2023 年 第 64 卷 第 4 期 921 收 稿 日 期 2022 06 07 基 金 項(xiàng) 目 徐 州 市 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 院 基 金 XM2021008 作 者 簡 介 張 佳 1996 女 遼 寧 錦 州 人 碩 士 研 究 實(shí) 習(xí) 員 研 究 方 向 為 果 品 質(zhì) 量 安 全 E mail zhangjia208 126 com 通 信 作 者 魏 猛 1983 男 山 東 濟(jì) 寧 人 副 研 究 員 博 士 研 究 方 向 為 土 壤 養(yǎng) 分 管 理 及 草 莓 栽 培 技 術(shù) E mail weimeng1024 163 com 文 獻(xiàn) 著 錄 格 式 張 佳 蔣 薇 賈 志 航 等 抑 霉 唑 在 草 莓 生 長 過 程 中 對 映 體 選 擇 性 降 解 行 為 J 浙 江 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 2023 64 4 921 926 DOI 10 16178 j issn 0528 9017 20220637 抑 霉 唑 在 草 莓 生 長 過 程 中 對 映 體 選 擇 性 降 解 行 為 張 佳 1 2 蔣 薇 1 2 賈 志 航 1 2 宋 慶 科 1 張 婷 1 魏 猛 1 2 1 江 蘇 徐 淮 地 區(qū) 徐 州 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 研 究 所 江 蘇 徐 州 221131 2 江 蘇 徐 淮 地 區(qū) 徐 州 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 研 究 所 銅 山 試 驗(yàn) 站 江 蘇 徐 州 221114 摘 要 采 用 優(yōu) 化 的 QuEChERS 樣 品 前 處 理 技 術(shù) 和 超 高 效 液 相 色 譜 串 聯(lián) 質(zhì) 譜 儀 UPLC MS MS 建 立 了 測 定 草 莓 中 手 性 農(nóng) 藥 抑 霉 唑 對 映 體 的 分 析 方 法 樣 品 用 乙 腈 提 取 N 丙 基 乙 二 胺 PSA 和 石 墨 化 碳 黑 GCB 凈 化 經(jīng) 手 性 色 譜 柱 Lux Cellulose 2 拆 分 后 用 UPLC MS MS 進(jìn) 行 測 定 基 質(zhì) 外 標(biāo) 法 定 量 分 析 結(jié) 果 表 明 手 性 農(nóng) 藥 抑 霉 唑 對 映 體 在 2 5 1 000 g L 1 范 圍 內(nèi) 線 性 關(guān) 系 良 好 R 2 0 99 方 法 定 量 限 LOQ 為 5 g kg 1 3 個 添 加 水 平 5 50 1 000 g kg 1 下 S 和 R 抑 霉 唑 對 映 體 在 草 莓 基 質(zhì) 中 的 平 均 回 收 率 分 別 為 94 6 119 7 和 86 6 117 3 相 對 標(biāo) 準(zhǔn) 偏 差 分 別 為 2 0 8 3 和 5 0 9 6 抑 霉 唑 兩 對 映 體 在 草 莓 生 長 中 的 降 解 符 合 一 級 動 力 學(xué) 方 程 S 抑 霉 唑 半 衰 期 6 54 d R 抑 霉 唑 半 衰 期 7 07 d 本 研 究 從 對 映 體 的 角 度 研 究 了 抑 霉 唑 在 草 莓 中 的 降 解 可 為 手 性 農(nóng) 藥 對 映 體 的 環(huán) 境 行 為 研 究 提 供 基 礎(chǔ) 數(shù) 據(jù) 關(guān) 鍵 詞 抑 霉 唑 草 莓 手 性 農(nóng) 藥 超 高 效 液 相 色 譜 串 聯(lián) 質(zhì) 譜 QuEChERS 中 圖 分 類 號 S668 4 文 獻(xiàn) 標(biāo) 志 碼 A 文 章 編 號 0528 9017 2023 04 0921 06 草 莓 色 澤 鮮 艷 口 味 酸 甜 具 有 豐 富 的 營 養(yǎng) 價 值 在 高 溫 高 濕 下 草 莓 極 易 引 發(fā) 病 害 殺 蟲 劑 殺 菌 劑 等 農(nóng) 藥 的 使 用 成 為 保 障 草 莓 產(chǎn) 業(yè) 健 康 發(fā) 展 必 不 可 少 的 措 施 1 近 年 來 草 莓 農(nóng) 藥 用 量 逐 年 增 加 據(jù) 報(bào) 道 草 莓 中 使 用 的 農(nóng) 藥 高 達(dá) 50 多 種 有 較 大 的 安 全 風(fēng) 險(xiǎn) 2 手 性 農(nóng) 藥 是 發(fā) 展 高 效 低 風(fēng) 險(xiǎn) 農(nóng) 藥 的 一 個 重 要 突 破 口 目 前 手 性 農(nóng) 藥 在 國 內(nèi) 外 農(nóng) 藥 市 場 占 比 達(dá) 40 以 上 抑 霉 唑 是 比 利 時 Janssen 公 司 開 發(fā) 的 咪 唑 類 手 性 殺 菌 劑 英 文 通 用 名 為 Imazalil 含 有 1 個 手 性 中 心 2 個 對 映 體 抑 霉 唑 為 內(nèi) 吸 性 廣 譜 殺 菌 劑 對 水 果 和 蔬 菜 中 常 見 的 青 霉 病 綠 霉 病 有 很 好 的 防 治 效 果 2018 年 抑 霉 唑 被 登 記 作 為 防 治 草 莓 灰 霉 病 的 殺 菌 劑 目 前 抑 霉 唑 以 外 消 旋 的 形 式 出 售 和 使 用 在 植 物 及 環(huán) 境 中 抑 霉 唑 對 映 體 存 在 選 擇 性 降 解 行 為 對 映 體 殘 留 存 在 差 別 從 而 威 脅 人 體 健 康 3 4 有 關(guān) 抑 霉 唑 對 映 體 手 性 拆 分 方 法 有 毛 細(xì) 管 電 泳 法 液 相 色 譜 法 和 液 相 色 譜 串 聯(lián) 質(zhì) 譜 法 Kodama 等 5 采 用 毛 細(xì) 管 電 泳 法 實(shí) 現(xiàn) 抑 霉 唑 對 映 體 的 分 離 并 且 首 次 應(yīng) 用 在 柑 橘 中 抑 霉 唑 的 檢 測 Pan 等 6 用 自 制 的 纖 維 素 手 性 色 譜 柱 在 正 相 液 相 色 譜 條 件 下 實(shí) 現(xiàn) 了 抑 霉 唑 對 映 體 的 完 全 分 離 且 分 離 度 高 但 分 離 時 間 過 長 基 于 手 性 固 定 相 的 液 相 色 譜 串 聯(lián) 質(zhì) 譜 法 直 接 拆 分 手 性 農(nóng) 藥 殘 留 具 有 速 度 快 應(yīng) 用 范 圍 廣 分 離 效 果 好 等 優(yōu) 點(diǎn) 成 為 手 性 農(nóng) 藥 分 離 分 析 的 一 種 重 要 手 段 目 前 已 在 蔬 菜 水 果 以 及 土 壤 農(nóng) 藥 殘 留 檢 測 中 廣 泛 應(yīng) 用 7 8 鑒 于 此 本 研 究 利 用 超 高 效 液 相 色 譜 串 聯(lián) 質(zhì) 譜 UPLC MS MS 對 抑 霉 唑 進(jìn) 行 手 性 拆 分 并 結(jié) 合 QuEChERS 前 處 理 方 法 優(yōu) 化 建 立 草 莓 中 抑 霉 唑 對 映 體 殘 留 的 UPLC MS MS 分 析 方 法 闡 明 手 性 農(nóng) 藥 抑 霉 唑 在 草 莓 上 的 降 解 規(guī) 律 填 補(bǔ) 在 對 映 體 水 平 上 研 究 草 莓 中 抑 霉 唑 的 殘 留 水 平 的 空 白 為 抑 霉 唑 更 準(zhǔn) 確 的 風(fēng) 險(xiǎn) 評 估 提 供 技 術(shù) 支 持 1 材 料 與 方 法 1 1 試 驗(yàn) 材 料 SCIEX Triple Quad 3500 質(zhì) 譜 儀 美 國 SCIEX 公 司 Lux Cellulose 2 手 性 色 譜 柱 150 mm 922 2023 年 第 64 卷 第 4 期 4 6 mm 5 m 美 國 Phenomenex 公 司 固 定 相 為 纖 維 素 三 3 氯 4 甲 基 苯 基 氨 基 甲 酸 酯 Centrifuge 5810R 離 心 機(jī) 德 國 Eppendorf 公 司 PL602 L 電 子 天 平 瑞 士 METTLER TOLEDO 公 司 JYL C020 勻 漿 機(jī) 中 國 九 陽 有 限 公 司 色 譜 級 乙 腈 美 國 Thermo Fisher Scientific 公 司 氯 化 鈉 無 水 硫 酸 鎂 中 國 Macklin 公 司 N 氮 基 乙 二 胺 PSA 40 m 石 墨 化 碳 黑 GCB 天 津 博 納 艾 杰 有 限 公 司 抑 霉 唑 標(biāo) 準(zhǔn) 品 純 度 99 對 映 單 體 比 例 1 1 中 國 Aladdin 公 司 20 抑 霉 唑 水 乳 劑 中 國 劍 牌 農(nóng) 化 股 份 有 限 公 司 有 機(jī) 濾 膜 0 22 m 中 國 津 騰 試 驗(yàn) 有 限 公 司 蒸 餾 水 1 2 試 驗(yàn) 方 法 試 驗(yàn) 于 2021 年 12 月 在 江 蘇 徐 淮 地 區(qū) 徐 州 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 研 究 所 中 心 實(shí) 驗(yàn) 室 進(jìn) 行 1 2 1 樣 品 前 處 理 準(zhǔn) 確 稱 取 紅 顏 草 莓 勻 漿 10 0 g 于 50 mL 離 心 管 中 加 入 10 mL 色 譜 級 乙 腈 渦 旋 5 min 然 后 向 提 取 液 中 加 入 1 0 g 氯 化 鈉 和 4 0 g 無 水 硫 酸 鎂 渦 旋 1 min 后 于 5 000 r min 1 離 心 5 min 取 上 清 液 1 5 mL 置 于 裝 有 30 mg PSA 10 mg GCB 和 0 150 g 無 水 硫 酸 鎂 的 2 mL 離 心 管 中 渦 旋 混 勻 1 min 于 5 000 r min 1 離 心 5 min 取 上 層 清 液 過 0 22 m 有 機(jī) 濾 膜 至 進(jìn) 樣 瓶 中 1 2 2 色 譜 與 質(zhì) 譜 檢 測 條 件 液 相 色 譜 條 件 為 手 性 色 譜 柱 為 Lux Cellulose 2 150 mm 4 6 mm 5 m 美 國 Phenomenex 公 司 流 動 相 為 超 純 水 A 和 乙 腈 B 洗 脫 梯 度 為 A B 15 85 流 速 5 mL min 1 柱 溫 35 進(jìn) 樣 量 為 5 L 質(zhì) 譜 條 件 具 體 為 離 子 源 為 電 噴 霧 離 子 源 ESI 掃 描 方 式 為 正 離 子 掃 描 氣 簾 氣 CUR 25 Psi 碰 撞 氣 CAD 7 Psi 離 子 化 電 壓 IS 5 500 V 離 子 源 溫 度 550 霧 化 器 GS1 55 Psi 霧 化 器 GS2 55 Psi 抑 霉 唑 質(zhì) 譜 參 數(shù) 見 表 1 表 1 抑 霉 唑 質(zhì) 譜 參 數(shù) 化 合 物 分 子 式 分 子 量 母 離 子 m z 子 離 子 m z 錐 孔 電 壓 V 碰 撞 能 量 V 定 性 定 量 抑 霉 唑 C 14 H 14 Cl 2 N 2 O 297 2 297 1 159 30 30 定 量 69 30 25 定 性 1 2 3 抑 霉 唑 對 映 體 洗 脫 順 序 的 確 定 根 據(jù) 文 獻(xiàn) 報(bào) 道 通 過 UPLC UV 串 聯(lián) 在 線 旋 光 檢 測 器 advanced laser polarimeter ALP 檢 測 旋 光 性 對 映 體 在 Lux Cellulose 2 手 性 柱 上 的 洗 脫 順 序 確 定 為 S 抑 霉 唑 和 R 抑 霉 唑 9 10 1 2 4 色 譜 參 數(shù) 計(jì) 算 考 量 色 譜 分 離 效 果 的 參 數(shù) 主 要 包 括 容 量 因 子 k 和 分 離 因 子 二 者 可 通 過 優(yōu) 化 達(dá) 到 最 佳 值 使 得 分 離 度 RS 達(dá) 到 最 大 一 定 范 圍 內(nèi) 增 大 k 可 顯 著 提 高 分 離 度 增 大 分 離 因 子 可 提 高 色 譜 分 析 準(zhǔn) 確 度 本 試 驗(yàn) 通 過 k 和 RS 評 價 抑 霉 唑 對 映 異 構(gòu) 體 分 離 效 果 計(jì) 算 公 式 如 下 k t t 0 t 0 1 式 1 中 k 容 量 因 子 t 保 留 時 間 RT t 0 死 時 間 k 1 k 2 2 式 2 中 分 離 因 子 k 1 k 2 容 量 因 子 RS 1 177 t 1 t 2 w 1 2 w 2 2 3 式 3 中 RS 分 離 度 w 2 半 峰 寬 1 2 5 標(biāo) 準(zhǔn) 曲 線 準(zhǔn) 確 稱 取 0 010 g 抑 霉 唑 標(biāo) 準(zhǔn) 品 至 100 mL 容 量 瓶 中 用 色 譜 級 乙 腈 稀 釋 定 容 得 100 mg L 1 母 液 其 對 映 單 體 的 濃 度 為 50 mg L 1 于 20 冰 箱 儲 存 待 用 用 乙 腈 逐 級 稀 釋 母 液 獲 得 濃 度 依 次 為 5 25 50 100 500 1 000 2 000 g L 1 的 外 消 旋 體 工 作 溶 液 其 中 抑 霉 唑 對 映 體 的 濃 度 分 別 為 2 5 12 5 25 50 250 500 1 000 g L 1 現(xiàn) 用 現(xiàn) 配 同 時 采 用 經(jīng) 過 提 取 的 空 白 草 莓 基 質(zhì) 配 制 相 應(yīng) 濃 度 的 基 質(zhì) 標(biāo) 準(zhǔn) 曲 線 1 2 6 基 質(zhì) 效 應(yīng) 通 過 溶 劑 標(biāo) 準(zhǔn) 曲 線 和 基 質(zhì) 標(biāo) 準(zhǔn) 曲 線 計(jì) 算 基 質(zhì) 效 應(yīng) ME 11 按 式 4 計(jì) 算 基 質(zhì) 效 應(yīng) 為 基 質(zhì) 標(biāo) 準(zhǔn) 曲 線 斜 率 與 溶 劑 標(biāo) 準(zhǔn) 曲 線 斜 率 之 差 占 溶 劑 標(biāo) 準(zhǔn) 曲 線 斜 率 的 百 分 比 1 2 7 方 法 準(zhǔn) 確 度 與 精 密 度 分 別 用 抑 霉 唑 對 映 體 的 回 收 率 及 相 對 標(biāo) 準(zhǔn) 偏 差張 佳 等 抑 霉 唑 在 草 莓 生 長 過 程 中 對 映 體 選 擇 性 降 解 行 為 923 進(jìn) 行 評 估 本 實(shí) 驗(yàn) 中 抑 霉 唑 對 映 體 的 添 加 水 平 分 別 為 5 50 1 000 g kg 1 每 個 添 加 水 平 進(jìn) 行 6 次 重 復(fù) 試 驗(yàn) 重 復(fù) 3 天 1 2 8 田 間 試 驗(yàn) 草 莓 上 抑 霉 唑 降 解 動 態(tài) 試 驗(yàn) 選 取 江 蘇 徐 淮 地 區(qū) 徐 州 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 研 究 所 銅 山 試 驗(yàn) 站 設(shè) 施 溫 室 的 紅 顏 草 莓 2 a 內(nèi) 未 噴 施 抑 霉 唑 及 結(jié) 構(gòu) 相 似 的 農(nóng) 藥 試 驗(yàn) 地 設(shè) 3 個 降 解 試 驗(yàn) 區(qū) 1 個 空 白 試 驗(yàn) 區(qū) 每 個 降 解 試 驗(yàn) 區(qū) 面 積 30 m 2 在 草 莓 生 長 至 一 半 大 小 時 施 藥 1 次 施 藥 濃 度 250 mg kg 1 最 高 推 薦 劑 量 的 1 5 倍 在 施 藥 后 2 h 1 3 5 7 10 15 21 27 d 取 樣 一 級 動 力 學(xué) 方 程 評 估 抑 霉 唑 在 草 莓 中 的 降 解 過 程 式 4 根 據(jù) 擬 合 的 一 級 動 力 學(xué) 方 程 計(jì) 算 抑 霉 唑 降 解 半 衰 期 T 1 2 式 5 抑 霉 唑 選 擇 性 降 解 差 異 用 對 映 體 分 數(shù) EF 評 估 式 6 C C 0 e k t 4 式 4 中 C t 時 對 映 體 濃 度 C 0 對 映 體 初 始 濃 度 T 1 2 ln 2 k 5 EF A A A 6 式 6 中 A S 抑 霉 唑 A R 抑 霉 唑 1 3 統(tǒng) 計(jì) 分 析 所 有 試 驗(yàn) 均 設(shè) 置 至 少 3 個 重 復(fù) 用 Excel 進(jìn) 行 數(shù) 據(jù) 統(tǒng) 計(jì) 用 Origin 2017 軟 件 繪 制 色 譜 圖 2 結(jié) 果 與 分 析 2 1 抑 霉 唑 對 映 體 分 離 色 譜 條 件 的 優(yōu) 化 本 實(shí) 驗(yàn) 在 前 人 研 究 基 礎(chǔ) 上 利 用 SCIEX Triple Quad 3500 質(zhì) 譜 儀 并 結(jié) 合 Lux Cellulose 2 手 性 色 譜 柱 針 對 不 同 流 動 相 比 例 A B 5 95 15 85 25 75 和 35 65 不 同 流 速 0 3 0 4 0 5 和 0 6 mL min 1 和 不 同 柱 溫 25 30 35 和 40 進(jìn) 行 色 譜 條 件 優(yōu) 化 2 1 1 流 動 相 比 例 的 優(yōu) 化 有 機(jī) 相 比 例 影 響 洗 脫 強(qiáng) 度 進(jìn) 而 影 響 手 性 化 合 物 的 分 離 效 果 本 實(shí) 驗(yàn) 分 析 流 動 相 比 例 A B 5 95 15 85 25 75 和 35 65 流 速 0 5 mL min 1 柱 溫 35 對 抑 霉 唑 分 離 的 影 響 如 表 2 所 示 隨 著 有 機(jī) 相 比 例 的 降 低 抑 霉 唑 對 映 體 的 容 量 因 子 k 不 斷 升 高 k 值 越 大 分 離 度 越 大 但 k 小 時 有 利 于 形 成 窄 峰 形 因 此 應(yīng) 綜 合 考 慮 分 離 因 子 從 0 83 提 高 到 0 86 增 大 可 提 高 分 離 分 析 準(zhǔn) 確 度 乙 腈 比 例 升 高 可 縮 短 兩 對 映 體 的 保 留 時 間 提 高 分 離 效 率 但 分 離 度 從 2 63 降 低 到 1 58 圖 1 中 A 一 般 地 當(dāng) 分 離 度 大 于 1 5 時 就 認(rèn) 為 對 映 體 實(shí) 現(xiàn) 基 線 分 離 因 此 在 本 試 驗(yàn) 設(shè) 計(jì) 的 4 個 有 機(jī) 相 比 例 下 抑 霉 唑 對 映 體 均 可 實(shí) 現(xiàn) 完 全 分 離 故 綜 合 考 慮 各 參 數(shù) 分 離 度 及 分 離 效 率 最 終 選 擇 了 流 動 相 比 例 為 A B 15 85 表 2 流 動 相 比 例 對 抑 霉 唑 對 映 體 分 離 效 果 的 影 響 流 動 相 比 例 A B k 1 k 2 RS 5 95 0 82 0 99 0 83 1 58 15 85 0 90 1 09 0 84 1 83 25 75 1 01 1 19 0 85 2 21 35 65 1 77 2 07 0 86 2 63 注 k 1 k 2 分 別 為 先 后 洗 脫 的 對 映 異 構(gòu) 體 的 容 量 因 子 表 3 同 2 1 2 流 速 對 分 離 的 影 響 分 析 流 速 0 3 0 4 0 5 和 0 6 mL min 1 流 動 相 比 例 A B 15 85 柱 溫 35 對 抑 霉 唑 分 離 的 影 響 當(dāng) 流 速 逐 漸 增 大 時 容 量 因 子 k 有 所 減 小 k 1 范 圍 為 0 67 0 87 k 2 范 圍 為 0 78 1 01 分 離 因 子 在 流 速 為 0 3 mL min 1 時 最 大 為 0 86 流 速 主 要 通 過 改 變 色 譜 系 統(tǒng) 壓 力 從 而 改 變 流 動 相 洗 脫 強(qiáng) 度 通 常 情 況 下 當(dāng) 流 速 增 大 時 洗 脫 時 間 減 少 分 析 效 率 提 高 同 樣 也 會 減 小 分 離 度 故 綜 合 考 慮 各 參 數(shù) 及 分 離 度 最 終 選 擇 了 流 速 為 0 5 mL min 1 表 3 和 圖 1 中 B 表 3 流 速 對 抑 霉 唑 對 映 體 分 離 效 果 的 影 響 流 速 mL min 1 k 1 k 2 RS 0 3 0 87 1 01 0 86 1 86 0 4 0 67 0 78 0 85 1 67 0 5 0 69 0 78 0 85 1 83 0 6 0 71 0 83 0 85 1 50 2 1 3 柱 溫 對 分 離 的 影 響 柱 溫 是 影 響 抑 霉 唑 對 映 異 構(gòu) 體 分 離 的 主 要 因 素 之 一 本 實(shí) 驗(yàn) 分 別 考 察 了 柱 溫 為 25 30 35 和 40 時 抑 霉 唑 對 映 體 的 分 離 情 況 結(jié) 果 見 圖 1 中 C 隨 著 柱 溫 升 高 抑 霉 唑 對 映 體 的 分 離 度 變 化 小 但 當(dāng) 柱 溫 升 高 到 40 時 分 離 度 下 降 到 1 48 因 此 綜 合 比 較 不 同 柱 溫 下 2 對 映 異 構(gòu) 體 的 分 離 度 RS 和 保 留 時 間 最 終 選 擇 了 柱 溫 35 綜 合 以 上 優(yōu) 化 結(jié) 果 選 擇 流 動 相 為 超 純 水924 2023 年 第 64 卷 第 4 期 A 乙 腈 B 15 85 流 速 0 5 mL min 1 柱 溫 35 作 為 儀 器 分 析 條 件 在 該 條 件 下 抑 霉 唑 2 對 映 體 在 8 min 內(nèi) 出 峰 完 畢 分 離 度 RS 1 5 達(dá) 到 分 析 要 求 A 表 示 流 動 相 比 例 對 分 離 效 果 的 影 響 B 表 示 流 速 對 分 離 效 果 的 影 響 C 表 示 柱 溫 對 分 離 效 果 的 影 響 圖 1 不 同 色 譜 分 離 條 件 下 手 性 殺 菌 劑 抑 霉 唑 分 離 色 譜 圖 2 2 凈 化 方 法 的 優(yōu) 化 抑 霉 唑 的 提 取 和 凈 化 基 于 QuEChERS 方 法 優(yōu) 化 QuEChERS 方 法 因 其 快 速 簡 便 廉 價 有 效 可 靠 和 安 全 的 特 點(diǎn) 已 成 為 分 析 農(nóng) 藥 和 獸 藥 殘 留 的 一 種 廣 泛 使 用 的 前 處 理 方 法 與 傳 統(tǒng) 前 處 理 方 法 相 比 QuEChERS 適 用 性 更 為 廣 泛 且 通 常 擁 有 較 高 的 回 收 率 和 高 樣 品 處 理 通 量 12 15 為 了 減 少 雜 質(zhì) 干 擾 且 提 高 回 收 效 率 在 草 莓 基 質(zhì) 中 的 加 標(biāo) 濃 度 為 100 g kg 1 消 旋 體 評 估 不 同 吸 附 劑 比 例 50 mg PSA 10 mg GCB 50 mg PSA 20 mg GCB 50 mg PSA 30 mg GCB 對 抑 霉 唑 對 映 體 回 收 率 的 影 響 結(jié) 果 見 圖 2 隨 著 GCB 用 量 的 增 加 抑 霉 唑 對 映 體 回 收 率 均 有 所 下 降 當(dāng) GCB 的 用 量 增 加 到 30 mg 時 回 收 率 低 于 80 50 mg PSA 10 mg GCB 和 50 mg PSA 20 mg GCB 凈 化 劑 組 合 在 草 莓 基 質(zhì) 中 顯 示 出 符 合 要 求 的 回 收 率 80 120 為 了 獲 得 較 高 回 收 率 和 較 好 的 純 化 效 果 選 擇 50 mg PSA 10 mg GCB 用 于 草 莓 樣 品 的 凈 化 圖 2 草 莓 中 抑 霉 唑 對 映 體 的 提 取 效 率 2 3 抑 霉 唑 檢 測 方 法 評 價 2 3 1 線 性 關(guān) 系 與 基 質(zhì) 效 應(yīng) 在 優(yōu) 化 條 件 下 按 1 2 節(jié) 方 法 考 察 抑 霉 唑 對 映 體 的 溶 劑 和 基 質(zhì) 標(biāo) 準(zhǔn) 曲 線 方 程 決 定 系 數(shù) 和 基 質(zhì) 效張 佳 等 抑 霉 唑 在 草 莓 生 長 過 程 中 對 映 體 選 擇 性 降 解 行 為 925 應(yīng) 結(jié) 果 見 表 4 結(jié) 果 表 明 抑 霉 唑 對 映 體 在 2 5 1 000 g L 1 濃 度 范 圍 內(nèi) 線 性 關(guān) 系 良 好 決 定 系 數(shù) R 2 均 在 0 99 以 上 故 本 試 驗(yàn) 選 擇 基 質(zhì) 標(biāo) 準(zhǔn) 曲 線 為 草 莓 基 質(zhì) 進(jìn) 行 定 量 分 析 根 據(jù) 抑 霉 唑 對 映 體 的 線 性 方 程 考 察 基 質(zhì) 效 應(yīng) 基 質(zhì) 效 應(yīng) matrix effect 影 響 分 析 檢 測 過 程 的 準(zhǔn) 確 性 和 可 靠 性 色 譜 串 聯(lián) 質(zhì) 譜 分 析 中 基 質(zhì) 效 應(yīng) 一 般 被 認(rèn) 為 共 洗 脫 的 成 分 導(dǎo) 致 被 分 析 物 質(zhì) 響 應(yīng) 增 強(qiáng) 或 抑 制 基 質(zhì) 效 應(yīng) 的 增 強(qiáng) 常 伴 隨 著 分 析 方 法 精 密 度 的 下 降 因 此 在 農(nóng) 藥 檢 測 中 多 通 過 建 立 標(biāo) 準(zhǔn) 曲 線 消 除 基 質(zhì) 效 應(yīng) 16 17 通 常 當(dāng) 基 質(zhì) 效 應(yīng) 在 10 10 時 可 忽 略 不 計(jì) 本 實(shí) 驗(yàn) 中 S 抑 霉 唑 和 R 抑 霉 唑 基 質(zhì) 效 應(yīng) 分 別 為 63 5 和 30 4 表 4 S 抑 霉 唑 和 R 抑 霉 唑 在 草 莓 中 表 現(xiàn) 出 較 強(qiáng) 的 基 質(zhì) 減 弱 效 應(yīng) 因 此 本 方 法 采 用 基 質(zhì) 標(biāo) 準(zhǔn) 溶 液 進(jìn) 行 定 量 分 析 表 4 抑 霉 唑 對 映 體 在 不 同 基 質(zhì) 中 的 標(biāo) 準(zhǔn) 曲 線 決 定 系 數(shù) R 2 和 基 質(zhì) 效 應(yīng) 化 合 物 基 質(zhì) 回 歸 方 程 決 定 系 數(shù) R 2 線 性 范 圍 g L 1 基 質(zhì) 效 應(yīng) 定 量 限 g kg 1 S 抑 霉 唑 乙 腈 y 1 002 3 x 31 100 0 995 0 2 5 100 0 草 莓 y 365 x 828 62 0 999 9 2 5 100 0 63 5 5 R 抑 霉 唑 乙 腈 y 483 7 x 11 377 0 995 8 2 5 100 0 草 莓 y 336 63 x 8 322 6 0 999 3 2 5 100 0 30 4 5 2 3 2 準(zhǔn) 確 度 和 精 密 度 檢 測 方 法 的 準(zhǔn) 確 度 和 精 密 度 按 照 1 2 7 節(jié) 進(jìn) 行 低 中 高 3 個 濃 度 水 平 的 樣 品 加 標(biāo) 回 收 實(shí) 驗(yàn) 每 個 水 平 重 復(fù) 6 次 同 時 按 1 2 5 節(jié) 配 制 相 應(yīng) 濃 度 的 基 質(zhì) 標(biāo) 準(zhǔn) 溶 液 用 基 質(zhì) 外 標(biāo) 法 定 量 回 收 率 和 相 對 標(biāo) 準(zhǔn) 偏 差 RSD 見 表 5 抑 霉 唑 2 對 映 體 在 草 莓 基 質(zhì) 中 日 內(nèi) 回 收 率 86 6 105 9 日 內(nèi) RSD 為 0 5 9 5 日 間 回 收 率 86 6 119 7 日 間 RSD 為 0 5 11 3 以 最 低 添 加 濃 度 計(jì) 算 方 法 的 定 量 限 得 草 莓 基 質(zhì) 中 抑 霉 唑 對 映 體 的 定 量 限 為 5 g kg 1 表 5 草 莓 中 不 同 添 加 水 平 下 抑 霉 唑 對 映 體 的 回 收 率 和 相 對 標(biāo) 準(zhǔn) 偏 差 化 合 物 添 加 水 平 g kg 1 日 間 n 6 1 d 2 d 3 d 回 收 率 RSD 回 收 率 RSD 回 收 率 RSD 日 內(nèi) n 16 RSD S 抑 霉 唑 5 105 9 0 5 108 5 2 2 105 2 3 4 2 0 50 94 6 4 4 119 7 7 1 110 4 5 2 5 6 1 000 99 2 9 5 112 9 9 0 104 3 6 4 8 3 R 抑 霉 唑 5 97 0 5 0 117 3 5 3 101 2 4 7 5 0 50 89 8 9 5 113 6 11 3 99 4 7 9 9 6 1 000 86 6 8 1 110 3 4 5 105 3 5 5 6 0 2 4 草 莓 生 長 過 程 中 抑 霉 唑 的 降 解 動 態(tài) 采 用 本 方 法 檢 測 紅 顏 草 莓 生 長 過 程 中 手 性 農(nóng) 藥 抑 霉 唑 對 映 體 的 殘 留 變 化 情 況 結(jié) 果 見 表 6 抑 霉 唑 2 對 映 體 在 草 莓 上 的 降 解 均 符 合 一 級 動 力 學(xué) 方 程 S 抑 霉 唑 在 草 莓 上 的 消 解 方 程 為 y 17 233e 0 106 x R 2 為 0 940 3 半 衰 期 6 54 0 09 d R 抑 霉 唑 在 草 莓 上 的 消 解 方 程 為 y 18 375e 0 098 x R 2 為 0 967 7 半 衰 期 7 07 0 17 d 分 析 半 衰 期 表 明 抑 霉 唑 2 個 對 映 體 在 草 莓 生 長 過 程 中 有 顯 著 的 選 擇 性 降 解 行 為 P 0 05 降 解 過 程 中 EF 從 0 51 降 至 0 42 與 EF 0 5 存 在 顯 著 差 異 P 0 01 說 明 2 個 對 映 體 在 草 莓 上 存 在 選 擇 性 降 解 行 為 手 性 農(nóng) 藥 的 選 擇 性 降 解 行 為 會 受 到 生 物 酶 微 生 物 等 因 素 的 影 響 18 同 一 手 性 農(nóng) 藥 在 不 同 作 物 上 的 選 擇 性 降 解 行 為 也 存 在 差 異 19 如 R 乙 螨 唑 在 蘋 果 和 土 壤 中 優(yōu) 先 降 解 而 S 乙 螨 唑 在 草 莓 中 優(yōu) 先 降 解 20 劉 娜 等 21 研 究 表 明 粉 唑 醇 2 對 映 體 在 草 莓 生 長 中 不 存 在 選 擇 性 降 解 行 為 因 此 手 性 農(nóng) 藥 的 施 用 和 風(fēng) 險(xiǎn) 評 估 應(yīng) 考 慮 其 施 用 作 物 栽 培 環(huán) 境 等 因 素 表 6 草 莓 生 長 過 程 中 手 性 農(nóng) 藥 抑 霉 唑 對 映 體 的 殘 留 變 化 時 間 d 平 均 濃 度 標(biāo) 準(zhǔn) 偏 差 g kg 1 S 抑 霉 唑 R 抑 霉 唑 EF 0 083 666 24 3 00 649 46 7 91 0 51 0 002 1 639 48 19 91 645 19 15 44 0 50 0 001 2 527 85 16 00 560 77 9 60 0 49 0 004 3 410 35 21 82 451 05 16 61 0 48 0 002 5 292 13 31 31 337 90 10 31 0 45 0 003 7 232 37 33 55 268 64 22 78 0 45 0 005 14 93 02 12 87 124 54 12 56 0 43 0 009 21 50 40 0 93 66 11 3 62 0 43 0 011 27 49 26 11 21 58 23 1 21 0 42 0 013926 2023 年 第 64 卷 第 4 期 3 小 結(jié) 本 研 究 建 立 了 一 種 基 于 QuEChERS 超 高 效 液 相 色 譜 串 聯(lián) 質(zhì) 譜 檢 測 草 莓 中 抑 霉 唑 對 映 體 的 手 性 拆 分 方 法 抑 霉 唑 對 映 體 在 2 5 1 000 g L 1 范 圍 內(nèi) 線 性 關(guān) 系 良 好 R 2 0 99 方 法 定 量 限 LOQ 為 5 g kg 1 S 和 R 抑 霉 唑 對 映 體 在 草 莓 基 質(zhì) 中 的 平 均 回 收 率 分 別 為 94 6 119 7 和 86 6 117 3 相 對 標(biāo) 準(zhǔn) 偏 差 分 別 為 2 0 8 3 和 5 0 9 6 研 究 了 抑 霉 唑 在 草 莓 生 長 過 程 中 的 對 映 體 選 擇 性 降 解 行 為 結(jié) 果 表 明 抑 霉 唑 對 映 體 在 草 莓 生 長 中 存 在 選 擇 性 降 解 S 抑 霉 唑 半 衰 期 6 54 d R 抑 霉 唑 半 衰 期 7 07 d 本 研 究 建 立 的 方 法 有 較 高 的 準(zhǔn) 確 度 和 精 密 度 可 對 草 莓 中 手 性 農(nóng) 藥 抑 霉 唑 對 映 體 準(zhǔn) 確 拆 分 和 測 定 分 析 速 度 快 靈 敏 度 高 可 為 手 性 農(nóng) 藥 抑 霉 唑 的 進(jìn) 一 步 研 究 提 供 技 術(shù) 參 考 文 獻(xiàn) 1 班 思 凡 李 春 梅 賀 青 華 等 設(shè) 施 栽 培 草 莓 中 農(nóng) 藥 殘 留 膳 食 風(fēng) 險(xiǎn) 評 估 J 食 品 工 業(yè) 科 技 2020 41 3 212 220 2 付 巖 張 亮 吳 銀 良 草 莓 中 嘧 霉 胺 的 殘 留 與 膳 食 風(fēng) 險(xiǎn) 評 估 J 現(xiàn) 代 食 品 科 技 2017 33 11 206 211 3 陳 宗 懋 食 品 中 農(nóng) 藥 殘 留 檢 測 發(fā) 展 的 新 趨 勢 J 農(nóng) 產(chǎn) 品 質(zhì) 量 與 安 全 2010 1 9 12 4 LV T CARVALHO P N CASAS M E et al Enantioselective uptake translocation and degradation of the chiral pesticides tebuconazole and imazalil by P h r a g m i t e s a u s t r a l i s J Environmental Pollution 2017 229 362 370 5 KODAMA S YAMAMOTO A OHURA T et al Enantioseparation of imazalil residue in orange by capillary electrophoresis with 2 hydroxypropyl cyclodextrin as a chiral selector J Journal of Agricultural and Food Chemistry 2003 51 21 6128 6131 6 PAN C X XU X Z ZHANG X J et al Comparative study of the enantioseparation of uniconazole and imazalil by HPLC on various cellulose chiral columns J Analytical Letters 2006 39 3 631 638 7 駱 沖 黃 聰 靈 朱 富 偉 等 兩 種 葉 菜 中 5 種 典 型 手 性 農(nóng) 藥 對 映 體 的 超 高 效 液 相 色 譜 串 聯(lián) 質(zhì) 譜 UPLC MS MS 分 析 方 法 研 究 J 分 析 測 試 學(xué) 報(bào) 2018 37 3 294 299 8 崔 璇 鐘 青 張 新 忠 等 農(nóng) 產(chǎn) 品 中 手 性 農(nóng) 藥 對 映 體 殘 留 色 譜 法 分 析 研 究 進(jìn) 展 J 分 析 測 試 學(xué) 報(bào) 2019 38 2 249 262 9 CHASI T YANG W QIU J et al Direct enantioseparation of nitrogen heterocyclic pesticides on cellulose based chiral column by high performance liquid chromatography J Chirality 2015 27 1 32 38 10 LI R N DONG F S XU J et al Enantioseparation of imazalil and monitoring of its enantioselective degradation in apples and soils using ultrahigh performance liquid chromatography tandem mass spectrometry J Journal of Agricultural and Food Chemistry 2017 65 16 3259 3267 11 張 圓 圓 劉 磊 李 娜 等 農(nóng) 藥 殘 留 檢 測 中 不 同 蔬 菜 的 基 質(zhì) 效 應(yīng) J 農(nóng) 藥 學(xué) 學(xué) 報(bào) 2019 21 3 327 337 12 王 琦 岳 寧 李 曉 慧 等 QuEChERS 技 術(shù) 結(jié) 合 超 高 效 液 相 串 聯(lián) 質(zhì) 譜 同 時 測 定 薄 皮 甜 瓜 中 7 種 葫 蘆 素 J 食 品 科 學(xué) 2022 43 4 144 149 13 ORFANIDI A GIKA H THEODORIDIS G et al Development of a UHPLC MS MS method for the determination of 84 pharmaceuticals and drugs of abuse in human liver J Journal of Chromatography B Analytical Technologies in the Biomedical and Life Sciences 2020 1151 122192 14 LIU T FANG K LIU Y et al Enantioselective residues and toxicity effects of the chiral triazole fungicide hexaconazole in earthworms E i s e n i a f e t i d a J Environmental Pollution 2021 270 116269 15 徐 子 婷 郝 莉 花 馬 靜 等 QuEChERS SPE 超 高 效 液 相 色 譜 串 聯(lián) 質(zhì) 譜 法 測 定 調(diào) 味 面 制 品 中 的 12 種 真 菌 毒 素 J