中國農學通報 ChineseAgriculturalScienceBulletin 中國農學通報 2024 40 34 24 32 ChineseAgriculturalScienceBulletin 基 金 項 目 河 北 省 重 點 研 發(fā) 計 劃 項 目 果 菜 類 蔬 菜 現(xiàn) 代 種 業(yè) 科 技 創(chuàng) 新 團 隊 優(yōu) 質 多 抗 設 施 番 茄 種 質 資 源 創(chuàng) 制 與 新 品 種 選 育 21326309D 河 北 省 重 點 研 發(fā) 計 劃 項 目 高 品 質 多 抗 櫻 桃 番 茄 種 質 資 源 創(chuàng) 制 與 新 品 種 選 育 22326313D 河 北 省 農 林 科 學 院 科 技 創(chuàng) 新 專 項 課 題 設 施 番 茄 新 品 種 選 育 及 棚 室 裝 備 研 究 應 用 2022KJCXZX JZS 5 河 北 省 農 林 科 學 院 科 技 創(chuàng) 新 人 才 隊 伍 建 設 博 士 基 金 番 茄 高 糖 基 因Lin5 的 發(fā) 掘 與 利 用 研 究 C22R0801 河 北 省 農 林 科 學 院 基 本 科 研 業(yè) 務 費 番 茄 蘋 果 酸 相 關 基 因 的 定 位 及 育 種 利 用 2024050203 河 北 省 第 三 批 巨 人 計 劃 蔬 菜 科 研 創(chuàng) 新團隊項目 第 一 作 者 簡 介 王 珊 珊 女 1992 年 出 生 河 北 衡 水 人 助 理 研 究 員 博 士 研 究 生 研 究 方 向 為 番 茄 育 種 研 究 通 信 地 址 050000 河 北 省 石 家 莊 市 新 華 區(qū)和平西路598 號中五樓109 室 河北省農林科學院經濟作物研究所 E mail 820705239 通 信 作 者 尹 慶 珍 女 1967 年 出 生 河 北 靈 壽 人 研 究 員 碩 士 研 究 生 研 究 方 向 為 番 茄 育 種 研 究 通 信 地 址 050000 河 北 省 石 家 莊 市 新 華 區(qū) 和 平 西 路598 號中五樓109 室 河北省農林科學院經濟作物研究所 E mail yinqingzhen67 收稿日期 2024 01 10 修回日期 2024 07 10 233 份中果番茄分離單株的抗病基因檢測 王珊珊 1 王晨瑜 1 楊超沙 2 蔡曉藝 1 尹慶珍 1 1 河北省農林科學院經濟作物研究所 石家莊050051 2 承德市農林科學院 河北承德067055 摘 要 通 過 篩 選 多 抗 中 果 番 茄 資 源 為 番 茄 抗 病 育 種 提 供 材 料 基 礎 以 課 題 組 引 進 的28 個 中 果 番 茄 品 種 為 材 料 每 個 品 種 選 擇8 10 株 分 離 單 株 的 幼 嫩 葉 片 采 用 五 引 物 擴 增 受 阻 突 變 體 系 PARMS 法 對 其 233 份 分 離 單 株 進 行12 種 病 害 的17 個 抗 性 基 因 檢 測 分 別 為 黃 化 曲 葉 病 毒 病 抗 性 基 因 Ty 1 Ty 5 煙 草 花 葉 病 毒 抗 病 基 因 Tm 2 a 根 結 線 蟲 抗 性 基 因 Mi 1 2 Mi 2 3 根 腐 病 抗 性 基 因 Frl 葉 霉 病 抗 性 基 因 Cf 5 Cf 9 灰 葉 斑 病 抗 性 基 因 Sm 枯 萎 病 抗 性 基 因 I 2 晚 疫 病 抗 性 基 因 Ph 3 青 枯 病 抗 性 基 因 Bwr 12 Bwr 6 細 菌 性 斑 點 病 抗 性 基 因 Pto 瘡 痂 病 抗 性 基 因 Rx 4 黃 萎 病 抗 性 基 因 Ve 1 Ve 2 結 果 顯 示 在233 份 分 離 單 株 中 含 有 抗 性 基 因 Ve 1 Sm Ve 2 Mi 1 2 的 分 離 單 株 較 多 分 別 為222 215 198 194 份 經 統(tǒng) 計 含 有7 8 個 抗 性 基 因 的 分 離 單 株 較 多 分 別 為55 50 份 含8 個 及 以 上 抗 性 基 因 的 共140 份 占 比60 綜 合 抗 性 最 終 篩 選 到3 個 含 有12 個 抗 性 基 因 的 分 離 單 株 分 別 為2 2 5 4 21 3 含 有11 個 抗 性 基 因 的 有21 個 分 別 為1 1 1 3 2 3 2 4 2 7 2 8 4 2 4 4 4 5 5 7 5 8 8 1 8 7 8 8 12 1 12 2 12 5 18 7 18 8 20 8 26 2 多抗資源較為豐富 本研究獲得了多個多抗中果 番茄資源 下一步可對篩選的分離單株 進行純化 為 篩選多抗中果番茄提供基礎材料 關鍵詞 中果番茄 分離單株 五引物擴增受阻突變體系 抗性檢測 中圖分類號 S641 2 文獻標識碼 A 論文編號 casb2024 0012 Detection of Disease Resistance Genes in 233 Medium Fruit Tomato Isolates WANG Shanshan 1 WANG Chenyu 1 YANG Chaosha 2 CAI Xiaoyi 1 YIN Qingzhen 1 1 Institute of Cash Crops Hebei Academy of Agriculture and Forestry Sciences Shijiazhuang 050051 2 Chengde Academy of Agriculture and Forestry Sciences Chengde 067055 Abstract In order to screen the resources of medium fruit tomato with multiple resistances and provide material basis for tomato disease resistance breeding using 28 medium fruit tomato varieties introduced by our research group as materials 17 resistance genes of 12 diseases were detected by five primer amplification inhibited mutation system PARMS method including yellow leaf curl virus resistance genes Ty 1 and Ty 5 tobacco mosaic virus resistance gene Tm 2 a root nematode resistance genes Mi 1 2 and Mi 2 3 Fusarium crown and root rot resistance gene Frl leaf mold resistance genes Cf 5 and Cf 9 grey leaf spot resistance genes Sm wilt resistance gene I 2 late blight resistance gene Ph 3 bacterial wilt resistance genes Bwr 12 and Bwr 6 bacterial speck resistance gene Pto bacterial spot resistance gene Rx 4 Verticillium wilt resistance gene Ve 1 and Ve 2 Among the 233 isolates there were 222 215 198 and 194 isolates containing the resistance genes0 引言 番 茄 Solanum lycopersicum 原 產 于 南 美 洲 具 有 獨 特 的 風 味 適 應 性 強 容 易 栽 培 近 年 來 已 成 為 世 界 上 重 要 的 蔬 菜 作 物 1 番 茄 中 含 有 豐 富 的 營 養(yǎng) 物 質 深 受 消 費 者 的 喜 愛 由 于 消 費 水 平 的 提 高 消 費 者 對 于 番 茄 的 需求正在發(fā)生轉變 近幾年更加注重番茄的口感 對于 形狀外觀要求更加多樣化 因此不斷培育適應市場且 綜 合 品 質 較 好 的 番 茄 新 品 種 是 育 種 家 長 久 的 課 題 中國是世界上番茄栽培面積最大且消費量最高的 國 家 番 茄 栽 培 主 要 以 設 施 栽 培 為 主 2 多 年 來 設 施 番 茄 連 作 障 礙 越 來 越 嚴 重 輪 作 倒 茬 困 難 病 害 多 發(fā) 3 產 量 降 低 造 成 了 巨 大 經 濟 損 失 且 農 藥 化 肥 的 不正確使用 不僅會造成環(huán)境污染 還會危害人類身體 健康 因此培育多抗番茄品種是最為健康有效的方法 近 年 來 分 子 標 記 輔 助 選 擇 技 術 得 到 快 速 發(fā) 展 相 比于傳統(tǒng)育種技術 抗病基因的發(fā)現(xiàn)可提高鑒定效率 縮 短 育 種 周 期 提 高 抗 病 基 因 聚 合 效 率 黃 化 曲 葉 病 毒病是番茄上毀滅性的病害 主要由煙粉虱介導傳播 傳 播 迅 速 防 治 較 為 困 難 4 到 目 前 為 止 研 究 者 確 定 了6 個 抗TY 病 毒 的 基 因 5 7 其 中 編 碼DFDGD 家 族 的 Ty 1 和 Ty 3 已 被 鑒 定 為 等 位 基 因 8 根 結 線 蟲 病 已 發(fā) 現(xiàn)9 個 Mi 抗 性 基 因 其 中 Mi 1 是 常 用 抗 病 基 因 4 9 番 茄 花 葉 病 毒 ToMV 是 番 茄 中 傳 染 性 最 強 的 病 毒 病 害 之 一 到 目 前 為 止 已 有 Tm 1 Tm 2 和 Tm 2 2 抗 ToMV 基 因 被 報 道 并 用 于 番 茄 品 種 開 發(fā) 10 番 茄 葉 霉 病 是 由 半 知 菌 亞 門 的 黃 枝 孢 菌 引 起 的 該 病 害 在 國 內 北 方 發(fā) 生 較 為 嚴 重 防 治 番 茄 葉 霉 病 最 有 效 的 方 法 就 是 培 育 抗 病 品 種 抗 病 基 因 應 用 最 為 廣 泛 的 還 是 Cf 5 Cf 9 11 12 頸 腐 根 腐 病 是 由 尖 孢 鐮 刀 菌Forl Fusarium oxysporum f sp radicis lycopersici 造 成 的 一 種 危 害 番 茄 極 大 的 土 傳 病 害 抗 性 基 因 Frl 被 定 位 在 第9 號 染 色 體 上 13 其 他 病 害 的 抗 性 基 因 很 多 也 被 應 用 主 要 有 灰 葉 斑 病 抗 性 基 因 Sm 14 15 定 位 在 番 茄 的11 號 染 色 體 上 枯 萎 病 抗 性 基 因 I 2 I 3 16 抗 斑 萎 病 毒 病 基 因 Sw 5 17 晚 疫 病 抗 性 基 因 Ph 3 18 青 枯 病 抗 性 基 因 Bwr 12 Bwr 6 19 細 菌 性 斑 點 病 抗 性 基 因 Pto 20 瘡 痂 病 抗性基因 Rx 4 21 黃萎病抗性基因 Ve 1 Ve 2 22 PARMS Penta primer amplification refractory mutation system 五 引 物 擴 增 受 阻 突 變 體 系 23 是 一 種 結 合 了1 對 通 用 熒 光 引 物 1 對SNP 等 位 基 因 特 異 引 物 以 及1 條 反 向 共 用 引 物 的SNPPCR 分 析 技 術 24 利 用 前 人 研 究 的 抗 性 基 因 的SNP 位 點 可 快 速 簡 單 進 行 SNP 等位基因基因型檢測 提高檢測效率 25 本 研 究 以 課 題 組 引 進 的28 個 中 果 番 茄 品 種 為 材 料 采 用PARMS 方 法 對 其233 份 分 離 單 株 的12 種 病 害 的17 個 抗 性 基 因 進 行 檢 測 分 別 為 黃 化 曲 葉 病 毒 病 抗 性 基 因 Ty 1 Ty 5 煙 草 花 葉 病 毒 抗 病 基 因 Tm 2 a 根 結 線 蟲 抗 性 基 因 Mi 1 2 Mi 2 3 根 腐 病 抗 性 基 因 Frl 葉 霉 病 抗 性 基 因 Cf 5 Cf 9 灰 葉 斑 病 抗 性 基 因 Sm 枯 萎 病 抗 性 基 因 I 2 晚 疫 病 抗 性 基 因 Ph 3 青 枯 病 抗 性 基 因 Bwr 12 Bwr 6 細 菌 性 斑 點 病 抗 性 基 因 Pto 瘡 痂 病 抗 性 基 因 Rx 4 黃 萎 病 抗 性 基 因 Ve 1 Ve 2 以 期 為 篩 選 多抗中果番茄提供材料基礎 1 材料與方法 1 1 試驗材料 供試用中果番茄定植于河北省農林科學院經濟作 物研究所日光溫室 試驗時間為2023 年1 6 月 本研 究 選 擇28 個 中 果 番 茄 品 種 表1 每 個 品 種 選 擇8 10 株分離單株的幼嫩葉片進行抗性基因檢測 1 2 試驗方法 1 2 1 DNA 提 取 取100mg 番 茄 幼 嫩 的 葉 片 于EP 管 中 加 入 研 磨 珠 液 氮 冷 卻 后 置 于 高 通 量 組 織 研 磨 器 寧 波 新 芝Scientz 192 中 研 磨 研 磨 后 的 樣 品 按 照 康 為 世 紀 公 司 的 新 型 植 物 基 因 組DNA 提 取 試 劑 盒 的 步 驟 進 行DNA 的 提 取 并 采 用 微 量 分 光 光 度 計 檢 測 提 取 的DNA 的 濃 度 1 2 2 檢 測 方 法 檢 測 方 法 按 照 楊 超 沙 等 26 的 方 法 利 用PARMS SNP 檢 測 技 術 對17 個 抗 性 基 因 進 行 檢 測 根 據(jù)PARMSmastermix 武 漢 市 景 肽 生 物 科 技 有 限 公 司 說 明 書 配 制PCR 反 應 體 系 采 用Tecan F200 掃 描 FAM HEX 和ROX 信 號 利 用SNPDecoder 對 數(shù) 據(jù) 進 Ve 1 Sm Ve 2 and Mi 1 2 respectively The isolates with 7 and 8 resistance genes were 55 and 50 respectively 140 isolates were with 8 or more resistance genes accounting for 60 3 isolated strains containing 12 resistance genes were screened which were 2 2 5 4 and 21 3 And there were 21 isolated strains containing 11 resistance genes which were 1 1 1 3 2 3 2 4 2 7 2 8 4 2 4 4 4 5 5 7 5 8 8 1 8 7 8 8 12 1 12 2 12 5 18 7 18 8 20 8 26 2 Polyresistant tomato resources were abundant In this study a number of medium fruit tomato resources with multiple antibodies were obtained and the next step can be purification of the isolated single strain providing a material basis for screening medium fruit tomato with multiple antibodies Keywords medium fruit tomato isolates PARMS resistance detection 王 珊 珊 等 233 份 中 果 番 茄 分 離 單 株 的 抗 病 基 因 檢 測 25中國農學通報 行分析并統(tǒng)計結果 1 3 數(shù)據(jù)分析 試 驗 數(shù) 據(jù) 采 用Microsoft office Excel 2010 軟 件 進 行分析 2 結果與分析 本 研 究 采 用PARMS 方 法 檢 測233 份 分 離 單 株 的17 個 抗 性 基 因 分 別 為 黃 化 曲 葉 病 毒 病 抗 性 基 因 Ty 1 Ty 5 煙 草 花 葉 病 毒 抗 病 基 因 Tm 2 a 根 結 線 蟲 抗 性 基 因 Mi 1 2 Mi 2 3 根 腐 病 抗 性 基 因 Frl 葉 霉 病 抗 性 基 因 Cf 5 Cf 9 灰 葉 斑 病 抗 性 基 因 Sm 枯 萎 病 抗 性 基 因 I 2 晚 疫 病 抗 性 基 因 Ph 3 青 枯 病 基 因 Bwr 12 Bwr 6 細 菌 性 斑 點 病 基 因 Pto 瘡 痂 病 基 因 Rx 4 黃 萎 病 基 因 Ve 1 Ve 2 2 1 抗性基因檢測 2 1 1 番 茄 黃 化 曲 葉 病 毒 病 抗 性 基 因 Ty 1 Ty 5 的 檢 測 233 份 分 離 單 株 中 含 有 黃 化 曲 葉 病 毒 病 抗 性 基 因 Ty 1 的 植 株 共141 份 圖1 占 比60 52 其 中 含 純 合 圖中綠點表示不含抗性基因 紅點表示雜合抗性基因 藍點表示含純合抗性基因 黑色表示陰性對照 灰點表示無法判斷 下同 圖 1 黃化曲葉病毒病抗性基因 Ty 1 Ty 5 檢測結果 表 1 中果番茄種質資源 編號 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 品種名稱 2122F2 1 3 JY213F2 5 1 JM1 號F2 2 6 JM2 號F2 1 5 FQ4 號F2 1 8 T2204F2 3 3 口感9 號F2 5 3 HL15 號F2 4 1 HL16 號F2 7 1 HXF2 4 8 166 2 號F2 1 2 CM 三號F2 6 2 2138F2 2 3 NG803F2 4 5 編號 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 品種名稱 303F2 3 1 CXF2 1 5 MLF2 2 3 CM1 號F2 8 2 ZHLBF2 9 2 YMGTF2 7 4 36009F2 5 8 39717F2 4 4 FBY1317F2 6 1 TJ1 號F2 4 2 TJ2 號F2 1 8 TJ3 號F2 2 4 TJ4 號F2 3 1 TJ5 號F2 4 2 圖 2 煙草花葉病毒病抗性基因 Tm 2 a 檢測結果 抗 性 基 因 植 株48 份 含 雜 合 抗 性 基 因 植 株93 份 含 有 黃 化 曲 葉 病 毒 病 抗 性 基 因 Ty 5 的 植 株 共8 份 占 比 3 43 其 中 含 純 合 抗 性 基 因 植 株2 份 含 雜 合 抗 性 基 因植株6 份 2 1 2 煙 草 花 葉 病 毒 抗 性 基 因 Tm 2 a 檢 測 233 份 分 離 單 株 中 含 有 煙 草 花 葉 病 毒 抗 性 基 因 Tm 2 a 的 植 株 共 100 份 圖2 占 比42 92 其 中 含 純 合 抗 性 基 因 植 株 40 份 含雜合抗性基因植株60 份 2 1 3 根結 線蟲 抗性 基因 Mi 1 2 Mi 2 3 檢測 233 份分 離 單 株 中 含 有 根 結 線 蟲 抗 性 基 因 Mi 1 2 的 植 株 共194 份 圖3 占 比83 26 其 中 含 純 合 抗 性 基 因 植 株154 份 含 雜 合 抗 性 基 因 植 株40 份 含 有 根 結 線 蟲 抗 性 基 因 Mi 2 3 的 植 株 共150 份 占 比64 38 其 中 含 純 合 抗 26性基因植株83 份 含雜合抗性基因植株67 份 2 1 4 根 腐 病 抗 性 基 因 Frl 檢 測 233 份 分 離 單 株 中 含 有 根 腐 病 抗 性 基 因 Frl 的 植 株 共128 份 圖4 占 比 54 94 其 中 含 純 合 抗 性 基 因 植 株59 份 含 雜 合 抗 性 基因植株69 份 2 1 5 葉 霉 病 抗 性 基 因 Cf 5 Cf 9 檢 測 233 份 分 離 單 株 中 含 有 葉 霉 病 基 因 Cf 5 的 植 株 共57 份 圖5 占 比 24 46 其 中 含 純 合 抗 性 基 因 植 株22 份 含 雜 合 抗 性 基 因 植 株35 份 含 有 葉 霉 病 基 因 Cf 9 的 植 株 共80 份 占 比34 33 其 中 含 純 合 抗 性 基 因 植 株34 份 含 雜 合 抗性基因植株46 份 2 1 6 灰 葉 斑 病 抗 性 基 因 Sm 檢 測 233 份 分 離 單 株 中 含 有 灰 葉 斑 病 抗 性 基 因 Sm 的 植 株 共215 份 圖6 占 比92 27 其 中 含 純 合 抗 性 基 因 植 株185 份 含 雜 合 抗 性基因植株30 份 圖 3 根結線蟲病抗性基因 Mi 1 2 Mi 2 3 的檢測結果 圖 5 葉霉病抗性基因 Cf 5 Cf 9 的檢測結果 圖 4 根腐病抗性基因 Frl 的檢測結果 王 珊 珊 等 233 份 中 果 番 茄 分 離 單 株 的 抗 病 基 因 檢 測 27中國農學通報 2 1 7 枯 萎 病 抗 性 基 因 I 2 檢 測 233 份 分 離 單 株 中 含 有 枯 萎 病 抗 性 基 因 I 2 的 植 株 共165 份 圖7 占 比 70 82 其 中 含 純 合 抗 性 基 因 植 株154 份 含 雜 合 抗 性 基因植株11 份 2 1 8 晚 疫 病 抗 性 基 因 Ph 3 檢 測 233 份 分 離 單 株 中 含 有 晚 疫 病 抗 性 基 因 Ph 3 的 植 株 共17 份 圖8 占 比 7 30 其 中 含 純 合 抗 性 基 因 植 株3 份 含 雜 合 抗 性 基 因植株14 份 2 1 9 青 枯 病 抗 性 基 因 Bwr 12 Bwr 6 檢 測 233 份 分 離 單 株 中 含 有 青 枯 病 抗 性 基 因 Bwr 12 的 植 株 共48 份 占 比 20 6 圖9 其 中 含 純 合 抗 性 基 因 植 株17 份 含 雜 合 抗 性 基 因 植 株31 份 含 有 青 枯 病 抗 性 基 因 Bwr 6 的 植 株 共130 份 占 比55 79 其 中 含 純 合 抗 性 基 因 植 株 42 份 含雜合抗性基因植株88 份 2 1 10 細 菌 性 斑 點 病 抗 性 基 因 Pto 檢 測 233 份 分 離 單 圖 6 灰葉斑病抗性基因 Sm 的檢測結果 圖 9 青枯病抗性基因 Bwr 12 Bwr 6 的檢測結果 圖 7 枯萎病抗性基因 I 2 的檢測結果 圖 8 晚疫病抗病基因 Ph 3 的檢測結果 28株 中 含 有 細 菌 性 斑 點 病 抗 性 基 因 Pto 的 植 株 共5 份 圖 10 占比2 15 均為純合抗性基因 2 1 11 瘡 痂 病 抗 性 基 因 Rx 4 檢 測 233 份 分 離 單 株 中 含 有 瘡 痂 病 抗 性 基 因 Rx 4 的 植 株 共6 份 圖11 占 比 2 58 其 中 含 純 合 抗 性 基 因 植 株3 份 含 雜 合 抗 性 基 因植株3 份 2 1 12 黃 萎 病 抗 性 基 因 Ve 1 Ve 2 檢 測 233 份 分 離 單 株 中 含 有 黃 萎 病 抗 性 基 因 Ve 1 的 植 株 共222 份 圖12 占 比95 28 其 中 含 純 合 抗 性 基 因 植 株196 份 含 雜 合 抗 性 基 因 植 株26 份 含 有 黃 萎 病 抗 性 基 因 Ve 2 的 植 株 共198 份 占 比84 98 其 中 含 純 合 抗 性 基 因 植 株163 份 含雜合抗性基因植株35 份 根 據(jù) 以 上 結 果 可 以 看 出 黃 萎 病 抗 性 基 因 Ve 1 灰 葉 斑 病 抗 性 基 因 Sm 黃 萎 病 抗 性 基 因 Ve 2 根 結 線 蟲 抗 性 基 因 Mi 1 2 的 分 離 單 株 較 多 分 別 為222 215 198 194 份 占 總 數(shù) 的80 以 上 而 含 有 黃 化 曲 葉 病 毒 病 抗 性 基 因 Ty 5 細 菌 性 斑 點 病 基 因 Pto 瘡 痂 病 基 因 Rx 4 的分離單株較少 分別有8 5 6 份 資源較為短缺 2 2 抗性個數(shù)統(tǒng)計 由 表2 3 可 看 出 233 份 中 果 番 茄 分 離 單 株 含 有3 個 抗 性 基 因 的 有3 株 含 有4 個 抗 性 基 因 的 有2 株 含 有5 個 抗 性 基 因 的 有10 株 含 有6 個 抗 性 基 因 的 有22 株 含 有7 個 抗 性 基 因 的 有55 株 含 有8 個 抗 性 基 因 的 有50 株 含 有9 個 抗 性 基 因 的 有39 株 含 有10 個 抗 性 基 因 的 有28 株 含 有11 個 抗 性 基 因 的 有21 株 分 別 為 1 1 1 3 2 3 2 4 2 7 2 8 4 2 4 4 4 5 5 7 5 8 8 1 8 7 8 8 12 1 12 2 12 5 18 7 18 8 20 8 26 2 含 有12 個 抗 性 基 因 的 分 離 單 株 有3 份 分 別 為2 2 5 4 21 3 本研究含有8 個及以上抗性基因的共140 份 占比 60 多 個 抗 性 基 因 的 植 株 較 多 可 為 后 期 抗 病 育 種 及 圖 12 黃萎病抗性基因 Ve 1 Ve 2 的檢測結果 王 珊 珊 等 233 份 中 果 番 茄 分 離 單 株 的 抗 病 基 因 檢 測 圖 10 細菌性斑點病基因 Pto 的檢測結果 圖 11 瘡痂病抗性基因 Rx 4 的檢測結果 29中國農學通報 抗病基因 研究提供材料基礎 3 討論 張 文 慧 27 對 陜 南 山 區(qū)54 個 番 茄 地 方 品 種 的 Ty 2 I 2 Tm 2 a Cf 9 Mi 1 5 個 抗 病 基 因 進 行 鑒 定 發(fā) 現(xiàn) 有 3 份材料同時檢測出5 個抗病基因分子標記 18 份材料 檢 測 出2 個 以 上 抗 病 基 因 分 子 標 記 楊 超 沙 等 26 對81 份 大 果 番 茄 材 料 共1323 株 自 交 系 進 行 了10 個 抗 病 基 因 的 檢 測 發(fā) 現(xiàn) 含2 個 抗 病 基 因 的 材 料4 個 含3 個 抗 病 基 因 的 材 料18 個 含4 個 抗 病 基 因 的 材 料35 個 含5 個 抗 病 基 因 的 材 料21 個 含6 個 抗 病 基 因 的 材 料3 個 范 惠 冬 等 28 對105 份 番 茄 種 質 資 源 的8 個 抗 性 基 因 Mi 1 I 2 Cf 9 Ph 3 Ty 1 Ty 3 Tm 2 a Sw 分 子 標 記 檢 測 含3 個 以 下 抗 性 基 因 材 料 有78 份 含4 個 抗 病 基 因 的 材 料 有9 份 含5 個 抗 病 基 因 的 材 料 有11 份 含6 個 抗 病 基 因 的 材 料 有6 份 含7 個 抗 病 基 因 的 材 料 有1 份 本 研 究 對 抗 性 基 因 進 行 統(tǒng) 計 發(fā) 現(xiàn) 含 有3 個 抗 性 基因的有3 株 含有4 個抗性基因的有2 株 含有5 個抗 性 基 因 的 有10 株 含 有6 個 抗 性 基 因 的 有22 株 含 有7 樣品編號 1 1 1 3 2 2 2 3 2 4 2 5 2 7 2 8 4 2 4 4 4 5 5 4 5 7 5 8 8 1 8 8 12 1 12 2 12 5 18 7 18 8 20 8 21 3 26 2 樣品名稱 2122F2 1 3 1 2122F2 1 3 3 JY213F2 5 1 2 JY213F2 5 1 3 JY213F2 5 1 4 JY213F2 5 1 5 JY213F2 5 1 7 JY213F2 5 1 8 JM2 號F2 1 5 2 JM2 號F2 1 5 4 JM2 號F2 1 5 5 FQ4 號F2 1 8 4 FQ4 號F2 1 8 7 FQ4 號F2 1 8 8 HL15 號F2 4 1 1 HL15 號F2 4 1 8 CM 三號F2 6 2 1 CM 三號F2 6 2 2 CM 三號F2 6 2 5 CM1 號F2 8 2 7 CM1 號F2 8 2 8 YMGTF2 7 4 8 36009F2 5 8 3 TJ3 號F2 2 4 2 Ty1 H 抗 H 抗 H 抗 H 抗 H H 抗 H H H 抗 抗 H H H H H H H H Ty5 H 抗 H H H H Mi1 2 H H H 抗 H 抗 H 抗 抗 抗 抗 H H H H H 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 H Mi23 H H 抗 抗 抗 抗 抗 抗 H H H H H TM2 抗 抗 抗 H H H H 抗 抗 抗 H H H H Cf5 H H H H H H H H 抗 H 抗 H H H Cf9 H H 抗 抗 H 抗 抗 抗 H H H H H H H Frl H H H H H H H 抗 H H Bwr12 抗 抗 抗 H H H 抗 抗 抗 H H H H 抗 抗 抗 H H Bwr6 H 抗 H 抗 H H H 抗 H H H 抗 抗 H H H H H H H H I2 H H H H 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 Ph3 H H H H H H Pto 抗 抗 抗 抗 Rx4 抗 H H H 抗 SM H H 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 H 抗 H Ve1 抗 抗 抗 H H 抗 H H 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 Ve2 抗 抗 抗 H H 抗 H H 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 抗 表 3 中果番茄種質資源抗性基因統(tǒng)計 11 個及以上 注 抗 表示含純合抗性基因 H 表示雜合抗性基因 表示不含抗性基因 表 2 抗性基因個數(shù)統(tǒng)計 抗性基因個數(shù) 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 資源份數(shù) 3 2 10 22 55 50 39 28 21 3 占比 1 3 0 9 4 3 9 4 23 6 21 5 16 7 12 0 9 0 1 3 30個 抗 性 基 因 的 有55 株 含 有8 個 抗 性 基 因 的 有50 株 含 有9 個 抗 性 基 因 的 有39 株 含 有10 個 抗 性 基 因 的 有 28 株 含 有11 個 抗 性 基 因 的 有21 株 含 有12 個 抗 性 基 因 的 有3 份 多 抗 資 源 相 對 較 為 豐 富 這 可 能 是 因 為 本 研 究 檢 測 了17 個 抗 性 基 因 檢 測 的 基 因 較 多 多 抗 資源更為豐富 因 目 前 市 場 對 于 中 果 番 茄 的 口 感 品 質 要 求 較 高 本 研 究 的 不 足 之 處 在 于 應 進 行 多 抗 中 果 番 茄 的 品 質 檢 測 為 篩 選 多 抗 優(yōu) 質 番 茄 提 供 更 大 的 篩 選 空 間 4 結論 本 研 究 對28 個 中 果 番 茄 品 種233 份 分 離 單 株 進 行12 種 病 害 的17 個 抗 性 基 因 檢 測 結 果 表 明 供 試 的 233 份 分 離 單 株 中 含 有 黃 萎 病 抗 性 基 因 Ve 1 的 分 離 單 株 共222 份 含 有 灰 葉 斑 病 抗 性 基 因 Sm 的 分 離 單 株 共215 份 含 有 黃 萎 病 抗 性 基 因 Ve 2 的 分 離 單 株 共 198 份 含 有 根 結 線 蟲 抗 性 基 因 Mi 1 2 共194 份 以 上4 個 抗 性 基 因 在 本 研 究 大 多 數(shù) 的 分 離 單 株 中 含 有 的 較 多 占 總 數(shù) 的80 以 上 而 含 有 黃 化 曲 葉 病 毒 病 抗 性 基 因 Ty 5 細 菌 性 斑 點 病 基 因 Pto 瘡 痂 病 基 因 Rx 4 的 分 離 單 株 較 少 分 別 有8 5 6 份 資 源 較 為 短 缺 通 過 對 每 個 分 離 單 株 抗 性 基 因 個 數(shù) 進 行 統(tǒng) 計 發(fā) 現(xiàn) 含 有8 個 及 以 上 抗 性 基 因 的 共140 份 占 比60 多 個 抗 性 基 因 的 植 株 較 多 含 有11 個 抗 性 基 因 的 有21 份 分 別 為1 1 1 3 2 3 2 4 2 7 2 8 4 2 4 4 4 5 5 7 5 8 8 1 8 7 8 8 12 1 12 2 12 5 18 7 18 8 20 8 26 2 含 有12 個 抗 性 基 因 的 分 離 單 株 有3 份 分 別 為2 2 5 4 21 3 本 研 究 篩 選 的 多 抗 中 果 番 茄 資 源 可 為 后 期 抗病育種提供豐富的材料基礎 參考文獻 1 許 向 陽 趙 爽 何 夢 曦 等 128 份 番 茄 種 質 資 源 主 要 農 藝 性 狀 鑒 定 及抗病性評價 J 東北農業(yè)大學學報 2022 53 5 32 41 2 田 永 強 高 麗 紅 設 施 番 茄 高 品 質 栽 培 理 論 與 技 術 J 中 國 蔬 菜 2021 2 30 40 3 李 天 來 我 國 設 施 蔬 菜 科 技 與 產 業(yè) 發(fā) 展 現(xiàn) 狀 及 趨 勢 J 中 國 農 村 科技 2016 5 75 77 4 楊 超 沙 王 國 華 吳 志 明 等 番 茄 黃 化 曲 葉 病 毒 及 根 結 線 蟲 抗 性 基 因的檢測 J 河北農業(yè)大學學報 2018 41 2 73 76 5 ZAMIR D EKSTEIN MICHELSON I ZAKAY Y et al Mapping and introgression of a tomato yellow leaf curl virus tolerance gene TY 1 J Theoreticalandappliedgenetics 1994 88 2 141 146 6 YAMAGUCHI H OHNISHI J SAITOA et al An NB LRR gene TYNBS 1 is responsible for resistance mediated by the Ty 2 Begomovirus resistance locus of tomato J Theoretical and applied genetics 2018 131 6 1345 1362 7 JUNG J KIM H J LEE J M et al Gene based molecular marker system for multiple disease resistances in tomato against tomato yellow leaf curl virus late blight and verticillium wilt J Euphytica 2015 205 2 599 613 8 CARO M VERLAAN M G JULI N O et al Assessing the genetic variation of Ty 1 and Ty 3 alleles confer