2022 4 總第107期 77 實用技術(shù) Practical Technology 文心蘭新品種 七彩湖 大規(guī)模組培快繁技術(shù) 謝光明 1 2 李秀梅 2 劉進平 1 1 海南大學(xué)熱帶作物學(xué)院 海南省熱帶生物資源可持續(xù)利用重點實驗室 海南海口 570228 2 五指山萬泉園藝有限公司 海南省五指山市中山鎮(zhèn)紅山農(nóng)場 海南五指山 572216 摘 要 七彩湖 是文心蘭的1個盆栽型雜交新品種 有很高的觀賞價值 由于其組織培 養(yǎng)存在困難 因此 目前尚未見大規(guī)模組培快繁的報道 從 七彩湖 文心蘭材料采集 表面消 毒 誘導(dǎo)培養(yǎng) 增殖培養(yǎng) 壯苗生根和煉苗移栽6個階段對 七彩湖 文心蘭大規(guī)模組培快繁技術(shù) 進行論述 為研究者和種植者提供參考 關(guān)鍵詞 蘭花 文心蘭 七彩湖 組培快繁 Large Scale Tissue Culture and Rapid Propagation Technology of Oncidium cv Qicaihu Colorful Lake XIE Guangming 1 2 LI Xiumei 2 LIU Jinping 1 1 College of Tropical Crops Hainan University Key Laboratory of Sustainable Utilization of Tropical Biological Resources of Hainan Province Haikou 570228 Hainan 2 Wuzhishan Wanquan Horticulture Co Ltd Hongshan Farm Zhongshan Town Wuzhishan 572216 Hainan Abstract Qicaihu Colorful Lake is a new potted hybrid variety of Oncidium which has high ornamental value Due to the dif culty in its tissue culture the large scale tissue culture and rapid propagation of Qicaihu Colorful 基金項目 2021年五指山市科技和工業(yè)信息化局項目 文心蘭 七彩湖 的規(guī)?；敝撑c栽培技術(shù)研 究 WZSKTPXM2021005 2020年海南省重點研發(fā)計劃項目 觀賞石斛蘭新品種選育與配套栽培技 術(shù)研究 ZDYF2020053 2019年海南省基礎(chǔ)與應(yīng)用基礎(chǔ)研究計劃 省自然科學(xué)基金 高層次人才項目 文心蘭生物鐘相關(guān)基因OnPRR9序列克隆 表達分析和功能鑒定 2019RC147 項目 作者簡介 謝光明 1983 男 碩士 研究方向為蘭花育種與栽培 E mail xieguanmin 163 com 通訊作者 劉進平 1970 男 教授 博士生導(dǎo)師 研究方向為作物遺傳育種 E mail liu3305602 78 實用技術(shù) Practical Technology Lake has not been reported This paper discussed the large scale tissue culture and rapid propagation technology of Qicaihu Colorful Lake from the stages of material collection surface disinfection induction culture proliferation culture strong seedling rooting and seedling transplanting in order to provide a reference for the researchers and growers Keywords orchid Oncidium Qicaihu Colorful Lake tissue culture and rapid propagation 文心蘭為蘭科 Orchidaceae 文心蘭屬 Oncidium 植物 多年生常綠草本植物 氣生性 蘭花 由于其艷麗的顏色 獨特的花型 酷似跳舞 的美人 又名舞女蘭 跳舞蘭等 文心蘭的花色豐 富 唇瓣可以是白色 紅色 黃色 斑點花紋等多 種顏色變化 觀賞價值很高 文心蘭既有切花品 種 又有盆栽品種 其中文心蘭切花被插花界譽為 切花 五美人 之一 為重要的切花類型之一 文心蘭傳統(tǒng)的繁殖方式主要是分株繁殖 分株 繁殖一般在春秋季節(jié)進行 尤其是在春季新芽萌 發(fā)時結(jié)合換盆進行 但分株繁殖系數(shù)低 繁殖速度 慢 適合家庭栽培使用 不能適應(yīng)對優(yōu)良新品種進 行大規(guī)模推廣和滿足市場供應(yīng)的需求 七彩湖 是文心蘭的1個雜交新品種 屬于 盆栽型文心蘭 由于其花期長 花色別致 花量 大 花序美觀 因此 其觀賞價值和經(jīng)濟價值較 高 深受市場青睞 七彩湖 組織培養(yǎng)存在諸多 困難 文心蘭側(cè)芽較小 消毒困難 如果將花梗作 為外植體材料 又因花梗太細 芽誘導(dǎo)困難 再加 上誘導(dǎo)培養(yǎng)的過程中容易出現(xiàn)黃化死芽 增殖率也 不高 因此 一直未見 七彩湖 文心蘭組培快繁 的報道 為了促進 七彩湖 文心蘭的商品化生 產(chǎn) 這里報道筆者新開發(fā)的 七彩湖 文心蘭大規(guī) 模組培快繁技術(shù) 分材料采集 表面消毒 誘導(dǎo)培 養(yǎng) 增殖培養(yǎng) 壯苗生根和煉苗移栽6個階段 1 材料采集 七彩湖 組培快繁以側(cè)芽作為外植體比較合 適 在準備采芽之前 提前1周選擇無病蟲害 生 長健壯 開花整齊的優(yōu)良母株 先用甲基托布津 3000倍液進行殺菌 同時 對植株進行控干處理 即提前1個星期不進行澆水施肥 使其在材料采集 時保持干燥狀態(tài) 選擇飽滿但葉片沒有完全張開 也未形成假球莖的側(cè)芽作為外植體 采芽時 先用 75 酒精將目標芽進行消毒 用75 酒精消毒后的 手術(shù)刀片從側(cè)芽的基部將其和母株分離 切割時要 特別小心 既不能傷到母株 又不能破壞側(cè)芽的生 長點 2 表面消毒 將采集的側(cè)芽外植體用少量洗潔精和自來水沖 洗5min 然后將側(cè)芽用消毒后的紙巾擦干 在超凈 工作臺上 借助刀片 小心地將苞片和未張開的葉 片剝下 注意不能傷到短縮莖 即形成假球莖之前 的側(cè)芽 因為在壓縮莖上的每一片葉片下都有1 個潛伏芽點 這些潛伏芽點將來會誘導(dǎo)長出新芽 在剝掉葉片的同時 需要用消毒后的棉球浸泡75 酒精 順著葉片生長的方向拭擦 將剝干凈的短縮 莖放入75 的酒精中震蕩消毒30s 然后用無菌水清 洗3遍 然后放入0 3 的升汞溶液震蕩消毒15min 再用無菌水清洗3遍 之后用滅菌后的衛(wèi)生紙吸干 壓縮莖表面的水分 切掉壓縮莖底部與消毒液直接 接觸而泛白的組織 3 誘導(dǎo)培養(yǎng) 將消毒后的短縮莖接入芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基 將切 口一頭插入培養(yǎng)基 深度約2 3mm 芽誘導(dǎo)培 養(yǎng)基為 1 2MS 100mL L椰子水 3mg L BA 0 2mg L NAA 8 5g L卡拉膠 15g L食用白糖 接 種后 在暗培養(yǎng)條件下培養(yǎng)40d 以誘導(dǎo)新芽 腋 芽 產(chǎn)生 圖1A 待新芽長出2cm以上 將其從短縮莖上剝離 將剝離的新芽切掉頂部葉片 將剩余的基部約 0 8cm的芽體接入新鮮的芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基 剝離新芽 后的短縮莖如果還有芽點未產(chǎn)生新芽 可將接觸到 培養(yǎng)基的短縮莖基部切掉薄薄1層組織 有利于吸 2022 4 總第107期 79 實用技術(shù) Practical Technology 收營養(yǎng) 轉(zhuǎn)接到新鮮的芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上繼續(xù)誘 導(dǎo)培養(yǎng) 然后在28 的暗培養(yǎng)條件下進行芽誘導(dǎo)培 養(yǎng) 4 增殖培養(yǎng) 經(jīng)2 3輪芽誘導(dǎo)培養(yǎng)后 會在新芽基部長出少 量叢生芽 此時可進行增殖培養(yǎng) 芽增殖培養(yǎng)基 為 1 2MS 100mL L椰子水 30g L香蕉泥 20g L 土豆泥 3mg L BA 0 2mg L NAA 8 5g L卡拉 膠 15g L食用白糖 在將叢生芽接種到增殖培養(yǎng) 基時 要破壞所有小芽的生長點 并且多個小芽聚 集放在一起進行增殖培養(yǎng) 圖1B 每一個繼代增 殖周期為45d左右 避免長時間不及時轉(zhuǎn)接導(dǎo)致叢 生芽黃化死亡 芽增殖培養(yǎng)同樣需要在暗培養(yǎng)中進 行 溫度維持在28 5 壯苗生根 經(jīng)過若干次繼代增殖培養(yǎng) 增殖芽的數(shù)量達到 目標數(shù)量后 就進行壯苗培養(yǎng) 需要在增殖培養(yǎng) 轉(zhuǎn)入壯苗培養(yǎng)前30d 將暗培養(yǎng)轉(zhuǎn)變?yōu)楣庹諒姸葹?2500lux的光照培養(yǎng) 光照培養(yǎng)過程中 葉片會從 黃白色轉(zhuǎn)為淺綠色 最后變?yōu)樯罹G色 壯苗培養(yǎng)基 為 2 3MS 30g L香蕉泥 20g L土豆泥 8 5g L卡 拉膠 15g L食用白糖 轉(zhuǎn)接時 將轉(zhuǎn)化為綠色的 芽球團接入壯苗培養(yǎng)基中光照培養(yǎng) 壯苗培養(yǎng)過程中芽球團中部分苗株長得很快 同時在貼著培養(yǎng)瓶的底部長出新的原球莖和芽球 圖1C 因此 需要在壯苗培養(yǎng)后45d左右 取 出芽球團 去除原球莖 將苗株按大小分開 將大 苗接入生根培養(yǎng)基 小苗接入壯苗培養(yǎng)基 生根培 養(yǎng)基為 MS 0 2mg L IBA 0 1mg L NAA 30g L 香蕉泥 20g L土豆泥 8 5g L卡拉膠 15g L食用白 糖 壯苗培養(yǎng)和生根培養(yǎng)均采用光照培養(yǎng) 光照強 度為2500lux 溫度為28 按此法將大小苗分開轉(zhuǎn) 接 多次重復(fù) 直到生根植株 圖1D 達到所需數(shù) 量 6 煉苗移栽 生根培養(yǎng)35d左右 培養(yǎng)瓶底部可觀察到大量 的白色根產(chǎn)生 且苗株長到5cm以上 此時就可以 將組培苗移到溫室大棚中煉苗 煉苗初期的溫度 維持在28 32 光照強度2500 5000lux 連續(xù) 煉苗40d左右時 會出現(xiàn)大量的根 盤繞在培養(yǎng)瓶 底部 苗株長到8cm以上 葉片增多 加厚 顏 圖1 七彩湖 文心蘭大規(guī)模組培快繁 A 誘導(dǎo)培養(yǎng) B 增殖培養(yǎng) C 壯苗培養(yǎng) D 生根培養(yǎng) E 晾苗 F 移栽 A C F B ED 80 實用技術(shù) Practical Technology 色明顯轉(zhuǎn)變?yōu)槟G色 并且在苗株基部有少量假 球莖和側(cè)芽產(chǎn)生 此時 可以把光照強度調(diào)整到 5000 8000lux 溫度維持在28 32 繼續(xù)煉苗約 20d后 即可出瓶移栽了 移栽時 將新出瓶的苗株置于陰涼通風(fēng)處晾苗 圖1E 使苗株略顯脫水狀態(tài) 然后將苗株按 大小分級 將株高8cm以上 有4條以上根 約5cm 長 的苗株分為1個等級 其余分為另1個等級 將 兩種不同等級的苗株分別種植在1 5寸營養(yǎng)杯和72孔 的穴盤 圖1F 中 有利于統(tǒng)一操作管理和苗株的 快速生長 本文報道的組培快繁技術(shù) 可為 七彩湖 文 心蘭大規(guī)模工廠化育苗提供參考 從而促進新品種 七彩湖 的推廣和市場供應(yīng) 1次清水 降低空氣溫度 以利于授粉 提高坐果 率 在結(jié)果期 遇到高溫干旱天氣應(yīng)采取勤施水 合理施肥 適時噴藥 生草栽培 適度修剪 果實 套袋等措施 降低高溫的不利影響 海南島芒果氣象災(zāi)害的演變趨勢對芒果生產(chǎn) 有利有弊 總體上利大于弊 各地發(fā)展芒果生產(chǎn) 需根據(jù)當?shù)貧夂驐l件 趨利避害 充分利用有利 氣候條件 采取措施防御氣象災(zāi)害 保障芒果豐 產(chǎn)增收 參考文獻 1 張明潔 李文韜 張京紅 等 1961 2011年海南島農(nóng)業(yè)氣候 資源變化及其影響研究 J 中國農(nóng)學(xué)通報 2014 30 32 232 241 2 鐵萬祝 羅關(guān)興 王友富 等 我國芒果產(chǎn)業(yè)發(fā)展概況與主要 問題 J 中國熱帶農(nóng)業(yè) 2013 5 16 19 3 朱杰 海南芒果產(chǎn)業(yè)現(xiàn)狀 問題與發(fā)展建議 J 農(nóng)業(yè)工程技 術(shù) 2019 39 32 20 21 4 王瓊 姚樹然 朱銳 等 金絲小棗生長期主要氣象災(zāi)害變化 特征及影響權(quán)重檢驗分析 J 干旱地區(qū)農(nóng)業(yè)研究 2021 39 3 202 208 5 王發(fā)科 雷玉紅 都占良 等 氣候變化對柴達木盆地主要農(nóng) 作物產(chǎn)量的影響 J 中國農(nóng)學(xué)通報 2020 36 14 107 112 6 余會康 徐宗煥 閩東氣候變化與龍眼寒凍害影響分析 J 浙江農(nóng)業(yè)科學(xué) 2014 344 5 748 752 7 余會康 陳安芳 阮翠冰 閩東氣候變化與芒果生長分析 J 中國農(nóng)業(yè)資源與區(qū)劃 2014 35 4 63 68 8 田俊 霍治國 劉丹 等 江西省早稻雨洗花災(zāi)害時空變化及 分區(qū) J 應(yīng)用氣象學(xué)報 2019 30 5 608 618 9 劉云鵬 長江中下游氣候變化與柑桔花期高溫?zé)岷?J 中國 南方果樹 1997 1 25 10 張朝 王品 陳一 等 1990年以來中國小麥農(nóng)業(yè)氣象災(zāi)害時 空變化特征 J 地理學(xué)報 2013 68 11 1453 1460 11 高愛平 陳業(yè)淵 許樹培 等 海南芒果發(fā)展和研究歷程述 評 J 中國熱帶農(nóng)業(yè) 2010 35 4 25 27 12 周文忠 反季節(jié)芒果低產(chǎn)主因分析 J 世界熱帶農(nóng)業(yè)信息 2006 12 21 23 13 鄧彪 馬振峰 杜成勛 等 攀枝花芒果種植氣象致災(zāi)因子危 險性評價 J 高原山地氣象研究 2018 38 1 91 95 14 張明潔 張京紅 劉少軍 等 海南島1961 2011年氣候變化 特征分析 J 熱帶作物學(xué)報 2014 35 12 2488 2495 15 佟金鶴 錢昆 田光輝 等 1977 2017年海南極端氣候事件 變化時空差異分析 J 中國農(nóng)學(xué)通報 2019 35 12 89 94 16 中國氣象局 冷空氣過程監(jiān)測指標 QX T 393 2017 S 北 京 氣象出版社 2017 17 中國氣象局 早稻播種育秧期低溫陰雨等級 QX T 98 2008 S 北京 氣象出版社 2008 18 中國氣象局 極端高溫監(jiān)測指標 QX T 280 2015 S 北京 氣象出版社 2015 19 韋金海 陸英 盧小丹 等 氣候變暖下百色芒果氣象災(zāi)害演 變特征及適應(yīng)對策 J 熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué) 2019 39 9 101 106 上接第76頁