李德全 鄧自發(fā) 曹云英 等 芽孢桿菌 NH 8 對番茄根結線蟲病的生防效果 J 江蘇農業(yè)科學 2020 48 8 108 110 doi 10 15889 j issn 1002 1302 2020 08 019 芽孢桿菌 NH 8 對番茄根結線蟲病的生防效果 李德全 鄧自發(fā) 曹云英 孫利軍 南通大學生命科學學院 農業(yè)農村部南方平原玉米科學觀測實驗站 江蘇南通 226001 摘要 芽孢桿菌 NH 8 對多種植物病害均有較好的防治效果 為進一步驗證其田間防治效果 進行生防菌劑防 治番茄根結線蟲病的田間試驗 結果表明 設施大棚中使用生防菌劑 NH 8 能有效防治番茄根結線蟲病 校正防效 達到 81 18 同時對番茄還有一定的促生作用 菌劑處理 20 d 后 番茄苗株高 鮮質量和干質量分別比清水對照增 加 29 51 49 94 55 14 關鍵詞 芽孢桿菌 番茄 根結線蟲 防治效果 生防菌劑 中圖分類號 S436 412 1 文獻標志碼 A 文章編號 1002 1302 2020 08 0108 03 收稿日期 2019 07 20 基金項目 國家自然科學基金 編號 81272378 南通市應用基礎研 究 編號 MS12015089 南通大學重點項目 編號 03080227 作者簡介 李德全 1975 男 江蘇徐州人 博士 副教授 主要從事 生物防治和抗性生理研究 E mail lidequan ntu edu cn 根結線蟲作為一類重要的植物病原物 分布范 圍十分廣泛 包括熱帶和亞熱帶地區(qū) 危害比較嚴 重的南方根結線蟲 目前報道的接近 80 種 1 根結 線蟲在我國大多數省份均有發(fā)現 可侵染多種農作 物 致使寄主常年減產 15 25 有時高達 75 以上 嚴重影響了糧食 蔬菜 果樹 花卉等作物的 生產和出口創(chuàng)匯 蔬菜中尤以種植面積較大的番 茄 黃瓜等受害最重 2 對于根結線蟲病的防治 傳統(tǒng)以化學藥劑為主 但化學殺線蟲劑對環(huán)境污 染嚴重 使用過程中對人 畜也不安全 因此 生物 防治方法日益受到重視 其中應用微生物農藥進 行根結線蟲防治的研究較多 微生物農藥是指由 微生物及其代謝產物加工而成的具有殺蟲 殺菌 除草或調節(jié)植物生長的具有農藥活性的物質 包括 農用抗生素和活體微生物農藥 是生物防治的物質 基礎和重要手段 3 7 目前 生產中已有一些芽孢 桿菌用于根結線蟲防治 效果良好 阿維菌素是由 灰色鏈霉菌發(fā)酵產生的一種新型抗生素 對根結線 蟲病具有良好的防效 目前 防治線蟲的生防資源 主要有真菌 細菌等 防治線蟲的細菌主要有芽孢 桿菌和假單胞菌 8 10 江蘇省南通市是保護地蔬菜種植的重要基地 但近年來 根結線蟲危害日益嚴重 給設施蔬菜生 產造成很大損失 嚴重影響本地農業(yè)的可持續(xù)發(fā) 展 為解決生產中根結線蟲病的防治問題 近年來 有一些關于中低毒藥劑和生防菌防治根結線蟲病 方面的試驗報道 11 為保護本地蔬菜免受根結線 蟲的危害 減輕根結線蟲對蔬菜產量的損失 南通 大學生命科學學院細菌實驗室開展了根結線蟲生 防菌株的篩選應用 篩選到的芽孢桿菌 NH 8 對 多種植物病害有較好的防治效果 為進一步驗證 其田間防治效果 進行生防菌劑防治番茄根結線蟲 病田間效果試驗 1 材料與方法 1 1 供試材料 1 1 1 供試菌株 NH 8 菌株由筆者所在實驗室 從南通市近海海藻中分離獲得 將 NH 8 菌株在 28 130 r min 條件下振蕩培養(yǎng) 48 h 的菌液 用無菌 水配成 1 0 10 10 CFU mL 的菌懸液 以備灌根使用 1 1 2 供試作物 供試番茄品種為蘇粉 8 號 1 2 試驗地點 田間試驗選取在江蘇省海門市正余鎮(zhèn)昌盛村 以及如皋市石莊鎮(zhèn)楊莊村設施番茄田塊進行 室內 試驗在南通大學生物技術重點實驗室進行 試驗 土壤類型為沙土兩合土 肥力中等偏上 有機質含 量為 14 g kg 在定植時采用處理藥劑進行灌根 1 3 試驗方法 1 3 1 生防菌劑處理番茄 棚內面積為 400 m 2 50 m 8 m 設 3 個處理 每個處理 3 次重復 共 設置 9 個小區(qū) 采用隨機區(qū)組排列 每個小區(qū) 48 m 2 左右 各小區(qū)間設置 2 行隔離區(qū) 以防止藥液 互相干擾 于移栽前整地時施用充分腐熟的有機 801 江蘇農業(yè)科學 2020 年第 48 卷第 8 期 肥 番茄移栽時采用 NH 8 發(fā)酵液灌根處理 每株 灌根 250 mL 并在移栽 10 20 d 后分別用藥劑處理 1 次 以清水處理為對照 1 3 2 生防菌對番茄生長作用的影響 番茄移栽 后 20 d 隨機抽取移栽好的番茄苗 采用 5 點取樣 法 每點取番茄苗 3 株 調查地上部分植株的鮮質量 和地下部根質量 將番茄植株用自來水洗凈晾干 用直尺測量株高 游標卡尺測量主莖粗度 電子秤 稱量植株鮮質量和干質量 稱量干質量時 先將番 茄植株在烘箱中 45 烘干 每個處理重復 3 次 1 4 病害調查與統(tǒng)計分析 1 4 1 病害調查 于移栽后 60 d 調查根結線蟲的 危害程度 以及各處理的病情指數和病株防效 按 照 Luc 等提出的病級標準記錄病級數 12 計算病害 嚴重度和防效 病害嚴重度和防效的計算公式為 病害嚴重度 病植株數 病級數 總植 株數 最高病級數 100 防效 對照病害嚴重度 處理病害嚴重度 對照病害嚴重度 100 校正防效用 Henderson Tdlton 公式計算 校 正防治效果 1 處理區(qū)藥后病情指數 對照區(qū) 藥前病情指數 處理區(qū)藥前病情指數 對照區(qū)藥 后病情指數 100 1 4 2 數據分析 利用 DPS 軟件對數據進行統(tǒng)計 分析 采用 Duncan s 新復極差法對各個處理進行顯 著性驗證 2 結果與分析 2 1 生防菌劑 NH 8 對番茄的促生作用效果 NH 8 菌株對番茄生長影響的測定結果 表 1 顯示 菌株發(fā)酵液處理對番茄生長具有顯著的促進 作用 其中 菌株發(fā)酵液處理 20 d 后 苗株高 鮮質 量和干質量分別比清水對照增加 28 95 49 94 55 14 表 1 NH 8 菌株對番茄生長 20 d 時的影響 處理 株高 cm 主莖粗 cm 鮮質量 g 株 干質量 g 株 NH 8 菌株發(fā)酵液 31 67a 1 27a 12 67a 3 32a 清水 24 56b 0 75b 8 45b 2 14b 注 Duncan s 新復極差法多重比較 不同小寫字母表示 5 的顯 著水平 相同字母表示差異不顯著 2 2 生防菌劑 NH 8 對番茄根結線蟲病的防治 效果 試驗地區(qū)連續(xù) 6 年種植番茄的大棚里 根結線 蟲及腐霉 疫霉等多種病原物引起的根部病害非常 嚴重 在此進行的田間生物防治 試驗結果表明 生防菌劑 NH 8 對番茄根結線蟲病有著良好的防 治效果 根系增多壯實且相對光滑 根結明顯減少 圖 1 方差分析結果表明 生防菌劑 NH 8 的校 正防效達到 81 18 有顯著提高 表 2 901 江蘇農業(yè)科學 2020 年第 48 卷第 8 期 表 2 生防菌劑 NH 8 對番茄根結線蟲病的防治效果 處理 施藥前 第 2 次藥后 60 d 病情指數 病穴率 病情指數 病穴防效 校正防效 生防菌劑 NH 8 6 33 16 67 4 67 61 97 81 18 aC 清水對照 6 20 17 00 注 aC 表示 5 的顯著水平 3 討論 根結線蟲病是影響番茄生產的重要病害之一 目前防治主要利用殺線蟲劑 但應用化學殺線蟲劑 會嚴重影響人畜健康 對環(huán)境不友好 近年來 隨 著人們對健康的重視和環(huán)保意識的增強 根結線蟲 病的生物防治也越發(fā)受到重視 開發(fā)利用生防因 子來防治根結線蟲病害 一直是人們關注的熱點問 題 13 14 Sharond 等研究發(fā)現 哈茨木霉對爪哇根 結線蟲病具有很好的防治效果 并對植株的生長有 顯著促進作用 15 oberts 等研究發(fā)現 綠木霉菌株 GL3 對南方根結線蟲卵的孵化產生很好的抑制作用 同時對立枯絲核菌和疫霉均有較好的防治效果 16 Becker 等研究發(fā)現 假單胞菌和芽孢桿菌的一些菌株 能殺滅根結線蟲的活性 具有較好的防治效果 17 枯草芽孢桿菌 Bacillus subtilis 在自然界中廣 泛存在 同時還是植物體內常見的內生細菌 對人 畜無毒害 對環(huán)境無污染 具有顯著的抗菌活性和 極強的抗逆能力 同時 枯草芽孢桿菌生長快 容 易培養(yǎng) 本試驗利用的枯草芽孢桿菌 NH 8 菌株 對多種植物病原生物具有具有較強的拮抗性能 在 溫室試驗中 對南方根結線蟲的二齡幼蟲也有很好 的防治效果 表現出較強的生防性能 18 本試驗結 果進一步表明 生防菌劑 NH 8 對番茄根結線蟲有 著良好的防治效果 使番茄根系粗壯且相對光滑 根結明顯減少 校正防效達到 81 18 同時試驗 結果還表明 該生防菌劑對供試植株具有很好的促 生作用 由于試驗所選用田塊長期連作發(fā)病較重 在移栽初期用藥進行灌根處理 可有效抑制土壤中 根結線蟲低齡幼蟲進入番茄根內 防效較高 但隨 著生長期的延長 藥劑藥效逐漸降低 土壤中根結 線蟲密度增大 番茄根結線蟲病病情加重 如果在 番茄不同生長期進行施藥處理 防治效果或許更 好 其結果有待進一步試驗驗證 同時試驗沒有在 不同番茄品種間進行防病促生作用的對比 有待進 一步研究 參考文獻 1 丁國春 付 鵬 李紅梅 等 枯草芽孢桿菌 A 11 菌株對南方根 結線蟲的生物 J 南京農業(yè)大學學報 2005 28 2 46 49 2 魏利輝 周冬梅 王云鵬 等 枯草芽孢桿菌 168 的遺傳修飾菌株 對番茄根結線蟲病的生防作用 J 農業(yè)生物技術學報 2011 19 4 740 745 3 趙鴻孫 彭德良 朱建蘭 根結線蟲的研究現狀 J 植物保護 2003 29 6 5 9 4 李紅梅 沈培垠 徐建華 江蘇省進出口園林植物寄生線蟲的調 查研究 J 南京農業(yè)大學學報 2000 23 1 34 38 5 Kiewnick S Sikora A Biological control of the root knot nematode Meloidogyne incognita by Paecilomyces lilacinus strain 251 J Biological Control 2005 38 2 179 187 6 Oka Y Koltai H Bar E M et al New strategies for the control of plant parasitic nematodes J Pest Management Science 2000 56 11 983 988 7 朱玉坤 尹衍才 微生物農藥研究進展 J 生物災害科學 2012 35 4 431 434 8 Mohammed S H Saedy M A Enan M et al Biocontrol efficiency of Bacillus thuringiensis toxins against root knot nematode Meloidogyne incognita J Journal of Cell and Molecular Biology 2008 7 1 57 66 9 Xiao T J Tan S Y Shen Q et al Bacillus cereus X5 suppresses root knot nematode of tomato by colonizing in roots and soil J African Journal of Microbiology esearch 2012 6 10 2321 2327 10 eddy P P ecent advances in crop protection in avermectins M London Springer 2013 11 丁曉帆 梁 蓉 王新軍 甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽對南方根結 線蟲的毒力 防效 J 南京農業(yè)大學學報 2009 32 4 85 88 12 Luc M Sikora A Bridge J Plant parasitic nematodes in subtropical and teopical agriculture M CAB Internation 1990 13 彭 震 蔣春號 魏利輝 等 生物農藥 使命 對黃瓜防病促生 的試驗分析 J 上海農業(yè)學報 2014 30 4 60 74 14 萬景旺 邵 穎 朱 華 等 生防菌 Jdm2 與生物源農藥混用防 治黃瓜根結線蟲病的效果 J 江蘇農業(yè)科學 2014 42 4 108 110 15 Sharond E Bar E M Chet I et al Biological control of the root knot nematode Meloidogyne javanic by Trichoderma harzianum J The American Phytopathological Society 2001 91 7 687 693 16 oberts D P Lohrke S M Meyer S L F et al Biocontrol agents applied individually and in combination for suppression of soilborne diseases of cucumber J Crop Protection 2005 24 2 141 155 17 Becker J O Zavaetam E Effects of rhizobacteria on root nem a todes and form ation J Phytopathology 1988 78 11 1466 1469 18 李德全 周鳴鳴 談 蓉 等 篩選和利用海洋細菌防治玉米紋 枯病試驗 J 江蘇農業(yè)科學 2014 42 8 118 121 011 江蘇農業(yè)科學 2020 年第 48 卷第 8 期