38 2 440 446 中國生物防治學報 Chinese Journal of Biological Control 2022 年 4 月 收稿日期 2020 02 04 基金項目 國家重點研發(fā)計劃 2017YFD0200603 北京市農林科學院青年科研基金 QNJJ201908 作者簡介 共同第一作者 付莉媛 女 碩士研究生 E mail liyuan fu 蔡瑞杰 女 碩士研究生 E mail cairuijir1997 通信作者 史鳳玉 副教授 E mail shify2021 劉建斌 副研究員 E mail liujianbin1981 DOI 10 16409 ki 2095 039x 2022 02 016 葡萄灰霉病生防芽胞桿菌的篩選與防效評價 付莉媛 1 2 3 蔡瑞杰 馮志敏 2 宋新娜 1 2 朱英波 1 史鳳玉 1 3 劉建斌 2 1 河北科技師范學院農學與生物科技學院 昌黎 066004 2 北京市農林科學院植物營養(yǎng)與資源環(huán)境研究所 北京 100097 3 河北科技師范學院 河北省作物逆境生物學重點實驗室 籌 秦皇島 066000 摘要 本研究從新疆 山東及河北等地區(qū)采集的健康葡萄根際土壤中分離生防菌 以葡萄灰霉病菌 Botrytis cinerea 為靶標菌 通過平板對峙試驗 葡萄葉片和果實上的離體抑菌試驗 篩選獲得 4 株生防菌 BF1 1 BF2 1 BF3 1 和 BF4 1 具有較好的拮抗作用 經形態(tài)學和分子生物學方法分別鑒定為地衣芽胞桿菌 Bacillus licheniformis 解淀粉芽胞桿菌 B amyloliquefaciens 枯草芽胞桿菌 B subtilis 和蠟樣芽胞桿菌 B cereus 4 株生防菌所制成的生物菌肥 對葡萄灰霉病的田間防效可達到 66 50 85 68 具有開發(fā)應用潛力 關 鍵 詞 葡萄灰霉病 生物防治 芽胞桿菌 防效評價 中圖分類號 S476 文獻標識碼 A 文章編號 1005 9261 2022 02 0440 07 Screening of Biocontrol Bacillus spp and Its Suppression Efficacy on Grape Gray Mold FU Liyuan 1 2 3 CAI Ruijie FENG Zhimin 2 SONG Xinna 1 2 ZHU Yingbo 1 SHI Fengyu 1 3 LIU Jianbin 2 1 College of Agronomy and Biotechnology Hebei Normal University of Science and Technology Changli 066004 China 2 Institute of Plant Nutrition and Resources Beijing Academy of Agriculture and Forestry Sciences Beijing 100097 China 3 Hebei Key Laboratory of Crop Stress Biology in Preparation Hebei Normal University of Science and Technology Qinhuangdao 066000 China Abstract Biocontrol strains were isolated from healthy grape rhizosphere soil collected from Xinjiang Shandong Hebei provinces Four antagonistic strains showed good biocontrol activities against Botrytis cinerea on grape leaves and fruit by the plate test Based on morphology and phylogenetic tree analysis the strains BF1 1 BF2 1 BF3 1 and BF4 1 were identified as Bacillus licheniformis Bacillus amyloliquefaciens Bacillus subtilis and Bacillus cereus respectively The control efficacies of fertilizer made from the four strains were between 66 50 85 68 in the field trial Key words grape gray mold biological control Bacillus spp control effect 葡萄是世界上廣泛種植的水果之一 由灰葡萄孢 Botrytis cinerea 引起的灰霉病是葡萄主要病害 嚴重 影響葡萄果實的品質和產量 1 2 灰葡萄孢在自然條件下即可侵染葡萄植株 造成灰霉病的大量發(fā)生 一般 造成的經濟損失在 5 20 嚴重時可達 80 以上 甚至毀棚 給種植戶帶來巨大經濟損失 3 目前 我國對葡萄灰霉病的控制多以化學藥劑防治為主 常用的化學藥劑主要有丙烷脒 多菌靈 噻 菌靈和腐霉利等 均有較好的抑制效果 4 然而 化學藥劑不當使用不僅會造成嚴重的環(huán)境污染 同時也 會增加病原菌的抗藥性 導致防治效果降低 5 6 生物防治具有安全性高 無污染 不產生抗藥性等優(yōu)點 是目前最有應用前景的防治方法 多年來 關于利用生防菌控制灰霉病的研究已有較多報道 如 Eald 等 7 童蘊慧等 8 發(fā)現(xiàn)哈茨木霉 綠色木霉具有防治葡萄灰霉病的效果 9 荊卓瓊 10 葉濤等 11 發(fā)現(xiàn)解淀粉芽胞 第 2 期 付莉媛等 葡萄灰霉病生防芽胞桿菌的篩選與防效評價 441 桿菌對番茄灰霉病有很好的抑制作用 但以葡萄灰霉病為靶標的生防芽胞桿菌的篩選與研究相對較少 本研究以灰葡萄孢菌為靶標病原菌 從健康葡萄根際土壤進行分離 篩選生防菌 通過對峙法篩選出對灰葡萄孢菌有抑制作用的生防芽胞桿菌 并制成生物菌肥 通過田間試驗評價其對葡萄灰霉病的防治效果 以期為葡萄灰霉病的生物防治提供理論 依據(jù)和應用技術 1 材料與方法 1 1 供試材料 土壤樣品采集自我國新疆 山東以及河北等葡萄主產區(qū)的葡萄根際土壤 0 20 cm 及健康新鮮的葡 萄葉片備用 供試牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基 用于芽胞桿菌分離和培養(yǎng) 牛肉膏 5 g 蛋白胨 10 g 氯化鈉 5 g 瓊脂 20 g 去離子水定容至 1000 mL 牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基 牛肉膏 5 g 蛋白胨 10 g 氯化鈉 5 g 去離子水定容至 1000 mL 馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基 用于葡萄灰霉病原菌培養(yǎng) 馬鈴薯 200 g 瓊脂 20 g 去離子水定容至 1000 mL 供試灰葡萄孢菌 Botrytis cinerea 由北京市農林科學院植物營養(yǎng)與資源環(huán)境研究所微生物科學實驗室分 離保存 對照藥劑腐霉利購自四川潤爾科技有限公司 用于葡萄灰霉病發(fā)病期的防治 1 2 拮抗菌株分離與培養(yǎng) 稱取供試土樣 5 g 加入裝有 45 mL 無菌水的 100 mL 三角瓶中 置于搖床上振蕩 30 min 200 r min 28 充分混勻后 80 水浴 15 min 無菌條件下吸取 1 mL 接入裝有 9 mL 無菌水的試管中 依次梯度 稀釋至 10 8 分別吸取 10 6 10 7 和 10 8 的懸浮液 100 L 在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基平板中涂布 并置于 28 恒溫培養(yǎng) 24 h 將新培養(yǎng)的平板單菌落分別接種到裝有 50 mL 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)液的 150 mL 三角瓶中 28 200 r min 振蕩培養(yǎng) 24 h 即得待測菌液 1 3 拮抗菌株篩選 平板對峙法 將直徑為 1 5 cm 灰葡萄孢菌的菌餅 接至 PDA 培養(yǎng)基平板中心 在距菌餅 2 5 cm 處的 左右兩邊各放置 1 個無菌牛津杯 分別向其中加入 100 L 待測菌液 對照組加等量無菌菌液 28 恒溫 培養(yǎng) 5 7 d 每個處理 3 個重復 待對照菌落長滿平板時 測量抑菌帶寬度及病原菌菌落直徑 抑制率 對照菌落直徑 處理菌落直徑 對照菌落直徑 菌餅直徑 100 1 4 生物菌肥的制備 分別挑取培養(yǎng) 24 h 的目標生防芽胞桿菌菌株 BF1 1 BF2 1 BF3 1 和 BF4 1 接種至無菌的 50 mL 牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基中 28 200 r min 振蕩培養(yǎng) 24 h 向培養(yǎng)好的發(fā)酵液加入 12 g 輕質碳酸鈣攪 拌均勻 置于干燥箱中 37 烘干至含水量為 20 左右即得芽胞桿菌菌粉 將菌粉與有機水溶肥 微基生 物技術 深圳 有限公司提供 按質量比為 100 0 3 的比例混合制得生物菌肥 BF1 1 BF2 1 BF3 1 和 BF4 1 生物菌肥的微生物數(shù)量分別為 3 5 0 10 10 3 0 10 10 6 5 10 10 和 7 0 10 10 CFU mL 1 5 拮抗菌株在離體葉片及果實上的抑制作用 將采摘的新鮮葡萄葉片或葡萄果實用無菌水沖洗 常溫無菌條件下風干 隨機分組 每組 10 片或 10 顆 用無菌手術刀在葉片主脈或葡萄果實兩側切出兩個長 2 cm 的傷口 然后將各組葉片或葡萄果實浸入 灰葡萄孢菌菌懸液 10 6 CFU mL 中 5 s 后取出 自然晾干 再將葡萄葉片或葡萄果實分別浸于生物菌肥 600 倍稀釋液中 15 s 后取出晾干 以浸泡無菌牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基和無菌水作為對照組 將不同處理的葉 片或果實在室溫條件 25 下置于培養(yǎng)皿 d 9 mm 的濾紙上 并滴加 2 mL 已滅菌的去離子水 7 15 d 后觀察結果 葡萄灰霉病分級標準為 0 級 全葉或者果無病 1 級 25 以下葉或者果腐爛 2 級 25 50 葉或者果腐爛 3 級 50 75 葉或者果腐爛 4 級 75 以上葉或者果腐爛 按照公式計算病情 指數(shù)和生防效果 病情指數(shù) 各級病葉或者果數(shù) 相應級數(shù)值 調查葉或者果數(shù) 4 100 生 442 中 國 生 物 防 治 學 報 第 38 卷 防效果 對照病情指數(shù) 處理病情指數(shù) 對照病情指數(shù) 100 1 6 生物菌肥對葡萄灰霉病田間防治效果 田間試驗在河北省衡水市饒陽縣屯里鄉(xiāng)屯里村 五公鎮(zhèn)許張保村和北廣村的葡萄塑料大棚 長 1 5 m 寬 11 5 m 進行 葡萄種植株距為 1 2 m 行距為 2 5 m 葡萄樹為成齡期第 2 年 試驗共設 7 個處理 每 個處理 3 個重復 每個重復 1 壟 每壟 10 株葡萄樹 將 1 4 方法制備的生物菌肥 BF1 1 BF2 1 BF3 1 和 BF4 1 分別各稀釋 600 倍 對照藥劑腐霉利 山東裕豐源農業(yè)科技有限公司 稀釋 600 倍 空白對照 CK 及有機水溶肥對照 所有處理進行 2 次藥劑噴施 噴施時間選擇在上午 9 00 11 00 7 d 后相同方法進 行第 2 次噴施 藥劑施用量均按照每棵葡萄 2 5 g 藥劑的用量進行 2 5 g 棵 試驗前調查每行葉片總數(shù) 第二次施藥后分別于 7 15 d 調查葉片發(fā)病情況 病情指數(shù)和防治效果同上 1 7 葡萄灰霉病拮抗菌株的鑒定 1 7 1 拮抗菌培養(yǎng)性狀觀察 將生防效果較好的 4 株菌株用劃線法分別在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上 28 培 養(yǎng) 12 h 后觀察菌落顏色及形態(tài) 經革蘭氏染色后 在高倍顯微鏡 德國徠卡 DM2500 下觀察菌落形態(tài) 并拍照記錄 1 7 2 拮抗菌的分子鑒定 將待鑒定菌株分別進行 DNA 的提取 選取適合的引物 27F 5 AGAGTTTGATC CTGGCTCAG 3 和 1492R 5 TACGACTTAACCCCAATCGC 3 進行 PCR 擴增 反應體系為 25 L Taq MIX 12 5 L 引物 27F 和 1492R 各 0 5 L DNA 1 L 去離子水補足至 20 L 反應程序為 95 預變性 10 min 93 變性 60 s 50 退火 60 s 72 延伸 90 s 25 個循環(huán) 72 延伸 90 s 將 PCR 產 物送至北京三博遠志技術有限公司所進行測序 待得到測序序列后 在 NCBI 進行 BLAST 比對 獲得同 源序列 然后確定菌株分類地位 12 1 8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析 統(tǒng)計分析采用 SPSS 軟件 IBM SPSS Statistics 24 USA 進行數(shù)據(jù)的分析處理 系統(tǒng)發(fā)育樹采用 MEGA7 Mega Limited Auckland New Zealand 2 結果與分析 2 1 目標拮抗菌篩選 從不同地區(qū)土樣中分離獲得 29 株細菌菌株 通過平板對峙試驗篩選獲得 14 株具有拮抗性能 其中病 原生長半徑小于 1 50 cm 以下 對照病原半徑 4 23 cm 且抑制率大于 60 的菌劑共用有 7 株 分別為 BF 2 4 BF3 1 BF4 1 BF3 7 BF2 1 BF3 2 及 BF3 4 表 1 2 2 拮抗菌在離體葉片上的抑制作用 從圖 1 和表 2 可知 在 14 株供試拮抗菌株中 有 7 株具有明顯葉面防治效果 其中 BF1 1 BF3 1 BF3 2 BF4 1 BF2 1 對灰葡萄孢的抑制作用較好 抑制率可達 50 以上 2 3 拮抗菌在離體果實上的抑制作用 從圖 2 和表 3 中可知 有 7 株菌具有明顯的病害防治效果 其中 BF3 1 BF4 1 BF2 1 和 BF1 1 可有 效降低葡萄灰霉病的發(fā)生 抑制率達 70 以上 2 4 生物菌肥對葡萄灰霉病防治效果 由表 4 可知 BF3 1 和 BF4 1 菌肥處理對葡萄灰霉病的田間防治效果分別達 85 68 和 82 07 顯著 高于水溶肥 54 35 和腐霉利 67 30 處理 2 5 拮抗菌株的鑒定 2 5 1 形態(tài)學觀察 菌株 BF1 1 菌落呈白色 表面粗糙皺褶 邊緣不規(guī)則 直徑約為 3 mm 產芽胞 芽 胞排列呈桿狀 兩端呈圓形 單生 革蘭氏陽性 初步確定為芽胞桿菌屬 菌株 BF2 1 菌落呈淡黃色 表 面粗糙不透明 邊緣不規(guī)則 產芽胞 芽胞兩端鈍圓 長短不一 革蘭氏陽性 初步確定為芽 胞桿菌屬 菌株 BF3 1 菌落呈白色 表面粗糙不透明 常形成褶皺 伴有多處隆起 單個細胞 0 7 0 8 m 2 3 m 著色均勻 鞭毛周生 能運動 無隔膜 革蘭氏陽性菌 產芽胞 芽胞 0 6 0 9 m 1 0 1 5 m 位于菌體中央或稍偏 芽胞形成后菌體不膨大 初步確定為芽胞桿菌屬 菌株 BF4 1 菌落似蠟燭 第 2 期 付莉媛等 葡萄灰霉病生防芽胞桿菌的篩選與防效評價 443 表1 芽胞桿菌在平板上對灰葡萄孢抑制率 Table 1 The inhibitory rate of Bacillus spp against B cinerea on the plate 處理 Treatments 病原生長半徑 Pathogen growth radius cm 抑制率 Inhibitory rate BF1 1 1 80 0 30 bc 57 4 BF2 1 1 48 0 03 abc 65 1 BF2 2 1 80 0 60 bc 57 4 BF2 3 1 70 0 35 bc 59 8 BF2 4 1 40 0 20 ab 66 9 BF2 5 2 30 0 30 c 45 6 BF3 1 0 80 0 26 a 81 1 BF3 2 1 03 0 25 ab 75 6 BF3 4 1 40 0 26 ab 66 9 BF3 6 2 34 0 44 c 44 6 BF3 7 1 35 0 15 ab 68 1 BF3 9 3 80 0 20 d 10 2 BF4 1 1 40 0 10 ab 66 9 BF4 2 1 80 0 30 bc 57 4 注 數(shù)據(jù)以平均值 標準差表示 數(shù)據(jù)后不同小寫字母表示差異顯著 P 0 05 Note Data were presented as mean SE data with the different lowercases letters indicated significantly different P 0 05 BF1 1 BF2 1 BF3 1 BF4 1 BF3 2 BF2 5 BF3 7 CK 圖1 拮抗菌株對灰葡萄孢菌離體葉片的抑菌活性 Fig 1 Aantagonistic effect of biocontrol strains against B cinerea on leaves 表2 生防菌株對灰葡萄孢抑制效果 Table 2 Inhibition of biocontrol strains on B cinerea 處理 Treatments 病情指數(shù) Disease index 生防效果 Biocontrol efficacy CK 35 0 21 21 d BF3 7 22 5 10 60 c 36 BF2 5 19 0 8 48 bc 46 BF1 1 16 5 9 19 abc 53 BF3 2 14 5 7 77 abc 59 BF2 1 12 5 6 36 abc 64 BF4 1 8 0 4 24 ab 77 BF3 1 3 5 2 12 a 90 注 數(shù)據(jù)以平均值 標準差表示 數(shù)據(jù)后不同小寫字母表示差異顯著 P 0 05 Note Data were presented as mean SE data with the different lowercases letters indicated significantly different P 0 05 444 中 國 生 物 防 治 學 報 第 38 卷 CK BF2 1 BF1 1 BF4 1 BF3 7 BF3 1 BF3 2 BF2 5 圖2 拮抗菌株對灰葡萄孢菌離體果實的抑菌活性 Fig 2 Antagonistic effect of biocontrol strains against B cinerea on fruit 表3 不同菌株對灰葡萄孢果實抑菌率 Table 3 Bacterial inhibition rate of different strains on fruit of B cinerea 處理 Treatments 病情指數(shù) Disease index 生防效果 Biocontrol efficacy CK 27 5 10 61 e BF3 7 19 0 8 49 d 31 BF3 2 15 5 6 36 cd 44 BF2 5 11 5 4 95 bcd 58 BF1 1 8 0 2 83 abc 71 BF2 1 5 0 4 25 ab 82 BF4 1 4 0 1 41 ab 85 BF3 1 1 5 2 12 a 95 注 數(shù)據(jù)以平均值 標準差表示 數(shù)據(jù)后不同小寫字母表示差異顯著 P 0 05 Note Data were presented as mean SE data with the different lowercases letters indicated significantly different P 0 05 表4 不同處理對葡萄灰霉病的防治效果 Table 4 Biocontrol effects of different treatments on B cinerea 處理 Treatments 稀釋倍數(shù) Dilution time 病情指數(shù) Disease index 生防效果 Control effect CK 156 0 60 81 c 水溶肥 600 141 5 48 79 bc 54 35 BF2 1 600 102 5 4 95 bc 66 50 BF1 1 600 100 5 7 78 b 66 72 腐霉利 60 98 0 35 36 b 67 30 BF4 1 600 43 5 12 02 a 82 07 BF3 1 60 41 5 24 75 a 85 68 注 數(shù)據(jù)以平均值 標準差表示 數(shù)據(jù)后不同小寫字母表示差異顯著 P 0 05 Note Data were presented as mean SE data with the different lowercases letters indicated significantly different P 0 05 樣顏色 近似圓形 質地軟 無色素 菌落直徑 5 7 mm 產芽胞 芽胞呈桿狀 芽胞中生或近中生 孢 囊無明顯膨大 革蘭氏陽性 無莢膜 初步確定為芽胞桿菌屬 2 5 2 分子鑒定 系統(tǒng)發(fā)育樹分析表明 菌株 BF1 1 BF2 1 BF3 1 和 BF4 1 分別與地衣芽胞桿菌 Bacillus lincheniformis MF871790 1 解淀粉芽胞桿 Bacillus amyloliquefaciens MW433641 1 枯草芽胞桿菌 Bacillus subtilis MW751907 1 和蠟樣芽胞桿菌 Bacillus cereus KC814716 1 處于同一分支 結合形態(tài) 學觀察結果 菌株 BF1 1 BF2 1 BF3 1 和 BF4 1 分別鑒定為地衣芽胞桿菌 解淀粉芽胞桿 枯草芽胞桿 菌和蠟樣芽胞桿菌 圖 3 第 2 期 付莉媛等 葡萄灰霉病生防芽胞桿菌的篩選與防效評價 445 BF2 1 99 94 80 81 99 64 100 99 97 98 0 02 100 100 100 80 80 100 MW433641 1 Bacillus amyloliquefaciens SCR4 MT081100 1 Bacillus amyloliquefaciens QT 162 BF3 1 BF1 1 BF4 1 LC602938 1 Bacillus subtilis Mori7 16 23 MW751907 1 Bacillus subtilis TV 11D MF871790 1 Bacillus licheniformis G MG733547 1 Bacillus licheniformis APBSWPTB74 AB021192 1 Bacillus mycoides AB190217 1 Bacillus anthracis ATCC 14578 MK177527 1 Bacillus sp B12 KF982821 1 Bacillus cereus AGN7 KC814716 1 Bacillus cereus B18 1 MN330378 1 Bacillus cereus R5 5 AB101595 1 Sporolactobacillus inulinus D16276 1 Paenibacillus polymyxa IAM 13419 X80725 1 E coli ATCC 11775T 圖3 生防菌株的系統(tǒng)發(fā)育樹狀圖 Fig 3 Phylogenetic dendrogram of the biocontrol strains 3 討論 本試驗從不同地區(qū)土樣中獲得 29 株細菌菌株 分離 培養(yǎng)并通過平板對峙試驗篩選獲得 14 株具有拮 抗性能的菌株 將具有拮抗性能的細菌菌株進行離體葉片和離體果實抑制活性測定后發(fā)現(xiàn) 抑制率均在 50 以上的拮抗菌有 4 株分別是 BF1 1 BF2 1 BF3 1 和 BF4 1 經菌株形態(tài)學特征以及分子生物學鑒定 為地衣芽胞桿菌 解淀粉芽胞桿菌 枯草芽胞桿菌及蠟樣芽胞桿菌 此外 枯草芽胞桿菌 BF3 1 蠟樣芽 胞桿菌 BF4 1 在對峙培養(yǎng)試驗中均顯現(xiàn)出較強的抑制力 有研究指出蠟樣芽胞桿菌生長繁殖能力強 分布范圍廣 可適應較高溫度 烹飪時間短溫度不夠 時不能將其完全殺死 可能會引起食物中毒等危害 13 15 應用安全性有待于進一步評估 此外 解淀 粉芽胞桿菌 BF2 1 和地衣芽胞桿菌 BF1 1 雖不及枯草芽胞桿菌 BF3 1 和蠟樣芽胞桿菌 BF4 1 的抑制能 力強 但仍表現(xiàn)出一定的拮抗效果 荊卓瓊 10 及陳哲等 16 柴慶凱等 17 黃靜等 18 羅琳等 19 利用 解淀粉芽胞桿菌分別防治番茄 黃瓜 草莓及葡萄等灰霉病 并取得較好的防治效果 也有研究表明 地衣芽胞桿菌的菌劑可抑制黃瓜土傳病害的發(fā)生 20 22 在農業(yè)生產中 單憑拮抗菌株是無法滿足生產 過程中的綜合需求 23 24 故本試驗嘗試將拮抗菌株與含有微量元素的有機水溶肥配合使用 發(fā)現(xiàn)無機 營養(yǎng)元素成分的添加對于拮抗菌株的生防效果無明顯的抑制作用 表明拮抗菌株與其他成分配合使用 是可行的 不僅能防治植物病害的發(fā)生 還可以葉面補充植物所需的營養(yǎng) 從而減少化肥使用 改善 作物的品質 增加作物的產量 但本試驗中僅采用了拮抗菌株菌粉和含有微量元素的有機水溶肥復合 的一種比例 而產生防治效果不同可能與菌粉與水溶肥比例 以及水溶肥組成成分有關 因此相關工 作還需進一步研究探討 參 考 文 獻 1 Zhang H Y Godana E A Yuan S et al Biological control as an alternative to synthetic fungicides for the management of grey and blue mould diseases of table grapes a review J Critical Reviews in Microbiology 2020 46 4 450 462 446 中 國 生 物 防 治 學 報 第 38 卷 2 王忠躍 葡萄健康栽培與病蟲害防控 J 果農之友 2020 8 51 3 鄧庭和 新疆塔額盆地設施葡萄灰霉病發(fā)生規(guī)律及防控技術的研究 D 石河子 石河子大學 2015 4 沈建生 滕元文 王華新 等 施佳樂 撲海因 速克靈單用及混用防治葡萄灰霉病田間藥效試驗 J 中國南方果樹 2005 34 6 66 67 5 韋發(fā)才 防治葡萄灰霉病藥劑篩選試驗 J 中國南方果樹 2005 6 77 78 6 Zhang J Wang Y Du Z L et al Screening identification and antagonistic effect of antagonistic bacteria JTFM1001 against aflatoxin contamination in corn J Oil Crop Science 2021 6 1 1 7 7 Elad Y Trichoderma harzianum T39 Preparation for Biocontrol of Plant Diseases Control of Botrytis cinerea Sclerotinia sclerotiorum and Cladosporium fulvum J Biocontrol Science and Technology 2010 10 4 499 507 8 童蘊慧 郭桂萍 徐敬友 等 拮抗細菌對番茄植株抗灰霉病的誘導 J 中國生物防治 2004 20 3 187 189 9 楊春林 席亞東 謝華蓉 等 哈茨木霉 Th 30 幾丁質酶的生產條件及對灰霉病菌的拮抗作用 J 植物保護學報 2009 36 4 295 300 10 荊卓瓊 郭致杰 徐生軍 等 解淀粉芽胞桿菌 HZ 6 3 的篩選鑒定及其防治番茄灰霉病效果的評價 J 草業(yè)學報 2020 29 2 31 41 11 葉濤 劉敏 任哲昕 等 番茄灰霉菌拮抗細菌的篩選鑒定及評價 J 浙江師范大學學報 自然科學版 2020 43 1 60 65 12 張飛官 高雅慧 任慧爽 等 桑疫病病原拮抗菌的分離 鑒定及發(fā)酵條件優(yōu)化 J 微生物學報 2013 53 12 1285 1294 13 喬淼 陸橋君 一起生活飲用水污染蠟樣芽胞桿菌的檢測與分析 J 江蘇預防醫(yī)學 2019 30 6 679 680 14 Oda M Yokotani A Hayashi N et al Role of sphingomyelinase in the pathogenesis of Bacillus cereus infection J Biological and Pharmaceutical Bulletin 2020 43 2 250 253 15 梁斌 何月悅 一起蠟樣芽胞桿菌引起食物中毒事件調查分析 J 社區(qū)醫(yī)學雜志 2020 18 16 1122 1124 16 陳哲 黃靜 趙佳 等 番茄灰霉病病原菌分離鑒定及拮抗菌篩選 J 生物技術通報 2017 33 8 81 87 17 柴慶凱 張斌 常若葵 等 解淀粉芽胞桿菌 LJ02 對黃瓜抗灰霉病菌的生防效果及其誘導抗性機理的初步研究 J 植物病理學報 2019 49 6 828 835 18 黃靜 趙佳 陳哲 等 抗草莓灰霉病的芽胞桿菌 CM3 的分離與篩選 J 北方園藝 2016 11 113 116 19 羅琳 王其慧 趙海霞 等 葡萄灰霉病生防菌株的篩選及其拮抗機理初探 J 中國釀造 2017 36 4 93 98 20 王良 地衣芽胞桿菌的應用現(xiàn)狀及展望 J 生物技術世界 2013 10 4 172 21 朱薇 桃褐腐病菌的生物學和地衣芽胞桿菌 W10 的防病機理研究 D 揚州 揚州大學 2019 22 陳劉軍 俞儀陽 王超 等 蠟質芽胞桿菌 AR156 防治水稻紋枯病機理初探 J 中國生物防治學報 2014 30 1 107 112 23 王紅麗 善文輝 胡?，?等 生防菌混合接種對葡萄灰霉病菌的防治效果 J 中國生物防治學報 2020 36 2 265 271 24 賀惠文 紀兆林 徐敬友 等 地衣芽胞桿菌 W10 與化學藥劑復配對桃褐腐病菌抑制活性的增效作用 J 亞熱帶植物科學 2017 46 4 391 393 責任編輯 呂平香