收稿日期 2019 03 22 基金項(xiàng)目 上海市農(nóng)委基礎(chǔ)研究項(xiàng)目 滬農(nóng)科攻字 2014 第7 3 6號(hào) 上海市市級(jí)農(nóng)口系統(tǒng)青年人才成長(zhǎng) 劃 滬農(nóng)青字 2018 第1 38號(hào) 國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目 31401599 美國(guó)外交部國(guó)際教育協(xié)會(huì)英美聯(lián)合全球創(chuàng)新倡議 GII 項(xiàng)目 GRT00033913 作者簡(jiǎn)介 李會(huì)賢 1995 女 碩士 研究方向 食品微 物 E mail xian529616860 qq com 通信作者 E mail shao saas 163 com 上海農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào) 2020 36 5 91 95 http www nyxb sh cn Acta Agriculturae Shanghai DOI 10 15955 j issn1000 3924 2020 05 18 李會(huì)賢 趙晶 姚春霞 等 施用有機(jī)肥對(duì) 菜和 壤中可培養(yǎng)抗 素耐藥菌的影響 J 上海農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào) 2020 36 5 91 95 施用有機(jī)肥對(duì)生菜和土壤中可培養(yǎng)抗生素耐藥菌的影響 李會(huì)賢1 2 趙 晶2 3 姚春霞2 4 黃柳娟2 馮 博2 王 華5 6 王衛(wèi)國(guó)7 邵 毅2 4 1上海海洋大學(xué)食品學(xué)院 上海201306 2上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品質(zhì) 標(biāo)準(zhǔn)與檢測(cè)技術(shù)研究所 上海201403 3華東師范大學(xué)地理科學(xué)學(xué)院 上海200241 4上海市設(shè)施園藝技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 上海201403 5美國(guó)俄亥俄州立大學(xué)食品科學(xué)與技術(shù)系 哥倫布43210 6復(fù)旦大學(xué) 命科學(xué)學(xué)院 上海200433 7上海國(guó)榮果業(yè)專業(yè)合作社 上海201516 摘 要 為研究施有機(jī)肥對(duì) 菜及 壤中抗 素耐藥菌的影響 用盆栽試驗(yàn)和平板 數(shù)法研究了施肥后采 摘期 菜和 壤中可培養(yǎng)細(xì)菌對(duì)四環(huán)素 TET 強(qiáng)力霉素 DOX 磺胺甲惡唑 SUL 頭孢噻肟 CTX 紅霉素 ERM 環(huán)丙沙星 CIP 和萘啶酸 NDA 7種抗 素的耐藥水平 用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)篩查了8種耐藥基因和 整合酶基因的存在情況 結(jié)果表明 栽培30 d的 菜表面未篩查到四環(huán)素耐藥菌TETS和強(qiáng)力霉素耐藥菌 DOXS 其他 菜中7種耐藥菌占總菌的百分比均高于對(duì)照組 壤中TETS CIPS NDAS ERMS和SULS 5類耐藥菌 的比例在施肥后均顯著增加 施肥后45 d內(nèi) 菜和 壤中耐藥基因的檢出率均高于對(duì)照組 因此 施用富含耐 藥菌的有機(jī)肥會(huì)提高采摘期 菜及 壤中可培養(yǎng)耐藥菌的污染水平 關(guān)鍵詞 耐藥菌 耐藥基因 菜 壤 有機(jī)肥 中圖分類號(hào) S141 文獻(xiàn)標(biāo)志碼 A 文章編號(hào) 1000 3924 2020 05 091 05 Influence of organic fertilizer application on the profiles of cultivable antibiotic resistant bacteria in lettuce and soil samples LI Huixian1 2 ZHAO Jing2 3 YAO Chunxia2 4 HUANG Liujuan2 FENG Bo2 WANG Hua5 6 WANG Weiguo7 SHAO Yi2 4 1 College of Food Science and Technology Shanghai Ocean University Shanghai 201306 China 2 Institute for Agri food Standards and Testing Technology Shanghai Academy of Agricultural Sciences Shanghai 201403 China 3 School of Geographic Sciences East China Normal University Shanghai 200241 China 4 Shanghai Key Laboratory of Protected Horticultural Technology Shanghai 201403 China 5 Department of Food Science and Technology The Ohio State University Columbus 43210 USA 6 School of Life Sciences Fudan University Shanghai 200433 China 7 Shanghai Guorong Fruit Professional Cooperative Shanghai 201506 China Abstract In oSdeS to investigate the influence of application of oSganic feStilizeS on the pSofiles of tetSacycline TET doxycycline DOX sulfamethoxazole SUL cefotaxime CTX eSythSomycin ERM cipSofloxacin CIP and nalidixic acid NDA Sesistant bacteSia in lettuce and soil samples the pSevalence of Sesistant bacteSia and Selated genes weSe studied by potting expeSiment with methods of plate count and PolymeSase Chain Reaction PCR Sespectively The Sesults showed that the peScentages of seven antibiotic Sesistant bacteSia in lettuce samples of oSganic manuSe tSeated gSoup weSe higheS than that of contSol gSoup and the TETS and DOXS weSe not detected in 30 d lettuce samples Meanwhile the peScentages of TETS CIPS NDAS ERMS and SULS weSe obviously incSeased in soil samples afteS applying of oSganic manuSe MoSeoveS the pSevalence of antibiotic Sesistance genes in both of feStilized lettuce and soil samples weSe higheS than that of 李會(huì)賢 等 施用有機(jī)肥對(duì) 菜和 壤中可培養(yǎng)抗 素耐藥菌的影響 untSeated gSoups Thus the contamination levels of ART commensal bacteSia in commeScial lettuce and soil samples would be incSeased by applying oSganic feStilizeS which was Sich in ART bacteSia Key words Antibiotic Sesistant bacteSia Antibiotic Sesistance genes Lettuce Soil OSganic feStilizeS 抗 素在養(yǎng)殖業(yè)中的過 應(yīng)用易引發(fā)細(xì)菌產(chǎn) 耐藥性 AR 會(huì)對(duì)環(huán)境和食品的安全造成嚴(yán)重影響 除了動(dòng)物源性農(nóng)產(chǎn)品 研究人員在蔬果產(chǎn)品中也發(fā)現(xiàn)了耐藥菌 ART 1 2 但其污染來源尚不明確 栽培 要素中的 壤 3 4 灌溉水 5 糞肥 6 有機(jī)肥 7 甚至空氣 8 中富含的ART菌和AR基因 都是蔬果表面 ART菌的潛在來源 此外 壤中的抗 素殘留也有可能對(duì)蔬菜內(nèi) 菌造成耐藥壓力 9 揭示種植過程 中各栽培要素及種植操作對(duì)蔬果產(chǎn)品 特別是對(duì)即食蔬果產(chǎn)品中ART菌的影響 是保證其微 物安全性 的基礎(chǔ) 目前 有關(guān)農(nóng)產(chǎn)品中ART菌的研究主要集中在致病菌的耐藥性篩查和耐藥機(jī)制等方面 10 11 但致病 菌僅占整 細(xì)菌 態(tài)系統(tǒng)中的很小一部分 且諸多證據(jù)表明 多種非致病菌均可成為AR基因的供體 受 體及中間體 對(duì)AR基因的水平遷移擴(kuò)散具有重要作用 12 目前 已在蔬果中發(fā)現(xiàn)了大 的AR基因移動(dòng) 原件 13 表明蔬果中AR基因水平遷移現(xiàn)象的存在 因此 亟需在整 細(xì)菌 態(tài)系統(tǒng)范圍內(nèi)展開研究 以 揭示不同栽培要素和操作對(duì)蔬果產(chǎn)品中的ART菌發(fā) 的影響 本研究通過盆栽試驗(yàn) 探究單次施用有機(jī) 肥對(duì)采摘期 菜及其栽培 壤中7類ART菌數(shù) 以及8種AR基因存在情況的影響 為揭示鮮食 菜表 面耐藥菌的污染來源提供依據(jù) 1 材料與方法 1 1 材料與處理 1 1 1 生菜栽培 施肥處理及采樣 菜栽培試驗(yàn)在上海普南園藝場(chǎng)進(jìn)行 周邊無大型養(yǎng)殖場(chǎng) 盆栽試驗(yàn)共設(shè)2 處理組 分別為未施 用有機(jī)肥組 CK 和施用有機(jī)肥組 OMT OSganic manuSe tSeated 在50 cm 長(zhǎng) 20 cm 寬 20 cm 深 的塑料盆中裝4 5盆 5 kg OMT組在 壤表面施加當(dāng)?shù)剞r(nóng)資店購(gòu)買的商品化雞糞肥200 g 有機(jī) 肥與 壤的質(zhì) 比為1 25 一次性施入并混勻 大小及葉片數(shù) 均一致的 菜苗于施肥當(dāng)天移植入塑 料盆中 苗間距一致 每盆8棵 每組3盆 栽培期間用自來水作為灌溉水源 栽培0 d 30 d和45 d后從 每 盆中隨機(jī)采集 凈的 菜葉和根層 壤表層3 4 cm 壤樣品 于冰盒中存放 并于當(dāng)天運(yùn)回實(shí)驗(yàn) 室進(jìn)行耐藥菌的分離 1 1 2 市售生菜及處理 市售 菜產(chǎn)品購(gòu)自上海市大型菜場(chǎng) 采后于冰盒中存放 2 h內(nèi)運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室 清洗10 min或浸泡 30 min后篩查耐藥菌 1 2 儀器與試劑 1300 SERIES A2型 物安全柜 美國(guó)TheSmo FisheS Scientific公司 SX 500型高壓滅菌鍋 日本TOMY 公司 BAGMIXER400型勻漿機(jī) 法國(guó)InteSscience公司 MedcenteS EinSichtungen GmbH型恒溫培養(yǎng)箱 德國(guó) FSiocell公司 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) PCR 儀和核酸電泳系統(tǒng) 美國(guó)Bio Sad公司 全自動(dòng)凝膠成像系統(tǒng) 上海復(fù) 日科技有限公司 抗 素粉末四環(huán)素 TetSacycline TET 強(qiáng)力霉素 Doxycycline DOX 磺胺甲惡唑 Sulfamethoxazole SUL 和三甲氧芐氨嘧啶 TSimethopSim TRI 頭孢噻肟 Cefotaxime CTX 紅霉素 ESythSomycin ERM 環(huán)丙沙星 CipSofloxacin CIP 萘啶酸 Nalidixic acid NDA 購(gòu)自美國(guó)Sigma公司 放線菌酮 Cycloheximide CYC 購(gòu)自美國(guó)AmSesco公司 腦心浸液肉湯 BSain heaSt infusion BHI 瓊脂培養(yǎng)基購(gòu)自英 國(guó)Oxoid公司 PCR試劑購(gòu)自北京全式金 物技術(shù)有限公司 PCR引物 14 由 物 程 上海 股份有 限公司合成 1 3 方法 1 3 1 可培養(yǎng)耐藥菌的篩查和計(jì)數(shù) 10 g 壤 菜或雞糞肥樣品分別與90 mL 0 9 的 理鹽水裝入無菌袋中 用勻漿機(jī)拍打10 min 29 上 海 農(nóng) 業(yè) 學(xué) 報(bào) 10倍梯度依次稀釋 每 濃度梯度分別取200 L懸濁液均勻涂布于含有16 g mL TET 16 g mL DOX 152 g mL SUL和8 g mL TRI 4 g mL CTX 100 g mL ERM 4 g mL CIP或8 g mL NDA的BHI培 養(yǎng)基平板上 15 每 培養(yǎng)基平板內(nèi)均含有100 g mL CYC以抑制酵母菌和霉菌的 長(zhǎng) 平板倒置于 30 培養(yǎng)箱中 培養(yǎng)48 h后進(jìn)行可培養(yǎng)耐藥菌的菌落 數(shù) 樣品均質(zhì)液梯度稀釋后涂布于不含抗 素 僅含CYC的BHI平板中 30 培養(yǎng)48 h后進(jìn)行可培養(yǎng)總菌的菌落 數(shù) 每 樣品重復(fù)3次 1 3 2 耐藥基因的篩查 根據(jù)菌落形態(tài) 在每 采樣點(diǎn)隨機(jī)挑取至少25株具有四環(huán)素耐藥表型或磺胺耐藥表型的細(xì)菌 用 PCR法篩查8 耐藥基因tetA tetB tetC tetG tetL tetM sul1 sul2和一類整合酶基因intI 14 1 3 3 數(shù)據(jù)處理 菜 壤和有機(jī)肥中ART菌的 數(shù)結(jié)果及耐藥菌占總菌的比例用 平均值 標(biāo)準(zhǔn)誤差 表示 用 SPSS 16 0軟件的單因素方差分析 one way ANOVA 方法比較處理組與對(duì)照組中耐藥菌占總菌的百分比 的差異顯著性 當(dāng)P 0 05時(shí) 差異顯著 2 結(jié)果與分析 2 1 市售生菜中可培養(yǎng)耐藥菌的計(jì)數(shù) 市售 菜表面普遍存在耐藥菌 除未發(fā)現(xiàn)強(qiáng)力霉素耐藥菌 DOXS 外 對(duì)本研究涉及的幾種抗 素耐 藥的細(xì)菌均有不同程度檢出 甚至在清洗10 min或浸泡30 min后的 菜中仍檢出一定水平具有耐藥表型 的細(xì)菌 表1 表1 市售生菜中可培養(yǎng)總菌和耐藥菌數(shù)量 Table 1 Counts of cultivable total bacteria and ART bacteria in lettuce samples from markets 耐藥菌可培養(yǎng)菌數(shù) lg CFU g 1 菜1 菜2 菜3 菜4 菜 清洗 菜 浸泡 BHI 5 77 0 05 7 93 0 06 4 48 0 07 5 93 0 05 5 81 0 03 4 75 0 20 TETS 3 43 0 07 6 66 0 08 0 00 0 00 0 00 0 00 2 18 0 12 3 76 0 11 DOXS 0 00 0 00 0 00 0 00 0 00 0 00 0 00 0 00 0 00 0 00 0 00 0 00 SULS 5 74 0 07 7 88 0 07 3 48 0 08 4 19 0 06 4 68 0 08 4 74 0 03 CTXS 5 69 0 07 7 65 0 07 4 46 0 08 5 21 0 05 4 85 0 09 4 68 0 12 ERMS 5 72 0 08 4 52 0 08 3 64 0 04 4 13 0 07 3 86 0 09 3 66 0 03 CIPS 4 81 0 08 7 69 0 04 4 37 0 06 5 35 0 06 4 74 0 03 3 72 0 05 NDAS 5 67 0 04 7 56 0 01 4 41 0 08 5 62 0 08 5 14 0 05 4 52 0 09 2 2 有機(jī)肥 土壤與生菜苗中可培養(yǎng)耐藥菌的本底水平 雞糞肥中能檢出7種耐藥菌 其 數(shù)均高于106 CFU g 比 壤和 菜苗中可培養(yǎng)耐藥菌的本底水平 高1 6 數(shù) 級(jí) 有機(jī)肥中除CTXS和SULS外 其余耐藥菌占總菌比例均高于 壤 壤和 菜苗中 均未發(fā)現(xiàn)DOXS 壤中其他耐藥菌的數(shù) 和占總菌的比例均高于 菜苗 且耐藥菌的數(shù) 高于 菜苗 0 1 數(shù) 級(jí) 表2 比較有機(jī)肥 壤與 菜苗中耐藥菌的本底水平 推測(cè)富含大 耐藥菌的有機(jī)肥 通過直接接觸這一途徑將更多的耐藥菌引入 壤環(huán)境 進(jìn)而在栽培過程中污染 菜產(chǎn)品 表2 雞糞肥 土壤和生菜苗中可培養(yǎng)耐藥菌本底水平及占可培養(yǎng)總菌的比例 Table 2 Background levels and percentages of cultivable antibiotic resistant bacteria in chicken manure soil and lettuce samples 耐藥菌有機(jī)肥數(shù) lg CFU g 1 比例 壤數(shù) lg CFU g 1 比例 菜數(shù) lg CFU g 1 比例 BHI 9 43 0 03 100 00 0 00 6 99 0 07 100 00 0 00 6 81 0 05 100 00 0 00 TETS 9 10 0 10 47 35 12 52 4 17 0 11 0 15 0 04 2 74 0 06 0 01 0 00 DOXS 6 05 0 06 0 04 0 00 0 00 0 00 0 00 0 00 0 00 0 00 0 00 0 00 SULS 8 16 0 13 5 29 1 12 6 05 0 13 11 47 2 03 5 86 0 05 11 24 1 47 CTXS 7 48 0 04 1 12 0 06 6 32 0 17 21 62 7 45 5 38 0 16 3 77 1 59 ERMS 7 38 0 06 0 89 0 08 3 41 0 02 0 03 0 00 3 12 0 06 0 02 0 00 CIPS 8 22 0 10 6 20 1 77 5 53 0 18 3 40 0 93 4 72 0 09 0 82 0 22 NDAS 9 41 0 05 94 66 09 58 6 96 0 11 97 34 43 52 6 13 0 08 21 24 5 48 39 李會(huì)賢 等 施用有機(jī)肥對(duì) 菜和 壤中可培養(yǎng)抗 素耐藥菌的影響 2 3 單次施用有機(jī)肥對(duì)生菜和土壤中可培養(yǎng)耐藥菌數(shù)量的影響 菜栽培至第30天和第45天 其表面CTXS SULS NDAS CIPS ERMS 5類耐藥菌占總菌的百分比均 顯著高于未施肥組 達(dá)7 88 100 00 是對(duì)照組的1 15 10 43倍 TETS和DOXS僅在栽培45 d樣品 中檢出 其中TETS在對(duì)照組和處理組中分別占總菌的0 01 和2 47 DOXS僅在處理組中發(fā)現(xiàn) 占總菌 的2 35 圖1 a 因此 不論是耐藥菌的種類還是數(shù) 施肥組的 菜均高于對(duì)照組 說明單次施用 有機(jī)肥會(huì)提高 菜表面ART菌的污染水平 同時(shí) 比較未處理組采摘期與0 d 菜樣品表面的ART菌 表2 發(fā)現(xiàn)除SULS TETS和DOXS外 其他4類ART菌占總菌的比例均顯著升高 說明除了施肥處理外 還有其他因素會(huì)導(dǎo)致 菜表面ART菌的累積 栽培30 d和45 d時(shí) 施肥組 壤中可培養(yǎng)耐藥菌占總菌的百分比較CK組有所增加 增加倍數(shù)因耐 藥菌種類不同而不同 30 d時(shí) TETS CIPS NDAS ERMS和SULS 5種耐藥菌占總菌的百分比提高至對(duì)照組 的5 52倍 3 98倍 1 43倍 1 27倍 1 2倍 45 d時(shí)提高至對(duì)照組的513 74倍 15 63倍 2 35倍 22 21倍 2 15倍 30 d時(shí) 對(duì)照組和施肥組的CTXS占總菌的百分比并無差異 而到45 d時(shí) 施肥組中 CTXS的百分比略高于不施肥組 是其1 27倍 30 d時(shí) 兩組 壤中均未檢出DOXS 但在45 d施肥組中檢 出 為1 66 102 CFU g 占總菌的0 48 圖1 b K TX S 46L S TET S 0X S A S I1 S ER S B 0 T 100 80 60 40 20 0 時(shí) 間 d 占 30 45 30 45 30 45 30 45 30 45 30 45 30 45 K TX S 46L S TET S 0X S A S I1 S ER S C 0 T 100 80 60 40 20 0 時(shí) 間 d 占 30 45 30 45 30 45 30 45 30 45 30 45 30 45 圖1 生菜 a 和土壤 b 中可培養(yǎng)耐藥菌占總菌數(shù)的百分比 Fig 1 Percentage of cultivable resistant bacteria in total bacteria in lettuce a and soil b samples 0 d K 30 d K 45 d K 0 d 0 T 30 d 0 T 45 d 0 T 70 60 50 40 30 20 10 0 B intI tet average sul average 70 60 50 40 30 20 10 0 C intI tet average sul average 0 d K 30 d K 45 d K 0 d 0 T 30 d 0 T 45 d 0 T 圖2 生菜 a 和土壤 b 中intI基因 tet基因和sul基因的檢出率 Fig 2 Prevalence of intI tet and sul genes in lettuce a and soil b samples 2 4 單次施用有機(jī)肥對(duì)生菜和土壤中耐藥基因的影響 為了在分子水平進(jìn)一步確認(rèn)單次施用有機(jī)肥對(duì) 菜表面和 壤細(xì)菌耐藥性的影響 在隨機(jī)選取的具 有耐藥表型細(xì)菌菌落中篩查了6 tet基因 tetA tetB tetC tetG tetL和tetM 2 sul基因 sul1和sul2 和 指示基因水平遷移潛勢(shì)的一類整合酶基因intI的存在情況 結(jié)果表明 有機(jī)肥處理組的采摘期 菜和 壤中3類基因的檢出率均高于對(duì)照組 圖2 表明單次施用有機(jī)肥可增加 菜及其栽培 壤中細(xì)菌的耐 藥性和AR基因水平遷移的潛勢(shì) 苗期 菜未發(fā)現(xiàn)3類耐藥相關(guān)基因 可能與其四環(huán)素和磺胺耐藥水平較 低 表2 獲得的用于基因檢測(cè)的菌落數(shù) 4 較少有關(guān) 壤菌落樣品中未檢出tetA 菜表面菌落樣 品中未檢出tetC和tetM 與已有報(bào)道 16 有所不同 可能與所施用的有機(jī)肥中AR基因組成不同有關(guān) 49 上 海 農(nóng) 業(yè) 學(xué) 報(bào) 3 討論與結(jié)論 已有研究證實(shí) 施用發(fā)酵有機(jī)肥會(huì)增加 壤中AR基因數(shù) 17 施肥可能是耐藥微 物及AR基因進(jìn) 入 壤環(huán)境的主要途徑 18 本研究結(jié)果表明 處于采摘期的 菜 栽培30 d或45 d 表面存在大 ART 菌 且有機(jī)肥施用組的 壤和 菜中篩查到的ART菌種類和水平以及AR基因的檢出率均高于對(duì)照組 說明單次施用有機(jī)肥不僅提高 壤耐藥菌的污染水平 還會(huì)影響 菜表面耐藥菌的數(shù) 和種類 帶來環(huán) 境和食用方面的雙重風(fēng)險(xiǎn) 因此應(yīng)格外重視養(yǎng)殖場(chǎng)用藥管理和糞便處理措施 以達(dá)到控制和減滅抗 素 耐藥菌的目的 研究表明 耐藥菌除了在抗 素篩選壓下被誘導(dǎo) 選擇性富集外 耐藥基因還會(huì)通過水平基因遷移 HGT 途徑進(jìn)行傳播和擴(kuò)散 12 本研究在 菜和 壤樣品中均發(fā)現(xiàn)了較高水平的intI基因 推測(cè) 菜表 面ART菌的富集過程中發(fā) 了HGT 但哪類細(xì)菌參與了HGT的發(fā) 相關(guān)AR基因是否有可能遷移至人 類共 菌中等問題值得深入研究 此外 菜 壤和有機(jī)肥中ART菌的同源性分析及AR基因和移動(dòng) 元件的遷移潛勢(shì)研究 有助于揭示有機(jī)肥施用對(duì) 菜AR菌污染影響的分子機(jī)制 參 考 文 獻(xiàn) 1 LI X WANG H TetSacycline Sesistance associated with commensal bacteSia fSom SepSesentative Seady to consume deli and SestauSant foods J JouSnal of Food PSotection 2010 73 10 1841 1848 2 邵毅 沈源源 劉海燕 等 上海地產(chǎn)草莓中細(xì)菌污染的安全風(fēng)險(xiǎn)研究 J 上海農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào) 2017 33 4 117 120 3 FANG H WANG H CAI L et al PSevalence of antibiotic Sesistance genes and bacteSial pathogens in long teSm manuSed gSeenhouse soils as Sevealed by metagenomic suSvey J EnviSonmental Science Technology 2015 49 2 1094 1104 4 ZHAO X WANG J ZHU L et al Field based evidence foS enSichment of antibiotic Sesistance genes and mobile genetic elements in manuSe amended vegetable soils J Science of the Total EnviSonment 2019 654 3 906 913 5 BLAUSTEIN R SHELTON D VAN KESSEL J et al ISSigation wateSs and pipe based biofilms as souSces foS antibiotic Sesistant bacteSia J EnviSonmental MonitoSing and Assessment 2016 188 1 56 6 FALDYNOVA M V DENSK P HAVLICKOVA H et al PSevalence of antibiotic Sesistance genes in faecal samples fSom cattle pigs and poultSy J VeteSinaSni Medicina 2013 58 6 298 304 7 QIAN X SUN W GU J et al VaSiable effects of oxytetSacycline on antibiotic Sesistance gene abundance and the bacteSial community duSing aeSobic composting of cow manuSe J JouSnal of HazaSdous MateSials 2016 315 5 61 69 8 薛銀剛 劉菲 王利平 等 氣溶膠中抗 素抗性基因研究進(jìn)展 以養(yǎng)殖場(chǎng)和醫(yī)院為例 J 態(tài)毒理學(xué)報(bào) 2017 12 6 27 37 9 YANG Q REN S NIU T et al DistSibution of antibiotic Sesistant bacteSia in chicken manuSe and manuSe feStilized vegetables J EnviSonmental Science and Pollution ReseaSch 2014 21 2 1231 1241 10 MCEWEN S FEDORKA CRAY P AntimicSobial use and Sesistance in animals J Clinical Infectious Diseases 2002 34 Suppl 3 S93 S106 11 BLAIR J WEBBER M BAYLAY A et al MoleculaS mechanisms of antibiotic Sesistance J NatuSe Reviews MicSobiology 2015 13 1 42 51 12 JAYKUS L WANG H SCHLESINGER L FoodboSn MicSobes Shaping the Host Ecosystems M Washington DC USA ASM PSess 2009 13 DANIELA J D VERA M EUG NIA F et al ASchitectuSe of class 1 2 and 3 integSons fSom gSam negative bacteSia SecoveSed among fSuits and vegetables J FSontieSs in MicSobiology 2016 7 96 1400 14 李姝 邵毅 周昌艷 等 市售雞肉及內(nèi)臟中磺胺耐藥菌污染特征 J 食品科學(xué) 2017 38 21 170 174 15 ZHANG L KINKELAAR D HUANG Y et al AcquiSed antibiotic Sesistance aSe we boSn with it J Applied and EnviSonmental MicSobiology 2011 77 20 7134 7141 16 李娟 魏源送 陳倩 北京地區(qū)畜禽養(yǎng)殖場(chǎng)周邊蔬菜地 食蔬菜抗 素耐藥基因 ARGs 的賦存特性 J 環(huán)境化學(xué) 2018 37 4 625 635 17 彭雙 王一明 林先貴 連續(xù)施用發(fā)酵豬糞對(duì) 壤中四環(huán)素抗性基因數(shù) 的影響 J 中國(guó)環(huán)境科學(xué) 2015 35 4 1173 1180 18 JENSEN L B BALODA S BOYE M et a1 AntimicSobial Sesistance among Pseudomonas spp and the Bacillus cereus gSoup isolated fSom Danish agSicultuSal soil J EnviSonmental InteSnational 2001 26 7 8 581 587 責(zé)任編輯 郭嬌 59