食 品 研 究 與 開 發(fā) 基 礎(chǔ) 研 究 基 礎(chǔ) 研 究 2 0 2 4 2 0 2 4 年 年 1 1 1 1 月 月 第 第 4 5 4 5 卷 卷 第 第 2 2 2 2 期 期 不 同 周 期 藍(lán) 光 處 理 對(duì) 采 后 桃 果 皮 色 澤 及 不 同 周 期 藍(lán) 光 處 理 對(duì) 采 后 桃 果 皮 色 澤 及 花 色 苷 代 謝 的 影 響 花 色 苷 代 謝 的 影 響 池 銘 1 2 3 孫 麗 娟 1 2 郝 浩 然 1 2 4 劉 思 含 1 2 周 宏 勝 1 2 4 凌 軍 1 2 4 李 鵬 霞 1 2 4 郭 正 兵 5 張 映 曈 1 2 4 1 江 蘇 省 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 院 農(nóng) 業(yè) 設(shè) 施 與 裝 備 研 究 所 江 蘇 南 京 2 1 0 0 1 4 2 江 蘇 省 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 院 農(nóng) 業(yè) 農(nóng) 村 部 農(nóng) 產(chǎn) 品 冷 鏈 物 流 技 術(shù) 重 點(diǎn) 實(shí) 驗(yàn) 室 江 蘇 南 京 2 1 0 0 1 4 3 遼 源 市 食 品 質(zhì) 量 安 全 檢 測(cè) 中 心 吉 林 遼 源 1 3 6 2 0 0 4 沈 陽 農(nóng) 業(yè) 大 學(xué) 食 品 學(xué) 院 遼 寧 沈 陽 1 1 0 8 6 6 5 江 蘇 農(nóng) 林 職 業(yè) 技 術(shù) 學(xué) 院 江 蘇 句 容 2 1 2 4 0 0 摘 要 前 期 研 究 發(fā) 現(xiàn) 采 后 藍(lán) 光 照 射 能 夠 促 進(jìn) 桃 果 皮 色 澤 的 提 升 該 試 驗(yàn) 以 此 為 基 礎(chǔ) 研 究 不 同 藍(lán) 光 周 期 對(duì) 桃 果 皮 花 色 苷 代 謝 的 影 響 將 中 桃 九 號(hào) 置 于 2 2 1 的 條 件 下 采 用 不 同 周 期 藍(lán) 光 6 1 2 1 8 h d 和 2 4 h d 進(jìn) 行 處 理 以 黑 暗 處 理 為 對(duì) 照 組 觀 察 其 表 型 測(cè) 定 色 差 值 花 色 苷 含 量 及 其 合 成 相 關(guān) 基 因 的 表 達(dá) 量 結(jié) 果 表 明 隨 著 光 照 時(shí) 間 的 延 長(zhǎng) 桃 果 皮 顏 色 a 值 和 色 澤 指 數(shù) 值 均 顯 著 提 升 其 中 1 8 h d 與 2 4 h d 處 理 組 桃 果 皮 花 色 苷 含 量 最 高 在 第 8 天 時(shí) 分 別 達(dá) 到 1 4 9 1 3 m g k g 和 1 5 0 9 5 m g k g 通 過 測(cè) 定 花 色 苷 合 成 相 關(guān) 基 因 的 表 達(dá) 量 可 知 1 8 h d 處 理 組 能 夠 持 續(xù) 提 升 花 色 苷 合 成 相 關(guān) 基 因 的 表 達(dá) 量 2 4 h d 處 理 組 花 色 苷 合 成 相 關(guān) 基 因 表 達(dá) 量 只 在 貯 藏 前 中 期 有 明 顯 提 升 貯 藏 后 期 呈 下 降 趨 勢(shì) 另 外 1 8 h d 處 理 還 能 夠 延 緩 貯 藏 期 間 果 實(shí) 硬 度 的 下 降 綜 上 選 擇 藍(lán) 光 1 8 h d 為 采 后 藍(lán) 光 處 理 桃 果 的 最 佳 光 周 期 關(guān) 鍵 詞 桃 光 周 期 色 澤 花 色 苷 基 因 表 達(dá) E f f e c t o f D i f f e r e n t B l u e L i g h t C y c l e s o n S k i n C o l o r a n d A n t h o c y a n i n M e t a b o l i s m o f P o s t h a r v e s t P e a c h C H I M i n g 1 2 3 S U N L i j u a n 1 2 H A O H a o r a n 1 2 4 L I U S i h a n 1 2 Z H O U H o n g s h e n g 1 2 4 L I N G J u n 1 2 4 L I P e n g x i a 1 2 4 G U O Z h e n g b i n g 5 Z H A N G Y i n g t o n g 1 2 4 1 I n s t i t u t e o f A g r i c u l t u r a l F a c i l i t i e s a n d E q u i p m e n t J i a n g s u A c a d e m y o f A g r i c u l t u r a l S c i e n c e s N a n j i n g 2 1 0 0 1 4 J i a n g s u C h i n a 2 K e y L a b o r a t o r y o f C o l d C h a i n L o g i s t i c s T e c h n o l o g y f o r A g r o p r o d u c t M i n i s t r y o f A g r i c u l t u r e a n d R u r a l A f f a i r s J i a n g s u A c a d e m y o f A g r i c u l t u r a l S c i e n c e s N a n j i n g 2 1 0 0 1 4 J i a n g s u C h i n a 3 L i a o y u a n F o o d Q u a l i t y a n d S a f e t y I n s p e c t i o n C e n t e r L i a o y u a n 1 3 6 2 0 0 J i l i n C h i n a 4 F o o d S c i e n c e C o l l e g e S h e n y a n g A g r i c u l t u r a l U n i v e r s i t y S h e n y a n g 1 1 0 8 6 6 L i a o n i n g C h i n a 5 J i a n g s u V o c a t i o n a l C o l l e g e o f A g r i c u l t u r e a n d F o r e s t r y J u r o n g 2 1 2 4 0 0 J i a n g s u C h i n a A b s t r a c t P r e v i o u s r e s e a r c h f o u n d t h a t p o s t h a r v e s t b l u e l i g h t i r r a d i a t i o n c a n e n h a n c e t h e c o l o r a t i o n o f p e a c h s k i n B a s e d o n t h i s t h e p r e s e n t s t u d y i n v e s t i g a t e d t h e e f f e c t o f d i f f e r e n t b l u e l i g h t p h o t o p e r i o d s o n a n t h o c y a n i n m e t a b o l i s m i n p e a c h s k i n Z h o n g t a o N o 9 p e a c h e s w e r e p l a c e d u n d e r c o n d i t i o n s o f 2 2 1 a n d s u b j e c t e d t o d i f f e r e n t b l u e l i g h t c y c l e s 6 1 2 1 8 h d a n d 2 4 h d w i t h d a r k t r e a t m e n t a s t h e c o n t r o l g r o u p P h e n o t y p i c o b s e r v a t i o n s c o l o r d i f f e r e n c e m e a s u r e m e n t s a n d d e t e c t i o n o f a n t h o c y a n i n c o n t e n t a n d e x p r e s s i o n l e v e l s o f r e l a t e d g e n e s w e r e c o n d u c t e d T h e r e s u l t s s h o w e d t h a t w i t h t h e e x t e n s i o n o f l i g h t e x p o s u r e t i m e p e a c h s k i n c o l o r a v a l u e a n d c o l o r i n d e x o f r e d g r a p e v a l u e w e r e s i g n i f i c a n t l y i m p r o v e d A m o n g t h e t r e a t m e n t s t h e 1 8 h d a n d 2 4 h d g r o u p s h a d t h e h i g h e s t a n t h o c y a n i n c o n t e n t r e a c h i n g 1 4 9 1 3 m g k g a n d 1 5 0 9 5 m g k g o n t h e 8 t h d a y r e s p e c t i v e l y M e a s u r e m e n t s o f t h e e x p r e s s i o n l e v e l s o f a n t h o c y a n i n b i o s y n t h e s i s r e l a t e d g e n e s i n d i c a t e d t h a t t h e 1 8 h d t r e a t m e n t g r o u p c o u l d c o n t i n u o u s l y e n h a n c e t h e e x p r e s s i o n o f t h e s e g e n e s I n c o n t r a s t t h e 2 4 h d t r e a t m e n t g r o u p s h o w e d a s i g n i f i c a n t i n c r e a s e i n g e n e e x p r e s s i o n o n l y i n t h e e a r l y a n d m i d d l e s t a g e s o f s t o r a g e f o l l o w e d b y a d e c l i n e i n t h e l a t e r s t a g e A d d i t i o n a l l y t h e 1 8 h d t r e a t m e n t d e l a y e d t h e d e c r e a s e i n f r u i t D O I 1 0 1 2 1 6 1 j i s s n 1 0 0 5 6 5 2 1 2 0 2 4 2 2 0 0 1 基 金 項(xiàng) 目 國 家 重 點(diǎn) 研 發(fā) 計(jì) 劃 項(xiàng) 目 2 0 2 2 Y F D 2 1 0 0 6 0 0 國 家 自 然 科 學(xué) 基 金 資 助 項(xiàng) 目 3 2 3 0 2 1 7 6 江 蘇 省 青 藍(lán) 工 程 優(yōu) 秀 教 學(xué) 團(tuán) 隊(duì) 作 者 簡(jiǎn) 介 池 銘 1 9 9 6 女 漢 碩 士 研 究 方 向 農(nóng) 產(chǎn) 品 貯 藏 保 鮮 通 信 作 者 張 映 曈 1 9 8 8 女 助 理 研 究 員 博 士 研 究 方 向 農(nóng) 產(chǎn) 品 貯 藏 與 加 工 1食 品 研 究 與 開 發(fā) 基 礎(chǔ) 研 究 基 礎(chǔ) 研 究 2 0 2 4 2 0 2 4 年 年 1 1 1 1 月 月 第 第 4 5 4 5 卷 卷 第 第 2 2 2 2 期 期 桃 P r u n u s p e r s i c a L B a t s c h 屬 薔 薇 科 距 今 已 有 千 年 歷 史 我 國 是 世 界 上 種 植 桃 樹 最 早 種 植 面 積 最 廣 產(chǎn) 量 最 大 的 國 家 1 桃 果 實(shí) 因 其 色 澤 艷 麗 口 味 鮮 美 營(yíng) 養(yǎng) 豐 富 深 受 人 們 喜 愛 花 色 苷 屬 類 黃 酮 類 物 質(zhì) 具 有 抗 炎 2 改 善 肝 機(jī) 能 3 預(yù) 防 癌 癥 和 提 高 記 憶 力 等 4 多 種 生 理 功 能 同 時(shí) 花 色 苷 還 是 重 要 的 呈 色 物 質(zhì) 有 助 于 水 果 外 觀 色 澤 的 呈 現(xiàn) 是 桃 果 實(shí) 呈 現(xiàn) 紅 色 的 主 要 原 因 因 此 富 含 花 色 苷 的 桃 果 實(shí) 不 僅 具 有 較 高 的 營(yíng) 養(yǎng) 價(jià) 值 還 能 呈 現(xiàn) 鮮 艷 誘 人 的 色 澤 但 在 目 前 生 產(chǎn) 中 通 常 采 用 套 袋 栽 培 模 式 雖 可 有 效 減 輕 病 蟲 害 減 少 農(nóng) 藥 殘 留 并 提 高 優(yōu) 質(zhì) 果 率 但 嚴(yán) 重 限 制 花 色 苷 的 積 累 制 約 桃 果 實(shí) 顏 色 的 呈 現(xiàn) 影 響 桃 產(chǎn) 業(yè) 的 健 康 發(fā) 展 因 此 在 采 后 進(jìn) 行 桃 果 花 色 苷 合 成 的 調(diào) 控 具 有 重 要 意 義 花 色 苷 的 合 成 主 要 分 為 3 個(gè) 階 段 苯 丙 氨 酸 裂 解 酶 p h e n y l a l a n i n e a m m o n i a l y a s e P A L 是 第 一 階 段 的 關(guān) 鍵 酶 負(fù) 責(zé) 將 苯 丙 氨 酸 轉(zhuǎn) 化 為 苯 丙 烯 酸 第 二 階 段 由 查 爾 酮 合 成 酶 c h a l c o n e s y n t h a s e C H S 查 爾 酮 異 構(gòu) 酶 c h a l c o n e i s o m e r a s e C H I 和 黃 烷 酮 3 羥 化 酶 f l a v o n o i d 3 h y d r o x y l a s e F 3 H 將 香 豆 酸 輔 酶 A 轉(zhuǎn) 化 為 二 氫 黃 酮 醇 第 三 階 段 由 二 氫 黃 酮 醇 經(jīng) 二 羥 黃 酮 醇 還 原 酶 d i h y d r o f l a v o n o l r e d u c t a s e D F R 花 色 素 合 成 酶 a n t h o c y a n i d i n s y n t h a s e A N S 與 類 黃 酮 3 O 葡 糖 基 轉(zhuǎn) 移 酶 U D P g l u c o s e f l a v o n o i d 3 O g l u c o s y l t r a n s f e r a s e U F G T 催 化 合 成 花 色 苷 5 8 花 色 苷 合 成 酶 編 碼 基 因 的 表 達(dá) 受 相 關(guān) 轉(zhuǎn) 錄 因 子 的 調(diào) 控 其 中 最 重 要 的 是 v m y b 禽 成 髓 細(xì) 胞 瘤 病 毒 同 源 基 因 v m y b a v i a n m y e l o b l a s t o s i s v i r a l o n c o g e n e h o m o l o g M Y B 堿 性 螺 旋 環(huán) 螺 旋 b a s i c h e l i x l o o p h e l i x b H L H 和 W D 4 0 重 復(fù) 蛋 白 W D 4 0 r e p e a t 這 3 種 蛋 白 相 互 作 用 形 成 調(diào) 控 復(fù) 合 體 M Y B b H L H W D 4 0 M B W 通 過 激 活 花 色 苷 合 成 結(jié) 構(gòu) 基 因 表 達(dá) 啟 動(dòng) 花 色 苷 的 合 成 9 1 0 光 是 最 重 要 的 環(huán) 境 因 子 與 花 色 苷 合 成 息 息 相 關(guān) 其 中 光 質(zhì) 和 光 照 強(qiáng) 度 是 影 響 花 色 苷 合 成 的 重 要 因 素 例 如 藍(lán) 光 和 紫 外 線 u l t r a v i o l e t C U V C 可 激 活 楊 梅 中 轉(zhuǎn) 錄 因 子 M r M Y B 1 的 表 達(dá) 促 進(jìn) 花 色 苷 合 成 1 1 1 2 紅 光 作 用 下 草 莓 M B W 復(fù) 合 體 表 達(dá) 上 調(diào) 提 高 了 花 色 苷 合 成 1 3 在 蘋 果 中 分 別 采 用 黑 暗 弱 中 和 強(qiáng) 光 進(jìn) 行 處 理 結(jié) 果 發(fā) 現(xiàn) 光 照 強(qiáng) 度 越 強(qiáng) 花 色 苷 積 累 程 度 越 高 1 4 同 樣 地 高 強(qiáng) 度 光 照 處 理 的 紫 色 羅 勒 葉 呈 現(xiàn) 出 更 深 的 紫 色 1 5 光 周 期 對(duì) 花 色 苷 積 累 也 有 重 要 影 響 1 6 例 如 李 子 果 實(shí) 在 陽 光 下 暴 露 時(shí) 間 越 長(zhǎng) 果 皮 顏 色 越 深 1 7 對(duì) 歐 洲 越 橘 分 別 進(jìn) 行 1 2 h 與 2 4 h 光 照 處 理 結(jié) 果 顯 示 2 4 h 處 理 組 花 色 苷 含 量 與 1 2 h 處 理 組 相 比 提 高 了 1 8 2 5 1 8 但 也 有 研 究 表 明 光 照 時(shí) 長(zhǎng) 和 花 色 苷 沒 有 絕 對(duì) 相 關(guān) 性 例 如 黃 冬 華 等 1 9 研 究 發(fā) 現(xiàn) 無 論 是 長(zhǎng) 時(shí) 間 還 是 短 時(shí) 間 光 照 只 要 有 一 定 的 低 溫 刺 激 均 能 促 進(jìn) 富 貴 籽 果 實(shí) 的 著 色 Y a m a g i s h i 等 2 0 研 究 發(fā) 現(xiàn) 在 亞 洲 雜 交 百 合 中 經(jīng) 過 光 照 后 花 色 苷 含 量 逐 漸 上 升 但 光 照 過 長(zhǎng) 時(shí) 間 反 而 花 色 苷 含 量 逐 漸 下 降 前 期 研 究 發(fā) 現(xiàn) 藍(lán) 光 處 理 能 夠 上 調(diào) 桃 果 實(shí) 花 色 苷 代 謝 調(diào) 控 因 子 M Y B 1 0 1 及 其 下 游 結(jié) 構(gòu) 基 因 的 表 達(dá) 促 進(jìn) 花 色 苷 的 合 成 和 積 累 2 1 同 時(shí) 確 定 了 適 宜 的 光 照 強(qiáng) 度 在 此 基 礎(chǔ) 上 本 研 究 使 用 藍(lán) 光 對(duì) 桃 果 實(shí) 進(jìn) 行 不 同 周 期 處 理 通 過 觀 察 和 分 析 果 實(shí) 色 澤 表 型 變 化 花 色 苷 含 量 差 異 及 結(jié) 構(gòu) 基 因 和 轉(zhuǎn) 錄 因 子 對(duì) 光 表 達(dá) 的 響 應(yīng) 情 況 等 確 定 光 周 期 對(duì) 桃 果 皮 色 澤 的 影 響 以 期 為 采 后 光 照 調(diào) 控 桃 果 皮 著 色 進(jìn) 程 及 花 色 苷 代 謝 提 供 理 論 依 據(jù) 1 材 料 與 方 法 1 1 材 料 與 試 劑 試 驗(yàn) 所 用 桃 品 種 為 中 桃 九 號(hào) 套 外 黃 內(nèi) 黑 果 袋 挑 選 外 觀 相 似 大 小 均 勻 無 機(jī) 械 外 傷 無 蟲 害 污 染 的 七 成 熟 果 實(shí) 作 為 試 驗(yàn) 材 料 巰 基 乙 醇 分 析 純 上 海 麥 克 林 生 物 科 技 有 限 公 司 鹽 酸 分 析 純 南 京 化 學(xué) 試 劑 有 限 公 司 醋 酸 鈉 分 析 純 廣 州 市 金 華 大 化 學(xué) 試 劑 有 限 公 司 F a s t P u r e U n i v e r s a l P l a n t T o t a l R N A I s o l a t i o n K i t R N A 提 取 試 劑 盒 H i S c r i p t I I I R T S u p e r M i x f o r q P C R g D N A w i p e r c D N A 合 成 試 劑 盒 C h a m Q S Y B R q P C R M a s t e r M i x 試 f i r m n e s s d u r i n g s t o r a g e I n c o n c l u s i o n 1 8 h d o f b l u e l i g h t w a s t h e o p t i m a l p h o t o p e r i o d f o r p o s t h a r v e s t b l u e l i g h t t r e a t m e n t o f p e a c h f r u i t s K e y w o r d s p e a c h p h o t o p e r i o d c o l o r a n t h o c y a n i n g e n e e x p r e s s i o n 引 文 格 式 池 銘 孫 麗 娟 郝 浩 然 等 不 同 周 期 藍(lán) 光 處 理 對(duì) 采 后 桃 果 皮 色 澤 及 花 色 苷 代 謝 的 影 響 J 食 品 研 究 與 開 發(fā) 2 0 2 4 4 5 2 2 1 8 C H I M i n g S U N L i j u a n H A O H a o r a n e t a l E f f e c t o f D i f f e r e n t B l u e L i g h t C y c l e s o n S k i n C o l o r a n d A n t h o c y a n i n M e t a b o l i s m o f P o s t h a r v e s t P e a c h J F o o d R e s e a r c h a n d D e v e l o p m e n t 2 0 2 4 4 5 2 2 1 8 2食 品 研 究 與 開 發(fā) 基 礎(chǔ) 研 究 基 礎(chǔ) 研 究 2 0 2 4 2 0 2 4 年 年 1 1 1 1 月 月 第 第 4 5 4 5 卷 卷 第 第 2 2 2 2 期 期 劑 盒 南 京 諾 唯 贊 生 物 科 技 股 份 有 限 公 司 1 2 儀 器 與 設(shè) 備 L E D 光 源 廣 東 歐 曼 科 技 股 份 有 限 公 司 電 子 天 平 P L 2 0 2 L 梅 特 勒 托 利 多 儀 器 上 海 有 限 公 司 全 自 動(dòng) 測(cè) 色 色 差 儀 C R 4 0 0 日 本 K O N I C A M I N O L T A 公 司 F T 0 2 型 手 持 硬 度 計(jì) 意 大 利 D R E U Z Z I 公 司 P A L 1 便 攜 式 數(shù) 顯 折 射 儀 日 本 A T A G O 公 司 液 氮 研 磨 器 A 1 1 B a s i c 艾 卡 廣 州 儀 器 設(shè) 備 有 限 公 司 紫 外 可 見 分 光 光 度 計(jì) U V 1 1 0 2 上 海 天 美 科 學(xué) 儀 器 有 限 公 司 漩 渦 振 蕩 器 M X S 無 錫 得 翻 儀 器 設(shè) 備 有 限 公 司 高 速 冷 凍 離 心 機(jī) 3 K 1 5 美 國 S i g m a A l d r i c h 公 司 E D C 8 1 0 型 基 因 擴(kuò) 增 儀 東 勝 國 際 貿(mào) 易 有 限 公 司 熒 光 定 量 聚 合 酶 鏈 式 反 應(yīng) 儀 C F X c o n n e c t 美 國 B i o R a d 公 司 1 3 方 法 1 3 1 不 同 光 周 期 處 理 采 用 不 同 光 周 期 6 1 2 1 8 h d 和 2 4 h d 處 理 水 蜜 桃 以 2 4 h 全 黑 暗 處 理 作 為 對(duì) 照 保 證 各 處 理 間 光 照 強(qiáng) 度 一 致 均 為 1 0 0 0 l u x 1 8 m o l m 2 s 采 用 打 孔 的 聚 乙 烯 袋 5 0 c m 3 5 c m 0 2 m m 放 置 樣 品 每 袋 1 2 個(gè) 桃 子 在 光 照 處 理 后 的 第 0 2 4 6 8 天 隨 機(jī) 選 取 3 包 樣 品 測(cè) 定 質(zhì) 量 與 色 差 并 拍 照 存 檔 用 不 銹 鋼 刀 片 分 離 桃 果 皮 將 分 離 后 的 果 皮 置 于 液 氮 速 凍 并 在 8 0 冰 箱 中 保 存 使 用 液 氮 研 磨 器 將 樣 品 粉 碎 混 勻 以 保 證 測(cè) 定 指 標(biāo) 時(shí) 取 樣 均 勻 1 3 2 硬 度 及 可 溶 性 固 形 物 含 量 的 測(cè) 定 硬 度 的 測(cè) 定 采 用 手 持 硬 度 計(jì) 測(cè) 定 在 桃 果 實(shí) 赤 道 位 置 切 去 對(duì) 稱 的 兩 個(gè) 1 c m 2 果 皮 將 硬 度 計(jì) 勻 速 插 入 果 肉 中 記 錄 數(shù) 值 每 個(gè) 處 理 測(cè) 定 3 6 個(gè) 水 蜜 桃 可 溶 性 固 形 物 t o t a l s o l u b l e s o l i d s T S S 含 量 采 用 手 持 折 射 儀 進(jìn) 行 測(cè) 定 1 3 3 色 差 值 的 測(cè) 定 桃 果 皮 的 色 差 值 參 照 王 瑤 等 2 2 的 方 法 測(cè) 定 包 括 L 值 a 值 b 值 和 色 澤 指 數(shù) c o l o r i n d e x o f r e d g r a p e C I R G 每 個(gè) 處 理 測(cè) 定 3 包 水 蜜 桃 共 3 6 顆 結(jié) 果 取 平 均 值 1 3 4 花 色 苷 含 量 的 測(cè) 定 采 用 p H 示 差 法 2 3 測(cè) 定 桃 果 皮 中 花 色 苷 含 量 取 1 g 桃 果 皮 樣 品 加 入 9 5 的 酸 化 甲 醇 0 1 m o l L H C l 5 m L 振 蕩 提 取 4 h 黑 暗 離 心 1 1 0 0 0 g 4 1 5 m i n 提 取 上 清 液 上 清 液 分 別 用 0 4 m o l L 醋 酸 鈉 緩 沖 液 p H 4 5 和 0 0 2 5 m o l L 氯 化 鉀 緩 沖 液 p H 1 0 稀 釋 3 5 倍 靜 置 1 5 m i n 后 測(cè) 定 溶 液 在 7 0 0 n m 和 5 2 0 n m 波 長(zhǎng) 處 的 吸 光 度 花 色 苷 含 量 計(jì) 算 公 式 如 下 X A 1 A 2 A 3 A 4 M W D F m 1 0 0 0 式 中 X 為 花 色 苷 含 量 m g k g A 1 為 樣 品 在 0 0 2 5 m o l L 氯 化 鉀 緩 沖 液 p H 1 0 波 長(zhǎng) 5 2 0 n m 處 的 吸 光 度 A 2 為 樣 品 在 0 0 2 5 m o l L 氯 化 鉀 緩 沖 液 p H 1 0 波 長(zhǎng) 7 0 0 n m 處 的 吸 光 度 A 3 為 樣 品 在 0 4 m o l L 醋 酸 鈉 緩 沖 液 p H 4 5 波 長(zhǎng) 5 2 0 n m 處 的 吸 光 度 A 4 為 樣 品 在 0 4 m o l L 醋 酸 鈉 緩 沖 液 p H 4 5 波 長(zhǎng) 7 0 0 n m 處 的 吸 光 度 為 摩 爾 吸 光 系 數(shù) 2 6 9 0 0 L m o l c m M W 為 氰 化 3 葡 萄 糖 苷 的 摩 爾 質(zhì) 量 4 4 9 2 g m o l m 為 樣 品 質(zhì) 量 g D F 為 稀 釋 因 子 1 3 5 花 色 苷 合 成 相 關(guān) 基 因 的 表 達(dá) 測(cè) 定 1 3 5 1 R N A 提 取 與 c D N A 反 轉(zhuǎn) 錄 R N A 提 取 與 c D N A 反 轉(zhuǎn) 錄 均 按 照 試 劑 盒 說 明 書 操 作 1 3 5 2 實(shí) 時(shí) 熒 光 定 量 聚 合 酶 鏈 式 反 應(yīng) 分 析 實(shí) 時(shí) 熒 光 定 量 聚 合 酶 鏈 式 反 應(yīng) q u a n t i t a t i v e r e a l t i m e p o l y m e r a s e c h a i n r e a c t i o n R T q P C R 體 系 如 表 1 所 示 按 照 表 1 的 反 應(yīng) 體 系 進(jìn) 行 實(shí) 時(shí) 熒 光 定 量 聚 合 酶 鏈 式 反 應(yīng) 采 用 2 C T 法 計(jì) 算 相 對(duì) 表 達(dá) 量 每 個(gè) 處 理 3 次 重 復(fù) R T q P C R 引 物 序 列 如 表 2 所 示 反 應(yīng) 體 系 2 S Y B R P r e m i x E x T a q T M P C R F o r w a r d P r i m e r P C R R e v e r s e P r i m e r T e m p l a t e D N A d d H 2 O 體 積 L 1 0 0 0 4 0 4 2 0 7 2 表 1 R T q P C R 反 應(yīng) 體 系 2 0 L T a b l e 1 R T q P C R r e a c t i o n s y s t e m 2 0 L 表 2 R T q P C R 引 物 序 列 T a b l e 2 P r i m e r s e q u e n c e s o f R T q P C R 基 因 名 稱 T E F P A L C H S C H I F 3 H D F R 上 游 引 物 序 列 5 3 G G T G T G A C G A T G A A G A G T G A T G G T T T G G T G C T A C C T C C C A C A C A A A C C A T C C T T C C C G A C A G T G A A G A C C T C A A G G A A C T T C T C A A T G G C C C A A C T T G A C C T A C C T C C A G A T G C C T G C C G A T A G T T C T T 下 游 引 物 序 列 5 3 T G A A G G A G A G G G A A G G T G A A A G A G A G T A G C C C T G G A G G A G T G T T C T C A G G C T T C A G G G C T A A T A C A C A G G T G A C A A C G A T A C T G C C A C T C T T T G G G A T G T G G A A G C T G T C C C T A A C A G T G T A G C C T C T T T C 3食 品 研 究 與 開 發(fā) 基 礎(chǔ) 研 究 基 礎(chǔ) 研 究 2 0 2 4 2 0 2 4 年 年 1 1 1 1 月 月 第 第 4 5 4 5 卷 卷 第 第 2 2 2 2 期 期 q P C R 反 應(yīng) 程 序 9 5 預(yù) 變 性 3 0 s 9 5 變 性 1 0 s 6 0 退 火 3 0 s 6 5 延 伸 5 s 3 9 個(gè) 循 環(huán) 1 4 數(shù) 據(jù) 統(tǒng) 計(jì) 所 有 試 驗(yàn) 進(jìn) 行 3 次 平 行 測(cè) 定 數(shù) 據(jù) 采 用 平 均 值 標(biāo) 準(zhǔn) 差 表 示 顯 著 性 差 異 P 0 0 5 為 差 異 顯 著 采 用 S P S S 2 2 0 軟 件 分 析 并 用 O r i g i n 2 0 1 8 軟 件 作 圖 2 結(jié) 果 與 分 析 2 1 不 同 光 周 期 處 理 對(duì) 桃 果 皮 著 色 的 影 響 不 同 光 周 期 處 理 對(duì) 桃 果 皮 著 色 的 影 響 如 圖 1 所 示 續(xù) 表 2 R T q P C R 引 物 序 列 C o n t i n u e t a b l e 2 P r i m e r s e q u e n c e s o f R T q P C R 基 因 名 稱 A N S U F G T M Y B 1 0 1 b H L H 3 W D 4 0 1 上 游 引 物 序 列 5 3 A A G T G G G T C A C T G C C A A G T G T G T T C G T C G C A A G A C T G G T G G A G G A C G G G A T T C T C G C C T G A A A A A G G T G T C T T G T T C A G A G T T C C G T T C C T A G C T T T A T C G G G G A G T A C T C 下 游 引 物 序 列 5 3 G T G G C T C A C A G A A A A C T G C C C A T G C G A G T A G T T T G A C G G T G T T T A T C G G C G T A C T A A A A T T C T C G A C T G T T G G C G C T G A G C T C A T C T T G T G A G A A G A C G C T A A G A C G T C G T 圖 1 不 同 光 周 期 處 理 對(duì) 桃 果 皮 著 色 的 影 響 F i g 1 E f f e c t o f d i f f e r e n t b l u e l i g h t c y c l e s o n c o l o r a t i o n o f p e a c h s k i n 1 8 h d 對(duì) 照 6 h d 1 2 h d 2 4 h d 0 d 2 d 4 d 6 d 8 d 由 圖 1 可 知 與 對(duì) 照 組 相 比 經(jīng) 藍(lán) 光 處 理 的 桃 果 皮 著 色 效 果 更 好 對(duì) 照 組 桃 果 皮 顏 色 隨 貯 藏 時(shí) 間 的 延 長(zhǎng) 差 異 較 小 光 照 處 理 組 從 第 2 天 開 始 逐 漸 變 色 6 h d 光 照 處 理 組 在 整 個(gè) 貯 藏 期 間 顏 色 始 終 呈 現(xiàn) 粉 色 1 2 h d 處 理 組 在 第 4 天 時(shí) 開 始 轉(zhuǎn) 為 深 粉 色 1 8 h d 和 2 4 h d 處 理 組 在 第 6 天 時(shí) 開 始 呈 現(xiàn) 鮮 艷 的 紅 色 以 上 結(jié) 果 表 明 隨 著 光 照 時(shí) 間 的 延 長(zhǎng) 桃 果 皮 顏 色 逐 漸 變 紅 光 周 期 越 長(zhǎng) 桃 果 皮 著 色 效 果 越 好 但 當(dāng) 光 照 時(shí) 間 繼 續(xù) 延 長(zhǎng) 至 2 4 h d 時(shí) 桃 果 皮 顏 色 與 1 8 h d 處 理 組 間 無 明 顯 差 異 2 2 不 同 光 周 期 處 理 對(duì) 桃 果 皮 色 差 的 影 響 不 同 光 周 期 處 理 對(duì) 桃 果 皮 色 差 的 影 響 如 圖 2 所 示 A a 值 B C I R G 值 C L 值 不 同 處 理 組 同 一 貯 藏 時(shí) 間 不 同 字 母 表 示 差 異 顯 著 P 0 0 5 圖 2 不 同 光 周 期 處 理 對(duì) 桃 果 皮 色 差 值 的 影 響 F i g 2 E f f e c t o f d i f f e r e n t b l u e l i g h t c y c l e s o n c o l o r c h r o m a t i s m o f p e a c h s k i n 50 60 70 80 90 l00 對(duì)照 6 h d l2 h d l8 h d 24 h d L 值 a b b c c a d b c d d b c a d d b c a d C 0 5 l 0 l 5 對(duì)照 6 h d l2 h d l8 h d 24 h d a a b c d CIRG值 a b b c a a a b c a d b c a d B 0 2 4 6 8 對(duì)照 6 h d l2 h d l8 h d 24 h