引文格式 劉沛 王丹 胡先奇 鎂毒害抑制茉莉酸信號通路增加擬南芥對南方根結(jié)線蟲敏感性的研究 J 云南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué) 報 自然科學(xué) 2022 37 2 220 227 DOI 10 12101 j issn 1004 390X n 202109039 鎂毒害抑制茉莉酸信號通路增加擬南芥對 南方根結(jié)線蟲敏感性的研究 劉 沛 王 丹 胡先奇 云南農(nóng)業(yè)大學(xué) 云南生物資源保護與利用國家重點實驗室 云南 昆明 605201 摘要 目的 研究鎂毒害脅迫下擬南芥生理過程及響應(yīng)南方根結(jié)線蟲侵染的變化及相關(guān)分子機理 方法 以 貧營養(yǎng)的蛭石為培養(yǎng)基質(zhì) 通過盆栽試驗分析鎂毒害脅迫 15 mmol L MgCl2 下擬南芥葉綠素合成變化及擬南 芥對南方根結(jié)線蟲侵染抗 感性變化 通過轉(zhuǎn)錄組測序策略分析鎂毒害脅迫下擬南芥基因上 下調(diào)變化關(guān)系 對表達(dá)差異顯著的基因進(jìn)行實時熒光定量PCR驗證 結(jié)果 鎂毒害脅迫下 擬南芥葉綠素合成受到顯著影 響 其葉片葉綠素含量均顯著或極顯著低于對照 P 0 05或P 0 01 擬南芥線蟲敏感性分析顯示 鎂毒害處 理組接種線蟲30 d后 根內(nèi)發(fā)育形成的雌成蟲數(shù)及根表形成的根結(jié)數(shù)均顯著多于對照 P 0 05 表明鎂毒害 脅迫增加了擬南芥對南方根結(jié)線蟲侵染的敏感性 轉(zhuǎn)錄組測序結(jié)果顯示 鎂毒害脅迫下 擬南芥中8個與氨 基酸 碳水化合物 脂類 維生素和次級代謝產(chǎn)物等代謝相關(guān)的基因顯著上調(diào) 下調(diào)基因中 有5個基因均 屬于信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程 分別涉及茉莉酸生物合成通路和茉莉酸介導(dǎo)的防衛(wèi)反應(yīng)通路 實時熒光定量PCR驗證表 明 分別用2個內(nèi)參基因校正后 各上 下調(diào)基因表達(dá)趨勢一致 與轉(zhuǎn)錄組測序數(shù)據(jù)吻合 結(jié)論 鎂毒害 脅迫干擾了擬南芥植株以葉綠素合成為代表的正常生理過程 抑制了擬南芥細(xì)胞茉莉酸生物合成和信號傳導(dǎo) 相關(guān)關(guān)鍵基因的表達(dá) 增加了擬南芥對南方根結(jié)線蟲侵染的敏感性 鎂可能是參與擬南芥中茉莉酸介導(dǎo)抗南 方根結(jié)線蟲防衛(wèi)反應(yīng)的重要礦質(zhì)元素 關(guān)鍵詞 鎂毒害 擬南芥 茉莉酸信號通路 南方根結(jié)線蟲 中圖分類號 Q949 748 305 文獻(xiàn)標(biāo)志碼 A 文章編號 1004 390X 2022 02 0220 08 Study on the Magnesium Toxicity Inhibits Jasmonic Acid Signaling Pathway and Increases Arabidopsis Sensitivity to Meloidogyne incognita LIU Pei WANG Dan HU Xianqi State Key Laboratory for Conservation and Utilization of Bio Resources in Yunnan Yunnan Agricultural University Kunming 650201 China Abstract Purpose To study the changes of physiological processes in Arabidopsis under the stress of magnesium toxicity and the change of sensitivity of Arabidopsis in response to Meloidogyne incognita infection and related molecular mechanisms Methods The poor nutrient culture medi 云南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報 自然科學(xué) 2022 37 2 220 227 Journal of Yunnan Agricultural University Natural Science E mail ynauzkxb 收稿日期 2021 09 27 修回日期 2022 02 23 網(wǎng)絡(luò)首發(fā)日期 2022 03 17 基金項目 國家重點研發(fā)計劃子課題 2017YFD0200601 4 2018YFD0201202 05 云南省博士后定向資助 培養(yǎng)計劃 作者簡介 劉沛 1986 男 云南昆明人 博士 主要從事分子植物線蟲學(xué)研究 E mail dingxiaoai 通信作者 Corresponding author 胡先奇 1965 男 云南鹽津人 博士 教授 主要從事植物線蟲病害 研究 E mail xqhoo 網(wǎng)絡(luò)首發(fā)地址 um vermiculite was used in pot experiments to conduct chlorophyll synthesis change analysis of Ara bidopsis under the stress of magnesium toxicity 15 mmol L MgCl2 and to analyze the change in res istance or sensitivity of Arabidopsis to M incognita infection Through the transcriptome sequencing strategy the relationships between the up and down regulated genes of Arabidopsis under the stress of magnesium toxicity was analyzed Real time fluorescence quantitative PCR qPCR were per formed to verify the expressions of genes with significant differences Results Under the stress of magnesium toxicity the chlorophyll synthesis of Arabidopsis was significantly affected the content of chlorophyll in leaves with magnesium toxicity treatment was significantly or extremely significantly lower than control P 0 05 or P 0 01 Thirty days after inoculations the numbers of females and galls developed in roots of Arabidopsis under magnesium toxicity treatment were significantly higher than control P1且P 0 05為選擇標(biāo)準(zhǔn) FC 為2組樣本表達(dá)量比值 篩選出與對照組相比 在3個生物學(xué)重復(fù)中均顯著上調(diào)或下調(diào)的基因進(jìn) 行KEGG注釋并進(jìn)一步分析其功能 轉(zhuǎn)錄組測序 222云南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報第 37 卷 數(shù)據(jù)已上傳至國家基因組數(shù)據(jù)中心 https bigd 1 5 差異表達(dá)基因的qPCR驗證 以試劑盒Total RNA Kit II Omega公司 提 取擬南芥總RNA 通過試劑盒GoldenstarTM RT6 cDNA Synthesis Kit TsingKe公司 反轉(zhuǎn)錄獲得 cDNA 在qPrimerDB數(shù)據(jù)庫 https biodb swu 中查詢獲得擬南芥基因特異的 qPCR引物 表1 20 分別以MON1和TIP41作 為內(nèi)參基因 21 qPCR反應(yīng)使用2 TSINGKE Master Mix TsingKe公司 試劑 在ABI7500 Real time PCR System Applied Biosystem公司 上 進(jìn)行 反應(yīng)使用兩步法程序 95 預(yù)變性30 s 95 變性5 s 60 復(fù)性 延伸30 s 共40個循 表 1 qPCR驗證引物列表 Tab 1 List of primers used for quantitative PCR 基因名稱 gene name 引物名稱 primer name 引物序列 5 3 sequence STS AT4G01970 STS qPCR F CTCGAAATCAGAAGCGATGAAG STS qPCR R ACATGTTGATCAACCCTAGAGG GMS AT3G01260 GMS qPCR F AGCGATGTGATTTGGAGAGTTA GMS qPCR R GTCACAGTGACTTCAAGTTTCC PEN1 AT4G15340 PEN1 qPCR F AGTAGAGGATGCAGCGAAAATA PEN1 qPCR R AACTCTATACGATGCTCGACTG PAP7 AT2G01880 PAP7 qPCR F GTGTGACTCAAGAGCTTGTAGA PAP7 qPCR R CAAGCAGTGATCATGTCCATTT CCoAOMT7 AT4G26220 CCoAOMT7 qPCR F GGTTGGTGGGATCATAGTGTAT CCoAOMT7 qPCR R AGGGTTGCTTTCTTGACTTCTA TGA1 AT5G65210 TGA1 qPCR F CAACGTCTAGACATCCCGATAA TGA1 qPCR R TTTCCAGTTGCTGAACATAAGC PR1 AT4G33720 PR1 qPCR F GATTCCAATACATGTGCATGGG PR1 qPCR R GACCATTGTTGCATCTCACTTT TPS27 AT3G25830 TPS27 qPCR F ACCTTCACCGTGGAACCATTGT TPS27 qPCR R AGACGGCTCTTCTTCTCATCATCA MYC2 AT1G32640 MYC2 qPCR F CGGATCAGGAGTACAGGAAAAA MYC2 qPCR R GAAAAACCATTCCGTATCCGTC VSP1 AT5G24780 VSP1 qPCR F GGAGACCTTGCATCTATACGAA VSP1 qPCR R CGTTTGGCTTGAGTATGAGATG VSP2 AT5G24770 VSP2 qPCR F CAAAGGACTTGCCCTAAAGAAC VSP2 qPCR R GTCTTCTCTGTTCCGTATCCAT JZA9 AT1G70700 JZA9 qPCR F CATGAGGTTAACGATGATGCTG JZA9 qPCR R GGCATGAAACTTGAAGTAGCAA JZA10 AT5G13220 JZA10 qPCR F TCAGTTTTCCAAGTGTCTCGTA JZA10 qPCR R TACCGAAAGATCTGTCTCCATC POX1 AT3G30775 POX1 qPCR F GAAGCGTTTATGAAGCTACTGG POX1 qPCR R ATGAGAGTTTGAAGTTCGGACT AOC2 AT3G25770 AOC2 qPCR F CTTCTACTTCGGAGACTATGGC AOC2 qPCR R TCATTAGCCAACCCTTTAAGGT RFS2 AT3G57520 RFS2 qPCR F TGTTCCATAGTCTACACCCAAC RFS2 qPCR R TATCACTGACATAGATTGCGCA MON1 AT2G28390 MON1 qPCR F CAATGGAGGTTTATTGCGTGAA MON1 qPCR R CTTCCTCTCTCTCCATCGTAAC TIP41 AT4G34270 TIP41 qPCR F TTTTGGCGAGAATGCATTAGTC TIP41 qPCR R TTGCTCCTGAATTTCCATTGTG 第 2 期劉 沛 等 鎂毒害抑制茉莉酸信號通路增加擬南芥對南方根結(jié)線蟲敏感性的研究223 2 Ct 環(huán) 結(jié)果使用軟件SDS v2 0進(jìn)行分析 以 法計算基因表達(dá)差異 22 1 6 統(tǒng)計分析方法 統(tǒng)計分析使用SPSS 13 0的ANOVA方法 2 結(jié)果與分析 2 1 鎂毒害抑制擬南芥葉綠素合成 由圖1可知 1 5 mmol L MgCl2處理組的葉 綠素含量與同時期CK相比均沒有顯著差異 說 明不添加鎂元素的液體MS培養(yǎng)基澆灌處理可滿 足擬南芥葉綠素合成的需求 而加入適量鎂元素 1 5 mmol L 并沒有顯著促進(jìn)擬南芥葉綠素的合 成 符合鎂作為中量元素的生物學(xué)作用 鎂毒害 處理組 15 mmol L MgCl2 的葉綠素含量均顯著 或極顯著低于CK組 P 0 05或P 0 01 說明過 量添加鎂元素 15 mmol L MgCl2 可抑制擬南芥 葉綠素合成 對擬南芥形成毒害脅迫 2 2 鎂毒害增加擬南芥對南方根結(jié)線蟲的敏感性 由圖2可知 鎂毒害處理組 15 mmol L MgCl2 根內(nèi)的雌成蟲數(shù)為36 8 根表形成的根 結(jié)數(shù)為30 6 分別顯著高于CK處理的雌成蟲數(shù) 17 7 和根結(jié)數(shù) 13 5 2 3 轉(zhuǎn)錄組測序揭示鎂毒害引起的基因表達(dá)差異 挖掘轉(zhuǎn)錄組測序數(shù)據(jù)后共得到差異表達(dá)基因 70個 其中 表達(dá)上調(diào)的基因48個 表達(dá)下調(diào) 的基因22個 上 下調(diào)基因中分別有8個基因 具有KEGG注釋信息 表2 8個表達(dá)上調(diào)基因分屬7個生物學(xué)過程 氨 基酸代謝 次級代謝產(chǎn)物生物合成 碳水化合物 代謝 輔酶因子和維生素代謝 萜類和多酮類化 合物代謝 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)以及環(huán)境適應(yīng) 可以看出 在感受到鎂毒害脅迫信號后 擬南芥細(xì)胞啟動了 碳水化合物 氨基酸 脂 維生素和次級代謝產(chǎn) 物等多個與正常營養(yǎng)生長和生物量積累相關(guān)的重 要代謝過程 但相關(guān)基因上調(diào)的結(jié)果可能不足以 回補鎂毒害脅迫造成的不良影響 擬南芥仍然表 現(xiàn)出以葉綠素含量下降為標(biāo)志的生長受抑制表型 8個表達(dá)下調(diào)基因分屬4個生物學(xué)過程 氨 基酸代謝 碳水化合物代謝 脂類代謝和信號 轉(zhuǎn)導(dǎo) 有別于上調(diào)基因較為分散地涉及多個生物 學(xué)過程 下調(diào)基因中有5個基因 MYC2 VSP1 VSP2 JAZ9和JAZ10 同屬于植物信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑 中的茉莉酸信號傳導(dǎo)相關(guān)通路 ath04016和 ath04075 而AOC2則屬于茉莉酸生物合成通路 ath00592 這一結(jié)果與前述鎂毒害脅迫下擬南芥 對南方根結(jié)線蟲敏感性增加的結(jié)果相一致 研究 結(jié)果初步表明 茉莉酸在擬南芥與南方根結(jié)線蟲 的互作中發(fā)揮著幫助植物抗線蟲的生物學(xué)功能 進(jìn)一步通過qPCR方法 分別使用2個擬南 芥內(nèi)參基因MON1和TIP41對具有KEGG注釋 信息的差異表達(dá)基因進(jìn)行表達(dá)驗證分析 結(jié)果 圖3 顯示 每個差異表達(dá)基因在經(jīng)過雙內(nèi)參校 正后 其表達(dá)上 下調(diào)趨勢相一致 與CK相比 表達(dá)差異明顯 與轉(zhuǎn)錄組測序數(shù)據(jù)吻合 熒光定 量PCR的結(jié)果進(jìn)一步佐證了鎂毒害脅迫對擬南芥 茉莉酸生物合成和信號傳導(dǎo)途徑的影響 0 7 14 處理時間 d time of treatment 21 28 葉綠素含量 mg g 1 content of chlorophyll 0 5 1 0 1 5 2 0 2 5 CK 1 5 mmol L MgCl 2 15 mmol L MgCl2 注 和 分別表示同時期處理組與CK相比差異顯著 P 0 05 和極顯著 P 0 01 Note and mean significant difference P 0 05 and extremely significant difference P 0 01 at the same time respectively 圖 1 鎂毒害抑制擬南芥葉綠素合成 Fig 1 Magnesium toxicity inhibiting the chlorophyll syn thesis in Arabidopsis 0 CK 處理組 treatment group 15 mmol L MgCl2 5 10 平均數(shù)量 average number 15 20 25 30 35 40 45根結(jié) galls雌成蟲 females 注 表示與CK組相比差異顯著 P 0 05 Note means significant difference with CK treatment P 0 05 圖 2 鎂毒害增加擬南芥對南方根結(jié)線蟲敏感性的影響 Fig 2 Effect of magnesium toxicity increasing on the sensit ivity of Arabidopsis to Meloidogyne incognita 224云南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報第 37 卷 3 討論 自然環(huán)境中 鎂毒害是特殊生境下植物面臨 的非生物脅迫 過量施用鎂肥也會產(chǎn)生相應(yīng)問 題 已有研究顯示 鎂毒害抑制擬南芥淀粉含量 和生物量積累 6 在此基礎(chǔ)上 本研究發(fā)現(xiàn)鎂毒 害抑制擬南芥葉綠素合成 鎂元素的一項重要生 物學(xué)功能即是參與植物細(xì)胞中葉綠素的生物合 成 而鎂毒害脅迫反而抑制了該過程 預(yù)示著植 物對鎂的吸收利用可能存在反饋抑制的機制 對 受鎂毒害脅迫擬南芥材料進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測序和qP CR驗證的結(jié)果進(jìn)一步證明 在鎂毒害脅迫下 表 2 具KEGG注釋的差異表達(dá)基因 Tab 2 Differential expressed genes with KEGG annotations 基因編號 accession No 基因名稱 gene name FC log2FC P值 P value 通路編號 pathway No 注釋 description 上調(diào)基因 up regulated gene AT4G26220 CCoAOMT7 4 652 2 218 3 92 10 5 ath00941黃酮類生物合成flavonoid biosynthesis ath00940苯丙烷生物合成phenylpropanoid biosynthesis ath00945 芪類 二芳基庚烷類和姜酚生物合 成 stilbenoid diarylheptanoid and gingerol biosynthesis ath00360苯丙氨酸代謝phenylalanine metabolism AT3G01260 GMS 13 624 3 768 5 75 10 8 ath00052半乳糖代謝galactose metabolism ath00010糖酵解glycolysis AT4G01970 STS 6 626 2 728 7 05 10 5 ath00052半乳糖代謝galactose metabolism AT4G15340 PEN1 8 977 3 166 4 42 10 5 ath00909 倍半萜和三萜生物合成 sesquiterpenoid and triterpenoid biosynthesis AT3G25830 TPS27 12 472 3 641 1 32 10 6 ath00902類單萜生物合成monoterpenoid biosynthesis AT2G01880 PAP7 5 334 2 415 1 12 10 5 ath00740核黃素代謝riboflavin metabolism AT4G33720 PR1 38 512 5 267 3 15 10 21 ath04016 MAPK信號通路MAPK signaling pathway ath04075植物激素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)plant hormone signal transduction ath04626植物 病原物互作plant pathogen interaction AT5G65210 TGA1 2 319 1 213 1 03 10 5 ath04075植物激素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)plant hormone signal transduction 下調(diào)基因 down regulated gene AT3G57520 RFS2 0 324 1 625 2 79 10 8 ath00052半乳糖代謝galactose metabolism AT3G25770 AOC2 0 402 1 316 9 52 10 5 ath00592 亞麻酸代謝alpha linolenic acid metabolism AT3G30775 POX1 0 242 2 048 7 86 10 6 ath00330精氨酸和脯氨酸代謝arginine and proline metabolism AT1G32640 MYC2 0 342 1 548 6 53 10 5 ath04016 MAPK信號通路MAPK signaling pathway ath04075植物激素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)plant hormone signal transduction AT5G24780 VSP1 0 029 5 103 6 44 10 7 ath04016 MAPK信號通路MAPK signaling pathwayAT5G24770 VSP2 0 041 4 603 1 65 10 5 AT1G70700 JAZ9 0 275 1 861 5 16 10 5 ath04075植物激素信號轉(zhuǎn)導(dǎo) plant hormone signal transductionAT5G13220 JAZ10 0 215 2 216 1 47 10 5 注 FC 2組樣本表達(dá)量比值 Note FC expression ratio of two groups of samples fold change 第 2 期劉 沛 等 鎂毒害抑制茉莉酸信號通路增加擬南芥對南方根結(jié)線蟲敏感性的研究225 擬南芥多個代謝相關(guān)基因顯著上調(diào) 但相關(guān)基因 的上調(diào)表達(dá)并沒有在表型上回補鎂毒害產(chǎn)生的 影響 相關(guān)研究結(jié)果明確了過量施用鎂肥并 不能如預(yù)期增產(chǎn) 反而會對植物生長產(chǎn)生不利影 響 23 因此 合理施用鎂肥 不論是從節(jié)約生產(chǎn) 成本和保護生態(tài)環(huán)境等角度 還是從促進(jìn)植物正 常生長角度分析 都具有重要意義 鎂毒害增加了擬南芥對南方根結(jié)線蟲侵染的 敏感性 同時還會干擾擬南芥茉莉酸生物合成和 茉莉酸介導(dǎo)防衛(wèi)反應(yīng)信號通路的信號傳導(dǎo) 表明 了二者之間潛在的聯(lián)系 茉莉酸是研究較為充分 的植物防衛(wèi)反應(yīng)相關(guān)激素 24 已有研究表明 茉 莉酸在植物響應(yīng)昆蟲啃食 機械創(chuàng)傷和死體寄生 病原物過程中發(fā)揮作用 25 對于茉莉酸在植物應(yīng) 對根結(jié)線蟲寄生過程中的作用 目前研究還存在 較大爭議 研究報道顯示 通過葉片噴施茉莉酸 類化合物 茉莉酸甲酯會誘導(dǎo)植物對根結(jié)線蟲 的抗性 26 27 而亦有研究發(fā)現(xiàn) 茉莉酸信號通路 是否完整是線蟲侵染番茄的關(guān)鍵 28 本研究結(jié)果 證明 在擬南芥與南方根結(jié)線蟲互作過程中 茉 莉酸發(fā)揮了幫助植物抵抗線蟲的生物學(xué)功能 綜 上所述 鎂毒害增加擬南芥對南方根結(jié)線蟲的敏 感性 可能是鎂毒害對擬南芥正常生長影響和干 擾茉莉酸介導(dǎo)防衛(wèi)反應(yīng)的綜合作用 相關(guān)潛在作 用機理還有待深入研究 4 結(jié)論 鎂毒害脅迫下 擬南芥葉片的葉綠素生物合 成受到顯著抑制 同時 擬南芥植株對南方根結(jié) 線蟲侵染的敏感性顯著增加 轉(zhuǎn)錄組測序分析發(fā) 現(xiàn) 鎂毒害脅迫下擬南芥多個代謝相關(guān)基因表達(dá) 顯著上調(diào) 而5個與茉莉酸生物合成或信號傳導(dǎo) 相關(guān)的關(guān)鍵基因則顯著下調(diào) qPCR分析驗證了 轉(zhuǎn)錄組測序的結(jié)果 本研究首次表明 鎂元素參 與了茉莉酸介導(dǎo)的擬南芥對南方根結(jié)線蟲的防衛(wèi) 反應(yīng) 鎂毒害對擬南芥茉莉酸合成和信號通路的 干擾 增加了擬南芥對南方根結(jié)線蟲的敏感性 參考文獻(xiàn) 慕康國 趙秀琴 李健強 等 礦質(zhì)營養(yǎng)與植物病害關(guān)系 研究進(jìn)展 J 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報 2000 5 1 84 DOI 10 3321 j issn 1007 4333 2000 01 016 1 武維華 植物生理學(xué) M 3版 北京 科學(xué)出版社 2018 2 王芳 劉鵬 徐根娣 土壤中的鎂及其有效性研究概 述 J 河南農(nóng)業(yè)科學(xué) 2004 1 33 DOI 10 3969 j issn 1004 3268 2004 01 011 3 HERMANS C VERBRUGGEN N Physiological char acterization of Mg deficiency in Arabidopsis thaliana J Journal of Experimental Botany 2005 56 418 2153 DOI 10 1093 jxb eri215 4 GUO W L CONG Y X HUSSAIN N et al The remod eling of seedling development in response to long term magnesium toxicity and regulation by ABA DELLA sig naling in Arabidopsis J Plant and Cell Physiology 2014 55 10 1713 DOI 10 1093 pcp pcu102 5 GUO W L CHEN S N HUSSAIN N et al Magnesium stress signaling in plant just a beginning J Plant Sig naling Behavior 2015 10 3 e992287 DOI 10 4161 15592324 2014 992287 6 REZA M H SHAH H MANJREKAR J et al Magnesi um uptake by CorA transporters is essential for growth development and infection in the rice blast fungus Mag naporthe oryzae J PLoS One 2016 11 7 e159244 DOI 10 1371 journal pone 0159244 7 HUBER D JONES J The role of magnesium in plant disease J Plant and Soil 2013 368 73 DOI 10 1007 s11104 012 1476 0 8 李丹萍 不同鎂肥在土壤中的遷移淋洗及其生物有效 性研究 D 重慶 西南大學(xué) 2018 9 馬建梅 使用鉀肥對土壤中鈣 鎂有效性及其效應(yīng)的 影響 D 銀川 寧夏大學(xué) 2021 10 JONES J T HAEGEMAN A DANCHIN E G et al Top 10 plant parasitic nematodes in molecular plant patho logy J Molecular Plant Pathology 2013 14 9 946 DOI 10 1111 mpp 12057 11 HOGENHOUT S A VAN DER HOORN R A TERAU CHI R et al Emerging concepts in effector biology of plant associated organisms J Molecular Plant Microbe Interaction 2009 22 2 115 DOI 10 1094 mpmi 22 2 0115 12 劉沛 南方根結(jié)線蟲MiMsp40效應(yīng)子與寄主STZ互作 調(diào)控免疫的機理研究 D 北京 中國農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017 13 PERRY R N MOENS M 植物線蟲學(xué) M 簡恒主譯 北京 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社 2011 14 GOVERSE A SMANT G The activation and suppres sion of plant innate immunity by parasitic nematodes J 15 0 CCoAOMT7 GMSSTSPEN1TPS27PAP7CAPE3TGA1RFS2AOC2POX1MYC2VSP1VSP2JAZ9JAZ10 相對表達(dá)變化 relative fold change 1 上調(diào)基因 up regulated gene下調(diào)基因 down regulated gene 2 3 4 5 6 MON1 TIP41 圖 3 qPCR驗證基因的表達(dá) Fig 3 qPCR verifications for differential expressed genes 226云南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報第 37 卷 Annual Review of Phytopathology 2014 52 243 DOI 10 1146 annurev phyto 102313 050118 MURASHIGE T SKOOG F A revised medium for rap id growth and bio assays with tobacco tissue cultures J Physiologia Plantarum 1962 15 3 473 DOI 10 1111 j 1399 3054 1962 tb08052 x 16 梁艷 元謀番茄產(chǎn)區(qū)根結(jié)線蟲鑒定及生物有機肥對其 調(diào)控的初步研究 D 昆明 云南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018 17 NIU J H LIU P LIU Q et al Msp40 effector of root knot nematode manipulates plant immunity to facilitate parasitism J Scientific Reports 2016 6 19443 DOI 10 1038 srep19443 18 劉維志 植物病原線蟲學(xué) M 北京 中國農(nóng)業(yè)出版社 2000 19 LU K LI T HE J et al qPrimerDB a thermodynamics based gene specific qPCR primer database for 147 or ganisms J Nucleic Acids Research 2017 46 D1 D1229 DOI 10 1093 nar gkx725 20 HAN B YANG Z SAMMA M K et al Systematic val idation of candidate reference genes for qRT PCR nor malization under iron deficiency in Arabidopsis J Bio Metals 2013 26 3 403 DOI 10 1007 s10534 013 9623 5 21 2 Ct LIVAK K J SCHMITTGEN T D Analysis of relative gene expression data using real time quantitative PCR and the method J Methods 2001 25 4 402 DOI 10 1006 meth 2001 1262 22 凌麗俐 黃翼 彭良志 等 鎂缺乏和過量脅迫對紐荷爾 臍橙葉綠素?zé)晒馓匦缘挠绊?J 生態(tài)學(xué)報 2014 34 7 1672 DOI 10 5846 stxb201304250813 23 VANDOORN A BONAVENTURE G SCHMIDT D D et al Regulation of jasmonate metabolism and activation of systemic signaling in Solanum nigrum COI1 and JAR4 play overlapping yet distinct roles J New Phyto logist 2011 190 3 640 DOI 10 1111 j 1469 8137 2010 03622 x 24 ROSAHL S FEUSSNER I Oxylipins M MURPHY D J Plant lipids biology utilisation and manipulation Ox ford and Boca Raton Blackwell Publishing Ltd CRC Press 2004 25 NAHAR K KYNDT T DE VLEESSCHAUWER D et al The jasmonate pathway is a key player in systemic ally induced defense against root knot nematodes in rice J Plant Physiology 2011 157 1 305 DOI 10 1104 pp 111 177576 26 FUJIMOTO T TOMITAKA Y ABE H et al Expres sion profile of jasmonic acid induced genes and the in duced resistance against the root knot nematode Melo idogyne incognita in tomato plants Solanum lycopersic um after foliar treatment with methyl jasmonate J Journal of Plant Physiology 2011 168 10 1084 DOI 10 1016 j jplph 2010 12 002 27 BHATTARAI K K XIE Q G MANTELIN S et al To mato susceptibility to root knot nematodes requires an intact jasmonic acid signaling pathway J Molecular Plant Microbe Interaction 2008 21 9 1205 DOI 10 1094 MPMI 21 9 1205 28 責(zé)任編輯 何謦成 第 2 期劉 沛 等 鎂毒害抑制茉莉酸信號通路增加擬南芥對南方根結(jié)線蟲敏感性的研究227