213 中國土壤與肥料 2020 2 doi 10 11838 sfsc 1673 6257 19187 枯草芽孢桿菌和綠色木霉協(xié)同促進芹菜生長的研究 周 游 1 2 楊臘英 1 2 汪 軍 1 2 郭立佳 1 2 梁昌聰 1 2 劉 磊 1 2 黃俊生 1 2 1 中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院環(huán)境與植物保護研究所 海南 ?？?571101 2 農(nóng)業(yè)農(nóng)村部熱帶作物有害生物綜合治理重點實驗室 海南 ?？?571101 摘 要 為了芹菜高產(chǎn)栽培的需要 利用枯草芽孢桿菌 BLG010 和綠色木霉 H06 對芹菜進行促生長試驗 試驗設(shè)置了蒸餾水處理 BLG010處理 H06處理 BLG010 H06處理 結(jié)果表明 BLG010和H06具有促進芹菜 生長協(xié)同增效的現(xiàn)象 因此 通過測定芹菜的防御酶活性和代謝物的變化來探明BLG010和H06對芹菜生長呈現(xiàn) 協(xié)同增效效果的原因 酶活性測定結(jié)果表明 相對于蒸餾水處理 BLG010和H06均能提高芹菜的CAT和POD活 性 并且BLG010 H06處理的CAT和POD活性均比蒸餾水處理 BLG010處理 H06處理高 利用GC MS技術(shù) 分析不同處理代謝物的結(jié)果表明 蘋果酸 甘露醇和蔗糖這3種物質(zhì)的含量在不同處理間呈現(xiàn)規(guī)律性差異 關(guān)鍵詞 芹菜 促生長 酶活性 代謝物 芹菜 Apium graveolens L 富含蛋白質(zhì) 維 生素 鈣 磷 鐵等20多種營養(yǎng)物質(zhì) 是我國國 民廣泛食用的蔬菜 1 2 隨著對芹菜需求的日益加 大 不少學(xué)者通過提高大量元素供給 施用黃腐酸 鉀和生長調(diào)節(jié)劑等物質(zhì) 或者利用微生物等手段研 究提高芹菜產(chǎn)量的方法 3 6 前人研究表明 復(fù)合使用不同類型的微生物 比使用單一微生物對植物的促生和控制植物病害 的效果更好 呈現(xiàn)增效作用 7 9 可能的原因是 不同類型的微生物對植物和對病原菌的作用方式 不同 分泌的作用物質(zhì)也不同 10 11 有研究表 明 不同種類的微生物共同培養(yǎng)后會加大有益物 質(zhì)的分泌 例如Trichoderma asperellum和 Bacil lus amyloliquefaciens共同培養(yǎng)后會加大D 天冬氨 酸等8種氨基酸的分泌 12 并且不同種類菌株 共同培養(yǎng)時會誘導(dǎo)單獨培養(yǎng)時沉默基因的表達 Schroeckh等發(fā)現(xiàn) Streptomyces hygroscopicus 現(xiàn) 為 S rapamycinicus 和 Aspergillus nidulans共培養(yǎng) 后 能激活A(yù) nidulans沉默的polyketide synthase PKS 基因簇表達 13 值得注意的是 不同種類 收稿日期 2019 04 30 錄用日期 2019 08 31 基金項目 國家重點研發(fā)計劃 2017YFD0200900 中央級公益 性科研院所基本科研業(yè)務(wù)專項 1630042019038 作者簡介 周游 1983 男 海南三亞人 助理研究員 博士 研究方向為植物病害生物防治 E mail zy563696 通訊作者 黃俊生 E mail h888111 菌株共同培養(yǎng)也能誘導(dǎo)產(chǎn)生新的物質(zhì) Dashti等 將 Actinokineospora sp 和 Nocardiopsis sp 共同培養(yǎng) 后分離出在單獨存在的情況下不能產(chǎn)生的3種新物 質(zhì) 14 但以往研究多關(guān)注于兩種微生物之間的相 互作用結(jié)果 而關(guān)于復(fù)合微生物促進植物生長的協(xié) 同增效機制尚不清楚 且研究報道極為鮮見 木霉 和芽孢桿菌是目前廣泛用來生產(chǎn)微生物菌肥的菌 種 因此 本研究通過比較綠色木霉和枯草芽孢桿 菌在單獨和混合施用情況下 對芹菜的防御酶活性 和代謝物含量的影響情況來探明這兩種微生物對芹 菜生長的協(xié)同增效作用的機制 這將為微生物的復(fù) 合使用提供理論基礎(chǔ) 也為芹菜的高產(chǎn)栽培提供有 效的技術(shù)支撐 1 材料與方法 1 1 供試菌株 枯草芽孢桿菌 BLG010 專利號 CN102747020A 由中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院環(huán)境與植物保護研究所提 供 菌株保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普 通微生物中心 保藏編號為CGMCC No 5953 將 BLG010接種在LB液體培養(yǎng)基中 在37 條件 下180 r min黑暗培養(yǎng)2 d后離心去除LB培養(yǎng)液獲 得純孢子體 并用無菌蒸餾水把孢子稀釋成1 0 10 7 個 mL濃度的孢子懸浮液 綠色木霉 H06 專利號 CN102839131A 由中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院環(huán)境與植物保護研究所提 214 中國土壤與肥料 2020 2 供 保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微 生物中心 保藏編號為CGMCC No 6229 將H06 接種到PDA平板上 在27 條件下黑暗培養(yǎng)9 d 并刮取孢子用無菌蒸餾水制成孢子懸浮液 濃度為 1 0 10 7 個 mL 1 2 盆栽試驗 2018年1月3日將長至5 6 cm的西芹幼 苗移栽至混合有滅菌的菜園土 營養(yǎng)土以及椰糠 作為栽培基質(zhì)的花盆中 幼苗移栽時各花盆均施 用市購復(fù)合肥 N P K 15 15 15 1 900倍液 500 mL 移栽5 d后按以下4個處理澆灌芹菜 每 處理設(shè)3個重復(fù) 每個重復(fù)含12株芹菜 移栽 30 d后收獲芹菜 測定株高和鮮重 蒸餾水處理 CK 每花盆澆灌300 mL 的 無菌蒸餾水 BLG010處理 每花盆澆灌300 mL的 BLG010 孢子懸浮液 1 0 10 7 個 mL H06處理 每花盆澆灌300 mL 的H06 孢子 懸浮液 1 0 10 7 個 mL BLG010 H06處理 每花盆澆灌各150 mL 的BLG010和H06孢子懸浮液 1 0 10 7 個 mL 1 3 酶活性測定 分別于處理后10 20 d時采集4個處理的距 離地面1 5 cm處莖稈用于提取總酶液 每6個 莖稈作為一個重復(fù) 根據(jù)吳衛(wèi)等的方法獲得含有 過氧化氫酶 CAT 和過氧化物酶 POD 的總酶 液 15 過氧化氫酶 CAT 活性利用H 2 O 2 測 定 16 過氧化物酶 POD 活性采用愈創(chuàng)木酚法 測定 17 1 4 差異代謝物GC MS分析 分別于處理后10 20 d時采集4個處理的距 離地面1 5 cm處莖稈用于代謝物檢測 每6個 莖稈作為一個重復(fù) 氣質(zhì)聯(lián)用儀型號為Thermo TRACE1310 ISQ TM QD GC MS 代謝物提取及衍生化 根據(jù)Lisec等的方法 提取代謝物 以核糖醇 0 2 mg mL 作為內(nèi)標 18 利用甲氧基胺基鹽酸鹽吡啶溶液 吡啶含量為 20 mg mL 與N O 雙 三甲基硅烷基 三氟乙酰 胺 含1 三甲基氯硅烷 對代謝物進行衍生化 色譜和質(zhì)譜條件 毛細管色譜柱為Thermo TG 5MS 30 m 0 25 mm 0 25 m 不分流進 樣 1 0 mL min恒流模式 升溫程序為 初始溫 度80 維持2 min 然后以5 min的速度升至 300 維持1 min 進樣口溫度設(shè)定為 250 EI 離子源 溫度250 電子轟擊電壓為70 eV 質(zhì) 譜檢測范圍為45 600 m z 每0 2 s掃描一次 溶 劑延遲3 min 樣品采用隨機順序連續(xù)自動進樣 數(shù)據(jù)處理 對樣品的總離子圖進行色譜峰識 別 并與NIST質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫比對 鑒定代謝物的種 類 使用自動積分方法進行積分并進行手動積分校 正 對代謝產(chǎn)物進行的定性和定量分析 2 結(jié)果與分析 2 1 不同處理對芹菜生長的影響 由圖1和圖2可見 同時澆灌枯草芽孢桿菌 BLG010 和綠色木霉 H06 的處理比其它處理 長勢良好 BLG010 H06處理的株高分別是CK BLG010 H06處理的1 44 1 13 1 21倍 株重分 別是CK BLG010 H06處理的3 4 1 39 2 07倍 這說明BLG010和H06對芹菜的促生具有協(xié)同增效 作用 圖 1 不同處理對芹菜生長的影響 圖 2 不同處理對芹菜株高和株重的影響 215 中國土壤與肥料 2020 2 2 2 不同處理對芹菜酶活性的影響 經(jīng)過分析得知 CAT與POD活性在4個處 理間表現(xiàn)出規(guī)律性變化 由圖3和圖4可知 BLG010 H06處理的CAT和POD活性在第10 d和 第20 d時均比其它處理高 CK處理在第10 d和第 20 d時的POD和CAT活性均比其它處理低 圖 3 不同處理對芹菜 CAT活性的影響 圖 4 不同處理對芹菜 POD活性的影響 在 第10 d時 BLG010 H06處 理 的POD活 性分別為BLG010和H06處理的1 23和1 36倍 BLG010 H06處理的CAT活性分別為BLG010和 H06處理的1 03和1 4倍 在 第20 d時 BLG010 H06處 理 的POD活 性分別為BLG010和H06處理的1 25和1 22倍 BLG010 H06處理的CAT活性分別為BLG010和 H06處理的1 78和1 45倍 由結(jié)果可知 BLG010和H06均能提高芹 菜CAT和POD活性 但是同時澆灌BLG010和 H06比單獨澆灌BLG010或H06對芹菜的CAT和 POD活性具有更強的誘導(dǎo)能力 這也說明BLG010 和H06對芹菜防御酶活性誘導(dǎo)具有協(xié)同增效 作用 2 3 不同處理對芹菜代謝物的影響 各處理樣品的GC MS 總離子流色譜圖峰 形較好 圖5 可根據(jù)峰面積計算代謝物質(zhì) 相對含量和通過NIST標準譜庫確認各峰的化 學(xué)結(jié)構(gòu) 由結(jié)果可知 蘋果酸 甘露醇和蔗糖 這3種物質(zhì)相對含量在不同處理間呈現(xiàn)規(guī)律性的 差異 與CK處理相比 BLG010 H06 BLG010 H06 處理的甘露醇含量在第10 d和20 d兩個時間點 均上調(diào)表達 圖6 處理間的含量大小順序為 BLG010 H06 BLG010 H06 CK處理 由圖7可知 與CK處理相比 BLG010 H06 處理的蘋果酸含量在第10 d和20 d兩個時間點均上 圖 5 芹菜代謝物 GC MS總離子流色譜圖 注 A CK處理 B BLG010處理 C H06處理 D BLG010 H06處理 216 中國土壤與肥料 2020 2 圖 6 不同處理對芹菜甘露醇含量的影響 圖 7 不同處理對芹菜蘋果酸含量的影響 調(diào)表達 而BLG010處理 H06處理的蘋果酸含量 在第10 d表達下調(diào) 但隨后BLG010處理的蘋果酸 含量在第20 d上調(diào)表達 由圖8可知 在第10 d CK處理的蔗糖含 量分別是BLG010 H06 BLG010 H06處理蔗糖 含量的5 78 2 33和7 01倍 但是在第20 d時 BLG010 H06 BLG010 H06處理的蔗糖含量分別 是CK處理蔗糖含量的1 98 1 3和7 22倍 結(jié)果表明 接種枯草芽孢桿菌或綠色木霉均能 引起芹菜的蘋果酸 甘露醇和蔗糖含量變化 而混 合接種枯草芽孢桿菌和綠色木霉則能導(dǎo)致這些變化 程度加大 3 結(jié)論與討論 POD和CAT是植物生長過程中的重要抗性相 關(guān)酶 其活性變化情況是反映植物抗病性的重要 生理指標 19 20 眾多學(xué)者利用生防菌接種寄主 植物來提高寄主的CAT和POD活性 由此使寄 主獲得誘導(dǎo)系統(tǒng)抗性 Induced systemic resistance ISR 因此 測定枯草芽孢桿菌和綠色木霉在單 獨和混合施用條件下對芹菜的CAT和POD活性影 響 能探明這兩種生防菌對芹菜的防御酶是否有增 效作用 也間接為其它生防菌的復(fù)合使用提供理論 支撐 圖 8 不同處理對芹菜蔗糖含量的影響 本研究發(fā)現(xiàn)枯草芽孢桿菌和綠色木霉均能提高 芹菜CAT和POD活性 且兩者混合接種芹菜提高 這兩種酶的活性更高 呈現(xiàn)增效作用 這可能是兩 種生防菌對芹菜的刺激比單一生防菌的刺激作用 強 加強了激活CAT和POD活性的過程 這和前 人的報道類似 21 22 他們發(fā)現(xiàn)接種病原菌和芽孢 桿菌處理的CAT和POD等抗性相關(guān)酶活性比只單 獨接種病原菌或者生防菌的高 本研究也發(fā)現(xiàn) 株高最高和株重最重的芹菜處 理 其CAT和POD活性也最大 這與呂斌等 23 和趙英等 24 的研究類似 他們發(fā)現(xiàn)POD和SOD 等抗性相關(guān)酶的活性與植物的生長勢有相關(guān)關(guān)系 因此將來可以進行深入的研究 探清芹菜CAT和 POD活性與芹菜株高與株重的相關(guān)關(guān)系 作為預(yù)測 微生物提高芹菜產(chǎn)量能力的檢測指標 代謝物的變化可視為植物對外界環(huán)境變化的響 應(yīng) 研究植物響應(yīng)外源微生物的代謝組不僅能描述 植物的狀態(tài) 也能了解植物與微生物互作的機制 本文對4個處理的芹菜進行代謝組分析 結(jié)果發(fā) 現(xiàn) 蘋果酸 甘露醇和蔗糖的含量在不同處理間呈 217 中國土壤與肥料 2020 2 現(xiàn)規(guī)律性的差異 這些差異變化是芹菜對枯草芽孢 桿菌和綠色木霉的響應(yīng) 蘋果酸是三羧酸 TCA 循環(huán)的中間產(chǎn)物 參 與多種代謝反應(yīng)的調(diào)控 能生成蔗糖 丙酮酸 草 酰乙酸等物質(zhì) 是一種重要的能量物質(zhì) 25 本研 究中 在兩個時間段 BLG010 H06處理的蘋果 酸均比CK處理和其它處理高 這與董鮮等 26 和 張風(fēng)革 27 的研究類似 他們發(fā)現(xiàn)植物接種微生物 后 其體內(nèi)的蘋果酸含量上調(diào) 造成這種現(xiàn)象的可 能原因是 芽孢桿菌和木霉對蘋果酸具有趨化性 蘋果酸可作為芽孢桿菌和木霉的營養(yǎng)來源之一 芹 菜加大蘋果酸的分泌能促進這兩種微生物在植物根 部定殖 27 28 也有可能是 在兩種生防菌的共同 作用下 刺激芹菜上調(diào)蘋果酸產(chǎn)量進而轉(zhuǎn)化為糖 類 為芹菜的生長發(fā)育提供能量 從而達到顯著促 進芹菜生長的目的 但是 第10 d時BLG010處理 和H06處理 第20 d時H06處理的蘋果酸含量均 比CK處理低 具體機理有待進一步研究 本研究發(fā)現(xiàn) BLG010和H06均能誘導(dǎo)芹菜甘 露醇累積 并且兩種生防菌共同處理的芹菜甘露醇 相對含量比單一生防菌處理的高 這和Luo等 29 的研究結(jié)果類似 他們發(fā)現(xiàn)利用菌根真菌接種楊樹 后 甘露醇在楊樹體內(nèi)累積 甘露醇是植物體內(nèi) 重要的滲透壓調(diào)節(jié)物質(zhì) 30 微生物與植物作用后 會導(dǎo)致植物的滲透勢發(fā)生改變 31 由此推測 芽 孢桿菌和木霉處理芹菜導(dǎo)致其甘露醇累積的原因 可能是 芹菜需要調(diào)節(jié)由這兩種微生物造成的滲 透壓失衡 故而加大甘露醇的分泌 并且兩種微 生物比單一微生物使芹菜累積甘露醇的作用更強 但是甘露醇與芹菜生長勢之間的關(guān)系需要進一步 研究 蔗糖能分解成果糖和葡萄糖 是植物體內(nèi)重要 的能源物質(zhì)也是分子信號 是源庫碳水化合物代 謝的樞紐 能影響植物生長發(fā)育過程中的基因表 達 32 33 植物根系的蔗糖是木霉的能量來源 但 是木霉獲得足夠的蔗糖后就下調(diào)其自身的蔗糖水解 酶活性 以避免其對寄主蔗糖的過量吸收而導(dǎo)致寄 主組織的破壞 34 鄒英寧等 35 研究表明 柑橘接 種叢枝菌根真菌能提高其株高和葉片數(shù)以及葉片蔗 糖含量 經(jīng)分析得知菌根侵染率與葉片蔗糖含量正 相關(guān) 他們認為葉片產(chǎn)生的蔗糖向根部運輸并分解 為葡萄糖和果糖供給菌根真菌吸收利用 本研究結(jié) 果表明 在第10 d時 各處理的蔗糖含量表現(xiàn)為 CK處理 BLG010處理 H06處理 BLG010 H06處 理 在第20 d時各處理的蔗糖含量出現(xiàn)反轉(zhuǎn) 表現(xiàn) 為BLG010 H06處理 BLG010處理 H06處理 CK 這可能的原因是在枯草芽孢桿菌和綠色木霉定殖根 部初期 芹菜產(chǎn)生的蔗糖向下運輸給這兩種生防菌 使用 導(dǎo)致莖部蔗糖含量變低 當它們獲得足夠的 蔗糖后產(chǎn)生調(diào)節(jié)信號給芹菜 芹菜調(diào)節(jié)蔗糖相關(guān)酶 的活性 提高體內(nèi)蔗糖含量用于促進自身生長 這 與劉春娟等 36 的研究類似 他們發(fā)現(xiàn)大豆葉片的 蔗糖含量與大豆的產(chǎn)量正相關(guān) 本研究中 BLG010 和H06聯(lián)合接種對提高芹菜的蔗糖含量呈現(xiàn)出了增 效效應(yīng) 這可能是BLG010和H06促進芹菜生長呈 現(xiàn)協(xié)同增效現(xiàn)象的原因之一 綜上所述 本研究發(fā)現(xiàn)接種枯草芽孢桿菌 BLG010 和綠色木霉 H06 能促進芹菜的生長 并且同時接種BLG010和H06比單獨接種BLG010 或H06促進芹菜生長的效果更好 同時還發(fā)現(xiàn) 芹 菜CAT和POD活性 蘋果酸 甘露醇和蔗糖的含 量在不同處理間呈現(xiàn)規(guī)律性的差異 這些差異變化 可能是枯草芽孢桿菌和綠色木霉促進芹菜生長呈現(xiàn) 協(xié)同增效的原因 這些研究結(jié)果將為生防菌的復(fù) 合使用提供新思路 為芹菜的高產(chǎn)栽培提供技術(shù) 支撐 參考文獻 1 郭春景 芹菜的營養(yǎng)價值與安全性評價 J 吉林農(nóng)業(yè) 2018 6 83 84 2 梁穎 李藝 師薇 等 芹菜不同品種類型間營養(yǎng)成分及抗 氧化活性差異 J 食品工業(yè)科技 2018 39 18 60 63 3 馮雪 于澤娟 劉艷雙 等 外源NO供體SNP對冬季溫室 芹菜生長及硝酸鹽含量的影響 J 湖北農(nóng)業(yè)科學(xué) 2016 55 8 4717 4721 4 張弓長 蔡虎銘 錢程 等 水溶肥中添加聚天冬氨酸和黃 腐酸鉀對芹菜產(chǎn)量及經(jīng)濟效益的影響 J 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué) 2016 44 33 103 105 5 張亞平 杜迎輝 楊慶鋒 等 解淀粉芽孢桿菌對芹菜生長 的影響 J 中國果菜 2016 12 30 32 6 王慧俐 鄭積榮 鄭曉冬 印度梨形孢對芹菜的生長及營養(yǎng) 品質(zhì)的影響 J 中國食品學(xué)報 2017 17 6 124 130 7 Akhtar N Goyal D Goyal A Biodegradation of leaf litter biomass by combination of Bacillus sp and Trichoderma reesei MTCC164 J Minerva Biotechnologica 2015 27 4 191 199 8 Kumar S P M Chowdappa P Krishna V et al Induction of defense related proteins and growth promotion in tomato by mixture of Trichoderma harzianum OTPB3 and Bacillus subtilis 218 中國土壤與肥料 2020 2 OTPB1 and Pseudomonas putida OPf1 against Phytophthora infestans J African Journal of Microbiology Research 2015 9 2 96 110 9 Alizadeh H Behboudi K Ahmadzadeh M et al Induced systemic resistance in cucumber and Arabidopsis thaliana by the combination of Trichoderma harzianum Tr6 and Pseudomonas sp Ps14 J Biological Control 2013 65 1 14 23 10 Woo S Fogliano V Scala F et al Synergism between fungal enzymes and bacterial antibiotics may enhance biocontrol J Antonie van Leeuwenhoek 2002 81 1 4 353 356 11 Xu X M Jeger M J Theoretical modeling suggests that synergy may result from combined use of two biocontrol agents for controlling foliar pathogens under spatial heterogeneous conditions J Phytopathology 2013 103 8 768 775 12 Wu Q Ni M Dou K et al Co culture of Bacillus amyloliquefaciens ACCC11060 and Trichoderma asperellum GDFS1009 enhanced pathogen inhibition and amino acid yield J Microbial Cell Factories 2018 17 1 155 167 13 Schroeckh V Scherlach K N tzmann H W et al Intimate bacterial fungal interaction triggers biosynthesis of archetypal polyketides in Aspergillus nidulans J Proceedings of the National Academy of Sciences 2009 106 34 14558 14563 14 Dashti Y Grkovic T Abdelmohsen UR et al Production of induced secondary metabolites by a co culture of sponge associated actinomycetes Actinokineospora sp EG49 and Nocardiopsis sp RV163 J Marine Drugs 2014 12 5 3046 3059 15 吳衛(wèi) 徐應(yīng)文 劉正瓊 等 一種植物超氧化物歧化酶 過 氧化氫酶和過氧化物酶活力檢測方法 CN201010224740 5 P 中國 2010 16 王晶晶 四川獼猴桃軟腐病菌的鑒定 遺傳多樣性及侵 染果實后的生理變化研究 D 雅安 四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013 17 曹建康 蔣微波 趙玉梅 果蔬采后生理生化實驗指導(dǎo) M 北京 中國輕工業(yè)出版社 2007 18 Lisec J Schauer N Kopka J et al Gas chromatography mass spectrometry based metabolite profiling in plants J Nature Protocols 2006 1 1 387 396 19 李方球 官春云 油菜菌核病抗性鑒定 抗性機理及抗性遺 傳育種研究進展 J 作物研究 2001 15 3 85 92 20 辛鑫 劉磊 潘江禹 等 綠色木霉H6對香蕉枯萎病的誘 導(dǎo)抗性作用 J 廣東農(nóng)業(yè)科學(xué) 2013 7 83 85 21 Youssef S A Tartoura K A Abdelraouf G A Evaluation of Trichoderma harzianum and Serratia proteamaculans effect on disease suppression stimulation of ROS scavenging enzymes and improving tomato growth infected by Rhizoctonia solani J Biological Control 2016 100 79 86 22 Li C Y Hu W C Pan B et al Rhizobacterium Bacillus amyloliquefaciens strain SQRT3 mediated induced systemic resistance controls bacterial wilt of tomato J Pedosphere 2017 27 6 1135 1146 23 呂斌 陳學(xué)年 李質(zhì)怡 等 不同砧木先鋒橙葉片POD活 性與樹體生長勢的關(guān)系 J 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報 1999 12 2 63 67 24 趙英 唐玉娟 芒果葉片SOD CAT 活性與生長勢的關(guān)系 J 農(nóng)業(yè)研究與應(yīng)用 2017 3 43 48 25 宋超 張立軍 賈永光 等 植物的蘋果酸代謝和轉(zhuǎn)運 J 植物生理學(xué)通訊 2009 45 5 419 428 26 董鮮 鄭青松 王敏 等 香蕉幼苗三類有機小分子溶質(zhì) 對尖孢鐮刀菌侵染的生理響應(yīng) J 生態(tài)學(xué)報 2015 35 10 3309 3319 27 張風(fēng)革 哈茨木霉誘變菌株T E5及其生物有機肥對黃瓜生 長的影響及機理研究 D 南京 南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015 28 張楠 根際有益芽孢桿菌N11及SQR9與植物根系的互作研 究 D 南京 南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012 29 Luo Z B Janz D Jiang X et al Upgrading root physiology for stress tolerance by ectomycorrhizas insights from metabolite and transcriptional profiling into reprogramming for stress anticipation J Plant Physiology 2009 151 4 1902 1917 30 Hacham Y Hershenhorn J Dor E et al Primary metabolic profiling of Egyptian broomrape Phelipanche aegyptiaca compared to its host tomato roots J Journal of Plant Physiology 2016 205 11 19 31 劉業(yè)霞 姜飛 張寧 等 嫁接辣椒對青枯病的抗性及其 與滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)的關(guān)系 J 園藝學(xué)報 2011 38 5 903 910 32 樊晶 柑橘宿主對黃龍病病原菌侵染的應(yīng)答機制 D 重 慶 重慶大學(xué) 2010 33 吳越 蘇華楠 黃愛軍 等 柑橘黃龍病菌侵染對甜橙葉片 糖代謝的影響 J 中國農(nóng)業(yè)科學(xué) 2015 48 1 63 72 34 陳捷 木霉菌誘導(dǎo)植物抗病性研究新進展 J 中國生物防 治學(xué)報 2015 31 5 733 741 35 鄒英寧 吳強盛 李艷 等 叢枝菌根真菌對枳根系形態(tài)和 蔗糖 葡萄糖含量的影響 J 應(yīng)用生態(tài)學(xué)報 2014 25 4 1125 1129 36 劉春娟 馮乃杰 鄭殿峰 等 植物生長調(diào)節(jié)劑S3307和 DTA 6對大豆源庫碳水化合物代謝及產(chǎn)量的影響 J 中 國農(nóng)業(yè)科學(xué) 2016 49 4 657 666 219 中國土壤與肥料 2020 2 Study of synergistic enhanced effect on promoting celery growth by Bacillus subtilis and Trichoderma viride ZHOU You 1 2 YANG La ying 1 2 WANG Jun 1 2 GUO Li jia 1 2 LIANG Chang cong 1 2 LIU Lei 1 2 HUANG Jun sheng 1 2 1 Environment and Plant Protection Institute Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences Haikou Hainan 571101 2 Key Laboratory of Pests Comprehensive Governance for Tropical Crops Ministry of Agriculture and Rural Affairs Haikou Hainan 571101 Abstract For the high yield cultivation of celery the growth promotion test of celery was carried out using Bacillus subtilis BLG010 and Trichoderma viride H06 and the test was performed with distilled water treatment BLG010 treatment H06 treatment and BLG010 H06 treatment The results showed that BLG010 and H06 had synergistic enhanced effect on promoting celery growth In order to find out the reasons for the synergistic enhanced effect of BLG010 and H06 the defensive enzyme activity and metabolomics of celery were analyzed The results of enzyme activity assay showed that both BLG010 and H06 increased the CAT and POD activities of celery compared with distilled water treatment and the CAT and POD activities of BLG010 H06 treatment were higher than those of other treatments The results of GC MS analysis of metabolomics showed that the contents of malic acid mannitol and sucrose showed regular changes in different treatments Key words celery growth promotion enzyme activity metabolomics 中 國 土 壤 與 肥 料 征 稿 簡 則 中國土壤與肥料 1964 年創(chuàng)刊 是農(nóng)業(yè)部主管 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)資源與農(nóng)業(yè) 區(qū) 劃 研 究 所 和 中 國 植 物 營 養(yǎng) 與 肥 料 學(xué) 會 主 辦的全國性專業(yè)科技期刊 為全國中文核心期刊 中國科技核心期刊 中國農(nóng)業(yè)核心期刊 RCCSE 中國核心學(xué)術(shù) 期 刊 被 中 國 科學(xué)引文數(shù)據(jù)庫 CSCD 核心庫 中國學(xué)術(shù)期刊綜合評價數(shù)據(jù)庫 CBST 科學(xué)技術(shù)文獻速報 日 中 國 學(xué) 術(shù) 期 刊 文 摘 CA 化學(xué)文摘 美 CABA 農(nóng)業(yè)與生物科學(xué)研究中心文摘 英 等 收 錄 以 促 進 土 肥 學(xué) 科 的 發(fā) 展 為 宗 旨 加 快 成 果 轉(zhuǎn) 化 推 動 技 術(shù)進步為目標 面 向 科 研 教 學(xué) 和 生 產(chǎn) 實 踐 主 要 刊 登 土 壤 資 源 與 利 用 植 物 營 養(yǎng) 與 施 肥 農(nóng) 業(yè) 水 資 源 利 用 農(nóng) 業(yè) 微 生 物 分 析 測 試 環(huán) 境 保 護 生 態(tài) 農(nóng) 業(yè) 等 方 面 的 新 理 論 新 技 術(shù) 新 產(chǎn) 品 的 試 驗 研 究 成 果 與 動 態(tài) 辟 有 專 家 論 壇 專 題 綜 述 研 究 報 告 分 析 方 法 研 究 簡 報 等 欄 目 讀 者 對 象 為 農(nóng) 業(yè) 科 研 教 學(xué) 推 廣 環(huán) 保 及 肥 料 生 產(chǎn) 經(jīng) 營 部 門 的 科 技 管 理 人 員 及 農(nóng) 民 技 術(shù) 員 來 稿 要 求 和 注 意 事 項 1 文 稿 請 按 科 技 論 文 編 寫 格 式 撰 寫 要 求 論 點 明 確 層 次 分 明 數(shù) 據(jù) 可 靠 圖 表 清 晰 文 字 精 煉 標 點 準 確 有 關(guān) 數(shù) 據(jù) 進 行 統(tǒng) 計 分 析 2 研 究 論 文 要 有 中 英 文 摘 要 和 關(guān) 鍵 詞 摘 要 中 要 含 有 論 文 的 重 要 數(shù) 據(jù) 3 量 和 單 位 及 符 號 采 用 國 家 法 定 計 量 單 位 符 合 國 標 對 科 技 期 刊 的 要 求 不 再 使 用N M ppm rpm 畝 目 等 土 壤 的 磷 鉀 養(yǎng) 分 含 量 需 用P K 計 算 肥 料 的 磷 鉀 養(yǎng) 分 含 量 用P 2 O 5 K 2 O 計 算 4 圖 表 要 有 自 明 性 不 要 求 英 文 標 注 表 格 采 用 三 線 表 格 式 圖 一 律 為 黑 白 圖 不 要 邊 框 背 景 和 網(wǎng) 格 線 5 參 考 文 獻 只 列 出 直 接 引 用 并 已 公 開 發(fā) 表 的 文 章 著 作 等 按 正 文 中 出 現(xiàn) 的 先 后 排 序 順 序 編 碼 制 文 獻 序 號 加 方 括 號 在 引 用 處 以 上 標 方 式 標 注 中 文 文 獻 不 要 求 英 文 注 釋 文 獻 作 者 只 寫 前3 人 姓 名 超 過3 人 后 面 加 等 3 人 之 內(nèi) 全 部 列 出 英 文 文 獻 作 者 姓 名 姓 前 名 后 姓 第1 個 字 母 大 寫 名 用 大 寫 首 字 母 縮 寫 大 寫 字 母 后 不 加 點 6 在 首 頁 腳 注 位 置 標 注 基 金 項 目 第 一 作 者 簡 介 以 及 通 訊 作 者 姓 名 和 信 箱 作 者 簡 介 姓 名 出 生 年 性 別 民 族 漢 族 可 省 略 籍 貫 學(xué) 位 職 稱 研 究 方 向 E mail 7 以word 格 式 A4 紙 型 排 版 通 過 本 刊 網(wǎng) 站 遠 程 稿 件 處 理 系 統(tǒng) 在 線 投 稿 并 可 查 看 稿 件 處 理 進 程 及 錄 用 情 況 8 文 稿 著 作 權(quán) 屬 于 作 者 文 責(zé) 作 者 自 負 本 編 輯 部 為 保 證 文 稿 的 規(guī) 范 和 精 練 可 對 內(nèi) 容 進 行 必 要 的 修 改 刪 節(jié) 作 者 如 有 不 同 意 見 可 在 來 稿 中 注 明 9 文 稿 請 勿 一 稿 多 投 論 文 經(jīng) 初 審 通 過 后 收 取 審 理 費 并 送 專 家 評 審 主 編 終 審 論 文 一 經(jīng) 錄 用 確 定 刊 期 后 收 取 稿 件 處 理 費 刊 出 后 付 給 作 者 稿 酬 并 贈 送2 本 當 期 期 刊 論 文 刊 出 后 同 時 以 網(wǎng) 絡(luò) 方 式 發(fā) 布 江 蘇 省 淮 安 大 華 生 物 科 技 有 限 公 司 為 您 提 供 高 效 綠 色 環(huán) 保 發(fā) 酵 劑 酵 素 菌 速 腐 劑 許 可 證 號 微 生 物 肥 2003 準 字 0107 號 國 環(huán) 有 機 農(nóng) 業(yè) 生 產(chǎn) 資 料 認 證 號 OP 0109 932 201 淮 安 市 大 華 生 物 科 技 有 限 公 司 是 以 研 制 生 產(chǎn) 酵 素 菌 系 列 微 生 物 制 品 為 主 的 科 技 型 企 業(yè) 集 科 研 生 產(chǎn) 銷 售 于 一 體 技 術(shù) 力 量 雄 厚 設(shè) 備 先 進 設(shè) 施 完 善 本 公 司 主 要 產(chǎn) 品 微 生 物 發(fā) 酵 劑 酵 素 菌 速 腐 劑 是 采 用 生 物 技 術(shù) 制 成 的 一 種 好 兼 氣 性 復(fù) 合 微 生 物 制 劑 高 效 綠 色 環(huán) 保 內(nèi) 含 大 量 有 益 微 生 物 活 性 酶 適 用 于 秸 稈 腐 熟 畜 禽 糞 便 處 理 垃 圾 堆 肥 污 泥 堆 肥 和 餅 粕 肥 農(nóng) 家 肥 等 有 機 物 固 體 發(fā) 酵 和 人 畜 糞 便 液 體 發(fā) 酵 是 生 產(chǎn) 有 機 生 物 肥 的 優(yōu) 質(zhì) 高 效 發(fā) 酵 劑 主 要 功 效 1 發(fā) 酵 分 解 能 力 強 快 速 腐 熟 有 機 材 料 2 改 良 土 壤 增 強 地 力 3 增 產(chǎn) 效 果 顯 著 4 減 輕 病 蟲 害 克 服 連 作 障 礙 5 改 善 農(nóng) 產(chǎn) 品 品 質(zhì) 我 公 司 可 為 生 物 有 機 肥 生 產(chǎn) 廠 家 提 供 發(fā) 酵 原 料 配 比 工 藝 等 資 料 機 插 秧 育 苗 專 用 肥 機 插 水 稻 育 苗 基 質(zhì) 蘇 農(nóng) 肥 2005 準 字0365 02 號 機 插 水 稻 育 苗 基 質(zhì) 拌 土 型 是 根 據(jù) 無 土 栽 培 學(xué) 植 物 營 養(yǎng) 學(xué) 肥 料 學(xué) 土 壤 微 生 態(tài) 學(xué) 原 理 研 制 而 成 內(nèi) 含 有 多 種 有 益 微 生 物 有 機 物 及 植 物 所 需 的 大 量 微 量 平 衡 營 養(yǎng) 元 素 既 是 一 種 栽 培 基 質(zhì) 又 是 一