園林園藝 農(nóng)業(yè)與技術(shù) 枸杞屬植物組織培養(yǎng)研究進(jìn)展 馬慧君 姚洪軍 趙惠恩 北京林業(yè)大學(xué)園林學(xué)院 花卉種質(zhì)創(chuàng)新與分子育種北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 國家花卉工程技術(shù)研究中心 城鄉(xiāng)生態(tài)環(huán)境北京實(shí)驗(yàn)室 北京 北京林業(yè)大學(xué)生物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院 北京 摘 要 枸杞屬是近年來備受關(guān)注的食藥兼用型植物 發(fā)展前景廣闊 然而枸杞屬栽培過程中仍存在部分品種生 長時(shí)間長 移栽成活困難等問題 組織培養(yǎng)技術(shù)對解決這些問題提供了有效途徑 本文闡述了外植體選擇及預(yù)處 理方法 從直接生芽途徑和間接誘導(dǎo)途徑闡述了芽的培養(yǎng) 從取材部位和生長調(diào)節(jié)劑兩方面闡述了愈傷組織的培 養(yǎng) 從材料 培養(yǎng)基類型 生長調(diào)節(jié)劑 繼代培養(yǎng)及環(huán)境影響 方面分析了不定芽的誘導(dǎo) 闡述了生根培養(yǎng)的方 法 從品種研究 基質(zhì)組合 培養(yǎng)環(huán)境 個(gè)角度梳理現(xiàn)存問題并提出解決建議及展望 以期為建立系統(tǒng)的枸杞屬 植物再生體系與新品種應(yīng)用 產(chǎn)業(yè)發(fā)展提供參考 關(guān)鍵詞 枸杞屬 組織培養(yǎng) 研究進(jìn)展 中圖分類號 文獻(xiàn)標(biāo)志碼 收稿日期 基金項(xiàng)目 寧夏回族自治區(qū)重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃 揭榜掛帥 課題基金 項(xiàng)目編號 作者簡介 馬慧君 女 碩士在讀 研究方向 植物育種 姚洪軍 男 博士 正高級實(shí)驗(yàn)師 研究方向 生物技術(shù) 通信作者趙惠恩 博士 教授 研究方向 種質(zhì)資源創(chuàng)新 枸杞屬 屬于茄科 其中 紅果枸杞 黑果枸杞是我國重要的藥用觀賞植物 在 鹽堿 干旱地區(qū)造林中起重要作用 枸杞是世界性分 布植物 但僅在我國得到馴化 栽培和開發(fā)利用 在 我國 隨著栽培面積和種植面積的擴(kuò)大 枸杞已成為 寧夏 甘肅 新疆 內(nèi)蒙古 青海 河北等地的重要 樹種 枸杞種質(zhì)資源的收集與保存是枸杞新品種培育的 基礎(chǔ)性工程 常見的播種 扦插等方法繁殖效率不 高 時(shí)間久 無法滿足現(xiàn)有繁殖需求 然而 組織培 養(yǎng)技術(shù)的運(yùn)用與推廣 可控性高 可高效完成整個(gè)繁 殖過程 極大縮短培育時(shí)間 加快枸杞屬植物的規(guī)模 化 市場化發(fā)展進(jìn)程 年 枸杞葉誘導(dǎo)出原生質(zhì)體 進(jìn)而產(chǎn)生了愈 傷組織 此后 關(guān)于枸杞屬植物組織培養(yǎng)的研究逐 漸增多 浩仁塔本等 采用黑果枸杞的去葉嫩枝為外 植體 系統(tǒng)構(gòu)建了枸杞組織培養(yǎng)的再生體系 移栽成 活率達(dá) 近年來 已建立黃果枸杞 寧夏枸 杞 黑果枸杞 等多個(gè)品種的組織培養(yǎng)體系 通過對枸杞屬植物組織培養(yǎng)文獻(xiàn)進(jìn)行歸納總結(jié) 概括了外植體選擇及預(yù)處理 直接生芽 間接誘導(dǎo)及 生根等方面的研究現(xiàn)狀 利用組織培養(yǎng)技術(shù) 枸杞屬 植物的繁育時(shí)間縮短 品種穩(wěn)定性提高 有利于開展 枸杞屬植物育種工作尤其是優(yōu)良種質(zhì)的選育 推動枸 杞產(chǎn)業(yè)高質(zhì)量發(fā)展 外植體選擇及預(yù)處理 外植體選擇 黑果枸杞離體培養(yǎng)常選擇種子作為外植體 戴 逢斌等 以枸杞種子為外植體開展研究 建立了枸杞 的組織培養(yǎng)和再生系統(tǒng) 于立霞等 選擇野生黑果 枸杞種子為外植體 其胚處于萌動階段 采用秋水仙 素浸種法進(jìn)行染色體加倍 效果明顯 效率高 見效 快 帶芽莖段 葉片 莖節(jié)也是較為常見初代培養(yǎng)的 初始材料 莖段的出愈率最高 葉片的出愈時(shí)間最 短 王聰慧等 以帶 個(gè)腋芽的黑果枸杞莖段為 外植體 以基礎(chǔ) 培養(yǎng)基為依托 搭配不同生長調(diào) 節(jié)劑進(jìn)行試驗(yàn) 探究不定芽誘導(dǎo)和生根培養(yǎng)條件 實(shí) 現(xiàn)了離體快繁 進(jìn)行不同外植體的對比試驗(yàn)發(fā)現(xiàn) 相 比葉片 莖節(jié)分化的愈傷組織 以莖段為外植體分化 的愈傷組織較疏松 但出愈率最高 莖節(jié)的出愈率最 低 葉片形成愈傷組織的時(shí)間短 為 左右時(shí)愈傷組織增長速度最高 而此時(shí)葉柄 莖段剛 農(nóng)業(yè)與技術(shù) 園林園藝 產(chǎn)生愈傷組織 格爾木 組織培養(yǎng)選取葉片 莖段兩種外植體 此外 有學(xué)者認(rèn)為 葉片和莖 段均適合黃果枸杞愈傷組織的誘導(dǎo) 因此 莖段和 葉片較適合作外植體 莖節(jié)較不適合 其他植物組織較少用來作外植體 張波等 選 用的外植體為 種枸杞新優(yōu)品系的花藥 段麗君等 選擇的外植體為 寧杞 號 的花藥 米佳麗等 利用胚乳為外植體建立了枸杞的再生體系 使不定芽 誘導(dǎo)率提高 馬彥軍等 以黃果枸杞水培的嫩枝為外 植體 而王方琳等 認(rèn)為 子葉比莖段 胚軸更適 合作誘導(dǎo)愈傷組織的外植體 由此可見 大多數(shù)研究以種子 莖段 葉 莖節(jié) 等為枸杞組織培養(yǎng)的外植體 預(yù)處理方法 組織培養(yǎng)成功的關(guān)鍵是獲得無菌外植體 外植體 不同 選用消毒劑也不同 常用的消毒劑之一是氯化汞溶液 也可用酒精進(jìn) 行輔助消毒 的氯化汞溶液是枸杞的枝條 尤 其是嫩枝的常用消毒劑 同樣適用于花藥 胚 乳 的消毒 消毒時(shí)間對外植體的消毒效果有很大 影響 為了達(dá)到理想的效果 夏秋兩季最長的消毒時(shí) 間可達(dá) 黑果枸杞的最佳莖段取樣位置是枝 條頂端 最佳消毒試劑時(shí)間是酒精 和氯化汞溶液 也可以在稀釋的 乙醇中浸泡 用 無菌水沖洗 次 繼而在 氯化汞溶液中浸泡 用無菌水沖洗 次 張欣等 將寧夏枸 杞種子在 的酒精溶液中浸種 再用 氯化 汞溶液浸種 經(jīng)無菌水沖洗 次后完成消 毒 次氯酸鈉溶液也是一種常見的消毒劑 用 的次氯酸鈉溶液將種子處理 消毒效果 較好 將野生黑果枸杞種子在 的酒精溶液中 浸種 再用無菌水泡洗沖洗 次 后用 的 次氯酸鈉浸種 經(jīng)無菌水沖洗 次后完成消 毒 也有學(xué)者采用次氯酸鈣溶液和硫酸溶液進(jìn)行消 毒 王聰慧等 建立了枸杞組織培養(yǎng)和再生系統(tǒng) 用 的乙醇對當(dāng)年生嫩莖消毒 再用無菌 水清洗 次 用 次氯酸鈣溶液消毒 王 靜等 用 的氯化汞溶液消毒 無菌水沖洗 次后 加入 的硫酸溶液浸泡種子 直接生芽途徑 直接出芽培養(yǎng) 樊映漢等 用 種誘導(dǎo)配方對含單核晚期花粉的 花藥進(jìn)行誘導(dǎo) 加 加 加 加 加 種配方均可 直接發(fā)育成幼苗 高思丹等 研究表明 加 是直接誘導(dǎo)黑果枸杞葉片產(chǎn) 生幼芽的最佳激素組合 誘導(dǎo)率為 直接出芽 途徑的植株生根情況與愈傷組織誘導(dǎo)途徑無顯著差 異 遺傳穩(wěn)定性分析 再生植物的遺傳穩(wěn)定性是植物繁育成敗的關(guān)鍵 組織培養(yǎng)的枸杞屬植物穩(wěn)定性高 移栽后更易獲得性 狀穩(wěn)定的植株 擴(kuò)增條帶的 分子標(biāo)記技術(shù)和檢 測植物倍性的流式細(xì)胞儀是檢測遺傳穩(wěn)定性的常用方 法 研究發(fā)現(xiàn) 直接再生植株與對照植株的遺傳相似 系數(shù)在 平均遺傳相似系數(shù)為 且獲 得的植株均為二倍體 這表明直接誘導(dǎo)不定芽途徑獲 得的幼苗能較好地保持親本的遺傳性狀 對組培 再生植株和親本植株的 分子檢測表明 遺傳相 似系數(shù)在 平均遺傳相似系數(shù)為 流式細(xì)胞儀檢測證明再生植株沒有發(fā)生倍性變化 說 明原生質(zhì)體產(chǎn)生的幼苗具有較高的遺傳穩(wěn)定性 間接誘導(dǎo)途徑 愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng) 愈傷組織的誘導(dǎo) 增殖與取材部位 生長調(diào)節(jié)劑 種類和濃度等有關(guān)系 取材部位對愈傷組織誘導(dǎo)的影響 愈傷組織的誘導(dǎo)與外植體具有直接關(guān)系 誘導(dǎo)愈 傷組織多以葉片 莖段等幼嫩部位為材料 因衰老植株很難進(jìn)行脫分化 通常采用枸杞幼嫩 組織誘導(dǎo)愈傷組織 裴小鵬等 用添加了 芐氨基腺嘌呤 和 萘乙酸 的培養(yǎng)基 誘導(dǎo)出西藏 青海 甘肅的黑 果枸杞愈傷組織 喬永旭 以枸杞的子葉 下胚軸 和胚根為外植體 在激素濃度 的 情況下 誘導(dǎo)率高達(dá) 孫曉紅等 發(fā)現(xiàn) 當(dāng)在 培養(yǎng)基中添加 和 時(shí) 誘導(dǎo)率達(dá)到 相同材料不同部位的培養(yǎng)基 配方不同 不同基因型枸杞莖段分化的最佳培養(yǎng)基 加 加 蔗糖加 瓊 脂 適合于不同基因型的黑果枸杞葉片分化的培養(yǎng)基 加 加 加 蔗糖加 瓊脂 生長調(diào)節(jié)劑對愈傷組織誘導(dǎo)的影響 孫曉紅等與大多數(shù)學(xué)者所使用的 不 同 其采用 玉米素 成功誘導(dǎo)愈傷 園林園藝 農(nóng)業(yè)與技術(shù) 組織 對于生長調(diào)節(jié)劑種類的探究是一個(gè)很好的開端 植物生長調(diào)節(jié)劑的濃度在誘導(dǎo)愈傷組織方面也起 著重要作用 許多研究表明 適合枸杞愈傷組織誘導(dǎo) 的 濃度為 枸杞愈傷組織 的生長狀況隨著 濃度的增加而逐漸向好 但在 濃度為 時(shí) 出現(xiàn)玻璃化現(xiàn)象 表 部分枸杞屬植物愈傷組織誘導(dǎo) 植物材料外植體培養(yǎng)基配方 紅果枸杞 葉片 葉柄 毒莠定 扁果枸杞 葉組織塊 黑果枸杞 葉片 莖節(jié) 莖段 黑果枸杞 種子 黑果枸杞 葉片 格爾木 葉片 莖段 寧杞 號 花藥 黑果枸杞 葉片 黃果枸杞 葉片 莖段 寧杞 號 葉片 莖段 黑果枸杞 子葉 莖段 胚軸 黑果枸杞 葉片 青杞 號 葉片 紅果枸杞 枝條 不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng) 材料對不定芽誘導(dǎo)的影響 不同品種的枸杞基因型不同 因此誘導(dǎo)出芽培養(yǎng)基 也不同 寧杞 號 培養(yǎng)基配方為 加 加 寧杞 號 培養(yǎng)基配方 為 加 加 在誘導(dǎo)再生芽形成方面 青海和西藏黑果枸杞的適宜 培養(yǎng)基為添加 加 的 培養(yǎng)基 甘肅黑果枸杞的適宜培養(yǎng)基為添加 加 的 培養(yǎng)基 再生芽率為 培養(yǎng)基類型對不定芽誘導(dǎo)的影響 基本培養(yǎng)基在不定芽培養(yǎng)中應(yīng)用較廣泛 但 也有研究表明 培養(yǎng)基具有同樣的效果 此 種培養(yǎng)基適用于木本植物的組織培養(yǎng) 特別是在初代 培養(yǎng)過程中效果較好 對部分枸杞品種適用 在含有 的 培養(yǎng)基和不含生長調(diào)節(jié) 劑的 培養(yǎng)基上生長的枸杞 顯示出良好的效果 最大再生率為 平 均芽長為 表 部分枸杞屬植物不定芽誘導(dǎo) 植物材料外植體培養(yǎng)基配方 扁果枸杞 葉片愈傷 黑果枸杞 葉片愈傷 紅果枸杞 葉片愈傷 黑果枸杞 莖段愈傷 黑果枸杞 葉片愈傷 格爾木 葉片愈傷 莖段愈傷 寧杞 號 花藥愈傷 黑果枸杞 子葉 黑果枸杞 葉片愈傷 黑果枸杞 莖段 青杞 號 葉片愈傷 寧杞 號 莖段愈傷 農(nóng)業(yè)與技術(shù) 園林園藝 生長調(diào)節(jié)劑對不定芽誘導(dǎo)的影響 通常情況 生長調(diào)節(jié)劑的種類及濃度對枸杞的出 芽有很大影響 王靜等 研究發(fā)現(xiàn) 激素濃度過低 或過高都會抑制分化 即隨著 濃度的增加 下 胚軸誘導(dǎo)的不定芽數(shù)量呈減少的趨勢 最佳 濃度 為 而莖段 最佳濃度為 和葉片 最佳濃度為 誘導(dǎo)的不定芽數(shù) 量呈先增加后減少的趨勢 喬永旭 以不同濃度的 和 組合為實(shí)驗(yàn)組 探究枸杞愈傷組織分化 情況 枸杞在培養(yǎng) 后開始形成芽 對比發(fā)現(xiàn) 和 組合時(shí) 芽形成的時(shí)間最早 且繁殖系數(shù)最高 是出芽的最佳組合 這與李媛媛 等 楊寧等 研究不定芽結(jié)果不一致 繼代培養(yǎng) 在枸杞屬植物的繼代培養(yǎng)中 以 基礎(chǔ)培養(yǎng)基 為基礎(chǔ) 添加不同濃度的 和 居多 大多無 獨(dú)立的繼代培養(yǎng)基 與誘導(dǎo)培養(yǎng)基配方保持一致開展 繼代 僅針對黑果枸杞有獨(dú)立的繼代培養(yǎng)基研 究 結(jié)果顯示 生長調(diào)節(jié)劑的濃度與取材部位關(guān)系密 切 以幼嫩莖段為外植體 適宜黑果枸杞增殖培養(yǎng)基 為 加 加 適 合微枝增殖培養(yǎng)的培養(yǎng)基為 加 加 裴小鵬等 的研究表明 在 不含任何植物生長調(diào)節(jié)劑的 培養(yǎng)基上繼代枸杞有 很好的效果 青海 甘肅 西藏 種黑果枸杞再生芽 的繼代培養(yǎng)基均為 培養(yǎng)基 綜上 考慮操作便捷 性 可優(yōu)先選用不含抗生素的 培養(yǎng)基和直接采用 誘導(dǎo)培養(yǎng)基 若某些品種的繼代效果不佳 再進(jìn)行繼 代培養(yǎng)基的配方試驗(yàn) 生根培養(yǎng)及移栽 生根培養(yǎng) 通常采用浸根或基質(zhì)與抗生素結(jié)合的方法促進(jìn)生 根 結(jié)果表明 不含抗生素的 培養(yǎng)基可用作生 根培養(yǎng)基 如 張虹等 在 培養(yǎng)基中誘導(dǎo)不 定芽生根 生根率為 添加了 蔗糖的 培養(yǎng)基觀察到更高數(shù)量的根形成 也有研究者將 小芽接種于不添加抗生素的 培養(yǎng)基中生根 有研究表明 黑果枸杞組培苗生根常用的生長素 為吲哚丁酸 但也有少數(shù)研究通過加 和 的組合或只添加 來誘導(dǎo)不定根 多數(shù)研 究人員認(rèn)為 添加 的 培 養(yǎng)基生根效果較好 楊寧等 研究了較低濃度生長素 對生根的影響 結(jié)果表明 生根率極 高 可達(dá)到 裴小鵬等 研究發(fā)現(xiàn) 適合生根 的培養(yǎng)基為 加 王方琳 等 向培養(yǎng)基中加入生根粉溶液 將 浸泡過的 不定芽轉(zhuǎn)入進(jìn)行培養(yǎng) 添加 殼聚糖的培養(yǎng) 基也被證明是非常有效的 獲得了高生根率 和發(fā)育良好的植株 表 部分枸杞屬植物根誘導(dǎo) 植物材料外植體培養(yǎng)基配方 扁果枸杞 不定芽 寧杞 號 試管苗 寧杞 號 試管苗 黑果枸杞 試管苗 格爾木 試管苗 黑果枸杞 試管苗 黑果枸杞 莖段 寧杞 號 不定芽 黑果枸杞 不定芽 黃果枸杞 不定芽 黑果枸杞 不定芽 黑果枸杞 葉片 黃果枸杞 莖段 黑果枸杞 不定芽 黑果枸杞 試管苗 黑果枸杞 不定芽 寧夏枸杞 不定芽 園林園藝 農(nóng)業(yè)與技術(shù) 移栽處理 常溫常光煉苗后的枸杞屬植物移栽 除了常規(guī)水 肥管理外 需特別注意保濕 用保鮮膜覆蓋 打開 一角 后再打開 繼續(xù)等待 后揭開保鮮膜 運(yùn)用此方法幼苗成活率超過 煉苗和覆膜保濕 均可明顯提高組培苗成活率 最高可達(dá) 在 移栽過程中 當(dāng)營養(yǎng)土 河沙 蛭石 時(shí) 移栽成活率達(dá) 先栽入腐殖土 沙土 的基質(zhì)中 后移入田間 試管苗成活率達(dá) 結(jié)論與展望 結(jié)論 枸杞屬作為常見的食用和藥用植物 栽培歷史悠 久 關(guān)于組織培養(yǎng)的研究集中于外植體選擇及預(yù)處 理 不定芽培養(yǎng) 生根培養(yǎng)等方面 常用外植體為葉 片和種子 預(yù)處理試劑以氯化汞溶液和次氯酸鈉消毒 及無菌水沖洗為主 不同生長過程的培養(yǎng)基配方有一 定的相似性 大多為基礎(chǔ)培養(yǎng)基添加不同濃度的 一般采用幼嫩組織誘導(dǎo)愈傷組織成 功率可高達(dá) 配方多為 加 加 生芽配方多為 加 加 繼代培 養(yǎng)基可選不加抗生素的 培養(yǎng)基或 加 生根培養(yǎng)基則以 培 養(yǎng)基為基礎(chǔ) 常用的生長素為 或增加 添加 效果較好 問題及展望 雖然枸杞屬組織培養(yǎng)研究取得了一定進(jìn)展 但還 存在品種單一 基質(zhì)組合局限 環(huán)境研究及應(yīng)用匱乏 等問題 為此提出建議及展望 完善種質(zhì)資源 系統(tǒng)開展品種研究 完善針對性研究 提高枸杞屬種質(zhì)資源的研究精 度 對種質(zhì)資源的研究不深入 種植品種比較單一 目前研究材料以黑果枸杞 寧夏枸杞居多 其他一些 品種尚不明確 經(jīng)過對西北地區(qū)的資源調(diào)查分析 寧 夏是我國枸杞產(chǎn)業(yè)的核心產(chǎn)區(qū) 系統(tǒng)整理種質(zhì)資 源 通過分類 鑒定 篩選出性狀優(yōu)良 研究進(jìn)展高 的品種 參考關(guān)鑒茹等 對中寧縣 份枸杞種質(zhì)分 析 繼續(xù)有針對性地開展研究 提高品種研究的系統(tǒng) 性 為品種選育提供理論支持 參考模式植物 擴(kuò)展基質(zhì)組合范圍 探索更多基質(zhì)組合 加大枸杞屬組織培養(yǎng)技術(shù)的 探究深度 相比其他屬植物 關(guān)于枸杞屬植物組織培 養(yǎng)的報(bào)道總數(shù)相對較少 其中大多數(shù)是在不同類型的 外植體中使用不同組合的基礎(chǔ)培養(yǎng)基和不同的生長調(diào) 節(jié)劑進(jìn)行濃度梯度實(shí)驗(yàn) 番茄是園藝研究的模式植 物 關(guān)于具體品種的組織培養(yǎng)體系已經(jīng)建立 如 公 牛 建議嘗試番茄等親緣關(guān)系較近植物 的組織培養(yǎng)基質(zhì) 挖掘培養(yǎng)效率更高的配方 融合 人工智能 進(jìn)行培養(yǎng)環(huán)境研究 摸索組培苗培養(yǎng)環(huán)境研究 拓展枸杞屬組織培養(yǎng) 應(yīng)用的廣度 枸杞屬植物分布廣泛 環(huán)境多樣 尤其 是在荒漠化 鹽堿化等自然條件惡劣地區(qū)可栽植 對 鄉(xiāng)村振興及生態(tài)文明建設(shè)貢獻(xiàn)較大 但目前關(guān)于培養(yǎng) 環(huán)境的應(yīng)用研究較少 建議未來在實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的基礎(chǔ) 上繼續(xù)開展后續(xù)移栽等實(shí)地應(yīng)用研究 為枸杞產(chǎn)業(yè)的 高質(zhì)量發(fā)展作出貢獻(xiàn) 如 結(jié)合數(shù)據(jù)模型 分析枸杞 適宜的水分調(diào)控水平和施氮水平 科學(xué)高效地提高枸 杞品種品質(zhì) 參考文獻(xiàn) 王益民 張寶琳 我國枸杞屬物種資源及發(fā)展對策 世界 林業(yè)研究 胡博然 徐文彪 趙吉強(qiáng) 等 枸杞生物技術(shù)研究進(jìn)展 西北植物學(xué)報(bào) 孫勇如 李文彬 黃美娟 等 枸杞的原生質(zhì)體生成愈傷組織 浩仁塔本 趙穎 郭永盛 等 黑果枸杞的組織培養(yǎng) 植 物生理學(xué)通訊 馬彥軍 楊萬鵬 楊坤 等 黃果枸杞愈傷組織誘導(dǎo)及快繁技 術(shù)研究 干旱區(qū)資源與環(huán)境 張欣 王鑫 劉輝鵬 等 寧夏枸杞雄性不育品系和可育品系 工廠化快繁體系的建立 分子植物育種 刁玄章 周玉麗 黑果枸杞組培快繁技術(shù)研究 安徽農(nóng)業(yè) 科學(xué) 楊寧 李宜珅 陳霞 等 黑果枸杞的組織培養(yǎng)和快速繁殖 西北師范大學(xué)學(xué)報(bào) 自然科學(xué)版 戴逢斌 劉麗萍 李艾佳 等 多基因型黑果枸杞高效快繁體 系的建立 生物技術(shù)通報(bào) 于立霞 何麗君 劉嘉偉 等 內(nèi)蒙古野生黑果枸杞四倍體 試管苗的創(chuàng)制與繁殖 干旱區(qū)資源與環(huán)境 王聰慧 王鐵軍 高芳 等 黑果枸杞離體快繁技術(shù)研究 森林工程 張虹 安迎瑞 張君 等 黑果枸杞高效植株再生與遺傳轉(zhuǎn) 化體系的建立 核農(nóng)學(xué)報(bào) 曹君邁 馬海軍 譚亞萍 離體黑果枸杞再生途徑的研究 干旱地區(qū)農(nóng)業(yè)研究 孫曉紅 位書磊 宋強(qiáng) 等 黑果枸杞的葉片分化與快速繁 殖 植物生理學(xué)報(bào) 寧曉春 高思丹 楊莉娜 等 黑果枸杞原生質(zhì)體培養(yǎng)及植 農(nóng)業(yè)與技術(shù) 園林園藝 株再生 西北植物學(xué)報(bào) 胡小柯 尉秋實(shí) 王祺 等 青海黑果枸杞 格爾木 無菌 培養(yǎng)體系的建立 中國水土保持 張波 曹有龍 付海輝 等 寧夏枸杞新優(yōu)品系花藥愈傷誘 導(dǎo)的影響因素 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 段麗君 曹有龍 枸杞花藥離體培養(yǎng)技術(shù)體系的建立 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 米佳麗 曹有龍 王俊 枸杞胚乳離體培養(yǎng)技術(shù)體系的建立 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 王方琳 柴成武 魏小紅 等 荒漠區(qū)藥用植物黑果枸杞 的組織培養(yǎng) 干旱區(qū)資源與環(huán)境 李媛媛 趙紅霞 趙學(xué)彩 等 黑果枸杞組培無菌體系獲得 及組培快繁技術(shù)研究 山東林業(yè)科技 王靜 趙百慧 姜牧炎 等 野生黑果枸杞快速繁殖體系 北方園藝 樊映漢 藏淑英 趙敬 寧夏枸杞研究 銀川 寧夏人 民出版社 高思丹 王聯(lián)星 郭佳磊 等 青海野生黑果枸杞再生體系 的建立及遺傳穩(wěn)定性分析 西北植物學(xué)報(bào) 裴小鵬 金芳 李文娟 等 三種黑果枸杞組織培養(yǎng)技術(shù)初 探 甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào) 喬永旭 黑果枸杞高頻再生體系的建立 中藥材 袁惠君 辛欣 趙冬苗 等 旱生經(jīng)濟(jì)灌木扁果枸杞葉組織 培養(yǎng)再生體系的建立 分子植物育種 王立科 毛善國 楊平 等 野生黑果枸杞組培快繁體系的 建立 分子植物育種 任重 黑果枸杞遺傳多樣性及快繁體系的初步研究 南 京 南京林業(yè)大學(xué) 徐蕊 于元元 石晶 等 寧杞 號 枸杞不同外植體愈傷 組織誘導(dǎo) 北方園藝 安煥霞 王占林 侯憲寬 不同激素對青杞 號枸杞葉片愈 傷組織誘導(dǎo)和生長的影響 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 曹有龍 許興 宋玉霞 等 枸杞原生質(zhì)體培養(yǎng)及高效成株 體系的建立 植物學(xué)通報(bào) 閆婷 烏日恒 魯敏 等 基于高遺傳轉(zhuǎn)化率及低幼苗玻璃 化率的黑果枸杞葉片組合培養(yǎng)體系 西北植物學(xué)報(bào) 段麗君 曹有龍 枸杞花藥培養(yǎng)研究 種子 陳曉丹 李愛民 張正海 等 蘇枸杞快繁體系建立 特產(chǎn)研究 包振華 郭軍戰(zhàn) 周瑋 等 枸杞組織培養(yǎng)再生體系優(yōu)化 西北林學(xué)院學(xué)報(bào) 方偉敏 弓淑樺 何卜卜 等 脅迫對寧夏枸杞組培苗 抗氧化酶及相關(guān)基因表達(dá)模式的影響 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 喬永旭 張永平 張紅心 等 寧夏枸杞再生體系的建立 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 馬鵬生 朱溶月 白長財(cái) 等 寧夏枸杞植物資源及產(chǎn)業(yè)發(fā) 展調(diào)查 中成藥 關(guān)鑒茹 呂小旭 崔貴娟 等 中寧縣 份枸杞種質(zhì)遺傳多 樣性 分析 時(shí)珍國醫(yī)國藥 王印 李娜 梅明川 等 牛心型番茄 公牛 的組培快繁 體系研究 上海農(nóng)業(yè)科技 王偉杰 金寶霞 朱曉林 等 櫻桃番茄材料 再生體 系的建立 北方園藝 張?jiān)屏?馬彥麟 高亞林 等 基于模糊 組合模型的 枸杞品質(zhì)水氮調(diào)控效應(yīng)評價(jià) 干旱地區(qū)農(nóng)業(yè)研究 責(zé)任編輯 王東印