<p>中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，（）殼聚糖對(duì)黃瓜穴盤苗根際細(xì)菌多樣性的影響董春娟李亮張志剛王玲玲尚慶茂（中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所農(nóng)業(yè)部園藝作物生物學(xué)與種質(zhì)創(chuàng)制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室環(huán)渤海灣地區(qū)設(shè)施蔬菜優(yōu)質(zhì)高效生產(chǎn)協(xié)同創(chuàng)新中心，北京）摘要為明確殼聚糖對(duì)黃瓜穴盤苗根際細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)的影響，以添加殼聚糖的草炭、蛭石、珍珠巖為基質(zhì)，進(jìn)行黃瓜穴盤育苗試驗(yàn)，測(cè)定幼苗生長(zhǎng)指標(biāo)，并采用焦磷酸測(cè)序技術(shù)測(cè)定穴盤苗根際細(xì)菌的種群變化。結(jié)果表明基質(zhì)添加殼聚糖可以顯著促進(jìn)黃瓜穴盤苗生長(zhǎng)。添加殼聚糖使穴盤苗根際基質(zhì)中細(xì)菌群落的、和指數(shù)減小，指數(shù)增大，根際細(xì)菌群落的豐富度和多樣性降低。序列分析表明，黃瓜穴盤苗根際基質(zhì)中的細(xì)菌主要是叢毛單胞菌科屬、假單胞菌科纖維弧菌屬、黃色桿菌科屬和草酸桿菌科屬等。添加殼聚糖后，根際細(xì)菌如屬、纖維弧菌屬、根瘤菌屬、屬、屬等的相對(duì)豐度顯著升高，這些細(xì)菌屬多具有植物促生潛力；而食酸菌屬、屬、屬、豐祐菌屬、纖維單胞菌屬等的相對(duì)豐度顯著降低。可見(jiàn)，基質(zhì)添加殼聚糖有利于根際有益細(xì)菌的選擇性富集，改善黃瓜穴盤苗根際微生態(tài)環(huán)境，促進(jìn)幼苗生長(zhǎng)。關(guān)鍵詞黃瓜；殼聚糖；基質(zhì)；根際細(xì)菌；測(cè)序中圖分類號(hào)文章編號(hào)（）文獻(xiàn)標(biāo)志碼收稿日期基金項(xiàng)目國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（）；公益性行業(yè)（農(nóng)業(yè)）科研專項(xiàng)經(jīng)費(fèi)項(xiàng)目（）；現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)資金（）；中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院科技創(chuàng)新工程（）第一作者董春娟，副研究員，主要從事蔬菜種苗發(fā)育調(diào)控研究，通訊作者尚慶茂，研究員，主要從事蔬菜種苗發(fā)育調(diào)控及繁育技術(shù)研究，（，），（，），；第期董春娟等殼聚糖對(duì)黃瓜穴盤苗根際細(xì)菌多樣性的影響殼聚糖（，）是甲殼素脫乙?；漠a(chǎn)物，因其來(lái)源廣泛、無(wú)毒無(wú)害、無(wú)殘留，以及同生物體極好的兼容性，常被用作植物病害抑制劑、種衣劑、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑、農(nóng)藥載體等，在農(nóng)業(yè)上廣泛應(yīng)用，。葉面噴施殼聚糖可以顯著促進(jìn)黃瓜、番茄等植株對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收，提高植株光合能力，促進(jìn)根系細(xì)胞分生，促進(jìn)植物生長(zhǎng)。作為土壤改良劑，殼聚糖可被土壤中微生物分解，活化土壤的和養(yǎng)分，且殼聚糖分子對(duì)土壤中微量元素、和等具有螯合效應(yīng)，可以提高土壤中微量元素的有效態(tài)養(yǎng)分。然而，施用殼聚糖是否對(duì)植物根際微生態(tài)環(huán)境有所影響，尚未見(jiàn)報(bào)道。植物根際細(xì)菌多樣性與植物生長(zhǎng)發(fā)育密切相關(guān)。一方面，根際有益細(xì)菌可以直接參與土壤營(yíng)養(yǎng)元素的代謝循環(huán)，促進(jìn)有機(jī)質(zhì)分解，提高養(yǎng)分的有效性，或分泌多種促生長(zhǎng)類激素直接促進(jìn)植物生長(zhǎng)，同時(shí)根際有益細(xì)菌還可以通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)營(yíng)養(yǎng)或侵染位點(diǎn)，合成抗生素類物質(zhì)或載鐵蛋白等機(jī)制抑制根際病原細(xì)菌的繁殖，協(xié)助植物抵御病害，提高植物免疫力。另一方面，根際有害細(xì)菌通過(guò)分泌毒素、競(jìng)爭(zhēng)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)等抑制植物生長(zhǎng)，尤其是一些病原細(xì)菌，通過(guò)侵染植物的維管束，造成植物水分、養(yǎng)分運(yùn)輸中斷，引起植物枯萎、根腐和猝倒等癥狀。多數(shù)根際細(xì)菌難以在實(shí)驗(yàn)室條件下培養(yǎng)。二代測(cè)序技術(shù)的興起，包括焦磷酸測(cè)序、等平臺(tái)為根際細(xì)菌探索提供了很好的途徑，可以更加高效、準(zhǔn)確地反映根際細(xì)菌的多樣性信息。黃瓜（）種植以育苗移栽為主，且主要采用穴盤育苗方式?；|(zhì)是穴盤育苗的重要組成部分，由于基質(zhì)配制不科學(xué)、操作不規(guī)范等，常造成幼苗根際基質(zhì)的微生態(tài)環(huán)境不良，苗期病害時(shí)有發(fā)生。添加生物活性物質(zhì)改善基質(zhì)的生物學(xué)特性，為幼苗提供良好的根際環(huán)境，對(duì)于黃瓜壯苗培育至關(guān)重要。本研究采用焦磷酸高通量測(cè)序技術(shù)分析了基質(zhì)添加殼聚糖對(duì)黃瓜穴盤苗根際細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)的影響，旨在從細(xì)菌多樣性角度豐富殼聚糖的促生機(jī)制，為黃瓜穴盤苗根際調(diào)控和壯苗培育提供理論依據(jù)。材料與方法黃瓜穴盤苗培養(yǎng)供試黃瓜選用“中農(nóng)號(hào)”（），由中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所選育。黃瓜種子經(jīng)體積分?jǐn)?shù)為的溶液表面消毒，無(wú)菌水沖洗遍后，恒溫培養(yǎng)箱中催芽。種子萌發(fā)后，選擇發(fā)芽一致的種子播種于裝有草炭蛭石珍珠巖（體積比為）混合基質(zhì)的孔穴盤中，每穴孔一粒種子。草炭購(gòu)自北京大漢園景有限公司（，德國(guó)），草炭，值±；蛭石和珍珠巖購(gòu)自河北靈壽縣騰達(dá)礦產(chǎn)品加工廠，粒徑分別為和?；|(zhì)中添加殼聚糖（，脫乙酰度，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司），以不加殼聚糖的基質(zhì)作為對(duì)照（）。播種后覆蓋厚的蛭石，并充分澆水，直至穴盤底部排水孔有水滴出現(xiàn)。育苗試驗(yàn)于年月在中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所玻璃溫室中進(jìn)行，平均晝夜溫度分別為（±）（±），自然光照強(qiáng)度（約（）和光周期，平均相對(duì)濕度。待黃瓜幼苗子葉平展后，每隔使用“花多多”水溶速效復(fù)合肥（，）溶液進(jìn)行追肥，施肥氮（）濃度為，至第一真葉展開(kāi)后每隔施用“花多多”水溶肥，施用量為穴盤，施肥與灌水交替進(jìn)行。每個(gè)處理設(shè)次重復(fù)，每重復(fù)個(gè)穴盤。黃瓜幼苗生長(zhǎng)指標(biāo)測(cè)定播種后，每處理每重復(fù)隨機(jī)選取株幼苗，測(cè)定株高、莖粗、葉面積、地上部鮮重、根鮮重和根體積等生長(zhǎng)指標(biāo)，測(cè)定方法參照高曉旭等。根際基質(zhì)細(xì)菌多樣性分析根際基質(zhì)樣品收集與基因組提取播種后，每處理每重復(fù)隨機(jī)選取株黃瓜幼苗，根際基質(zhì)的收集參照聶艷麗等的方法，抖落根區(qū)基質(zhì)后，用小刷子將根系緊密附著的基質(zhì)輕輕掃下，收集、混勻，過(guò)篩，去除較大的基質(zhì)塊和植物根系組織，將所得基質(zhì)裝入無(wú)菌自封袋中，冰箱保存，用于細(xì)菌基因組提取。使用公司試劑盒抽提基質(zhì)基因組，采用大量產(chǎn)物純化試劑盒（天根生化科技有限公司，北京）進(jìn)行純化。采用瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)抽提的基因組，并采用（，）測(cè)定濃度。擴(kuò)增與焦磷酸測(cè)序以純化后的基因組為模板，采用細(xì)菌通中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)年第卷用引物對(duì)的區(qū)進(jìn)行擴(kuò)增，引物序列分別為（）和（），由上海美吉生物醫(yī)藥科技有限公司合成。同時(shí)在引物的端添加序列區(qū)分樣品。反應(yīng)體系包括聚合酶（全式金生物技術(shù)有限公司，北京）、緩沖液、正向引物（）、反向引物（）、模板，補(bǔ)至。反應(yīng)程序?yàn)轭A(yù)變性，變性，退火，延伸，個(gè)循環(huán)后，延伸，保持直到反應(yīng)完成。反應(yīng)在型儀（，）中進(jìn)行。每個(gè)樣品個(gè)重復(fù)，將同一樣品的產(chǎn)物混合后用瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)，使用凝膠回收試劑盒（，）切膠回收產(chǎn)物，洗脫。瓊脂糖凝膠電泳再次檢測(cè)、定量。參照電泳初步定量結(jié)果，將產(chǎn)物用藍(lán)色熒光定量系統(tǒng)（，）進(jìn)行檢測(cè)定量，將各擴(kuò)增產(chǎn)物等量（）混合，用于測(cè)序。測(cè)序由上海美吉生物醫(yī)藥科技有限公司使用（，）完成，試劑采用。測(cè)序讀長(zhǎng)為。序列數(shù)據(jù)分析通過(guò)區(qū)分各樣品的測(cè)序數(shù)據(jù)，并生成不含的各樣品測(cè)序的有效序列文件。然后對(duì)有效序列進(jìn)行去雜優(yōu)化，包括保留引物的錯(cuò)配數(shù)在個(gè)以內(nèi)的序列；使用軟件（）檢測(cè)接頭和修剪末端，去除序列末端的后引物的接頭序列、多堿基、尾巴及低質(zhì)量堿基；使用軟件（）去除長(zhǎng)度短于，模糊堿基數(shù)、序列平均質(zhì)量的序列。采用軟件進(jìn)行（可操作分類單元，）聚類分析，主要步驟包括合并序列長(zhǎng)度和堿基組成完全一致的序列，提取非重復(fù)序列；采用的方法（），與數(shù)據(jù)庫(kù)（版）中的核糖體序列數(shù)據(jù)庫(kù)（、）進(jìn)行比對(duì)；使用（）檢測(cè)并去除序列；計(jì)算比對(duì)對(duì)齊后的序列間非校正配對(duì)距離，使用方法（）按相似度聚類生成。使用稀釋曲線（）和曲線表征樣品的測(cè)序深度，采用程序得出指數(shù)和指數(shù)表示物種的豐富度，以指數(shù)和指數(shù)評(píng)估樣品的物種多樣性。為了獲得每個(gè)的分類學(xué)信息，將相似水平下每個(gè)中的所有序列進(jìn)行一致性分析，找出同一個(gè)中的不同序列的最近祖先的種屬信息作為該的種屬信息。所用軟件為分類學(xué)分析（），算法為。數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析試驗(yàn)結(jié)果用次重復(fù)的平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（±）表示，采用檢驗(yàn)進(jìn)行差異顯著性分析。結(jié)果與分析殼聚糖對(duì)黃瓜穴盤苗生長(zhǎng)發(fā)育的影響基質(zhì)添加殼聚糖對(duì)黃瓜幼苗出苗率及出苗速率沒(méi)有顯著影響。但播種后時(shí)幼苗株高、地上部鮮重以及第二真葉面積等參數(shù)顯著高于對(duì)照（表），可見(jiàn)，基質(zhì)添加殼聚糖可以促進(jìn)黃瓜穴盤苗的生長(zhǎng)。焦磷酸測(cè)序數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析采用焦磷酸測(cè)序法分析不同基質(zhì)樣品的細(xì)菌多樣性，如表所示，共獲得條有效序列，序列平均長(zhǎng)度為，按照質(zhì)量控制原則對(duì)有效序列進(jìn)行篩選，篩選后的優(yōu)化序列共條，優(yōu)化序列平均長(zhǎng)度為，每個(gè)樣品得到的優(yōu)化序列數(shù)量為條。經(jīng)比對(duì)，共有條序列可以比對(duì)到數(shù)據(jù)庫(kù)中，占優(yōu)質(zhì)序列的。在相似度水平，共獲得個(gè)，對(duì)照樣品中數(shù)量分別為、和條，添加殼聚糖的基質(zhì)中數(shù)量略低，分別為、和條。第期董春娟等殼聚糖對(duì)黃瓜穴盤苗根際細(xì)菌多樣性的影響表殼聚糖對(duì)黃瓜穴盤苗生長(zhǎng)發(fā)育的影響樣品株高莖粗地上部鮮重第一真葉面積第二真葉面積根鮮重根體積±±±±±±±殼聚糖±±±±±±±注，表示在和水平與對(duì)照相比差異顯著。下同。表黃瓜穴盤苗各根際基質(zhì)樣品測(cè)序數(shù)據(jù)量統(tǒng)計(jì)樣品有效序列優(yōu)化序列匹配的序列數(shù)量（）（）（）（）（）（）（）（）殼聚糖（）（）（）（）總計(jì)注括號(hào)內(nèi)數(shù)字表示優(yōu)化序列占有效序列的百分比；括號(hào)內(nèi)數(shù)字表示匹配的序列占優(yōu)化序列的百分比；聚類的相似度水平為。；稀釋曲線可以反映樣品的測(cè)序深度，如圖所示，在的相似度水平下，不同根際基質(zhì)樣品的稀釋曲線趨于平坦，但均未達(dá)到飽和，說(shuō)明測(cè)序數(shù)據(jù)量合理，更多的數(shù)據(jù)量只會(huì)產(chǎn)生少量新的，該測(cè)序深度能基本完整反映細(xì)菌群落多樣性。曲線利用各樣品的測(cè)序量在不同測(cè)序深度時(shí)的指數(shù)構(gòu)建曲線，當(dāng)曲線趨于平坦時(shí)，說(shuō)明測(cè)序數(shù)據(jù)量足夠大，可以反映樣品中絕大多數(shù)的微生物信息。由圖可知，所有樣品的指數(shù)均達(dá)到平臺(tái)期，進(jìn)一步說(shuō)明所有樣品的測(cè)序深度均能反映根際細(xì)菌多樣性信息。添加殼聚糖對(duì)黃瓜穴盤苗根際細(xì)菌多樣性的影響將各樣品測(cè)序獲得的優(yōu)質(zhì)序列用于評(píng)價(jià)基質(zhì)細(xì)菌多樣性，如表所示。和指數(shù)用于估圖不同根際基質(zhì)樣品的稀釋曲線和曲線（相似水平）（）中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)年第卷計(jì)樣品中物種總數(shù)，可以反映樣品的物種豐富度。添加殼聚糖的基質(zhì)中和指數(shù)顯著降低（），表明基質(zhì)添加殼聚糖可以降低黃瓜根際基質(zhì)中細(xì)菌的豐富度。和指數(shù)反映樣品中微生物多樣性。值越大，表明群落多樣性越高；與之相反，指數(shù)值越小，表明群落多樣性越高。如表所示，添加殼聚糖后，指數(shù)減小，指數(shù)增大，表明根際細(xì)菌群落多樣性水平降低?？梢?jiàn)，基質(zhì)添加殼聚糖可以引起黃瓜穴盤苗根際細(xì)菌群落豐富度和多樣性水平降低。表殼聚糖對(duì)黃瓜穴盤苗根際基質(zhì)樣品的細(xì)菌多樣性的影響樣品豐富度指數(shù)多樣性指數(shù)對(duì)照±±±±殼聚糖±±±±基質(zhì)添加殼聚糖對(duì)黃瓜穴盤苗根際細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)的影響利用序列信息對(duì)黃瓜穴盤苗的根際細(xì)菌群落組成進(jìn)行分析。在科分類水平，在對(duì)照和添加殼聚糖的根際基質(zhì)樣品中，分別鑒定到和個(gè)科，種樣品中共有的科有個(gè)。其中相對(duì)豐度大于的已知細(xì)菌科有個(gè)，如圖所示。對(duì)照樣品主要的細(xì)菌有叢毛單胞菌科（，）、黃單胞菌科（，）、假單胞菌科（，）、柄桿菌科（，）、草酸桿菌科（，）和紅螺菌科（，）。添加殼聚糖后，根際基質(zhì)中主要細(xì)菌為叢毛單胞菌科（）、假單胞菌科（）、黃單胞菌科（）、柄桿菌科（）、微桿菌科（，）、紅螺菌科（）和根瘤菌科（，）。其中叢毛單胞菌科、假單胞菌科、根瘤菌科、鞘脂單胞菌科、鞘脂桿菌科（）、微單胞菌科（）等的相對(duì)豐度顯著升高，而黃單胞菌科、草酸桿菌科、酸桿菌科（）、豐祐菌科（）等的相對(duì)豐度顯著降低（圖）。在屬分類水平，所有序列共分為個(gè)屬，其中對(duì)照根際基質(zhì)樣品中共鑒定到個(gè)屬，添加殼聚糖的基質(zhì)中較低，只有個(gè)屬。相對(duì)豐度大于的已知細(xì)菌屬共個(gè)，如圖所示。對(duì)照根際基質(zhì)樣品中，屬（）、纖維弧括號(hào)內(nèi)數(shù)字表示相對(duì)豐度，為次重復(fù)的平均值。圖殼聚糖對(duì)黃瓜穴盤苗根際基質(zhì)細(xì)菌群落的影響（科分類水平）第期董春娟等殼聚糖對(duì)黃瓜穴盤苗根際細(xì)菌多樣性的影響圖殼聚糖對(duì)黃瓜穴盤苗根際基質(zhì)細(xì)菌群落的影響（屬分類水平）菌屬（）、屬（）和屬（）為優(yōu)勢(shì)菌屬，其相對(duì)豐度均大于。添加殼聚糖后，屬、纖維弧菌屬的相對(duì)豐度顯著升高，而屬和屬的相對(duì)豐度則顯著降低。此外，屬、根瘤菌屬、鞘氨醇單胞菌屬、微桿菌屬、屬、屬和屬的相對(duì)含量均有顯著升高；而相對(duì)豐度顯著降低的細(xì)菌菌群有屬、食酸菌屬、豐祐菌屬、纖維單胞菌屬等（圖）。進(jìn)一步將得到的鑒定到種，但是多數(shù)序列無(wú)法獲得其菌種信息，圖列出了種發(fā)生顯著差異的已知細(xì)菌的相對(duì)豐度變化。如圖所示，根瘤菌屬和的相對(duì)豐度分別是對(duì)照樣品的和倍；此外，屬、微桿菌屬、指孢囊菌屬和中慢生根瘤菌屬的相對(duì)豐度也有顯著升高。相比對(duì)照，添加殼聚糖的根際基質(zhì)中屬的相對(duì)豐度顯著降低，只有對(duì)照的。結(jié)論與討論基質(zhì)添加殼聚糖可以顯著促進(jìn)黃瓜穴盤苗的生長(zhǎng)發(fā)育（表），進(jìn)一步采用焦磷酸測(cè)序技術(shù)分析了基質(zhì)添加殼聚糖對(duì)黃瓜穴盤苗根際細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)的影響，發(fā)現(xiàn)添加殼聚糖后根際基質(zhì)的和指數(shù)顯著降低，指數(shù)減小，指數(shù)增大（表），表明殼聚糖可以引起根際基質(zhì)細(xì)菌豐富度和群落多樣性顯著降低。分析原因，殼聚糖可以作為一種新的碳源物質(zhì)，被根際某些細(xì)菌分解利用，因此為根際細(xì)菌的生長(zhǎng)提供了一個(gè)選擇性的環(huán)境，利于可以分解和利用殼聚糖的細(xì)菌生長(zhǎng)，而原有細(xì)菌菌群受到競(jìng)爭(zhēng)性抑制，從而導(dǎo)致根際細(xì)菌多樣性降低?；|(zhì)添加殼聚糖可以改變黃瓜穴盤苗的根際細(xì)菌群落組成?；|(zhì)添加殼聚糖后，穴盤苗根際基質(zhì)中屬、纖維弧菌屬、根瘤菌屬、屬、屬等的相對(duì)豐度顯著升高，而原有優(yōu)勢(shì)菌屬屬、屬、食酸菌屬、豐祐菌屬、纖維單胞菌屬等的相對(duì)豐度則顯著降低（圖和圖），這與已報(bào)道的土壤中添加殼聚糖后植物根際細(xì)菌群落的變化趨勢(shì)相一致，。進(jìn)一步分析這些上調(diào)菌群的生物學(xué)功能，發(fā)現(xiàn)中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)年第卷圖殼聚糖對(duì)黃瓜穴盤苗根際基質(zhì)中種細(xì)菌相對(duì)豐度的影響屬、纖維弧菌屬、根瘤菌屬、鞘氨醇單胞菌屬、屬等細(xì)菌多為植物促生菌。多數(shù)屬細(xì)菌基因組中含有糖苷水解酶編碼基因，可以分解基質(zhì)中的纖維素、半纖維素以及外源添加的殼聚糖等多糖分子，為幼苗生長(zhǎng)提供更多的碳源和養(yǎng)分，促進(jìn)幼苗生長(zhǎng)，。添加殼聚糖后纖維弧菌屬的豐度顯著增加，這與之前的報(bào)道一致。等發(fā)現(xiàn)在河流、壕溝等不同的生態(tài)環(huán)境中添加甲殼素或殼聚糖后，纖維弧菌屬細(xì)菌均顯著增多成為優(yōu)勢(shì)菌群。多數(shù)纖維弧菌屬細(xì)菌可以合成幾丁質(zhì)酶，分解殼聚糖，甚至一些纖維弧菌，如經(jīng)甲殼素誘導(dǎo)后會(huì)分泌多種多糖水解酶，促進(jìn)根際糖類物質(zhì)的分解和活化。此外，部分纖維弧菌屬細(xì)菌還具有固氮功能，對(duì)植物根部氮素的吸收具有促進(jìn)作用。另一類顯著升高的根際細(xì)菌為根瘤菌屬。黃瓜穴盤苗根際主要的根瘤菌包括和（圖），這兩種細(xì)菌廣泛存在于植物根際土壤中，是最主要的植物非共生固氮菌。纖維弧菌和根瘤菌數(shù)量的升高有助于植物根部氮的固定和利用，促進(jìn)植物生長(zhǎng)。鞘氨醇單胞菌屬和屬細(xì)菌的增多有助于植物抵御根部細(xì)菌或真菌性病害。等發(fā)現(xiàn)，根際鞘氨醇單胞菌可以提高萵苣抗根腐病的能力。此外，殼聚糖自身對(duì)嗜酸菌屬、黃單胞菌屬等植物致病性細(xì)菌也具有一定的抑菌效果，?？梢?jiàn)，基質(zhì)添加殼聚糖后，引起黃瓜穴盤苗根際屬、纖維弧菌屬、根瘤菌屬、鞘氨醇單胞菌屬、屬等具有促生潛力的細(xì)菌數(shù)量增多，促進(jìn)植物根部碳、氮等養(yǎng)分的活化和吸收，抵御根際致病性細(xì)菌的繁殖和侵染，從而改善黃瓜穴盤苗的根際微生態(tài)環(huán)境，促進(jìn)幼苗的生長(zhǎng)發(fā)育。本研究采用焦磷酸測(cè)序技術(shù)分析了基質(zhì)添加殼聚糖對(duì)黃瓜穴盤苗根際細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)的影響，豐富了殼聚糖的促生機(jī)制。相較于傳統(tǒng)分離培養(yǎng)的方法，基于的測(cè)序技術(shù)在分析量和信息量上具有明顯的優(yōu)勢(shì)，但這種方法也有一定的局限性，無(wú)法將游離于細(xì)胞外的以及死亡細(xì)胞的與具有活性的細(xì)胞區(qū)分開(kāi)來(lái)，且序列信息的解析基于數(shù)據(jù)庫(kù)，部分序列無(wú)法獲得其分類信息。因此，對(duì)黃瓜穴盤苗根際促生細(xì)菌的分離和功能鑒定，并探究其促進(jìn)幼苗生長(zhǎng)的作用機(jī)制，將是下一步開(kāi)展的工作重點(diǎn)。參考文獻(xiàn)，于仁竹，于賢昌，王桂紅殼聚糖對(duì)黃瓜幼苗生長(zhǎng)和生理特性的影響西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，（），（）（），第期董春娟等殼聚糖對(duì)黃瓜穴盤苗根際細(xì)菌多樣性的影響，蔣小姝，莫海濤，蘇海佳，張小勇甲殼素及殼聚糖在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域方面的應(yīng)用中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)，（），（）（），（）康貽軍，程潔，梅麗娟，胡健，樸哲，殷士學(xué)植物根際促生菌作用機(jī)制研究進(jìn)展應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào)，（），（），（）（），（）高曉旭，張志剛，段穎，董春娟，尚慶茂高濃度營(yíng)養(yǎng)液對(duì)黃瓜和番茄下胚軸徒長(zhǎng)的抑制作用植物營(yíng)養(yǎng)與肥料學(xué)報(bào)，（），（）（）聶艷麗，陸斌，劉金鳳，童清不同育苗基質(zhì)的團(tuán)花根際微生物群落功能多樣性特征中南林業(yè)科技大學(xué)學(xué)報(bào)，（），（）（），（），</p>