6 種 多 倍 體 大 花 萱 草 組 織 培 養(yǎng) 研 究 陳 曦 劉 志 洋 哈 爾 濱 市 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 院 黑 龍 江 哈 爾 濱 1 5 0 0 2 9 摘要 為了滿足市場對 多倍體大花萱草數(shù)量及 品種的需求 降低由 國外 引種 的成 本 實(shí) 現(xiàn) 工 廠 化 生 產(chǎn) 引 進(jìn) 多 倍 體 大 花 萱 草 紅 運(yùn) 紅 寶石 橘黃色 肉粉色 大金杯 和 金娃娃 6 個(gè)品種為研 究 材 料 采 用 組 織 培 養(yǎng) 的 繁 殖 方 式 進(jìn) 行 離 體 快 繁 技 術(shù) 研 究 通 過 對 外 植 體 部位 篩選 不定芽誘導(dǎo) 增殖培養(yǎng) 生根培養(yǎng)等 研 究 表 明 分 蘗 莖 段 是 誘 導(dǎo) 不 定 芽 形 成 的 最 佳 外 植 體 培 養(yǎng) 2 5 d 左 右 不 定 芽 平 均 伸 長 5 c m 左右 不同濃度的植物 生長調(diào)節(jié)劑對不同種多倍體大花萱草 誘導(dǎo)率 的 影響 有 很 大 差 異 不 同 植 物 生 長 調(diào) 節(jié) 劑 對 6 種 多 倍 體 大 花 萱 草芽 量和增殖系數(shù)的影 響變化趨勢一致 但在同種處理 上 不同品種 間 存 在 著 差 異 6 個(gè) 品 種 組 培 苗 的 最 適 宜 生 根 時(shí) 間 為 2 0 d 左 右 最 大生 根率都在 7 6 8 以上 關(guān)鍵 詞 大花萱草 組織培養(yǎng) 誘導(dǎo)率 植物生長調(diào)節(jié)劑 增殖系 數(shù) 生根 率 中圖 分類號 S 6 8 2 1 9 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 A 文章 編號 0 5 1 7 6 6 1 1 2 0 2 0 0 1 0 1 0 6 0 5 d o i 1 0 3 9 6 9 j i s s n 0 5 1 7 6 6 1 1 2 0 2 0 0 1 0 3 3 開 放科學(xué) 資源 服務(wù) 標(biāo)識 碼 O S I D S t u d y o n T i s s u e C u l t i v a t i o n i n S i x P o l y p l o i d H e m e r o c a l l i s h y b r i d a C H E N X i L I U Z h i y a n g H a r b i n A c a d e m y o f A g r i c u l t u r a l S c i e n c e s H a r b i n H e i l o n g j i a n g 1 5 0 0 2 9 A b s t r a c t I n o r d e r t o m e e t t h e m a r k e t d e m a n d f o r t h e n u m b e r a n d v a r i e t y o f H e m e r o c a l l i s h y b r i d a r e d u c e t h e c o s t o f i n t r o d u c t i o n f r o m a b r o a d H o n g y u n H o n g b a o s h i J u h u a n g s e R o u f e n s e D a j i n b e i a n d J i n w a w a w e r e s e l e c t e d a s m a t e r i a l s t i s s u e c u l t u r e p r o p a g a t i o n m e t h o d s w e r e u s e d t o s t u d y i n v i t r o r a p i d p r o p a g a t i o n t e c h n i q u e s S t u d i e s o n e x p l a n t s a d v e n t i t i o u s b u d i n d u c t i o n p r o l i f e r a t i o n c u l t u r e a n d r o o t i n g c u l t u r e s h o w e d t h a t t i l l e r s t e m s e g m e n t w a s t h e b e s t e x p l a n t f o r i n d u c i n g a d v e n t i t i o u s b u d f o r m a t i o n a f t e r c u l t u r i n g f o r a b o u t 2 5 d a y s t h e a v e r a g e e l o n g a t i o n o f a d v e n t i t i o u s b u d s w a s a b o u t 5 c m e f f e c t s o f d i f f e r e n t c o n c e n t r a t i o n s o f p l a n t g r o w t h r e g u l a t o r s o n d i f f e r e n t v a r i e t i e s o f H h y b r i d a i n d u c t i o n r a t e h a d g r e a t d i f f e r e n c e e f f e c t s o f d i f f e r e n t p l a n t g r o w t h r e g u l a t o r s o n t h e b u d y i e l d a n d r e p r o d u c t i v e c o e f f i c i e n t o f s i x p o l y p l o i d g e r a n i u m b u d s w e r e c o n s i s t e n t b u t t h e r e w e r e d i f f e r e n c e s a m o n g d i f f e r e n t c u l t i v a r s i n t h e s a m e t r e a t m e n t t h e o p t i m u m r o o t i n g t i m e o f t h e 6 c u l t i v a r s w a s 2 0 d a n d t h e m a x i m u m r o o t i n g r a t e s w e r e a l l a b o v e 7 6 8 K e y w o r d s H e m e r o c a l l i s h y b r i d a T i s s u e c u l t i v a t i o n I n d u c t i o n r a t e P l a n t g r o w t h r e g u l a t o r P r o l i f e r a t i o n c o e f f i c i e n t R o o t i n g r a t e 基 金 項(xiàng) 目 哈 爾 濱 市 科 技 創(chuàng) 新 人 才 項(xiàng) 目 2 0 1 3 R F Q Y J 0 1 9 作 者 簡 介 陳 曦 1 9 8 2 女 黑 龍 江 哈 爾 濱 人 高 級 農(nóng) 藝 師 碩 士 從 事 矮 牽 牛 育 種 及 宿 根 花 卉 引 種 馴 化 工 作 通 信 作 者 高 級 農(nóng) 藝 師 碩 士 從 事 花 卉 育 種 工 作 收 稿 日 期 2 0 1 9 0 5 2 2 修 回 日 期 2 0 1 9 0 6 2 4 多倍體 大 花 萱 草 H e m e r o c a l l i s h y b r i d a 品 種 繁 多 花 型 秀美 花 色繁多 艷 麗 將 觀 花 和 觀 葉 融 為 一 體 在 東 北 地 區(qū) 花期 從 5 月 下 旬 到 9 月 對 土 壤 和 水 分 要 求 不 嚴(yán) 可 在 鹽 堿 地上 生長開 花 加之冬 天極 耐 寒的特 性 使 大 花 萱 草 成 為 東 北 地區(qū) 主要園 林工程 花 卉品 種 目 前 各商 家紛紛 由國 外 引種 進(jìn) 行 繁 殖 但 成 本 較 高 且 資 源 有 限 多 倍 體 大 花 萱 草 的 自 然 繁 殖 方 式 是 分 蘗 繁 殖 每 年分 蘗 2 3 株 而 且不結(jié) 實(shí)或很 少結(jié)實(shí) 繁 殖效率 低 不能滿 足市 場需求 需 要利用 植物 組 織培養(yǎng) 技 術(shù) 對 引 進(jìn) 的 萱 草 品 種 進(jìn) 行 種 苗 的 大 量 繁 殖 以 滿 足 園 林 市 場 需 求 解 決 限 制 多 倍 體大 花萱草 繁殖 速 度 的 瓶 頸 問 題 大 花 萱 草 的 組 織 培 養(yǎng) 研 究 已 有一些 報(bào)道 1 6 采 用 組織培 養(yǎng)方法 可以大 幅提 高 繁 殖 系 數(shù) 短 時(shí) 間 內(nèi) 就 可 以 生 產(chǎn) 出 大 量 的 種 苗 投 放 市 場 加 快 了 新 品 種的應(yīng) 用 為 了 能 夠 滿 足 市 場 對 多 倍 體 大 花 萱 草 數(shù) 量 及 品 種 的 需 求 降 低 由 國 外 引 種 的 成 本 增 加 新 品 種 多 倍 體 的數(shù) 量 該研究 引進(jìn)多 倍體 大 花 萱 草 紅 運(yùn) 紅 寶 石 橘 黃 色 肉 粉 色 大金 杯 和 金 娃 娃 6 個(gè) 品 種 為 材 料 采 用 組 織培 養(yǎng)的繁 殖方式 進(jìn) 行離 體快繁 技 術(shù) 研 究 為 其 實(shí) 現(xiàn) 工 廠 化 生產(chǎn) 提供理 論依據(jù) 和 技術(shù) 支持 1 材 料 與方法 1 1 材 料 試 驗(yàn) 材 料 為 哈 爾 濱 市 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 院 園 區(qū) 內(nèi) 種 植 的 6 個(gè)多倍 體大 花 萱草 品 種 取樣時(shí) 間為每 年 6 9 月 盛花 期 1 2 方 法 1 2 1 外植 體 消 毒 與 處 理 選 取 花 蕾 分 蘗 莖 段 和 根 作 為 外 植 體材 料 將 采取 的 分 蘗 莖 段 切 成 1 2 c m 的 留 芽 小 段 先 用 洗 衣 粉 清 洗 材 料 再 用 流 水 沖 洗 6 0 m i n 后 在 超 凈 工 作 臺 上用 滅 菌劑 處 理 選用 7 5 乙醇 和 0 1 升 汞 滅 菌 設(shè) 5 個(gè) 處 理 表 1 表 1 滅菌劑 種類及處理 時(shí)間 T a b l e 1 S t e r i l i z e r t y p e a n d t r e a t m e n t t i m e 處理 T r e a t m e n t 7 5 乙醇處 理時(shí)間 T r e a t m e n t t i m e o f 7 5 e t h a n o l s 0 1 升汞 處理時(shí)間 T r e a t m e n t t i m e o f 0 1 m e r c u r y m i n 5 5 1 0 5 2 0 8 3 0 8 4 0 1 0 1 2 2 不定 芽 誘 導(dǎo) 不同植 物 品 種 適 宜 的 基 本 培 養(yǎng) 基 也 不 盡 相 同 目前 多倍 體 大 花 萱 草 最 常 用 基 本 培 養(yǎng) 基 為 M S 培 養(yǎng) 基 7 9 通過 在 基本 培 養(yǎng) 基 中 添 加 不 同 植 物 生 長 調(diào) 節(jié) 物 質(zhì) 和 比 例促 使 外植 體 材料 分 化和 發(fā) 育 其 次 是 添 加 不 同 的 營 養(yǎng) 物 質(zhì) 調(diào) 節(jié) 培 養(yǎng) 基 內(nèi) 的 微 環(huán) 境 達(dá) 到 適 合 外 植 體 發(fā) 育 和 分 化 理 想 環(huán)境 以 M S 培 養(yǎng)基 為 基本 培 養(yǎng) 基 添 加 不 同 濃 度 的 植 物 生 長 調(diào) 節(jié) 劑 6 B A N A A 共設(shè) 置 1 0 個(gè) 濃 度梯 度 表 2 將 預(yù)處 理 好 的 6 種 多 倍體 萱 草的 分 蘗莖 段 分 別 接 種 于 上 述 培 養(yǎng) 基 中 每 個(gè) 品種 每 個(gè) 處 理 接 種 1 0 瓶 每 瓶 3 個(gè) 外 植 體 重 復(fù) 3 次 安 徽 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) J A n h u i A g r i c S c i 2 0 2 0 4 8 1 1 0 6 1 1 0 以 M S 為 基本 培 養(yǎng)基 添 加 蔗 糖 3 0 g L 瓊 脂 7 g L p H 調(diào) 至 6 0 2 培 養(yǎng) 溫度 2 5 左 右 空氣 相對濕 度 控 制 在 4 0 6 0 光 照 強(qiáng)度 1 0 0 0 2 0 0 0 l x 培 養(yǎng)一定 時(shí)間后 調(diào) 查 污 染 情 況 和 統(tǒng)計(jì) 不定芽 誘導(dǎo)情 況 誘 導(dǎo) 率 成 功 誘 導(dǎo) 不 定 芽 數(shù) 接 種 培 養(yǎng)基 總數(shù) 1 0 0 表 2 誘 導(dǎo)培養(yǎng)中植 物生長調(diào)節(jié) 劑的濃度 T a b l e 2 C o n c e n t r a t i o n s o f p l a n t g r o w t h r e g u l a t o r i n i n d u c t i o n c u l t u r e m g L 培養(yǎng)基 M e d i u m 6 B A N A A M 1 0 0 M 2 0 5 0 0 5 M 3 0 5 0 1 0 M 4 0 5 0 2 0 M 5 1 0 0 0 5 M 6 1 0 0 1 0 M 7 1 0 0 2 0 M 8 2 0 0 0 5 M 9 2 0 0 1 0 M 1 0 2 0 0 2 0 1 2 3 不 定芽增 殖 培養(yǎng) 以 M S 培養(yǎng) 基為 基 本培 養(yǎng) 基 添 加 不同 濃度 植 物 生 長 調(diào) 節(jié) 劑 6 B A N A A 共 設(shè) 6 個(gè) 濃 度 梯 度 表 3 將 經(jīng)過成 功 誘導(dǎo) 的 6 種 多 倍 體 大 花 萱 草 組 培 苗 分 別 接種 于增 殖 培 養(yǎng) 基 上 每 個(gè) 品 種 每 個(gè) 處 理 接 種 1 0 瓶 每 瓶 3 叢 塊 重 復(fù) 3 次 2 0 d 統(tǒng) 計(jì) 其 芽 量 和 增 殖 系 數(shù) 光 照 強(qiáng) 度 為 2 0 0 0 3 0 0 0 l x 溫 度 為 2 5 增殖 系數(shù) 增殖 苗數(shù) 接種 苗數(shù) 表 3 增 殖培養(yǎng)中植 物生長調(diào)節(jié) 劑的濃度 T a b l e 3 C o n c e n t r a t i o n o f p l a n t g r o w t h r e g u l a t o r s i n m u l t i p l i c a t i o n c u l t u r e m g L 培養(yǎng)基 M e d i u m 6 B A N A A Z 1 0 0 Z 2 0 5 0 1 Z 3 1 0 0 1 Z 4 2 0 0 2 Z 5 3 0 0 3 Z 6 5 0 0 5 1 2 4 生 根培養(yǎng) 當(dāng)不 定 芽長 至 2 3 c m 時(shí) 將 不 定 芽 分 割 成單 個(gè) 外 植 體 以 1 2 M S 為 基 本 培 養(yǎng) 基 添 加 不 同 濃 度 的 N A A 和 I B A 表 4 比 較 2 種 植 物 生 長 調(diào) 節(jié) 劑 的 生 根 情 況 挑選 出 紅寶 石 紅運(yùn) 橘 黃 色 肉 粉 色 大 金 杯 和 金 娃娃 增殖培 養(yǎng) 2 0 d 4 6 c m 高的 健壯植 株 其 葉 色 濃 綠 切 除 基 部 的 愈 傷 組 織 分 別 接 種 于 生 根 培 養(yǎng) 基 上 每 處 理 接 種 1 0 瓶 每瓶 接 種 3 株 培 養(yǎng) 苗 重 復(fù) 3 次 轉(zhuǎn) 接 后 注 意 觀 察 記 錄苗 的生 根 情 況 2 0 d 后 測 量 根 長 統(tǒng) 計(jì) 生 根 率 并 進(jìn) 行 移 栽 生根率 生 根苗數(shù) 接 種 小苗 數(shù) 1 0 0 1 2 5 煉 苗及移 栽 打 開 組 培 瓶 蓋 在 室 溫 下 煉 苗 3 4 d 接 受 太 陽 光 照 射 取 出 組 培 苗 并 用 流 水 洗 凈 根 系 上 的 培 養(yǎng) 基 然 后 直 接 移 栽 到 營 養(yǎng) 缽 中 待 長 出 新 芽 后 再 移 栽 到 花 盆 或 大 田 表 4 N A A 和 I B A 生 根培養(yǎng)基的濃 度 T a b l e 4 C o n c e n t r a t i o n o f N A A a n d I B A r o o t i n g m e d i u m m g L 生長調(diào)節(jié)劑 G r o w t h r e g u l a t o r 培養(yǎng)基 M e d i u m 濃度 C o n c e n t r a t i o n N A A S 1 0 S 2 0 1 S 3 0 3 S 4 0 5 S 5 0 7 S 6 1 0 I B A T 1 0 T 2 0 1 T 3 0 2 T 4 0 4 T 5 0 6 T 6 1 0 2 結(jié) 果與分 析 2 1 外 植體 的 確立 從 3 種 外 植 體 接 種 到 培 養(yǎng) 基 后 的 表 現(xiàn) 看 花 蕾 部 分 先 產(chǎn) 生 愈 傷 組 織 再 由 愈 傷 組 織 誘 導(dǎo) 生 成 不 定 芽 而 根 的 誘 導(dǎo) 率 極 低 分 蘗 莖 段 以 器 官 發(fā) 生 途 徑 直 接 誘 導(dǎo) 形 成 不 定 芽 縮 短 了 不 定 芽 生 成 時(shí) 間 不 容 易 引 起 變 異 是 誘 導(dǎo) 不 定芽 形 成的 最 佳外 植 體 2 2 滅 菌方 法 對 外 植 體 的 影 響 由 表 5 可 知 乙 醇 處 理 時(shí) 間 過 長容 易 導(dǎo)致 外 植體 死 亡 然而 乙 醇 處 理 時(shí) 間 短 則 容 易 導(dǎo) 致 滅 菌效 果 不理 想 在 乙 醇 處 理 時(shí) 間 一 致 的 情 況 下 外 植 體 污 染 率 隨 著 升 汞 處 理 時(shí) 間 增 加 而 減 少 但 死 亡 率 同 步 上 升 說 明 滅 菌 時(shí) 間 越 長 其 污 染 率 越 低 而 滅 菌 時(shí) 間 過 長 對 外 植 體 會(huì) 造 成 嚴(yán) 重 的 創(chuàng) 傷 如 加 重 外 植 體 的 褐 化 程 度 使 外 植 體 發(fā) 生 水浸 狀 態(tài)變 化 致 使 其 死 亡 或 失 水 萎 蔫 1 0 但 是 滅 菌 時(shí) 間 過 短 污 染 率 增 加 不 能 達(dá) 到 真 正 的 滅 菌 目 的 污 染 致 使 外 植 體 死亡 表 5 不同 滅菌方法對 外植體的影響 T a b l e 5 E f f e c t s o f d i f f e r e n t s t e r i l i z a t i o n m e t h o d s o n e x p l a n t 處理 T r e a t m e n t 接種數(shù)個(gè) N u m b e r o f v a c c i n a t i o n 個(gè) 污染數(shù) P o l l u t i o n n u m b e r 個(gè) 死 亡數(shù) N u m b e r o f d e a t h s 個(gè) 污染率 P o l l u t i o n r a t e 死亡率 M o r t a l i t y r a t e 5 4 3 7 0 6 8 5 0 5 7 2 0 0 3 5 1 0 5 0 8 2 1 6 0 4 0 5 4 5 4 9 3 7 4 5 6 2 7 3 6 1 2 5 綜合 認(rèn) 為 7 5 乙 醇 3 0 s 0 1 升 汞 8 m i n 是 多 倍 體 大 花 萱 草分 蘗 莖段 適 宜的 滅 菌方 法 2 3 多 倍 體 大 花 萱 草 不 定 芽 形 成 過 程 將 多 倍 體 大 花 萱 草 的 分 蘗莖 段 分割 成 1 2 c m 接 種 到 誘 導(dǎo) 培 養(yǎng) 基 中 5 d 后 莖 芽 呈 黃綠 色 部 分 開 始 伸 長 7 d 左 右 莖 芽 開 始 增 粗 略 有 伸 長 顏 色偏綠 新 長 出的 嫩 葉稍 稍 向 外 翻 卷 1 0 d 后 莖 芽 長 出 嫩 葉 平 均伸 長 1 5 c m 左 右 顏 色 翠 綠 莖 基 部 出 現(xiàn) 不 同 數(shù) 量 的 不 定 芽 嫩 葉 向 外 翻 卷 寬 度 明 顯 增 加 接 種 1 5 d 后 新 7 0 1 4 8 卷 1 期 陳 曦 等 6 種 多 倍 體 大 花 萱 草 組 織 培 養(yǎng) 研 究 芽伸 長 量 平 均 達(dá) 3 c m 左 右 不 定 芽 增 多 形 成 芽 叢 2 0 2 5 d 不 定 芽平 均 長度 可 達(dá) 5 c m 左右 圖 1 注 A 分蘗莖段 接到培養(yǎng)基 中 2 d 的生長情況 B 7 d 后長 出子葉 顏色 變綠 C 1 0 d 后莖葉伸 長增粗 長出側(cè)芽 D 1 5 d 后 不 定 芽 越 來 越 多 形 成 芽 叢 E 2 0 d 后 芽叢增 粗增 長 顏 色更綠 F 2 5 d 左右 長大 的不定芽 N o t e A T h e g r o w t h o f t h e t i l l e r s t e m s e g m e n t s i n t h e m e d i u m f o r 2 d a y s B A f t e r 7 d a y s t h e c o t y l e d o n s g r e w a n d t h e c o l o r t u r n e d g r e e n C A f t e r 1 0 d a y s t h e s t e m s a n d l e a v e s w e r e t h i c k e n e d a n d t h e l a t e r a l b u d s g r e w D A f t e r 1 5 d a y s m o r e a n d m o r e b u d s w e r e f o r m e d E A f t e r 2 0 d a y s t h e b u d s g r e w t h i c k e r a n d t h e c o l o r w a s d e e p g r e e n F A b o u t 2 5 d a y s t h e g r o w i n g a d v e n t i t i o u s b u d s 圖 1 多倍體大 花萱草不定 芽形成過程 F i g 1 T h e p r o c e s s t o i n d u c e b u d o f H h y b r i d a 2 4 不 同 濃 度 6 B A 和 N A A 配 比 對 不 定 芽 誘 導(dǎo) 的 影 響 6 B A 是 誘 導(dǎo)再 生 芽 的 主 要 因 素 隨 著 6 B A 濃 度 的 增 加 產(chǎn) 生 的不定 芽 數(shù) 逐 漸 增 加 但 是 過 高 濃 度 的 6 B A 會(huì) 抑 制叢 生芽后 期 生 長 黃 化 直 至 逐 漸 枯 萎 另 外 添 加 一 定 濃 度的 生長素 N A A 可以 促進(jìn) 不 定 芽 分 化 提 高 平 均 再 生 芽 數(shù) 但 N A A 過高會(huì) 使不定 芽矮 小 抑 制 其 伸 長 生 長 因 此 適 合 的 植物 生長調(diào) 節(jié)劑配 比 是生 長不定 芽 的必 要 條件 由表 6 可知 不 同 濃度 的 植物 生 長 調(diào) 節(jié) 劑 對 不 同 基 因 型 多 倍 體萱 草 的誘 導(dǎo) 率影 響 也有 很 大 的 差 異 從 整 體 變 化 趨 勢 看 紅 寶石 紅 運(yùn) 橘 黃 色 肉 粉 色 和 大 金 杯 在 M 3 M 4 M 5 M 6 M 7 中 有不 同 的 表 現(xiàn) 但 誘 導(dǎo) 率 最 高 的 情 況 都 出 現(xiàn) 在 M 6 培 養(yǎng) 基 上 金 娃 娃 與 其 他 5 個(gè) 品 種 不 同 在 M 2 M 3 M 4 M 5 M 6 上 較為 活 躍 而 誘 導(dǎo) 率 最 高 的 情 況 出 現(xiàn) 在 處 理 M 3 中 表 6 不同濃 度植物生長 調(diào)節(jié)劑對大 花萱草誘導(dǎo)率 的影響 T a b l e 6 E f f e c t s o f d i f f e r e n t c o n c e n t r a t i o n s o f p l a n t g r o w t h r e g u l a t o r s o n i n d u c t i o n r a t e o f H h y b r i d a 培養(yǎng)基 M e d i u m 紅寶 石 H o n g b a o s h i 紅運(yùn) H o n g y u n 橘 黃色 J u h u a n g s e 肉粉色 R o u f e n s e 大金杯 D a j i n b e i 金娃娃 J i n w a w a M 1 M 2 2 3 8 M 3 1 7 6 1 8 9 2 2 3 2 0 7 1 7 7 7 8 4 M 4 1 9 6 2 1 1 2 5 8 3 2 7 3 3 9 5 2 1 M 5 3 0 8 3 2 7 4 0 2 3 8 3 5 0 6 3 5 2 M 6 6 7 5 7 8 3 8 1 0 6 6 4 7 3 8 1 9 7 M 7 4 2 6 3 7 8 2 9 7 2 4 5 1 9 8 M 8 M 9 M 1 0 2 5 多倍 體大 花 萱 草 增 殖 培 養(yǎng) 由 表 7 可 知 不 同 濃 度 的 植物 生長調(diào) 節(jié)劑對 紅寶 石 紅 運(yùn) 橘 黃 色 肉 粉 色 大 金 杯 和 金 娃 娃 6 個(gè) 品 種 芽 量 和 增 殖 系 數(shù) 的 影 響 較 大 橘黃 色 肉 粉 色 和 金 娃 娃 在 Z 3 處 理 上 芽 量 和 增 殖 系 數(shù)最 大 其中 橘黃色 芽 量 為 1 8 5 個(gè) 增 殖 系 數(shù) 達(dá) 3 1 紅 寶 石 和 紅 運(yùn) 的 最 大 芽 數(shù) 出 現(xiàn) 在 Z 4 處 理 中 紅 運(yùn) 的 增 殖 系 數(shù)最 大 達(dá) 3 2 大 金 杯 的 最 大 芽 量 和 增 殖 系 數(shù) 分 別 為 1 5 6 和 2 6 不同 植 物生 長 調(diào) 節(jié) 劑 對 6 種 多 倍 體 萱 草 芽 量 和 增 殖 系 數(shù) 的 影 響 變 化 趨 勢 一 致 但 在 同 種 處 理 上 不 同 品 種 間 存 在 8 0 1 安徽農(nóng)業(yè) 科學(xué) 2 0 2 0 年 著差 異 在 Z 2 處理 上 紅 寶 石 紅 運(yùn) 和 大 金 杯 的 芽 量 和增 殖 系 數(shù) 均 無 變 化 而 橘 黃 色 芽 數(shù) 為 7 2 增 殖 系 數(shù) 為 1 2 金 娃娃 則 為 9 6 和 1 6 在 Z 3 處理 上 芽 數(shù)和增 殖系數(shù) 均 表 現(xiàn)為 紅 寶石 大 金 杯 紅 運(yùn) 肉 粉 色 金 娃 娃 橘 黃色 表 7 不同 濃度植物生 長調(diào)節(jié)劑對 組培苗增殖的 影響 T a b l e 7 E f f e c t s o f d i f f e r e n t c o n c e n t r a t i o n s o f p l a n t g r o w t h r e g u l a t o r o n p r o l i f e r a t i o n o f t i s s u e c u l t u r e p l a n t l e t s 培養(yǎng)基 M e d i u m 紅 寶 石 H o n g b a o s h i 芽數(shù) N u m b e r o f b u d s 個(gè) 增殖系數(shù) P r o l i f e r a t i o n c o e f f i c i e n t 紅運(yùn) H o n g y u n 芽數(shù) N u m b e r o f b u d s 個(gè) 增殖 系數(shù) P r o l i f e r a t i o n c o e f f i c i e n t 橘黃色 J u h u a n g s e 芽數(shù) N u m b e r o f b u d s 個(gè) 增 殖系數(shù) P r o l i f e r a t i o n c o e f f i c i e n t 肉 粉色 R o u f e n s e 芽 數(shù) N u m b e r o f b u d s 個(gè) 增殖系數(shù) P r o l i f e r a t i o n c o e f f i c i e n t 大金 杯 D a j i n b e i 芽 數(shù) N u m b e r o f b u d s 個(gè) 增殖系數(shù) P r o l i f e r a t i o n c o e f f i c i e n t 金娃 娃 J i n w a w a 芽數(shù) N u m b e r o f b u d s 個(gè) 增殖系數(shù) P r o l i f e r a t i o n c o e f f i c i e n t Z 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 Z 2 7 2 1 2 7 9 1 3 9 6 1 6 Z 3 8 3 1 4 9 7 1 6 1 8 5 3 1 1 6 8 2 8 9 0 1 5 1 7 8 3 0 Z 4 1 6 8 2 8 1 9 2 3 2 1 3 4 2 2 1 3 2 2 2 1 5 6 2 6 1 1 7 2 0 Z 5 1 0 2 1 7 1 1 2 1 9 1 0 5 1 8 9 2 1 5 1 3 1 2 2 7 0 1 2 Z 6 7 8 1 3 8 3 1 4 6 8 1 1 7 2 1 2 7 7 1 3 6 3 1 1 2 6 多倍 體大 花 萱 草 生 根 和 成 苗 過 程 由 圖 2 可 知 將 組 培 苗 轉(zhuǎn)接到 生根培 養(yǎng) 基中 4 d 左 右 根部 生 成 乳 黃 色 根 瘤 狀 根 瘤 隨著時(shí) 間的增 加 逐漸 增大 7 d 后 每 株 長 出 3 4 條 白 色 細(xì) 根 當(dāng) 組培苗 轉(zhuǎn)接到 生 根 培 養(yǎng) 基 中 1 6 d 左 右 時(shí) 平 均 根 長 可達(dá) 3 5 c m 左 右 時(shí) 顏 色 轉(zhuǎn) 為 黃 綠 色 根 尖 部 依 然 為 黃 白 色 同 時(shí)根瘤 處長出 一些 白 色 細(xì) 小 須 根 生 根 培 養(yǎng) 2 0 d 左 右 時(shí) 各 品種 根 部 生 長 都 達(dá) 到 了 煉 苗 標(biāo) 準(zhǔn) 根 長 度 達(dá) 3 5 c m 以 上 的組 培 苗可 直 接移 栽 到營 養(yǎng) 缽 里 進(jìn) 行 煉 苗 處 理 因 此 多 倍 體 大花 萱 草組 培 苗適 宜 的生 根 培養(yǎng) 時(shí)間為 2 0 d 左 右 注 A 組培苗在 生根培養(yǎng)基中 生長 7 d 左右的 情況 B 組 培苗在生根 培養(yǎng)基中生 長 2 0 d 左 右的 情況 C 生根培養(yǎng) 后的組培苗 D 將組 培 苗 移 栽 到 營 養(yǎng) 缽中 E 將 組培苗移 栽 到試驗(yàn)地中 F 長 大的組 培苗 N o t e A T i s s u e c u l t u r e s e e d l i n g s g r e w i n r o o t i n g m e d i u m f o r a b o u t 7 d a y s B T i s s u e c u l t u r e s e e d l i n g s g r e w i n r o o t i n g m e d i u m f o r a b o u t 2 0 d a y s C T i s s u e c u l t u r e s e e d l i n g a f t e r r o o t i n g D T r a n s p l a n t i n g t i s s u e c u l t u r e s e e d l i n g s i n t o p l a n t i n g b o w l s E T r a n s p l a n t i n g t i s s u e c u l t u r e s e e d l i n g s i n t o e x p e r i m e n t a l s i t e s F T h e g r o w i n g t i s s u e c u l t u r e s e e d l i n g 圖 2 多倍 體大花萱草 的生根和成 苗過程 F i g 2 R o o t i n g a n d s e e d l i n g f o r m a t i o n o f H h y b r i d a 2 7 不 同 濃 度 植 物 生 長 調(diào) 節(jié) 劑 對 多 倍 體 大 花 萱 草 生 根 率 的 影響 與表 8 相比 表 9 的 生 根 率 變 化 更 大 在 無 植 物 生 長 調(diào)節(jié) 劑添 加 的 情 況 下 各 品 種 的 生 根 率 為 3 8 2 5 8 1 肉粉 色 和 金娃 娃 在 1 2 M S N A A 0 1 m g L 時(shí) 生 根 率 達(dá) 到 最 大 為 9 7 4 和 9 6 2 而 在 1 2 M S I B A 1 0 m g L 時(shí) 只 有 8 4 2 和 8 1 3 當(dāng) 植 物生 長調(diào)節(jié) 劑為 N A A 時(shí) 橘黃色 和 大 金 杯 最 大 生 根 率 出 現(xiàn) 在 濃 度 為 1 2 M S N A A 0 3 m g L 分 別 為 9 6 3 9 5 6 當(dāng) 植 物 生 長 調(diào) 節(jié) 劑 為 I B A 時(shí) 橘 黃 色 最大 生根 率 出 現(xiàn) 在 1 2 M S I B A 0 2 m g L 時(shí) 為 8 3 7 大金 杯 的 最 大 生 根 率 在 1 2 M S I B A 0 4 m g L 出 現(xiàn) 為 7 6 8 都 較 植 物 生 長 調(diào) 節(jié) 劑 為 N A A 時(shí) 大 幅 降 低 綜 合 2 種 植 物 生 長 調(diào) 節(jié) 劑 對 6 種 多 倍 體 大 花 萱 草 根 長 生 根 率 9 0 1 4 8 卷 1 期 陳 曦 等 6 種 多 倍 體 大 花 萱 草 組 織 培 養(yǎng) 研 究 的影 響 以 及 從 價(jià) 格 考 慮 建 議 在 大 批 量 生 產(chǎn) 中 采 用 N A A 為 佳 表 8 不同濃 度 N A A 對 大花 萱草生根 率的影響 T a b l e 8 E f f e c t s o f d i f f e r e n t N A A c o n c e n t r a t i o n s o n r o o t i n g r a t e o f H h y b r i d a 培養(yǎng)基 M e d i u m 紅寶 石 H o n g b a o s h i 紅運(yùn) H o n g y u n 橘 黃色 J u h u a n g s e 肉粉色 R o u f e n s e 大金杯 D a j i n b e i 金娃娃 J i n w a w a S 1 4 6 7 4 3 6 3 8 2 4 8 3 5 1 3 5 8 1 S 2 8 8 4 8 3 7 9 4 7 9 7 4 8 9 4 9 6 2 S 3 9 2 5 8 7 7 9 6 3 9 3 3 9 5 6 9 2 1 S 4 9 8 6 9 7 3 8 8 3 8 8 9 9 3 2 8 7 7 S 5 9 3 2 8 6 7 8 5 2 8 6 4 8 7 6 8 5 8 S 6 8 1 3 8 2 8 7 8 4 8 2 3 7 5 9 6 9 4 表 9 不同 濃 度 I B A 對 大花萱草生 根率影響 T a b l e 9 E f f e c t s o f d i f f e r e n t I B A c o n c e n t r a t i o n s o n r o o t i n g r a t e o f H h y b r i d a 培養(yǎng)基 M e d i u m 紅寶 石 H o n g b a o s h i 紅運(yùn) H o n g y u n 橘 黃色 J u h u a n g s e 肉粉色 R o u f e n s e 大金杯 D a j i n b e i 金娃娃 J i n w a w a T 1 4 6 7 4 3 6 3 8 2 4 8 3 5 1 3 5 8 1 T 2 7 5 3 6 9 4 8 0 1 8 4 2 6 9 5 8 1 3 T