肖 婷 ， 成 瑋 ， 顏偉中 ， 等 上海地區(qū)草莓灰霉病病菌種群抗藥性研究 J 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) ， 2018， 46( 20) : 117 120doi: 1015889/j issn1002 1302201820030上海地區(qū)草莓灰霉病病菌種群抗藥性研究肖 婷1， 成 瑋2， 顏偉中2， 王建華1， 許 媛1， 吉沐祥1， 楊敬輝1( 1 江蘇丘陵地區(qū)鎮(zhèn)江農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所 ， 江蘇句容 212400; 2 上海市農(nóng)技推廣中心 ， 上海 200000)摘要 : 為闡明上海地區(qū)草莓灰霉病病菌對常用殺菌劑的抗藥性水平 ， 采用區(qū)分劑量法測定 2016 年 、2017 年采集的 319 株草莓灰霉病病菌 ( Botrytis cinerea) 對 9 種殺菌劑的抗性 ， 并對菌株的多重抗藥性進行分析 。結(jié)果表明 ， 所有灰霉病病菌菌株對咪鮮胺 ( prochloraz， 簡稱 Pro) 、環(huán)酰菌胺 ( fenhexamid， 簡稱 Fen) 均表現(xiàn)敏感 ， 而對多菌靈 ( carbendazim，簡稱 Car) 、乙霉威 ( diethofencarb， 簡稱 Die) 、吡唑醚菌酯 ( pyraclostrobin， 簡稱 Pyr) 、嘧菌酯 ( azoxystrobin， 簡稱 Azo) 、啶酰菌胺 ( boscalid， 簡稱 Bos) 、嘧霉胺 ( pyrimethanil， 簡稱 Pyr) 、嘧菌環(huán)胺 ( cyprodinil， 簡稱 Cyp) 等表現(xiàn)為抗性的菌株占比分別為 7122%、5070%、6561%、6630%、3126%、2704%、2438%; 灰霉病病菌種群在地區(qū)間對不同藥劑的抗藥性水平不同 ， 在上海市閔行區(qū)采集的菌株對所有供試藥劑以敏感菌株為主 ， 崇明區(qū)的敏感種群與抗性種群比例相當(dāng) ，而嘉定區(qū)和青浦區(qū)則是以抗性菌株占主導(dǎo)地位 ， 抗性菌株占比分別為 91 89%、84. 42%; 在田間草莓灰霉病病菌種群中 ， 共檢 測 到 9 種多重抗藥性表型 ， 分 別 為 Azo、Car、Pyr、CarPyr、CarAzo、CarBos、CarAzoPyr、CarBosAzo、CarBosAzoPyr。表明 ， 上海地區(qū)草莓灰霉病病菌種群對多菌靈 、嘧菌酯 、吡唑醚菌酯基本喪失了敏感性 ， 多藥劑抗藥性種群以 CarAzo、CarAzoPyr、CarBosAzo、CarBosAzoPyr等為優(yōu)勢亞種群 ， 抗性治理措施中推薦使用咪鮮胺和環(huán)酰菌胺交替防治灰霉病 。關(guān)鍵詞 : 上海地區(qū) ; 草莓灰霉病病菌 ; 殺菌劑 ; 抗藥性 ; 敏感性 ; 抗藥性表型 ; 多重抗藥性中圖分類號 : S43668+4 文獻標(biāo)志碼 : A 文章編號 : 1002 1302( 2018) 20 0117 04收稿日期 : 2018 02 27基金項目 : 上海市農(nóng)業(yè)委員會示范推廣計劃 編號 : 滬農(nóng)科推字( 2015) 第 2 7 號 ; 江蘇省鎮(zhèn)江市農(nóng)業(yè)科技支撐項目 ( 編號 :NY2015019) 。作者簡介 : 肖 婷 ( 1982) ， 女 ， 山東濟寧人 ， 碩士 ， 副研究員 ， 主要從事植物保護方面的研究 。E mail: xiaoting826448163 com。通信作者 : 楊敬輝 ， 博士 ， 研究員 ， 主要從事植物保護方面的研究 。Tel: ( 0511) 80978081; E mail: yjhnn32126 com。上海市草莓產(chǎn)業(yè)發(fā)展始于 20 世紀(jì) 80 年代 ， 近年來 ， 隨著產(chǎn)業(yè)的發(fā)展 ， 草莓種植面積約為 2 000 hm2。隨著品種不斷優(yōu)化 、栽培水平持續(xù)提高 ， 草莓供應(yīng)從 11 月持續(xù)到翌年 5 月 ， 周期長 、效益高 ， 是農(nóng)民增收的重要途徑之一 ， 草莓產(chǎn)業(yè)已經(jīng)成為種植業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整的主要內(nèi)容 。上海地區(qū)草莓種植均以塑料大棚種植為主 ， 且長期連作 。在每年草莓開花后 ， 大棚均須要蓋外層塑料棚膜 ， 這種封閉的生長條件極利于病害的暴發(fā)流行 ， 其中由灰葡萄孢菌 ( Botrytis cinerea) 引起的草莓灰霉病是設(shè)施大棚草莓開花結(jié)果期的主要病害 。這是一種世界性病害 ， 廣泛侵染各種蔬果 1， 現(xiàn)階段 ， 生產(chǎn)上防治灰霉病的主要藥劑種類有苯并咪唑類 、甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑 、琥珀酸脫氫酶抑制劑類 、苯胺基嘧啶類等藥劑 2 3， 但這些殺菌劑如多菌靈 ( carbendazim， 簡 稱 Car) 、嘧 菌 酯 ( azoxystrobin， 簡 稱Azo) 、吡 唑 醚 菌 酯 ( pyraclostrobin， 簡 稱 Pyr) 、啶 酰 菌 胺( boscalid， 簡稱 Bos) 、嘧霉胺 ( pyrimethanil， 簡稱 Pyr) 、嘧菌環(huán)胺 ( cyprodinil， 簡稱 Cyp) 等都是單一作用位點殺菌劑 ， 如果長期 、多頻次使用 ， 抗藥性會快速發(fā)展 。關(guān)于灰霉病病菌抗藥性方面的報道 ， 在國內(nèi)外屢見不鮮 4 10。鑒于上海地區(qū)目前尚無系統(tǒng)性研究灰霉病病菌種群對常用殺菌劑的抗藥性 ， 本研究連續(xù) 2 年系統(tǒng)檢測上海地區(qū)主要草莓種植地區(qū)灰霉病病菌種群對 9 種常用殺菌劑的抗藥性水平 ， 以期探明上海市不同草莓種植地區(qū)灰霉病病菌種群的多藥劑優(yōu)勢亞種群 ， 因地制宜地提出抗藥性治理策略 。1 材料與方法11 菌株的采集 、分離 、鑒定2016 年 4 月和 2017 年 4 月分別在上海市嘉定區(qū) 、青浦區(qū) 、金山區(qū) 、閔行區(qū) 、崇明區(qū)等的 15 個草莓園區(qū)隨機采取草莓灰霉病病株 ， 于實驗室內(nèi)分離 ， 挑單孢培養(yǎng) ， 鑒定其為灰葡萄孢菌 ( Botrytis cinerea Pers ) 。共分離得到 319 株草莓灰霉病病菌 ， 其中 2016 年有 124 株 ， 2017 年有 195 株 ， 所有菌株均采用濾紙片法保存 ， 置于 20 冰箱中 ， 備用 。12 供試藥劑本試驗所用殺菌劑信息如表 1 所示 。99% 水楊肟酸 ( salicylhydroxamic acid， 簡稱 SHAM) ， 由Sigma Aldrich 公司生產(chǎn) ， 溶于甲醇 ， 配制成 20 000 mg/L 母液 。均放于 4 保存?zhèn)溆?。13 多菌靈 、咪鮮胺 、乙霉威的抗藥性檢測方法采用區(qū)分劑量法測定供試菌株對多菌靈 、咪 鮮 胺( prochloraz， 簡稱 Pro) 、乙霉威 ( diethofencarb， 簡稱 Die) 的抗藥性 ， 多菌靈 、咪鮮胺 、乙霉威的區(qū)分劑量分別設(shè)置為 10、5、10 mg/L 11， 培養(yǎng)基采用馬鈴薯葡萄糖瓊脂 ( PDA) 培養(yǎng)基 ( 購自北京奧博星生物技術(shù)有限公司 ) ， 以不含藥劑的培養(yǎng)基為對照 ， 接種后于 23 培養(yǎng) 3 d 后進行觀察 ， 平板上正常生長的為抗性菌株 ， 不能正常生長的為敏感菌株 。所有抗性菌株均進行 2 次重復(fù)再次確認(rèn) 。711江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2018 年第 46 卷第 20 期表 1 試驗所用殺菌劑的詳細(xì)信息通用名 劑型 濃度 生產(chǎn)廠家區(qū)分劑量( mg/L)多菌靈 可濕性粉劑 ( wettablepowder， 簡稱 WP) 500% 江蘇藍豐生物化工股份有限公司 10咪鮮胺 WP 500% 江蘇省綠盾植保農(nóng)藥實驗有限公司 5乙霉威 WP 500% 青島翰生生物科技股份有限公司 10吡唑醚菌酯 懸浮劑 ( suspension concentrate， 簡稱 SC) 250% 德國巴斯夫公司 10嘧菌酯 SC 2500 g/L 先正達 ( 蘇州 ) 作物保護公司 10環(huán)酰菌胺 ( fenhexamid， 簡稱 Fen) 原藥 982% 沈陽化工研究院提供 ( 用丙酮配制成10 000 g/mL 母液 )5啶酰菌胺 水分散粒劑 ( water dispersible granules， 簡稱 WDG)500% 先正達 ( 蘇州 ) 作物保護公司 1嘧霉胺 WDG 800% 德國拜耳公司 5嘧菌環(huán)胺 WDG 500% 先正達 ( 蘇州 ) 作物保護公司 514 嘧菌酯 、吡唑醚菌酯 、環(huán)酰菌胺的抗藥性檢測方法采用區(qū)分劑量法測定供試菌株對嘧菌酯 、吡唑醚菌酯 、環(huán)酰菌胺的抗藥性 ， 嘧菌酯和吡唑醚菌酯的區(qū)分劑量均設(shè)置為10 mg/L 12， 環(huán)酰菌胺的區(qū)分劑量設(shè)置為 5 mg/L， 培養(yǎng)基采用1%麥芽浸粉瓊脂 ( MEA) 培養(yǎng)基 ， 包含氯霉素麥芽提取物瓊脂 ( 購自青島海博生物技術(shù)有限公司 ) 和瓊脂粉 ， 以不含藥劑的培養(yǎng)基為對照 。為防止旁路氧化 13， 嘧菌酯和吡唑醚菌酯及其對照培養(yǎng)基中均含有 100 mg/L SHAM， 于 23 培養(yǎng) 3 d后進行觀察 ， 平板上正常生長的為抗性菌株 ， 不能正常生長的為敏感菌株 。所有抗性菌株均進行 2 次重復(fù)再次確認(rèn) 。15 啶酰菌胺的抗藥性檢測方法采用區(qū)分劑量法測定供試菌株對啶酰菌胺抗藥性的濃度為 1 mg/L 14， 采用酵母浸出粉胨葡萄糖 ( YBA) 培養(yǎng)基 ( 10 g酵母粉 ， 10 g 蛋白胨 ， 20 g 醋酸鈉 ， 15 g 瓊脂 ， 蒸餾水定容至1 000 mL) 制作藥皿 。設(shè)不加藥劑的培養(yǎng)基為空白對照 ， 于23 培養(yǎng) 2 d 后進行觀察 ， 平板上病菌孢子正常萌發(fā) 、菌絲正常生長的確定為抗性菌株 ， 不能正常生長的確定為敏感菌株 。所有抗性菌株均進行 2 次重復(fù)再次確認(rèn) 。16 嘧霉胺 、嘧菌環(huán)胺的抗藥性檢測方法采用區(qū)分劑量法測定供試菌株對嘧霉胺 、嘧菌環(huán)胺的抗藥性 ， 兩者的區(qū)分劑量均設(shè)置為 5 mg/L， 采用察氏瓊脂( CZA) 培養(yǎng)基 ( 2 00 g NaNO3， 1 00 g K2HPO4， 0 50 g KCl，0. 50 g MgSO4， 0 01 g FeSO4， 30 00 g 蔗糖 ， 20 00 g 瓊脂 ， 蒸餾水定容至 1 00000 mL) 制作藥皿 。設(shè)不加藥劑的培養(yǎng)基為空白對照 ， 于 23 培養(yǎng) 2 d 后進行觀察 ， 平板上病菌孢子正常萌發(fā) 、菌絲正常生長的確定為抗性菌株 ， 不能正常生長的確定為敏感菌株 。所有抗性菌株均進行 2 次重復(fù)再次確認(rèn) 。17 數(shù)據(jù)分析統(tǒng)計不同地區(qū)不同藥劑抗性菌株的數(shù)量 ， 分析其抗性水平 。不同采樣點菌株抗性頻率的計算公式 : 抗性頻率 = 抗性菌株數(shù)量 /測試菌株數(shù)量 ×100%。統(tǒng)計并分析抗性菌株的多重抗藥性表型 。2 結(jié)果與分析21 上海市不同地區(qū)草莓灰霉病病菌種群對藥劑的抗藥性檢測結(jié)果為準(zhǔn)確快速區(qū)分灰霉病病菌對 9 種藥劑的抗藥性 ， 以含有藥劑平板上灰霉孢子正常萌發(fā)生長的菌株判定為抗性菌株 ， 不能正常萌發(fā)生長的菌株判定為敏感菌株 。由圖 1 可知 ，2016 年和 2017 年采集的灰霉病病菌菌株中未檢測到對咪鮮胺和環(huán)酰菌胺產(chǎn)生抗性的菌株 ， 所有供試菌株對咪鮮胺和環(huán)酰菌胺均表現(xiàn)為敏感 ， 而對多菌靈 、嘧菌酯 、吡唑醚菌酯 、乙霉威等的抗性頻率較高 。2016 年對多菌靈產(chǎn)生抗性的菌株高達 8155%， 其次為嘧菌酯 、吡唑醚菌酯 、乙霉威 ， 其抗性頻率分別為 7614%、7406%、58 72%。與 2016 年相比 ， 2017 年所采集的菌株對多菌靈 、嘧菌酯 、吡唑醚菌酯 、乙霉威的抗性頻率 均 有 所 下 降 ， 分 別 為 60 87%、57 15%、56 46%、42. 67%。22 上海市不同地區(qū)草莓灰霉病病菌種群對藥劑的抗藥性分布2016 年測定采自嘉定區(qū) ( 30 株 ) 、青浦區(qū) ( 52 株 ) 、金山區(qū) ( 42 株 ) 等 3 個地區(qū)的灰霉病病菌菌株對 9 種藥劑的敏感性 ， 抗性菌株共計 110 株 ， 嘉定區(qū) 、青浦區(qū) 、金山區(qū)的抗性菌株占比分別為 80%、92 31%、88 1%， 上述 3 地的草莓灰霉病抗性菌株群體已成為田間主導(dǎo)種群 。2017 年測定采自閔行區(qū) ( 24 株 ) 、嘉定區(qū) ( 45 株 ) 、青浦區(qū) ( 70 株 ) 、崇明區(qū) ( 56 株 )等 4 個地區(qū)的灰霉病病菌菌株對 9 種藥劑的敏感性 ， 抗性菌株共計 133 株 ， 閔興區(qū) 、嘉定區(qū) 、青浦區(qū) 、崇明區(qū)的抗性菌株占比分別為 20 83%、100 00%、78 57%、56 36%。由圖 2 可知 ， 2017 年嘉定區(qū)供試菌株除了對乙霉威的抗性頻率比 2016年略低以外 ， 對其余供試藥劑的抗性頻率均呈明顯上升趨勢 ，且抗性頻率均高于 50%， 該地區(qū)田間主導(dǎo)種群為抗性菌株群體 ; 青浦區(qū)的灰霉病病菌菌株群體與 2016 年的檢測結(jié)果趨勢相當(dāng) ， 抗性頻率略有下降 ， 但抗性菌株群體依然是主導(dǎo)種群 ，811 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2018 年第 46 卷第 20 期而崇明區(qū)抗性菌株群體與敏感菌株群體的比例相當(dāng) ， 須指出的是閔行區(qū)田間灰霉病病菌群體依然以敏感菌株為主導(dǎo) 。23 上海地區(qū)草莓灰霉病病菌種群多重抗藥性表型分析根據(jù)試驗結(jié)果 ， 重點選取了多菌靈 ( Car) 、啶酰菌胺( Bos) 、嘧菌酯 ( Azo) 、嘧霉胺 ( Pyr) 等分析多重抗藥性 。由圖3 可知 ， 2016 年和 2017 年 243 株抗性菌株的抗藥性表型共有9 種 。其中 ， 單抗菌株有 3 種類型 ， 分別為 Azo、Car、Pyr，分別有 9、16、1 株 ， 共 26 株 ， 占總抗性菌株的比例為 1070%;雙抗菌株有 3 種類型 ， 分別為 CarPyr、CarAzo、CarBos，分別有 1、64、2 株 ， 共 67 株 ， 占總抗性菌株的比例為 2757%;三抗菌株有 2 種類型 ， 分別為 CarAzoPyr、CarBosAzo，分別有 51、53 株 ， 共 104 株 ， 占總抗性菌株的比例為 4280%;四抗菌株類型為 CarBosAzoPyr， 有 46 株 ， 占總抗性菌株的比例為 18 93%。2016 年多重抗藥性表型以雙抗類型( CarAzo) 和三抗類型 ( CarAzoPyr、CarBosAzo) 為優(yōu)勢亞 種 群 ， 分 別 占 2016 年測定菌株總數(shù)的 25 45%、2091%、2545%， 而四抗類型占 13 64%。與 2016 年相比 ，2017 年的多重抗藥性表型略有變化 ， 單抗類型 Azo、Pyr、雙抗類型 CarBos及三抗類型 CarBosAzo所占比例略有下降 ， 而其他優(yōu)勢亞種群所占比例均有所上升 ， CarAzo、CarAzoPyr、CarBosAzoPyr所占比例分別為 27 07%、2105%、2331%， 其中四抗類型菌株數(shù)量上升最多 ， 所占比例由 2016 年的 13 64% 上升至 2017 年的 23 31%。上海地區(qū)草 莓 灰 霉 病 病 菌 的 多 重 抗 藥 性 表 型 以 CarAzo、CarAzoPyr、CarBosAzo、CarBosAzoPyr為優(yōu)勢亞種群 ， 呈現(xiàn)出單抗類型比例減少多抗類型比例上升的演變趨勢 。3 結(jié)論與討論本試驗于 2016 年和 2017 年分別在上海市嘉定區(qū) 、青浦區(qū) 、金山區(qū) 、閔行區(qū) 、崇明區(qū)等采集 319 株草莓灰霉病病菌菌株 ， 測定了菌株對多菌靈 、乙霉威 、咪鮮胺 、吡唑醚菌酯 、嘧菌酯 、環(huán)酰菌胺 、啶酰菌胺 、嘧霉胺 、嘧菌環(huán)胺等的抗藥性 。采集的所有菌株均對咪鮮胺 、環(huán)酰菌胺表現(xiàn)為敏感 ， 未檢測到抗性菌株 ， 但對多菌靈的抗藥性穩(wěn)居榜首 ， 這與文獻報道中 ， 江蘇省南京市 、鎮(zhèn)江市草莓灰霉病病菌對多菌靈產(chǎn)生了很高的抗藥性 15相一致 。從 2 年的結(jié)果來看 ， 嘉定區(qū)灰霉病病菌菌株對嘧菌酯和吡唑醚菌酯的抗性頻率呈上升趨勢 ， 抗性頻率由2016 年的 70%上升至 2017 年的 9778%， 抗性菌株已經(jīng)成為優(yōu)勢種群 ?；矢\紅等在 2013 年也曾報道了浙江省灰霉菌對嘧菌酯的抗藥性也呈現(xiàn)此種趨勢 10。嘧霉胺和嘧菌環(huán)胺的抗藥頻率目前處于抗性發(fā)展階段 ， 趙虎等在南京 、鎮(zhèn)江等地區(qū)采集的菌種中檢測到的草莓灰霉病病菌對嘧霉胺抗藥性高達 83% 15， 2016 年徐州市草莓灰霉病病菌對嘧霉胺的抗藥性也高達 5376% 16。可見草莓灰霉病對嘧霉胺的抗性問題也應(yīng)引起高度重視 。不同地區(qū)由于管理水平和用藥選擇壓力不同 ， 抗性分布并不均勻 ， 閔行區(qū)和崇明區(qū)相對于嘉定區(qū) 、青浦區(qū) 、金山區(qū)抗性頻率明顯較低 。在閔行區(qū)采集的菌株對所有供試藥劑以敏感菌株為主 ， 由此可見 ， 此地區(qū)草莓灰霉病病菌以敏感種群為主導(dǎo) ， 抗性菌株所占比例較小 ， 但生產(chǎn)中仍要注意藥劑的使用次數(shù)和輪換交替用藥的原則 ， 保持田間菌株的敏感性 ， 延長各種藥劑的使用壽命 。通過 1 年的田間指導(dǎo)用藥 、藥劑的合理使用培訓(xùn)等 ， 2017年在青浦區(qū)采集到的菌株對多菌靈 、乙霉威 、吡唑醚菌酯 、嘧菌酯等的抗藥性均有所下降 ， 但抗性頻率仍處于 70% 左右 ，田間依然以抗性群體為優(yōu)勢群體 ， 而草莓灰霉病病菌菌株對啶酰菌胺 、嘧霉胺 、嘧菌環(huán)胺等的抗藥性處于平穩(wěn)期 ， 2 年的檢測結(jié)果相差不大 。由此可見 ， 上海地區(qū)草莓產(chǎn)區(qū)的灰霉病病菌對多菌靈 、嘧菌酯 、吡唑醚菌酯 、乙霉威等呈抗性的種群為主導(dǎo)種群 。藥劑間交互抗藥性分析結(jié)果表明 ， 大部分灰霉病病菌菌株對多菌靈和乙霉威具有負(fù)交互抗性 ， 因此對多菌靈產(chǎn)生抗性的菌株多數(shù)對乙霉威敏感 ， 而對多菌靈敏感的菌株 ， 即使從來沒有使用過乙霉威 ， 但其仍對乙霉威表現(xiàn)抗藥性 ， 但本研究發(fā)現(xiàn)乙霉威與多菌靈雙抗菌株在 2016 年高達 35%， 另有報911江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2018 年第 46 卷第 20 期道乙霉威在研究區(qū)田間的高抗群體達 10% 15， 而作為多菌靈 +乙霉威抗藥性治理的黃金搭檔也不能幸免抗藥性的產(chǎn)生 ， 自 20 世紀(jì) 90 年代初 ， 世界各國陸續(xù)檢測到對多菌靈 、腐霉 利 、乙霉威均具抗性的多抗灰霉菌株 ， 即BenDicNpc 17 19; 而菌株對吡唑醚菌酯和嘧菌酯具有嚴(yán)重的正交互抗性 ， 檢測結(jié)果中灰霉病病菌對嘧菌酯和吡唑醚菌酯的抗性頻率基本相同 ; 菌株對嘧霉胺和嘧菌環(huán)胺也有一定的交互抗性 。另外 ， 菌株雖然對啶酰菌胺也產(chǎn)生了抗藥性 ， 但抗性水平均處于低抗水平 ， 2016 年和 2017 年抗性水平比較平穩(wěn) ， 相差不大 ， 因此實際生產(chǎn)中加大藥劑使用量 ， 仍然可以較好地防控灰霉病的危害 。供試 9 種藥劑 ， 沒有檢測出對咪鮮胺和環(huán)酰菌胺產(chǎn)生抗性的菌株 ， 這 2 種藥劑對草莓灰霉病病菌依然有很好的防效 。從藥劑的多重抗藥性表型分布來看 ， 從 2016 年到 2017年 ， 單抗菌株逐漸向雙抗菌株發(fā)展 ， 三抗菌株逐漸向四抗菌株發(fā)展 ， 田間草莓灰霉病病菌的多重抗藥性表型以 CarAzo、CarAzoPyr、CarBosAzo、CarBosAzoPyr等為優(yōu)勢亞種群 ， 由此可見 ， 該地區(qū)病菌對藥劑的多重抗藥性處于發(fā)展階段 ， 具有明顯的發(fā)展趨勢 ， 而且隨著藥劑的使用 ， 單抗類型比例減小 ， 逐漸向多抗類型演變 。因此 ， 在生產(chǎn)過程中要注意不同種類藥劑的輪用 、混用 ， 避免抗藥性的快速發(fā)展 。參考文獻 : 1 Bouchra C， Achouri M， Idrissi Hassani L M， et al Chemicalcomposition and antifungal activity of essential oils of sevenMoroccan Labiatae against Botrytis cinerea Pers: Fr J Journal ofEthnopharmacology， 2003， 89( 1) : 165 169 2 Leroux P Chemical control of Botrytis cinerea and its resistance tochemical fungicides M / /Elad Y， Williamson B， Tudzynski P， etal Botrytis: biology， pathology and control Dordrecht: Springer，2007: 195 222 3 Williamson B， Tudzynski B， Tudzynski P， et al Botrytis cinerea: thecause of grey mould disease J Molecular Plant Pathology， 2007， 8( 5) : 561 580 4 禮 茜 ， 嚴(yán)蕾艷 ， 童英富 ， 等 浙江兩地區(qū)草莓灰霉病菌 ( Botrytiscinerea) 對撲海因的抗藥性及其分子機制 J 果樹學(xué)報 ， 2007，24( 3) : 344 348 5 Weber W esistance of Botrytis cinerea to multiple fungicides innorthern German small fruit production J Plant Disease， 2011，95( 10) : 1263 1269 6 Banno S， Fukumori F， Ichiishi A， et al Genotyping of benzimidazole resistant and dicarboximide resistant mutations in Botrytis cinereausing real time polymerase chain reaction assays J Phytopathology， 2008， 98( 4) : 397 404 7 Fernandez Ortuno D， Tores J A， De Vicente A A Mechanisms ofresistance to Qol fungicides in phytopathogenic fungi J International Microbiology， 2008， 11( 1) : 1 9 8 Leroch M， Plesken C， Weber W， et al Gray mold populations inGerman strawberry fields are resistant to multiple fungicides anddominated by a novel clade closely related to Botrytis cinerea J Applied and Environment Microbiology， 2013， 79( 1) : 159 167 9 趙 平 ， 嚴(yán)秋旭 ， 李 新 ， 等 甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑的開發(fā)及抗性發(fā)展?fàn)顩r J 農(nóng)藥 ， 2011， 50( 8) : 547 551 10 皇甫運紅 ， 戴德江 ， 時浩杰 ， 等 浙江省果蔬灰霉病菌對嘧菌酯的抗藥性研究 J 農(nóng)藥學(xué)學(xué)報 ， 2013， 15( 5) : 504 510 11 嚴(yán) 紅 ， 燕繼曄 ， 王忠躍 ， 等 葡萄灰霉病菌對 3 種殺菌劑的多重抗藥性檢測 J 果樹學(xué)報 ， 2012， 29( 4) : 625 629 12 Yin D， Chen X， Hamada M S， et al Multiple resistance to QoIs andother classes of fungicides in Botrytis cinerea populations fromstrawberry in Zhejiang Province， China J European Journal ofPlant Pathology， 2015， 141( 1) : 169 177 13 金麗華 ， 陳長軍 ， 王建新 ， 等 嘧菌酯及 SHAM 對 4 種植物病原真菌的活性和作用方式研究 J 中國農(nóng)業(yè)科學(xué) ， 2007， 40( 10) :2206 2213 14 Latorre B A， Torres Prevalence of isolates of Botrytis cinerearesistant to multiple fungicides in Chilean vineyards J CropProtection， 2012， 40( 5) : 49 52 15 趙 虎 ， 王松群 ， 余新燕 ， 等 南京 、鎮(zhèn)江地區(qū)草莓灰霉病菌對 6種殺菌劑的抗藥性及生物學(xué)性狀分析 J 基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué) ， 2016， 35( 7) : 1828 1834 16 白耀博 ， 陳學(xué)進 ， 鳳舞劍 ， 等 徐州市草莓灰霉病菌對嘧霉胺的抗藥性 J 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué) ， 2016， 44( 35) : 162 164 17 丁 中 ， 劉 峰 ， 王會利 ， 等 番茄灰霉菌的多重抗藥性研究 J 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報 ( 自然科學(xué)版 ) ， 2001， 32( 4) : 452 456 18 Kim B S， Park E W， Cho K Y Population dynamics of sensitive andresistance phenotypes of Botrytis einerea to benzimidazole，dicarboximide and N phenylearbamate fungicides in Korea J Journal of Pesticide Science， 2000， 25( 4) : 385 386 19 朱桂寧 ， 黃福新 ， 蔡健和 ， 等 廣西番茄灰霉病菌的多重抗藥性檢測 J 中國蔬菜 ， 2003( 4) : 14 16021 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2018 年第 46 卷第 20 期