寒旱農(nóng)業(yè)科學(xué) 2025 4 1 84 86 Journal of Cold Arid Agricultural Sciences 蘭州百合 Lilium davidii var unicolor 是一種 獨(dú)特的中國(guó)本土甜百合品種 因其顯著的營(yíng)養(yǎng)和藥 用價(jià)值而聞名 蘭州百合以大型白色鱗莖和甜美 的口感為特征 在甘肅省種植已超過(guò)400年 1 3 蘭州百合不僅是美味佳肴 同時(shí)也是一種具有健脾 養(yǎng)胃和抗衰老等功效的藥用植物 截至目前 甘肅 省種植面積約1 58萬(wàn)hm 2 總產(chǎn)量11 16萬(wàn)t 產(chǎn)值 10 06億元 蘭州百合作為原國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢 疫總局認(rèn)可的地理標(biāo)志保護(hù)產(chǎn)品 是甘肅省重要的 經(jīng)濟(jì)作物 也是當(dāng)?shù)剞r(nóng)民致富的支柱產(chǎn)業(yè) 4 近年來(lái) 隨著市場(chǎng)需求的增加 蘭州百合種 植面積不斷擴(kuò)大 加之長(zhǎng)期無(wú)性繁殖 百合植株體 內(nèi)病毒積累 導(dǎo)致品種退化 品質(zhì)逐年下降 5 6 植物組織培養(yǎng)脫病毒技術(shù)是以組織培養(yǎng)技術(shù)為媒 介 通過(guò)一系列技術(shù)手段去除植物體內(nèi)病毒病原 從而培育并繁殖出無(wú)毒植株 脫去病毒的植株具 有抗病能力強(qiáng) 繁殖效率高 作物產(chǎn)量和品質(zhì)顯 著提高等特點(diǎn) 目前已經(jīng)成為百合種苗商品化生 產(chǎn)的主要技術(shù) 7 8 然而 將脫毒組培苗馴化成商 品栽培苗 即煉苗 提高馴化成活率 是該技術(shù) 成熟應(yīng)用的核心部分 9 我們以多年的試驗(yàn)研究 及蘭州百合組培脫毒苗生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn) 提出并制定蘭 州百合組培脫毒苗的煉苗技術(shù)規(guī)程 確保蘭州百 合脫毒種苗的可持續(xù)生產(chǎn) 為蘭州百合產(chǎn)業(yè)的前 摘要 蘭州百合是中國(guó)名特優(yōu)新農(nóng)產(chǎn)品之一 為促進(jìn)蘭州百合產(chǎn)業(yè)中優(yōu)質(zhì)脫毒種苗的高質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn) 根據(jù)國(guó)家及行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) 結(jié)合多年試驗(yàn)和生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn) 從適用范圍 苗體選擇 煉苗方法與培養(yǎng)條件 后期管理等 方面總結(jié)制定了蘭州百合組培脫毒苗煉苗技術(shù)規(guī)程 本規(guī)程的制定可提高蘭州百合組培脫毒苗移栽的成活率 以期為規(guī)?；a(chǎn)提供有力的技術(shù)支持 關(guān)鍵詞 蘭州百合 脫毒苗 煉苗 組織培養(yǎng) 移栽 技術(shù)規(guī)程 中圖分類號(hào) S644 1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼 B 文章編號(hào) 2097 2172 2025 01 0084 03 doi 10 3969 j issn 2097 2172 2025 01 014 Technical Regulation for the Seedling Hardening in Virus free Tissue Culture Seedlings of Lanzhou Lily HOU Yiqing WANG Liguang ZHANG Minmin LIU Yaoquan PEI Huaidi InstituteofBiotechnology GansuAcademyofAgriculturalSciences LanzhouGansu730070 China Abstract Lanzhou lily is one of the national famous special and new agricultural products Based on national and industry standards and combined with years of testing and production experience the technical regulation for the hardening of Lanzhou lily tissue culture virus free seedlings were summarized and formulated from the aspects of application scope selection of tissue culture virus free seedlings hardening methods and culture conditions and post management The formulation of this regulation could improve the survival rate of transplanted Lanzhou lily tissue culture virus free seedlings which would provide strong technical support for the large scale production of high quality virus free seedlings in the Lanzhou lily industry Key words Lanzhou lily Virus free seedling Seedling hardening Tissue culture Transplanting Technical regulation 蘭州百合脫毒組培苗煉苗技術(shù)規(guī)程 厚毅清 王立光 張敏敏 劉耀權(quán) 裴懷弟 甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究所 甘肅 蘭州 730070 收稿日期 2024 07 06 基金項(xiàng)目 國(guó)家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系項(xiàng)目 CARS 21 甘肅省重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目 23YFNA0032 甘肅省現(xiàn)代農(nóng)業(yè) 科技支撐體系區(qū)域創(chuàng)新項(xiàng)目 2022GAAS02 甘肅省省級(jí)人才重點(diǎn)項(xiàng)目 2024RCXM13 作者簡(jiǎn)介 厚毅清 1982 男 甘肅金昌人 助理研究員 主要從事組織培養(yǎng)技術(shù)及分子標(biāo)記技術(shù)的研究與開(kāi)發(fā)方面 的工作 Email lishuiqing376 通信作者 裴懷弟 1979 女 甘肅天水人 副研究員 主要從事作物種苗快繁與栽培技術(shù)研究方面的工作 Email phdfeixiang 端打下堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ) 1 適用范圍 本規(guī)程規(guī)定了蘭州百合脫毒組培苗的煉苗方 式 組培脫毒苗選擇 基質(zhì)的配置 煉苗方法 培養(yǎng)條件 后期管理技術(shù)措施 本規(guī)程適用于甘肅省蘭州市七里河區(qū) 榆中 縣 定西市臨洮縣和臨夏州永靖縣 海拔1500 3500m的育苗溫室內(nèi) 其他產(chǎn)區(qū)可參考執(zhí)行 其 中 育苗溫室需符合GB T51424 2022規(guī)范 10 2 規(guī)范性引用文件 下列文件對(duì)于本規(guī)程的應(yīng)用是必不可少的 凡是注日期的引用文件 僅注日期的版本適用于 本規(guī)程 凡是不注日期的引用文件 其最新版本 包括所有的修改單 適用于本規(guī)程 GB T51424 2022 農(nóng)業(yè)溫室結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)標(biāo)準(zhǔn) 10 GB T 8321 10 2018 農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則 十 11 NY T1276 2007 農(nóng)藥安全使用規(guī)范總則 12 NY T1107 2020 大量元素水溶肥料 13 3 術(shù)語(yǔ)和定義 下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本規(guī)程 3 1 脫毒組培苗 是指以組織培養(yǎng)技術(shù)為媒介 通過(guò)一系列技 術(shù)手段去除百合苗體中的病毒病原 從而培育并 繁殖出的健康百合種苗 14 3 2 煉苗 因植物組織培養(yǎng)技術(shù)的特征 組培苗是在密閉 狹小可控的環(huán)境中生長(zhǎng) 不能在室外的環(huán)境中存活 需通過(guò)調(diào)整培養(yǎng)環(huán)境等各種方法將其馴化 使其逐 漸適應(yīng)室外環(huán)境并生長(zhǎng) 該過(guò)程稱作煉苗 15 16 3 3 脫毒組培苗根部器官定向培養(yǎng) 是指通過(guò)組織培養(yǎng)技術(shù) 將脫毒組培苗接種 于特定的培養(yǎng)基中 誘導(dǎo)其根部向特定的方向發(fā) 育生長(zhǎng) 4 苗體選擇 4 1 脫毒組培苗根部器官定向培養(yǎng) 將脫毒組培苗反復(fù)繼代 接種于MS NAA0 2 mg L的培養(yǎng)基中進(jìn)行根部器官膨大培養(yǎng) 培養(yǎng)溫 度24 使苗體達(dá)到煉苗標(biāo)準(zhǔn) 4 2 煉苗苗體的選擇 從根部膨大培養(yǎng)的脫毒組培苗中 選擇苗體 長(zhǎng)6 7cm 具有4 6條主根的健壯苗體進(jìn)行煉 苗 未達(dá)到條件的苗體可接種于4 1中所述的培養(yǎng) 基及培養(yǎng)條件中 反復(fù)繼代至煉苗標(biāo)準(zhǔn) 5 基質(zhì)的配置 草炭土 珍珠巖 蛭石按體積比1 2 2混 合使用 基質(zhì)可重復(fù)利用 多菌靈可濕性粉劑兌水 噴灑到基質(zhì)中并攪拌均勻 多菌靈用量為50g m 3 攪拌均勻后的基質(zhì)達(dá)到輕微潮濕即可裝盆使用 多菌靈的使用應(yīng)符合GB T8321 10 2018規(guī)定 基質(zhì)伴藥處理場(chǎng)所應(yīng)符合NY T 1276 2007規(guī) 定 6 煉苗 6 1 脫毒組培苗馴化 將選擇的脫毒組培苗帶瓶放置于苗床上 放 置環(huán)境光照強(qiáng)度 12 000lx 溫度為23 26 24h后 打開(kāi)瓶蓋繼續(xù)在光照強(qiáng)度 5000lx 溫 度23 26 濕度80 100 下放置1d 第3 天 調(diào)節(jié)放置環(huán)境光照強(qiáng)度 5000lx 溫度23 26 濕度50 60 第4天 調(diào)節(jié)放置環(huán)境 光照強(qiáng)度 5000lx 溫度23 26 濕度40 60 馴化第4天如遇葉片干卷 可臨時(shí)平鋪報(bào)紙 于瓶體上方 并將報(bào)紙澆濕 6 2 苗體處理 將馴化4d的脫毒組培苗從瓶體中取出 放置 于干凈的盆中 加入清水 清洗掉苗體根部培養(yǎng) 基塊 小心操作 以防損傷苗體根部 洗凈去除 培養(yǎng)基后 苗體用清水沖洗2遍 待用 6 3 扦插 在基質(zhì)上用干凈的鑷子做出2 3cm的孔洞 將馴化并清洗過(guò)的脫毒組培苗根部向下扦插于基 質(zhì)上的孔洞中 用周圍基質(zhì)填充并壓實(shí)孔洞 根 部距離基質(zhì)表層4 6cm 扦插苗體間距3 4cm 扦插完成后澆透水 6 4 緩苗 將扦插于基質(zhì)上的脫毒苗平鋪于苗床上進(jìn)行 緩苗處理 緩苗環(huán)境光照強(qiáng)度 5 000 lx 溫度 23 26 空氣濕度50 70 光照強(qiáng)度可用 黑色遮陰網(wǎng)控制 緩苗2d后可去除 7 后期管理 7 1 光照 保持培養(yǎng)環(huán)境光照強(qiáng)度 12000lx 厚毅清 等 蘭州百合脫毒組培苗煉苗技術(shù)規(guī)程1期 85 7 2 溫度 保持培養(yǎng)環(huán)境溫度25 28 夜間溫度 15 7 3 濕度 保持空氣濕度40 70 基質(zhì)濕度18 30 7 4 病蟲害防治 待萎蔫的百合葉片變挺拔后 及時(shí)處理發(fā)現(xiàn) 的病蟲害 百合病害主要有灰霉病和疫病 灰霉 病可感染葉片和莖 發(fā)病初期可用50 多菌靈可 濕性粉劑500 800倍液噴施防治 每14d噴施1 次 連噴1 2次 也可用1000億株 g的枯草芽 孢桿菌1000倍液噴施 每7d噴1次 連噴2 3 次 同時(shí)控制溫棚內(nèi)的濕度 疫病可造成根莖部 花器枯萎腐敗或全株枯萎死亡 發(fā)病初期可用 75 百菌清可濕性粉劑600倍液 或25 甲霜靈 可濕性粉劑1500倍液噴霧防治 每10d噴1次 連噴2 3次 同時(shí)控制溫室和基質(zhì)的濕度 20 后期應(yīng)及時(shí)將患病植株拔除銷毀 常見(jiàn)的百合蟲害有蚜蟲和粉虱 主要危害百 合葉片和莖 粉虱可使用黃色 綠色粘板按說(shuō)明 書誘殺 盛發(fā)期可用70 艾美樂(lè)水分散粒15000 倍液噴殺 蚜蟲可用高氯啶蟲脒微乳劑 高效氯 氰菊酯2 啶蟲脒3 20mL兌水20L 噴霧 防殺 1d噴1次 連噴2d 其余病蟲害可依據(jù)NY T1276 2007 GB T 8321 10 2018 適當(dāng)使用低毒農(nóng)藥進(jìn)行防治 7 5 營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充 脫毒苗煉化在基質(zhì)上存活后 可在澆水時(shí)適 量施用稀釋的液體肥料 以促進(jìn)苗體生長(zhǎng)和生根 稀釋的液體肥料應(yīng)符合NY T1107 2020規(guī)定 成分含量N P 2 O 5 K 2 O 50 Fe B為0 2 0 3 每次施用量為0 42kg hm 2 葉面噴灑至基質(zhì)澆濕 8 注意事項(xiàng) 提高百合脫毒組培苗煉苗成活率有三個(gè)關(guān)鍵 技術(shù)環(huán)節(jié) 一是選擇根部健壯的苗體進(jìn)行煉苗 二是組培苗瓶蓋揭開(kāi)后 環(huán)境濕度 70 三是經(jīng) 過(guò)馴化 清洗的脫毒組培苗扦插在基質(zhì)上進(jìn)行緩 苗 培養(yǎng)環(huán)境的光照強(qiáng)度 5000lx 濕度 50 該緩苗過(guò)程可用打濕的報(bào)紙或遮陰網(wǎng)進(jìn)行時(shí)宜調(diào) 節(jié) 參考文獻(xiàn) 1 裴懷弟 李 琦 李淑潔 等 蘭州百合試管小鱗莖 膨大及碳水化合物變化規(guī)律研究 J 甘肅農(nóng)業(yè)科技 2021 52 12 5 10 2 厚毅清 羅俊杰 歐巧明 等 卷丹及主要食用百合 EST SSR鑒別體系的構(gòu)建 J 中草藥 2020 51 16 4308 4315 3 李玉帆 明 軍 楊新艷 等 15個(gè)百合品種和品種 的食用性比較研究 J 園藝學(xué)報(bào) 2013 40 S 2693 2694 4 宋小霞 蘭州百合產(chǎn)業(yè)發(fā)展路徑研究與思考 J 甘肅 農(nóng)業(yè) 2019 10 49 50 5 柳玉晶 百合植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)研究進(jìn)展 J 現(xiàn) 代園藝 2023 46 13 12 14 6 尹 燕 楊道蘭 梁玉文 等 光暗條件下蔗糖和大 量元素對(duì)蘭州百合鱗莖生長(zhǎng)的影響 J 寒旱農(nóng)業(yè)科學(xué) 2023 2 3 254 259 7 樊亞敏 周云帆 淺談組培苗的脫毒及應(yīng)用 J 現(xiàn)代 園藝 2023 46 5 82 84 8 高文敬 董景湘 劉靈娣 中藥材組培脫毒技術(shù)研究 進(jìn)展 J 河北農(nóng)業(yè)科學(xué) 2023 27 2 83 86 90 9 王 昊 哈 蓉 楊 波 等 釀酒葡萄組培苗馴化 煉苗關(guān)鍵因子研究 J 農(nóng)業(yè)科學(xué)研究 2023 44 3 38 43 10 中華人民共和國(guó)住房和城鄉(xiāng)建設(shè)部 中華人民共和 國(guó)國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局 農(nóng)業(yè)溫室結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)標(biāo)準(zhǔn) GB T 51424 2022 S 北京 中國(guó)計(jì)劃出版社 2022 11 中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局 中國(guó) 國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì) 農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則 十 GB T 8321 10 2018 S 北京 中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社 2018 12 中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部 農(nóng)藥安全使用規(guī)范總 則 NY T 1276 2007 S 北京 中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社 2007 13 中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部 大量元素水溶肥料 NY T 1107 2020 S 北京 中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社 2020 14 董 薇 余永亮 楊紅旗 等 豫菊花2號(hào) 脫毒培 養(yǎng)及脫毒苗分級(jí) J 分子植物育種 2024 22 13 4333 4340 15 葛玉君 鞏 娜 楊建峰 等 棉花組培苗高效移 栽馴化技術(shù)的研究 J 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào) 2024 40 7 14 19 16 張雪冰 王 鴻 張 帆 等 山桃生根成苗關(guān)鍵 技術(shù)研究 J 寒旱農(nóng)業(yè)科學(xué) 2023 2 3 270 274 4卷86