湖 北 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 2 0 2 3 年 收 稿 日 期 2 0 2 2 0 9 0 7 基 金 項(xiàng) 目 湖 北 省 重 點(diǎn) 研 發(fā) 項(xiàng) 目 2 0 2 2 B B A 0 0 6 2 2 0 2 1 B B A 1 0 1 天 山 創(chuàng) 新 團(tuán) 隊(duì) 計(jì) 劃 項(xiàng) 目 2 0 2 2 D 1 4 0 1 5 武 漢 市 生 物 育 種 關(guān) 鍵 技 術(shù) 及 新 品 種 培 育 重 大 專 項(xiàng) 2 0 2 2 0 2 1 3 0 2 0 2 4 8 5 2 武 漢 市 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 院 創(chuàng) 新 項(xiàng) 目 X K C X 2 0 2 2 0 4 1 作 者 簡(jiǎn) 介 萬 麗 麗 1 9 8 2 女 湖 北 武 漢 人 博 士 農(nóng) 藝 師 主 要 從 事 農(nóng) 作 物 生 物 技 術(shù) 育 種 研 究 工 作 電 話 1 3 0 1 8 0 9 5 1 9 3 電 子 信 箱 w a n l i l i 1 3 2 2 6 1 6 3 c o m 通 信 作 者 湯 謐 1 9 8 1 湖 北 武 漢 人 正 高 級(jí) 農(nóng) 藝 師 博 士 主 要 從 事 西 瓜 新 品 種 研 究 選 育 及 推 廣 工 作 電 子 信 箱 x t g y j s w u h a n a g r i c o m 第 6 2 卷 第 1 1 期 2 0 2 3 年 1 1 月 湖 北 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) H u b e i A g r i c u l t u r a l S c i e n c e s V o l 6 2 N o 1 1 N o v 2 0 2 3 萬 麗 麗 王 轉(zhuǎn) 茸 湯 謐 等 A L S 抑 制 類 除 草 劑 對(duì) 西 瓜 子 葉 外 植 體 分 化 的 研 究 J 湖 北 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 2 0 2 3 6 2 1 1 2 0 2 2 0 6 2 1 3 人 口 的 增 長(zhǎng) 和 極 端 氣 候 環(huán) 境 給 農(nóng) 作 物 的 生 產(chǎn) 帶 來 挑 戰(zhàn) 提 高 作 物 的 產(chǎn) 量 和 對(duì) 逆 境 脅 迫 的 適 應(yīng) 性 是 育 種 工 作 者 需 要 重 點(diǎn) 關(guān) 注 的 問 題 田 間 雜 草 與 農(nóng) 作 物 競(jìng) 爭(zhēng) 光 照 水 肥 和 氧 氣 影 響 農(nóng) 作 物 的 產(chǎn) 量 和 品 質(zhì) 1 化 學(xué) 除 草 是 現(xiàn) 代 農(nóng) 業(yè) 生 產(chǎn) 中 控 制 雜 草 的 主 要 手 段 乙 酰 乳 酸 合 成 酶 A c e t o l a c t a t e s y n t h a s e A L S A L S 抑 制 類 除 草 劑 對(duì) 西 瓜 子 葉 外 植 體 分 化 的 研 究 萬 麗 麗 1 王 轉(zhuǎn) 茸 1 湯 謐 1 曾 紅 霞 1 張 學(xué) 軍 2 3 張 娜 1 任 儉 1 孫 玉 宏 1 朱 志 坤 4 1 武 漢 市 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 院 武 漢 4 3 0 0 6 5 2 新 疆 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 院 哈 密 瓜 研 究 中 心 烏 魯 木 齊 8 3 0 0 9 1 3 新 疆 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 院 海 南 三 亞 農(nóng) 作 物 育 種 試 驗(yàn) 中 心 海 南 三 亞 5 7 2 0 1 4 4 武 漢 市 蔡 甸 區(qū) 農(nóng) 業(yè) 農(nóng) 村 局 武 漢 4 3 0 1 9 9 摘 要 以 西 瓜 自 交 系 D 6 6 的 子 葉 為 外 植 體 將 外 植 體 置 于 含 有 不 同 濃 度 乙 酰 乳 酸 合 成 酶 A c e t o l a c t a t e s y n t h a s e A L S 抑 制 劑 類 除 草 劑 S U 除 草 劑 I M I 除 草 劑 的 篩 選 培 養(yǎng) 基 上 根 據(jù) 外 植 體 的 分 化 率 確 定 最 適 宜 的 除 草 劑 濃 度 探 討 不 同 植 物 生 長(zhǎng) 調(diào) 節(jié) 劑 6 B A N A A 濃 度 配 比 對(duì) 不 定 芽 的 增 殖 作 用 結(jié) 果 表 明 S U 除 草 劑 中 苯 磺 隆 和 噻 吩 磺 隆 的 最 適 宜 濃 度 均 為 0 2 5 m g L 芐 嘧 磺 隆 的 最 適 宜 濃 度 為 0 5 0 m g L I M I 除 草 劑 中 滅 草 喹 和 滅 草 煙 的 最 適 宜 濃 度 均 為 1 5 0 m g L 在 M S 1 0 m g L 6 B A 0 5 m g L N A A 培 養(yǎng) 基 中 不 定 芽 的 增 殖 率 最 高 為 2 8 7 0 根 據(jù) 西 瓜 自 交 系 材 料 D 6 6 確 定 的 除 草 劑 最 適 宜 濃 度 同 樣 適 用 于 西 瓜 雜 交 種 武 農(nóng) 8 號(hào) 黑 美 人 甜 王 1 號(hào) 早 佳 8 4 2 4 子 葉 外 植 體 的 篩 選 試 驗(yàn) 關(guān) 鍵 詞 子 葉 外 植 體 A L S 抑 制 類 除 草 劑 西 瓜 自 交 系 西 瓜 雜 交 種 不 定 芽 增 殖 S U 除 草 劑 I M I 除 草 劑 中 圖 分 類 號(hào) S 6 5 1 文 獻(xiàn) 標(biāo) 識(shí) 碼 A 文 章 編 號(hào) 0 4 3 9 8 1 1 4 2 0 2 3 1 1 0 2 0 2 0 5 D O I 1 0 1 4 0 8 8 j c n k i i s s n 0 4 3 9 8 1 1 4 2 0 2 3 1 1 0 3 5 開 放 科 學(xué) 資 源 服 務(wù) 標(biāo) 識(shí) 碼 O S I D S t u d y o n t h e d i f f e r e n t i a t i o n o f w a t e r m e l o n c o t y l e d o n e x p l a n t s b y A L S i n h i b i t o r h e r b i c i d e s W A N L i l i 1 W A N G Z h u a n r o n g 1 T A N G M i 1 Z E N G H o n g x i a 1 Z H A N G X u e j u n 2 3 Z H A N G N a 1 R E N J i a n 1 S U N Y u h o n g 1 Z H U Z h i k u n 4 1 W u h a n A c a d e m y o f A g r i c u l t u r a l S c i e n c e s W u h a n 4 3 0 0 6 5 C h i n a 2 T h e R e s e a r c h C e n t e r o f H a m i m e l o n X i n j i a n g A c a d e m y o f A g r i c u l t u r a l S c i e n c e s U r u m q i 8 3 0 0 9 1 C h i n a 3 H a i n a n S a n y a C r o p B r e e d i n g E x p e r i m e n t a l C e n t e r X i n j i a n g A c a d e m y o f A g r i c u l t u r a l S c i e n c e s S a n y a 5 7 2 0 1 4 H a i n a n C h i n a 4 C a i d i a n D i s t r i c t B u r e a u o f A g r i c u l t u r e a n d R u r a l A f f a i r s W u h a n 4 3 0 1 9 9 C h i n a A b s t r a c t U s i n g t h e c o t y l e d o n s o f w a t e r m e l o n i n b r e d l i n e D 6 6 a s e x p l a n t s t h e e x p l a n t s w e r e p l a c e d o n a s c r e e n i n g m e d i u m c o n t a i n i n g d i f f e r e n t c o n c e n t r a t i o n s o f a c e t o l a c t a t e s y n t h a s e A L S i n h i b i t o r h e r b i c i d e s S U h e r b i c i d e s I M I h e r b i c i d e s a n d t h e o p t i m a l h e r b i c i d e c o n c e n t r a t i o n w a s d e t e r m i n e d b a s e d o n t h e d i f f e r e n t i a t i o n r a t e o f t h e e x p l a n t s T h e e f f e c t o f d i f f e r e n t p l a n t g r o w t h r e g u l a t o r s 6 B A N A A c o n c e n t r a t i o n r a t i o s o n t h e p r o l i f e r a t i o n o f a d v e n t i t i o u s b u d s w a s e x p l o r e d T h e r e s u l t s s h o w e d t h a t t h e o p t i m a l c o n c e n t r a t i o n s o f t r i b e n u r o n m e t h y 1 a n d t h i f e n s u l f u r o n m e t h y 1 i n S U h e r b i c i d e s w e r e b o t h 0 2 5 m g L w h i l e t h e o p t i m a l c o n c e n t r a t i o n o f b e n s u l f u r o n w a s 0 5 0 m g L t h e m o s t s u i t a b l e c o n c e n t r a t i o n s f o r I M I h e r b i c i d e s s u c h i m a z a q u i n a n d i m a z a p y r w e r e b o t h 1 5 0 m g L t h e h i g h e s t p r o l i f e r a t i o n r a t e o f a d v e n t i t i o u s b u d s w a s o b s e r v e d i n M S 1 0 m g L 6 B A 0 5 m g L N A A m e d i u m w h i c h w a s 2 8 7 0 t h e o p t i m a l c o n c e n t r a t i o n o f h e r b i c i d e s d e t e r m i n e d b a s e d o n w a t e r m e l o n i n b r e d l i n e D 6 6 m a t e r i a l s w a s a l s o s u i t a b l e f o r s c r e e n i n g c o t y l e d o n e x p l a n t s o f w a t e r m e l o n h y b r i d s W u n o n g 8 B l a c k B e a u t y T i a n w a n g 1 Z a o j i a 8 4 2 4 K e y w o r d s c o t y l e d o n e x p l a n t s A L S i n h i b i t o r y h e r b i c i d e s w a t e r m e l o n i n b r e d l i n e w a t e r m e l o n h y b r i d a d v e n t i t i o u s b u d p r o l i f e r a t i o n S U h e r b i c i d e s I M I h e r b i c i d e s第 1 1 期 抑 制 劑 類 除 草 劑 具 有 廣 譜 性 活 性 高 選 擇 性 強(qiáng) 和 生 物 安 全 性 高 的 優(yōu) 勢(shì) 在 田 間 雜 草 防 控 中 被 廣 泛 應(yīng) 用 主 要 包 括 5 個(gè) 不 同 結(jié) 構(gòu) 的 化 合 物 家 族 分 別 是 磺 酰 脲 類 S u l f o n y l u r e a s S U 咪 唑 啉 酮 類 I m i d a z o l i n o n e s I M I 三 唑 嘧 啶 磺 酰 胺 類 T r i a z o l o p y r i m i d i n e s T P 嘧 啶 水 楊 酸 類 P y r i m i d y l b e n z o a t e s P B 和 磺 酰 氨 羧 基 三 唑 啉 酮 類 S u l f o n l y a m i n o c a r b o n y l t r i a z o l i n o n e s S C T 2 S U 和 I M I 是 常 用 的 除 草 劑 這 2 類 除 草 劑 主 要 用 于 1 年 生 或 多 年 生 闊 葉 雜 草 的 防 除 S U 除 草 劑 主 要 有 苯 磺 隆 T r i b e n u r o n m e t h y l T M 噻 吩 磺 隆 T h i f e n s u l f u r o n m e t h y l H A R 芐 嘧 磺 隆 B e n s u l f u r o n m e t h y l B M 等 I M I 除 草 劑 主 要 有 滅 草 煙 I m a z e t h a p y r I P 和 滅 草 喹 I m a z a q u i n I Q 等 A L S 抑 制 類 除 草 劑 的 作 用 靶 標(biāo) 是 植 物 內(nèi) 源 A L S 通 過 阻 斷 底 物 進(jìn) 入 A L S 酶 的 活 性 位 點(diǎn) 并 與 之 結(jié) 合 進(jìn) 而 影 響 纈 氨 酸 亮 氨 酸 異 亮 氨 酸 等 支 鏈 氨 基 酸 的 生 物 合 成 影 響 植 物 體 內(nèi) 的 蛋 白 代 謝 最 終 滅 殺 植 物 3 盡 管 A L S 抑 制 劑 類 除 草 劑 具 有 諸 多 優(yōu) 勢(shì) 但 其 作 用 位 點(diǎn) 單 一 長(zhǎng) 期 高 頻 施 用 容 易 產(chǎn) 生 雜 草 耐 受 性 進(jìn) 而 產(chǎn) 生 抗 藥 性 雜 草 種 群 植 物 對(duì) A L S 抑 制 劑 類 除 草 劑 產(chǎn) 生 的 抗 性 機(jī) 制 如 下 靶 標(biāo) 抗 性 T a r g e t s i t e r e s i s t a n c e T S R 靶 標(biāo) 基 因 A L S 保 守 區(qū) 域 發(fā) 生 突 變 引 起 氨 基 酸 的 改 變 導(dǎo) 致 酶 結(jié) 構(gòu) 或 者 空 間 構(gòu) 象 變 化 對(duì) 除 草 劑 的 敏 感 性 降 低 進(jìn) 而 產(chǎn) 生 抗 性 A L S 蛋 白 質(zhì) 的 研 究 發(fā) 現(xiàn) A 9 6 P 1 7 1 A 1 7 9 W 5 4 8 和 S 6 2 7 5 個(gè) 高 度 保 守 結(jié) 構(gòu) 域 中 氨 基 酸 突 變 會(huì) 提 高 植 株 對(duì) 除 草 劑 的 抗 性 4 5 非 靶 標(biāo) 抗 性 N o n t a r g e t s i t e r e s i s t a n c e N T S R 通 過 減 少 除 草 劑 的 吸 收 轉(zhuǎn) 運(yùn) 和 活 化 能 力 提 高 除 草 劑 解 毒 降 解 和 誘 導(dǎo) 損 傷 修 復(fù) 能 力 6 細(xì) 胞 色 素 P 4 5 0 單 氧 化 酶 谷 胱 甘 肽 轉(zhuǎn) 移 酶 G l u t a t h i o n e S t r a n s f e r a s e G S T S 和 糖 基 轉(zhuǎn) 移 酶 等 通 過 催 化 除 草 劑 脫 烷 基 化 環(huán) 甲 基 羥 基 化 芳 環(huán) 的 羥 基 化 脫 硫 氧 化 或 者 催 化 有 害 物 質(zhì) 的 親 電 子 基 團(tuán) 與 還 原 型 谷 胱 甘 肽 的 巰 基 偶 聯(lián) 增 加 疏 水 性 使 有 害 物 質(zhì) 更 容 易 穿 透 細(xì) 胞 膜 分 解 排 出 7 9 基 于 抗 A L S 抑 制 劑 類 除 草 劑 的 作 用 機(jī) 理 通 過 多 途 徑 獲 得 新 型 A L S 抑 制 劑 類 除 草 劑 抗 性 資 源 是 解 決 雜 草 抗 藥 性 的 有 效 策 略 目 前 有 學(xué) 者 已 經(jīng) 通 過 種 子 E M S 誘 變 與 除 草 劑 篩 選 相 結(jié) 合 植 株 體 細(xì) 胞 或 者 小 孢 子 細(xì) 胞 與 除 草 劑 共 培 養(yǎng) 等 方 式 獲 得 自 發(fā) 突 變 的 抗 性 種 子 和 抗 性 細(xì) 胞 系 1 0 1 2 隨 著 生 物 技 術(shù) 的 快 速 發(fā) 展 利 用 轉(zhuǎn) 基 因 和 基 因 編 輯 技 術(shù) 實(shí) 現(xiàn) A L S 與 除 草 劑 結(jié) 合 位 點(diǎn) 的 突 變 快 速 創(chuàng) 制 抗 除 草 劑 的 種 質(zhì) 1 3 1 6 玉 米 A L S 基 因 1 6 5 位 S e r 替 換 為 P r o 獲 得 抗 氯 磺 隆 除 草 劑 的 玉 米 種 質(zhì) 西 瓜 內(nèi) 源 A L S 基 因 1 9 0 位 P r o 替 換 為 S e r 獲 得 抗 除 草 劑 的 西 瓜 種 質(zhì) 1 7 此 外 隨 著 基 因 編 輯 工 具 的 優(yōu) 化 利 用 單 堿 基 編 輯 器 構(gòu) 建 A L S 基 因 飽 合 突 變 體 庫(kù) 能 夠 快 速 獲 得 抗 除 草 劑 的 基 因 資 源 利 用 農(nóng) 桿 菌 介 導(dǎo) 的 遺 傳 轉(zhuǎn) 化 方 法 在 含 有 適 宜 除 草 劑 濃 度 的 培 養(yǎng) 基 上 篩 選 植 物 的 外 植 體 能 夠 獲 得 抗 A L S 抑 制 類 除 草 劑 的 新 種 質(zhì) 資 源 1 8 2 0 遺 傳 轉(zhuǎn) 化 的 程 序 包 含 農(nóng) 桿 菌 侵 染 共 培 養(yǎng) 選 擇 培 養(yǎng) 分 化 培 養(yǎng) 和 植 株 再 生 等 遺 傳 轉(zhuǎn) 化 后 的 組 織 培 養(yǎng) 程 序 中 可 以 施 加 不 同 類 型 的 A L S 抑 制 類 除 草 劑 作 為 再 生 細(xì) 胞 的 選 擇 劑 經(jīng) 過 分 化 培 養(yǎng) 獲 得 抗 不 同 類 型 除 草 劑 的 再 生 植 株 不 同 的 作 物 種 類 外 植 體 類 型 對(duì) 除 草 劑 的 敏 感 性 存 在 差 異 篩 選 適 宜 的 除 草 劑 濃 度 對(duì) 鑒 定 抗 除 草 劑 種 質(zhì) 資 源 顯 得 尤 為 重 要 本 研 究 以 西 瓜 子 葉 為 試 驗(yàn) 材 料 置 于 不 同 濃 度 A L S 抑 制 類 除 草 劑 的 培 養(yǎng) 基 中 研 究 除 草 劑 對(duì) 西 瓜 組 織 培 養(yǎng) 外 植 體 再 生 的 影 響 為 建 立 高 效 的 西 瓜 抗 除 草 劑 遺 傳 轉(zhuǎn) 化 體 系 提 供 科 學(xué) 依 據(jù) 1 材 料 與 方 法 1 1 材 料 試 驗(yàn) 材 料 為 西 瓜 自 交 系 D 6 6 西 瓜 雜 交 種 武 農(nóng) 8 號(hào) 黑 美 人 甜 王 1 號(hào) 早 佳 8 4 2 4 1 2 試 劑 M S 培 養(yǎng) 基 含 維 生 素 購(gòu) 自 荷 蘭 D u c h e f a 公 司 植 物 生 長(zhǎng) 調(diào) 節(jié) 劑 6 B A 1 m g m L 和 I A A 1 m g m L 均 購(gòu) 自 生 工 生 物 工 程 上 海 股 份 有 限 公 司 瓊 脂 粉 A g a r 西 格 瑪 奧 德 里 奇 上 海 貿(mào) 易 有 限 公 司 抑 菌 劑 特 美 汀 均 購(gòu) 自 上 海 泰 坦 科 技 股 份 有 限 公 司 A L S 抑 制 類 除 草 劑 磺 酰 脲 類 的 苯 磺 隆 噻 吩 磺 隆 芐 嘧 磺 隆 和 咪 唑 啉 酮 類 的 滅 草 喹 滅 草 煙 均 購(gòu) 自 西 格 瑪 奧 德 里 奇 上 海 貿(mào) 易 有 限 公 司 1 3 方 法 1 3 1 A L S 抑 制 類 除 草 劑 的 配 制 分 別 稱 取 1 0 m g 苯 磺 隆 噻 吩 磺 隆 芐 嘧 磺 隆 滅 草 煙 和 滅 草 喹 固 體 粉 末 用 1 0 0 L 2 m o l L N a O H 液 體 溶 解 最 后 用 去 離 子 水 定 容 1 3 2 除 草 劑 篩 選 西 瓜 種 子 置 于 7 5 乙 醇 中 消 毒 3 0 s 1 5 次 氯 酸 鈉 消 毒 2 0 m i n 無 菌 去 離 子 水 沖 洗 3 5 次 接 種 于 M S 0 4 5 m g L 6 B A 培 養(yǎng) 基 2 6 暗 培 養(yǎng) 2 3 d 直 至 胚 根 伸 長(zhǎng) 至 0 2 0 5 c m 從 子 葉 和 胚 根 接 觸 位 置 切 開 去 除 子 葉 遠(yuǎn) 軸 端 1 3 的 部 分 將 剩 下 的 2 3 子 葉 作 為 外 植 體 將 外 植 體 轉(zhuǎn) 移 至 除 草 劑 篩 選 培 養(yǎng) 基 M S 1 0 m g L 6 B A 除 草 劑 0 8 g L A g a r 2 0 0 m g L 特 美 汀 培 養(yǎng) 基 其 中 除 草 劑 分 別 為 T M H A R B M I Q 和 I P S U 除 草 劑 設(shè) 置 不 同 濃 度 A 0 0 1 m g L B 0 0 5 m g L C 0 2 5 m g L D 0 5 0 m g L 苯 磺 隆 除 草 劑 對(duì) 應(yīng) 的 篩 選 培 養(yǎng) 基 分 別 為 T M A 萬 麗 麗 等 A L S 抑 制 類 除 草 劑 對(duì) 西 瓜 子 葉 外 植 體 分 化 的 研 究 2 0 3湖 北 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 2 0 2 3 年 T M B T M C T M D 噻 吩 磺 隆 除 草 劑 對(duì) 應(yīng) 的 篩 選 培 養(yǎng) 基 分 別 為 H A R A H A R B H A R C H A R D 芐 嘧 磺 隆 除 草 劑 對(duì) 應(yīng) 的 篩 選 培 養(yǎng) 基 分 別 為 B M A B M B B M C B M D I M I 除 草 劑 設(shè) 置 不 同 濃 度 a 0 2 5 m g L b 0 5 0 m g L c 1 0 0 m g L d 1 5 0 m g L 滅 草 喹 除 草 劑 對(duì) 應(yīng) 的 篩 選 培 養(yǎng) 基 分 別 為 I Q a I Q b I Q c I Q d 滅 草 煙 除 草 劑 對(duì) 應(yīng) 的 篩 選 培 養(yǎng) 基 分 別 為 I P a I P b I P c I P d 不 含 有 除 草 劑 的 培 養(yǎng) 基 為 對(duì) 照 C K 組 織 培 養(yǎng) 的 溫 度 為 2 5 2 光 照 度 為 1 5 0 0 3 0 0 0 l x 1 6 h 光 照 8 h 黑 暗 培 養(yǎng) 每 個(gè) 處 理 3 次 重 復(fù) 分 別 在 培 養(yǎng) 1 0 2 5 3 5 d 后 記 錄 外 植 體 的 分 化 率 計(jì) 算 公 式 如 下 分 化 率 分 化 出 愈 傷 數(shù) 或 者 不 定 芽 的 外 植 體 數(shù) 接 種 外 植 體 總 數(shù) 1 0 0 1 死 亡 率 外 植 體 死 亡 數(shù) 接 種 外 植 體 總 數(shù) 1 0 0 2 1 3 3 西 瓜 子 葉 誘 導(dǎo) 不 定 芽 將 誘 導(dǎo) 生 成 的 1 2 c m 不 定 芽 轉(zhuǎn) 移 到 含 有 不 同 濃 度 6 B A 和 N A A 的 M S 培 養(yǎng) 基 中 其 中 6 B A 濃 度 分 別 為 0 5 1 0 2 0 m g L N A A 濃 度 分 別 為 0 1 0 5 1 5 m g L 每 個(gè) 處 理 接 種 6 8 個(gè) 不 定 芽 3 次 重 復(fù) 3 0 d 后 統(tǒng) 計(jì) 芽 增 殖 率 計(jì) 算 公 式 如 下 芽 增 殖 率 新 增 出 芽 數(shù) 原 有 芽 數(shù) 1 0 0 3 1 3 4 數(shù) 據(jù) 分 析 試 驗(yàn) 數(shù) 據(jù) 用 E x c e l 2 0 1 7 軟 件 統(tǒng) 計(jì) 在 S P S S 2 6 0 軟 件 中 采 用 D u n c a n s 法 進(jìn) 行 多 組 樣 本 間 差 異 顯 著 性 分 析 2 結(jié) 果 與 分 析 2 1 S U 除 草 劑 對(duì) 西 瓜 子 葉 外 植 體 的 分 化 作 用 將 西 瓜 自 交 系 D 6 6 的 子 葉 作 為 外 植 體 置 于 不 同 類 型 和 濃 度 的 S U 除 草 劑 篩 選 培 養(yǎng) 基 1 0 2 5 3 5 d 后 統(tǒng) 計(jì) 外 植 體 的 分 化 率 和 死 亡 率 圖 1 由 表 1 表 2 表 3 可 知 隨 著 S U 除 草 劑 濃 度 的 增 加 外 植 體 死 亡 率 呈 上 升 趨 勢(shì) 分 化 率 呈 下 降 趨 勢(shì) 外 植 體 在 0 2 5 m g L 苯 磺 隆 培 養(yǎng) 基 上 培 養(yǎng) 1 0 d 后 外 植 體 的 分 化 率 為 0 培 養(yǎng) 3 5 d 后 外 植 體 的 死 亡 率 為 4 2 0 外 植 體 在 0 2 5 m g L 噻 吩 磺 隆 培 養(yǎng) 基 上 培 養(yǎng) 1 0 d 后 外 植 體 的 分 化 率 為 0 培 養(yǎng) 3 5 d 后 外 植 體 的 死 亡 率 為 5 5 7 在 0 5 0 m g L 芐 嘧 磺 隆 培 養(yǎng) 基 上 培 養(yǎng) 1 0 d 后 外 植 體 的 分 化 率 為 0 培 養(yǎng) 3 5 d 后 外 植 體 的 死 亡 率 為 5 2 7 本 試 驗(yàn) 中 篩 選 的 是 非 轉(zhuǎn) 基 因 西 瓜 材 料 外 植 體 沒 有 分 化 表 明 該 處 理 下 外 植 體 不 具 備 分 化 能 力 為 今 后 開 展 轉(zhuǎn) 基 因 抗 除 草 劑 西 瓜 種 質(zhì) 的 篩 選 提 供 參 考 依 據(jù) 因 此 將 最 早 出 現(xiàn) 外 植 體 分 化 率 為 0 時(shí) 除 草 劑 的 濃 度 定 義 為 最 適 宜 篩 選 濃 度 苯 磺 隆 和 噻 吩 磺 隆 除 草 劑 的 最 適 宜 篩 選 濃 度 均 為 0 2 5 m g L 芐 嘧 磺 隆 的 最 適 宜 篩 選 濃 度 為 0 5 0 m g L a b c d e f g h i a b c 分 別 為 在 篩 選 培 養(yǎng) 基 M S 1 0 m g L 6 B A 0 2 5 m g L 苯 磺 隆 0 8 g L A g a r 2 0 0 m g L 特 美 汀 上 生 長(zhǎng) 1 0 2 5 3 5 d 的 子 葉 外 植 體 d e f 分 別 為 在 篩 選 培 養(yǎng) 基 M S 1 0 m g L 6 B A 0 2 5 m g L 噻 吩 磺 隆 0 8 g L A g a r 2 0 0 m g L 特 美 汀 上 生 長(zhǎng) 1 0 2 5 3 5 d 的 子 葉 外 植 體 g h i 分 別 為 在 篩 選 培 養(yǎng) 基 M S 1 0 m g L 6 B A 0 5 0 m g L 芐 嘧 磺 隆 0 8 g L A g a r 2 0 0 m g L 特 美 汀 上 生 長(zhǎng) 1 0 2 5 3 5 d 的 子 葉 外 植 體 圖 1 外 植 體 在 S U 除 草 劑 培 養(yǎng) 基 上 的 生 長(zhǎng) 情 況 表 1 外 植 體 在 T M 培 養(yǎng) 基 上 的 生 長(zhǎng) 情 況 單 位 培 養(yǎng) 基 T M A T M B T M C T M D 培 養(yǎng) 1 0 d 死 亡 率 0 0 9 0 2 6 3 分 化 率 2 7 7 1 3 3 0 0 培 養(yǎng) 2 5 d 死 亡 率 0 0 2 0 7 5 0 3 分 化 率 4 4 3 1 4 3 0 0 培 養(yǎng) 3 5 d 死 亡 率 0 0 4 2 0 8 6 0 分 化 率 5 1 7 1 6 7 0 0 表 2 外 植 體 在 H A R 培 養(yǎng) 基 上 的 生 長(zhǎng) 情 況 單 位 培 養(yǎng) 基 H A R A H A R B H A R C H A R D 培 養(yǎng) 1 0 d 死 亡 率 0 1 3 1 8 0 4 1 3 分 化 率 1 7 3 1 3 3 0 0 培 養(yǎng) 2 5 d 死 亡 率 0 8 0 4 0 3 6 3 0 分 化 率 2 2 3 1 2 0 0 0 培 養(yǎng) 3 5 d 死 亡 率 3 0 1 7 7 5 5 7 9 1 3 分 化 率 2 3 7 1 7 3 0 0 表 3 外 植 體 在 B M 培 養(yǎng) 基 上 的 生 長(zhǎng) 情 況 單 位 培 養(yǎng) 基 B M A B M B B M C B M D 培 養(yǎng) 1 0 d 死 亡 率 0 0 0 1 1 3 分 化 率 4 5 0 2 8 3 1 1 0 0 培 養(yǎng) 2 5 d 死 亡 率 0 0 9 3 0 3 分 化 率 6 2 3 4 0 7 1 5 3 0 培 養(yǎng) 3 5 d 死 亡 率 0 4 0 2 1 3 5 2 7 分 化 率 7 2 3 6 7 3 2 3 3 0 2 2 I M I 除 草 劑 對(duì) 西 瓜 子 葉 外 植 體 的 分 化 作 用 將 西 瓜 自 交 系 D 6 6 的 子 葉 作 為 外 植 體 置 于 不 同 類 型 和 濃 度 的 I M I 除 草 劑 培 養(yǎng) 基 中 由 表 4 表 5 可 2 0 4第 1 1 期 知 在 1 5 0 m g L 滅 草 喹 除 草 劑 培 養(yǎng) 基 上 西 瓜 子 葉 外 植 體 的 分 化 率 為 0 培 養(yǎng) 3 5 d 后 外 植 體 的 死 亡 率 達(dá) 4 9 3 在 1 5 0 m g L 滅 草 煙 除 草 劑 培 養(yǎng) 基 上 西 瓜 子 葉 外 植 體 的 分 化 率 為 0 培 養(yǎng) 3 5 d 后 外 植 體 的 死 亡 率 達(dá) 4 5 5 將 最 早 出 現(xiàn) 外 植 體 分 化 率 為 0 時(shí) 除 草 劑 的 濃 度 定 義 為 最 佳 篩 選 濃 度 西 瓜 子 葉 外 植 體 在 滅 草 喹 和 滅 草 煙 培 養(yǎng) 基 上 篩 選 濃 度 均 為 1 5 0 m g L 表 4 外 植 體 在 I Q 培 養(yǎng) 基 上 的 生 長(zhǎng) 情 況 單 位 組 合 編 號(hào) I Q a I Q b I Q c I Q d 培 養(yǎng) 1 0 d 死 亡 率 0 0 0 0 分 化 率 1 4 7 9 0 7 0 0 培 養(yǎng) 2 5 d 死 亡 率 0 0 8 3 2 2 1 分 化 率 2 1 3 1 3 3 1 1 3 0 培 養(yǎng) 3 5 d 死 亡 率 0 0 1 5 3 4 9 3 分 化 率 2 3 3 1 9 3 1 2 1 0 表 5 外 植 體 在 I P 培 養(yǎng) 基 上 的 生 長(zhǎng) 情 況 單 位 組 合 編 號(hào) I P a I P b I P c I P d 培 養(yǎng) 1 0 d 死 亡 率 0 0 0 0 分 化 率 1 3 0 9 0 3 7 0 培 養(yǎng) 2 5 d 死 亡 率 0 0 9 0 1 8 5 分 化 率 1 9 3 1 3 7 6 7 0 培 養(yǎng) 3 5 d 死 亡 率 0 7 3 1 3 2 4 5 5 分 化 率 2 1 0 1 5 7 9 3 0 2 3 不 同 植 物 生 長(zhǎng) 調(diào) 節(jié) 劑 濃 度 配 比 對(duì) 不 定 芽 增 殖 培 養(yǎng) 的 影 響 6 B A 濃 度 分 別 為 0 5 1 0 2 0 m g L N A A 濃 度 分 別 為 0 1 0 5 1 5 m g L 將 誘 導(dǎo) 生 成 的 不 定 芽 置 于 不 同 植 物 生 長(zhǎng) 調(diào) 節(jié) 劑 濃 度 配 比 的 培 養(yǎng) 基 中 由 表 6 可 知 不 同 植 物 生 長(zhǎng) 調(diào) 節(jié) 劑 6 B A N A A 均 能 促 進(jìn) 不 定 芽 的 增 殖 在 M S 1 0 m g L 6 B A 0 5 m g L N A A 的 培 養(yǎng) 基 中 不 定 芽 的 增 殖 率 最 高 為 2 8 7 0 2 4 西 瓜 雜 交 種 的 子 葉 外 植 體 在 除 草 劑 培 養(yǎng) 基 上 的 分 化 研 究 將 西 瓜 雜 交 種 武 農(nóng) 8 號(hào) 黑 美 人 甜 王 1 號(hào) 早 佳 8 4 2 4 和 西 瓜 自 交 系 D 6 6 發(fā) 芽 2 d 后 的 子 葉 作 為 外 植 體 置 于 除 草 劑 培 養(yǎng) 基 表 7 3 5 d 后 統(tǒng) 計(jì) 4 種 西 瓜 雜 交 種 和 西 瓜 自 交 系 D 6 6 外 植 體 的 分 化 率 和 死 亡 率 4 種 西 瓜 雜 交 種 和 西 瓜 自 交 系 D 6 6 在 0 2 5 m g L T M 0 2 5 m g L H A R 0 5 m g L B M 1 5 m g L I Q 和 1 5 m g L I P 除 草 劑 培 養(yǎng) 基 中 的 分 化 率 均 為 0 西 瓜 外 植 體 在 5 種 除 草 劑 T M H A R B M I Q I P 處 理 下 的 死 亡 率 分 別 為 4 0 0 5 0 5 5 4 7 6 5 0 4 0 9 5 2 0 4 0 7 5 2 5 3 9 5 4 5 2 3 結(jié) 論 1 西 瓜 自 交 系 D 6 6 子 葉 外 植 體 在 含 有 S U 除 草 劑 苯 磺 隆 和 噻 吩 磺 隆 的 培 養(yǎng) 基 上 最 適 宜 濃 度 均 為 萬 麗 麗 等 A L S 抑 制 類 除 草 劑 對(duì) 西 瓜 子 葉 外 植 體 分 化 的 研 究 表 6 不 同 植 物 生 長(zhǎng) 調(diào) 節(jié) 劑 配 比 對(duì) 不 定 芽 增 殖 培 養(yǎng) 的 影 響 處 理 1 2 3 4 5 6 7 8 9 6 B A 濃 度 m g L 0 5 1 0 2 0 0 5 1 0 2 0 0 5 1 0 2 0 N A A 濃 度 m g L 0 1 0 1 0 1 0 5 0 5 0 5 1 5 1 5 1 5 增 殖 率 1 1 5 3 2 6 3 3 1 5 0 0 2 3 6 7 2 8 7 0 1 2 3 3 2 2 3 3 1 9 0 0 1 1 6 7 不 定 芽 生 長(zhǎng) 狀 況 分 化 明 顯 生 長(zhǎng) 緩 慢 不 定 芽 發(fā) 育 正 常 分 化 明 顯 生 長(zhǎng) 緩 慢 不 定 芽 發(fā) 育 正 常 分 化 明 顯 生 長(zhǎng) 慢 不 定 芽 發(fā) 育 畸 形 分 化 明 顯 生 長(zhǎng) 緩 慢 不 定 芽 發(fā) 育 正 常 分 化 明 顯 生 長(zhǎng) 緩 慢 不 定 芽 發(fā) 育 正 常 分 化 不 明 顯 生 長(zhǎng) 慢 不 定 芽 畸 形 分 化 明 顯 生 長(zhǎng) 緩 慢 不 定 芽 發(fā) 育 正 常 分 化 明 顯 生 長(zhǎng) 緩 慢 不 定 芽 發(fā) 育 正 常 分 化 不 明 顯 生 長(zhǎng) 慢 不 定 芽 畸 形 表 7 西 瓜 子 葉 外 植 體 在 S U 和 I M I 除 草 劑 培 養(yǎng) 基 上 的 生 長(zhǎng) 情 況 材 料 D 6 6 武 農(nóng) 8 號(hào) 黑 美 人 甜 王 1 號(hào) 早 佳 8 4 2 4 D 6 6 武 農(nóng) 8 號(hào) 黑 美 人 甜 王 1 號(hào) 早 佳 8 4 2 4 D 6 6 武 農(nóng) 8 號(hào) 黑 美 人 甜 王 1 號(hào) 早 佳 8 4 2 4 D 6 6 武 農(nóng) 8 號(hào) 黑 美 人 甜 王 1 號(hào) 早 佳 8 4 2 4 D 6 6 武 農(nóng) 8 號(hào) 黑 美 人 甜 王 1 號(hào) 早 佳 8 4 2 4 除 草 劑 類 型 T M T M T M T