<p>2 017 ·22相較于我國南方，北方城市綠化景觀水平相對較低，草花品種單一，壽命短，園林負擔沉重 。針對此情況，可以借鑒俄羅斯等高緯度地區(qū)城市綠化的成功經(jīng)驗，在寒溫帶城市地區(qū)綠化中引入可連續(xù)開花耐寒月季作為多年生小灌木花卉，不但觀賞性高，并且抗低溫效果好，因此應用前景非常廣闊 。1 材料與方法1.1 外植體建立材料為馴化 2 年的紅色耐寒月季 “MoHa N a ”。選取帶芽莖段的最好時期是 5 月末 。材料選取當年生半木質(zhì)化枝條中飽滿而未萌發(fā)的側(cè)芽 。首先，將選好的枝條去葉，用牙刷蘸洗衣粉水輕輕刷洗后放入裝有多菌靈的三角瓶中震蕩清洗5 分鐘 。再用流水沖洗 12 小時，剪成 68 厘米左右?guī)б秆康那o段 。超凈臺上，將莖段先用 70 酒精溶液浸泡 1 分鐘，再置于 0.1 的升汞溶液中消毒 12 分鐘 , 然后用無菌水沖洗 4 次，濾紙吸干后接種 。1.2 離體芽誘導培養(yǎng)將無菌莖段分別接種于不同配方培養(yǎng)基上誘導萌芽 。誘導培養(yǎng)基以 MS 為基本培養(yǎng)基，加入不同濃度的細胞分裂素和生長素 。后用正交法添加不同劑量的 6- BA 與不同濃度的 NAA進行配比試驗 。組成 4 種培養(yǎng)基：第一種 MS+6- BA0.50mg/L+NAA0.10mg/L 、第二種 MS+6- BA0.50mg/L+NAA0.20mg/L 、第三種 MS+6- BA1. 00mg/L+NAA0.10mg/L 、 第 四 種 MS+6- BA1.00mg/L+NAA0.20mg/L 。每種培養(yǎng)基均接種 2 到 3 個無菌莖段，培養(yǎng) 2 周后統(tǒng)計離體芽誘導率 。1.3 叢生芽繼代增殖培養(yǎng)將誘導培養(yǎng)基上已萌發(fā)的 “MoHa N a ”嫩芽切下轉(zhuǎn)接到 4 種不同濃度的細胞分裂素和生長素的繼代培養(yǎng)基中進行繼 代 增 殖 培 養(yǎng) 。 繼 代 培 養(yǎng) 基 為 ： 第 五 種 MS+6- BA0.50mg/L+NAA0.10mg/L 、 第 六 種 MS+6- BA1.00mg/L+NAA0.10mg/L 、第 七 種 MS+6- BA0.50mg/L+NAA0.20mg/L 、第 七 種MS+6- BA1.00mg/L+NAA.20mg/L 。每種培養(yǎng)基接入 3 5 株嫩芽，接種時單芽莖段長 1 厘米至 2 厘米左右，培養(yǎng) 4 周后統(tǒng)計叢生芽的數(shù)量以及高于 1 厘米的芽數(shù) 。1.4 試管苗壯苗培養(yǎng)將生長旺盛的叢生苗切成單株接入到 2 種不同配方的壯苗培養(yǎng)基中培養(yǎng)，每瓶接 10 15 株 。4 周后統(tǒng)計試管苗的生長情況 。組成 2 種壯苗培養(yǎng)基為：第九種 MS+NAA0.10mg/L 、第十種 MS+NAA0.20mg/L 。1.5 試管苗生根培養(yǎng)將生長鍵壯，高度為 5 厘米左右的試管苗接入到生根培養(yǎng)基中 。每種培養(yǎng)基接入 510 個單株，接種 15 天后統(tǒng)計生根情況 。2 結(jié)果與分析2.1 離體牙的誘導結(jié)果離體芽的誘導很快，接種 7 天后離體芽開始萌動，芽萌動后培養(yǎng) 3 周后，結(jié)果顯示：第一種的培養(yǎng)基離體芽少，出芽率為75 ；第二種的出芽率為 100 ，離體芽生長細弱；第四種的離體芽萌動后產(chǎn)生愈傷組織；第三種出芽率為 100 ，且生長健壯 。反復試驗，結(jié)果表明：適合離體芽誘導的培養(yǎng)基為：第三種 。2.2 叢生芽繼代增殖結(jié)果耐寒月季 “MoHa N a ”在 4 種繼代增殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)4 周后，芽的增殖倍數(shù)和大于 2 厘米芽的比率存在著差異 。其中第六種和 第八種兩種培養(yǎng)基，增殖的叢生芽數(shù)量多，且生長健壯，芽的增殖倍數(shù)分別為 2.16 倍和 3.3 倍，高于 2 厘米的芽占 75. 和 71.7 ，明顯高于其他培養(yǎng)基 。第五種的培養(yǎng)基中，叢生芽生長細弱，高于 2 厘米的芽僅占 18.25 ；第 七 種的 培 養(yǎng) 基 中 ，繼 代 芽 產(chǎn) 生 愈 傷 組 織 。反復試驗，結(jié)果表明：適合 “MoHa N a ”繼代增殖的培養(yǎng)基為第六種 。2.3 試管苗壯苗培養(yǎng)將生長旺盛的叢生苗切單株接入 2 種培養(yǎng)基培養(yǎng) 4 周后統(tǒng)計試管苗的生長情況 。結(jié)果顯示：第九種培養(yǎng)基中試管苗有70 生長健壯， 30 有分化情況；第十種培養(yǎng)基中試管苗100 生長鍵壯 。反復試驗，結(jié)果表明：適合 “MoHa N a ”試管苗壯苗培養(yǎng)基為第十種 。2.4 試管苗的生根培養(yǎng)結(jié)果將生長粗壯的耐寒月季接入到生根培養(yǎng)基上培養(yǎng) 10 天后開始長出白色的根，根系發(fā)達，粗壯，葉片深綠，長勢良好，生根率達為 95 ，平均根長位 1.5 厘米和 2.5 厘米 。3 結(jié)論經(jīng)過兩年的試驗，建立了俄羅斯耐寒月季 “MoHa N a ”的組培快繁體系，組培苗能夠在長春地區(qū)露地安全越冬，其越冬成活率在 80 以上 。該研究的結(jié)果給規(guī)?；敝程峁┝丝尚行裕瑯O大地保存和豐富了東北地區(qū)耐寒花卉品種 。參考文獻1 王軍娥 . 牡丹組織培養(yǎng)技術(shù)的研究 D. 西北農(nóng)林科技大學 . 20082C. Leifert,Helen Camotta,W. M. Waites.Effect of combi-nations of antibiotics on micropropagated Clematis, Delphinium,Hosta, Iris and Photinia J 1992,Plant Cell, Tissue and OrganCulture(02):153- 160.作者簡介：李 河 蒙 ，碩士，助理研究員，研究方向：生物工程 。摘要：紅色耐寒月季 “MoHa N a ”，是吉林省生物研究所從俄羅斯引進的一個全新的耐寒月季品種 。本實驗以 “MoHa N a ”莖段為外植體，通過植物組織培養(yǎng)手段建立快速繁殖 。該試驗獲得成功，豐富了東北地區(qū)耐寒花卉品種 。關(guān)鍵詞：俄羅斯耐寒月季 “MoHa N a ”；組織培養(yǎng)；紅色耐寒月季；快速繁殖中圖分類號： S685.12 文獻標識碼： A DOI 編號： 10.14025/j.cnki.jlny.2017.22.023李 河 蒙 ，周紅昕，于新海（吉林省生物研究所，吉林 長春 130000 ）紅色耐寒月季 “MoHa N a ”的快繁技術(shù)shi yan yan jiu研驗究實058</p>