2022年13期 智慧農(nóng)業(yè)導(dǎo)刊 JournalofSmartAgriculture 試驗(yàn) 研究 蝴蝶蘭 火鳳凰 組織培養(yǎng)關(guān)鍵技術(shù)研究 曾燕紅1 玉新愛2 蘇榮軍1 1 廣西玉林農(nóng)業(yè)學(xué)校 廣西玉林 537000 2 玉林市農(nóng)業(yè)科學(xué)院 廣西玉林 537000 蝴蝶蘭屬蘭科蝴蝶蘭屬 花體輕盈美麗 花形奇 特 花色艷麗 花期長 被稱為 洋蘭皇后 圖 1 由于 其觀賞和經(jīng)濟(jì)價(jià)值高 深受國內(nèi)外花卉市場的青睞 蝴 蝶蘭屬單莖氣生蘭 極少數(shù)側(cè)枝 所以 在大規(guī)模生產(chǎn) 中 采用分株繁殖是非常困難的 此外 由于大部分的 種子尚未完全成熟 而且種子中沒有胚乳 因此發(fā)芽速 度較慢 難以通過播種技術(shù)進(jìn)行有性生殖 組織培養(yǎng)技 術(shù)具有快速的生長速度和較高的繁殖能力 具有年生 產(chǎn)能力高的優(yōu)點(diǎn) 是目前工廠式育苗的主要技術(shù)途徑 目前 國內(nèi)外關(guān)于蝴蝶蘭的組培技術(shù)已較為成熟 但由 于品種之間的誘導(dǎo)率差異大 增 殖 系 數(shù) 低 植物生長調(diào) 節(jié)劑的種類和濃度比例不確定等原因 其技術(shù)水平也 有差異 所以 開發(fā)適合于特殊品種的組培快繁技術(shù)系 統(tǒng)具有十分重要的現(xiàn)實(shí)意義 因此 本文選擇了蝴蝶蘭 火鳳凰 的莖稈作為實(shí)驗(yàn)材料 通過對蝴蝶蘭 火鳳 凰 的 不定芽誘導(dǎo) 增 殖和生根等各個(gè)階段的影響進(jìn)行 了研究 確定了 火鳳凰 組培快繁的最佳培養(yǎng)條件 使 其快速繁殖技術(shù)系統(tǒng)得到優(yōu)化 為其工業(yè)化 規(guī)?；?產(chǎn)提供技術(shù)支撐 1 1 材料和方法 1 1 試驗(yàn)材料 加入不同比例的植物生長調(diào)節(jié)劑 用 8 00g L的瓊 脂對所有的載體進(jìn)行了固化 并且在25g L的蔗糖和 5 6 的 pH值下進(jìn)行了固化 加入0 50g L的活性碳 AC 以防爆炸褐化 然后在121 下進(jìn)行30min的殺 菌 如圖2所示 1 2 材料選擇和滅菌 開花期間 從花卉市場購買蝴蝶蘭 火鳳凰 應(yīng) 選 擇生長旺盛 無病蟲害 無變異的母株為外植體 在收集 前對外植體進(jìn)行預(yù)處理 在收獲前5 7d向母株噴灑菌 劑 能有效地預(yù)防和降低內(nèi)源污染 增加誘變成功率 外植體的最佳選擇是蝴蝶蘭第一芽開花的帶腋芽花梗 將其切成5cm左右的小段 小鑷子去除腋芽外部苞 片 放入燒杯中 如圖3所示 在燒杯中滴入幾滴洗滌劑 用自來水沖洗6 8h 再用無菌水沖洗 然后在無菌工作臺(tái)上消毒表面 表面 用75 酒精消毒30s 用 無菌水沖洗3次 然后用0 1 HgCl2溶液浸泡花梗10min 繼續(xù)搖動(dòng) 用無菌水清洗 摘 要 以蝴蝶蘭帶有腋芽的花梗作為外植體 研究多種培養(yǎng)基和不同植物生長調(diào)節(jié)劑的配比對蝴蝶蘭 火鳳凰 不定芽 誘發(fā) 增殖和生根各階段的影響 在誘導(dǎo)蝴蝶蘭不定芽過程中 以MS 花寶1號(hào) 花寶2號(hào) 3 00mg L6 BA 0 05mg LNAA 培養(yǎng)基為最好 不定芽增殖最優(yōu)的培養(yǎng)基為MS 花寶1號(hào) 5 00mg L6 BA 0 5mg LNAA 而生根蝴蝶蘭中 1 2MS 培養(yǎng) 基的生根率總體優(yōu)于 MS 培養(yǎng)基 且誘導(dǎo)蝴蝶蘭生根的最適培養(yǎng)基配方為1 2MS 1 0mg LIBA 0 5mg LNAA 關(guān)鍵詞 蝴蝶蘭 組織培養(yǎng) 關(guān)鍵技術(shù) 中圖分類號(hào) S274 2 文獻(xiàn)標(biāo)志碼 A 文章編號(hào) 2096 9902 2022 13 0025 03 Abstract ThepedicelswithaxillarybudsofPhalaenopsiswereusedasexplantstostudytheeffectsofdifferentmedia andplantgrowthregulatorsontheinduction proliferationandrootingofadventitiousbudsofPhalaenopsis Huofeng Inthe inductionofadventitiousbudsofPhalaenopsis thebestmediumwasMS Huabao1 Huabao2 3 00mg L6 BA 0 05mg L NAA andthebestmediumforadventitiousbudproliferationwasMS Huabao1 5 00mg L6 BA 0 5mg LNAA A mongtherootingPhalaenopsis therootingrateof1MSmediumwasbetterthanthatofMSmedium andtheoptimummedi umforinducingrootingofPhalaenopsiswas1ap2MS 1 0mg LIBA 0 5mg LNAA Keywords Phalaenopsis tissueculture keytechnology 基金項(xiàng)目 2020年廣西農(nóng)業(yè)科技自籌項(xiàng)目 Z202069 作者簡介 曾燕紅 1989 女 碩士研究生 農(nóng)藝師 講師 研究方向?yàn)橹参锝M織培養(yǎng) 果蔬花卉生產(chǎn)技術(shù) 中 職涉農(nóng)教育 DOI 10 20028 j zhnydk 2022 13 009 25 2022年13期試驗(yàn) 研究 智慧農(nóng)業(yè)導(dǎo)刊 JournalofSmartAgriculture 4 5次 用消毒過的濾紙將物料表面的濕氣吹干 然后 進(jìn)行接種 無菌材料是蝴蝶蘭組織培養(yǎng)的一個(gè)重要條件 和保障 而滅菌是一種行之有效的方法 采用表面消毒 方法 將表面的細(xì)菌殺死 使其在最大程度上維持其活 性 所以 在蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)中 殺菌是一個(gè)非常關(guān)鍵 的環(huán)節(jié) 注 消毒時(shí)間取決于外植體的種類或成熟度 圖1 蝴蝶蘭 圖2 蝴蝶蘭組織培養(yǎng) 一 圖3 蝴蝶蘭組織培養(yǎng) 二 1 3 方法 首先是對疫苗室和操作臺(tái)進(jìn)行清潔和消毒 然后是 酒精燈 消毒器 接種刀 鑷子等接種器具的準(zhǔn)備 隨后 完成接種 將蝴蝶蘭的花梗兩端切去 將帶腋芽的花梗節(jié)切成 1 2cm的小段 根據(jù)生長極性插入培養(yǎng)基中 每個(gè)處理 接種30個(gè)外植體 重復(fù)3次 注意嚴(yán)格規(guī)范無菌操作 盡 可能減少因操作不當(dāng)而引起的污染 嚴(yán)格消毒器具 減少 與病毒的交叉感染 切取外植體時(shí)要用銳利的刀具和快 速的切割 同時(shí)要避免互相擠壓 以免損傷材料 所有的 外植體取刀時(shí) 刀口的尺寸和切點(diǎn)都要合理 正確 例如 切花梗的下端為45 切口 上端為平面 為 了確保所需 的養(yǎng)分和光照 外 植 體 應(yīng) 在 培養(yǎng)皿中均勻地分布 以MS 花寶1號(hào) 花寶2號(hào)為基質(zhì) 添加不同比例 的6 BA和NAA 各培養(yǎng)基上分別接種帶有腋芽的蝴蝶 蘭花梗小段 每處理均為20個(gè)花梗段 重復(fù)3次 30d 后統(tǒng)計(jì)各處理誘導(dǎo)率 采用MS 花寶1號(hào)作為基質(zhì) 添加了6 BA NAA 等不同比例的植物生長調(diào)節(jié)劑 將初代培養(yǎng)30d左右 的蝴蝶蘭不定芽轉(zhuǎn)入增殖培養(yǎng)基中 每次處理20個(gè)不 定芽 重復(fù)3次 培養(yǎng)30d左右時(shí) 統(tǒng)計(jì)新的不定芽的 發(fā)生情況 計(jì)算增殖系數(shù) 以1 2MS MS為基質(zhì) 添加不同比例的植物生長 調(diào)節(jié)劑IBA和NAA 選擇發(fā)育均勻的蝴蝶蘭 將其接種 于不同的發(fā)芽基中進(jìn)行生根實(shí)驗(yàn) 每次處理20株 3次 重復(fù) 約45d后統(tǒng)計(jì)各處理出根情況 適宜的溫度為25 28 環(huán)境濕度為60 80 在 黑暗中培育7 9d 防止褐變 光照強(qiáng)度為2000 2500Lx 光照時(shí)間為每天11 13h 2結(jié)果與分析 2 1 不同基本培養(yǎng)基對腋芽萌發(fā)誘導(dǎo)的影響 將消毒后的 火鳳凰 花 梗 接 種 到 不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng) 基上 14d左右開始萌發(fā)不定芽 添加不同的植物生長 調(diào)節(jié)劑配比 雖然對 火鳳凰 花 梗 誘導(dǎo)率不同 但添加 一定濃度的6 BA和NAA都有利于 火鳳凰 不定芽的 誘導(dǎo) 在9組處理中 處理5的誘導(dǎo)率最高 達(dá)到 86 7 即最佳的不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS 花寶1號(hào) 花寶2號(hào) 3 00mg L6 BA 0 05mg LNAA培養(yǎng)基 誘導(dǎo)率 萌發(fā)的外植體數(shù) 接種的總外植體數(shù) 100 2 2 不同培養(yǎng)基對不定芽增殖的影響 將不定芽從花梗中分離出來 在15d后 不定芽基 部開始生長出原球莖 25d左右逐漸長出葉片 當(dāng)植物 生長調(diào)節(jié)劑NAA濃度相同時(shí) 蝴蝶蘭 火鳳凰 的 不定 芽增殖系數(shù)隨著6 BA的濃度升高而升高 但增殖系數(shù) 大時(shí) 葉片顏色淡 生長玻璃化 脆嫩 綜合增殖系數(shù)和 幼苗長勢 增殖培養(yǎng)基最優(yōu)的組合是處理6 MS 花寶1 號(hào) 5 00mg L6 BA 0 5mg LNAA 增殖系數(shù)達(dá)到 3 9 26 2022年13期 智慧農(nóng)業(yè)導(dǎo)刊 JournalofSmartAgriculture 試驗(yàn) 研究 增殖系數(shù) 增殖不定芽總數(shù) 增殖不定芽外植體數(shù) 2 3 不同生根培養(yǎng)基對幼苗生根的影響 在引種蝴蝶蘭的基本培養(yǎng)基中 1 2MS培養(yǎng)基的 生根率均高于 MS 而1 2MS 1 0mg LIBA 0 5mg L NAA的9號(hào)培養(yǎng)基 其生根率達(dá)86 7 結(jié)果表明 最適 宜的培養(yǎng)基是1 2MS 1 0mg LIBA 0 5mg LNAA 3 結(jié)論與討論 蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)是影響組織培養(yǎng)成敗的重要因 素 不同品種的蝴蝶蘭 不同的栽培材料 不同的生長時(shí) 期 不同的栽培材料對培養(yǎng)基的需求也不同 因此 對蝴 蝶蘭的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選 既是蝴蝶蘭組織培養(yǎng)的基礎(chǔ) 又是其重要的一步 在誘導(dǎo)蝴蝶蘭 火鳳凰 花梗腋芽萌發(fā)的實(shí)驗(yàn)中 添 加一定濃度的6 BA和NAA都有利于 火鳳凰 不定芽 的誘導(dǎo) 這和高壯壯等 2 的試驗(yàn)結(jié)果一致 本試驗(yàn)中最佳 的不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS 花寶1號(hào) 花寶2號(hào) 3 00mg L 6 BA 0 05mg LNAA培養(yǎng)基 細(xì)胞分裂素對蝴蝶蘭不定芽增殖的試驗(yàn)中 6 BA 對增殖效果的影響強(qiáng)于 NAA 且濃度5 00mg L6 BA 比濃度3 00mg L6 BA的增殖效果要更優(yōu) 當(dāng)6 BA濃度為5 00mg L 時(shí) NAA 濃度為1 0mg L時(shí)的 增殖系數(shù)比0 50mg L 增殖效果更高 但幼苗長勢受到 影響 所以MS作為不定芽增殖的基本培養(yǎng)基 在不 同 植物生長調(diào)節(jié)劑濃度配比下 5 00mg L6 BA 0 50mg L NAA最適合不定芽增殖生長 這個(gè)試驗(yàn)結(jié)果與陳春 等 3 6 的試驗(yàn)結(jié)論相似 表明蝴蝶蘭增殖時(shí)要同時(shí)增殖 系數(shù)和幼苗生長狀態(tài) 而在誘導(dǎo)蝴蝶蘭生根的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中 1 2MS 培 養(yǎng)基的生根率總體優(yōu)于MS 培養(yǎng)基 其中生根率最高的 是1 2MS 1 0mg LIBA 0 5mg LNAA的9號(hào)培養(yǎng) 基 其生根率為86 7 由此可知 誘導(dǎo)蝴蝶蘭生根的最 適培養(yǎng)基配方為1 2MS 1 0mg LIBA 0 5mg L NAA 參考文獻(xiàn) 1 張果 趙玉安 劉曉鵬 等 國內(nèi)蝴蝶蘭育種技術(shù)的研究進(jìn)展 J 貴州農(nóng)業(yè)科學(xué) 2020 48 9 86 92 2 高壯壯 婁倩 劉雅莉 蝴蝶蘭 大辣椒 組培快繁技術(shù)體系優(yōu)化 的研究 J 西北林學(xué)院學(xué)報(bào) 2020 35 4 95 100 211 3 陳春 蝴蝶蘭 紅箭 組織培養(yǎng)快繁技術(shù) J 福建林業(yè)科技 2021 48 2 63 67 4 楊錄軍 王俊 楊書才 等 蝴蝶蘭新品種 鄭農(nóng)火鳳凰 的組培 快繁技術(shù)研究 J 陜西農(nóng)業(yè)科學(xué) 2015 61 11 52 54 5 賴思婷 豐鋒 陳樺潔 等 6 BA對火鳳凰蝴蝶蘭成花誘導(dǎo)的影 響 J 廣東農(nóng)業(yè)科學(xué) 2021 48 5 50 56 6 楊佳麗 田時(shí)豪 朱彤 等 影響蝴蝶蘭組織培養(yǎng)的主要因素及 控制研究 J 農(nóng)村科學(xué)實(shí)驗(yàn) 2020 5 62 65 大智慧農(nóng)業(yè)相關(guān)系列技術(shù)研究 其二 推進(jìn)以農(nóng)業(yè)信息化 為基礎(chǔ)的智能農(nóng)業(yè)裝備的設(shè)計(jì)制造 提升農(nóng)機(jī)設(shè)備的信 息化和智能化水平 適應(yīng)智慧農(nóng)業(yè)發(fā)展需求 提升我國智 慧農(nóng)業(yè)裝備的供給能力和國際競爭力 其三 建設(shè)完善智 慧農(nóng)業(yè)作業(yè)系統(tǒng) 其四 加大智慧農(nóng)業(yè)作業(yè)技術(shù)研究力度 與無人農(nóng)場建設(shè) 其五 建立并完善智慧農(nóng)業(yè)信息技術(shù)標(biāo) 準(zhǔn) 注重復(fù)合型人才培養(yǎng) 總之 農(nóng)業(yè)信息化是智慧農(nóng)業(yè)的一個(gè)發(fā)展階段 是 信息技術(shù)在現(xiàn)代農(nóng)業(yè)領(lǐng)域的應(yīng)用 是智慧農(nóng)業(yè)發(fā)展的核 心要求 二者是你中有我 我中有你的相互促進(jìn)關(guān)系 大 力推進(jìn)農(nóng)業(yè)信息化建設(shè)是走智慧農(nóng)業(yè)之路 提升我國綜 合國力的必然選擇 參考文獻(xiàn) 1 趙春江 智慧農(nóng)業(yè)的發(fā)展現(xiàn)狀與未來展望 J 華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué) 報(bào) 2021 42 6 1 7 2 孔繁濤 朱孟帥 孫坦 現(xiàn)代信息技術(shù)在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域的應(yīng)用分析與 建議 互聯(lián)網(wǎng)企業(yè)進(jìn)軍農(nóng)業(yè)引發(fā)的思考 J 智慧農(nóng)業(yè) 2019 1 4 31 41 3 戴崢 張晶晶 杜茜亞 等 新形勢下的農(nóng)業(yè)信息化發(fā)展思考 J 現(xiàn)代化農(nóng)業(yè) 2021 10 56 58 4 羅治情 官波 陳娉婷 等 大數(shù)據(jù)背景下農(nóng)業(yè)農(nóng)村信息化建設(shè) 研究 EB OL 2021 12 30 https S 20211229 1333 014 html 5 趙春江 智慧農(nóng)業(yè)發(fā)展現(xiàn)狀及戰(zhàn)略目標(biāo)研究 J 智慧農(nóng)業(yè) 2019 1 1 1 7 6 孫九林 李燈華 許世衛(wèi) 等 農(nóng)業(yè)大數(shù)據(jù)與信息化基礎(chǔ)設(shè)施發(fā) 展戰(zhàn)略研究 J 中國工程科學(xué) 2021 23 4 10 19 7 謝蘇兵 崔勇彪 區(qū)塊鏈背景下的洞庭湖區(qū)農(nóng)業(yè)信息化研究 J 農(nóng)業(yè)科技與裝備 2021 6 107 108 8 孔繁濤 發(fā)展中的農(nóng)業(yè)信息學(xué) J 廣東農(nóng)業(yè)科學(xué) 2012 39 15 219 223 9 中國政府網(wǎng) 國務(wù)院關(guān)于加快推進(jìn)農(nóng)業(yè)機(jī)械化和農(nóng)機(jī)裝備產(chǎn)業(yè) 轉(zhuǎn)型升級(jí)的指導(dǎo)意見 EB OL 2018 12 29 2019 12 26 http 上接24頁 27