<p>SHANGHAIVEGETABLES 上海蔬菜 摘 要 ： 為 了 找 尋 綠 色 、 高 效 的 蔬 菜 根 結(jié) 線 蟲 病 的 防 治 方 法 ， 我 們 開 展 了 芽 孢 桿 菌AMCC100153 防 治 番 茄 根 結(jié) 線 蟲 效 果 試 驗(yàn) ， 并 觀 察 該 生 物 菌 劑 對 番 茄 生 長 的 影 響 。 試 驗(yàn) 結(jié) 果 表 明 ， 生 物 菌 劑 芽 孢 桿 菌AMCC100153 具 有 較 強(qiáng) 的 殺 線 活 性 ， 可 有 效 抑 制 根 結(jié) 線 蟲 的 發(fā) 生 和 發(fā) 展 ， 且 持 效 期 長 ， 同 時(shí) 可 促 進(jìn) 番 茄 植 株 健 壯 生 長 ， 提 高 產(chǎn) 量 ， 改 善 番 茄 果 實(shí) 品 質(zhì) 。 關(guān) 鍵 詞 ： 芽 孢 桿 菌AMCC100153 ； 番 茄 根 結(jié) 線 蟲 病 ； 藥 效 試 驗(yàn) 中 圖 分 類 號(hào) ：S481.9 蔬菜根結(jié)線蟲（ R o o t - k n o t n e m a t o d e s， R K N）屬墊刃目（ T y l e n c h i d a）墊刃亞目（ T y l e n c h i n a）墊刃總科（ T y l e n c h o i d e a o r l e y，1980）異皮科（ H e t e r o d e r i d a e）根結(jié)亞科（ M e l o i d o g y n i n a e）根結(jié)屬（ M e l o i d o g y n e G o e l d i，1982） 12 ，是 一種土壤定居性內(nèi)寄生線蟲。根結(jié)線蟲包含90多個(gè)種，寄主多達(dá)5500多種植物 3 ，其中南方根結(jié)線蟲（ M . i n c o g n i t a）的寄主超過3000多種植物，幾乎能侵染所有栽培植物的根部。90%以上的植物根結(jié)線蟲病是由 南方根結(jié)線蟲（ M e l o i d o g y n e i n c o g n i t a）、北方根結(jié)線蟲（ M . h a p i l a）、爪哇根結(jié)線蟲（ M . j a v a n i c a）和花生根結(jié)線蟲 （ M . a r e n a r i a）引起的 4 。 隨著我國設(shè)施蔬菜種植面積的迅速增加和蔬菜復(fù)種指數(shù)的不斷提高，根結(jié)線蟲的發(fā)生面積逐漸擴(kuò)大， 可使蔬菜減產(chǎn)20%30%，嚴(yán)重的可達(dá)60%70% 5 ，嚴(yán)重制約了設(shè)施蔬菜產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。目前，防治根結(jié)線蟲的 方法主要有化學(xué)防治、物理防治、生物防治、選育抗性品種、嫁接等。其中，化學(xué)防治方法因見效快、操作簡 單而廣受菜農(nóng)歡迎，但化學(xué)藥劑藥性持久性較差，且成本高，藥劑難降解，對環(huán)境污染嚴(yán)重，不利于現(xiàn)代綠色 農(nóng)業(yè)的發(fā)展。為此，我們開展了微生物菌劑芽抱桿菌AMCC100153防治番茄根結(jié)線蟲病的效果試驗(yàn)，以期 找出一種安全、經(jīng)濟(jì)、有效的根結(jié)線蟲防治方法。試驗(yàn)同時(shí)，觀察芽抱桿菌AMCC100153對番茄生長、果實(shí) 品質(zhì)的影響?，F(xiàn)將試驗(yàn)結(jié)果總結(jié)如下。 1 材 料 與 方 法 1 . 1 試 驗(yàn) 材 料 供試微生物菌劑為芽抱桿菌（ B a c i l l u s s p p .）AMCC100153（山東農(nóng)業(yè)大學(xué)資源與環(huán)境微生物實(shí)驗(yàn)室提 供），菌劑濃度為1.0×10 8 CFU/g。供試番茄品種為金棚6088。 1 . 2 試 驗(yàn) 方 法 試驗(yàn)于2015年和2016年設(shè)在山東省德州市陵縣丁莊鄉(xiāng)小莊村日光溫室內(nèi)。試驗(yàn)地前茬為茴香，土壤 含有機(jī)質(zhì)10.5g/kg、全氮62.7g/kg、速效磷12.9mg/kg、速效鉀（K 2 O）89.9mg/kg，含鹽量0.344%，pH值7.13。 采集試驗(yàn)地土壤，經(jīng)檢測土壤內(nèi)有南方根結(jié)線蟲。結(jié)合整地，每hm 2 全層均勻撒施農(nóng)家土雜肥8.8m 3 、雞糞 120m 3 、復(fù)合肥（N-P 2 O 5 -K 2 O=15-15-15）2000kg作基肥。選取長勢一致的健壯番茄苗定植，大行距80cm、 小行距50cm，株距30cm，每hm 2 種植51300株。試驗(yàn)設(shè)3個(gè)處理，每個(gè)處理3次重復(fù)，每個(gè)處理面積27m 2 。 · 植 物 保 護(hù) · 芽 孢 桿 菌 A M C C 1 0 0 1 5 3 防 治 番 茄 根 結(jié) 線 蟲 病 效 果 試 驗(yàn) 及 其 對 番 茄 生 長 的 影 響 田 文 鐸 徐 光 東 朱 金 英 * （山東省德州市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院，山東 德州 253015） * 通 信 作 者 ， 聯(lián) 系 電 話 ：0534-2321660 。 2018（5）：3840，56 - -38 SHANGHAIVEGETABLES 上海蔬菜 （1）空白對照（ck）：不用任何殺線蟲藥劑。 （2）阿維菌素處理：番茄移栽時(shí)，用阿維菌素2000倍液灌根，隨后 覆土。 （3）芽抱桿菌AMCC100153處理：將生物菌劑芽抱桿菌AMCC100153均勻撒施在番茄種植溝內(nèi)，番茄定 植后覆土。各處理田間管理一致，番茄不進(jìn)行疏花疏果，保留到6穗果后打頂。 1 . 3 調(diào) 查 統(tǒng) 計(jì) 方 法 分別于番茄定植后的15d、30d、60d、90d、120d，定壟定株測量株高、莖粗，統(tǒng)計(jì)葉片數(shù)。定植后60d， 各處理隨機(jī)選取5株番茄植株，稱量地上部干鮮重等指標(biāo)。分別于番茄移栽后的15d、60d、90d、120d，每個(gè) 小區(qū)隨機(jī)選取3株番茄，取其根系及根際土壤（帶土量最少為300g）裝入密封袋，做好標(biāo)記，立即帶回實(shí)驗(yàn) 室，采用過篩分離法測定根結(jié)線蟲的蟲口密度。每處理定壟定株調(diào)查10株番茄的經(jīng)濟(jì)性狀，包括單株坐果 數(shù)、平均單果重等。每次采收時(shí)測量各小區(qū)果實(shí)質(zhì)量（精確到1g），并折算667m 2 產(chǎn)量。每處理隨機(jī)選取 第4穗果上成熟度、大小一致的3個(gè)商品果，用2，6-二氯淀粉法測定果實(shí)的維生素C含量，用蒽酮比色法測 定可溶性糖含量，用手持折光儀測定可溶性固形物含量。 2 結(jié) 果 與 分 析 2 . 1 不 同 處 理 對 番 茄 根 際 土 壤 根 結(jié) 線 蟲 蟲 口 密 度 的 影 響 由圖1可知，芽抱桿菌AMCC100153處理在第15d、 30d、60d、90d、120d較空白對照（ck）根結(jié)線蟲蟲口密度 分別降低了68.28%、61.47%、54.72%、61.96%和86.34%，較 阿維菌素處理分別降低了13.10%、2.76%、-2.18%、14.35% 和46.17%?？梢?，芽抱桿菌AMCC100153在番茄生長期內(nèi) 可有效降低根際土壤中的根結(jié)線蟲蟲口密度，且番茄根部 無根結(jié)形成，說明芽抱桿菌AMCC100153可以阻礙根結(jié)線 蟲侵染番茄根系。 2 . 2 不 同 處 理 對 番 茄 株 高 和 莖 粗 的 影 響 由圖2可知，定植后15d內(nèi)，各處理番茄株高增幅較小；定植后1590d，株高增幅變大；定植后90d，株 高增長減緩。定植后30d，不同處理對番茄株高的影響差異開始顯現(xiàn)，株高由高到低依次為芽抱桿菌 AMCC100153處理&gt;阿維菌素處理&gt;空白對照（ck），芽抱桿菌AMCC100153處理的番茄株高較空白對照（ck） 高10.63%（差異極顯著），較阿維菌素處理高1.45%（差異不顯著）。 芽抱桿菌AMCC100153處理和阿維菌素處理番茄植株的莖粗均大于空白對照（ck），且與空白對照（ck） 差異極顯著。定植后15d，各處理的番茄莖粗與株高變化趨勢一致，差異不顯著；定植后1530d內(nèi)，莖粗增 加明顯；定植后90d，芽抱桿菌AMCC100153處理莖粗增長極顯著優(yōu)于其它處理，較空白對照（ck）粗 12.50%、較阿維菌素處理粗6.31%。 f2o d f2o d f2o d Aa Aa Aa Aa Bb ABb Bb Bb Bb Bb Bb Bb o 5o foo f5o 2oo 25o 3oo 35o 4oo 45o f5 3o 6o 9o f2o 定植后天數(shù)d 每g土中的蟲量條 空白對照（ck） 阿維菌素處理 芽抱桿菌AMCCfoof53處理 圖 1 各 處 理 番 茄 根 際 土 壤 根 結(jié) 線 蟲 的 蟲 口 密 度 定植后天數(shù)/d 每g土中的蟲量/條 Bc Bb Bb Aa Aa ABb Aa ABb Aa Aa Aa Aa Aa Aa Aa o 2o 4o 6o 8o foo f2o f4o f5 3o 6o 9o f2o 株高cm 空白對照（ck） 阿維菌素處理 芽抱桿菌AMCCfoof53處理 Bc Cc Bb Bb Bb Ab Bb Aa Aa Aa Aa Aa Aa Aa Aa o f 2 3 4 5 6 7 8 9 fo f5 3o 6o 9o f2o 莖粗 mm 阿維菌素處理 芽抱桿菌AMCCfoof53處理 空白對照（ck） 定植后天數(shù)/d 定植后天數(shù)/d 圖 2 各 處 理 番 茄 的 株 高 和 莖 粗 2018（5）：3940，56 - -39 SHANGHAIVEGETABLES 上海蔬菜 2 . 3 不 同 處 理 對 番 茄 植 株 葉 片 數(shù) 的 影 響 由圖3可知，定植后15d，芽抱桿菌AMCC100153處理的番茄植株葉片數(shù)最多，與阿維菌素處理和空白 對照（ck）差異極顯著。隨著定植天數(shù)的增加，不同處理間番茄植株葉片數(shù)的差異增大。定植后60d，各處理 番茄的單株葉片數(shù)達(dá)最大值，芽抱桿菌AMCC100153處理單株葉片數(shù)最多（18片），分別較空白對照（ck）和 阿維菌素處理多7.59%和6.98%，差異極顯著。 2 . 4 不 同 處 理 對 番 茄 植 株 地 上 部 干 鮮 重 的 影 響 由圖4可知，芽抱桿菌AMCC100153處理植株的地上部干鮮重均高于其他處理。芽抱桿菌AMCC100153 處理的單株干重為14.70g，較空白對照（ck）高25.32%，差異極顯著。 Cc Ab Cc Ba Bc Bb Aab Bb Aa Bb Aa Aab Aa Aa Aa o 5 fo f5 2o f5 3o 6o 9o f2o 空白對照（ck） 阿維菌素處理 芽抱桿菌AMCCfoof53處理 單株葉片數(shù)量片 定植后天數(shù)/d 圖 3 各 處 理 番 茄 葉 片 數(shù) Bb Ab Aa Aab Aa Aab o 5o foo f5o 2oo 25o 鮮重 干重 單株干鮮重g 空白對照（ck） 阿維菌素處理 芽抱桿菌AMCCfoof53處理 圖 4 各 處 理 番 茄 植 株 地 上 部 干 鮮 重 2 . 5 不 同 處 理 對 番 茄 產(chǎn) 量 的 影 響 由圖5可知，不同處理間番茄前期產(chǎn)量差異不大， 芽抱桿菌 AMCC100153 處理 667m 2 產(chǎn)量最高 （3297.12kg），較空白對照（ck）增產(chǎn)12.19%；后期產(chǎn)量 仍以芽抱桿菌AMCC100153處理最高，667m 2 產(chǎn)量為 3161.66kg， 較空白對照（ck）增產(chǎn)33.45%， 差異極顯著。 總產(chǎn)量芽抱桿菌AMCC100153處理最高， 667m 2 產(chǎn)量為 6458.78kg， 較空白對照（ck）高21.68%， 差異極顯著。 2 . 6 不 同 處 理 對 番 茄 果 實(shí) 品 質(zhì) 的 影 響 由表1可知，各處理中芽抱桿菌AMCC100153處理番茄果實(shí)的維生素C、可溶性糖、可溶性固形物含量 最高，分別為310.6mg/kg、4.42%和5.32%，分別較空白對照（ck）高17.79%、13.27%和11.97%，差異極顯著， 說明芽抱桿菌AMCC100153處理的番茄品質(zhì)最優(yōu)。 表 1 各 處 理 番 茄 的 果 實(shí) 品 質(zhì) 處理 空白對照（ck） 阿維菌素 芽抱桿菌AMCC100153 維生素C含量/mg·kg -1 268.9Bc 299.8Ab 310.6Aa 可溶性糖含量/% 3.83Cc 4.22Bb 4.42Aa 可溶性固形物含量/% 4.73Cc 5.15Bb 5.32Aa 3 小 結(jié) 試驗(yàn)表明，芽抱桿菌AMCC100153具有較強(qiáng)的殺線活性，能有效抑制根結(jié)線蟲的發(fā)生和發(fā)展，且持效期 長。Huang分離到的不產(chǎn)伴抱晶體的側(cè)抱短芽抱桿菌G4，也具有很高的抗線蟲活性，其病理學(xué)觀察結(jié)果表 Cc Cc Bb Bb Bb Aa Aa Aa Aa o fooo 2ooo 3ooo 4ooo 5ooo 6ooo 7ooo 前期產(chǎn)量 后期產(chǎn)量 總產(chǎn)量 結(jié)果時(shí)期 2 ） 空白對照（ck） 阿維菌素處理 芽抱桿菌AMCCfoof53處理 每667m 2 產(chǎn)量/kg 圖 5 各 處 理 番 茄 的 產(chǎn) 量 （ 下 轉(zhuǎn) P 5 6 ） 2018（5）：40，56 - -40 SHANGHAIVEGETABLES 上海蔬菜 2 防 治 方 法 2 . 1 農(nóng) 業(yè) 防 治 2.1.1 種 子 處 理 可用52溫水浸種30min，將種子撈出、晾干后備用；也可用10%甲醛溶液浸種20min，然后用流水沖 洗40min后晾干備用。 2.1.2 實(shí) 行 輪 作 大部分病原菌都能隨病株殘?bào)w在土壤中存活35年甚至10年以上，成為初侵染源。因此，必須實(shí)行3年 以上輪作，有條件的地方最好種植1年水稻或水生作物，也可種植蔥蒜類等能分泌殺菌物質(zhì)的作物，避免種 植與甘藍(lán)有相近病害的作物。 2.1.3 加 強(qiáng) 田 間 管 理 施用腐熟有機(jī)肥作基肥，增施磷鉀肥，提高植株抗病性；田間加強(qiáng)通風(fēng)透光，減少病原菌累積；農(nóng)事操作 過程中，避免損傷甘藍(lán)根系，防止病菌從傷口侵入；不宜漫灌和長期噴灌，最好采用滴灌技術(shù)；合理安排采收 期，防止病菌侵染。 2 . 2 化 學(xué) 防 治 霜霉病可用72%霜脲錳鋅可濕性粉劑800倍液或72.2%霜霉威水劑600倍液防治，68d噴1次，共噴2 3次；軟腐病可選用72%農(nóng)用鏈霉素可溶性粉劑3000倍液、53.8%可殺得2000干懸浮劑1000倍液、20%龍 克菌可濕性粉劑600倍液、5%菌毒清水劑300倍液、47%加瑞農(nóng)可濕性粉劑800倍液等藥劑防治；菌核病可 選用50%速克靈可濕性粉劑2000倍液、50%農(nóng)利靈可濕性粉劑1000倍液、50%多菌靈可濕性粉劑800倍液 等藥劑防治；炭疽病發(fā)病初期可噴灑70%甲基硫菌靈可濕性粉劑1000倍液或80%炭疸福美可濕性粉劑 800倍防治；黑斑病可用75百菌清可濕性粉劑500600倍液或64殺毒礬可濕性粉劑500倍液防治；病毒 病發(fā)病初期可選用20%病毒A可濕性粉劑500倍液、 20%病毒凈可濕性粉劑500倍液、 20%病毒克星可濕性粉劑 500倍液、55%菌毒清水劑500倍液、1.5%植病靈水乳劑1000倍液防治，每隔57d噴1次，連噴23次。 明，G4菌株純化的胞外蛋白酶直接破壞了線蟲表皮 6 。芽抱桿菌AMCC100153產(chǎn)生活性物質(zhì)對南方根結(jié)線 蟲胚胎發(fā)育有強(qiáng)烈的抑制和破壞作用，可直接殺傷二齡幼蟲，致死率達(dá)90%以上，且其活性物質(zhì)具有較好的 熱穩(wěn)定性和pH穩(wěn)定性 7 。試驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)，芽抱桿菌AMCC100153能夠促進(jìn)番茄植株健壯生長，有效抑制植株 早衰，從而提高產(chǎn)量（尤其是后期產(chǎn)量），并可顯著改善番茄果實(shí)的營養(yǎng)品質(zhì)。 綜上所述，芽抱桿菌AMCC100153具有較好的殺線功能，在一定程度上減輕了根結(jié)線蟲對番茄植株的 影響，表現(xiàn)出較好的應(yīng)用推廣潛力，今后應(yīng)進(jìn)一步研究其最佳使用量及使用方式，為大面積推廣應(yīng)用提供科 學(xué)的理論依據(jù)。 參 考 文 獻(xiàn) 1 謝輝.植物線蟲分類學(xué)M.北京：高等教育出版社（第2版），2005. 2 劉維志.植物病原線蟲學(xué)M.北京：北京農(nóng)業(yè)出版社，2000. 3 JonesJT，HaegemanA，DanchinEG，etal.Top10plant-parasiticnematodesinmolecularplantpathologyJ.MolecularPlant Pathology，2013，14（9）：946961. 4 EisenbackJ.D.，HirschmannH.，SasserJ.N.，TriantaphyllouA.C.Aguidetothefourmostcommonspeciesofroot-knotnema tode（ M e l o i d o g y n e s p p.）withapictorialkeyM.Raleigh，NorthCarolina：USAgencyforInternationalDevelopment，1981. 5 劉鳴韜.北方蔬菜根結(jié)線蟲病加重的原因及控制對策J.河南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2001（1）：2324. 6 HuangX，TianB，NiuQ，etal.Anextracellularproteasefrom B r e v i b a c i l l u s l a t e r o s p o r u sG4withoutparasporalcrystalscan serveasapathogenicfactorininfectionofnematodesJ.ResearchinMicrobiology，2005，156（5）：719727. 7 王建宇.芽抱桿菌AMCC100153防治番茄根結(jié)線蟲病的應(yīng)用研究D.山東：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，2016：46. （ 上 接 P 4 0 ） 2018（5）：56 - -56</p>