新疆農(nóng)業(yè)科學(xué) nullnullnullnull nullnull null nullnullnull nullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 高溫悶棚對設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲的 防治效果及土壤微生物群落結(jié)構(gòu)的影響 何 偉 null 羅文芳 null 于鎮(zhèn)華 null 許建軍 null 孫曉軍 null nullnull 新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所 null農(nóng)業(yè)部西北荒漠作物有害生物綜合治理重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 烏魯木齊 nullnullnullnullnullnull nullnull 中國科學(xué)院東北地理與農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所 null黑土區(qū)農(nóng)業(yè)生態(tài)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 哈爾濱 nullnullnullnullnullnull 摘 要 目的 研究高溫悶棚對蔬菜根結(jié)線蟲和根際土壤微生物群落的影響 方法 采用田間小區(qū)試驗(yàn)和 高通量測序技術(shù)方法 結(jié)果 高溫悶棚后 灌水 null 覆膜處理和灌水 null 覆膜 null 藥劑處理 nullnull nullnull 深土壤溫度在 nullnullnull以上 持續(xù)時(shí)間 nullnull nullnullnull 根結(jié)線蟲蟲口減退率為 nullnullnullnull 顯著高于灌水未覆膜處理 高溫增加了真菌和細(xì) 菌物種豐度和多樣性 但灌水 null 覆膜 null 阿維菌素處理的真菌物種豐度和多樣性下降 生菜采收期 真菌物種 豐度增加 多樣性下降 細(xì)菌物種豐度和多樣性均增加 高溫促進(jìn)了鏈格孢屬 枝孢屬真菌和 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 細(xì)菌繁殖 抑制了鞘氨醇單胞菌屬繁殖 結(jié)論 灌水 null 覆膜的悶棚方式可有 效防治根結(jié)線蟲且可影響土壤中微生物群落結(jié)構(gòu) 下茬生菜生長期 土壤中微生物群落逐步恢復(fù) 該悶棚方式 適宜在新疆溫室蔬菜應(yīng)用 關(guān)鍵詞 高溫悶棚 根結(jié)線蟲 土壤微生物 群落結(jié)構(gòu) 中圖分類號 nullnullnullnullnull null 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 null 文章編號 nullnullnullnull nullnullnullnullnull nullnullnullnull nullnull nullnullnullnullnull nullnullnull 收稿日期 nullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnull nullnullnull nullnullnull 基金項(xiàng)目 國家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 新疆維吾爾自治區(qū)重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnull 作者簡介 何偉 nullnullnullnull null 男 安徽利率人 助理研究員 研究方向?yàn)槭卟瞬∠x害防治技術(shù) null null nullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnull nullnullnull 通信作者 許建軍 nullnullnullnull null 男 河南孟津人 研究員 研究方向?yàn)槭卟瞬∠x害防治 null null nullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnull null 引 言 研究意義 根結(jié)線蟲是一種高度?；偷?植物病原線蟲 近年來 隨著設(shè)施蔬菜種植面積的 增加 根結(jié)線蟲病已成為嚴(yán)重威脅新疆設(shè)施蔬菜 生產(chǎn)的一種重要土傳病害 null 研究高溫悶棚對 蔬菜根結(jié)線蟲和根際土壤微生物群落的影響 對 研究適宜本地的綠色防控技術(shù)具有重要意義 前人研究進(jìn)展 目前 蔬菜生產(chǎn)上防治根結(jié)線蟲 方法有抗病品種 null 嫁接栽培技術(shù) null 農(nóng)業(yè)防 治 null 生物防治 null nullnull 和化學(xué)防治 null nullnull 其中以化學(xué) 防治為主 但化學(xué)藥劑造成蔬菜品質(zhì)下降 環(huán)境 污染及人體健康的問題日益突出 高溫悶棚作為 一種有效的防治病害的措施被廣泛應(yīng)用 如高溫 悶棚防治黃瓜霜霉病 null 白粉病 nullnull 西瓜枯萎 病 nullnull 茄子黃萎病 nullnull 根結(jié)線蟲病 nullnull 及消除土壤 連作障礙 nullnull 等已有相關(guān)報(bào)道 高溫悶棚不僅可 以有效殺滅溫室中的病原微生物 其對土壤微生 物群落也會產(chǎn)生影響 李佳川 nullnull 報(bào)道 灌水高溫 悶棚處理后 土壤微生物區(qū)系表現(xiàn)為細(xì)菌及放線 菌含量升高 真菌含量降低 宋健等 nullnull 報(bào)道日曬 高溫覆膜對韭菜根際土壤微生物多樣性無顯著影 響 何志剛等 nullnull 研究表明 高溫悶棚是否淹水是 影響土壤微生物群落劃分的主要因素 本研究 切入點(diǎn) 長期以來 新疆設(shè)施蔬菜種植戶在夏季 高溫時(shí)僅采用扣棚方式悶棚 但此方法地溫達(dá)不 到殺死根結(jié)線蟲的溫度 擬解決的關(guān)鍵問題 研究新疆高溫干旱區(qū)溫室灌水 null 覆膜 灌水 null 覆 膜 null 藥劑及灌水未覆膜高溫悶棚處理對土壤根結(jié) 線蟲及土壤微生物群落結(jié)構(gòu)影響 為新疆區(qū)域高 溫悶棚防治根結(jié)線蟲提供科學(xué)依據(jù) null 材料與方法 新疆農(nóng)業(yè)科學(xué) nullnull 卷 1 1 材 料 nullnullnull噻唑膦顆粒劑 日本石原產(chǎn)業(yè)株式會 社 nullnullnull nullnull阿維 噻唑啉顆粒劑 江西眾合化工 有限公司 nullnull 阿維菌素乳油 江西眾合化工有 限公司 自計(jì)式土壤溫度記錄儀 型號 nullnullnull nullnull 杭州路格科技有限公司 試驗(yàn)于 nullnullnullnull 年 null nullnull 月在吐魯番市高昌區(qū)亞 爾鄉(xiāng)建設(shè)七隊(duì)溫室進(jìn)行 試驗(yàn)溫室結(jié)構(gòu)為干打壘 溫室 長 nullnullnull null 寬 null null 在上茬番茄拉秧后 及時(shí) 清除病殘?bào)w 鏟除田間雜草 帶出棚外深埋 保持 棚架完好 棚膜完整 無破損 均勻撒施雞糞在土 壤表面 用量 null nullnullnull nullnullnullnullnullnullnull null 深翻 nullnull nullnullnull nullnull 1 2 方 法 nullnull nullnull null 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)設(shè)置在同一個(gè)溫室中 null 個(gè)處理 每處理 nullnullnull null null null 次重復(fù) 小區(qū)長 nullnull null 寬 null null nullnullnull噻唑 膦顆粒劑和 nullnullnull nullnull 阿維 噻唑膦顆粒劑各 nullnull nullnull nullnull 分別與細(xì)土混勻后均勻撒于土壤表面 nullnull 阿 維菌素乳油稀釋 null nullnullnull 倍 均勻噴灑于土壤表面 采用旋耕機(jī)進(jìn)行土壤深耕 每處理四周做壩 灌 水 水面高出地面 null nullnull nullnull 蓋好厚度為 nullnull nullnull nullnull 舊棚膜 四周用土壓嚴(yán)實(shí) 扣棚進(jìn)行悶棚處理 nullnull null 悶棚結(jié)束后進(jìn)行耕翻 晾曬 nullnull null 后直播生菜 在高溫悶棚后增施生物菌肥 在直播生菜第 null 次灌水時(shí) 將微生物菌劑寧盾一號 null 型隨水沖 施 用 量 為 nullnull nullnullnullnullnullnull null 第 null 次 灌 水 時(shí) nullnullnull nullnullnullnull null 表 null 表 null 處理方法 Table null Test treatment method 處理 nullnullnullnullnull nullnullnullnull 處理方法 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnull 藥劑施用方法 nullnullnullnullnullnull nullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null 灌水 null 覆膜 nullnull nullnullnull nullnullnullnullnullnullnull null 阿維菌素 噴霧 null 灌水 null 覆膜 nullnull nullnullnullnullnullnullnull null 阿維噻唑磷 撒施 null 灌水 null 覆膜 nullnull nullnullnullnullnullnullnull null 噻唑膦 撒施 null 灌水 null 覆膜 null null 灌水不覆膜 null null nullnull 不灌水不覆膜 null nullnull nullnull null 測定指標(biāo) nullnull nullnull nullnull null 土壤溫度監(jiān)測 采用自計(jì)式土壤溫度計(jì) 溫度記錄間隔 null nullnullnull 記錄土壤溫度變化情況 覆膜后將土壤溫度 計(jì)插入土壤 探頭插入深度分別為 nullnull nullnull nullnull nullnull 土壤中 悶棚結(jié)束后 取回溫度記錄儀 將數(shù)據(jù)轉(zhuǎn) 入計(jì)算機(jī) 使用 nullnullnullnullnull 分析數(shù)據(jù) nullnull nullnull nullnull null 土壤樣品采集 悶棚前 后和生菜收獲期 分別采用取土器取 深度 null nullnullnull nullnull 土壤 每處理隨機(jī)取 nullnull 個(gè)點(diǎn) 混勻 后部分土壤用于檢測根結(jié)線蟲數(shù)量 部分土壤 null nullnullnull保存用于微生物檢測 悶棚前處理 null nullnull 土 壤樣本編號為 null null null null null 悶棚后處理 null null null 土壤樣 本編號為 null null null null null 生菜采收期處理 null null null 土壤樣 本編號為 null null null null null nullnull nullnull nullnull null 土壤理化性質(zhì) 將采集的土壤樣品進(jìn)行處理 經(jīng)自然風(fēng)干 研 磨過篩 null nullnull 后 測定土壤的理化性質(zhì) 速效氮 采用堿解擴(kuò)散法 速效磷采用 nullnull null nullnullnullnullnull nullnullnullnullnull null 浸提 null 鉬 銻 抗 比 色 法 速 效 鉀 采 用 null nullnullnullnullnull nullnull null nullnullnull 浸提 null 火焰光度法 nullnull 值采用 nullnull 計(jì)按 土水比 nullnullnullnull null 測定 nullnull nullnull nullnull null 土壤根結(jié)線蟲數(shù)量 采用淺盤分離法與漏斗分離法分離線蟲 具 體步驟如下 取一根橡皮管 一端用夾子夾住 另 一端連接漏斗 放在漏斗架上 在 nullnullnull 目的標(biāo)準(zhǔn)沖 篩框上墊 null 張面巾紙 裝入稱好的 nullnullnull null 土樣 鋪 平 往漏斗內(nèi)加水 水漫過土壤約 nullnull null nullnull 左右 靜 置 nullnull null 后 松開止水夾 將漏斗中水緩慢放入小 燒杯內(nèi) 最后在體視顯微鏡下統(tǒng)計(jì)根結(jié)線蟲 null 齡 幼蟲的數(shù)量 nullnull nullnull nullnull null 土壤微生物 nullnullnull 提取及高通量測序 根據(jù) nullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnull nullnullnull nullnullnull nullnullnullnull 試劑盒的操 作步驟提取土壤微生物總 nullnullnull nullnullnull 所用的細(xì)菌 引物為 nullnull null nullnull 通用引 物 nullnullnullnull nullnull null nullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnull 和 nullnullnullnull nullnull null nullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnull nullnull 真菌引物為通用 引物 nullnullnullnullnull nullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnull和 nullnullnullnull nullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnull nullnull 微生物擴(kuò)增子高通量測序由北京百邁客生 物科技有限公司完成 null 結(jié)果與分析 2 1 不同處理土壤溫度監(jiān)測 研究表明 灌水 null 覆膜處理 nullnull nullnull 和 nullnull nullnull 深土壤最高溫度分別為 nullnullnull null nullnullnull null 和 nullnullnull nullnull 持 nullnullnull null 期 何 偉等 高溫悶棚對設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲的防治效果及土壤微生物群落結(jié)構(gòu)的影響 續(xù)時(shí)間為 nullnull nullnullnull 灌水未覆膜處理分別為 nullnull nullnullnull null 和 nullnullnull nullnull 持續(xù)時(shí)間為 nullnull nullnullnull 空白對照分 別為 nullnull nullnullnull null 和 nullnullnull nullnull 持續(xù)時(shí)間為 nullnull nullnullnull 灌 水 null 覆膜可以增加土壤溫度 且高溫持續(xù)時(shí)間長 圖 null 圖 null 不同土壤深度的溫度變化 Fignull null Temperature changes in different soil depths 2 2 不同時(shí)期各處理土壤根結(jié)線蟲檢測 研究表明 悶棚后灌水 null 覆膜 null 藥劑和灌水 null 覆膜處理土壤根結(jié)線蟲蟲口減退率 nullnullnullnull 灌 水未覆膜蟲口減退率為 nullnullnull nullnull 生菜采收期 各 處理均無根結(jié)線蟲危害 灌水 null 覆膜 null 藥劑和灌 水 null 覆膜處理土壤根結(jié)線蟲蟲口減退率在 nullnullnull 以上 灌水未覆膜處理蟲口減退率 nullnullnull nullnull 表 null 表 null 不同處理對土壤根結(jié)線蟲防治效果比較 Table null Comparison of control effects of different treatments on soil root nullknot nematodes 處理 nullnullnullnullnullnullnullnullnull 線蟲數(shù)量 nullnullnullnullnullnull nullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnull 條 null nullnullnullnull 土壤 生菜采收期 nullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnull 悶棚前 nullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnull 悶棚后 nullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnull 減退率 nullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnull null 線蟲數(shù)量 nullnullnullnullnullnull nullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnull 條 null nullnullnullnull 土壤 減退率 nullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnull null null nullnullnull null nullnullnull null null nullnullnull null null null nullnullnull null nullnullnull null null nullnullnull null null null nullnullnull null nullnullnull null null nullnullnull null null nullnullnull null nullnullnull null null nullnullnull null null null nullnullnull nullnull nullnullnull null null nullnull nullnullnull null null null nullnullnull nullnullnull null null nullnullnull nullnullnull null null 注 不同小寫字母代表各處理之間差異顯著 P nullnullnull nullnull 下同 nullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnull nullnull nullnull nullnullnullnullnullnull nullnullnull nullnullnullnull nullnull nullnullnullnullnull nullnullnull 新疆農(nóng)業(yè)科學(xué) nullnull 卷 2 3 不同時(shí)期各處理土壤養(yǎng)分差異 研究表明 高溫悶棚后較悶棚前 處理 null null null 土壤速效氮含量無顯著差異性 處理 null 和 null 顯著 下降 處理 null nullnull 土壤速效磷含量顯著增加 處理 null 無顯著差異 處理 null nullnull 土壤速效鉀含量顯著降 低 處理 null 和 null 土壤 nullnull 值顯著下降 其他處理無 顯著差異 生菜采收期較高溫悶棚后 處理 null nullnull 土壤速效氮含量無顯著差異 處理 null 和 null 顯著增 加 處理 null null null 土壤速效磷含量顯著下降 處理 null nullnull 土壤速效鉀含量顯著增加 處理 null 土壤 nullnull 值 顯著增加 其他處理無顯著差異 圖 null 注 數(shù)值為平均值 null 標(biāo)準(zhǔn)誤 不同小寫字母表示不同處理之間差異顯著 P nullnullnull nullnull null 為悶棚前 null 為悶棚后 null 為生菜采收期 nullnullnullnull nullnullnullnullnullnull nullnull nullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull P nullnullnull nullnull null null nullnull nullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnull nullnullnullnull null nullnull nullnullnull nullnullnull nullnullnullnullnullnull nullnullnullnull null nullnull nullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnull 圖 null 不同時(shí)期各處理土壤理化性狀 Fignull null Soil physical and chemical properties of different treatments in different periods 2 4 樣品間 nullnullnullnull 多樣性 研究表明 細(xì)菌主成分 null nullnullnull 主成分 null nullnullnull 的樣品差異性貢獻(xiàn)率分別為 nullnullnull nullnullnull nullnullnull nullnullnull 合 計(jì) 達(dá) 到 nullnullnull nullnullnull 真 菌 主 成 分 null nullnullnull 主成分 null nullnullnull 的樣品差異性貢獻(xiàn)率分 別為 nullnullnull nullnullnull nullnullnull nullnullnull 合計(jì)達(dá)到 nullnullnull nullnullnull 高溫 悶棚前 后和生菜采收期 null 個(gè)時(shí)間點(diǎn)土壤樣本距 離均較遠(yuǎn) null 個(gè)時(shí)間點(diǎn)土壤中真菌 細(xì)菌組成成分 均存在顯著差異 悶棚前 后和生菜采收期中每個(gè) 時(shí)期 null 個(gè)處理土壤樣本距離較近 每個(gè)時(shí)期土壤 中真菌 細(xì)菌組成成分相近 圖 null 2 5 對土壤微生物多樣性的影響 研究表明 悶棚前 后和生菜采收期 null 個(gè)不同 處理分別得到 null nullnullnull nullnullnull null nullnullnull nullnullnull 和 null nullnullnull nullnullnull 條有效序列 nullnullnullnullnullnullnullnull 測序深度指數(shù)均大于 nullnullnull nullnull 表明測序深度已基本上覆蓋到樣品中所 有的物種 高溫悶棚后 灌水 null 覆膜 null 阿維菌素 土壤中的真菌物種豐度和多樣性均減少 空白對 照土壤中真菌物種豐度下降 但真菌物種多樣性 增加 其他 null 個(gè)處理土壤真菌物種豐度和多樣性 均增加 生菜采收期真菌物種豐度增加 但真菌 物種多樣性下降 表 null 悶棚前 后和下茬生菜采收期 null 個(gè)不同處理 分別得到 null nullnullnull nullnullnull nullnullnull nullnullnull 和 nullnullnull nullnullnull 條有效序 列 nullnullnullnullnullnullnullnull 測序深度指數(shù)均大于 nullnullnull nullnull 表明 測序深度已經(jīng)覆蓋到測試樣品中大部分物種 結(jié) 果表明 高溫悶棚后 null 個(gè)處理土壤樣本中細(xì)菌物 種豐度和多樣性均較高溫悶棚前下降 生菜采收 期 細(xì)菌物種豐度和多樣性均較高溫悶棚后上升 表 null nullnullnull null 期 何 偉等 高溫悶棚對設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲的防治效果及土壤微生物群落結(jié)構(gòu)的影響 注 null 是細(xì)菌 null 是真菌 null nullnull null null nullnull 是悶棚前處理 null null null null nullnull null null nullnull 是悶棚后處理 null nullnull null nullnull null nullnullnull 是生菜采收期處理 null nullnull 下 同 nullnullnullnull null nullnull nullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnull null nullnull nullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnull null nullnull null null nullnull nullnull nullnullnullnullnullnull nullnullnullnull null nullnull nullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnull nullnullnullnull null nullnull null null nullnull nullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnull nullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnull nullnullnullnull null nullnull null null nullnull nullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnull nullnull nullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnull nullnullnull nullnullnullnull nullnull nullnullnullnullnull 圖 null 屬水平上樣本的 PCoA 分析 Fignull null The principal component analysis at the genus level 2 6 門水平上真菌群落結(jié)構(gòu) 研究表明 不同時(shí)期各處理土壤樣本中真菌 優(yōu)勢菌門有顯著差別 高溫悶棚后較悶棚前 null 個(gè)處理土壤中被孢霉門豐度顯著下降 處理 null 和 null 擔(dān)子菌門豐度顯著下降 其他處理擔(dān)子菌門豐 度顯著增加 生菜采收期 處理 null 被孢霉門豐度 較高溫悶棚后無顯著差異 其他各處理的被孢霉 門豐度顯著降低 圖 null 圖 null 門水平上真菌樣本的群落組成 Fignull null The community abundance analysis of fungal genes at the phylum level 2 7 門水平上細(xì)菌群落結(jié)構(gòu) 研究表明 高溫悶棚后 處理 null 和 null 土壤樣本 中變形菌門 Proteobacteria 豐度增加 異常球菌 null 棲熱菌門 Deinococcus null nullnullnullnullnullnullnull 豐度無顯著變 化 其他處理變形菌門豐度下降 異常球菌 null 棲熱 菌門豐度增加 null 個(gè)處理土壤樣本中芽單胞菌門 Gemmatimonadetes 酸桿菌門 Acidobacteria 硝化螺 旋菌門 Nitrospirae 和浮霉菌門 Planctomycetes 豐度 顯著降低 厚壁菌門 Firmicutes 豐度顯著增加 處 理 null 土壤樣品中綠彎菌門 Chloroflexi 豐度下降 其他處理綠彎菌門豐度增加 生菜采收期較高溫悶棚后 處理 null 和 null 土壤 樣品中變形菌門豐度下降 其他處理豐度增加 處 理 null 綠彎菌門豐度增加 其他處理綠彎菌門豐度 下降 null 個(gè)處理擬桿菌門豐度顯著增加 處理 null 厚 壁菌門豐度無顯著變化 其他處理厚壁菌門豐度 顯著降低 圖 null nullnullnull 新疆農(nóng)業(yè)科學(xué) nullnull 卷 表 null 真菌的多樣性指數(shù) Table null The analysis of alpha diversity estimators of fungi 樣本 nullnullnullnullnullnull nullnullnull 數(shù)目 nullnullnull 豐富度指數(shù) nullnullnullnullnullnullnull 多樣性指數(shù) nullnullnullnull 測序深度指數(shù) nullnullnullnullnullnullnullnull null null nullnull nullnullnull nullnull nullnull nullnullnull nullnull null nullnullnullnull nullnull null nullnullnull nullnull null nullnullnull nullnull null nullnull nullnullnull nullnull nullnull nullnullnull nullnull null nullnullnullnull nullnull null nullnullnull nullnull null nullnullnull nullnull null nullnull nullnullnull nullnull nullnull nullnullnull nullnull null nullnullnullnull nullnull null nullnullnull nullnull null nullnullnull nullnull null nullnull nullnullnull nullnull nullnull nullnullnull nullnull null nullnullnullnull nullnull null nullnullnullnull nullnull null nullnullnull nullnull null nullnull nullnullnull nullnull nullnull nullnullnull nullnull null nullnullnullnull nullnull null nullnullnull nullnull null nullnullnull nullnull null nullnull nullnullnull nullnull nullnull nullnullnull nullnull null nullnullnullnull nullnull null nullnullnullnull nullnull null nullnullnull nullnull null nullnull nullnullnull nullnull nullnull nullnullnull nullnull nullnull nullnullnullnull nullnull null nullnullnull nullnull null nullnullnull nullnull null nullnull nullnullnull nullnull nullnull nullnullnull null null nullnullnullnull nullnull null nullnullnull nullnull null nullnullnull nullnull null nullnull nullnullnull nullnull nullnull nullnullnull nullnull null nullnullnullnull nullnull null nullnullnull nullnull null nullnullnull nullnull null nullnull nullnullnull nullnull nullnull nullnullnull nullnull null nullnullnullnull nullnull null nullnullnull nullnull null nullnullnull nullnull null nullnull nullnullnull nullnull nullnull nullnullnull nullnull nullnull nullnullnullnull nullnull null nullnullnull nullnull null nullnullnull nullnull null nullnull nullnullnull nullnull nullnull nullnullnull nullnull nullnull nullnullnullnull nullnull null nullnullnull nullnull null nullnullnull nullnull null nullnull nullnullnull nullnull nullnull nullnullnull nullnull null nullnullnullnull nullnull null nullnullnullnull nullnull null nullnullnull nullnull null nullnull nullnullnull nullnull nullnull nullnullnull nullnull nullnull nulln