1 河 南省科技攻關(guān)項目 162102110092 182102110241 商 丘師 范學(xué)院校級青年骨干教師資助項目 2016GGJS10 第一作者簡介 馬麗 女 1982 年 9 月生 商丘師范學(xué)院生物與 食品學(xué)院 副教授 E mail ndmali 163 com 收稿日期 2019 年 6 月 10 日 責任編輯 任 俐 雙色茉莉葉片初代培養(yǎng)物的建立及愈傷組織誘導(dǎo) 1 馬 麗 郭學(xué)良 周勝楠 王穎 田維爽 閆世月 商 丘師范學(xué)院 商丘 476000 摘 要 以雙色茉莉的葉片為外植體 探討外植體取材時期 消 毒時間 不同植物生長調(diào)節(jié)劑組合對愈傷組織 誘導(dǎo)的影響 結(jié)果表明 取材時期對雙色茉莉葉片誘導(dǎo)愈傷組織的影響較為顯著 4 月份和 10 月份是雙色茉莉葉 片取材的最佳時期 不同消毒時間對雙色茉莉葉片愈傷組織誘導(dǎo)影響不同 其中在 0 1 的氯化汞中消毒 5 6 min 污染率較低 且誘導(dǎo)產(chǎn)生的愈傷組織生長狀況最優(yōu) 培養(yǎng)基中 6 芐氨基嘌呤 6 BA 質(zhì)量濃度 萘乙酸 NAA 質(zhì)量 濃度影響了雙色茉莉葉片愈傷組織的誘導(dǎo) 當 6 BA 質(zhì)量濃度 NAA 質(zhì)量濃度為 1 4 1 時有利于愈傷組織的誘 導(dǎo) 形成的愈傷組織質(zhì)量較好 添加激動素 KT 則不利于雙色茉莉葉片愈傷組織的誘導(dǎo) 該研究以雙色茉莉葉片 為外植體 培養(yǎng)獲得了愈傷組織 其中愈傷組織誘導(dǎo)的適宜培養(yǎng)基有 MS 1 0 mg L 1 6 BA 1 0 mg L 1 NAA MS 1 0 mg L 1 6 BA 2 0 mg L 1 NAA MS 1 0 mg L 1 6 BA 4 0 mg L 1 NAA 和 MS 2 0 mg L 1 6 BA 2 0 mg L 1 NAA 這為雙色茉莉離體繁殖再生體系的建立奠定了基礎(chǔ) 關(guān) 鍵詞 雙色茉莉 愈傷組織 選材時期 消毒時間 植物生長調(diào)節(jié)劑 分類號 S685 16 Q813 1 2 Establishment of Primary Culture and Callus Induction of Brunfelsia latifolia Leaves Ma Li Guo Xueliang Zhou Shengnan Wang Ying Tian Weishuang Yan Shiyue Shangqiu Normal University Shangqiu 476000 P China Journal of Northeast Forestry University 2020 48 5 67 71 Taking the leaves of Brunfelsia latifolia Benth as explants we studied the effects of explant sampling period disin fection time and plant growth regulators on callus induction were discussed The results showed that the sampling period had a great effect on callus induction from leaves of B latifolia and April and October were the best sampling periods Dif ferent disinfection times have different effects on callus induction The pollution rate of disinfection for 5 6 min in 0 1 mercuric chloride was lower and the callus induced were in the best growth condition The value of 6 BA NAA in the cul ture medium affected the callus induction of leaves of B latifolia It was beneficial to the callus induction and the callus formed was of good quality when the value of 6 BA to NAA ranged from 1 4 to 1 The concentration of KT had little effect on callus induction The leaves of B latifolia were used as explants and callus was obtained by culture The suitable medi um for callus induction were MS 1 mg L 1 6 BA 1 mg L 1 NAA MS 1 mg L 1 6 BA 2 mg L 1 NAA MS 1 mg L 1 6 BA 4 mg L 1 NAA and MS 2 mg L 1 6 BA 2 mg L 1 NAA which laid the foundation for establishing in vitro regeneration system of B latifolia Keywords Brunfelsia latifolia Benth Callus Selection period Disinfection time Plant growth regulator 雙 色茉莉 Brunfelsia latifolia Benth 又 名番茉 莉 鴛鴦茉莉 是茄科鴛鴦茉莉?qū)俪＞G矮灌木 株高 30 100 cm 葉片呈長卵形 暗綠色 單葉互生 花 單生或幾多密生 聚傘花序 花被具五淺裂 好似五 瓣梅花 雙色茉莉花初開為淡紫色 后逐漸轉(zhuǎn)變成 白色 單花開放 3 5 d 花期 4 10 月份 因花開有 先后 同一株雙色茉莉常能觀賞到兩種顏色的花朵 故名雙色茉莉 1 花 開期間芳香撲鼻 為觀賞者展 示了一個更迭變換的空間 使觀賞變得饒有趣味 深 得人們的喜愛 雙色茉莉結(jié)實少或不結(jié)實 限制了雙色茉莉有 性繁殖的發(fā)展 而采用扦插 高空壓條等無性繁殖的 方法 成苗慢 生根較難 且植株生長不良 不利于工 廠化生產(chǎn) 2 植 物組織培養(yǎng)技術(shù)為植物的大量快 速繁殖提供了新的途徑 植物組織培養(yǎng)研究至今已 有 100 多年歷史 已成為生物學(xué)科研究的重要技術(shù) 手段 3 目 前 許多觀賞植物 園藝作物 經(jīng)濟林 木 無性繁殖作物等均已采用組織培養(yǎng)技術(shù)進行離 體快速繁殖并獲得了成功 試管苗生產(chǎn)在國內(nèi)外市 場上已經(jīng)形成產(chǎn)業(yè)化 4 近 幾年 隨著經(jīng)濟水平的 提高 觀賞花卉需求量劇增 各類觀賞花卉的離體快 速繁殖體系的建立成為近年來研究的熱點 目前 有關(guān)雙色茉莉的組織培養(yǎng)也有報道 但多見于用莖 段或莖尖為外植體進行腋芽或頂芽的誘導(dǎo)和增 殖 5 6 而 對雙色茉莉經(jīng)過愈傷組織途徑進行離 體再生的研究鮮見報道 通過愈傷組織進行不定 芽誘導(dǎo) 由于不定芽形成的數(shù)量與腋芽數(shù)目無關(guān) 其增殖率高 易形成芽叢且繁殖速度快 7 20 世 紀 80 年 代 付凱等 8 最早簡述了利用雙色茉 莉嫩 葉進行組織培養(yǎng)的方法 但沒有經(jīng)過愈傷組織途 徑 而是直接從葉枕處分化出不定芽 轉(zhuǎn)接到生根 培養(yǎng)基中 且生根率高達 90 以上 袁媛等 9 以 雙 色茉莉的花瓣 葉片 莖段為外植體進行了研 DOI 10 13759 ki dlxb 2020 05 013 究 指出嫩葉的污染率最低 且愈傷誘導(dǎo)率最高 平均出愈時間最短 本研究以雙色茉莉葉片為外植體 探討取材時 期 消毒時間 不同植物生長調(diào)節(jié)劑組合對愈傷組織 誘導(dǎo)的影響 以期篩選適宜于雙色茉莉愈傷組織誘 導(dǎo)的培養(yǎng)基 為雙色茉莉離體快繁提供理論依據(jù) 也 為雙色茉莉高效 優(yōu)質(zhì)生產(chǎn)奠定基礎(chǔ) 以滿足市場的 需求 1 材料與方法 1 1 供試材料 供試材料為商丘市金世紀花卉市場購買的 3 年 生雙色茉莉 開花時顏色由深藍色轉(zhuǎn)為淺紫色 最后 轉(zhuǎn)變?yōu)榘咨?在溫室養(yǎng)護 1 個月左右進行試驗 1 2 材料處理及培養(yǎng)條件 選擇天氣晴朗的下午 摘取雙色茉莉幼嫩且完 全展開的葉片 頂端第 3 5 片葉 放入清洗干凈 的燒杯中 加入肥皂水漂洗 5 10 min 洗凈葉片上 的灰塵以及其他附著物 再用紗布蓋好燒杯口 在流 動的自來水下沖洗 30 min 接種之前 在超凈工作 臺上 將葉片用 75 酒精處理 10 s 在無菌水中浸 泡 3 5 min 然后用 0 1 氯化汞溶液浸泡 6 min 最后用無菌水沖洗 4 5 次 在超凈工作臺上進 行無菌操作 用解剖刀垂直葉脈劃出傷口 將葉 片切成約 0 5 cm 0 5 cm 大小 正面朝上接種在 培養(yǎng)基上 培養(yǎng)基在 121 條件下滅菌 20 min 高溫滅菌 前 pH 值調(diào)至 5 8 左右 接種后在培養(yǎng)溫度為 25 光照時間為 12 h d 1 光照強度 2 000 lx 的無菌室 中培養(yǎng) 1 3 試驗設(shè)計 取樣時期試驗 分別在 4 5 6 10 月份進行初代 培養(yǎng) 每瓶接種 3 個外植體 每個時期接種 20 瓶 觀 察愈傷組織生長狀況 消毒時間試驗 以 MS 1 0 mg L 1 6 BA 1 0 mg L 1 NAA 為培養(yǎng)基 4 月份取幼嫩葉片 升汞消 毒時間分別設(shè)定為 3 4 5 6 7 8 min 接種 30 d 后觀 察愈傷組織生長狀況 不同激素配比試驗 在 MS 培養(yǎng)基中添加不同 質(zhì)量濃度的 6 BA NAA KT 培養(yǎng)基中加入瓊脂 6 g L 1 蔗糖 30 g L 1 4 月份取幼嫩葉片接 種 30 d 后觀察愈傷組織生長情況 不同激素配 比組成見表 1 1 4 測定指標與方法 污染率 污染數(shù) 接種數(shù) 100 愈傷組織誘導(dǎo)率 未污染外植體產(chǎn)生愈傷組 織數(shù) 未污染外植體總數(shù) 100 愈傷化程度的測定指標 表示小于 50 葉 片劃傷處 表示大于 50 葉片劃傷處 表示大于 50 葉片劃傷處和主脈部位 表 示大于 50 葉片劃傷處 主脈部位和葉片表面或背 面被愈傷組織覆蓋 表 1 不同激素配比組成 培養(yǎng)基 激素質(zhì)量濃度 mg L 1 6 BA NAA KT M 1 1 0 0 5 0 M 2 2 0 0 5 0 M 3 4 0 0 5 0 M 4 1 0 1 0 0 M 5 1 0 2 0 0 M 6 1 0 4 0 0 M 7 2 0 1 0 0 M 8 2 0 2 0 0 M 9 1 0 1 0 1 0 M 10 1 0 1 0 2 0 M 11 1 0 1 0 4 0 2 結(jié)果與分析 2 1 取材時間對愈傷組織誘導(dǎo)的影響 表 2 顯示 4 月份和 10 月份誘導(dǎo)愈傷組織生長 狀況最好 呈翠綠色顆粒狀 且污染率較其他時期明 顯降低 僅分別為 5 5 6 7 而 5 月份和 6 月份污 染率分別為 34 5 和 48 7 且 4 月份和 10 月份 誘導(dǎo)率均達 100 而 5 月份和 6 月份愈傷組織誘導(dǎo) 率僅為 51 8 和 42 8 同時 4 月份和 10 月份采 集的葉片出愈時間較早 其愈傷組織形成高峰期比 5 月份和 6 月份的材料平均提前 5 d 且 4 月份和 10 月份的愈傷化程度較高 有利于雙色茉莉的離體快 速繁殖 表 2 取材時間對愈傷組織誘導(dǎo)的影響 取材時間 葉片卷曲 變形時間 d 愈傷組織形成 高峰時間 d 愈傷化 程度 愈傷組織 生長狀況 污染 率 愈傷組織 誘導(dǎo)率 4 月份 2 13 致密 翠綠色顆粒狀 5 5 100 0 5 月份 8 18 疏松 淺綠色顆粒狀 顆粒較小 外植體失綠 34 5 51 8 6 月份 12 20 疏松 淺綠色水澤狀 外植體失綠嚴重 48 7 42 8 10 月份 6 15 致密 翠綠色顆粒 6 7 100 0 86 東 北 林 業(yè) 大 學(xué) 學(xué) 報 第 48 卷 2 2 消毒時間對愈傷組織誘導(dǎo)的影響 由表 3 可以看出 增加升汞對外植體的浸泡時 間可以有效降低污染率 但是過長的時間也會使葉 片的生理功能受到不同程度的損傷 將葉片在升汞 中浸泡 7 8 min 葉片明顯失去原有的綠色 且產(chǎn)生 的愈傷組織呈現(xiàn)黃綠色 而浸泡時間為 3 4 min 時 葉片雖然保持了原有的生理活性 但是愈傷化程度 較低 且誘導(dǎo)產(chǎn)生的愈傷組織生長狀況不佳 浸泡 5 6 min 時 葉片的愈傷化程度最高 且愈傷組織生長 狀況最優(yōu) 綜上所述 以雙色茉莉葉片為外植體 在 0 1 氯化汞溶液中浸泡 5 6 min 最有利于雙色茉 莉葉片愈傷組織的誘導(dǎo) 表 3 消毒時間對愈傷組織誘導(dǎo)的影響 消毒時間 min 接種數(shù) 個 污染率 愈傷組織誘導(dǎo)率 愈傷化程度 愈傷組織生長狀況 3 20 46 67 100 不連續(xù)疏松 綠色顆粒狀 4 20 36 84 100 不連續(xù)疏松 黃綠色顆粒狀 5 20 5 00 100 連續(xù)致密 白色顆粒狀 6 20 5 00 100 連續(xù)致密 白色顆粒狀 7 20 5 00 100 不連續(xù)致密 黃綠色顆粒狀 8 20 0 100 不連續(xù)疏松 黃綠色顆粒狀且外植體出現(xiàn)失綠現(xiàn)象 2 3 不同激素配比對愈傷組織誘導(dǎo)的影響 由表 4 和圖 1 中 M 1 M 8 處理相比可以看出 細 胞分裂素質(zhì)量濃度 生長素質(zhì)量濃度對誘導(dǎo)愈傷組 織有一定影響 比值相同的愈傷化程度和愈傷組織 生長狀況基本一致 其中 M 4 M 5 M 6 M 8 處理細胞 分裂素質(zhì)量濃度 生長素質(zhì)量濃度為 1 4 1 誘導(dǎo)產(chǎn) 生的愈傷組織生長狀況較優(yōu) 且愈傷化程度較高 由此可見 NAA 有利于誘導(dǎo)雙色茉莉葉片愈傷組織 的誘導(dǎo) 而高質(zhì)量濃度 6 BA 則相反 不利于愈傷組 織的形成 有利于雙色茉莉葉片愈傷組織誘導(dǎo)的培 養(yǎng)基為 MS 1 0 mg L 1 6 BA 1 0 mg L 1 NAA MS 1 0 mg L 1 6 BA 2 0mg L 1 NAA MS 1 0 mg L 1 6 BA 4 0 mg L 1 NAA 和 MS 2 0 mg L 1 6 BA 2 0 mg L 1 NAA 與 M 4 相比 M 9 M 11 中加入了 KT 由表 4 和圖 1 可見 添加不同質(zhì)量濃度的 KT 溶液對誘導(dǎo)愈傷組 織沒有產(chǎn)生正向作用 其愈傷化程度和愈傷組織生 長狀況均不及未添加 KT 的處理 且劃傷處愈傷組 織顏色明顯變?yōu)槟G色水浸褐化狀 因此 KT 不利 于雙色茉莉葉片誘導(dǎo)愈傷組織的誘導(dǎo) 表 4 不同激素配比對愈傷組織誘導(dǎo)的影響 處理 6 BA 質(zhì)量濃度 NAA 質(zhì)量濃度 KT 質(zhì)量濃度 mg L 1 接種 數(shù) 個 出愈 數(shù) 個 愈傷組織 誘導(dǎo)率 愈傷化 程度 愈傷組織的顏色及生長狀況 M 1 2 0 15 15 100 劃傷處致密 深綠色顆粒狀 覆蓋葉片處疏松水澤狀 M 2 4 0 15 15 100 致密 淺綠色顆粒狀 M 3 8 0 15 15 100 疏松 黃綠色顆粒狀 M 4 1 0 15 15 100 致密 翠綠色顆粒狀 M 5 1 2 0 15 15 100 致密 翠綠色顆粒狀 M 6 1 4 0 15 15 100 致密 淺綠色顆粒狀 M 7 2 0 15 15 100 劃傷處致密 深綠色顆粒狀 覆蓋葉片處疏松水澤狀 M 8 1 0 15 15 100 致密 翠綠色顆粒狀 M 9 1 1 0 15 15 100 連續(xù)致密 墨綠色水浸褐化狀 M 10 1 2 0 15 15 100 不連續(xù)致密 墨綠色水浸褐化狀 M 11 1 4 0 15 15 100 不連續(xù)疏松 水浸褐化狀 3 結(jié)論與討論 本研究表明 取材的時間和部位直接影響了雙 色茉莉葉片誘導(dǎo)愈傷組織的誘導(dǎo) 4 月份和 10 月份 為取材的最佳時期 誘導(dǎo)率最高 這與前人研究結(jié)果 一致 王玲平等 10 在研究雙色茉莉莖段離體培養(yǎng)時 也指出 4 月份和 10 月份取材最好 誘導(dǎo)率達 84 93 袁媛等 9 也指出 3 4 月份取材葉片效果較 好 這可能是因為 3 4 月份和 10 月份分別為雙 色茉莉春梢和秋稍生長期 生長代謝比較活躍 有利 于愈傷組織的誘導(dǎo) 且新生嫩葉與外界接觸時間較 短 因此污染率較低 升汞消毒時間為 5 6 min 時效果最佳 污染率 低 且保持了葉片最佳的生理狀態(tài) 升汞消毒時間 短 不能有效殺死微生物 而消毒時間過長又會對材 料造成傷害 而最佳消毒時間為 5 6 min 而呂孟 雨等 6 用 0 2 升汞對莖尖消毒的最佳時間為 5 min 本研究中選用的升汞質(zhì)量分數(shù)為 0 1 外植體 選擇葉片 最佳消毒時間為 5 6 min 時 污染率控制 在 5 而劉敏杰等 5 指出 莖段消毒的最佳時間為 3 min 時間長容易發(fā)生褐化 這說明與莖段相比 葉片和莖尖更耐升汞消毒 96第 5 期 馬麗 等 雙色茉莉葉片初代培養(yǎng)物的建立及愈傷組織誘導(dǎo) a M 1 M 7 b M 2 c M 3 d M 4 M 5 M 8 e M 6 f M 9 g M 10 h M 11 圖 1 不同激素配比條件下愈傷組織生長情況 生長調(diào)節(jié)物質(zhì)的質(zhì)量濃度及配比影響產(chǎn)生愈傷 組織的質(zhì)量 6 BA 質(zhì)量濃度 NAA 質(zhì)量濃度分別為 1 4 1 2 1 的培養(yǎng)基誘導(dǎo)產(chǎn)生的愈傷組織生長狀況 較優(yōu) 且愈傷化程度較高 6 BA 質(zhì)量濃度 NAA 質(zhì) 量濃度過高則不利于葉片愈傷組織的誘導(dǎo) 因此 適 宜于愈傷組織誘導(dǎo)的 6 BA 質(zhì)量濃度 NAA 質(zhì)量濃 度為 4 1 1 本研究指出 KT 的添加不利于雙色茉 莉葉片愈傷組織的誘導(dǎo) KT 在雙色茉莉組織培養(yǎng)中 的應(yīng)用 前人也鮮有報道 前人通過對其他植物組 織培養(yǎng)的研究指出 隨著 KT 質(zhì)量濃度的增加 愈傷 07 東 北 林 業(yè) 大 學(xué) 學(xué) 報 第 48 卷 組織誘導(dǎo)率呈下降趨勢 11 12 與本研究結(jié)果一致 關(guān)于雙色茉莉葉片組織培養(yǎng)的報道較少 本研究探 索出雙色茉莉葉片愈傷組織誘導(dǎo)適宜的培養(yǎng)基為 MS 1 0 mg L 1 6 BA 1 0 mg L 1 NAA MS 1 0 mg L 1 6 BA 2 0 mg L 1 NAA MS 1 0 mg L 1 6 BA 4 0 mg L 1 NAA 和 MS 2 0 mg L 1 6 BA 2 0 mg L 1 NAA 這為雙色茉莉葉片進一步分化成完整 植株奠定了基礎(chǔ) 參 考 文 獻 1 魏海龍 雙色茉莉組織培養(yǎng)技術(shù)體系研究 D 雅安 四川農(nóng)業(yè) 大學(xué) 2002 2 李路文 石玉蓮 申鵬 雙色茉莉繁殖方法與栽培管理技術(shù) J 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技 2013 9 173 174 3 郝玉華 我國植物組織培養(yǎng)的發(fā)展現(xiàn)狀與前景展望 J 江蘇農(nóng) 業(yè)科學(xué) 2008 4 20 23 4 周亞輝 熊帥 植物組織培養(yǎng)快速繁殖成功的影響因素 J 中 國園藝文摘 2016 2 223 224 5 劉敏杰 劉柱明 雙色茉莉的組培快繁體系建立 J 現(xiàn)代園藝 2016 13 10 11 6 呂孟雨 魏景若 葛亞新 雙色茉莉組培快繁及試管苗移栽技術(shù) J 農(nóng)業(yè)科技通訊 1998 2 17 7 王蒂 陳勁楓 植物組織培養(yǎng) M 2 版 北京 中國農(nóng)業(yè)出版社 2013 146 148 8 付凱 王玉英 顧曉紅 雙色茉莉的組織培養(yǎng) J 植物雜志 1986 1 17 9 袁媛 連芳青 鴛鴦茉莉不同外植體誘導(dǎo)愈傷組織研究初探 J 北方園藝 2010 1 168 171 10 王玲平 魏海龍 石大興 等 雙色茉莉莖段離體培養(yǎng)再生植株 的研究 J 浙江林業(yè)科技 2008 28 5 20 24 11 毛雅妮 張德罡 孫娟 等 KT 對白花草木樨不同外植體愈傷 組織培養(yǎng)的影響 J 草原與草坪 2009 5 33 34 12 朱軍 王芳 新疆紫草愈傷組織誘導(dǎo)及植株再生研究 J 新疆 農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報 2007 30 3 14 18 上接 66 頁 18 GAO L X YANG H X LIU H F et al Extensive transcriptome changes underlying the flower color intensity variation in Paeonia ostii J Frontiers in Plant Science 2016 6 1205 19 IWASHINA T Contribution to flower colors of flavonoids inclu ding anthocyanins J Natural Product Communications 2015 10 3 529 544 20 WEISS D egulation of flower pigmentation and growth multiple signaling pathways control anthocyanin synthesis in expanding petals J Plant Physiol 2000 110 2 152 157 21 MO EAU C AMB OSE M J TU NE L et al The b gene of pea encodes a defective flavonoid 3 5 hydroxylase and confers pink flower color J Plant Physiol 2012 159 2 759 768 22 MIYAGAWA N MIYAHA A T OKAMOTO M et al Di hydroflavonol 4 reductase activity is associated with the intensity of flower colors in delphinium J Plant Biotechnol 2015 32 3 249 255 23 LI M SUN Y T LU X C et al Proteomics reveal the profiles of color change in brunfelsia acuminata flowers J Int J Mol Sci 2019 20 8 1 16 24 LEPINIEC L DEBEAUJON I OUTABOUL J M et al Genet ics and biochemistry of seed flavonoids J Annu ev Plant Bi ol 2006 57 1 405 430 25 PET ONI K TONELLI C ecent advances on the regulation of anthocyanin synthesis in reproductive organs J Plant Sci 2011 181 3 219 229 26 ZHAO D TAO J HAN C et al Flower colour diversity revealed by differential expression of flavonoid biosynthetic genes and fla vonoid accumulation in herbaceous peony Paeonia lactiflora Pall J Mol Biol ep 2012 39 11263 11275 27 戴思蘭 洪艷 基于花青素苷合成和呈色機理的觀賞植物花色 改良分子育種 J 中國農(nóng)業(yè)科學(xué) 2016 49 3 529 542 28 WU Y Q WEI M ZHAO D Q et al Flavonoid content and expression analysis of flavonoid biosynthetic genes in herbaceous peony Paeonia lactiflora Pall with double colors J Journal of Integrative Agriculture 2016 15 9 2023 2031 29 LI Z J ZHAO M Y JIN J F et al Anthocyanins and their bio synthetic genes in three novel colored osa rugosa cultivars and their parents J Plant Physiology and Biochemistry 2018 129 421 428 30 韓科廳 趙莉 唐杏姣 等 菊花花青素苷合成關(guān)鍵基因表達與 花色表型的關(guān)系 J 園藝學(xué)報 2012 39 3 516 524 31 DUBOS C ST ACKE G OTEWOLD E et al MYB tran scription factors in Arabidopsis J Trends Plant Sci 2010 15 10 573 581 32 XU W J G AIN D BOBET S et al Complexity and robustness of the flavonoid transcriptional regulatory network revealed by comprehensive analyses of MYB bHLH WD complexes and their targets in Arabidopsis seed J New Phytology 2014 202 1 132 144 33 B OUN P Transcriptional control of flavonoid biosynthesis a complex network of conserved regulators involved in multiple as pects of differentiation in Arabidopsis J Current Opinion in Plant Biology 2005 8 3 272 279 34 NAKATSUKA T HA UTA K S PITAKSUTHEEPONG C et al Identification and characterization of 2 3 MYB and bHLH transcription factors regulating anthocyanin biosynthesis in gentian flowers J Plant Cell Physiology 2008 49 12 1818 1829 35 MO ITA Y SAITOH M HOSHINO A et al Isolation of cD NAs for 2 3 MYB bHLH and WD transcriptional regulators and identification of c and ca mutations conferring white flowers in the Japanese morning glory J Plant Cell Physiology 2006 47 4 457 470 36 TAKOS A M JAFFE F W JACOB S et al Light induced ex pression of a MYB gene regulates anthocyanin biosynthesis in red apples J Plant Physiology 2006 142 3 1216 1232 37 DELUC L G BOGS J WALKE A et al The transcription factor VvMYB5b contributes to the regulation of anthocyanin and proanthocyanidin biosynthesis in developing grape berries J Plant Physiology 2008 147 4 2041 2053 38 宋雪薇 魏解冰 狄少康 等 花青素轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控機制及代謝 工程研究進展 J 植物學(xué)報 2019 54 1 136 159 39 SPELT C QUATT OCCHIO F MOL J et al anthocyanindin of petunia encodes a basic helix loop helix protein that directly acti vates transcription of structural anthocyanin genes J Plant Cell 2000 12 9 1619 1631 40 MOONEY M DEMOS T HA ISON K et al Altered regula tion of tomato and tobacco pigmentation genes caused by the deli la gene of Antirrhinum J Plant J 1995 7 2 333 339 41 劉曉芬 李方 殷學(xué)仁 等 花青苷生物合成轉(zhuǎn)錄調(diào)控研究進展 J 園藝學(xué)報 2013 40 11 2295 2306 42 LI C QIU J DING L et al Anthocyanin biosynthesis regulation of DhMYB2 and DhbHLH1 in Dendrobium hybrids petals J Plant Physiology Biochemistry 2017 112 335 345 43 XIANG L L LIU X F LI X et al A Novel bHLH transcription factor involved in regulating anthocyanin biosynthesis in chrysan themums Chrysanthemum morifolium amat J PLoS One 2015 10 11 e0143892 doi 10 1371 journal pone 0143892 17第 5 期 馬麗 等 雙色茉莉葉片初代培養(yǎng)物的建立及愈傷組織誘導(dǎo)