浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報Acta Agriculturae Zhejiangensis 6 z ny b cn 柯義強 郭鵬輝 馬洪鑫 等 蘭州百合組培快繁體系的構(gòu)建 J 浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報 6 DO 6 issn 6 收稿日期 基金項目 甘肅省國際科技合作項目 YF W 66 科技部援助項目 Y 長江學(xué)者和創(chuàng)新團隊發(fā)展計劃 創(chuàng)新團隊 RT R 西北民族大學(xué)本科生創(chuàng)新項目 Y 甘肅省科技計劃 JR R 6 西北民族大學(xué)中央高?；究蒲袠I(yè)務(wù)費資金 西北民族大學(xué)中央高?；究蒲袠I(yè)務(wù)費專項資金資助研究生項目 Y m 6 作者簡介 柯義強 男 寧夏固原人 碩士研究生 研究方向為食品質(zhì)量安全與控制 m i 6 6 qq com 通信作者 高丹丹 m i g od n 6 com 蘭州百合組培快繁體系的構(gòu)建 柯義強 郭鵬輝 馬洪鑫 楊許花 高丹丹 劉湘君 馬忠仁 丁功濤 西北民族大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院 甘肅蘭州 西北民族大學(xué)生物醫(yī)學(xué)研究中心 甘肅蘭州 摘 要 以蘭州百合新鮮鱗莖為外植體 選擇 S和 S培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基 采用正交設(shè)計研究不同消 毒劑組合對外植體存活率 不同植物生長調(diào)節(jié)劑組合對愈傷組織誘導(dǎo)率和發(fā)芽率的影響 并用響應(yīng)面法優(yōu)化 不同激素組合對生根率的影響 結(jié)果表明 最佳消毒劑組合為 乙醇消毒 s 次氯酸鈉溶液浸 泡 min 外植體成活率可達 6 愈傷組織誘導(dǎo)最佳培養(yǎng)基配方為 S mg N mg 6 B 誘導(dǎo)率可達 6 促進發(fā)芽的最佳培養(yǎng)基配方為 S mg N mg 6 B 發(fā)芽率可達 促進生根的最佳培養(yǎng)基配方為 S mg N mg 6 B mg 活性炭 生根率可達 本研究建立的組培快繁體系可用于蘭州百合的快速大量繁殖 可為蘭州百 合組培苗的工廠化生產(chǎn)提供參考 關(guān)鍵詞 蘭州百合 快繁體系 植物組培 響應(yīng)面 中圖分類號 S6 Q 文獻標(biāo)志碼 文章編號 6 Rapid propagation system establishment of Lanzhou lily Yiqi ng GUO Peng ui ong in Y NG Xu u G O D nd n U Xi ng un Z ong en D NG Gong o College of Life Science and Engineering Northwest Minzu University Lanzhou 730124 China Biomedical Research Center Northwest Minzu University Lanzhou 730030 China Abstract To so ve e s o ge o nz ou i y seed ings mic o o g ion sys em o m ss oduc ion o nz ou i y seed ings s discussed in is s udy F es bu bs o nz ou i y e e used s e ini i n m e i nd S nd S medium e e used s e b sic medium T e o ogon design s used o s udy e e ec s o di e en disin ec n s on su viv e o e n s nd di e en n g o egu o s on c us nd c us e ed s oo s induc ion T e es onse su ce me od so s used o eve e e ec s o di e en o mones combin ions on oo ing T e esu s e e s o o s T e bes disin ec n combin ion s co o disin ec ion o s sodi um y oc o i e so u ion o min T e su viv e o e n s 6 T e bes medium o mu ion o c us induc ion s S mg N mg 6 B nd e induc ion e cou d e c 6 T e bes medium o mu o omo e c us e ed s oo s induc ion s S mg N mg 6 B nd e induc ion e cou d e c T e bes medium o mu o oo ing s S mg N mg 6 B mg c iv ed c bon e oo ing e cou d e c Key words nz ou i y id o g ion sys em n issue cu u e es onse su ce me od 蘭州百合屬球根作物 為多年生單子葉草本 植物 是全國唯一能夠食用的甜百合 蘭州百 合色澤潔白如玉 味道甜美 個頭大 纖維含量 低 富含秋水仙堿 礦物質(zhì) 微量元素和氨基 酸等多種營養(yǎng)成分 具有清熱解毒 潤肺美容 止 咳化痰 止痛止血 抗癌和增強人體免疫力等作 用 近年來 隨著其市場需求和種植面積增 加 蘭州百合相關(guān)產(chǎn)品的加工也初具規(guī)模 但由 于傳統(tǒng)育種存在耗時長 耗費勞動力 受限當(dāng)?shù)?的氣候條件和地理位置等缺點 使得其不能在短 時間內(nèi)大批量生產(chǎn) 這已成為制約蘭州百合相關(guān) 產(chǎn)業(yè)持續(xù)發(fā)展的瓶頸 與傳統(tǒng)繁殖方法相比 植物組織培養(yǎng)技術(shù)可以突破外界環(huán)境與傳統(tǒng)繁 殖難生根 年齡效應(yīng)等限制因素 能夠保持 品種的優(yōu)良特性 縮短育種周期 降低生產(chǎn)成本 提高成活率 滿足農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中大批量 高標(biāo)準(zhǔn)的 種苗生產(chǎn)要求 本研究以蘭州百合為研究對象 研究基礎(chǔ)培 養(yǎng)基 不同消毒劑與消毒時間 增殖與生根階段 激素種類和濃度對蘭州百合組培快繁體系建立 的影響 探索最適合蘭州百合的消毒方法 以及 愈傷組織誘導(dǎo) 發(fā)芽 生根的最佳激素配比 以期 為蘭州百合組培苗的工廠化發(fā)展提供參考 材料與方法 材料 市售蘭州百合 購于蘭州市城關(guān)區(qū)榆中街 市場 方法 培養(yǎng)基 基本培養(yǎng)基 S和 S培養(yǎng)基 根據(jù)需 要添加不同種類植物生長調(diào)節(jié)劑 其中 S培養(yǎng) 基中蔗糖為 g S培養(yǎng)基中蔗糖為 g 種培養(yǎng)基中各添加瓊脂 g 為 6 培養(yǎng)基在 滅菌 min備用 外植體消毒 取蘭州百合新鮮外植體自來水流水沖洗 min 再加入洗滌劑沖洗 min 將外植體切成 cm cm的小塊 置于超凈工作臺中 采 用 正交試驗設(shè)計 試驗因子與測試水平見 表 研究 種不同消毒劑 乙醇 次氯酸鈉 溶液 有效氯濃度 gC 溶液 相互 組合處理對外植體存活率的影響 所有組合處 理過的外植體均接種于含 S培養(yǎng)基的三角瓶 中 每個組合 瓶 每瓶外植體 個 d轉(zhuǎn)接 轉(zhuǎn)接 次 于 d后統(tǒng)計外植體存活率 成活率 存活外植體總數(shù)接種外植體總數(shù) 愈傷組織誘導(dǎo)與叢芽發(fā)生 取存活的外植體分別置于添加不同濃度梯 度N 6 B 和 D的 S培養(yǎng)基上 室溫下 培養(yǎng) 試驗采用 正交試驗設(shè)計 試驗因子 與測試水平見表 優(yōu)化激素添加種類和水平 以不加任何激素的 S培養(yǎng)基為對照組 試驗共 設(shè)置 個組合 每個組合 瓶 每瓶外植體 個 于 d后統(tǒng)計愈傷組織誘導(dǎo)率和發(fā)芽率 誘導(dǎo)率 愈傷組織誘導(dǎo)數(shù)接種總數(shù) 不定芽生根 將高 cm 具有 片葉的不定芽切 下 分別接種到含有不同濃度梯度的N 6 B 和活性炭的 S培養(yǎng)基上 室溫培養(yǎng) 采用響 應(yīng)面試驗設(shè)計 試驗因子與測試水平見表 以 生根率為指標(biāo) 優(yōu)化植物生長調(diào)節(jié)劑添加種類和 表1 外植體滅菌的因素與水平 Table 1 F c o s nd eve s o e n s e i iz ion 水平 eve s 因素F c o s A 乙醇 e no s B 次氯酸鈉 N C O min C 氯化汞 gC min 表2 愈傷組織誘導(dǎo)與叢芽發(fā)生影響因子和水平 Table 2 F c o s nd eve s o c us induc ion nd c us e ed s oo s induc ion mg 水平 eve s 因素F c o s A 萘乙酸 N B 6 芐氨基嘌呤 6 B C 二氯苯氧乙酸 D 柯義強 等 蘭州百合組培快繁體系的構(gòu)建 表3 不定芽生根的影響因子與水平 Table 3 F c o s nd eve s o oo ing mg 水平 eve s 因素F c o s A 萘乙酸 N B 6 芐氨基腺嘌呤 6 B C 活性炭 c iv ed c bon 添加量 以不含任何激素的 S培養(yǎng)基為對 照組 試驗共設(shè) 個組合 每個組合 瓶 每 瓶 個外植體 于 d后統(tǒng)計生根率 生根率 生根數(shù)接種總數(shù) 數(shù)據(jù)分析 采用 ce 進行數(shù)據(jù)整理 SPSS 進行方差分析 Design e 6 進行響 應(yīng)面處理 結(jié)果與分析 外植體滅菌 如表 和表 所示 個因素對外植體存活 率影響大小依次為 乙醇 次氯酸鈉 gC 對照組R值大于 gC 小于 乙醇和 次氯酸鈉 說明 乙醇和次氯酸鈉對外植體存 活率影響顯著 表6顯著性分析也表明 乙醇和次氯酸鈉在蘭州百合外植體的滅菌 保 證外植體存活方面具有極顯著影響 P 結(jié)果 表明 采用 乙醇和次氯酸鈉溶液消毒外植 體是防治污染 保證外植體存活的關(guān)鍵因素 通過以上分析可以看出 防止外植體污染 提高 存活率的最佳組合為 B 即 乙醇滅菌 s 次氯酸鈉溶液浸泡 min 外植體存活率可 達 6 表4 外植體滅菌存活率正交試驗設(shè)計方案與結(jié)果 Table 4 O ogon e e imen design nd esu o e n s e i iz ion su viv e 培養(yǎng)基 edium 試驗設(shè)計方案 e imen design A B C D 存活率 Su viv e 6 6 6 6 6 6 表5 極差分析結(jié)果 Table 5 Resu o nge n ysis 因素 F c o s k k k R 最優(yōu)水平 O im eve A 乙醇 6 66 no B 次氯酸鈉6 6 6 6 N C O C 氯化汞 gC 6 6 6 66 D 對照Con o 6 6 植物生長調(diào)節(jié)劑對愈傷組織誘導(dǎo)與叢芽發(fā) 生的影響 表 為愈傷組織誘導(dǎo)與叢芽發(fā)生正交試驗 結(jié)果 由表 的R值可以看出 N 6 和 6 B 為外植體誘導(dǎo)愈傷組織的最主要影 響因子 其次是 D 個因素的極差值 都大于對照組 由k值可以看出 因素A N 的最優(yōu)水平為A 因素B 6 B 的最優(yōu) 水平為B 方差分析 表 表明N 和6 B 對誘導(dǎo)蘭州百合外植體愈傷組織分化有極顯著 影響 P 同時N 和6 B 的平方和遠大于 D 且大 于對照組 說明誘導(dǎo)外植體愈傷組織分化的最佳 表6 外植體滅菌存活率方差分析結(jié)果 Table 6 i nce n ysis esu s o e n s e i iz ion su viv e 變異來源 Sou ce 平方和 Sum o squ e D 均方 e n squ e F顯著性 Signi ic nce 乙醇 C C O 次氯酸鈉N C O 6 gC 6 6 對照Con o 6 R D 自由度 表示在 水平上差異顯著 下同 D Deg ee o eedom indic ed e signi ic n di e ence eve T e s me s be o 浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報 第 卷 第6期 激素組合為A B 所以愈傷組織誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng) 基配方為 S mg N mg 6 B 愈傷組織誘導(dǎo)率最高達 6 由表 中k值可以看出 D對叢芽發(fā)生 的促進作用較小 N 和6 B 是主要的影響因 子 個因素對叢芽發(fā)生的影響大小依次為N 6 B D 方差分析 表 顯示 N 和 6 B 對誘導(dǎo)外植體發(fā)芽方面有極顯著影響 P 因此 與 誘導(dǎo)外植體愈傷組織分化的最佳激素組合一樣 誘導(dǎo)愈傷組織發(fā)芽的最佳激素配比也是 B 最 佳培養(yǎng)基配方為 S mg N mg 6 B 發(fā)芽率可達 植物生長調(diào)節(jié)劑對不定芽生根的影響 多元二次方程模型的建立與檢驗 選擇 個對生根影響顯著的因素 N 6 B 和活性炭 進行蘭州百合不定芽誘導(dǎo)響應(yīng)面 分析試驗 根據(jù)Bo Bekn en中心組合原理設(shè)計 表7 愈傷組織誘導(dǎo)與叢芽發(fā)生正交試驗設(shè)計方案與結(jié)果 Table 7 O ogon e e imen design nd esu o c us nd c us e ed s oo s induc ion 序號 No 試驗設(shè)計方案 e imen design A B C D 愈傷組織誘導(dǎo)率 R e o c us induc ion 叢芽發(fā)生率 R e o c us e ed s oo s induc ion 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 66 6 表8 極差分析結(jié)果 Table 8 Resu o nge n ysis 因素 F c o s 愈傷組織誘導(dǎo)率R e o c us induc ion k k k R 最優(yōu)水平 O im eve 叢芽發(fā)生率R e o c us e ed s oo s induc ion k k k R 最優(yōu)水平 O im eve A N 6 66 6 6 6 B 6 B 6 6 6 C D 6 6 6 D 對照Con o 6 表9 愈傷組織誘導(dǎo)率方差分析結(jié)果 Table 9 n ysis o v i nce o c us induc ion e 變異來源 Sou ce 平方和 Sum o squ e D 均方 e n squ e F顯著性 Signi ic nce A N 6 B 6 B 6 6 C D 6 誤差 o 6 表10 叢芽發(fā)生率方差分析結(jié)果 Table 10 n ysis o v i nce o c us e ed s oo s induc ion e 變異來源 Sou ce 平方和 Sum o squ e D 均方 e n squ e F顯著性 Signi ic nce A N 6 B 6 B 6 C D 6 誤差 o 6 柯義強 等 蘭州百合組培快繁體系的構(gòu)建 了 組試驗 包括 組重復(fù)試驗 結(jié)果如表 所示 利用Design e 6 軟件對表 中的試驗數(shù)據(jù)進行多元回歸擬合 得到生根率 Y 與植物生長調(diào)節(jié)劑N A 6 B B 和活 性炭 C 的實際值全變量二次多元回歸方程為 Y B C A B C 由表 可以看出 本模型所選用的二次多 項模型具有顯著性 P 說明該試驗方法 是可行的 本模型的二次方程能夠模擬真實 因素 水平的試驗結(jié)果 其決定系數(shù)R R d 說明二次多項模型可解釋 的響 應(yīng)值變化 僅有總模型的 不能用該二次多 項式解釋 表明此模型擬合度好 解釋本試驗方 法是可靠的 適合用于蘭州百合的生根優(yōu)化 由表 可以看出 模型所選用的二次多項 式模型在 水平內(nèi)極顯著 P 表明該 試驗方法是可行的 交互項BC在 水平內(nèi)顯 著 P 表明6 B 和活性炭兩因素交互作 用對蘭州百合外植體生根有顯著的影響 A 和 B 都在 水平內(nèi)極顯著 P 說明活性炭對蘭州百 合生根影響較小 響應(yīng)面分析和優(yōu)化 響應(yīng)曲面圖可直觀反應(yīng)出各因素之間交互 作用的強弱 響應(yīng)曲面坡度越陡峭 說明各因素 間的交互作用越顯著 響應(yīng)曲面越平緩 說明各 因素的交互作用越弱 圖 為6 B 和N 之間的交互作用 當(dāng)6 B 作用濃度一定時 隨著 N 濃度的增加 生根率先增加后減小 響應(yīng)曲 面顯著 有明顯峰值 圖 B為6 B 和活性炭之 間的交互作用 當(dāng)6 B 濃度一定時 隨著活性炭 表11 Bo Be nken試驗設(shè)計與結(jié)果 Table 11 Bo Be nken design nd e e e imen esu 培養(yǎng)基 edium 植物激素P n o mone A N mg B 6 B mg C 活性炭 c iv ed c bon mg 生根率 Roo ing e C C C C 6 C 6 6 6 C6 C 6 6 C C 6 6 C 6 C C C C 6 C C 6 6 C 表12 二次多項模型方差分析結(jié)果 Table 12 i nce n ysis o e i ed qu d ic o ynomi mode 方差來源 Sou ce 平方和 Sum o squ e D 均方 e n squ e F顯著性 Signi ic nce 模型 ode 66 失擬項 ck o i 6 純誤差Pu e o 總和Co To 66 66 6 R R d 浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報 第 卷 第6期 表13 響應(yīng)面回歸方程系數(shù)顯著性檢驗結(jié)果 T b e 13 Reg ession coe icien s nd ei signi ic nce o e qu d ic mode 方差來源 Sou ces o v i nce 平方和 Sum o squ e D 均方 e n squ e F P顯著性 Signi ic nce 模型 ode 66 A 6 6 6 B C 6 6 AB 6 AC 6 6 BC A 6 66 6 66 6 B C 6 6 6 表示在 水平上差異顯著 表示在 水平上差異顯著 indic ed e signi ic n di e ence eve indic ed e signi ic n di e ence eve 圖1 各因素響應(yīng)面 D圖 Fig 1 D es onse su ce o e c c o 濃度的增加 生根率先增加后減小 過高的活性 炭濃度會抑制生根率 圖 C為N 和活性炭之 間的交互作用 生根率隨著兩者濃度的增加先升 高后降低 有明顯的最大值 模型驗證試驗 Design e 6 軟件分析結(jié)果顯 示 各因素的最優(yōu)值為 N A mg 6 B B mg 活性炭 C mg 理論生根率為 但實際操作中C 培養(yǎng)基的生根率達 超過預(yù)測值 說明用響 應(yīng)面法優(yōu)化蘭州百合外植體生根條件是可行的 優(yōu)化后的蘭州百合組培過程 蘭州百合組培主要分為外植體滅菌 愈傷組 織誘導(dǎo) 發(fā)芽和生根 部分 圖 是采用本研究 優(yōu)化的最佳消毒方法和培養(yǎng)基進行蘭州百合組 培的結(jié)果 其中 圖 中外植體經(jīng) 乙醇消 毒 s 次氯酸鈉溶液浸泡 min 未發(fā)生污 染 圖 B和圖 C為最佳培養(yǎng)基 S mg N mg 6 B 中蘭州百合外植體的 愈傷組織誘導(dǎo)和發(fā)芽情況 圖 D為最佳培養(yǎng)基 S mg N mg 6 B mg 活性炭中蘭州百合的生根情況 結(jié)論與討論 本試驗中 不對外植體做任何消毒處理的對 照組存活率幾乎為 沒有樣品產(chǎn)生愈傷組織 d內(nèi)無外植體存活 但經(jīng)過消毒劑處理的樣品 柯義強 等 蘭州百合組培快繁體系的構(gòu)建 消毒后的外植體 B 愈傷組織誘導(dǎo) C 叢芽發(fā)生 D 生根誘導(dǎo) S e i ized e n s B C us induc ion C C us e ed s oo s induc ion D Roo ing induc ion 圖2 蘭州百合組培過程 Fig 2 Tissue cu u e o nz ou i y 存活率最高可達 6 這與梁小敏等 的研 究結(jié)果吻合 說明消毒在組培試驗中是控制植物 組培死亡率的關(guān)鍵 不同消毒劑組合對外植體 存活率影響不一 常用的消毒劑有乙醇 次氯 酸鈉溶液 過氧化氫 gC 溶液等 本研 究使用了 種消毒劑相互組合 通過與對照組比 較 確定外植體消毒的主要影響因素為乙醇和次 氯酸鈉溶液 次要影響因素是 gC 溶液 有報 道指出 最適合垂花百合外植體的消毒劑組合是 乙醇處理 s gC 溶液浸泡 min 周非 研究發(fā)現(xiàn) 藥百合的最佳消毒劑 為 乙醇 本研究結(jié)果與此一致 但本研究中 乙醇濃度為 另一消毒劑為消毒效果更強的 次氯酸鈉溶液 推測可能是本試驗在冬季進行 取材不是植物生長的最佳季節(jié) 相較于 gC 溶 液 次氯酸鈉在溶液中釋放出的氯離子可以更有 效的殺死菌體 從而提高外植體存活率 百合植物組織培養(yǎng)過程中較常用的植物生 長調(diào)節(jié)劑有N 6 B 和 D等 本研究 發(fā)現(xiàn) 在愈傷組織誘導(dǎo)和不定芽分化的試驗中 N 和6 B 是顯著影響因子 D對愈傷組 織誘導(dǎo)和不定芽分化影響較小 這與前人研究結(jié) 果一致 極低濃度的植物生長調(diào)節(jié)劑就能夠?qū)?外植體生長起明顯的促進作用 有研究發(fā) 現(xiàn) 在培養(yǎng)基中添加 mg 的N 對百合 愈傷組織誘導(dǎo)和發(fā)芽都有明顯的促進作用 本試驗得出的結(jié)果與此一致 但柳玉晶等 發(fā) 現(xiàn) 最適合東方百合的N 質(zhì)量體積分數(shù)為 mg 這與本試驗的結(jié)果相差較大 分析可能 原因為不同品種百合所適用的植物生長調(diào)節(jié)劑 濃度略有不同 也可能是因為本試驗是在冬季進 行的 外植體尚處在休眠期 需要提高N 的濃 度來促進愈傷組織誘導(dǎo)和不定芽分化 研究發(fā) 現(xiàn) 普通的植物生長調(diào)節(jié)劑同樣對組培苗根的發(fā) 育有促進作用 本研究在常規(guī)植物生長調(diào)節(jié) 劑的基礎(chǔ)上加入活性炭 并用響應(yīng)面分析的方法 探究其對外植體生根的影響 結(jié)果表明 適宜濃 度的活性炭可顯著提高外植體的生根率 這是因 為活性炭在提供暗環(huán)境的同時可以有效吸附培 養(yǎng)基中的抑制物 這與潘得林等 的研究結(jié)果 6 浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報 第 卷 第6期 一致 但是當(dāng)濃度不合適時 反而會抑制生根 率 6 本研究中也遇到了類似問題 例如表 中的C 組合 當(dāng)活性炭濃度最大時生根率僅有 6 C 培養(yǎng)基中生根率僅為 可能 是活性炭在吸附培養(yǎng)基中抑制物的同時 也會吸 附培養(yǎng)基中的植物生長調(diào)節(jié)劑 導(dǎo)致根系不能吸 收足夠的營養(yǎng)成分 從而降低生根率 活性炭對 生根培養(yǎng)的具體作用機理 有待今后進一步 研究 綜上 獲得成活率高的組培苗可以從以下 方面著手 第一 盡量選取當(dāng)季新鮮的外植體 外 植體消毒可選用不同消毒劑組合消毒 但時間不 可過長 第二 后續(xù)愈傷組織誘導(dǎo) 發(fā)芽和生根 的過程中 組培苗對激素的反應(yīng)較靈敏 選擇合 適的激素濃度配比會顯著提高成活率 參考文獻 References 丁書榮 蘭州百合系列研究 J 甘肅農(nóng)業(yè) D NG S R nz ou i y se ies ese c J Gansu Agricul ture in C inese 吳國鋒 汪玉明 焦學(xué)榮 等 蘭州百合粉的研制 J 食 品研究與開發(fā) WU G F W NG Y J O X R e S udy in Lilium da vidii v unicolor S isb o de J Food Research and De velopment in C inese i ng is bs c 馬君義 趙小亮 張繼 等 蘭州百合的研究進展 J 塔 里木大學(xué)學(xué)報 6 J Y Z O X Z NG J e P og ess in ese c o Lilium davidii v unicolor J Journal of Tarim University of Agricultural Reclamation 6 in C inese i ng is bs c 田世龍 袁麗卿 甘肅省幾種主要蔬菜不同品種營養(yǎng)成分 分析 J 甘肅農(nóng)業(yè)科技 T N S YU N Q n ysis o nu i ion com onen s o seve m in vege b e v ie ies in G nsu P ovince J Gansu Agricultural Science and Teshnology in C inese 孫鳳茹 李紅軍 蘭州百合品牌戰(zhàn)略包裝研究 J 中國 包裝工業(yè) 6 SUN F R J Rese c on nz ou i y b nd s egic ck ging J China Packaging Industry 6 in C inese 6 劉靜 蘭州百合快速繁殖研究 J 南方農(nóng)業(yè)學(xué)報 U J O imiz ion o ig y e icien n egene ion sys em o Lilium davidii v unicolor oog co on J Jour nal of Southern Agriculture in C inese i ng is bs c 郝雪 植物細胞全能性和組織培養(yǎng)方法 的教學(xué)設(shè)計 J 中學(xué)生物學(xué) O X Te c ing design o n ce o i o ency nd issue cu u e me od J Middle School Biology in C inese 曾洪學(xué) 張小華 植物細胞全能性理論在中國的研究與實 踐 J 分子植物育種 6 Z NG X Z NG X Rese c nd ic ion o n ce o i o ency in C in J Molecular Plant Breeding 6 in C inese i ng is bs c 谷瑞升 蔣湘寧 郭仲琛 植物離體培養(yǎng)中器官發(fā)生調(diào)控 機制的研究進展 J 植物學(xué)通報 GU R S J NG X N GUO Z C dv nces in e s udies on e mec nism o n o g nogenesis in vitro J Chinese Bulletin of Botany in C inese i ng is bs c 林小蘋 賴鐘雄 黃淺 光質(zhì)對植物離體培養(yǎng)的影響 J 亞熱帶農(nóng)業(yè)研究 N X P Z X U NG Q ec s o ig qu i y on n issue cu u e J Subtropical Agriculture Research in C inese i ng is bs c 賈敬芬 陳剛 郝建國 蔥屬植物離體培養(yǎng)和遺傳操作 J 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報 J J F C N G O J G In vitro cu u e nd gene ic m ni u ion in Allium s ecies J Journal of Agricultural Biotechnology in C inese i ng is bs c 王林 甜瓜未受精胚珠離體培養(yǎng)研究 D 武漢 華中農(nóng) 業(yè)大學(xué) W NG In vitro cu u e o un e i ized ovu es o muskme on D Wu n u z ong g icu u Unive si y in C inese i ng is bs c 梁小敏 羅贛豐 亳州芍藥組織培養(yǎng)的關(guān)鍵技術(shù) J 北 方園藝 6 NG X UO G F ey ec no ogy o issue cu u e o Boz ou i e eony oo seed ings J Northern Horticulture 6 in C inese i ng is bs c 王剛 杜捷 李桂英 等 蘭州百合和野百合組織培養(yǎng)及 快速繁殖研究 J 西北師范大學(xué)學(xué)報 自然科學(xué)版 6 W NG G DU J G Y e S udy on issue cu u e nd c on o g ion o Lilium davidii v unicolor oog Co on nd Lilium brownii F B o n e ie ez J Journal of Northwest Normal University Natural Science Edition 6 in C inese i ng is bs c 柯義強 等 蘭州百合組培快繁體系的構(gòu)建 王震 西葫蘆花藥離體培養(yǎng)初步探究 D 鄭州 河南農(nóng) 業(yè)大學(xué) 6 W NG Z P im y s udy in vitro cu u e o summe squ s D Z engz ou en n g icu u Unive si y 6 in C inese i ng is bs c 6 楊克相 唐容 呂建偉 等 花生組織培養(yǎng)研究進展 J 農(nóng)技服務(wù) 6 Y NG X T NG R YU J W e Rese c og ess o e nu issue cu u e J Agricultural Technology Services 6 in C inese 呂爽 王超 結(jié)球甘藍離體培養(yǎng)的研究進展 J 北方園 藝 6 YU S W NG C dv nces o c bb ge in vitro cu u e J Northern Horticulture 6 in C inese 雷家軍 徐瑩 垂花百合鱗片離體培養(yǎng)研究 J 東北農(nóng) 業(yè)大學(xué)學(xué)報 6 J J XU Y S udy on bu b sc e cu u e in vitro o Lilium cernuum om J Journal of Northeast Agricultural Univer sity 6 in C inese i ng is b s c 周非 藥百合組織培養(yǎng)條件的優(yōu)化 D 合肥 安徽大 學(xué) Z OU F O imiz ion o condi ions o id o g ion o Lilium speciosum unb G o iosoides b ke D e ei n ui Unive si y in C inese i ng is b s c 劉進平 吳繁花 木薯外植體表面消毒和啟動培養(yǎng)的研 究 J 廣西熱帶農(nóng)業(yè) U J P WU F S udy on su ce disin ec ion nd s u cu u e o c ss v e n s J Guangxi Tropical Agricul ture in C inese 林海 張芳 郝慧敏 不同激素水平對百合愈傷組織誘 導(dǎo)研究 J 北方園藝 N Z NG F O S udy on e induc ion con di ions o c us o Lilium candidum J Northern Horticul ture in C inese i ng is b s c 張璐 潘遠智 劉柿良 等 宜昌百合胚性愈傷組織誘導(dǎo) 及植株再生體系的研究 J 植物研究 6 Z NG P N Y Z U S e mb yonic c us in duc ion nd n egene ion o Lilium leucanthum J Bulletin of Botanical Research 6 in C inese i ng is bs c 柳玉晶 龔束芳 樊金萍 等 百合愈傷組織的誘導(dǎo)及植 株再生 J 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報 U Y J GONG S F F N J P e mb yoidgenesis nd n egene ion o Lilium s J Journal of Northeast Ag ricultural University in C inese i ng is bs c 陳勤 王斐 琚淑明 杉科植物組培生根機理研究綜述 J 林業(yè)實用技術(shù) C N Q W NG F JU S Revie on e mec nism o issue cu u e nd oo ing o T odi ce e J Practical For estry Technology in C inese 潘德林 賈展慧 黃勝男 等 紅陽 獼猴桃外植體不定 芽誘導(dǎo)及生根培養(yǎng)激素配方篩選 J 中國南方果樹 P N D J Z U NG S N e Se ec ion o o mone o mu ion o inducing dven i ious buds nd oo s om ongy ng ki i ui e n J South China Fruits in C inese 6 劉雅楠 蘭州百合不同外植體培養(yǎng)及其優(yōu)化研究 D 蘭州 甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) U Y N T e cu u e o e Lilium davidii v Unico o e n s D nz ou G nsu g icu u Unive si y in C inese i ng is bs c 付艷華 盧君 楊慧瑩 等 百合組培苗試管外生根技術(shù) 研究 J 浙江農(nóng)業(yè)科學(xué) FU Y U J Y NG Y e S udy on in vitro oo ing ec no ogy o i y issue cu u e seed ings J Journal of Zhe jiang Agricultural Sciences in C i nese 責(zé)任編輯 侯春曉 浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報 第 卷 第6期