nullnull23年 第 9期 nullnullnull nullnullnull nullnullnullnullnullnull null 23nullnullnullnull 43nullnullnull 9 二斑葉螨 Tetranychus urticae Koch 可為害果 樹 蔬菜 花卉等共計800種以上植物 1 化學(xué)防治 是主要的防治方法之一 但因該螨具有體型小 發(fā)育 歷期短 繁殖力強等特點 易產(chǎn)生抗藥性 目前已對 近百種殺蟲活性成分產(chǎn)生了不同程度的抗性 2 研 究表明 阿維菌素靶標(biāo)基因 GluCls 的 G314D 和 G326E 突變 聯(lián)苯肼酯靶標(biāo)基因 Cytb 的 G126S 和 A269V突變 乙螨唑靶標(biāo)基因CHS1的I1017F突變 噠螨靈靶標(biāo)基因 PSST 同源復(fù)合物 NADH 的 H92R 突變 丁氟螨酯靶標(biāo)基因SDHB的R119C和I260V 突變 均與二斑葉螨對相應(yīng)藥劑的抗性相關(guān) 2 3 二 斑葉螨抗性基因數(shù)量明顯高于其他昆蟲 這也是二斑 葉螨抗藥性廣泛 治理困難的原因之一 3 2021年 筆 者在北京市昌平區(qū)草莓大棚開展試驗 明確不同類型 藥劑在二斑葉螨初發(fā)期施用的防效 并于2022年采 集北京市不同草莓種植區(qū)的二斑葉螨田間種群 檢測 其對5種常用殺螨劑的靶標(biāo)基因突變頻率 綜合上述 兩項研究的結(jié)果 可為科學(xué)制定防治策略 選擇適宜 殺螨劑品種并延長其使用壽命提供參考 1 供試材料 供試藥劑分別為 43 聯(lián)苯肼酯懸浮劑 愛利思 達(dá)生物化學(xué)品有限公司 30 乙螨唑懸浮劑 上海 悅聯(lián)生物科技有限公司 20 丁氟螨酯懸浮劑 江 蘇省蘇州富美實植物保護劑有限公司 240 g L 螺 螨酯懸浮劑 拜耳作物科學(xué) 中國 有限公司 施藥 器械為MH D16 3型電動噴霧器 浙江濛花噴霧器 有限公司 2 試驗內(nèi)容 2null1 田間施藥防螨試驗 2021年10月在北京市昌平區(qū)百善鎮(zhèn)獅子營村 草莓二斑葉螨的防治藥劑篩選 及其田間抗藥性初探 王帥宇 1 谷振東 2 王 胤 1 楊 文 1 賈峰勇 1 李 錦 2 董 杰 1 1 北京市植物保護站 北京 100029 2 北京市昌平區(qū)植保植檢站 北京 昌平 102299 摘要 通過開展田間試驗 調(diào)查比較了 4 種殺螨劑對草莓二斑葉螨的防效 并測定了采自北京市不同草莓種植區(qū)的 田間二斑葉螨種群對 5種常用殺螨劑的靶標(biāo)基因突變頻率 結(jié)果表明 在草莓二斑葉螨初發(fā)期噴施聯(lián)苯肼酯的速效 性和持效性均較好 藥后 1 7 d的防效均高于 80 噴施丁氟螨酯的速效性好 藥后 1 d 防效即達(dá) 83 81 持效性偏 低 藥后 7 d 防效降至 70 41 噴施乙螨唑或螺螨酯速效性偏低 藥后 1 d 防效分別為 70 42 62 29 但防效隨藥 后時間延長而上升 藥后 7d防效較藥后 1 d高出約 8個百分點 采集的田間二斑葉螨種群多數(shù)對噠螨靈 H92R 和 聯(lián)苯肼酯 G126S 靶標(biāo)基因突變頻率高于 55 部分對阿維菌素 G326E 突變頻率達(dá) 100 部分對乙螨唑 I1017F 突變頻率在 50 上下 對丁氟螨酯突變頻率整體較低 在實際生產(chǎn)中 應(yīng)綜合考慮藥劑防效和田間二斑葉螨種群靶 標(biāo)基因突變頻率 制定科學(xué)用藥策略 關(guān)鍵詞 草莓 二斑葉螨 殺螨劑 田間防效 靶標(biāo)基因 突變頻率 中圖分類號 S436 639 S481 4 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 B 文章編號 1672 6820 2023 09 0081 03 投稿日期 2023 06 03 修回日期 2023 07 26 基金項目 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)體系北京市設(shè)施蔬菜創(chuàng)新團隊 BAIC01 2023 17 作者簡介 王帥宇 高級農(nóng)藝師 主要從事農(nóng)作物病蟲監(jiān)測與防控工作 E mail shuaiyu3 通訊作者 董杰 推廣研究員 長期從事農(nóng)作物病蟲監(jiān)測與防控工作 E mail dongjiefine 81 nullnull23年 第9期 nullnullnull nullnullnull nullnullnullnullnullnull null 23nullnullnullnull 43nullnullnull 9 草莓大棚開展施藥試驗 此時二斑葉螨處于初發(fā)期 該季草莓 品種為紅顏 定植前進(jìn)行了高溫悶棚處 理 棚內(nèi)管理措施一致 試驗共設(shè)4個藥劑處理 即 每667 m 2 分別施用43 聯(lián)苯肼酯懸浮劑20 mL 制 劑用量 下同 30 乙螨唑懸浮劑10 mL 20 丁氟 螨酯懸浮劑30 mL 240 g L螺螨酯懸浮劑20 mL 另 設(shè)清水對照 各處理隨機區(qū)組設(shè)計 3次重復(fù) 每個重 復(fù)小區(qū)面積均為15 m 2 10月15日使用電動噴霧器 對草莓葉片正面和背面均勻噴施藥液至不流滴 分別于施藥前和藥后1 3 7 d進(jìn)行調(diào)查 采用 5點取樣法 每點選3株草莓 調(diào)查每株頂端3 4 片 葉上的活螨數(shù) 參考 GB T 17980 17 2000 4 計算活 螨減退率和防治效果 活螨減退率 施藥前螨數(shù) 施藥后螨數(shù) 施藥前螨數(shù) 100 防治效果 1 對照區(qū)施藥前活螨數(shù) 處理 區(qū)藥后活螨數(shù) 對照區(qū)施藥后活螨數(shù) 處理區(qū)藥前 活蟲數(shù) 100 使用SPSS 26 0軟件處理調(diào)查數(shù)據(jù) 采用鄧肯氏 新復(fù)極差法 DMRT 分析處理間防效差異的顯著性 2null2 田間種群與藥劑相關(guān)靶標(biāo)基因突變頻率調(diào)查 2022年4月在北京不同草莓種植區(qū)隨機采集二 斑葉螨 經(jīng)室內(nèi)形態(tài)鑒定 將二斑葉螨雌蟲置于 80 保存 采用組織 細(xì)胞基因組DNA快速提取試劑盒 北京博邁德基因技術(shù)有限公司 對保存樣本進(jìn)行 DNA提取 參考Shen等的引物序列設(shè)計和PCR擴 增方法 3 對與阿維菌素 噠螨靈 聯(lián)苯肼酯 乙螨唑 丁氟螨酯相關(guān)的靶標(biāo)基因片段進(jìn)行PCR擴增 產(chǎn)物 送北京博邁德基因技術(shù)有限公司測序 采用Chromas 軟件和 Bioedit 軟件分析抗藥性分子測定結(jié)果 用 Excel記錄統(tǒng)計每個樣本的基因型及突變頻率 3 結(jié)果與分析 3null1 不同藥劑對二斑葉螨的防治效果 經(jīng)田間調(diào)查發(fā)現(xiàn) 供試殺螨劑 43 聯(lián)苯肼酯懸 浮劑 30 乙螨唑懸浮劑 20 丁氟螨酯懸浮劑和 240 g L 螺螨酯懸浮劑對草莓上二斑葉螨均有一定 的控制效果 表1 整體防效從高到低排序為聯(lián)苯 肼酯 丁氟螨酯 乙螨唑 螺螨酯 施用聯(lián)苯肼酯后 1 3 7 d 防效分別為 84 55 87 59 80 09 在各 處理同期防效中均為最高 表現(xiàn)出較好的速效性和 持效性 施用丁氟螨酯后第1天 第3天的防效分別 為83 81 84 83 與聯(lián)苯肼酯同期防效接近 高于 其他2種藥劑 但到藥后第7天防效下降明顯 僅為 供試藥劑 制劑用量 mL 667m 2 藥前活螨 數(shù) 頭 藥后 1 d 藥后 3 d 藥后 7 d 活螨數(shù) 頭 防效 活螨數(shù) 頭 防效 活螨數(shù) 頭 防效 43 聯(lián)苯肼酯 SC 20 224 49 84 55 a 58 87 59 a 121 80 09 a 30 乙螨唑 SC 10 222 93 70 42 b 104 77 54 ab 129 78 58 a 20 丁氟螨酯 SC 30 218 50 83 81 a 69 84 83 a 175 70 41 b 240 g L螺螨酯 SC 20 191 102 62 29 c 122 69 38 c 155 70 09 b 清水對照 209 296 436 567 表1 不同殺螨劑對草莓二斑葉螨的田間防效 1 1 2021年10月 二斑葉螨初發(fā)期 在北京市昌平區(qū)百善鎮(zhèn)獅子營村草莓大棚開展施藥試驗 同列數(shù)據(jù)后不同小寫字母表示差異顯著 p 0 05 采集地點 阿維菌素 噠螨靈 聯(lián)苯肼酯 乙螨唑 丁氟螨酯 G314D G326E H92R A269V G126S I1017F I260V R119C 昌平區(qū)百善鎮(zhèn) 43 4 100 100 0 63 0 34 1 38 0 0 昌平區(qū)小湯山鎮(zhèn) 38 5 40 6 95 2 14 2 80 8 52 1 2 2 28 5 大興區(qū)龐各莊鎮(zhèn) 16 9 100 85 2 5 4 4 3 5 5 0 4 6 延慶區(qū)舊縣鎮(zhèn) 56 9 12 6 65 0 23 7 55 2 55 4 61 2 3 2 通州區(qū)潞城鎮(zhèn) 82 7 9 2 88 5 4 5 70 2 49 8 63 2 29 8 表2 2022年北京市不同草莓種植區(qū)二斑葉螨種群對5種殺螨劑的靶標(biāo)基因突變頻率 82 nullnull23年 第 9期 nullnullnull nullnullnull nullnullnullnullnullnull null 23nullnullnullnull 43nullnullnull 9 70 41 顯著低于聯(lián)苯肼酯和乙螨唑的同期防效 說明該藥速效性較好但持效性較差 施用乙螨唑后 1 7 d防效由70 42 逐漸升至78 58 施用螺螨酯 后 1 7 d 防效由 62 29 逐漸升至 70 09 這兩種 藥劑速效性較差 但具有一定的持效性 尤其是乙螨 唑 藥后7 d防效已與聯(lián)苯肼酯無顯著差異 并顯著 高于其他2種藥劑 另外 據(jù)藥后的持續(xù)觀察 4 種 藥劑在試驗劑量下對草莓葉片 花和果實均未產(chǎn)生 藥害和不良影響 藥劑處理對草莓安全 3null2 靶標(biāo)基因突變頻率 根據(jù)分子檢測結(jié)果統(tǒng)計 北京市二斑葉螨種群 靶標(biāo)基因突變頻率 發(fā)現(xiàn)突變頻率最高的對應(yīng)藥劑 為噠螨靈 采自 5 個區(qū)域種群的 H92R 位點突變頻 率在 60 以上 其中 1 個種群突變頻率達(dá) 100 其他也多在 90 上下 對于阿維菌素 有 2 個種群 G326E 突變頻率達(dá) 100 G314D 突變頻率也較高 對于聯(lián)苯肼酯 有 4 個種群 G126S 突變頻率高于 55 A269V 突變頻率較低 對于乙螨唑 I1017F 突 變頻率為 5 5 55 4 除大興區(qū)龐各莊鎮(zhèn)和昌平 區(qū)百善鎮(zhèn)群體外 其他采集地群體突變頻率在 50 上下 對于丁氟螨酯 I260V 突變頻率為 0 63 2 R119C 突變頻率為 0 29 8 突變頻率整體較低 表 2 null 小結(jié)與討論 在草莓上二斑葉螨初發(fā)期 以推薦劑量噴施 43 聯(lián)苯肼酯懸浮劑對二斑葉螨速效性好 防效在 80 以上 可維持7 d 20 丁氟螨酯懸浮劑速效性 好 但持效性略差 藥后 7 d 防效下降較明顯 30 乙螨唑懸浮劑和 240 g L 螺螨酯懸浮劑起效相對較 慢 但具有一定的持效性 藥后7 d的防效也可達(dá)到 70 以上 調(diào)查發(fā)現(xiàn) 對于傳統(tǒng)殺螨劑噠螨靈和新型 殺螨劑聯(lián)苯肼酯 采樣區(qū)域的二斑葉螨相關(guān)靶標(biāo)基 因突變頻率高于 55 鑒于聯(lián)苯肼酯在本試驗中的 田間防效仍較好 建議僅在二斑葉螨初發(fā)期與其他 作用機制的藥劑混用 1 2 次 避免過多使用 百善 鎮(zhèn)和龐各莊鎮(zhèn)種群對阿維菌素抗性較高 小湯山鎮(zhèn) 舊縣鎮(zhèn) 潞城鎮(zhèn)種群對乙螨唑抗性較高 不建議當(dāng)?shù)?使用相關(guān)藥劑防治二斑葉螨 噠螨靈和阿維菌素是北京市防治草莓二斑葉螨 的常用藥劑 但近年發(fā)現(xiàn)其控螨效果已不理想 研究 發(fā)現(xiàn)與噠螨靈抗性相關(guān)的H92R突變頻率隨噠螨靈 在二斑葉螨防控中的廣泛使用而逐步上升 且對相 同作用機制的其他藥劑也產(chǎn)生了抗性 3 與阿維菌 素抗性相關(guān)的 G314D 突變頻率與二斑葉螨對阿維 菌素的抗性水平呈正相關(guān) 而G326E 位點對阿維菌 素抗性發(fā)展的貢獻(xiàn)則較為復(fù)雜 3 5 聯(lián)苯肼酯 G126S 和 A269V 的突變頻率也隨用藥頻次增加而呈現(xiàn)上 升趨勢 3 國內(nèi)乙螨唑 I1017F 突變頻率較低 但本 次調(diào)查發(fā)現(xiàn)有 3 個二斑葉螨種群突變頻率在 50 上下 這可能與乙螨唑在當(dāng)?shù)厥褂妙l率偏高有關(guān) 丁 氟螨酯突變頻率整體較低 這可能與其用于草莓二 斑葉螨防控年份較短且使用頻次較低有關(guān) 殺螨劑對二斑葉螨的防效與作用機制 防控時 期 抗藥性等相關(guān) 在實際生產(chǎn)中應(yīng)根據(jù)田間防效和 抗藥性監(jiān)測結(jié)果 及時調(diào)整用藥方案 一方面應(yīng)持續(xù) 關(guān)注草莓全生育期包括育苗期的用藥情況 防治效 果 靶標(biāo)基因突變頻率變化 多重抗藥性及交互抗 性 制定科學(xué)用藥策略 另一方面應(yīng)繼續(xù)優(yōu)化作物凈 苗入棚 棚室及土壤消毒 物理阻隔 釋放天敵 選用 生物藥劑等綠色防控措施 實現(xiàn)對草莓二斑葉螨高 效 綠色和可持續(xù)的控制 參考文獻(xiàn) 1 宮亞軍 石寶才 王澤華 等 新型殺螨劑聯(lián)苯肼酯對二 斑葉螨的毒力測定及田間防效 J 農(nóng)藥 2013 52 3 225 227 2 Adesanya A W Lavine M D Moural T W et al Mechanisms and management of acaricide resistance for Tetranychus urticae in agroecosystems J Journal of Pest Science 2021 94 3 639 663 3 Shen X J Zhang Y J Wang S Y et al A high through put KASP assay provides insights into the evolution of multiple resistant mutations in populations of the two spotted spider mite Tetranychus urticae across China J Pest Manag Sci 2023 79 5 1702 1712 4 國家質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局 GB T 17980 17 2000 農(nóng)藥田間 藥效試驗準(zhǔn)則 一 殺螨劑防治豆類 蔬菜葉螨 S 北 京 中國標(biāo)準(zhǔn)出版社 5 徐丹丹 王少麗 何艷艷 等 我國二斑葉螨抗藥性現(xiàn)狀 及靶標(biāo)基因突變頻率檢測 J 中國瓜菜 2019 32 8 155 156 83