6 期 86 NAA 60 g L 1蔗糖 蔗 糖 濃 度 對 百 合 鱗 莖 的 膨 大 起 著 重 要 作 用 錢 劍 林 等 2004 研 究 表 明 當 培 養(yǎng) 基 中 蔗 糖 含 量 為 75 g L 1時 東 方 百 合 Sorbonne 小 鱗 莖 的 體 積 膨 大 系 數(shù) 最 大 20 張 延 龍 等 2006 以 Siberia 小 鱗 莖 為 試 材 研 究 了 不 同 蔗 糖 含 量 對 組 培 苗 的 影 響 發(fā) 現(xiàn) 蔗 糖 含 量 大于50 g L 1時 鱗 莖 體 積 開 始 增 大 到 90 g L 1時 直 徑 能 夠 達 到 最大1 59 cm 21 李 雪 艷 等 2016 對 蔗 糖 濃 度 對 東 方 百 合 Tiger Woods 小 鱗 莖 膨 大 的 研 究 表 明 當MS基 本 培 養(yǎng) 基 中 加入75 g L 1 的 蔗 糖 時 能 有 效 促 進 試 管 小 鱗 莖 直 徑 的 增 加 22 本 研 究 表 明 MS基 本 培 養(yǎng) 基含90 g L 1的 蔗 糖 最 有 利 于 東 方 百 合 Vivian 小 鱗 莖 的 膨 大 蔗 糖 含 量 繼 續(xù) 升 高 則 小 鱗 莖 體 積 不 會 繼 續(xù) 增 大 而 且 發(fā) 生 部 分 小 鱗 莖 產(chǎn) 生 褐 死 現(xiàn) 象 原 因 可 能 是 培 養(yǎng) 基 中 過 高 濃 度 蔗 糖 使 培 養(yǎng) 基 滲 透 壓 過 大 對 小 鱗 莖 產(chǎn) 生 了 脅 迫 從 而 不 利 于 其 膨 大 綜 上 所 述 不 同 百 合 品 種 由 于 遺 傳 差 異 適 合 各 自 小 鱗 莖 膨 大 的 最 適 蔗 糖 濃 度 有 所 不 同 所 以 在 對 新 品 種 小 鱗 莖 膨 大 培 養(yǎng) 過 程 中 對其蔗糖濃度進行優(yōu)化至關(guān)重要 本 研 究 建 立 的 東 方 百 合 Vivian 的 不 定 芽 誘 導(dǎo) 不 定 芽 增 殖 鱗 莖 膨 大 鱗 莖 生 根 等 過 程 的 組 織 培 養(yǎng) 快 繁 體 系 可 為 其 種 球 規(guī) 模 化 生 產(chǎn) 提 供 技 術(shù) 保 障 參考文獻 1 夏九成 鄭毅 陳志堅 等 百合不定芽的快速誘導(dǎo) J 基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué) 2011 30 1 35 39 2 張旭紅 王頔 梁振旭 等 歐洲百合愈傷組織誘導(dǎo)及植株再生體系的建立 J 植物學(xué)報 2018 53 6 840 847 3 張文婷 何燕紅 舒寧 等 金黃花滇百合植株再生與離體快繁技術(shù)體系的建立 J 植物學(xué)報 2019 54 6 773 778 4 羅曉波 齊良富 耿研會 宜昌百合離體培養(yǎng)快繁技術(shù)研究 J 四川林業(yè)科技 2015 36 5 75 78 5 崔祺 賈桂霞 OT 雜種系百合 Bay watch 離體再生體系的建立 J 東北林業(yè)大學(xué)學(xué)報 2014 42 5 34 38 6 趙芳 楊利平 Siberia 百合再生體系的建立 J 河北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報 2013 36 2 60 64 7 崔興林 秦新惠 劉芬 等 蘭州百合高效再生體系的建立 J 中國蔬菜 2014 6 44 46 8 向地英 薛木易 鄒麗紅 鐵炮百合離體再生體系的建立 J 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2015 43 2 55 57 9 馬生軍 丁萬紅 李淑珍 等 百合鱗片組織培養(yǎng)研究 J 生物技術(shù)通訊 2018 29 6 819 824 10 李鶯 李星 李生玲 等 黃天霸 百合花器官愈傷組織誘導(dǎo)及植株再生 J 熱帶作物學(xué)報 2013 34 8 1507 1512 11 蘇江 岑忠用 陽艷華 等 水晶布蘭卡百合鱗片的組織培養(yǎng)及快速繁殖條件 J 貴州農(nóng)業(yè)科學(xué) 2014 42 3 120 124 12 孫 紅 梅 宋 勝 利 申 屠 玥 等 亞 洲 百 合 Strawberry and Cream 花 器 官 組 培 快 繁 技 術(shù) 研 究 J 沈 陽 農(nóng) 業(yè) 大 學(xué) 學(xué) 報 2015 46 1 7 12 13 常琳 杜方 王麗婷 等 金石和伯爵百合鱗莖誘導(dǎo)及膨大研究 J 山西農(nóng)業(yè)科學(xué) 2018 46 8 1279 1281 1370 14 Han D Niimi Y Nakano M et al Regeneration of haploid plants from anther cultures of the Asiatic hybrid lily Connecticut King J Plant Cell Tissue and Organ Culture 1997 47 2 153 158 15 翟彥 張宗勤 賈敏 等 百合體細胞胚胎發(fā)生和植株再生 J 西北植物學(xué)報 2011 31 4 834 841 16 王雅楠 薛莉 雷家軍 新疆百合鱗片離體培養(yǎng)研究 J 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報 2017 48 4 30 35 17 Nhut D T Van Le B Fukai S et al Effects of activated charcoal explant size explant position and sucrose concentration on plant and shoot regeneration of Lilium longiflorum via young stem culture J Plant Growth Regulation 2001 33 1 59 65 18 Arzatefernandez A M Nakazaki T Okumoto Y et al Efficient callus induction and plant regeneration from filaments with anther in lily Lilium longiflorum Thunb J Plant Cell Reports 1997 16 12 836 840 19 Nhut D T Van Le B Tanaka M et al Shoot induction and plant regeneration from receptacle tissues of Lilium longiflorum J Scientia Horticulturae 2001 87 1 131 138 20 錢劍林 朱旭東 東方百合 sorbonne 試管成球和低溫處理的初步探討 J 園藝學(xué)報 2004 3 l 828 21 張延龍 梁建麗 牛立新 東方百合試管鱗莖膨大的研究 J 西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報 自然科學(xué)版 2006 34 6 75 78 22 李雪艷 嚴瑞 張靜 等 東方百合Tiger Woods離體快繁技術(shù)體系的建立 J 沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報 2016 47 6 654 660 圖 2 移栽成活的組培苗 Fig 2 Survival plantlets after transplanting 任君芳 等 東方百合 Vivian 高效離體快繁體系的建立 研究簡報 87 Summary for 東方百合 Vivian 高效離體快繁體系的建立 Establishment of an Efficient Approach in Vitro Propagation for Oriental Hybrid Lily Cultivar Vivian REN Junfang1 ZHANG Li1 LIU Jianxia1 SHAN Fengjiao2 LIU Qianli1 LI Changyu3 1 Aba Prefecture Institute of Forestry Science and Technology Wenchuan 623000 China 2 Forestry and Grassland Bureau of Aba Maerkang 624000 China 3 Forestry and Grassland Bureau of Wenchuan Wenchuan 623000 China Corresponding author 314241819 Abstract In order to develop an efficient approach for the rapid propagation of Oriental hybrid lily cultivar Vivian by tissue culture the scales were used as the explants The results showed that the best adventitious bud induction medium of Oriental hybrid lily cultivar Vivian was MS 1 0 mg L 1 6 BA 0 1 mg L 1 NAA 30 g L 1 sucrose 6 0 g L 1 agar and pH value was 6 0 The optimal medium for adventitious bud proliferation was MS 1 0 mg L 1 6 BA 0 15 mg L 1 NAA 60 g L 1 sucrose 6 0 g L 1 agar and the pH value was 6 0 The best medium for bulblet expansion was MS 90 g L 1 sucrose 6 0 g L 1 agar with pH value of 6 0 The optimal medium for bulblet rooting was 1 2 MS 0 3 mg L 1 NAA 60 g L 1 sucrose 6 0 g L 1 agar and the pH value was 6 0 Transplanted tissue culture seedlings in the substrate of the ratio of peat to vermiculite of 1 1 growed vigorously and the survival rate was up to 95 31 This efficient in vitro rapid propagation system can provide technical support for large scale production of Oriental hybrid lily cultivar Vivian Key words Oriental hybrid lily cultivar Vivian Tissue culture Rapid propagation doi 10 12172 202009010001 四川林業(yè)科技 2020 年 第41 卷 第6 期 88