干熱處理在防治西瓜和蒲瓜黃瓜 綠斑駁花葉病毒上的研究 廖慧敏 王婉婷 王雨晴 程佳雨 梁金方 包衛(wèi)國 近年來 隨著作物栽培模式和栽培面積的不 斷擴(kuò)大 地域間的種子運(yùn)輸與貯藏導(dǎo)致作物的種 傳病害廣泛傳播 引起作物種傳病害的病原種類 有很多 其中黃瓜綠斑駁花葉病毒 Cucumber Green Mottle Mosaic Virus CGMMV 主要侵染葫蘆 科作物 1 為害嚴(yán)重且分布廣泛 嚴(yán)重影響西瓜 蒲 瓜等葫蘆科作物的商業(yè)化制種及生產(chǎn) CGMMV是帚狀病毒科煙草花葉病毒屬 是正 單鏈RNA 病毒 病毒性質(zhì)穩(wěn)定 2 被 CGMMV 侵染 的植物主要表現(xiàn)為植株葉片花葉 斑駁 褪綠 果實(shí) 出現(xiàn)水漬 纖維化 但不同寄主表現(xiàn)不同 3 該病毒 侵染力強(qiáng) 且傳播途徑多樣 對經(jīng)濟(jì)作物的生產(chǎn)有 較大影響 20世紀(jì) 60 年代 CGMMV 通過黃瓜 蒲 瓜和西瓜從歐洲傳到印度 日本 20世紀(jì)80年代 傳 入我國臺灣 到21世紀(jì) 中亞 東亞 南亞一些國家 和幾乎所有的歐洲國家均有發(fā)生 4 2006年 我國將 其確定為全國農(nóng)業(yè)植物檢疫性有害植物 屬國家三 類檢疫性病害 并列入 中華人民共和國進(jìn)境植物檢 疫性有害生物名錄 5 2019年5月 寧波郵局海關(guān) 截獲攜帶CGMMV 的非法入境植物種子 是全國首 次從非法郵寄進(jìn)境的植物種子中截獲該病毒 6 CGMMV已在我國廣泛分布 每年給商業(yè)育種公司 苗圃 商業(yè)水果和蔬菜生產(chǎn)商 以及食品零售等行 業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失 葫蘆科植物在采收 運(yùn)輸 貯存過程中都易受 到病原微生物的侵染 種子攜帶的CGMMV是植株 苗期和成株期的主要侵染源 可能造成葫蘆科作物 大規(guī)模減產(chǎn)甚至絕收 7 所以對帶菌 帶毒種子的消 摘 要 為探索防治西瓜 蒲瓜種傳病害黃瓜綠斑駁花葉病毒 Cucumber Green Mottle Mosaic Virus CGMMV 的有效 方法 通過干熱物理消毒法 將帶毒的西瓜和蒲瓜種子分別在消毒處理機(jī)進(jìn)行上層 中層 下層消毒和不消毒 CK CK 處理 結(jié)果表明 干熱處理防治西瓜種子 CGMMV效果顯著 對蒲瓜種子有一定防治效果 且以在消毒處理機(jī)中 上層效果更佳 但干熱處理會降低西瓜種子的發(fā)芽率 對蒲瓜種子發(fā)芽率沒有影響 干熱消毒處理可降低種子攜帶 病毒量 且不同種類及品種所需的干熱程序不同 關(guān)鍵詞 西瓜 蒲瓜 種子 發(fā)芽率 CGMMV 干熱處理 DOI 10 3865 j issn 1001 3547 2024 16 005 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 基金項(xiàng)目 浙江省農(nóng)業(yè)新品種選育重大科技專項(xiàng) 2021C02065 1 5 王寧東 寧波微萌種業(yè)有限公司 浙江寧波 315101 E mail wnd 邵橋 吳長江 甘寧 寧波微萌種業(yè)有限公司 吳新勝 通訊作者 寧波微萌種業(yè)有限公司 浙江寧波 315101 E mail wxs 收稿日期 2024 07 23 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null null null null null null null null null null null null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null null null null null null null null null null null 表 5 沐甜 1號品質(zhì)鑒定 品種 可溶性固形物 維生素 C mg g 番茄紅素 mg g 沐甜 1號 6 50 0 19 0 026 橙色密碼 CK 7 00 0 12 0 022 2020 40 31 34 37 6 苑國良 周明 鄧?yán)?等 多抗高品質(zhì)口感型番茄新品種京 番 309的選育 J 中國蔬菜 2023 6 97 100 7 林文 福州地區(qū)口感型水果番茄越冬設(shè)施栽培技術(shù) J 長 江蔬菜 2023 11 40 42 8 呂金浮 李美芹 楊園園 等 口感番茄新品種 濰科玉玲 瓏 的選育 J 北方園藝 2024 1 157 161 9 苑國良 周明 鄧?yán)?等 多抗高品質(zhì)口感型番茄新品種京 番 309的選育 J 中國蔬菜 2023 6 97 100 10 劉小云 趙永威 ?？嗣?等 優(yōu)質(zhì)口感型番茄酸甜果 10 號高效栽培技術(shù) J 長江蔬菜 2021 23 54 56 11 蔣欣梅 董然 鄭姍姍 等 不同性質(zhì)鈣肥施用對番茄產(chǎn) 量及品質(zhì)的影響 J 長江蔬菜 2015 20 77 79 2024 16 14 表 1 干熱處理機(jī)干熱消毒程序 程式段號 溫度 濕度 時(shí)間 h 1 35 20 12 2 50 20 12 3 60 20 12 4 66 20 3 5 68 20 72 6 65 20 3 7 60 20 12 8 50 20 6 表 2 干熱處理對西瓜種子發(fā)芽率的影響 批次 處理 播種數(shù) 粒 播種 10 d后 發(fā)芽數(shù) 株 播種 10 d后 發(fā)芽率 第 1批 CK 300 185 61 67 上層 300 104 34 67 中層 300 166 55 33 下層 300 178 59 33 第 2批 CK 300 215 71 67 上層 300 161 53 67 中層 300 168 56 00 下層 300 172 57 33 表 3 干熱處理對蒲瓜種子發(fā)芽率的影響 批次 處理 播種數(shù) 粒 播種 10 d后 發(fā)芽數(shù) 株 播種 10 d后 發(fā)芽率 第 1批 CK 100 83 83 00 上層 100 89 89 00 中層 100 78 78 00 下層 100 83 83 00 第 2批 CK 100 89 89 00 上層 100 90 90 00 中層 100 88 88 00 下層 100 87 87 00 毒處理尤為重要 目前 對種子進(jìn)行消毒處理方法 多樣 包括濕熱處理 干熱處理 藥劑處理和干熱 藥劑處理 8 由于CGMMV存在于種子內(nèi)部 藥劑處理 只能對種子表面消毒 往往效果甚微 可作為防治 CGMMV的輔助手段 干熱處理是一種常用的消毒 方法 是加強(qiáng)帶毒種子防治管理的關(guān)鍵 目前已被 證實(shí)為防治 CGMMV最為有效的方法 其原理是干 熱處理可使CGMMV鈍化 從而失去侵染能力 9 另 外 研究表明 干熱處理會影響種子胚芽從而降低 種子發(fā)芽率 但不同種類及品種種子對于干熱處理 的溫度敏感性有所差異 為此 寧波微萌種業(yè)有限公 司特開展現(xiàn)有干熱處理程序?qū)GMMV陽性種子的 消毒效果及對種子發(fā)芽率的影響研究 并總結(jié)如下 1 材料與方法 1 1 試驗(yàn)材料 供試材料是由鄭州果樹所提供的接種CGMMV 的西瓜 美都 蒲瓜 奔霄5號 植株收獲經(jīng)酶聯(lián)免 疫吸附測定 ELISA 和逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng) RT PCR 測定確認(rèn)感染CGMMV的種子 1 2 試驗(yàn)方法 干熱處理 試驗(yàn)設(shè)計(jì)通過隨機(jī)抽樣 于2023 年 3 月 1 日各抽取 8 kg 感染 CGMMV 的西瓜和蒲 瓜種子 西瓜和蒲瓜種子各平均分成 4 份 其中 3 份西瓜和蒲瓜種子分別放置到贛州鑫宇翔設(shè)備技 術(shù)有限公司生產(chǎn)的干熱滅菌機(jī) 型號 5HX 5 0L 05 上 中 下層進(jìn)行干熱處理 剩下的 1 份西瓜和 蒲瓜種子不進(jìn)行干熱處理作對照 CK CK 干熱 處理后西瓜上 中 下層干熱處理的樣品和未干熱 處理的樣品各抽取 300 粒種子作 2 個(gè)批次測定相 應(yīng)的指標(biāo) 干熱處理后蒲瓜上 中 下層干熱處理的 樣品和未干熱處理的樣品各抽取 100 粒種子作 2 個(gè)批次測定相應(yīng)的指標(biāo) 干熱消毒程序如表1 發(fā)芽率測定 將經(jīng)上述干熱處理后的西瓜 和蒲瓜種子置于純凈水中浸泡4 h 后將種子平鋪 在培養(yǎng)皿中的濾紙上 置于設(shè)定溫度 30 2 的植物 生長箱 型號 GXZ型 寧波江南儀器廠 培養(yǎng)至根長 1 cm 左右 于 2023 年 3 月 23 日 播種 10 d 后 分 別統(tǒng)計(jì)西瓜和蒲瓜種子的發(fā)芽數(shù) 計(jì)算發(fā)芽率 發(fā) 芽率 發(fā)芽的種子數(shù)量 測試的種子數(shù)量 100 干熱處理效果測定 將經(jīng)上述干熱處理后的 西瓜和蒲瓜種子催芽并定植于田間 西瓜和蒲瓜在 2023年4月10日 植株2葉1心期進(jìn)行田間植株病 癥觀察 并取嫩葉用逆轉(zhuǎn)錄 聚合酶鏈反應(yīng) Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction RT PCR 檢測 CGMMV 計(jì)算陽性比率 陽性比率 陽性 單株數(shù) 檢測總株數(shù) 100 RNA提取 幼苗2葉1心時(shí) 用打孔器分別 在西瓜和蒲瓜嫩葉上取樣 以 10 個(gè)植株葉片為 1 個(gè)混樣 植株葉片RNA提取采用RNAprep Pure 多 糖多酚植物總 RNA 提取試劑盒 DP441 天根生化 科技有限公司 RT PCR 檢測 RNA 反轉(zhuǎn)錄與 PCR 擴(kuò)增采 用 PrimeScript TM One Step RT PCR Kit Ver 2 天根 生化科技有限公司 2024 16 15 圖2 第1批蒲瓜干熱處理和CK 混樣電泳 注 M DNA Marker 1 10 蒲瓜干熱處理上層混樣1 10 11 20 21 30 31 40 41 50 51 60 61 70 71 80 81 90 91 100 11 20 蒲瓜干熱處理中層混樣1 10 11 20 21 30 31 40 41 50 51 60 61 70 71 80 81 90 91 100 21 30 蒲瓜干熱處理下層混樣1 10 11 20 21 30 31 40 41 50 51 60 61 70 71 80 81 90 91 100 31 40 蒲瓜CK 混樣1 10 11 20 21 30 31 40 41 50 51 60 61 70 71 80 81 90 91 100 陽性對照 陰性對照 圖1 干熱處理西瓜混樣電泳 注 M DNA Marker 1 11 西瓜干熱處理上層11個(gè)混樣 12 22 西瓜干熱處理中層11個(gè)混樣 23 33 西瓜干熱處理下層11個(gè)混樣 34 44 CK 西瓜11個(gè)混樣 陽性對照 陰性對照 1 000 bp 700 bp 400 bp 100 bp 1 000 bp 700 bp 400 bp 100 bp 400 bp 700 bp 200 bp 1 000 bp 400 bp 700 bp 200 bp 1 000 bp PCR 反應(yīng)體系 為 RNA 模板 2 5 L 正反向引物各0 5 L 2 1 step Buffer 6 5 L PrimeScript One Step Enzyme 0 25 L 用超 純水補(bǔ)足至10 L PCR擴(kuò)增程序?yàn)?45 反轉(zhuǎn)錄 30 min 95 預(yù)變性2 min 94 變性 30 s 60 退火 30s 72 延伸30s 循環(huán) 36次 72 延伸5 min 4 保存 PCR產(chǎn)物用 2 瓊脂糖凝膠電泳檢 測分析 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì) 利用 Excel軟件統(tǒng)計(jì)試驗(yàn)數(shù) 據(jù)并進(jìn)行數(shù)據(jù)分析 2 結(jié)果與分析 2 1 干熱處理對西瓜 和蒲瓜種子發(fā)芽率的 影響 西瓜種子經(jīng)干熱處 理機(jī)上 中 下層分別處 理后 第1批西瓜種子 播種10 d后的發(fā)芽率依次為34 67 55 33 59 33 CK為61 67 第2批西瓜種子播種 10 d 后的發(fā)芽 率依次為 53 67 56 00 57 33 CK 為 71 67 表 2 結(jié)果表明 干熱處理會降低西瓜種子的發(fā) 芽率 蒲瓜種子經(jīng)干熱處理機(jī)上 中 下層分別處理 后 第 1 批蒲瓜種子播種10 d后的發(fā)芽率依次為 89 00 78 00 83 00 CK 為83 00 第2批蒲瓜種 子播種 10 d 后的發(fā)芽率依次為 90 00 88 00 87 00 CK 為89 00 表3 結(jié)果表明 蒲瓜種子經(jīng)干 熱處理后的發(fā)芽率與 CK 無明顯差異 即干熱消毒 對蒲瓜種子的發(fā)芽率無較大影響 2 2 干熱處理的消毒效果 干熱處理對西瓜種子CGMMV的防治效果 對 干熱處理后西瓜植株2葉1心時(shí)的嫩葉提取RNA 混樣后使用引物 CGMMV1 CGMMV2 GB T 28071 2011 及作為對照的植物鑒定引物 eflaF R 經(jīng) PCR 檢測后可觀察到作為對照的引物擴(kuò)增條帶290 bp 而鑒定 CGMMV 的引物均未獲得 654 bp 的擴(kuò)增條 帶 圖1 結(jié)果表明 干熱處理對西瓜種子CGMMV 的防治效果明顯 干熱處理對蒲瓜種子CGMMV的防治效果 對 干熱處理后蒲瓜植株2葉1心時(shí)的嫩葉提取RNA 每 10株混樣后使用引物 CGMMV1 CGMMV2 GB T 28071 2011 及作為對照的植物鑒定引物 eflaF R 經(jīng) PCR 檢測后可觀察到作為對照的引物擴(kuò)增條帶 290 bp 由表4可知 第1批蒲瓜干熱上層混樣未檢 測到CGMMV 蒲瓜干熱中層混樣1 10 11 20 蒲瓜 干熱下層混樣 31 40 41 50 61 70 81 90 91 100 蒲瓜CK 混樣21 30 31 40 41 50 51 60 71 80檢 測到654 bp擴(kuò)增條帶 圖2 第2批蒲瓜CK 混樣 1 10 11 20 21 30 31 40 41 50 51 60 61 70 71 80 81 90 91 100 蒲瓜干熱上層混樣81 90 蒲瓜干 熱中層混樣11 20 61 70 蒲瓜干熱下層混樣1 10 2024 16 16 表 4 干熱處理對蒲瓜混樣 CGMMV消毒效果 批次 處理 陽性混樣 總計(jì) 第 1批 CK 21 30 31 40 41 50 51 60 71 80 5 上層 0 中層 1 10 11 20 2 下層 31 40 41 50 61 70 81 90 91 100 5 第 2批 CK 1 10 11 20 21 30 31 40 41 50 51 60 61 70 71 80 81 90 91 100 10 上層 81 90 1 中層 11 20 61 70 2 下層 1 10 11 20 21 30 31 40 41 50 51 60 61 70 71 80 81 90 9 表 5 干熱處理對蒲瓜單株 CGMMV的消毒效果 批次 處理 陽性單株 陽性比率 第 1批 CK 29 33 35 41 52 54 56 77 79 9 上層 0 中層 9 15 2 下層 32 45 67 81 94 5 CK 7 10 16 18 19 20 22 25 35 37 41 42 48 49 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 66 73 75 82 88 93 96 31 上層 82 83 85 3 中層 13 66 69 3 第 2批 下層 6 15 19 24 28 37 44 47 49 54 56 57 59 60 64 68 69 75 79 88 89 21 圖3 第2批蒲瓜干熱處理和CK 混樣電泳 注 M DNA Marker 蒲瓜干熱消毒上層混樣1 10 11 20 21 30 31 40 41 50 51 60 61 70 71 80 81 90 91 100 11 20 蒲瓜干熱消毒中層混樣1 10 11 20 21 30 31 40 41 50 51 60 61 70 71 80 81 90 91 100 21 30 蒲瓜干熱消毒下層混樣1 10 11 20 21 30 31 40 41 50 51 60 61 70 71 80 81 90 91 100 31 40 蒲瓜CK 混樣1 10 11 20 21 30 31 40 41 50 51 60 61 70 71 80 81 90 91 100 陽性對照 陰性對照 400 bp 700 bp 200 bp 1 000 bp 400 bp 700 bp 200 bp 1 000 bp 11 20 21 30 31 40 41 50 51 60 61 70 71 80 81 90檢測到654 bp擴(kuò)增條帶 圖3 對混樣檢測結(jié)果中陽性混樣組進(jìn)行單株檢測 檢測結(jié)果如表5 第1批蒲瓜種子經(jīng)干熱處理機(jī)上 中 下層干熱處理后陽性比率分別為 0 2 5 CK 的陽性比率為 9 第 2 批蒲瓜種子經(jīng)干熱處 理機(jī)上 中 下層干熱 處理后陽性比率分別 為 3 3 21 CK 的陽性比率為31 綜 合混樣和單株檢測結(jié) 果 干熱處理過的蒲瓜 仍帶有 CGMMV 病毒 殘?bào)w 但陽性比率較 CK 明顯降低 并且以 干熱處理機(jī)的上中層 的消毒效果更佳 2 3 CGMMV 侵染植 株后的癥狀表現(xiàn) 不同的葫蘆科作 物品種與同一物種栽培 品種的 CGMMV 癥狀 有所不同 在葫蘆科作 物中 CGMMV 表現(xiàn)為 植株生長緩慢 矮化 葉 片斑駁 花葉甚至變白 枯萎 莖和花穗梗形成 棕色的壞死條 甚至整 株植物都可能過早死 亡 但有些成熟植物葉 片上的癥狀會消失 特 別是在開闊的田野環(huán)境 中 表現(xiàn)為無癥狀感染 果實(shí)則經(jīng)常出現(xiàn)畸形和 內(nèi)部果肉海綿狀 腐爛 變黃等癥狀 干熱處理后西 瓜田間種植表現(xiàn) 田 間觀察發(fā)現(xiàn) 極少數(shù)西 瓜葉片表現(xiàn)出褪綠 黃 化 皺縮現(xiàn)象 圖4 但 取樣進(jìn)行PCR檢測 未 檢測到CGMMV 即干 熱處理對防治西瓜種子CGMMV有明顯效果 干熱處理后蒲瓜田間種植表現(xiàn) 田間觀察發(fā) 現(xiàn) 絕大多數(shù)蒲瓜在苗期表現(xiàn)為無癥狀 少數(shù)表現(xiàn)出 被侵染癥狀 干熱處理后的蒲瓜種子在田間種植的正 常植株及部分病株如圖5 其中蒲瓜干熱下層68 86 及CK 54為PCR檢測CGMMV陽性 田間較正常植 2024 16 17 基金項(xiàng)目 寧波市 科技創(chuàng)新 2025 重大專項(xiàng) 2019B10002 廖慧敏 寧波微萌種業(yè)有限公司 浙江寧波 315101 E mail lhm 王婉婷 王雨晴 程佳雨 梁金方 寧波微萌種業(yè)有限公司 包衛(wèi)國 通訊作者 寧波微萌種業(yè)有限公司 浙江寧波 315101 E mail wxs 收稿日期 2024 03 27 圖4 干熱處理后西瓜田間種植的正常植株與其他病毒病株 正常植株 葉片花葉 葉片皺縮 植株矮縮 正常植株 干熱下層68 干熱下層86 CK 54 圖5 干熱處理后蒲瓜田間種植的正常植株與CGMMV病株 株均表現(xiàn)出植株矮化 葉片皺縮和葉片變形等癥狀 即干熱處理對防治蒲瓜種子CGMMV有效 3 結(jié)論與討論 CGMMV的遠(yuǎn)距離傳播主要依靠種子攜帶病毒 傳播 且病毒穩(wěn)定性極強(qiáng) CGMMV的致死溫度為 90 100 常溫下病毒侵染力可保持?jǐn)?shù)月 在 0 可保持?jǐn)?shù)年 20 病毒仍能存活 一旦條件適宜就 能繼續(xù)傳播蔓延 田間一旦發(fā)病 如未進(jìn)行有效的 殺滅處理 病株殘?bào)w中的病毒可存活多年 即便將 病根埋在土壤內(nèi) 1 a 以上 病毒仍保持侵染能力 10 一般可用物理方法或化學(xué)方法鈍化 CGMMV 播種 前對種子進(jìn)行物理消毒 不僅具有良好防治效果 而且在合適條件下 可提高種子活力 增加作物產(chǎn) 量 改善產(chǎn)品品質(zhì) 11 研究表明 干熱處理可大大減 輕種子發(fā)病程度 甚至不發(fā)病 12 在同一生產(chǎn) 栽 培 管理?xiàng)l件下 不同品種 不同成熟度的種子經(jīng)干 熱處理后的發(fā)芽率有所不同 13 本試驗(yàn)對攜帶CGMMV 的陽性西瓜和蒲瓜種子分別進(jìn)行干熱處理 干熱處 理對西瓜種子的發(fā)芽率影響最大 西瓜種子進(jìn)行干 熱處理后極大降低了種子攜帶 CGMMV 的可能 但 其發(fā)芽率受到影響 說明干熱處理對西瓜種子消毒 效果明顯 但還需針對干熱溫度及時(shí)長進(jìn)行探索 從而降低對西瓜種子發(fā)芽率的影響 干熱處理后蒲 瓜陽性比率明顯低于 CK 組 在干熱處理機(jī)的不同 層中 下層的陽性比率明顯高于上層 中層 推測可 能是因?yàn)楣戏N子種殼較厚 對溫度的耐受程度高 而上中層溫度較高 消毒效果更好 CGMMV是一種為害嚴(yán)重 防治困難的檢疫性 有害生物 主要侵染葫蘆科作物 植株被侵染后 在 種子或苗期很難通過觀察癥狀來辨別是否攜帶 CGMMV 而干熱處理技術(shù)是防治種傳病害的重要 措施 針對不同的物種和品種探索適宜的干熱處理 溫度及時(shí)長在保持種子發(fā)芽率的同時(shí) 可有效滅活 種子表面和內(nèi)部的病原菌 降低種傳病害對制種業(yè) 和農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的影響 參考文獻(xiàn) 1 孟姍姍 石延霞 李寶聚 李寶聚博士診病手記 六十六 黃瓜 種傳病害的干熱消毒技術(shù) J 中國蔬菜 2013 23 20 22 2 任春梅 楊柳 繆倩 等 種子種苗上黃瓜綠斑駁花葉病毒 IC RT PCR 檢測方法的建立及應(yīng)用 J 植物保護(hù) 2022 48 5 212 219 3 謝婷 羅金燕 陳磊 等 黃瓜綠斑駁花葉病毒病防治方法 的比較與展望 J 浙江大學(xué)學(xué)報(bào) 農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版 2022 48 3 279 288 4 馮蘭香 謝丙炎 楊宇紅 等 檢疫性黃瓜綠斑駁花葉病毒 的檢測和防疫控制 J 中國蔬菜 2007 9 34 38 5 中華人民共和國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部 中華人民共和國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部第 788 號公告 EB OL 2006 12 21 2024 02 25 http www 6 王佳瑩 張吉紅 崔俊霞 寧波海關(guān)全國郵檢首次截獲黃 瓜綠斑駁花葉病毒 J 植物檢疫 2019 3 62 7 古勤生 防治監(jiān)控黃瓜綠斑駁花葉病毒 確保瓜類安全生 產(chǎn) J 中國瓜菜 2007 1 47 48 8 蔡明 江冬 張麗英 等 黃瓜綠斑駁花葉病毒種子處理試 驗(yàn)研究 J 植物檢疫 2011 25 1 62 63 9 宋順華 吳萍 鄭曉鷹 等 干熱處理對蔬菜種子質(zhì)量的影響及 其殺菌效果研究 J 河南農(nóng)業(yè)科學(xué) 2011 40 4 117 119 10 吳元華 李立梅 趙秀香 等 黃瓜綠斑駁花葉病毒在我國定 殖和擴(kuò)散的風(fēng)險(xiǎn)性分析 J 植物保護(hù) 2010 36 1 33 36 11 岳鑫璐 梁根 李志強(qiáng) 等 干熱處理對白菜種傳黑腐病 抑菌效果評價(jià) J 廣東農(nóng)業(yè)科學(xué) 2022 49 1 105 110 12 蔡明 李明福 江東 日本 韓國黃瓜綠斑駁花葉病毒發(fā) 生及防控策略 J 植物檢疫 2010 24 4 65 68 13 杜忠佩 陳星伊 金衛(wèi)杰 等 干熱處理對南瓜種子發(fā)芽 及 CGMMV 病毒活性的影響 J 寒旱農(nóng)業(yè)科學(xué) 2023 9 839 844 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null null null null null null null null null null null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null null null null null null null null null null 2024 16 18