江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào) 張志春 張 怡 沈迎春 等 殺蟲(chóng)真菌爪哇棒束孢對(duì)非洲菊煙粉虱作用特點(diǎn)和控害效果 江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào) 殺蟲(chóng)真菌爪哇棒束孢對(duì)非洲菊煙粉虱作用特點(diǎn)和控害 效果 張志春 張 怡 沈迎春 郭慧芳 江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所 江蘇南京 江蘇省農(nóng)藥總站 江蘇南京 收稿日期 基金項(xiàng)目 江蘇省農(nóng)業(yè)科技自主創(chuàng)新基金項(xiàng)目 江蘇 省農(nóng)業(yè)科學(xué)院基金項(xiàng)目 江蘇省農(nóng)業(yè)三新工程 項(xiàng)目 江蘇省特經(jīng)作物安全用藥篩選與登記項(xiàng)目 作者簡(jiǎn)介 張志春 男 江蘇如皋人 博士 副研 主要從事害 蟲(chóng)生物防治研究 通訊作者 郭慧芳 沈迎春 摘要 煙粉虱是非洲菊上常發(fā)害蟲(chóng) 主要依賴化學(xué)防治 但常用藥劑防治效果一般 生物防治是理想的替代 手段 本研究首先鑒定非洲菊煙粉虱的生物型 然后測(cè)定蟲(chóng)生真菌爪哇棒束孢對(duì)非洲菊煙粉虱的室內(nèi)殺蟲(chóng)活性 并對(duì)其田間防治效果進(jìn)行評(píng)價(jià) 結(jié)果表明 非洲菊煙粉虱屬于 型 爪哇棒束孢含量為 孢子以上對(duì)非 洲菊煙粉虱成蟲(chóng)即具有很高的致病力 后校正死亡率達(dá) 以上 后非洲菊煙粉虱成蟲(chóng)全部死亡 在濕度大 于 條件下 孢子爪哇棒束孢油懸劑稀釋到 孢子 對(duì)田間非洲菊煙粉虱具有較高的防 治效果 藥后 和 的校正防效分別為 和 說(shuō)明蟲(chóng)生真菌爪哇棒束孢對(duì)非洲菊上的煙粉虱 致病力高且實(shí)際防治效果好 可用于非洲菊等花卉煙粉虱的防治 關(guān)鍵詞 非洲菊 煙粉虱 爪哇棒束孢 生物防治 中圖分類號(hào) 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 文章編號(hào) 煙粉虱 屬半翅目粉 虱科 作為重要的入侵生物 其已成為一種世界性害 蟲(chóng) 可通過(guò)直接刺吸 分泌蜜露誘發(fā)煤煙病以及傳播 病毒等產(chǎn)生危害 給農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和經(jīng)濟(jì)作物造成極大 的危害 除為害蔬菜 棉花等經(jīng)濟(jì)作物外 煙粉 虱也是花卉上的重要害蟲(chóng) 長(zhǎng)期以來(lái) 煙粉虱的防 治主要以化學(xué)農(nóng)藥防治為主 導(dǎo)致害蟲(chóng)對(duì)常見(jiàn)的化 學(xué)農(nóng)藥如啶蟲(chóng)脒等產(chǎn)生了嚴(yán)重抗藥性 增加了防治 難度 且不同生物型煙粉虱在寄主適應(yīng)性 抗藥 性等方面均存在較大差異 進(jìn)一步增強(qiáng)了防治難 度 非洲菊 是世界五大鮮 切花之一 其花色繁多 花枝挺拔 花期長(zhǎng)且不易 衰敗 深受花卉種植者和消費(fèi)者喜愛(ài) 具有極高的經(jīng) 濟(jì)價(jià)值 然而由于非洲菊葉片寬大 是煙粉虱喜 好的寄主 受危害嚴(yán)重 嚴(yán)重時(shí)造成的霉污病不僅影 響光合作用 也影響非洲菊鮮切花的品質(zhì) 非洲菊 煙粉虱的防治同樣依賴化學(xué)農(nóng)藥 化學(xué)農(nóng)藥長(zhǎng)期單 一使用后造成煙粉虱抗藥性增強(qiáng) 由于繁殖速度 快 為害隱蔽 抗藥性強(qiáng) 煙粉虱的生物防治研究一 直備受關(guān)注 其中利用蟲(chóng)生真菌進(jìn)行生物防治已成 為替代化學(xué)防治的最重要手段之一 蠟蚧輪枝菌 球孢白僵菌 座殼孢菌 擬青毒等已被報(bào)道可作為生 物防治煙粉虱的殺蟲(chóng)真菌 其中球孢白僵菌已被 登記用于煙粉虱的防治 本實(shí)驗(yàn)室從田間煙粉虱中 分離出殺蟲(chóng)真菌爪哇棒束孢 并首次將這種真菌 登記為生物農(nóng)藥 用于蔬菜上煙粉虱的生物防治 為進(jìn)一步發(fā)揮生物農(nóng)藥爪哇棒束孢的作用 本試驗(yàn) 研究了爪哇棒束孢對(duì)非洲菊煙粉虱的室內(nèi)殺蟲(chóng)活性 和田間防治效果等 以探明爪哇棒束孢對(duì)非洲菊煙 粉虱的作用特點(diǎn)和防治潛力 提升花卉害蟲(chóng)生物防 治水平 材料與方法 試驗(yàn)材料 供試?yán)ハx(chóng) 非洲菊煙粉虱采自南京市農(nóng)業(yè) 科學(xué)研究所祿口基地 在人工氣候室 溫度 光周期 中用非洲菊飼養(yǎng) 供試藥劑 爪哇棒束孢 孢 子粉和 孢子爪哇棒束孢油懸劑由江蘇 省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所研制 試驗(yàn)方法 煙粉虱生物型鑒定 反應(yīng)擴(kuò)增單頭煙 粉虱 基因 根據(jù) 擎科生物科技有限公司 試劑盒說(shuō)明書(shū) 利用 加熱裂解法處理單頭煙粉虱作為 模板 擴(kuò)增所用引物為通用引物 上游引物 下游引物 擴(kuò) 增產(chǎn)物為 基因 末端大小為 左 右的部分序列 反應(yīng)體系 模板 加 至 反應(yīng)體 系于 變性 然后進(jìn)行 個(gè)循環(huán) 變 性 退火 延伸 然后再 延伸 反應(yīng)產(chǎn)物置于 冰箱保存 送擎科生 物科技有限公司測(cè)序 測(cè)序結(jié)果通過(guò) 網(wǎng)站上 的 進(jìn)行比對(duì)鑒定 室內(nèi)殺蟲(chóng)活性測(cè)定 將爪哇棒束孢孢子粉 用 吐溫 配置成 孢子 孢 子 孢子和 孢子 孢子 以 吐溫 作為對(duì)照 均勻噴霧于帶有采自非洲菊的煙 粉虱黃瓜葉正反面 待煙粉虱成蟲(chóng)穩(wěn)定不亂飛后 將 黃瓜葉片放于高濕環(huán)境中 每個(gè)處理重復(fù) 次 分別 于藥后 和 調(diào)查活蟲(chóng)數(shù) 計(jì)算死亡率 并與對(duì) 照死亡率進(jìn)行比較 計(jì)算校正死亡率 用唐啟義教 授開(kāi)發(fā)的 統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理 并 進(jìn)行差異顯著性比較 田間防效評(píng)價(jià) 在大棚中選取受煙粉虱危 害的非洲菊 做好標(biāo)記 每個(gè)小區(qū)標(biāo)記 株 將 孢子爪哇棒束孢油懸劑用水稀釋 倍和 倍即得到 和 孢子 個(gè)處 理 用電動(dòng)噴霧器均勻噴霧于非洲菊葉正反面 每個(gè) 處理設(shè) 個(gè)重復(fù) 每重復(fù) 株 同時(shí)用清水作對(duì)照 噴霧處理后大棚保持高濕環(huán)境 然后正常管理 后再次施以相同處理藥液 分別于第一次施藥 前 施藥后 和 調(diào)查活蟲(chóng)數(shù) 計(jì)算死亡率 并 與對(duì)照死亡率進(jìn)行比較 計(jì)算校正死亡率 感染率 為顯癥蟲(chóng)數(shù)占供試蟲(chóng)基數(shù)的百分率 用 統(tǒng) 計(jì)分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理 用 法進(jìn)行不同 處理間差異顯著性比較 結(jié)果與分析 煙粉虱生物型的鑒定 對(duì)煙粉虱 基因的擴(kuò)增結(jié)果表明 張志春等 殺蟲(chóng)真菌爪哇棒束孢對(duì)非洲菊煙粉虱作用特點(diǎn)和控害效果 產(chǎn)物大小約為 與預(yù)計(jì)中的產(chǎn)物大小相 近 無(wú)非特異性條帶 序列通過(guò) 比對(duì) 圖 初步確定為 型 利用 軟件 將非洲菊煙 粉虱 基因序列和 型煙粉虱 型煙粉虱 基因序列比對(duì) 結(jié)果發(fā)現(xiàn)非洲菊煙粉虱 序列和 型煙粉虱完全相同 非洲菊上的煙粉虱鑒 定為 型 圖 煙粉虱 基因序列比對(duì)結(jié)果 爪哇棒束孢對(duì)非洲菊煙粉虱的室內(nèi)殺蟲(chóng)活性 爪哇棒束孢對(duì)煙粉虱的侵染效果如圖 所示 從圖 中可以看出 爪哇棒束孢真菌侵染 后 在 煙粉虱體表就能長(zhǎng)滿菌絲 后 煙粉虱體表的爪 哇棒束孢就能產(chǎn)生大量孢子 可以繼續(xù)侵染其他煙 粉虱 處理后 處理后 未處理對(duì)照 圖 非洲菊煙粉虱感染爪哇棒束孢后的癥狀 爪哇棒束孢對(duì)非洲菊煙粉虱的室內(nèi)殺蟲(chóng)活性見(jiàn) 表 從表 中可以看出 爪哇棒束孢對(duì)非洲菊煙 粉虱的致病力因孢子含量不同而異 在孢子含量為 及以上時(shí) 對(duì)害蟲(chóng)表現(xiàn)出很高的致病活 性 處理后 校正死亡率即達(dá) 以上 高達(dá) 孢子含量為 時(shí) 爪哇棒束孢殺蟲(chóng) 江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào) 年第 卷第 期 活性較低 后校正死亡率為 爪哇棒束孢 處理后 對(duì)煙粉虱成蟲(chóng)的毒力回歸方程為 和 分別為 孢子和 孢子 處理后 對(duì)煙粉虱 成蟲(chóng)的毒力回歸方程為 和 分別為 孢子和 孢子 表 爪哇棒束孢對(duì)非洲菊煙粉虱的室內(nèi)活性 孢子含量 校正死亡率 處理后 處理后 同列數(shù)據(jù)后不同小寫(xiě)字母表示不同處理間差異達(dá) 顯著水平 爪哇棒束孢對(duì)非洲菊煙粉虱的田間防治效果 孢子爪哇棒束孢油懸劑對(duì)非洲菊 煙粉虱表現(xiàn)出理想的田間控害效果 從表 可以看 出 孢子爪哇棒束孢油懸劑配置成 和 孢子 個(gè)孢子含量藥液噴霧處 理 對(duì)溫室內(nèi)非洲菊煙粉虱均具有較好的防治效果 首次施藥后 孢子和 孢子 藥液對(duì)害蟲(chóng)的校正防效分別為 和 真菌感染率分別為 和 高孢子含量 處理感染率顯著高于低孢子含量處理 表 孢子爪哇棒束孢油懸劑對(duì)非洲菊煙粉虱的田間 防治效果 孢子含量 首次施藥后 校正死亡率 感染率 首次施藥后 校正死亡率 感染率 同列數(shù)據(jù)后不同小寫(xiě)字母表示不同處理間差異達(dá) 顯著水平 討論 利用蟲(chóng)生真菌防治害蟲(chóng)是生物防控的重要手 段 因其環(huán)境友好 對(duì)人畜安全 易于規(guī)模生產(chǎn) 難以 產(chǎn)生抗性等優(yōu)點(diǎn) 日益受到人們的重視和青睞 由 于長(zhǎng)期使用化學(xué)農(nóng)藥 非洲菊煙粉虱對(duì)一些常用化 學(xué)藥劑產(chǎn)生了很高的抗藥性 利用生物防治可以很 好地解決這些問(wèn)題 國(guó)內(nèi)外利用蟲(chóng)生真菌防治 煙粉虱已經(jīng)取得了一些成果 比如利用球孢白僵菌 玫煙色擬青霉菌和蠟蚧輪枝菌等蟲(chóng)生真菌能較好地 防治煙粉虱 前人研究發(fā)現(xiàn) 白僵菌在濕度 為 的室內(nèi)條件下對(duì)煙粉虱 齡若蟲(chóng)的 為 孢子 而玫煙色擬青霉菌的 為 孢子 孢子玫煙色棒束孢 菌株在室內(nèi)高濕條件下處理煙粉虱成蟲(chóng) 的校正死亡率為 而本研究結(jié)果表 明 在室內(nèi)爪哇棒束孢對(duì)非洲菊煙粉虱成蟲(chóng) 的 即為 孢子 顯著優(yōu)于玫煙色棒束 孢 菌株 對(duì)于煙粉虱等害蟲(chóng)的殺蟲(chóng)真菌研究 大多數(shù)局 限于對(duì)殺蟲(chóng)真菌的室內(nèi)活性研究 缺少田間條件下 對(duì)害蟲(chóng)的殺蟲(chóng)效果評(píng)價(jià) 本研究發(fā)現(xiàn) 爪哇棒束孢 油懸劑對(duì)設(shè)施大棚的非洲菊煙粉虱也具有很好的防 治效果 有效成分用量為 孢子時(shí) 的校正防效達(dá) 的校正防效達(dá) 且真菌感染率很高 綜合上述研究結(jié)果表 明 爪哇棒束孢對(duì)非洲菊煙粉虱的生物防治潛力大 除已開(kāi)發(fā)用于蔬菜上的煙粉虱防治產(chǎn)品外 也可開(kāi) 發(fā)用于非洲菊等花卉上煙粉虱防治產(chǎn)品 由于殺蟲(chóng) 真菌的侵染特點(diǎn) 施藥后 內(nèi)需要田間保持高濕 度 有可能帶來(lái)田間病害增加的風(fēng)險(xiǎn) 如何協(xié)調(diào)設(shè) 施內(nèi)病蟲(chóng)害的防控 營(yíng)造短期高濕度條件以發(fā)揮殺 蟲(chóng)真菌對(duì)害蟲(chóng)的防控作用 同時(shí)減少對(duì)病害發(fā)生的 直接影響 需要進(jìn)一步根據(jù)不同作物種類及生長(zhǎng)期 等進(jìn)行病蟲(chóng)害發(fā)生和控制的系統(tǒng)研究 參考文獻(xiàn) 許麗麗 蔡 力 沈偉江 等 中國(guó)部分地區(qū)煙粉虱生物型種類 及系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系分析 應(yīng)用生態(tài)報(bào) 張志春等 殺蟲(chóng)真菌爪哇棒束孢對(duì)非洲菊煙粉虱作用特點(diǎn)和控害效果 何玉仙 翁啟勇 黃 建 等 煙粉虱田間種群的抗藥性 應(yīng) 用生態(tài)學(xué)報(bào) 鄭 宇 趙建偉 何玉仙 等 福建省煙粉虱田間種群抗藥性發(fā) 展及其影響因素 應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào) 郝向陽(yáng) 林 覓 孫雪麗 等 福建非洲菊產(chǎn)區(qū)根腐病病原菌的 分離與鑒定 福建農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào) 焦元辰 郝向陽(yáng) 孫雪麗 等 不同激素和非生物脅迫處理對(duì)非 洲菊 活性的影響 園藝與種苗 王 慧 孔維娜 馬瑞燕 煙粉虱生物防治研究進(jìn)展 山西 農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào) 宋薇薇 朱 輝 余鳳玉 等 植物內(nèi)生菌及其對(duì)植物病害的防 治作用綜述 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 李 歡 曹雪梅 陳 茹 等 高效拮抗鏈孢霉和綠色木霉海洋 細(xì)菌的篩選及鑒定 南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào) 蔣 妮 白丹宇 宋利沙 等 棘孢木霉 菌株對(duì)三七灰霉病 的生物防治作用 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 梁 麗 田 晶 馬瑞燕 玫煙色棒束孢研究進(jìn)展 山西農(nóng) 業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào) 王聯(lián)德 黃 建 煙粉虱的為害及其生物防治策略 福建農(nóng) 業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào) 劉 召 雷仲仁 對(duì)煙粉虱具有高致病力的蟲(chóng)生真菌篩選 中國(guó)蔬菜 田 晶 田浩楷 刁紅亮 等 玫煙色棒束孢對(duì)煙粉虱致病的時(shí) 間 劑量 死亡率模型分析 河南農(nóng)業(yè)科學(xué) 責(zé)任編輯 陳海霞 江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào) 年第 卷第 期