收稿日期 作者簡介 劉會寧 （），女 ，碩士 ，教授 ，現(xiàn)主要從事葡萄抗病性及園藝植物優(yōu)質(zhì)高效栽培方面的研究工作 ，。引著格式 劉會寧 ，李叢玉塑料大棚內(nèi) 個歐亞種葡萄品種對霜霉病的抗性表現(xiàn)長江大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版 ），（）：，塑料大棚內(nèi)個歐亞種葡萄品種對霜霉病的抗性表現(xiàn)劉會寧 ，李叢玉（長江大學(xué)園藝園林學(xué)院 ，湖北 荊州）摘要 在葡萄霜霉病盛發(fā)期 （月份），通過田間自然鑒定和室內(nèi)離體葉圓片接種鑒定方法 ，探討了塑料大棚內(nèi) 個歐亞種葡萄品種對霜霉病的抗性 。種方法均以葉片為調(diào)查對象 ，以發(fā)病率和病情指數(shù)為指標(biāo) 。結(jié)果表明 ：供試的 個歐亞種葡萄品種都不抗霜霉病 ，但品種間存在感病性的差異 。根據(jù)室內(nèi)離體葉圓片接種鑒定的病情指數(shù) ，將試驗品種分為 類 ：鳳凰 號為高感品種 ，維多利亞 、研選 號 、為中感品種，早紫 、粉紅亞都蜜為低感品種 。由于供試品種中早紫和粉紅亞都蜜品種對霜霉病的抗病性最強 ，建議在霜霉病發(fā)病嚴(yán)重的南方保護地適度推廣栽培 ，也可作為育種的原始材料加以利用 。關(guān)鍵詞 塑料大棚 ；歐亞種葡萄 ；霜霉病 ；抗病性中圖分類號 ；文獻標(biāo)志碼 文章編號 （）歐亞種葡萄 （ ）是品質(zhì)優(yōu)良的葡萄種類 ，但通常不抗真菌性病害 。葡萄霜霉病病菌（ ）是危害葡萄生產(chǎn)的主要真菌病害 ，幾乎遍布全世界所有的葡萄產(chǎn)區(qū)，。目前 ，尚未發(fā)現(xiàn)一個葡萄免疫品種 、品系或類型 ，也沒有一種農(nóng)藥能根除葡萄霜霉病。葡萄霜霉病起源于美洲 ，年因引種抗葡萄根瘤蚜的砧木而傳入法國 ，其后陸續(xù)傳至世界各地 。該病主要為害葉片 ，可導(dǎo)致葉片早落 。發(fā)生嚴(yán)重時 ，導(dǎo)致葡萄植株發(fā)育不良 ，對樹勢和產(chǎn)量影響很大 ，一般導(dǎo)致減產(chǎn)，嚴(yán)重時可達以上。葡萄霜霉病是復(fù)侵染病害 ，目前主要采用農(nóng)藥防治方法 ，但農(nóng)藥防治不僅增加生產(chǎn)成本 ，污染環(huán)境 ，還會降低葡萄及其加工產(chǎn)品的品質(zhì) ，長期使用農(nóng)藥后還會使植株產(chǎn)生抗藥性 。因此 ，需要尋找新的病害防治途徑 。實踐證明 ，選育和合理推廣抗藥新品種是綜合防治葡萄霜霉病的最有效措施，。筆者通過田間自然鑒定和室內(nèi)離體葉圓片接種鑒定種方法 ，對個歐亞種葡萄品種對霜霉病的抗性進行了鑒定 ，旨在篩選出抗病性較強的葡萄品種直接用于生產(chǎn)栽培 ，或為抗病育種提供原始材料 。 材料與方法 試驗材料所用試驗材料種植于長江大學(xué)園藝園林學(xué)院教學(xué)實習(xí)基地塑料大棚內(nèi) 。供試品種有維多利亞 、粉紅亞都蜜 、研選號 、早紫和鳳凰號共個 ，株行距為×，單臂籬架 ，扇型整枝 。試驗期間 ，所有品種田間管理條件相同 。 試驗儀器及設(shè)備試驗中所用儀器及設(shè)備主要有型人工氣候箱 、顯微鏡 （×倍 ）、手持噴霧器 、血球計數(shù)板 、打孔器等 。··長江大學(xué)學(xué)報 （自然科學(xué)版 ）年 第 卷 第 期 （ ），DOI:10.16772/j.cnki.1673-1409.2019.11.013 試驗方法 田間自然鑒定試驗于年月份進行 。每個品種隨機選取非邊緣位置且長勢大致相同的植株作為病害鑒定用植株 ，單株小區(qū) ，次重復(fù) ，以葉片為調(diào)查對象 。在發(fā)病過程中 ，分次 （月日和月日 ）對各品種的感病情況進行調(diào)查 。每小區(qū)選取個枝條 ，調(diào)查片以上葉片 。記錄各小區(qū)調(diào)查的總?cè)~片數(shù)和發(fā)病葉片數(shù)以及葉片病斑面積占總?cè)~片面積百分率 （嚴(yán)重度 ），根據(jù)的 “”級分級方法（見表），統(tǒng)計每一級別的感病葉片數(shù) ，計算各品種的發(fā)病率和病情指數(shù) ：發(fā)病率發(fā)病葉片數(shù)調(diào)查總?cè)~片數(shù)×病情指數(shù)（病級值×該級發(fā)病葉片數(shù) ）最高病級值×調(diào)查總?cè)~片數(shù)×表 葡萄霜霉病分級標(biāo)準(zhǔn) （分級法 ）級別 嚴(yán)重度 對葉片的病情指數(shù)進行方差分析 （測驗 ），差異顯著者再進行多重比較 （新復(fù)極差法 ），然后計算最小顯著差數(shù) （，），再按感病性將供試品種依據(jù)文獻 的方法分成種類型 ：感病性弱的品種 ，這一類品種的病情指數(shù)下限為最抗病品種的病情指數(shù)，上限為；感病性中等的品種 ，包括所有介于類和類之間的品種 ；感病性強的品種 ，這一類品種的病情指數(shù)上限為最感病品種的病情指數(shù)，下限為。 室內(nèi)離體葉圓片接種鑒定）適宜孢子囊接種濃度的確定將取自田間自然發(fā)病的葡萄葉片 ，用潔凈的毛筆刷下病菌 ，加蒸餾水配制成孢子懸浮液 ，用血球計數(shù)板在顯微鏡下計數(shù) ，配制成×、×、×、×孢子囊 共種濃度的菌液備用 ，以蒸餾水作對照 。采摘供試植株第或第節(jié)位上的無病葉片 ，用直徑的打孔器將各品種的無病葉片打成葉圓片片 ，葉背向上平擺于同一個底部墊有三層吸水紙的瓷盤上 ，重復(fù)次 ，然后用手持噴霧器進行噴霧接種 ，接種后用塑料薄膜蓋住瓷盤以保持濕度。將瓷盤放置于溫度為、光周期為、光強為的人工氣候箱中 。后統(tǒng)計發(fā)病情況 ，用的 “”的分級法進行分級 ，并計算病情指數(shù) 。結(jié)果表明以×孢子囊 濃度菌液接種所引起的不同品種間病情指數(shù)的極差和變異系數(shù)均最大 ，為室內(nèi)接種的最佳濃度 ，因此室內(nèi)接種的抗病性鑒定用此濃度進行 。）室內(nèi)離體葉圓片接種年月日 ，以×孢子囊 的菌液對供試的個品種的離體葉圓片進行噴霧接種 ，重復(fù)次 ，試驗方法 、試驗條件均與適宜孢子囊接種濃度篩選的完全相同 ，接種后后統(tǒng)計發(fā)病率和嚴(yán)重度并計算病情指數(shù) 。 結(jié)果與分析 田間自然鑒定對供試品種植株的葉片進行田間自然鑒定 ，統(tǒng)計其發(fā)病率和病情指數(shù) ，結(jié)果如表所示 。由表可知 ，年月日與月日的鑒定結(jié)果基本一致 ，品種間的抗病性有差異 。從年月日的鑒定結(jié)果可知 ，霜霉病葉片發(fā)病率在，平均。病情指數(shù)在，平均。從發(fā)病率來看 ，、研選號無顯著差異 ；粉紅亞都蜜 、鳳凰號和早紫之間無顯著差異 。病情指數(shù)也是如此 。對病情指數(shù)的調(diào)查結(jié)果進行方差分析 （··第 卷 第 期 劉會寧 等 ：塑料大棚內(nèi) 個歐亞種葡萄品種對霜霉病的抗性表現(xiàn)，），并計算所得最小顯著差數(shù)，將供試品種分為個級別 ：維多利亞為高感品種 ，、研選號為中感品種 ，粉紅亞都蜜 、鳳凰號 、早紫為低感品種 。表 不同葡萄品種對霜霉病的田間感病性品種發(fā)病率 病情指數(shù) 抗性分類發(fā)病率 病情指數(shù) 抗性分類維多利亞 高感 高感 中感 中感研選 號 中感 中感粉紅亞都蜜 低感 中感鳳凰 號 低感 低感早紫 低感 低感注 ：表中數(shù)據(jù)為 次重復(fù)的平均值 ；表中大寫字母表示 水平上顯著 ，小寫字母表示 水平上顯著 。年月日的鑒定結(jié)果表明 ，葉片發(fā)病率在，平均。維多利亞 、研選號之間無顯著差異 ；鳳凰號 、早紫之間無顯著差異 。病情指數(shù)在，平均。、研選號和粉紅亞都蜜之間無顯著差異 ；鳳凰號 、早紫之間無顯著差異 。對病情指數(shù)的調(diào)查結(jié)果進行方差分析 （，），并計算所得最小顯著差數(shù)，將供試品種分為個級別 ：維多利亞為高感品種 ，研選號 、粉紅亞都蜜 、為中感品種 ，鳳凰號 、早紫為低感品種 。 室內(nèi)離體葉圓片接種鑒定表 供試品種對霜霉病的抗性表現(xiàn)品種病情指數(shù) 表現(xiàn)型鳳凰 號高感維多利亞中感研選 號中感 中感早紫低感粉紅亞都蜜低感室內(nèi)離體葉圓片接種結(jié)果如表所示 。由表病情指數(shù)的多重比較結(jié)果可知 ，維多利亞 、研選號 、之間無顯著差異 ；早紫和粉紅亞都蜜之間無顯著差異 。為了將供試品種按感病性進行分級 ，對病情指數(shù)的鑒定結(jié)果進行了方差分析 （，），計算所得最小顯著差數(shù)，然后將供試品種對霜霉病的感病性分為個級別 ：鳳凰號為高感品種 ，維多利亞 、研選號 、為中感品種 ，早紫 、粉紅亞都蜜為低感品種 。 田間自然鑒定和室內(nèi)離體葉圓片接種鑒定的相關(guān)分析田間自然鑒定與室內(nèi)離體葉圓片接種鑒定的病情指數(shù)相關(guān)性分析結(jié)果如表所示 。從表可以看出 ，月號 、月號田間自然鑒定的病情指數(shù)與室內(nèi)接種鑒定的病情指數(shù)間的相關(guān)系數(shù)分別為和，均達極顯著水平 ，表明種鑒定方法的結(jié)果極顯著正相關(guān) 。室內(nèi)接種鑒定排除了氣候等因素對鑒定結(jié)果的影響 ，具有較強的可靠性 ，也最能說明品種間抗病性的差異。故品種間抗病性的強弱以室內(nèi)接種鑒定結(jié)果進行歸類 。表 田間鑒定與室內(nèi)離體葉圓片接種鑒定的病情指數(shù)相關(guān)性分析品種田間自然鑒定月 日 月 日室內(nèi)離體葉圓片接種鑒定維多利亞 研選 號 粉紅亞都蜜 鳳凰 號 早紫 相關(guān)系數(shù)（下轉(zhuǎn)第頁 ）··長江大學(xué)學(xué)報 （自然科學(xué)版 ） 年 月參考文獻 賀會利 ，魏小兵 ，歐長波 ，等雞傳染性支氣管炎病毒研究進展動物醫(yī)學(xué)進展，（）：磨美蘭 ，韋平 ，韋正吉 ，等雞傳染性支氣管炎病毒分型研究進展中國家禽，（）：亓麗紅 ，艾武 ，黃兵 ，等雞傳染性支氣管炎病毒 和 基因遺傳變異的相關(guān)性中國獸醫(yī)學(xué)報，（）：，劉振湘中藥防治雞傳染性支氣管炎的療效觀察中國獸醫(yī)雜志，（）：劉鵬飛麻杏石甘粉防治人工感染雞傳染性支氣管炎的試驗研究保定：河北農(nóng)業(yè)大學(xué) ，王?；?，張曉峰 ，馬曉海黃連清瘟散對自然感染雞傳染性支氣管炎的治療效果中國家禽，（）：王真 ，梁雄燕 ，安紅柳 ，等抑制 增殖的植物乙醇提取物的初步篩選黑龍江畜牧獸醫(yī)，（）： ， ， ， ，：王真禽傳染性支氣管炎病毒非結(jié)構(gòu)蛋白 的生物學(xué)功能研究荊州：長江大學(xué) ，范桂鋒中草藥防治雞傳染性支氣管炎研究獸醫(yī)導(dǎo)刊，（）：石晉麗 ，朱甘培中國香薷屬植物的藥用及開發(fā)前景中藥材，（）：丁晨旭 ，紀(jì)蘭菊香薷化學(xué)成分及藥理作用研究進展上海中醫(yī)藥雜志，（）：陳鐘文 ，吳文茂 ，劉華 ，等藥用香薷類植物化學(xué)成分的研究中國實驗方劑學(xué)雜志，（）：應(yīng)國紅 ，鄭民實種中草藥抗乙型肝炎病毒的實驗研究江西醫(yī)學(xué)院學(xué)報，（）：應(yīng)國紅 ，羅國生中草藥抑制 的實驗研究江西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報，（）： ， ， ， ，： ， ， ， ， ，：盧年芳 ，黃愛龍干擾素抗病毒作用的機制國際流行病學(xué)傳染病學(xué)雜志，（）：編輯 余文斌（上接第頁 ） 結(jié)論在歐亞種葡萄對霜霉病抗性鑒定試驗中 ，個品種的葉片都表現(xiàn)出不同程度的感病性 ，同一時期各品種的葉片發(fā)病情況也存在一定程度的差異 。按室內(nèi)離體葉圓片接種鑒定的病情指數(shù)對各品種葉片的感病性進行分類 ，其葉片感病性強的為鳳凰號 ；感病性中等的有維多利亞 、研選號和；感病性弱的有早紫 、粉紅亞都蜜 。根據(jù)試驗所得結(jié)果 ，建議將抗病力強的早紫和粉紅亞都蜜品種在霜霉病發(fā)病嚴(yán)重的南方保護地適度推廣栽培 ，也可作為育種的原始材料加以利用 。與露地相比較 ，塑料大棚內(nèi)葡萄霜霉病的發(fā)病程度較輕 ，發(fā)病時期較晚 ，這表明歐亞種葡萄在南方地區(qū)宜采用保護地栽培。參考文獻 賀普超葡萄學(xué)北京：中國農(nóng)業(yè)出版社 ，邱強中國果樹病蟲原色圖鑒鄭州：河南科學(xué)技術(shù)出版社 ，宋潤剛 ，張亞鳳 ，李昌禹山葡萄品種（品系 ）對霜霉病抗性的研究 北方園藝，（）：劉書曉 ，段秀玲用綠乳化銅防治葡萄霜霉病試驗北方果樹，（）：曹若彬果樹病理學(xué)北京：中國農(nóng)業(yè)出版社 ，宋潤剛 ，路文鵬 ，李昌禹山葡萄種內(nèi)雜交 對霜霉病抗性遺傳的研究園藝學(xué)報，（）：李華葡萄優(yōu)質(zhì)抗病育種 理論與方法研究北京：中國農(nóng)業(yè)出版社 ，李華分級法在鑒定葡萄霜霉抗性中的利用四川農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，（）：蓋鈞鎰試驗統(tǒng)計方法北京：中國農(nóng)業(yè)出版社 ，賀普超 ，劉延琳葡萄屬種間雜交一代對霜霉病抗性遺傳的研究園藝學(xué)報，（）：湯鈿葡萄霜霉病離體接種方法的研究微生物學(xué)通報，（）：劉延琳 ，賀普超歐亞種葡萄品種間雜交一代霜霉病抗性的遺傳葡萄栽培與釀酒，（）：李瑩葡萄文獻分布的探討農(nóng)業(yè)圖書情報學(xué)刊，（）：，編輯 李啟棟··長江大學(xué)學(xué)報 （自然科學(xué)版 ） 年 月 ， （ ， ， ，； ， ， ，）， ， ， ， ， （ ， ， ，）， （ ， ， ，）： ， ， ， ， ： ， ， ， ； ， ， ， （） ； ， ， （） ： ； ； ； （ ， ， ， ，） （ ， ， ，） ， ， （ ， ， ， ，）： （） （） ， ： （）（ ）（）（）（）（ ）（）（） ， ， （） ， ； ， ， ， ， ， ， ， ， ， ； ， ， ：； ； ； ， （ ， ， ，）： （ ）， （ ） ， ， ， ： ， ； ， ： ； ；