128 2023 年 第 64 卷 第 1 期 收 稿 日 期 2022 03 14 基 金 項 目 河 北 省 產(chǎn) 業(yè) 創(chuàng) 新 創(chuàng) 業(yè) 團(tuán) 隊 項 目 199A2905H 河 北 省 創(chuàng) 新 能 力 提 升 計 劃 20566301D 邯 鄲 市 科 學(xué) 技 術(shù) 研 究 與 發(fā) 展 計 劃 21112012018 作 者 簡 介 李 得 萍 1997 女 貴 州 茅 臺 人 在 讀 碩 士 研 究 方 向 為 植 物 組 織 培 養(yǎng) 與 育 種 E mail 1505442752 qq com 通 信 作 者 劉 艷 軍 1970 男 天 津 人 高 級 實 驗 師 碩 士 從 事 園 藝 植 物 組 織 培 養(yǎng) 和 分 子 育 種 研 究 工 作 E mail liuyanjun00a 126 com 文 獻(xiàn) 著 錄 格 式 李 得 萍 何 遠(yuǎn) 秦 許 丁 帆 等 鐵 皮 石 斛 組 培 快 繁 技 術(shù) J 浙 江 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 2023 64 1 128 131 DOI 10 16178 j issn 0528 9017 20220217 鐵 皮 石 斛 組 培 快 繁 技 術(shù) 李 得 萍 何 遠(yuǎn) 秦 許 丁 帆 易 元 慧 董 洪 雨 劉 艷 軍 天 津 農(nóng) 學(xué) 院 園 藝 園 林 學(xué) 院 天 津 300392 摘 要 以 鐵 皮 石 斛 莖 段 為 外 植 體 探 究 最 佳 的 外 植 體 消 毒 方 法 和 最 適 的 誘 導(dǎo) 增 殖 生 根 培 養(yǎng) 基 進(jìn) 而 優(yōu) 化 鐵 皮 石 斛 組 培 快 繁 體 系 結(jié) 果 表 明 最 佳 外 植 體 消 毒 方 法 為 30 次 氯 酸 鈉 消 毒 10 min 外 植 體 污 染 率 6 死 亡 率 0 最 適 誘 導(dǎo) 培 養(yǎng) 基 為 基 礎(chǔ) 培 養(yǎng) 基 MS 2 mg L 1 細(xì) 胞 分 裂 素 BA 0 5 mg L 1 萘 乙 酸 NAA 在 此 培 養(yǎng) 基 中 再 生 芽 生 長 快 速 且 健 壯 誘 導(dǎo) 率 為 5 6 最 適 增 殖 培 養(yǎng) 基 為 MS 0 5 mg L 1 NAA 1 0 mg L 1 BA 在 此 培 養(yǎng) 基 中 叢 生 芽 芽 勢 健 壯 生 長 快 增 殖 率 為 3 8 最 適 生 根 培 養(yǎng) 基 為 MS 0 5 mg L 1 NAA 在 此 培 養(yǎng) 條 件 下 組 培 苗 的 平 均 根 數(shù) 達(dá) 7 3 條 平 均 根 長 5 8 cm 根 系 正 常 且 生 長 快 速 本 研 究 優(yōu) 化 了 鐵 皮 石 斛 組 培 快 繁 體 系 可 為 組 培 快 繁 工 廠 化 生 產(chǎn) 流 程 的 進(jìn) 一 步 優(yōu) 化 提 供 依 據(jù) 關(guān) 鍵 詞 鐵 皮 石 斛 組 織 培 養(yǎng) 莖 段 激 素 培 養(yǎng) 基 中 圖 分 類 號 S685 99 文 獻(xiàn) 標(biāo) 志 碼 A 文 章 編 號 0528 9017 2023 01 0128 04 鐵 皮 石 斛 D e n d r o b i u m c a n d i d u m 又 稱 黑 節(jié) 草 是 一 種 重 要 的 藥 用 草 本 植 物 具 有 生 津 降 血 糖 增 強(qiáng) 機(jī) 體 免 疫 力 等 作 用 近 年 愈 發(fā) 受 保 健 品 市 場 的 喜 歡 1 3 鐵 皮 石 斛 種 子 細(xì) 小 沒 有 胚 乳 必 須 與 真 菌 共 生 才 能 萌 發(fā) 因 此 自 然 繁 殖 率 低 4 5 早 期 一 般 通 過 扦 插 分 株 的 繁 殖 方 式 進(jìn) 行 鐵 皮 石 斛 的 生 產(chǎn) 繁 殖 6 這 些 常 規(guī) 方 式 存 在 繁 殖 周 期 長 速 度 慢 等 問 題 不 能 滿 足 生 產(chǎn) 中 對 鐵 皮 石 斛 種 苗 的 大 量 需 求 而 通 過 組 織 培 養(yǎng) 技 術(shù) 進(jìn) 行 組 培 快 繁 可 以 極 大 的 縮 短 繁 殖 時 間 故 使 用 組 織 培 養(yǎng) 技 術(shù) 來 進(jìn) 行 工 廠 化 育 苗 是 解 決 繁 殖 率 低 的 理 想 手 段 7 同 時 也 可 通 過 人 工 種 子 技 術(shù) 進(jìn) 行 鐵 皮 石 斛 的 繁 殖 8 9 鐵 皮 石 斛 組 培 中 多 采 用 種 子 播 種 10 11 誘 導(dǎo) 原 球 莖 進(jìn) 行 組 培 快 繁 而 本 研 究 采 用 了 誘 導(dǎo) 鐵 皮 石 斛 腋 芽 萌 發(fā) 的 方 法 通 過 不 斷 剪 切 帶 芽 莖 段 來 進(jìn) 行 誘 導(dǎo) 增 殖 和 生 根 與 傳 統(tǒng) 的 無 菌 播 種 快 繁 相 比 本 研 究 采 用 的 方 法 有 以 下 三 點 優(yōu) 勢 首 先 是 成 苗 的 生 長 勢 較 強(qiáng) 腋 芽 直 接 再 生 要 比 從 原 球 莖 長 出 的 芽 生 長 勢 強(qiáng) 可 以 直 接 用 于 生 根 從 而 縮 短 了 組 培 的 時 間 其 次 腋 芽 萌 發(fā) 出 來 的 芽 的 自 然 變 異 率 要 明 顯 低 于 原 球 莖 從 而 保 障 了 再 生 苗 的 遺 傳 穩(wěn) 定 性 使 得 組 培 體 系 更 穩(wěn) 定 最 后 此 方 式 的 成 苗 質(zhì) 量 高 獲 得 的 再 生 苗 在 形 態(tài) 上 與 母 本 一 樣 高 度 保 持 了 母 本 的 特 性 而 通 過 傳 統(tǒng) 方 法 以 原 球 莖 進(jìn) 行 再 生 的 苗 中 畸 形 苗 較 多 需 要 長 時 間 的 培 養(yǎng) 才 能 變 成 正 常 苗 進(jìn) 而 影 響 鐵 皮 石 斛 的 商 品 價 值 1 材 料 與 方 法 1 1 試 驗 材 料 試 驗 所 用 鐵 皮 石 斛 盆 栽 苗 由 天 津 農(nóng) 學(xué) 院 園 林 植 物 實 驗 室 提 供 1 2 試 驗 方 法 1 2 1 鐵 皮 石 斛 外 植 體 消 毒 剪 取 長 度 為 2 3 cm 的 鐵 皮 石 斛 嫩 芽 用 70 乙 醇 溶 液 浸 泡 30 s 無 菌 水 沖 洗 30 s 再 分 別 使 用 20 30 40 的 次 氯 酸 鈉 水 溶 液 消 毒 消 毒 時 間 設(shè) 置 為 5 10 15 20 min 消 毒 后 無 菌 水 沖 洗 3 次 每 次 沖 洗 10 min 最 后 用 無 菌 濾 紙 吸 干 外 植 體 表 面 水 分 將 外 植 體 接 種 到 基 礎(chǔ) 培 養(yǎng) 基 MS 上 試 驗 重 復(fù) 3 次 每 個 處 理 接 10 瓶 每 瓶 接 種 4 個 外 植 體 10 d 后 觀 察 并 統(tǒng) 計 不 同 處 理 的 外 植 體 污 染 率 死 亡 率 李 得 萍 等 鐵 皮 石 斛 組 培 快 繁 技 術(shù) 129 1 2 2 鐵 皮 石 斛 腋 芽 的 誘 導(dǎo) 將 消 毒 處 理 后 沒 有 污 染 生 長 健 壯 的 鐵 皮 石 斛 莖 段 外 植 體 接 種 到 含 有 不 同 激 素 的 培 養(yǎng) 基 上 誘 導(dǎo) 莖 段 腋 芽 萌 發(fā) 培 養(yǎng) 基 以 MS 為 基 本 培 養(yǎng) 基 分 別 添 加 不 同 濃 度 細(xì) 胞 分 裂 素 BA 激 動 素 KT 和 萘 乙 酸 NAA 6 種 培 養(yǎng) 基 分 別 為 1 0 mg L 1 BA 1 0 mg L 1 BA 0 5 mg L 1 NAA 2 0 mg L 1 BA 0 5 mg L 1 NAA 1 0 mg L 1 KT 1 0 mg L 1 KT 0 5 mg L 1 NAA 2 0 mg L 1 KT 0 5 mg L 1 NAA 每 個 處 理 接 種 10 瓶 每 瓶 接 種 4 個 外 植 體 試 驗 重 復(fù) 3 次 接 種 后 每 3 d 觀 察 1 次 40 d 后 統(tǒng) 計 平 均 每 個 側(cè) 芽 誘 導(dǎo) 系 數(shù) 與 再 生 芽 生 長 情 況 1 2 3 鐵 皮 石 斛 腋 芽 增 殖 培 養(yǎng) 將 鐵 皮 石 斛 莖 段 上 誘 導(dǎo) 出 的 腋 芽 接 種 到 含 不 同 激 素 的 培 養(yǎng) 基 上 進(jìn) 行 增 殖 培 養(yǎng) 培 養(yǎng) 基 以 MS 為 基 本 培 養(yǎng) 基 分 別 添 加 不 同 濃 度 分 裂 素 BA 和 生 長 素 NAA 吲 哚 丁 酸 IBA 6 種 培 養(yǎng) 基 分 別 為 0 5 mg L 1 IBA 0 5 mg L 1 IBA 1 mg L 1 BA 1 mg L 1 IBA 0 5 mg L 1 BA 0 5 mg L 1 NAA 0 5 mg L 1 NAA 1 mg L 1 BA 1 mg L 1 IBA 0 5 mg L 1 BA 每 個 處 理 接 種 10 瓶 每 瓶 接 種 4 個 外 植 體 每 個 處 理 重 復(fù) 3 次 接 種 后 每 3 d 觀 察 1 次 經(jīng) 過 40 d 后 觀 察 并 統(tǒng) 計 平 均 每 個 側(cè) 芽 增 殖 系 數(shù) 與 叢 生 芽 生 長 情 況 1 2 4 鐵 皮 石 斛 的 生 根 培 養(yǎng) 將 增 殖 培 養(yǎng) 中 萌 發(fā) 的 腋 芽 長 到 3 5 cm 高 時 剪 下 一 部 分 繼 續(xù) 用 于 增 殖 培 養(yǎng) 另 一 部 分 進(jìn) 行 生 根 培 養(yǎng) 將 用 于 生 根 培 養(yǎng) 的 小 苗 接 種 到 含 有 不 同 生 長 素 的 生 根 培 養(yǎng) 基 上 培 養(yǎng) 基 以 MS 為 基 本 培 養(yǎng) 基 分 別 添 加 不 同 種 類 和 不 同 濃 度 的 生 長 素 IAA 0 5 mg L 1 1 0 mg L 1 2 0 mg L 1 和 NAA 0 2 mg L 1 0 5 mg L 1 1 0 mg L 1 每 個 處 理 接 種 10 瓶 每 瓶 接 種 4 個 外 植 體 每 個 處 理 重 復(fù) 6 次 接 種 后 每 5 d 觀 察 1 次 30 d 后 觀 察 并 統(tǒng) 計 植 株 平 均 生 根 數(shù) 平 均 根 長 和 生 根 質(zhì) 量 以 及 植 株 生 長 情 況 1 2 5 培 養(yǎng) 條 件 以 上 培 養(yǎng) 基 均 采 用 5 5 g L 1 瓊 脂 粉 30 g L 1 蔗 糖 pH 5 8 6 0 培 養(yǎng) 溫 度 25 2 光 照 強(qiáng) 度 2 000 2 500 lx 連 續(xù) 照 明 1 2 6 數(shù) 據(jù) 統(tǒng) 計 及 方 法 腋 芽 誘 導(dǎo) 系 數(shù) 誘 導(dǎo) 形 成 的 腋 芽 數(shù) 接 種 莖 段 數(shù) 增 殖 系 數(shù) 有 效 芽 數(shù) 接 種 外 植 體 數(shù) 有 效 芽 為 芽 高 1 cm 的 芽 試 驗 數(shù) 據(jù) 均 采 用 Excel 進(jìn) 行 處 理 2 結(jié) 果 與 分 析 2 1 不 同 消 毒 處 理 方 法 對 外 植 體 消 毒 效 果 的 影 響 由 表 1 可 知 不 同 濃 度 的 消 毒 劑 和 消 毒 時 間 對 外 植 體 消 毒 效 果 不 同 在 20 次 氯 酸 鈉 消 毒 液 作 用 下 外 植 體 污 染 率 一 直 是 處 于 很 高 的 水 平 說 明 在 低 濃 度 消 毒 液 下 微 生 物 基 本 不 受 影 響 即 使 延 長 作 用 時 間 也 不 能 殺 死 植 株 體 內(nèi) 的 微 生 物 從 外 植 體 生 長 來 看 在 低 濃 度 的 消 毒 液 作 用 下 除 了 被 微 生 物 侵 染 造 成 的 生 長 影 響 外 外 植 體 沒 有 出 現(xiàn) 受 消 毒 液 影 響 而 褐 變 死 亡 的 現(xiàn) 象 在 高 濃 度 40 的 次 氯 酸 鈉 作 用 下 微 生 物 幾 乎 全 被 殺 死 只 有 在 消 毒 時 間 為 5 min 時 有 少 數(shù) 外 植 體 出 現(xiàn) 污 染 現(xiàn) 象 可 能 是 由 于 消 毒 時 間 過 短 引 起 的 這 說 明 在 此 濃 度 下 微 生 物 不 能 夠 生 存 但 同 時 在 這 種 較 高 濃 度 的 消 毒 液 水 平 下 幾 乎 所 有 外 植 體 都 出 現(xiàn) 了 褐 變 死 亡 現(xiàn) 象 說 明 在 高 濃 度 的 消 毒 液 作 用 下 植 物 材 料 不 能 夠 正 常 生 長 當(dāng) 采 用 30 次 氯 酸 鈉 消 毒 時 間 為 10 min 時 外 植 體 污 染 率 6 死 亡 率 0 在 外 植 體 污 染 率 較 低 的 前 提 下 也 能 保 證 外 植 體 的 存 活 消 毒 效 果 較 好 綜 合 考 慮 最 適 的 鐵 皮 石 斛 莖 段 外 植 體 消 毒 方 法 為 使 用 30 次 氯 酸 鈉 水 溶 液 消 毒 10 min 表 1 不 同 消 毒 處 理 方 法 對 鐵 皮 石 斛 外 植 體 消 毒 效 果 的 影 響 消 毒 時 間 min 20 次 氯 酸 鈉 30 次 氯 酸 鈉 40 次 氯 酸 鈉 污 染 率 死 亡 率 污 染 率 死 亡 率 污 染 率 死 亡 率 5 100 0 45 0 14 82 10 100 0 6 0 40 100 15 97 0 0 28 0 100 20 81 5 0 87 0 100 2 2 不 同 培 養(yǎng) 基 對 鐵 皮 石 斛 莖 段 腋 芽 誘 導(dǎo) 培 養(yǎng) 的 影 響 由 表 2 可 知 采 用 不 同 激 素 的 培 養(yǎng) 基 對 鐵 皮 石 斛 莖 段 腋 芽 誘 導(dǎo) 的 情 況 差 異 明 顯 在 單 獨 使 用 BA 或 KT 時 雖 然 都 能 誘 導(dǎo) 出 腋 芽 但 芽 細(xì) 弱 顏 色 淡 綠 說 明 再 生 芽 內(nèi) 源 生 長 素 含 量 較 低 需 要 在 培 養(yǎng) 基 中 添 加 外 源 激 素 當(dāng) 添 加 NAA 后 再 生 芽 健 壯 且 誘 導(dǎo) 率 高 于 單 獨 添 加 分 裂 素 BA 或 KT 當(dāng) 使 用 KT 作 為 分 裂 素 時 誘 導(dǎo) 出 的 芽 細(xì) 弱 誘 導(dǎo) 率 不 高 同 時 隨 著 KT 濃 度 的 增 加 再 生 芽 出 現(xiàn) 玻 璃130 2023 年 第 64 卷 第 1 期 化 現(xiàn) 象 說 明 KT 不 適 宜 鐵 皮 石 斛 的 生 長 使 用 BA 作 為 分 裂 素 時 誘 導(dǎo) 出 的 再 生 芽 生 長 正 常 生 長 速 度 快 隨 著 BA 濃 度 的 增 加 誘 導(dǎo) 率 也 增 大 當(dāng) BA 濃 度 為 2 0 mg L 1 時 再 生 芽 生 長 快 且 健 壯 誘 導(dǎo) 率 5 6 因 此 選 擇 MS 2 0 mg L 1 BA 0 5 mg L 1 NAA 作 為 鐵 皮 石 斛 莖 段 誘 導(dǎo) 腋 芽 的 誘 導(dǎo) 培 養(yǎng) 基 表 2 不 同 培 養(yǎng) 基 對 鐵 皮 石 斛 莖 段 腋 芽 誘 導(dǎo) 培 養(yǎng) 的 影 響 培 養(yǎng) 基 平 均 每 個 側(cè) 芽 誘 導(dǎo) 系 數(shù) 再 生 芽 生 長 情 況 1 mg L 1 BA 2 3 細(xì) 弱 顏 色 淡 綠 色 1 mg L 1 BA 0 5 mg L 1 NAA 3 3 健 壯 顏 色 正 常 2 mg L 1 BA 0 5 mg L 1 NAA 5 6 健 壯 顏 色 深 綠 1 mg L 1 KT 1 2 細(xì) 弱 顏 色 發(fā) 黃 1 mg L 1 KT 0 5 mg L 1 NAA 2 7 細(xì) 弱 有 玻 璃 化 現(xiàn) 象 2 mg L 1 KT 0 5 mg L 1 NAA 1 8 細(xì) 弱 都 為 玻 璃 化 苗 2 3 不 同 培 養(yǎng) 基 對 鐵 皮 石 斛 叢 生 芽 增 殖 培 養(yǎng) 的 影 響 由 表 3 可 知 不 同 激 素 的 培 養(yǎng) 基 對 鐵 皮 石 斛 叢 生 芽 增 殖 情 況 差 異 明 顯 在 單 獨 使 用 生 長 素 IBA 或 NAA 時 雖 然 都 有 一 定 的 增 殖 但 增 殖 率 不 高 且 叢 生 芽 生 長 緩 慢 說 明 叢 生 芽 內(nèi) 源 激 素 含 量 較 低 需 要 在 培 養(yǎng) 基 中 添 加 外 源 激 素 添 加 BA 后 增 殖 系 數(shù) 高 于 單 獨 使 用 IBA 或 NAA 當(dāng) 使 用 IBA 作 為 分 裂 素 時 增 殖 出 的 芽 生 長 緩 慢 再 生 芽 長 勢 弱 同 時 加 入 BA 后 再 生 芽 的 長 勢 稍 好 但 生 長 也 緩 慢 說 明 IBA 不 適 宜 鐵 皮 石 斛 生 長 當(dāng) 使 用 NAA 作 為 分 裂 素 時 再 生 芽 芽 勢 正 常 且 生 長 快 生 長 素 與 分 裂 素 比 例 為 1 2 時 更 利 于 鐵 皮 石 斛 的 生 長 當(dāng) NAA 濃 度 為 0 5 mg L 1 BA 濃 度 為 1 mg L 1 時 再 生 芽 長 勢 健 壯 生 長 快 增 殖 系 數(shù) 3 8 因 此 最 佳 的 增 殖 培 養(yǎng) 基 為 MS 0 5 mg L 1 NAA 1 mg L 1 BA 表 3 不 同 培 養(yǎng) 基 對 鐵 皮 石 斛 叢 生 芽 增 殖 培 養(yǎng) 的 影 響 培 養(yǎng) 基 平 均 每 個 側(cè) 芽 增 殖 系 數(shù) 叢 生 芽 芽 生 長 情 況 0 5 mg L 1 IBA 1 6 芽 勢 細(xì) 弱 生 長 緩 慢 0 5 mg L 1 IBA 1 mg L 1 BA 2 8 芽 勢 一 般 生 長 較 慢 1 mg L 1 IBA 0 5 mg L 1 BA 2 2 芽 勢 細(xì) 弱 生 長 較 慢 0 5 mg L 1 NAA 2 8 芽 勢 正 常 生 長 較 快 0 5 mg L 1 NAA 1mg L 1 BA 3 8 芽 勢 健 壯 生 長 快 1 mg L 1 NAA 0 5 mg L 1 BA 1 4 芽 勢 細(xì) 弱 生 長 緩 慢 有 玻 璃 化 現(xiàn) 象 2 4 不 同 生 長 素 對 鐵 皮 石 斛 組 培 苗 生 根 生 長 的 影 響 由 表 4 可 知 在 不 同 的 培 養(yǎng) 基 中 鐵 皮 石 斛 組 培 苗 生 根 數(shù) 量 長 度 及 生 根 質(zhì) 量 明 顯 不 同 在 使 用 IAA 作 為 生 根 誘 導(dǎo) 激 素 時 生 根 數(shù) 量 較 少 根 長 較 短 且 誘 導(dǎo) 出 的 再 生 根 基 本 都 是 短 粗 生 長 緩 慢 的 肉 質(zhì) 根 不 具 有 根 的 功 能 移 栽 時 不 易 成 活 在 使 用 NAA 作 為 生 根 誘 導(dǎo) 激 素 時 誘 導(dǎo) 出 的 根 生 長 迅 速 平 均 根 長 明 顯 長 于 IAA 誘 導(dǎo) 出 的 根 長 同 時 誘 導(dǎo) 出 的 均 為 生 長 正 常 的 根 具 有 主 動 吸 收 功 能 可 以 進(jìn) 行 直 接 移 栽 當(dāng) NAA 的 用 量 為 0 5 mg L 1 時 平 均 生 根 數(shù) 為 7 3 條 平 均 根 長 達(dá) 5 8 cm 且 都 為 生 長 快 的 正 常 根 當(dāng) 繼 續(xù) 增 加 NAA 的 用 量 時 再 生 出 的 根 生 長 速 度 有 一 定 的 下 降 且 在 個 別 植 株 上 出 現(xiàn) 了 玻 璃 化 現(xiàn) 象 說 明 高 濃 度 的 NAA 開 始 對 組 培 苗 產(chǎn) 生 毒 害 作 用 綜 上 所 述 最 佳 的 鐵 皮 石 斛 組 培 苗 生 根 培 養(yǎng) 基 配 方 是 MS 0 5 mg L 1 NAA 表 4 不 同 激 素 對 鐵 皮 石 斛 組 培 苗 生 根 的 影 響 激 素 平 均 生 根 數(shù) 平 均 根 長 cm 生 根 質(zhì) 量 及 生 長 情 況 0 5 mg L 1 IAA 1 2 2 1 肉 質(zhì) 根 生 長 緩 慢 1 0 mg L 1 IAA 2 5 3 0 肉 質(zhì) 根 生 長 較 慢 2 0 mg L 1 IAA 2 9 2 6 肉 質(zhì) 根 生 長 緩 慢 0 2 mg L 1 NAA 5 1 4 9 正 常 根 生 長 較 快 0 5 mg L 1 NAA 7 3 5 8 正 常 根 生 長 快 1 0 mg L 1 NAA 6 6 3 4 正 常 根 生 長 較 快 3 討 論 鐵 皮 石 斛 再 生 植 株 具 有 多 種 獲 取 途 徑 常 用 的 方 式 是 使 用 鐵 皮 石 斛 種 子 進(jìn) 行 無 菌 播 種 形 成 原 球 莖 再 通 過 原 球 莖 增 殖 分 化 發(fā) 育 成 完 整 再 生 植 株 12 也 可 以 通 過 誘 導(dǎo) 莖 段 莖 尖 幼 芽 或 葉 片 等 外 植 體 形 成 叢 生 芽 來 獲 取 再 生 植 株 13 本 試 驗 采 用 后 者 以 莖 段 為 外 植 體 建 立 了 一 套 完 整 的 誘 導(dǎo) 腋 芽 萌 發(fā) 增 殖 生 根 培 養(yǎng) 快 繁 體 系 鐵 皮 石 斛 使 用 工 廠 化 生 產(chǎn) 育 苗 可 以 在 一 定 時 間 內(nèi) 生 產(chǎn) 大 量 整 齊 度 良 好 的 瓶 苗 14 在 工 廠 化 育 苗 中 使 用 種 子 擴(kuò) 繁 要 優(yōu) 于 莖 段 其 優(yōu) 勢 主 要 體 現(xiàn) 在 起 始 階 段 的 種 子 外 植 體 感 染 率 較 低 且 種 子 的 增 殖 系 數(shù) 顯 著 高 于 莖 段 等 但 誘 導(dǎo) 種 子 萌 發(fā) 誘 導(dǎo) 原 球 莖 所 需 的 周 期 較 長 且 因 種 子 是 通 過 雜 交 授 粉 得 到 的 其 遺 傳 性 不 穩(wěn) 定 由 種 子 再 生 的 植 株 經(jīng) 過 多 次 繼 代 受 環(huán) 境 以 及 添 加 的 外 源 激 素 的 影 響 易 改 變 其李 得 萍 等 鐵 皮 石 斛 組 培 快 繁 技 術(shù) 131 原 有 的 性 狀 進(jìn) 而 出 現(xiàn) 性 狀 分 離 的 現(xiàn) 象 以 莖 段 為 外 植 體 進(jìn) 行 腋 芽 誘 導(dǎo) 增 殖 出 來 的 植 株 其 遺 傳 穩(wěn) 定 性 高 能 較 好 地 保 持 原 有 親 本 植 株 的 性 狀 15 本 試 驗 選 用 30 次 氯 酸 鈉 來 對 莖 段 進(jìn) 行 外 植 體 消 毒 消 毒 10 min 外 植 體 污 染 率 為 6 死 亡 率 為 0 消 毒 效 果 高 于 其 他 濃 度 的 次 氯 酸 鈉 以 及 HgCl 2 等 常 用 消 毒 液 16 17 誘 導(dǎo) 莖 段 腋 芽 萌 發(fā) 階 段 可 以 通 過 采 用 添 加 一 些 外 源 激 素 來 加 快 其 增 殖 和 生 長 本 試 驗 誘 導(dǎo) 培 養(yǎng) 基 為 MS 2 0 mg L 1 BA 0 5 mg L 1 NAA 誘 導(dǎo) 系 數(shù) 5 6 再 生 芽 生 長 快 且 健 壯 增 殖 階 段 采 用 生 長 素 與 分 裂 數(shù) 比 例 為 1 2 時 更 適 宜 鐵 皮 石 斛 的 生 長 叢 生 芽 生 長 健 壯 增 殖 率 高 本 試 驗 增 殖 培 養(yǎng) 基 為 MS 0 5 mg L 1 NAA 1 0 mg L 1 BA 增 殖 率 3 8 綜 上 所 述 本 研 究 以 莖 段 為 外 植 體 優(yōu) 化 了 鐵 皮 石 斛 組 培 快 繁 體 系 使 用 莖 段 誘 導(dǎo) 腋 芽 萌 發(fā) 增 殖 的 方 法 可 以 成 為 一 種 穩(wěn) 定 繁 殖 優(yōu) 株 的 途 徑 為 鐵 皮 石 斛 繁 育 和 優(yōu) 質(zhì) 種 苗 生 產(chǎn) 提 供 了 參 考 依 據(jù) 參 考 文 獻(xiàn) 1 寇 戰(zhàn) 利 陳 社 論 劉 冰 林 等 鐵 皮 石 斛 多 糖 對 糖 尿 病 大 鼠 脂 代 謝 異 常 的 改 善 作 用 及 機(jī) 制 J 廣 州 中 醫(yī) 藥 大 學(xué) 學(xué) 報 2021 38 11 2462 2468 2 劉 杰 陳 雙 雪 何 柳 等 鐵 皮 石 斛 藥 用 價 值 研 究 探 索 J 中 國 林 副 特 產(chǎn) 2021 4 73 75 3 舒 杰 鐵 皮 石 斛 的 應(yīng) 用 價 值 及 林 下 仿 野 生 栽 培 技 術(shù) J 現(xiàn) 代 農(nóng) 業(yè) 科 技 2021 24 61 69 4 張 明 夏 鴻 西 朱 利 泉 等 石 斛 組 織 培 養(yǎng) 研 究 進(jìn) 展 J 中 國 中 藥 雜 志 2000 25 6 3 6 5 周 艷 榮 鐵 皮 石 斛 組 織 培 養(yǎng) 快 速 繁 殖 技 術(shù) 的 優(yōu) 化 D 呼 和 浩 特 內(nèi) 蒙 古 農(nóng) 業(yè) 大 學(xué) 2018 6 賈 紅 茹 王 麗 英 李 煥 明 等 鐵 皮 石 斛 的 特 性 及 其 人 工 栽 培 技 術(shù) J 安 陽 工 學(xué) 院 學(xué) 報 2010 9 6 86 87 7 陳 瑞 蕊 林 先 貴 施 亞 琴 藥 用 石 斛 及 其 組 培 技 術(shù) 研 究 概 要 J 江 蘇 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 2002 30 5 64 66 8 賴 佳 鐵 皮 石 斛 液 體 懸 浮 培 養(yǎng) 和 人 工 種 子 的 研 究 D 成 都 四 川 農(nóng) 業(yè) 大 學(xué) 2013 9 許 丁 帆 李 建 科 劉 艷 軍 等 鐵 皮 石 斛 愈 傷 組 織 穩(wěn) 定 培 養(yǎng) 體 系 的 建 立 J 天 津 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 2018 24 8 67 69 90 10 邱 詩 春 張 世 平 馮 山 柴 等 鐵 皮 石 斛 種 子 快 繁 培 養(yǎng) 體 系 的 優(yōu) 化 J 江 蘇 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 2021 49 3 58 61 11 胡 佳 麗 鐵 皮 石 斛 種 子 組 織 培 養(yǎng) 條 件 的 優(yōu) 化 研 究 D 杭 州 浙 江 農(nóng) 林 大 學(xué) 2018 12 陳 志 汪 一 婷 呂 永 平 等 鐵 皮 石 斛 無 菌 播 種 成 苗 體 系 優(yōu) 化 J 浙 江 農(nóng) 業(yè) 學(xué) 報 2018 30 11 1870 1878 13 歐 陽 凡 董 文 賓 付 瑜 等 鐵 皮 石 斛 莖 段 快 繁 技 術(shù) 的 研 究 J 生 物 技 術(shù) 通 報 2016 32 3 63 67 14 陳 瀟 倩 鐵 皮 石 斛 工 廠 化 生 產(chǎn) 技 術(shù) 研 究 D 福 州 福 建 農(nóng) 林 大 學(xué) 2016 15 黃 艷 艷 仉 勁 付 均 惠 等 鐵 皮 石 斛 人 工 繁 育 技 術(shù) J 北 方 園 藝 2021 2 115 123 16 任 潔 鐵 皮 石 斛 組 培 苗 培 養(yǎng) 及 叢 生 芽 增 殖 體 系 的 建 立 D 南 京 南 京 師 范 大 學(xué) 2015 17 高 燕 李 澤 生 耿 秀 英 等 鐵 皮 石 斛 雜 交 種 組 織 培 養(yǎng) 技 術(shù) 試 驗 J 熱 帶 農(nóng) 業(yè) 科 技 2014 37 2 21 24 責(zé) 任 編 輯 張 瑞 麟