PECIAL ECONOMIC ANIMALS AND PLANTS 特種經(jīng)濟(jì)動植物 S 51 2020 年 第 12 期 金針菇工廠化液體菌種制備關(guān)鍵技術(shù) 王偉霞 1 2 張 婷 1 3 仝樂濤 1 4 李福后 1 2 1 江蘇海洋大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院 江蘇 連云港 222005 2 江蘇省海洋資源開發(fā)研究院 江蘇 連云港 222005 3 連云港市質(zhì)量技術(shù)綜合檢驗(yàn)檢測中心 江蘇 連云港 222006 4 連云港友和食用菌有限公司 江蘇 連云港 223500 摘要 本文對用于金針菇工廠化栽培的液體菌種制備關(guān)鍵技術(shù)進(jìn)行了綜述 包括培養(yǎng)基配方 制 備工藝以及注意事項(xiàng)等 以期進(jìn)一步推動金針菇工廠化栽培的發(fā)展 關(guān)鍵詞 金針菇 液體菌種 制備 金針菇是我國食用菌工廠化栽培的主要品種 之一 目前 金針菇工廠化栽培已成為金針菇生 產(chǎn)的主要模式 液體菌種使用逐步代替固體菌種 用于金針菇工廠化生產(chǎn)是今后的發(fā)展趨勢 開展 金針菇液體菌種研發(fā)和工廠化生產(chǎn)應(yīng)用 可有效 提高企業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益 促進(jìn)產(chǎn)業(yè)可持續(xù)發(fā)展 1 培養(yǎng)基 金針菇液體菌種制備主要涉及三種培養(yǎng)基 分別是 P D A 固體培養(yǎng)基 搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)基和 發(fā)酵罐培養(yǎng)基等 目前已報(bào)道了多種搖瓶發(fā)酵 培養(yǎng)基和發(fā)酵罐培養(yǎng)基配方 都取得了明顯實(shí) 效 1 4 1 1 搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)基 配方 1 葡萄糖 2 0 g 蛋白胨 2 g 磷酸二 氫鉀 1g 硫酸鎂 0 5g 檸檬酸三鈉 1g 氯化鈣 0 1g 硫 酸 亞 鐵 1mg 硫 酸 錳 1mg V B1 0 1 g V B2 0 1 g 水 1 000mL 配方 2 可溶性淀粉 40g 葡萄糖 10g 蛋白 胨 3g 磷酸二氫鉀 1g 硫酸鎂 0 5g V B1 10 g V B2 50 g 水 1 000mL 1 2 發(fā)酵罐培養(yǎng)基 配方 1 馬鈴薯 150g 麩皮 30g 蔗糖 20g 磷酸二氫鉀 1g 硫酸鎂 0 5g 水 1 000mL 配方 2 豆粕粉 40g 白砂糖 10g 磷酸二 氫鉀 1g 硫酸鎂 0 5g V B1 100 g V B2 500 g 水 1 000mL 配方 3 玉米粉 50g 麩皮 30g 磷酸二氫 鉀 1g 硫 酸 鎂 0 5g V B1 0 1 g V B2 0 5 g 水 1 000mL 在發(fā)酵罐培養(yǎng)基中 一般加入適量的消泡劑 如聚二甲基硅氧烷乳液等 可有效防止泡沫的形 成 避免泡沫對液體菌種發(fā)酵過程造成影響 2 液體菌種制備過程 在金針菇工廠化液體菌種制備過程中 為 了有效縮短生長周期和避免不必要的污染 生產(chǎn) 企業(yè)多采用搖瓶液體種子直接接入發(fā)酵罐培養(yǎng)基 中 其具體工藝為 試管或平板固體菌種 搖瓶 發(fā)酵 發(fā)酵罐菌種 接種栽培料 具體過程如下 2 1 平板接種菌種 選用 PDA 平板培養(yǎng)基 于平板中央接種一 塊直徑約 0 5cm 的菌種塊 25 條件下培養(yǎng) 金 針菇氣生菌絲發(fā)達(dá) 一般 6 7d 即可長滿整個平 板 建議使用平板 9cm 培養(yǎng)皿 來培養(yǎng)固體菌種 一是有利于觀察菌種的氣生菌絲生長狀況 二是 有利于從菌落邊緣打孔 2 2 搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)菌絲 利 用 1 000mL 搖 瓶 裝 入 600mL 發(fā) 酵 培 養(yǎng)基 滅菌后備用 用打孔器從平板菌落邊緣 打孔 接種到搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)基 接種量為 8 10 塊 固 體 菌 種 直 徑 5mm 轉(zhuǎn) 速 160r min 23 培養(yǎng) 6 7d 為了防止菌絲球凝結(jié)在一起 可利用磁力攪拌器將種子液中的菌絲塊打散 圖 1 A 2 3 發(fā)酵罐接種菌種 利用 1 000L 氣動式發(fā)酵罐 裝入 800L 發(fā)酵 培養(yǎng)基 高壓蒸汽滅菌后備用 接種量為 1 2 特種植物 特色蔬菜 52 2020 年 第 12 期 23 條件下培養(yǎng) 6 7d 即可放罐 用于接種栽培 料 圖 1 B 圖1 搖瓶和發(fā)酵罐培養(yǎng) 3 注意事項(xiàng) 3 1 防止雜菌污染 液體菌種制種效率高 易實(shí)現(xiàn)工廠化操作 但雜菌污染是液體菌種制備過程中不容忽視的問 題 特別是中小型金針菇生產(chǎn)企業(yè) 抗風(fēng)險能力 弱 一旦發(fā)生雜菌污染 極有可能造成破產(chǎn)倒閉 造成雜菌污染的原因主要有三個 一是技術(shù)操作 問題 二是發(fā)酵罐及附屬設(shè)備滲漏 三是菌種 染菌 針對以上問題 建議企業(yè)可采取如下措施 將風(fēng)險控制到最低范圍 定期培訓(xùn)技術(shù)操作人員 提升技術(shù)操作人員理論和操作水平 建立發(fā)酵車 間操作規(guī)范 引導(dǎo)技術(shù)人員按章操作 定期檢查 和維護(hù)設(shè)備 避免設(shè)備跑冒滴漏 定期開展菌種 純化和檢驗(yàn)工作 利用平板培養(yǎng) 顯微鏡觀察等 方法 及時判斷菌種是否感染雜菌等 3 2 維護(hù)菌種穩(wěn)定 菌種是企業(yè)生產(chǎn)的核心 維護(hù)菌種穩(wěn)定是企 業(yè)高產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn)的關(guān)鍵 企業(yè)應(yīng)每周對液體菌種進(jìn)行 一次抽樣檢測 檢測方法有回接平板培養(yǎng) 顯微 鏡觀察等 通過觀察氣生菌絲生產(chǎn)狀況 鎖狀聯(lián) 合有無 見圖 2 等初步判斷菌種質(zhì)量 防止菌 種退化對企業(yè)造成不可挽回的損失 馬丹丹等 5 發(fā)現(xiàn) 利用加入溴百里芬藍(lán)的 LBL 液體培養(yǎng)基可 排除退化嚴(yán)重菌株 退化嚴(yán)重的菌株脫色能力差 建議生產(chǎn)企業(yè)可推廣使用 圖2 金針菇平板培養(yǎng)和顯微鏡觀察 鎖狀聯(lián)合 參考文獻(xiàn) 1 宋士良 金針菇液體制種技術(shù) J 農(nóng)業(yè)科技通訊 1993 01 17 2 陳力力 劉紅 鄒正 金針菇液體菌種的制備及栽培試 驗(yàn) J 食用菌 2011 33 02 13 14 3 李國慶 柯家厚 焦小雨 等 金針菇工廠化生產(chǎn)的液體 菌種開發(fā)與應(yīng)用 J 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué) 2017 45 20 53 55 4 黃竹青 鄭劍玲 鄧鐵宏 等 白色金針菇液體菌種制備 及工廠化生產(chǎn)應(yīng)用初探 J 微生物學(xué)雜志 2013 33 02 75 79 5 馬丹丹 余昌霞 陳輝 等 生產(chǎn)用金針菇菌種退化的快 速判斷 J 食用菌學(xué)報(bào) 2012 19 01 36 38 基金項(xiàng)目 連云港市第五期 521工程 資助項(xiàng)目 2017 灌南縣農(nóng)業(yè)科技計(jì)劃 GN201805 作者簡介 王偉霞 1977 女 講師 研究方向 食用菌工廠 化栽培 通訊作者 李福后 1978 男 副教授 研究方向 食用菌 工廠化栽培和設(shè)施園藝技術(shù)推廣 應(yīng)對移栽苗進(jìn)行一次澆透水 雨季移栽時 選擇在 雨 天 前 栽 植 可 不 必 澆 水 3 3 結(jié)語 在樟子松容器育苗栽培技術(shù)的運(yùn)用中 應(yīng)把 握好技術(shù)操作要點(diǎn) 才有助于提高干旱地區(qū)樟子松 造林成活率和造林效果 參考文獻(xiàn) 1 凌利宏 邵百惠 夏得月 容器苗養(yǎng)護(hù)管理研究 J 安徽農(nóng) 業(yè)科學(xué) 2020 08 140 142 2 賈艷才 樟子松容器苗播種繁育技術(shù)要點(diǎn) J 江西農(nóng) 業(yè) 2020 04 52 53 3 趙亮 章古臺地區(qū)樟子松抗旱造林關(guān)鍵技術(shù)分析 J 防護(hù) 林科技 2019 05 70 71 上接第47頁