北 null 方 null 園 null 藝 nullnullnullnullnull nullnull nullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 食 用 菌 第一作者簡介 王鑫淼 nullnullnullnull null 女 碩士研究生 研究方向 為生物學 null nullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnull 責任作者 王麗艷 nullnullnullnull null 女 博士 副教授 現(xiàn)主要從事 食用菌資源開發(fā)與利用等研究工作 null nullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnull 基金項目 內蒙古自治區(qū)科技創(chuàng)新引導資助項目 nullnullnullnull 黑龍江省大學生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)資助項目 nullnullnullnullnullnull 國家自然科學基金面上資助項目 nullnullnullnull 收稿日期 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 不同基質對桑黃菌絲生長及酶活性的影響 王 鑫 淼 荊 瑞 勇 吳 null 楠 閆 null 權 李 喜 梅 王 麗 艷 黑龍江八一農墾大學 生命科學技術學院 黑龍江 大慶 nullnullnullnullnullnull nullnull 摘 null 要 以桑黃為試材 利用粗木屑 細木屑 小麥秸稈 花生秸稈 玉米秸稈 油菜秸稈 和大豆秸稈 null 種主料對桑黃進行培養(yǎng) 采用單純型格子法進行混料設計 篩選以粗木屑 油 菜秸稈和大豆秸稈為主料的配方 對菌絲生長速率 漆酶 多酚氧化酶 纖維素酶 半纖維素 酶以及酸性蛋白酶活性進行了測定 分析胞外酶活性與菌絲生長速率之間的相關性 優(yōu)化適 合桑黃生長的配方 以期為桑黃培養(yǎng)配方的篩選提供參考依據(jù) 結果表明 不同基質對各胞 外酶活性大小有不同的影響 且酶活性大小與菌絲生長速率之間的偶聯(lián)性較差 優(yōu)化得出 適合桑黃生長的配方為粗木屑 nullnullnullnullnull 油菜秸稈 nullnullnullnullnull 大豆秸稈 nullnullnullnullnull 麥麩 nullnullnull 蔗糖 nullnull 碳酸鈣 nullnull 關鍵詞 桑黃 農作物秸稈 單純型格子法 酶活測定 中圖分類號 nullnullnullnullnullnullnullnullnull 文獻標識碼 nullnull 文章編號 nullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnull 桑黃 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 屬大型多孔菌 null 是 一種珍貴的藥食兩用真菌 富含多種活性成分 具 有抗腫瘤 抗炎 調節(jié)免疫等作用 null 藥用價值較 高 在抗癌治療中被廣泛應用 許多研究證明桑黃 作為癌癥的輔助用藥 應用前景廣闊 null 然而 桑 黃在自然環(huán)境下生長周期較長 產量較少 難以滿 足市場的需求 null 因此 對于桑黃栽培基質的研究 意義重大 目前 利用秸稈對食用菌進行栽培已 成為研究熱點 它來源廣 產量大 種類多 價格低 廉且營養(yǎng)豐富 null 是栽培食用菌的理想原料 null 秸稈應用于食用菌生產推動了食用菌產業(yè)的快速 發(fā)展 nullnull 進而提高了它在真菌界的二次利用 nullnull 然而不同秸稈用于栽培食用菌前仍需優(yōu)化配方才 能得以大面積應用 該研究利用混料設計方法對初篩得到的粗木 屑 油菜秸稈和大豆秸稈 null 種主料進行主料配方 設計 測定桑黃在營養(yǎng)生長階段的菌絲生長速率 及相關胞外酶活性等評價指標 比較各胞外酶活 性與菌絲生長速率的相關性 以期優(yōu)化得出適合 桑黃菌絲生長的配方 為快速高效生產桑黃菌包 提供參考依據(jù) nullnull 材料與方法 nullnullnullnull 試驗材料 nullnullnullnullnullnull 供試菌株 供試食用菌品種為桑黃 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 編 號 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 由黑龍江八一農墾大學生命科 學技術學院食用菌實驗室提供 nullnullnullnullnullnull 供試材料 新鮮無霉變的粗木屑 細木屑 小麥秸稈 花 生秸稈 玉米秸稈 油菜秸稈 大豆秸稈 麥麩 蔗 糖 碳酸鈣均采用分析純試劑 均由黑龍江八一農 墾大學生命科學技術學院食用菌實驗室提供 nullnullnullnullnullnull 供試儀器 nullnullnullnullnullnullnullnull 超凈工作臺 北京東聯(lián)哈爾儀器 制造有限公司 nullnullnullnullnullnullnull 培養(yǎng)箱 北京東聯(lián)哈爾 儀器制造有限公司 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 多功能酶 標儀 北 京 龍 躍 生 物 科 技 發(fā) 展 有 限 公 司 nullnullnullnullnullnullnull 電 子 天 平 奧 豪 斯 儀 器 常 州 有 限 公司 nullnullnullnull 試驗方法 nullnullnullnullnullnull 初篩培養(yǎng)基制備 培養(yǎng)基配方 主料 nullnullnull 麥麩 nullnullnull 碳酸鈣 nullnull 蔗糖 nullnull 分別稱取 null 種主料各 nullnullnull 主料 分別為粗木屑 細木屑 小麥秸稈 花生秸稈 玉米 秸稈 油菜秸稈 大豆秸稈 其它輔料成分不變 等 量分 裝 至 null 個 平 板 nullnullnullnull 中 含 水 量 nullnullnull nullnullnullnull 高壓滅菌 nullnull 冷卻至室溫備用 nullnullnullnullnullnull 粗酶液提取 待菌絲長滿平板后取基質 nullnull 適當研磨后移 入 nullnullnullnull 離心管中 加入純凈水 nullnullnullnull 于 nullnullnull 水浴 鍋 中 浸 提 nullnull 后 過 濾 取 濾 液 定 容 至 nullnullnullnull 即為粗酶液 用 nullnullnull 離心管分裝 保存于 nullnullnullnull 備用 nullnullnullnullnullnull 酶活測定 用酶活性測定試劑盒 蘇州格瑞思生物科技 有限公司 測定多酚氧化酶 漆酶 半纖維素酶 纖 維素酶 酸 性 蛋 白 酶 null 種 酶 活 性 分 別 在 nullnullnull nullnullnullnullnull 和 nullnullnullnullnull 處測定 nullnull 值 并根據(jù)說明書 所提供的公式計算酶活性 nullnullnullnullnullnull 混合設計配方 運用混料設計方法 nullnullnullnullnullnullnull 中的單純型格 子法 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 來限制主料成分的 上下界 nullnull 從而進行比例設計 利用 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 軟件對主料中各成分的比例進行優(yōu) 化設 計 具 體 配 比 見 表 null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnull 其中 nullnull 為粗木屑 nullnull 為油菜秸稈 nullnull 為大豆秸稈 nullnullnullnull 項目測定 測定桑黃生長時期的菌絲生長速率 多酚氧 化酶 漆酶 半纖維素酶 纖維素酶 酸性蛋白酶活 性 null 個評價指標 菌絲生長速率采用 nullnullnullnull 的 培養(yǎng)皿測定 接種塊直徑為 nullnullnull 菌絲生長速 nullnullnullnullnullnull 表 null null 培養(yǎng)基配方設計 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null 配方 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 栽培基質配比 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnull nullnull nullnull null nullnullnullnull nullnull null null nullnull nullnullnullnull null null nullnull nullnull nullnullnull null nullnullnull nullnullnull null null nullnullnull nullnull nullnull null nullnull nullnullnull nullnull null nullnullnullnullnull nullnullnullnullnull nullnullnullnull null nullnullnullnullnull nullnullnullnullnull nullnullnullnull null nullnullnullnullnull nullnullnullnullnull nullnullnullnull null nullnullnullnullnull nullnullnullnullnull nullnullnullnull 率 nullnull null nullnull null 第 nullnull 天所測菌落直徑 null 接種 塊直徑 nullnull nullnull null 種胞外酶活性根據(jù)試劑盒說 明書所提供的公式計算測定 nullnullnullnull 數(shù)據(jù)分析 采用 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 軟件統(tǒng)計試驗數(shù)據(jù) 采用 nullnullnullnullnullnullnullnullnull 軟件進行數(shù)據(jù)相關性 nullnullnullnullnullnullnull 分析 采用 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 軟件對主料中各成 分的比例進行優(yōu)化設計 nullnull 注 不同小寫字母表示處理間差異顯著 null nullnullnullnullnull 下同 nullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 圖 null null 初篩配方桑黃菌絲生長速率差異顯著性分析 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnull 結果與分析 nullnullnullnull 桑黃培養(yǎng)主料的篩選 由圖 null 可知 不同主料培養(yǎng)的桑黃菌絲生長 速率之間存在顯著性差異 nullnullnullnullnullnull 粗木屑基 nullnullnull 北 null 方 null 園 null 藝 nullnullnullnullnullnull null 月 上 null 質的菌絲生長速率為 nullnullnullnullnullnull null nullnull 顯著高于 花生秸稈 玉米秸稈 小麥秸稈基質 其次為油菜 秸 稈 和 大 豆 秸 稈 菌絲生長速率分別為 nullnullnullnullnullnull null nullnull 和 nullnullnullnullnullnull null nullnull 小麥秸稈基質 的菌絲生長速率最小 為 nullnullnullnullnullnull null nullnull 以此作 為依據(jù) 篩選出粗木屑 油菜秸稈 大豆秸稈 null 種 優(yōu)勢主料 進行下一步配方優(yōu)化試驗 nullnullnullnull 不同主料對桑黃菌絲生長速率的影響 根據(jù) nullnull 種配方的平板培養(yǎng)試驗 表 null 將測 得菌絲生長速率做差異顯著性分析 由圖 null 可 知 不同配方培養(yǎng)的桑黃菌絲生長速率之間存在 顯著性差異 nullnullnullnullnullnull null 配方的菌絲生長速率 為 nullnullnullnullnullnull null nullnull 顯著高于其它配方 其次是 null null null null 和 null 配方 其中 null 和 null 配方菌絲生長 速率分別為 nullnullnullnull nullnullnullnullnullnull null nullnull null 配方的菌 絲生長速率最小 為 nullnullnullnullnullnull null nullnull 圖 null nullnullnull 個配方菌絲生長速率差異顯著性分析 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnull 不同主料對桑黃相關胞外酶活性的影響 nullnullnullnullnullnull 桑黃不同主料培養(yǎng)條件下胞外酶活性的 變化 nullnull 食用菌產生的酶主要為胞外酶 它有利于菌 體將原料中的物質進行分解 把大分子物質轉化 成小分子物質 然后用于菌體的消化 吸收和利 用 為自身生長發(fā)育提供營養(yǎng) nullnull 通過對多酚氧 化酶 漆酶 半纖維素酶 纖維素酶和酸性蛋白酶 null 種胞外酶活性進行回歸分析 結果表明 null 種胞 外酶在桑黃培養(yǎng)過程中發(fā)揮著不同的作用 由表 null 可知 多酚氧化酶在 null 培養(yǎng)基活性最 高 且 null null 與 null 培養(yǎng)基的多酚氧化酶活性處于同 一顯著水平 漆酶在 null 培養(yǎng)基上具有較高的活 性 說明培養(yǎng)在該種培養(yǎng)基上的桑黃對木質素的 降解能力較強 在食用菌生長發(fā)育過程中 半纖 維素酶和纖維素酶的變化趨勢相似 nullnull 從表 null 還 可以看出 null 種酶均在 null 培養(yǎng)基上活性最高 達到 nullnullnullnullnullnullnull nullnull nullnull 和 nullnullnullnullnullnull nullnull nullnull 且在 null 和 null 培養(yǎng)基上 null 種酶的活性處于同一顯著水平 在 null 培 養(yǎng) 基 上 酸 性 蛋 白 酶 活 性 最 高 達 到 nullnullnullnullnull nullnull nullnull null nullnullnullnullnullnull 桑黃胞外酶活性與各主料之間的回歸模 型方程分析 由表 null 可知 null 種胞外酶的回歸模型的 null 值 均小于 nullnullnullnull 且失擬項不顯著 表明 null 種胞外酶 與各主料之間的回歸方程擬合較好 方程的自變 量系數(shù) null 反映了方程中自變量的影響程度 由 null 種胞外酶活性與各主料之間的回歸方程可知 各主料對多酚氧化酶和漆酶活性貢獻程度依次為 nullnull 大豆秸稈 nullnullnull 油菜秸稈 nullnullnull 粗木屑 各主料對纖維素酶和半纖維素酶活性的貢獻程度 依次為 nullnull 油菜秸稈 nullnullnull 大豆秸稈 nullnullnull 粗 木屑 各主料對酸性蛋白酶活性的貢獻程度依次 為 nullnull 大豆秸稈 nullnullnull 粗木屑 nullnullnull 油菜秸 稈 因此 不同基質對各胞外酶活性的貢獻程度 不同 基質對酶活性也有著重要的影響 nullnullnullnull 菌絲生長速率與胞外酶活性的相關性分析 由表 null 可知 菌絲生長速率與多酚氧化酶 半 纖維素酶和纖維素酶 null 種胞外酶活性的相關系數(shù) 均為負值 分別為 nullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnull 和 nullnullnullnullnullnull 三者在 nullnullnullnullnullnull 水平呈極顯著負相關 漆酶活 性與酸性蛋白酶活性 null 種胞外酶之間的相關系數(shù) 較小 為 nullnullnullnullnull 且在 nullnullnullnullnullnull 水平上呈顯著正相 關 漆酶活性與半纖維素酶活性和纖維素酶活性 在 nullnullnullnullnullnull 水平上呈極顯著負相關 相關系數(shù)均 為負數(shù) 分別為 nullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnull 纖維素酶活性 與半纖維素酶活性在 nullnullnullnullnullnull 水平上呈極顯著 正相關 相關系數(shù)較高 為 nullnullnullnullnull nullnullnullnull 配方預測 根據(jù)各評價指數(shù)之間的相關性 設定各組分 的期望值 運用 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 軟件設置 目標響應值并進行回歸方程分析見表 nullnullnull 最終 優(yōu)化得出適合桑黃菌絲體生長的配方 其組分為 粗木 屑 nullnullnullnullnull 油 菜 秸 稈 nullnullnullnullnull 大 豆 秸 稈 nullnullnullnullnull 麥麩 nullnullnull 蔗糖 nullnull 碳酸鈣 nullnull nullnullnullnull 第 null期 nullnullnullnullnullnullnull 北 null 方 null 園 null 藝 表 null null 不同胞外酶活性比較 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnull nullnull 配方 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 多酚氧化酶活性 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 漆酶活性 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 半纖維素酶活性 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 纖維素酶活性 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 酸性蛋白酶活性 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnull 注 不同小寫字母代表差異顯著 null nullnullnullnullnull nullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 表 null null 胞外酶活性與各主料之間的回歸模型方程分析 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 酶 nullnullnullnullnullnull 回歸方程 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null值 nullnullnullnullnullnull 失擬項 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 多酚氧化酶 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null null nullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnull 漆酶 nullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null null nullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnull 纖維素酶 nullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull