<p>盈江縣高山大白菜根腫菌生理小種鑒定及 抗源篩選 尹俊龍 1錢(qián)正益 2鄭宇峰 3趙從新 3岳艷玲 1* （ 1 云南農(nóng)業(yè)大學(xué)園林園藝學(xué)院，云南昆明650201； 2 景東彝族自治縣農(nóng)業(yè)試驗(yàn)站，云南普洱 676299； 3 德 宏州農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心，云南芒市 679300） 摘 要：采用Williams鑒別系統(tǒng)對(duì)云南省盈江縣高山大白菜產(chǎn)區(qū)采集的根腫菌進(jìn)行鑒定，4個(gè)鑒別寄主均表現(xiàn)為感病，病情 指數(shù)分別為21、33、28、30，說(shuō)明該根腫菌為4號(hào)生理小種。采用菌土法接種盈江根腫菌，對(duì)18個(gè)抗根腫病大白菜品種進(jìn) 行抗性鑒定，其中6個(gè)品種發(fā)病率和病情指數(shù)均為0，對(duì)盈江根腫菌表現(xiàn)免疫；2個(gè)品種病情指數(shù)10，表現(xiàn)抗病，可以作 為該病區(qū)大白菜新品種選育的抗性遺傳資源。 關(guān)鍵詞：大白菜；盈江根腫菌；生理小種；抗源篩選 同地區(qū)栽培后所表現(xiàn)出的抗性也存在顯著差異（譚 翀和岳艷玲，2013） 。盈江是云南省德宏州高山大 白菜的重要產(chǎn)區(qū)，但土壤被根腫菌污染后生產(chǎn)受到 嚴(yán)重威脅，產(chǎn)量損失嚴(yán)重，幾近絕收，因此篩選適 宜盈江地區(qū)栽培的抗病品種尤為重要。為了保障該 地區(qū)大白菜生產(chǎn)的需求，對(duì)該地區(qū)根腫菌進(jìn)行生理 小種鑒定和抗源篩選，以期為盈江地區(qū)大白菜生產(chǎn) 和新品種選育提供理論參考。 1 材料與方法 1.1 試驗(yàn)材料 根腫菌采自云南省德宏州盈江縣油松嶺大白菜 產(chǎn)區(qū)。 Williams鑒別寄主4份，即2個(gè)結(jié)球甘藍(lán) Jersey Queen、Badger Shipper和2個(gè) 蕪 菁 甘 藍(lán) Laurentian、Wilhelmsburger，源自沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)。 從國(guó)內(nèi)外引進(jìn)抗根腫病大白菜品種18份，品 種名稱(chēng)及來(lái)源見(jiàn)表2；對(duì)照為感病品種魯春白1號(hào)。 1.2 試驗(yàn)方法 試驗(yàn)于2016年810月在云南農(nóng)業(yè)大學(xué)園林 園藝學(xué)院蔬菜基地進(jìn)行。利用Williams鑒別系統(tǒng)， 采用菌土法（司軍 等，2003）進(jìn)行根腫菌生理小 種鑒定和大白菜品種抗性鑒定。菌土的孢子濃度為 1×10 7 個(gè)·g -1 （周永紅 等，2007） ，每個(gè)品種接種 尹俊龍，男，碩士研究生，專(zhuān)業(yè)方向：蔬菜作物遺傳育種，E-mail： 974578034qq.com &nbsp; *通訊作者（Corresponding author）：岳艷玲，女，教授，碩士生導(dǎo)師， 專(zhuān)業(yè)方向：蔬菜作物遺傳育種，E-mail：yanling-yue126.com 收稿日期：2018-03-13；接受日期：2018-05-22 基金項(xiàng)目：公益性行業(yè)（農(nóng)業(yè)）科研專(zhuān)項(xiàng)（201003029） 大白菜根腫病是由蕓薹根腫菌 （Plasmodiophora brassicae Woron.）侵染所引起的 一種世界性土傳病害。該病菌最早發(fā)現(xiàn)于歐洲， 目前流行于主要十字花科作物產(chǎn)區(qū)（伍文憲 等， 2015） 。根腫菌的休眠孢子能夠在土壤中存活8 a 以上（譚翀和岳艷玲，2013） ，一旦被侵染將很難 再進(jìn)行十字花科作物的種植。根腫菌自20世紀(jì)末 傳入我國(guó)，不斷蔓延，目前已有多個(gè)省市土壤受 到污染，損失慘重（田雅琳，2015） 。近年來(lái)，隨 著對(duì)根腫病防控方法的深入研究，發(fā)現(xiàn)施用生石 灰調(diào)節(jié)土壤pH能夠在一定程度上減弱根腫病的為 害（班靜潔，2014） ，施用枯草芽孢桿菌（Bacillus &nbsp;subtilis）生物制劑能夠抑制土壤中90%的根腫菌孢 子萌發(fā)（彭麗莎，2015），施用化學(xué)農(nóng)藥氟啶胺（福 帥得）防治效果可以達(dá)到80%以上（王昌玉 等， 2004） 。但最為經(jīng)濟(jì)有效的綠色防控方法是使用抗 病品種。由于根腫菌在不同的地區(qū)以不同致病性和 不同類(lèi)型的生理小種形式存在，造成抗病品種在不 &nbsp;55 &nbsp; 新優(yōu)品種 栽培管理 本期視點(diǎn) 產(chǎn)業(yè)市場(chǎng) 病蟲(chóng)防控 &nbsp;55 &nbsp; 研究論文 中 國(guó) 蔬 菜 &nbsp; &nbsp; CHINA VEGETABLES 2018（8）：55 - 57 100株，40 d后調(diào)查發(fā)病情況，計(jì)算發(fā)病率和病情 指數(shù)。 根據(jù)十字花科作物根腫菌苗期病害分級(jí)標(biāo)準(zhǔn) （侯明生和蔡麗，2014）對(duì)不同品種大白菜植株發(fā) 病情況進(jìn)行鑒定和分級(jí)，分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)：0級(jí)，根部無(wú) 腫瘤；1級(jí)，側(cè)根有小腫瘤；3級(jí)，主根腫大，其 直徑小于2倍莖基部；5級(jí)，主根腫大，其直徑是 莖基部的23倍；7級(jí)，主根腫大，其直徑是莖 基部的34倍；9級(jí)，主根腫大，其直徑是莖基 部的4倍以上或腫大的根部變黑。計(jì)算病情指數(shù)， 病情指數(shù)=0記為免疫，病情指數(shù)10記為抗病， 病情指數(shù)10記為感病。 發(fā)病率=發(fā)病株數(shù)/調(diào)查株數(shù)×100% （各級(jí)病株數(shù)×相對(duì)級(jí)數(shù)值） 調(diào)查總株數(shù)×9 病情指數(shù)= &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp;×100 2 結(jié)果與分析 2.1 盈江根腫菌生理小種鑒定 Williams 鑒別系統(tǒng)的4個(gè)寄主接種盈江根腫菌 40 d后，病情指數(shù)分別為21、33、28、30，均大 于10，且各寄主的發(fā)病率均為100%（表1） 。根據(jù) Williams鑒別系統(tǒng)的分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)，盈江根腫菌為4號(hào) 生理小種。 表 1 盈江根腫菌生理小種鑒定結(jié)果 鑒別寄主 總株數(shù)/株 感病株 數(shù)/株 發(fā)病 率/% 病情 指數(shù) 抗感 反應(yīng) Jersey Queen 100 100 100 21 + Badger Shipper 100 100 100 33 + Laurentian 100 100 100 28 + Wilhelmsburger 100 100 100 30 + 注： “+”代表感病。 2.2 大白菜品種抗性鑒定 從國(guó)內(nèi)外引進(jìn)的18個(gè)抗根腫病大白菜品種接 種盈江根腫菌后，發(fā)病率和病情指數(shù)明顯不同（表 2） 。其中尚品、CR鐵甲1號(hào)、抗根911、泰能 CR119、倍盛CR12、新抗根等6個(gè)品種的發(fā)病率 和病情指數(shù)均為0，對(duì)盈江根腫菌表現(xiàn)免疫，占供 試品種的33.3%；德高CR117、中華白菜王的發(fā)病 率分別為17%和11%，病情指數(shù)分別為9.7和7.7， 對(duì)盈江根腫菌表現(xiàn)抗病，占供試品種的11.1%；其 他10個(gè)品種和感病對(duì)照魯春白1號(hào)的發(fā)病率均為 100%，病情指數(shù)在38.865.7之間，表現(xiàn)感病。 表 2 18個(gè)抗根腫病大白菜品種對(duì)盈江根腫菌抗性鑒定結(jié)果 品種名稱(chēng) 來(lái)源 總株數(shù)/株 感病株 數(shù)/株 發(fā)病 率/% 病情 指數(shù) 抗性 尚品 遼寧 100 0 0 0 免疫 韓國(guó)優(yōu)早四 山東 100 100 100 61.1 感病 CR鐵甲1號(hào) 山東 100 0 0 0 免疫 德高CR117 山東 100 17 17 9.7 抗病 德高CR63 山東 100 100 100 42.5 感病 抗根911 北京 100 0 0 0 免疫 泰能CR119 山東 100 0 0 0 免疫 靚根CR1 膠州 100 100 100 42.9 感病 倍盛CR12 山東 100 0 0 0 免疫 中華白菜王 山東 100 11 11 7.7 抗病 韓春 韓國(guó) 100 100 100 51.8 感病 開(kāi)拓16號(hào) 韓國(guó) 100 100 100 38.8 感病 榮耀 山東 100 100 100 50.4 感病 亞菲4號(hào) 韓國(guó) 100 100 100 45.2 感病 秋冠 韓國(guó) 100 100 100 53.7 感病 CR摩根 青島 100 100 100 57.4 感病 新抗根 山東 100 0 0 0 免疫 韓國(guó)春秋王 山東 100 100 100 56.2 感病 魯春白1號(hào)（CK） 青島 100 100 100 65.7 感病 注：病情指數(shù)=0，免疫；病情指數(shù)10，抗??；病情指數(shù) 10，感病。 3 結(jié)論與討論 3.1 盈江根腫菌是更復(fù)雜的根腫菌 本試驗(yàn)中，Willimas鑒別系統(tǒng)的4個(gè)寄主接種 盈江根腫菌后全部發(fā)病，發(fā)病率均為100%；病情 指數(shù)分別為21、33、28、30，均大于10，鑒定盈 江根腫菌為4號(hào)生理小種。但是，抗4號(hào)生理小種 的大白菜品種榮耀、亞菲4號(hào)和秋冠在接種湖北 枝江和山東青島2個(gè)地區(qū)的4號(hào)生理小種后均表 現(xiàn)抗?。ㄔ钜?等，2017） ，而在本試驗(yàn)中榮耀、 秋冠和亞菲4號(hào)接種盈江根腫菌后的發(fā)病率均為 100%，病情指數(shù)均大于10，表現(xiàn)為感病，說(shuō)明盈 江根腫菌4號(hào)生理小種與湖北枝江和山東青島根腫 菌4號(hào)生理小種不同，盈江根腫菌致病性更強(qiáng)，可 能是Willimas鑒別系統(tǒng)鑒別不到的生理小種，也可 能是含有多個(gè)生理小種的混合菌，具體小種組成還 需要進(jìn)一步進(jìn)行單孢分離侵染鑒定。 3.2 盈江根腫菌抗病種質(zhì)資源相對(duì)豐富 本試驗(yàn)引進(jìn)的18個(gè)抗根腫病大白菜品種接種 盈江根腫菌后，尚品、CR鐵甲1號(hào)、抗根911、 泰能CR119、倍盛CR12、新抗根等6個(gè)品種的發(fā) 病率和病情指數(shù)均為0，對(duì)盈江根腫菌表現(xiàn)免疫； &nbsp;56 &nbsp; 新優(yōu)品種 栽培管理 本期視點(diǎn) 產(chǎn)業(yè)市場(chǎng) 病蟲(chóng)防控 &nbsp;56 &nbsp; 研究論文 中 國(guó) 蔬 菜 &nbsp; &nbsp; CHINA VEGETABLES 德高CR117、中華白菜王的發(fā)病率分別為17%和 11%，病情指數(shù)分別為9.7和7.7，對(duì)盈江根腫菌表 現(xiàn)抗病。說(shuō)明這8個(gè)品種可能含有抗盈江根腫菌的 抗性基因，可利用這些遺傳資源，針對(duì)該地區(qū)特殊 的生理小種，將抗病基因轉(zhuǎn)育到適宜生態(tài)類(lèi)型品系 中，培育符合當(dāng)?shù)卦耘鄨@藝性狀需求的大白菜抗病 新品種。 3.3 篩選符合當(dāng)?shù)厣a(chǎn)需求的大白菜新品種 盈江縣是云南省德宏州高山大白菜重要產(chǎn)區(qū)， 已有20 a的栽培歷史，大白菜夏秋季生產(chǎn)是當(dāng)?shù)剞r(nóng) 民創(chuàng)收的重要項(xiàng)目。隨著土壤被根腫菌污染，根腫 病發(fā)生為害越來(lái)越嚴(yán)重，給當(dāng)?shù)卮蟀撞松a(chǎn)造成了 巨大的損失。近幾年來(lái)，德高CR117在該地區(qū)進(jìn) 行推廣應(yīng)用，初步取得了較好的防控效果。但是， 盈江地區(qū)主要是進(jìn)行夏秋季栽培，溫度高、雨水大， 德高CR117軟腐病的發(fā)生率為10%13%，而且 該品種球形偏大，不太符合當(dāng)?shù)厥袌?chǎng)需求。本試驗(yàn) 篩選出6個(gè)對(duì)盈江根腫菌表現(xiàn)免疫的大白菜品種， 可通過(guò)進(jìn)一步試種，對(duì)其在當(dāng)?shù)氐谋憩F(xiàn)進(jìn)行綜合評(píng) 價(jià)，以篩選出適宜當(dāng)?shù)貧夂驐l件和市場(chǎng)需求的抗病 品種，豐富盈江地區(qū)大白菜的品種類(lèi)型。 參考文獻(xiàn) 班靜潔2014 土壤含水量、pH、Ca 2+ 濃度對(duì)蕓薹屬根腫菌侵染 及發(fā)病影響研究碩士論文武漢：華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 侯明生，蔡麗2014十字花科蔬菜根腫病武漢：湖北科學(xué)技術(shù) 出版社：27-29 彭麗莎2015十字花科作物根腫病生防菌研究進(jìn)展植物保護(hù)， 41（4） ：16-22 司軍，李成瓊，肖崇剛，任雪松，王小佳2003甘藍(lán)根腫菌接種 方法西南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，25（3）：29-31 譚翀，岳艷玲2013不同大白菜品種對(duì)根腫病的抗性鑒定中國(guó) 蔬菜，（8）：91-94 田雅琳2015十字花科根腫病研究現(xiàn)狀及未來(lái)預(yù)測(cè)天津農(nóng)業(yè)科 學(xué)，21（4）：123-124 王昌玉，朱建良，保世森，陳露萍，阮石佑，周金玉2004百 菌清防治大白菜根腫病應(yīng)用技術(shù)研究農(nóng)藥科學(xué)與管理，26 &nbsp;（7）：16-18 伍文憲，劉勇，張蕾，黃小琴2015蕓薹屬根腫菌致病機(jī)理的研 究進(jìn)展中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)，31（18）：260-265 曾令益，任麗，劉凡，陳旺，陳坤榮，徐理，方小平201728 個(gè)大白菜品種對(duì)根腫菌不同菌株的抗性反應(yīng)及抗病基因位點(diǎn) 檢測(cè)中國(guó)油料作物學(xué)報(bào)，39（4）：532-639 周永紅，孫保亞，沈向群2007大白菜根腫病抗病接種濃度的研 究遼寧農(nóng)業(yè)科學(xué)，（3）：34-35 Physiological Race Identification of Plasmodiophora brassicae and Screening of &nbsp;Resistant Source in Chinese Cabbage at Yingjiang County YIN Jun-long 1 ，QIAN Zheng-yi 2 ，ZHENG Yu-feng 3 ，ZHAO Cong-xin 3 ，YUE Yan-ling 1* （ 1 College of Landscape and Horticulture，Yunnan Agricultural University，Kunming 650201，Yunnan，China； 2 Agricultural Experiment Station of Jingdong Yi Autonomous County，Puer 676299，Yunnan，China； 3 Dehong State &nbsp;Agricultural Technology Promotion Center，Mangshi 679300，Yunnan，China） Abstract：The Williams identification system was adopted to identify the Plasmodiophora brassicae &nbsp;collected from the Chinese cabbage producing area at the mountainous areas in Yingjiang County，Yunnan &nbsp;ProvinceThe 4 differential hosts all showed that they were susceptible，and the disease index was 21、 33、28、30，respectively，indicating that fungus was physiological race No.4The resistance of 18 Chinese &nbsp;cabbage cultivars from home and abroad was identified by planting on fungal soil methodThe results &nbsp;showed that the incidence and disease indexes of 6 varieties were 0，and they were immune to Yingjiang &nbsp;Plasmodiophora brassicaeThe disease index of 2 varieties were 10，indicating they were resistant to &nbsp;Yingjiang Plasmodiophora brassicaeThey could be used as resistant genetic resources for selecting new &nbsp;Chinese cabbage varieties for this disease Key words：Chinese cabbage；Yingjiang Plasmodiophora brassicae；Physiological race；Screening of &nbsp;resistant source &nbsp;57 &nbsp; 新優(yōu)品種 栽培管理 本期視點(diǎn) 產(chǎn)業(yè)市場(chǎng) 病蟲(chóng)防控 &nbsp;57 &nbsp; 研究論文 中 國(guó) 蔬 菜 &nbsp; &nbsp; CHINA VEGETABLES</p>