Guihaia Oct 2019 39 10 1327 1333 http www guihaia DOI 10 11931 guihaia gxzw201812057 引 文 格 式 劉 洋 王 玉 英 李 枝 林 等 大 花 蕙 蘭 紅 酒 蓮 瓣 蘭 邊 草 素 花 雜 交 種 組 培 快 繁 技 術(shù) J 廣 西 植 物 2019 39 10 1327 1333 LIUY WANGYY LIZL etal TissuecultureandrapidpropagationtechniquesinCymbidiumhybridum hongjiu C tortisepalum biancaosuhua J Guihaia 2019 39 10 1327 1333 大 花 蕙 蘭 紅 酒 蓮 瓣 蘭 邊 草 素 花 雜 交 種 組 培 快 繁 技 術(shù) 劉 洋 王 玉 英 李 枝 林 李 茹 云 南 農(nóng) 業(yè) 大 學(xué) 園 林 園 藝 學(xué) 院 昆 明650201 摘 要 該 研 究 以 大 花 蕙 蘭 紅 酒 Cymbidiumhybridum hongjiu 蓮 瓣 蘭 邊 草 素 花 C tortisepalum biancaosuhua F1 代 雜 交 種 原 球 莖 和 根 狀 莖 為 材 料 比 較 了 不 同 激 素 配 比 增 殖 分 化 生 根 的 培 養(yǎng) 基 建 立 了 適 用 雜 交 蘭 組 培 快 繁 體 系 結(jié) 果 表 明 1 2MS 6 BA1 0mg L 1 NAA1 0mg L 1 AC0 05 香 蕉80 g L 1 對 原 球 莖 增 殖 效 果 最 佳 增 殖 率 達(dá) 到307 1 2MS 6 BA1 5mg L 1 NAA1 0mg L 1 AC0 05 香 蕉80g L 1 有 利 于 原 球 莖 分 化 分 化 率 為82 1 2MS TDZ2 0mg L 1 NAA0 1mg L 1 AC0 05 香 蕉80g L 1 對 根 狀 莖 增 殖 分 化 效 果 最 佳 增 殖 率 為293 分 化 率 為79 1 2MS IBA0 5mg L 1 NAA0 3 mg L 1 AC0 05 香 蕉80g L 1 為 最 佳 生 根 培 養(yǎng) 基 生 根 率 達(dá) 到84 7 且 根 粗 苗 壯 葉 色 濃 綠 此 體 系 為 雜 交 蘭 種 苗 的 規(guī) 模 化 生 產(chǎn) 提 供 了 技 術(shù) 支 持 關(guān) 鍵 詞 蘭 花 雜 交 種 根 狀 莖 原 球 莖 增 殖 與 分 化 中 圖 分 類 號(hào) Q945 文 獻(xiàn) 標(biāo) 識(shí) 碼 A 文 章 編 號(hào) 1000 3142 2019 10 1327 07 Tissuecultureandrapidpropagationtechniquesin Cymbidiumhybridum hongjiu C tortisepalum biancaosuhua LIUYang WANGYuying LIZhilin LiRu InstituteofLandscapePlants YunnanAgriculturalUniversity Kunming650201 China Abstract Arapidpropagationtechniquesystemofhybridorchidwasestablishedbycomparingtheeffectsofdifferent hormoneratiosonproliferationandrooting withtheprotocormsandrhizomesofF1hybridsofCymbidiumhybridum hongjiu andC tortisepalum biancaosuhua wereusedasmaterials Theresultswereasfollows 1 2MS 6 BA1 0 mg L 1 NAA1 0mg L 1 AC0 05 banana80g L 1 hadthebestconductiveeffectsonproliferationofprotocorm andtheproliferativeratereachedto307 1 2MS 6 BA1 5mg L 1 NAA1 0mg L 1 AC0 05 banana80g L 1 mediumwasbeneficialtodifferentialprotocormculture andthedifferentialratewas82 1 2MS TDZ2 0mg L 1 收 稿 日 期 2019 05 25 基 金 項(xiàng) 目 云 南 省 重 點(diǎn) 新 產(chǎn) 品 開 發(fā) 計(jì) 劃 項(xiàng) 目 2012BB008 云 南 農(nóng) 業(yè) 大 學(xué) 自 然 科 學(xué) 青 年 科 研 基 金 2016ZR10 Supportedbythe KeyNewProductDevelopmentofYunnanProvince China 2012BB008 NaturalScienceYouthResearchFoundationofYunnanAgricul turalUniversity 2016ZR10 作 者 簡 介 劉 洋 1994 女 湖 南 邵 陽 人 碩 士 研 究 生 主 要 從 事 園 林 植 物 資 源 利 用 與 創(chuàng) 新 研 究 E mail 893747155 通 信 作 者 李 枝 林 碩 士 教 授 主 要 從 事 植 物 資 源 的 利 用 和 創(chuàng) 新 研 究 E mail 13708870986 NAA0 1mg L 1 AC0 05 banana80g L 1 mediumwasconductivetoproliferationanddifferentiationofrhizome andtheproliferativeratereached293 thedifferentialratewas79 Mediumof1 2MS IBA0 5mg L 1 NAA0 3 mg L 1 AC0 05 banana80g L 1 wasthebestforrooting therootingratewas84 7 andtherootswerehealthy withstrongseedlings andtheleavesweredarkgreen Thissystemprovidestechnicalsupportforlarge scaleproduction ofhybridorchidseedlings Keywords Orchidhybrid rhizome protocorm proliferationanddifferentiation 蘭 花 為 中 國 傳 統(tǒng) 名 花 觀 賞 價(jià) 值 極 高 國 蘭 ChineseCymbidium 是 中 國 傳 統(tǒng) 十 大 名 花 之 一 通 常 是 指 蘭 科 蘭 屬 Cymbidium 植 物 中 的 部 分 地 生 蘭 其 花 型 較 小 但 氣 味 芳 香 葉 態(tài) 優(yōu) 美 大 花 蕙 蘭 Cymbidiumhybridum 屬 蘭 科 Orchidaceae 蘭 屬 Cymbidium 多 年 生 草 本 植 物 是 蘭 屬 內(nèi) 一 些 附 生 蘭 雜 交 種 的 統(tǒng) 稱 其 大 部 分 品 種 葉 片 長 且 披 散 花 無 香 味 朱 根 發(fā) 等 2004 大 花 蕙 蘭 紅 酒 為 大 花 早 開 花 品 種 常 在 圣 誕 節(jié) 前 后 開 花 可 用 于 培 育 圣 誕 節(jié) 開 花 的 紅 花 盆 栽 品 種 蓮 瓣 蘭 邊 草 素 花 是 蘭 科 蘭 屬 多 年 生 草 本 植 物 屬 地 生 蘭 為 細(xì) 葉 蓮 瓣 蘭 類 葉 槽 較 深 葉 邊 金 黃 色 花 為 淡 黃 色 全 素 開 花2 4 朵 花 幽 香 以 紅 酒 邊 草 素 花 為 親 本 進(jìn) 行 種 間 雜 交 意 在 獲 得 花 期 長 花 朵 較 大 鮮 艷 美 麗 且 有 香 味 的 蘭 花 新 品 種 對 大 花 蕙 蘭 Cymbidiumhybri dum 若 采 用 傳 統(tǒng) 的 分 株 繁 殖 則 繁 殖 速 度 慢 周 期 長 盧 思 聰 1994 且 大 多 是 引 進(jìn) 的 國 外 優(yōu) 良 品 種 難 以 滿 足 市 場 需 求 因 此 需 通 過 組 織 培 養(yǎng) 來 快 速 繁 殖 大 花 蕙 蘭 國 內(nèi) 外 已 開 展 了 對 蘭 花 雜 交 種 的 研 究 目 前 已 有 數(shù) 千 個(gè) 品 種 但 對 地 生 蘭 和 附 生 蘭 雜 交 種 的 研 究 較 少 近 年 來 國 內(nèi) 的 研 究 大 多 集 中 在 雜 交 育 種 和 胚 培 養(yǎng) 方 面 鄭 立 明 2010 朱 根 發(fā) 等 2005 丁 長 春 和 夏 念 和 2011 陳 瑤 瑤 等 2009 雜 交 蘭 原 球 莖 的 增 殖 分 化 研 究 報(bào) 道 較 多 宋 蓮 等 2017 謝 利 等 2014 根 狀 莖 報(bào) 道 較 少 但 對 大 花 蕙 蘭 紅 酒 蓮 瓣 蘭 邊 草 素 花 F1 代 雜 交 種 的 快 繁 技 術(shù) 目 前 尚 未 見 有 研 究 報(bào) 道 因 此 本 研 究 以 大 花 蕙 蘭 紅 酒 蓮 瓣 蘭 邊 草 素 花 F1 代 雜 交 種 的 根 狀 莖 和 原 球 莖 為 材 料 在 不 同 的 培 養(yǎng) 基 上 進(jìn) 行 增 殖 分 化 生 根 以 篩 選 出 最 適 培 養(yǎng) 基 從 而 為 雜 交 蘭 的 工 廠 化 生 產(chǎn) 和 新 品 種 選 育 奠 定 基 礎(chǔ) 1 材 料 與 方 法 1 1 材 料 大 花 蕙 蘭 紅 酒 與 蓮 瓣 蘭 邊 草 素 花 雜 交 種 原 球 莖 和 根 狀 莖 材 料 由 云 南 農(nóng) 業(yè) 大 學(xué) 花 卉 研 究 所 自 主 培 育 雜 交 種 萌 發(fā) 后 產(chǎn) 生 原 球 莖 和 根 狀 莖 雜 交 蘭 產(chǎn) 生 的 胚 狀 體 長 條 狀 稱 為 根 狀 莖 形 成 的 胚 狀 體 圓 球 形 稱 為 原 球 莖 從 中 分 別 挑 選 出 性 狀 長 勢 一 致 的 原 球 莖 和 根 狀 莖 為 試 驗(yàn) 材 料 本 試 驗(yàn) 在 云 南 農(nóng) 業(yè) 大 學(xué) 園 林 園 藝 學(xué) 院 花 卉 所 組 培 實(shí) 驗(yàn) 室 進(jìn) 行 1 2 方 法 1 2 1 原 球 莖 和 根 狀 莖 的 增 殖 分 化 將 原 球 莖 大 小 為0 3cm 和 根 狀 莖 約 為1 5cm 分 別 接 種 于 1 2MS 基 本 培 養(yǎng) 添 加 不 同 濃 度 配 比 的NAA TDZ 和6 BA 附 加 香 蕉80g L 1 和 活 性 炭0 5g L 1 暗 培 養(yǎng)45d 后 再 進(jìn) 行 光 照 培 養(yǎng) 培 養(yǎng) 條 件 為 溫 度 23 2 光 照 度1800 2500lx pH5 8 瓊 脂 7g L 1 和 蔗 糖30g L 1 每 處 理42 個(gè) 原 球 莖 根 狀 莖 處 理30 個(gè) 重 復(fù)3 次 對30d 后 的 增 殖 率 和 60d 后 的 出 芽 率 進(jìn) 行 數(shù) 據(jù) 分 析 1 2 2 生 根 培 養(yǎng) 將 苗 高2 3cm 的 無 根 苗 接 種 于 1 2MS 基 本 培 養(yǎng) 添 加 如 下 植 物 激 素 濃 度 6 BA0 3 mg L 1 NAA0 2 0mg L 1 和IBA0 1 0mg L 1 上 進(jìn) 行 光 照 培 養(yǎng) 培 養(yǎng) 條 件 同 上 培 養(yǎng)60d 統(tǒng) 計(jì) 生 根 率 根 長 根 粗 等 情 況 1 3 數(shù) 據(jù) 統(tǒng) 計(jì) 分 析 原 球 莖 增 殖 分 化 階 段 每 瓶5 個(gè) 每 處 理10 瓶 重 復(fù)3 次 根 狀 莖 增 殖 分 化 階 段 每 瓶5 個(gè) 每 處 理 10 瓶 重 復(fù)3 次 生 根 培 養(yǎng) 階 段 每 瓶5 苗 每 處 理 10 瓶 重 復(fù)3 次 數(shù) 據(jù) 采 用DPS9 50 統(tǒng) 計(jì) 軟 件 分 析 進(jìn) 行 差 異 顯 著 性 分 析 8 2 3 1 廣 西 植 物 39 卷 2 結(jié) 果 與 分 析 2 1 不 同 激 素 配 比 對 原 球 莖 增 殖 分 化 的 影 響 在 原 球 莖 增 殖 分 化 培 養(yǎng) 基 中 培 養(yǎng)10d 后 開 始 增 殖 出 芽 分 化 隨 著 天 數(shù) 的 增 加 增 殖 率 出 芽 率 增 大 30d 后 不 同 激 素 配 比 培 養(yǎng) 基 增 殖 率 出 芽 率 有 所 差 異 由 表1 可 知 隨 著6 BA 濃 度 的 增 加 增 殖 率 出 現(xiàn) 了 先 上 升 后 下 降 的 趨 勢 不 同 濃 度 6 BA 對 雜 交 蘭 原 球 莖 增 殖 分 化 影 響 顯 著 2 號(hào) 培 養(yǎng) 基1 2MS 6 BA1 0mg L 1 NAA1 0mg L 1 AC0 05 香 蕉80g L 1 對 原 球 莖 增 殖 分 化 最 好 增 殖 率 為307 比6 BA2 0mg L 1 2 5mg L 1 的 培 養(yǎng) 基 顯 著 高186 344 數(shù) 據(jù) 表 明6 BA 濃 度 高 于2 0mg L 1 原 球 莖 增 殖 率 明 顯 下 降 原 球 莖 出 芽 率 增 殖 不 明 顯 5 號(hào) 培 養(yǎng) 基 出 現(xiàn) 了 部 分 褐 化 由 此 可 見 激 素 濃 度 大 于 一 定 限 度 不 利 于 原 球 莖 增 殖 3 號(hào) 培 養(yǎng) 基 出 芽 率 顯 著 高 于 其 他 培 養(yǎng) 基 出 芽 率 為82 分 別 比 添 加NAA 1 0 2 0 2 5 mg L 1 培 養(yǎng) 基 培 養(yǎng) 的 出 芽 率 顯 著 高105 78 310 芽 體 翠 綠 無 褐 化 情 況 可 見6 BA1 5mg L 1 最 適 于 原 球 莖 出 芽 增 殖 太 低 或 太 高 濃 度 的 6 BA 均 不 能 啟 動(dòng) 芽 分 化 還 會(huì) 導(dǎo) 致 出 芽 黃 化 以 上 結(jié) 果 表 明 6 BA1 0mg L 1 有 利 于 原 球 莖 增 殖 6 BA1 5mg L 1 促 進(jìn) 分 化 培 養(yǎng) 效 果 最 佳 高 濃 度6 BA 抑 制 了 增 殖 分 化 效 果 表1 不 同 培 養(yǎng) 基 對 原 球 莖 增 殖 分 化 的 影 響 Table1 Effectsofdifferentmediaonproliferationanddifferentiationprotocorms 培 養(yǎng) 基 編 號(hào) Medium number 6 BA 濃 度 6 BAconcentration mg L 1 NAA 濃 度 NAAconcentration mg L 1 接 種 數(shù) Inoculation number 增 殖 數(shù) Proliferation number 增 殖 率 Proliferation rate 出 芽 數(shù) Budding number 出 芽 率 Buddingrate 1 0 5 1 0 42 57 143c 27 27c 2 1 0 1 0 42 123 307a 66 40b 3 1 5 1 0 42 90 221b 108 82a 4 2 0 1 0 42 44 107d 39 46b 5 2 5 1 0 42 27 69e 14 20c 注 同 列 數(shù) 據(jù) 后 不 同 小 寫 字 母 表 示 差 異 顯 著 P 0 05 下 同 Note Differentlowercaselettersinthesamecolumnshowsignificantdifferences P 0 05 Thesamebelow 2 2 不 同 激 素 配 比 對 雜 交 蘭 根 狀 莖 增 殖 分 化 的 影 響 將 原 球 莖 誘 導(dǎo) 出 來 的 根 狀 莖 接 種 于 不 同 濃 度 的 培 養(yǎng) 基 中 進(jìn) 行 培 養(yǎng) 隨 時(shí) 間 延 長 增 殖 分 化 出 根 狀 莖 不 定 芽 結(jié) 果 如 表2 所 示 不 同 濃 度TDZ 對 根 狀 莖 增 殖 分 化 效 果 明 顯 NAA 濃 度 為0 3mg L 1 處 理1 比 含TDZ2 0mg L 1 3 0mg L 1 的 培 養(yǎng) 基 顯 著 高288 443 隨 著TDZ 濃 度 的 增 加 增 殖 率 出 現(xiàn) 了 明 顯 下 降 的 趨 勢 表 明 高 濃 度 的 TDZ 不 利 于 根 狀 莖 增 殖 根 狀 莖 長 度 增 長 不 明 顯 顏 色 較 淺 TDZ 濃 度 為2 0mg L 1 時(shí) NAA 濃 度 為0 1mg L 1 分 化 效 果 最 佳 分 別 比 添 加NAA0 3 mg L 1 0 5 mg L 1 的 培 養(yǎng) 基 顯 著 高216 203 且 顏 色 呈 綠 色 根 狀 莖 長 度 明 顯 增 長 在 原 有 的 根 狀 莖 上 增 殖 出 長 短 不 一 的 根 狀 莖 莖 周 圍 新 長 出 茂 密 的 絨 毛 隨 著NAA 濃 度 增 加 分 化 率 越 低 抑 制 芽 的 分 化 芽 體 顏 色 較 淺 為 淡 綠 色 所 以 綜 合 考 慮4 號(hào) 培 養(yǎng) 基1 2MS TDZ2 0mg L 1 NAA0 1mg L 1 AC0 05 香 蕉80g L 1 對 根 狀 莖 增 殖 分 化 效 果 最 佳 增 殖 率 為293 出 芽 率 為79 出 芽 較 多 芽 體 呈 綠 色 以 上 結(jié) 果 表 明 TDZ2 0mg L 1 和NAA0 1 9 2 3 1 10 期 劉 洋 等 大 花 蕙 蘭 紅 酒 蓮 瓣 蘭 邊 草 素 花 雜 交 種 組 培 快 繁 技 術(shù) 表2 不 同 培 養(yǎng) 基 對 根 狀 莖 增 殖 分 化 的 影 響 Table2 Effectsofdifferentmediaonproliferationanddifferentiationrhizome 培 養(yǎng) 基 編 號(hào) Medium number TDZ 濃 度 TDZconcentration mg L 1 NAA 濃 度 NAAconcentration mg L 1 接 種 數(shù) Inoculation number 增 殖 數(shù) Proliferation number 增 殖 率 Proliferation rate 出 芽 數(shù) Budding number 出 芽 率 Buddingrate 1 1 0 0 3 30 49 163b 25 32c 2 2 0 0 3 90 38 42d 59 46b 3 3 0 0 3 90 27 30d 29 25c 4 2 0 0 1 30 88 293a 92 79a 5 2 0 0 5 30 23 77c 14 26c mg L 1 組 合 使 用 有 利 于 根 狀 莖 的 增 殖 分 化 高 濃 度 的TDZ NAA 抑 制 根 狀 莖 的 增 殖 分 化 效 果 2 3 不 同NAA IBA 濃 度 生 根 的 影 響 將 原 球 莖 和 根 狀 莖 分 化 的 無 根 小 苗 接 種 于 不 同 培 養(yǎng) 基 中 培 養(yǎng) 隨 著 時(shí) 間 延 長 苗 體 數(shù) 量 不 斷 增 加 60d 統(tǒng) 計(jì) 結(jié) 果 如 表3 可 知 不 同 激 素 配 比 的 培 養(yǎng) 基 對 植 株 生 根 有 影 響 2 號(hào) 培 養(yǎng) 基 和3 號(hào) 培 養(yǎng) 基 的 生 根 率 均 較 高 NAA 濃 度 在0 5 1 0mg L 1 為 最 佳 濃 度 生 根 率 均 達(dá) 到72 根 系 誘 導(dǎo) 較 好 根 粗 而 多 葉 色 濃 綠 長 勢 好 當(dāng)NAA 濃 度 大 于 1 0mg L 1 時(shí) 苗 的 生 根 受 到 抑 制 生 根 率 出 現(xiàn) 了 先 上 升 后 下 降 的 趨 勢 受 誘 導(dǎo) 形 成 的 組 培 苗 本 身 激 素 含 量 的 影 響 壯 苗 培 養(yǎng) 時(shí) 低 濃 度 的NAA 可 以 更 好 地 促 進(jìn) 苗 體 生 長 比 添 加NAA1 5mg L 1 2 0 mg L 1 顯 著 高46 140 但 是 不 添 加 NAA 植 株 則 表 現(xiàn) 為 矮 化 葉 片 部 分 黃 化 隨 著 IBA 濃 度 增 大 生 根 率 也 明 顯 提 高 生 根 率 出 現(xiàn) 了 先 上 升 后 下 降 的 趨 勢 在 左 利 娟 等 2015 的 研 究 中IBA 濃 度 對 雜 交 蘭 根 狀 莖 有 促 進(jìn) 作 用 本 研 究 NAA0 3mg L 1 和IBA0 5mg L 1 組 合 使 用 為 最 佳 濃 度 生 根 率 為84 7 分 別 比 添 加IBA0mg L 1 0 3 mg L 1 1 0 mg L 1 的 培 養(yǎng) 基 顯 著 高 11 32 9 57 4 綜 合 考 慮 1 2MS IBA0 5 mg L 1 NAA0 3mg L 1 AC0 05 香 蕉80 g L 1 為 最 佳 生 根 培 養(yǎng) 基 以 上 結(jié) 果 表 明 高 濃 度NAA 抑 制 了 生 根 效 果 IBA0 5mg L 1 和NAA0 3mg L 1 組 合 使 用 促 進(jìn) 植 株 生 根 且 葉 色 濃 綠 根 數(shù) 較 多 而 粗 苗 長 勢 良 好 3 討 論 與 結(jié) 論 蘭 科 植 物 大 多 是 由 原 球 莖 分 化 成 完 整 植 株 Amaki Haguchi 1989 雜 交 蘭 誘 導(dǎo) 分 化 出 原 球 莖 進(jìn) 一 步 生 長 為 根 狀 莖 王 國 興 1989 用 于 蘭 花 組 培 的 材 料 主 要 有 莖 尖 葉 片 種 子 目 前 大 多 采 用 種 子 萌 發(fā) 形 成 中 間 材 料 進(jìn) 行 擴(kuò) 繁 本 研 究 以 雜 交 蘭 原 球 莖 和 根 狀 莖 為 材 料 進(jìn) 行 組 培 研 究 以 期 實(shí) 現(xiàn) 雜 交 蘭 的 規(guī) 模 化 繁 殖 原 球 莖 增 殖 分 化 選 擇 培 養(yǎng) 基 尤 為 重 要 適 宜 濃 度 的 激 素 配 比 對 原 球 莖 的 增 殖 分 化 影 響 較 大 吳 彥 秋 等 2016 以 杜 鵑 蘭 原 球 莖 為 材 料 對 比 在 1 2MS MS VW KC 培 養(yǎng) 基 上 的 不 同 生 長 情 況 1 2MS 培 養(yǎng) 基 的 增 殖 率 及 長 勢 顯 著 高 于 其 他 處 理 孫 芳 等 2012 和 孫 玉 芬 等 2014 研 究 也 顯 示 蘭 屬 植 物 組 培 以 1 2MS 效 果 較 適 宜 聶 菁 等 2016 以 蝴 蝶 蘭 品 種 紅 太 陽 無 菌 播 種 形 成 的 原 球 莖 為 材 料 6 BA5 0mg L 1 NAA0 7mg L 1 為 最 佳 的 類 原 球 莖 誘 導(dǎo) 和 增 殖 培 養(yǎng) 基 濃 度 本 研 究 在 激 素 和 培 養(yǎng) 基 選 擇 具 有 相 同 性 以1 2MS 培 養(yǎng) 基 中 添 加6 BA1 0mg L 1 NAA1 0mg L 1 增 殖 分 化 效 果 最 佳 添 加NAA 6 BA 有 利 于 原 球 莖 分 化 這 與 相 關(guān) 研 究 宋 蓮 等 2017 胡 蕾 和 申 婷 2017 一 致 說 明 不 同 品 種 的 雜 交 蘭 對 激 素 的 0 3 3 1 廣 西 植 物 39 卷 表3 不 同 激 素 濃 度 對 雜 交 種 苗 生 根 情 況 Table3 Effectsofdifferenthormoneconcentrationsonrootingofhybridseedlings 編 號(hào) No IBA 濃 度 IBA concen tration NAA 濃 度 NAA concen tration 6 BA 濃 度 6 BA concen tration 轉(zhuǎn) 接 根 數(shù) Root number 生 根 情 況 Rootingcondition 生 根 率 Rooting percentage 平 均 根 數(shù) Average number ofroots 平 均 根 長 Average length ofroots mm 根 粗 Root diameter 苗 生 長 情 況 Growthofseedlings 1 0 0 0 3 0 46 06b 0 89bc 12 57a 葉 黃 化 長 勢 差 Yellowing poorgrowth 2 0 0 5 0 3 0 72 14a 1 23abc 11 50a 葉 色 濃 綠 長 勢 良 好 Leavesaredarkgreenandgrowwell 3 0 1 0 0 3 0 72 82a 1 62a 9 83ab 葉 色 濃 綠 長 勢 較 好 Leavesaredarkgreenandgrowwell 4 0 1 5 0 3 0 49 61b 1 31ab 8 09b 植 株 矮 化 少 量 葉 片 黃 化 Plantdwarfing asmallamountofleafyellowing 5 0 2 0 0 3 0 30 95b 0 84c 7 05b 莖 粗 壯 長 勢 一 般 Stemsstrong generalgrowth 6 0 0 3 0 0 39 24b 0 94a 4 7b 有 部 分 褐 化 長 勢 差 Partialbrowning poorgrowth 7 0 3 0 3 0 0 63 72ab 1 21a 9 01a 苗 粗 壯 長 勢 一 般 Seedlingsarestrongandgrownormally 8 0 5 0 3 0 0 84 71a 1 33a 8 02a 葉 色 濃 綠 長 勢 良 好 Leavesaredarkgreenandgrowwell 9 1 0 0 3 0 0 53 83ab 1 18a 9 25a 葉 色 濃 綠 長 勢 一 般 Leavesaredarkgreenandgrownormally 注 代 表 根 粗 一 般 代 表 根 粗 良 好 代 表 根 粗 健 壯 Note meansroughnessofrootsisgeneral meansrootthicknessisgood meansrootthicknessandrobustness 敏 感 性 有 差 異 雜 交 蘭 通 過 種 子 萌 發(fā) 獲 得 原 球 莖 進(jìn) 一 步 分 化 出 根 狀 莖 根 狀 莖 增 殖 速 度 較 慢 故 提 高 根 狀 莖 的 繁 殖 系 數(shù) 尤 為 關(guān) 鍵 陳 云 喜 等 2010 研 究 表 明6 BA 和NAA 組 合 使 用 促 進(jìn) 根 狀 莖 增 殖 分 化 說 明 原 球 莖 和 根 狀 莖 增 殖 分 化 有 其 相 似 性 TDZ 能 刺 激 植 株 再 生 Hutchinson Sax ena 1996 但TDZ 誘 導(dǎo) 芽 變 成 完 整 植 株 存 在 問 題 如 生 根 困 難 不 利 于 芽 的 生 長 等 Huetteman Preece 1993 在 紅 花 草 莓 組 培 誘 導(dǎo) 過 程 中TDZ 的 誘 導(dǎo) 效 果 優(yōu) 于6 BA TDZ 與NAA 配 合 使 用 效 果 優(yōu) 于 與IBA 的 組 合 金 美 芳 等 2017 在 蝴 蝶 蘭 的 不 定 芽 誘 導(dǎo) 中 單 獨(dú) 添 加TDZ 或6 BA 芽 誘 導(dǎo) 率 顯 著 高 于NAA 與TDZ 或6 BA 的 組 合 程 強(qiáng) 強(qiáng) 等 2011 TDZ 在 雜 交 蘭 根 狀 莖 的 增 殖 分 化 方 面 的 研 究 尚 未 報(bào) 道 因 此 本 實(shí) 驗(yàn) 使 用TDZ 和NAA 促 進(jìn) 根 狀 莖 增 殖 結(jié) 果 表 明TDZ 濃 度2 0mg L 1 和 NAA0 1mg L 1 組 合 使 用 時(shí) 根 狀 莖 增 殖 的 最 佳 效 果 這 與 程 強(qiáng) 強(qiáng) 等 2011 的 研 究 有 所 差 異 可 能 受 植 株 本 身 激 素 的 影 響 在 增 殖 培 養(yǎng) 中 所 需NAA 濃 度 較 低 激 素 濃 度 使 用 有 所 不 同 使 用 新 型 激 素 TDZ 和NAA 組 合 促 進(jìn) 根 狀 莖 增 殖 組 培 苗 長 勢 決 定 了 其 后 期 擴(kuò) 繁 和 移 栽 的 難 易 程 度 許 申 平 等 2018 以 墨 蘭 根 狀 莖 分 化 出 苗 培 養(yǎng) 基MS 25 g L 1 糖 7 5g L 1 瓊 脂 2g L 1 活 性 炭 墨 蘭 的 生 根 效 果 最 好 6 BA 和NAA 濃 度 增 加 幼 苗 生 根 率 下 降 本 研 究 與 之 相 較 差 異 較 大 這 可 能 由 雜 交 蘭 的 特 異 性 決 定 不 同 雜 交 蘭 遺 傳 特 性 的 差 異 導(dǎo) 致 在 生 根 階 段 所 需 激 素 種 類 不 一 同 種 激 素 不 同 濃 度 的 生 根 情 況 有 較 大 區(qū) 別 激 素 選 擇 上 IBA NAA 組 合 比6 BA NAA 組 合 生 根 率 要 好 生 根 培 養(yǎng) 基 選 擇1 2MS IBA0 5mg L 1 和NAA0 3mg L 1 組 合 可 以 促 進(jìn) 植 株 生 根 葉 色 濃 綠 根 數(shù) 較 多 而 粗 生 根 效 果 最 佳 與 左 利 娟 等 2015 的 研 究 一 致 有 研 究 表 明 活 性 炭 促 進(jìn) 增 殖 分 化 苗 體 生 根 防 止 褐 1 3 3 1 10 期 劉 洋 等 大 花 蕙 蘭 紅 酒 蓮 瓣 蘭 邊 草 素 花 雜 交 種 組 培 快 繁 技 術(shù) 化 王 玉 英 等 2015 在 輻 射 誘 變 的 線 藝 蘭 快 繁 技 術(shù) 體 系 研 究 中 加 入 了80g L 1 香 蕉 泥 本 研 究 在 增 殖 分 化 生 根 培 養(yǎng) 中 均 添 加 了 香 蕉 泥 和 活 性 炭 來 促 進(jìn) 苗 體 生 長 減 輕 葉 片 褐 化 現(xiàn) 象 本 研 究 結(jié) 果 表 明 誘 導(dǎo) 篩 選 并 建 立 了 大 花 蕙 蘭 紅 酒 蓮 瓣 蘭 邊 草 素 花 雜 交 蘭 的 快 繁 技 術(shù) 體 系 研 究 結(jié) 果 表 明 最 適 宜 原 球 莖 增 殖 的 培 養(yǎng) 基 為1 2MS 6 BA1 0mg L 1 NAA1 0mg L 1 AC 0 05 香 蕉80g L 1 原 球 莖 分 化 最 佳 培 養(yǎng) 基 為 1 2MS 6 BA1 5mg L 1 NAA1 0mg L 1 AC 0 05 香 蕉80g L 1 1 2MS TDZ2 0mg L 1 NAA0 1mg L 1 AC0 05 香 蕉80g L 1 對 根 狀 莖 增 殖 分 化 效 果 最 佳 1 2MS IBA0 5mg L 1 NAA0 3mg L 1 AC0 05 香 蕉80g L 1 為 最 佳 生 根 培 養(yǎng) 基 此 體 系 的 建 立 為 種 苗 生 產(chǎn) 提 供 了 技 術(shù) 支 持 參 考 文 獻(xiàn) AMAKIW HAGUCHI H 1989 Effects of dividing on the growthandorganogenesisofprotocorm likebodiesinDortae noosis J SciHortic 39 l 63 68 CHENYY ZHANGY ZHANGC etal 2009 Astudyon aseptic seed germination of interspecific hybrid between Cymbidiumhybrida C sinenseandC faberi J Acta HorticSin 36 3 441 446 陳 瑤 瑤 張 燕 張 琛 等 2009 雜交 蘭 韓 國 桃 花 蕙 蘭 種 間 雜 交 種 子 無 菌 萌 發(fā) 特 征 研 究 J 園藝學(xué) 報(bào) 36 3 441 446 CHEN YX HE DD LIAO HR et al 2010 Factors influencingonshootdifferentiationofrhizomeofCymbidium sinense Cymbidiumlancifolium J ChinAgricSciBull 26 9 65 69 陳 云 喜 何 丹 丹 廖 浩 如 等 2010 影 響 墨 蘭 兔 耳 蘭 根 狀 莖 芽 分 化 的 因 素 J 中 國 農(nóng) 學(xué) 通 報(bào) 26 9 65 69 CHENGQQ ZHUANGDH XUDX etal 2011 Thehigh frequencyinductionofadventitiousshootsandplantregene rationfromleafexplantsofPhalaenopsiswithaddedthidia zuron J SciPlantJ 29 4 524 530 程 強(qiáng) 強(qiáng) 莊 東 紅 許 大 熊 等 2011 TDZ 高效誘導(dǎo) 蝴 蝶 蘭 葉 片 不 定 芽 及 植 株 再 生 J 植物 科學(xué)學(xué)報(bào) 29 4 524 530 DING CC XIA NH 2011 Embryo culture of interspecific hybridbetweenCymbidiumtortisepalumandC skymintpatty J SWChinJAgricSci 24 4 1609 1611 丁 長 春 夏 念 和 2011 蓮 瓣蘭 與 大 花 蕙 蘭 黃 金 薄 荷 種 間 雜 種 胚 培 養(yǎng) 研 究 J 西南 農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào) 24 4 1609 1611 HUL SHENT 2017 Tissuecultureandrapidpropagationof hybridorchid J JZhejiangAgricSci 58 2 259 260 264 胡 蕾 申 婷 2017 雜 交 蘭 的 組 織 培 養(yǎng) 與 快 繁 技 術(shù) J 浙 江農(nóng) 業(yè) 科學(xué) 58 2 259 260 264 HUTCHINSONMJ SAXENAPK 1996 Acetylasalicylicacid enchancesand synchronizes TDZ induced somatic embryo genesisingeranium Pelargonium horturumBailey tissue cultures J PlantCellRep 15 512 515 HUETTEMAN CA PREECE JE 1993 TDZ A potent cytokininfor woody plant tissue culture J Plant Cell TissueOrganCult 33 105 119 JINMF CAOZ CAIJJ etal 2017 Tissuecultureandrapid propagation technique of red flowered strawberry J Guihaia 37 11 1395 1405 金 美 芳 曹 智 蔡 俊 杰 等 2017 紅 花草 莓 的組 織培 養(yǎng) 與 快 繁 技 術(shù) 研 究 J 廣 西 植物 37 11 1395 1405 LU SC 1994 Chinese Cymbidium and tactics of orchids M Beijing Golden Shield Press 62 81 盧 思 聰 1994 中國 蘭與 洋蘭 M 北京 金盾 出版 社 62 81 NIEQ LIULF RENHH etal 2016 Preliminarystudyon multiplication and regeneration system of protocorm like bodiesinphalaenopsis J ShanxiUniv NatSciEd 39 2 318 32 聶 菁 劉 麗 鳳 任 海 虹 等 2016 蝴 蝶 蘭 類原 球 莖誘 導(dǎo) 增殖 及 植 株 再 生 條 件 初 步 研 究 J 山 西 大學(xué) 學(xué) 報(bào) 自然科 學(xué) 版 39 2