<p>2018 年 5 月第 31 卷第 3 期黑龍江生態(tài)工程職業(yè)學院學報Journal of Heilongjiang Vocational Institute of Ecological EngineeringMay 2018Vol31 No3doi: 103969/jissn1674-6341201803015花葉觀賞植物分子特征及葉斑形成機制研究進展關(guān)夏玉 陳清西 檀靈瑩( 福建農(nóng)林大學 園藝學院 ， 福建 福州 350002)摘 要 : 觀葉植物是廣泛應用于室內(nèi)裝飾和室外景觀的非常重要的非糧食作物之一 ， 是全世界觀賞產(chǎn)業(yè)的重要組成部分 。葉斑是觀葉植物整體品種價值的主要決定因素 ， 是園藝育種者 、園藝愛好者和消費者最熱衷的特征 。在過去的幾十年中 ， 為解開葉斑的分子機制 ， 已經(jīng)利用模式植物進行了大量的研究工作 。較常規(guī)育種而言 ， 這樣能更好地了解決定雜色形成的遺傳因素和分子因素 ， 為后基因組和組學中提供大量的有效方法和獨特工具 ， 同時通過生物技術(shù)為有效產(chǎn)生外來雜色表型提供了很好的機會和有吸引力的替代方法 ?；诖?， 綜述觀葉植物的主要特征及葉斑來源 ， 對利用模式植物揭開葉綠素生物合成和葉斑形成的分子機制進行探討 ， 并描述調(diào)查工作的現(xiàn)狀及關(guān)于觀葉植物葉斑的重要研究發(fā)現(xiàn)與進展 。關(guān)鍵詞 : 花葉觀賞植物 ; 分子特征 ; 葉斑 ; 觀葉植物中圖分類號 : Q37 文獻標識碼 : B 文章編號 : 1674-6341( 2018) 03-0043-04Molecular Characterization of Leaf Variegation and Implication for Foliage OrnamentalsGUAN Xiayu， CHEN Qingxi， TAN Lingying( Fujian Agriculture and Forestry University， Fuzhou 350002， China)Abstract: Foliage plants are one of the most important non grain crops widely used in interior decoration and outdoorlandscape They are important parts of the worlds ornamental industry Leaf variegation is a major determining factor for theoverall varietal value in foliage plants and remains the most sought trait by horticultural breeders， enthusiasts and consumersOver the past several decades there have been extensive research endeavors using model plant species to unravel the molecu-lar mechanisms underlying variegation In comparison with conventional breeding， this can better understand the genetic andmolecular factors that determine the formation of variegated colors， provide a large number of effective methods and uniquetools for the post genome and omics， and provide a good opportunity and an attractive alternative to the effective generationof exotic color phenotypes through biotechnology In accordance with such expectation， this review focuses on issues relatedto major features of foliage plants and sources of variegation， examines molecular mechanisms of chlorophyll biogenesis andvariegation formation uncovered using model species and provides the current status of investigative efforts and significantfindings related to variegation in ornamental foliage speciesKey words: Foliage ornamentals; Molecular characterization; Leaf variegation; Foliage plants收稿日期 : 2018-04-18基金項目 : 福建省科技重大專項 “福建特色園藝作物種質(zhì)優(yōu)異資源的挖掘與種質(zhì)創(chuàng)新 ”( 2015NZ0002) 。第一作者簡介 : 關(guān)夏玉 ( 1984) ， 女 ， 福建莆田人 ， 在讀博士研究生 ， 實驗師 。研究方向 : 花卉與景觀園藝 。人類通常對被歸為觀賞植物的奇異植物有無盡的需求和好奇 。這些植物一般具有郁郁蔥蔥 、迷人的葉子 ， 葉子往往具有奇特結(jié)構(gòu)和優(yōu)美的圖案或隨機葉斑 。這些植物的花朵鮮艷 ， 帶有奇異的香味并極具季節(jié)吸引力 ， 漿果光亮可愛 。我們對奇異植物的熱情恰如 HowardYana Shapiro(作者 /育種家 ) 所描述的那樣 : “看到我們花園中的變化 、成長 、演化和自然循環(huán) 這是真正的奇跡 ， 也是生活中最大的喜悅之一 ?！睂τ谑覂?nèi)裝飾和室外景觀中廣泛應用的裝飾性觀葉植物而言 ， 葉斑是其最重要的特征之一 。1 觀賞植物花葉的產(chǎn)生許多科研技術(shù)被應用于觀葉植物中新葉斑表型的產(chǎn)生 。這些技術(shù)包括交叉雜交 ( 或常規(guī)育種 ) 、體細胞誘變 ( 或體外誘變 ) 、化學誘變 ( 或體內(nèi)誘變 ) 、輻射誘變 、自然界中新物質(zhì)的開發(fā)和基因工程 。11 育種在眾多育種方法中 ， 常規(guī)育種是能創(chuàng)造更大的遺傳變異性的最古老的方法 ， 尤其對于觀賞植物 。這是因為許多葉雜色與穩(wěn)定的遺傳因子有關(guān) ， 這些遺傳因子可以通過交叉雜交傳遞給新的后代 。例如 ， Marcotrigiano 等人 1利用枝條培養(yǎng)技術(shù) ， 研究了 Coleus x hybridus Voss 品種后代中白化性狀和花青素葉斑性狀的遺傳穩(wěn)定性 。3412 突變自 20 世紀 60 年代以來 ， 許多育種公司和科學家開始就這一領域進行更有效的技術(shù)開發(fā) 。如植物材料的 X 射線處理已被人們廣泛研究 。私人公司通過化學或物理方法 ， 對許多觀賞作物進行了突變誘導 。13 組織培養(yǎng)在組織培養(yǎng)過程中 ， 體細胞無性系變異是觀葉植物新突變體的重要來源 。這些突變由多種機制引起 ， 包括培養(yǎng)外植體前已存在的遺傳異質(zhì)性 、培養(yǎng)過程中使用化學物質(zhì)引起的新基因組突變和表觀遺傳突變 。14 基因工程隨著現(xiàn)代分子生物學的進步 ， 人們已經(jīng)進行了大量的研究來分離和表征控制許多植物品種花葉的基因 。這些研究提供了一個最被需要的知識庫和進一步理解葉斑控制的機制 。然而 ， 與已經(jīng)廣泛探索的基因工程方法以創(chuàng)造新的花表型和栽培品種的花卉作物相比 ， 觀葉作物在該領域的進展落后 2。2 模式植物光合機制及葉斑分解機制的研究植物對光能的成功儲存和轉(zhuǎn)換取決于許多復雜的 、通常是多余的但有利于功能性光合機制發(fā)展的細胞過程 。簡而言之 ， 光能被光合反應中心的葉綠素捕獲 ， 隨后用于植物發(fā)育所必需的細胞組分的產(chǎn)生 。對這些細胞過程的分子研究 ，揭示了植物如何為自己的生存獲取能量以及如何改善植物自身生長 。多年來 ， 人們從擬南芥 、玉米 、水稻和番茄等眾多物種中 ， 鑒定出許多顯著的雜色突變體 ， 并且在分子水平上進行了詳細描述 3， 4。值得注意的是 ， 雖然葉斑可能由許多環(huán)境因素或病原體攻擊 ( 如病毒 ) 觸發(fā) ， 但穩(wěn)定和可遺傳的葉斑主要由基因突變 ( 即本文討論的主題 ) 引所起的 5。根據(jù)致病突變的位置 ， 可將這些突變體分為細胞器誘導組和核誘導組 。在細胞器或非核組中 ， 突變體表型是由質(zhì)體基因組或質(zhì)體中的基因突變引起的 ， 而核基因突變則決定了核組的發(fā)生 。由細胞器誘導的葉斑突變體有幾個獨特的特征 ， 分別是自然發(fā)生 、母系遺傳以及混合正常和異常質(zhì)體的異質(zhì)細胞器的存在 。此外 ， 不僅葉綠體基因組突變會導致葉斑 ， 線粒體基因組突變也會通過破壞葉綠體組成物質(zhì)的正常供應及與葉綠體的交流而引起葉斑 。Brner 和 Sear 6， 7綜述了許多在分子水平上具有雜色表型的葉綠體突變體 。迄今為止 ， 文獻所報道的大部分變異為核變異 。這表明核基因在質(zhì)體形成及葉綠素和類胡蘿卜素等關(guān)鍵色素的生物合成中起重要作用 ， 并負責維持質(zhì)體內(nèi)許多代謝通路的完整性 。不難想象 ， 這些基因的突變將不可避免地導致質(zhì)體發(fā)育異常以及光合功能的喪失 ， 最終影響葉斑形成 。與花葉相關(guān)的核基因的主要指標之一是孟德爾遺傳定律 。另外 ， 這些基因通常直接在質(zhì)體內(nèi)或與質(zhì)體發(fā)育相關(guān)聯(lián) ， 從而編碼結(jié)構(gòu)蛋白 、酶促蛋白和調(diào)節(jié)蛋白 。多年來 ， 許多這樣的突變基因已從不同的物種中鑒定出來并被很好地表征 。在擬南芥中 ， immutans( im) 、var1 和 var2 是被討論最多的與葉斑相關(guān)的核隱性基因 8。含有 im 等位基因的植物以斑點形式產(chǎn)生綠色和白色部分 9。其中綠色部分含有正常的質(zhì)體 ， 而白色部分則含有不正常的質(zhì)體 。早期的生理和生化調(diào)查表明 ， 突變體的白色區(qū)域組織是由類胡蘿卜素生物合成的關(guān)鍵步驟阻斷所導致的 ， 從而導致有色類胡蘿卜素的缺乏 ， 而有色類胡蘿卜素對于轉(zhuǎn)移過多的光能并防止由光氧化造成的質(zhì)體損害具有重要意義 。var1 和 var2 引起的葉斑 ( 黃色雜交 ) 存在一些表型相似性 ， 但是兩個等位基因位于不同的染色體上 10。之后 ， 基于圖譜的克隆研究表明 var1 和var2 基因編碼葉綠體 FtsH 蛋白酶 11， 12。ATP 依賴性金屬蛋白酶 FtsH 屬于 AAA 蛋白酶超家族 ， 它無處不在并在從原核生物到真核生物的生物體中執(zhí)行各種蛋白水解功能 13。轉(zhuǎn)座子誘變研究也被廣泛應用于金魚草中 ， 以誘發(fā)產(chǎn)生葉斑基因 。一個類似的實驗研究確定了編碼鎂原卟啉 螯合酶的核同系物 Oliver 14。該酶能催化四吡咯 金屬螯合 ，而這恰是葉綠素合成的關(guān)鍵步驟 。因此 ， 該基因的突變將導致葉綠素的喪失和葉綠體發(fā)育的異常 。此外 ， 還發(fā)現(xiàn)一個由核基因編碼的功能未知的 DAG 蛋白質(zhì)能夠影響葉綠體的發(fā)育 15。值得注意的是 ， 對于基因組信息無法獲得的物種而言 ， 轉(zhuǎn)座子誘變是產(chǎn)生突變體和鑒定檢測的有力工具 ， 因為轉(zhuǎn)座因子能夠破壞基因和 /或啟動子區(qū)域中的基因 ， 導致包括葉斑在內(nèi)的表型變異 。3 觀葉植物花葉研究的最新進展與上述非觀賞植物的研究工作相比 ， 歷史上對觀賞植物葉斑機制的分子調(diào)查研究相對較少 。在 20 世紀 60 年代早期 ， 一品紅中花葉馬賽克斑點型的突變體被廣泛研究 ， 并隨后分離出與質(zhì)體遺傳相關(guān)的塑性突變 16。直到 20 世紀 80年代 ， 類似的研究表明 ， 來源于體外繁殖葉片外植體的非洲紫羅蘭的不定芽嵌合體中的雜色嵌合體的發(fā)生 ， 是由基因異源細胞類型共存引起的 17， 但認為基因表達才是雜色真正來源的研究人員立即否定了這一結(jié)論 18。接下來的很長一段時間 ， 研究工作主要集中于葉斑細胞水平的觀察和表征 ，其中葉斑是由觀葉植物體外培養(yǎng)或環(huán)境因素誘導引發(fā)的 1924。其他研究則利用擴增片段長度多態(tài)性 ( AFLP) 研究了與觀賞物種遺傳環(huán)境有關(guān)的問題 ， 如染色體數(shù)目 、核型變異 25以及商業(yè)栽培品種的遺傳相關(guān)性 26。通過綠蘿 ( Epipremnum aureum) 中花葉的研究 ， 人們對非重復序列基因表達調(diào)控的分子機制進行了特別細致的闡述 2730。綠蘿作為一種重要的觀賞植物 ， 已經(jīng)在世界范圍內(nèi)廣泛種植 ， 并在觀葉作物產(chǎn)業(yè)中得到高度重視 。觀葉植物具有引人注目的花葉斑點 、常綠藤本植物的生長習性和廣泛用途 ( 如吊籃作物可廣泛應用于室外 /室內(nèi)裝飾工程中 ) ， 因而十分流行 。它仍然是集約化育種計劃 、組織培養(yǎng)和轉(zhuǎn)化體系發(fā)展的主要目標物種 ， 其最終目標是擴大生物技術(shù)應用以創(chuàng)造新品種 31， 32。近年來 ， 隨著更為先進的分子生物學技術(shù)的出現(xiàn) ， 差異表達譜被用于鑒定其轉(zhuǎn)錄調(diào)控和 /或基因產(chǎn)物能夠影響和產(chǎn)生花葉表型的基因 27。這些研究人員首次發(fā)現(xiàn)了大量的核非重復序列基因 ， 它們在綠色組織和淡黃色組織中共有高達150 次的差異性表達 。有趣的是 ， 這種高度調(diào)控的全局基因表達可導致異常葉綠體發(fā)生空泡化隔室 、類囊體膜消失和塑性球體積累 。在菊科菊屬植物中 ， 發(fā)現(xiàn)許多與光合作用有關(guān)的基因在黃色部分上調(diào) ， 其中包括 ChlH 和 FtsH 的直系同源物 ， 它們分別編碼鎂螯合酶的大亞基和 ATP 依賴性肽酶 /ATP 酶 /金屬肽酶 27。ChlH 和 FtsH 基因先前在其他物種中均有表達 ， 并在花葉發(fā)生中起重要作用 ， 同時還由于誘導型44補償基因上調(diào)而在褪綠組織中增強表達 14， 28。然而 ， 必須指出的是 ， 這些研究人員未能在基因水平上為花葉生長發(fā)育提供更明確的機制解釋 ， 并且不能鑒定與非綠色組織相關(guān)的任何下調(diào)基因 。最近對鎂原卟啉 一甲酯 ( MgProtoME) 環(huán)化酶同源物EaZIP 的研究為觀賞植物中核基因表達和雜色形成的相關(guān)性提供了強有力的證據(jù) 。人們已經(jīng)鑒定了 MgProtoME 環(huán)化酶基因 ， 并利用細菌和如擬南芥菜和煙草等模式植物 ， 充分闡明了它們在質(zhì)體發(fā)育中的功能作用 3336。植物中 ， 在底物MgProtoME 中形成二乙烯基原葉綠素環(huán)上的同素環(huán)時 ， 這種酶催化氧化環(huán)化反應 ， 促進了葉綠素的形成 。即使這種酶在類囊體膜中有反應位置 ， 它也是具有葉綠體轉(zhuǎn)運肽及成熟肽編碼區(qū)的核基因產(chǎn)物 37。序列分析顯示 ， EaZIP 蛋白與煙草( NTZIP) 和擬南芥 ( CHL27) 的同源物分別具有 86%和 84%的同一性 ， 表明不同物種之間具有高度保守的基因同源性 38。我們課題組在對綠蘿的研究中發(fā)現(xiàn)缺失轉(zhuǎn)運肽的EaZip 基因在煙草中的過表達會表達煙草的花葉 。這個研究結(jié)果表明 ， 這也可能是一種花葉植物品種改良的新方法和新途徑 39。4 結(jié)語花葉是一個自然的奇跡 ， 它提高了觀葉植物的觀賞價值 ， 并始終是觀葉植物產(chǎn)業(yè)中受高度重視的特征之一 。雖然常規(guī)育種仍然是品種多樣化發(fā)展及擴大品種范圍的主要方法 ， 但是對觀賞植物花葉分子機制的深入了解還有賴于生物技術(shù)在觀賞植物改良中更好的應用 。特別是在當前的后基因組和組學領域中 ， 基于對模式植物的大量實踐 ， 已創(chuàng)建了大量的葉色突變知識庫 ， 并揭示了大量基因?qū)夂仙厣锇l(fā)生 、質(zhì)體或葉綠體發(fā)育及雜色形成的重要作用 。這些信息將加快從觀賞植物中分離和鑒定類似基因的分子研究 ， 而這些基因可能與模式種具有顯著不同的遺傳背景 。有效的組織培養(yǎng)和轉(zhuǎn)化系統(tǒng)以及表征良好的基因和遺傳元件的可用性 ， 將明顯增強我們的研究能力 ， 并有利于高效地創(chuàng)造出受市場和消費者喜愛的理想雜色表型 。參考文獻 : 1 Marcotrigiano M， Boyle TH， Morgan PA， Ambach KL LeafColor Variants from Coleus Shoot Cultures J J AMESOC HOT SCI， 1990， 115( 4) : 681686 2 Shibata M Importance of genetic transformation in ornamen-tal plant breeding J Plant Biotechnology， 2008( 25) : 38 3 odermel S Arabidopsis variegation mutants J The Arabi-dopsis Book2002 dol: 101199/tab0079 4 Sakamoto W Leafvariegated mutations and their responsi-ble genes in Arabidopsis thaliana J Genes Genet Syst，2003( 78) : 19 5 Yu F， Fu A， Aluru M， Oark S， Xu Y， Liu H， Liu X，F(xiàn)oudree A， Nambogga M， odermel S Variegation mutantsand mechanisms of chloroplast biogenesis J Plant Cell En-virn， 2007( 30) : 350365 6 Brner T， Sears BB Plastome mutants J Plant Mol Biolep， 1986( 4) : 6992 7 aghavendra AS， Padmasree K， Saradadevi K Interdepend-ence of photosynthesis and respiration in plant cells: interac-tions between chloroplasts and mitochondria J Plant Sci，1994( 97) : 114 8 Sakamoto， W， Zaltsman， A， Adam， Z， Takahashi， YCoordinated regulation and complex formation of yellow var-iegated1 and yellow variegated2， chloroplastic FtsH metallo-proteases involved in the repair cycle of photosystem II inArabidopsis thylakoid membranes J Plant Cell， 2003( 15) : 2 8432 855 9 Wetzel CM， Jiang C， Meehan LJ， Voytas DF， odermelS Nuclearorganelle interactions: theimmutans variegationmutant of Arabidopsis is plastid autonomous and impaired incarotenoid biosynthesis J The Plant Journal， 1994( 6) :161175 10 Chen M， Jensen M， oderrmel S The yellow variegatedmutant ofArabidopsis is plastid autonomous and delayed inchloroplast biogenesis J J Hered， 1999( 90) : 207214 11 Chen M， Choi YD， Voytas D， odermel S Mutations inthe ArabidopsisVA2 locus cause leaf variegation due tothe loss of a chloroplastic FtsH protease J Plant J， 2000( 22) : 303313 12 Sakamoto W， Tamura T， HanbaTomita Y， Sodmergen，Murata M TheVA1 locus of Arabidopsis encodes a chlo-roplsatic FtsH and is responsible for leaf variegation in themutant alleles J Genes To Cells， 2002( 7) : 769780 13 Patel S， Latterich M The AAA team: related ATPases withdiverse functions J Trends Cell Biol， 1998( 8) : 6571 14 Hudson A， Carpenter ， Doyle S， Coen ESOliver: a keygene required for chlorophyll biogenesis in Antirrhinum ma-jus J EMBO J， 1993( 12) : 3 7113 719 15 Chatterjee M， Sparvoli S， Edmunds C， Garosi P， FindlayK， Martin C DAG， a gene required for chloroplast differ-entiation and palisade development in Antirrhinum majus J The EMBO Journal， 1996， 15( 16) 4 1944 207 16 Stewart N The origin and transmission of a series of plas-togene mutants in dianthus and euphorbia J Genetics，1965( 52) : 925947 17 Norris ， Smith H， Vaughn KC Plant chimeras used toestablish de novo origin of shoots J Science， 1983， 220( 4592) : 7576 18 Marcotrigiano M， Stewart N All variegated plants are notChimeras J Science， 1984， 223( 4635) : 505 19 Broertjes C， Van Harten AM Single cell origin of adventur-ous buds J Euphytica， 1985( 34) : 9395 20 Vladimirova SV， McConnell DB， Kane ME， Heley WMorphological plasticity of Dracaena sanderanaibbonin response to four light intensities J Hort Science，1997， 32( 6) : 1 0491 052 21 Zaffari G， Peres LEP， Kerbauy GB Endogenous Levelsof Cytokinins， Indoleacetic Acid， Abscisic Acid， and Pig-ments in Variegated Somaclones of Micropropagated BananaLeaves J J Plant Growth egul， 1998( 17) : 596154 22 Tsukaya H， Okada H， Mohamed M A novel feature ofstructural variegation in leaves of the tropical plantSchismatoglottis calyptrata J J Plant es， 2004( 117) :477480 23 occa N， ascio N， Pupillo P Variegation in Arum itali-cum leaves A structuralfunctional study J Plant Physi-ology and Biochemistry， 2011， 49( 12) : 1 3921 398 24 Kim J， Kang SW， Pak CH， Kim MS Changes in Leaf Var-iegation and Coloration of English Ivy and Polka Dot Plantunder Various Indoor Light Intensities J HortTechnolo-gy， 2012， 22( 1) : 4955 25 Deng M， Chen J， Henny J， Li Q Chromosome Numberand Karyotype Variation in Codiaeum variegatum Cultivars J Hortscience， 2010， 45( 4) : 538540 26 Fang J， Chen J， Henny J， Chao CT Genetic elatednessof Ornamental Ficus Species and Cultivars Analyzed byAmplified Fragment Length Polymorphism Markers J JAME SOC HOT SCI， 2007， 132( 6) : 807815 27 Chang Q， Chen S， Chen Y， Deng Y， Chen F， Zhang F，Wang S Anatomical and Physiological Differences and Dif-ferentially Expressed Genes Between the Green and YellowLeaf Tissue in a Variegated Chrysanthemum Variety J Mol Biotechnol， 2013( 54) : 393411 28 Kakizaki， T， Matsumura， H， Nakayama， K， Che， FS， Terauchi， ， Inaba， T Coordination of plastid pro-tein import and nuclear gene expression by plastidtonu-cleus retrograde signaling J Plant Physiology， 2009( 151) : 1 3391 353 29 Hung CY， Sun YH， Chen J， Darlington DE， WilliamsAL， Burkey KO， Xie J Identification of a Mgprotopor-phyrin IX monomethyl ester cyclase homologue， EaZIP，differentially expressed in variegated Epipremnum aureumGolden Pothosis achieved through a unique method ofcomparative study using tissue regenerated plants J Jour-nal of Experimental Botany， 2010， 61( 5) : 1 4831 493 30 Meshram A， Srivstava N Molecular and physiological roleof Epipremnum aureum J Internat J Green Pharm， 2014( 8) : 7376 31 Qu L， Chen J， Henny J， Huang Y， Caldwell D， ob-inson CA Thidazuron promotes adventitious shoot regerner-ation from Pothos ( epipremnum aureum) leaf and petioleexplants J In Vitro Cell Dev BiolPlant， 2002( 38) :268271 32 Kotsuka K， Tada Y Genetic transformation of golden pot-hos ( Epipremnum aureum) mediated by Agrobacterium tu-mefaciens J Plant Cell Tiss Organ Cult， 2008( 95) : 305311 33 Pinta V， Picaud M， eissHusson F， Astier C ubrivivaxgelatinosus acsF ( previously orf 358) codes for a con-served， putative binuclearironclustercontaining proteininvolved in aerobic oxidative cyclization of Mgprotopor-phyrin IX monomethylester J J Bacteriol， 2002( 184) :746753 34 Tottey S， Block MA， Allen M， Westergren T， Albrieux C，Scheller HV， Merchant S， Jensen PE ArabidopsisCHL27， located in both envelope and thylakoid mem-branes， is required for the synthesis of protochlorophyllide J Proceedings of the National Academy of Sciences，2003( 100) : 16 11916 124 35 Peter E， othbart M， Oelze ML， Shalygo N， Dietz KJ，Grimm B Mg protoporphyrin monomethylester cyclase defi-ciency and effects on tetrapyrrole metabolism in differentlight conditions J Plant Cell Physiol， 2010， 51( 7) : 1 2291 241 36 Liu N， Yang YT， Liu HH， Yang GD， Zhang NH， ZhengCC NTZIP antisense plants show reduced chlorophyll lev-els J Plant Physiology and Biochemistry， 2001( 42) : 321327 37 Bruce BD Chloroplast transit peptides: structure， functionand evolution J TENDS in Cell Biology， 2000( 10) :440447 38 Hung CY， Sun YH， Chen J， Darlington DE， WilliamsAL， Burkey KO， Xie J Identification of a Mgprotopor-phyrin IX monomethyl ester cyclase homologue， EaZIP，differentially expressed in variegated Epipremnum aureumGolden Pothosis achieved through a unique method ofcomparative study using tissue regenerated plants J Jour-nal of Experimental Botany， 2010， 61( 5) : 1 4831 493 39 Guan X， Li Z， Zhang Z， Wei X， Xie J， Chen J， et al2017 Overexpression of an EaZIP gene devoid of transitpeptide sequence induced leaf variegation in tobacco EB/OL PLoS ONE， 2017， 12( 4) : e0175995 https: / /doiorg/101371/journalpone0175995責任編輯 : 富春凱64</p>