O k 中國食用菌 B O H Q 黑木耳液體菌種培養(yǎng)基配方及培養(yǎng)條件優(yōu)化 盛立柱 葉松梅 葉曉菊 何建芬 文冬華 孫孔蘭 林火松 龍泉市食藥用菌產(chǎn)業(yè)辦公室 浙江 龍泉 浙江雙益菇業(yè)有限公司 浙江 龍泉 摘要 為探討黑木耳液體菌種最佳培養(yǎng)基配方及最佳培養(yǎng)條件 以黑木耳品種 黑山 為材料開展研究 采用 單因素和 正交試驗(yàn)方法 研究不同碳源 氮源 無機(jī)鹽以及不同培養(yǎng)溫度 培養(yǎng)天數(shù)和搖床轉(zhuǎn)速對黑木耳 液體菌種菌絲體生物量的影響 結(jié)果顯示 黑木耳液體菌種最佳培養(yǎng)基配方為玉米粉 豆粕 磷酸 二氫鉀 硫酸鎂 搖瓶培養(yǎng)溫度 培養(yǎng)天數(shù) 轉(zhuǎn)速 關(guān)鍵詞 黑木耳 液體菌種 正交試驗(yàn) 菌絲生物量 中圖分類號 S646 6文獻(xiàn)標(biāo)志碼 A 文章編號 1003 8310 2022 03 0082 05 Optimization of Formula and Cultivation Conditions of Auricularia heimuer Liquid Spawn SH NG Li zhu 1 Y Song mei 2 Y Xiao ju 1 H Jian fen 1 W N Dong hua 1 SUN Kong lan 2 LIN Huo song 1 O Q q q Abstract T Auricularia heimuer q w w w A auricular H T x w k A auricular q w T w A auricular q w w k k w w k w Key words Auricularia heimuer q w 基金項(xiàng)目 浙江省農(nóng)業(yè)重大技術(shù)協(xié)同推廣計(jì)劃項(xiàng)目 作者簡介 盛立柱 女 碩士 農(nóng)藝師 主要從事食 藥 用菌栽培技術(shù)與品種選育方面研究 qq 收稿日期 黑木耳 Auricularia heimuer W B 隸屬于擔(dān)子菌綱 B 木耳 目 木耳科 木耳 屬 Auricularia 別稱黑耳 云耳 樹耳等 黑木 耳味道獨(dú)特 嫩口爽滑 營養(yǎng)豐富 被現(xiàn)代營養(yǎng)學(xué) 家譽(yù)為 素中之葷 世界上稱之為 中餐中的黑色 瑰寶 兼具食 藥 用價(jià)值 具有提高免疫力 抗凝血和抗腫瘤等保健效果和藥用功效 其營養(yǎng)價(jià) 值豐富 味道鮮美且口感松脆 深受消費(fèi)者喜愛 隨著集約化 機(jī)械化生產(chǎn)規(guī)模的日益擴(kuò)大 以 及黑木耳產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)型升級的需求提升 液體菌種生產(chǎn) 制作技術(shù)成為食用菌企業(yè) 合作社 菇農(nóng)等的迫切 需求 故對黑木耳液體菌種培養(yǎng)基配方進(jìn)行篩選優(yōu) 化試驗(yàn) 可為黑木耳產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)型升級提供技術(shù)支持 1 材料與方法 1 1 材料 菌種 選用的黑木耳菌種 黑山 來自龍泉市 張良明菌種場 斜面培養(yǎng)基 馬鈴薯 去皮煮汁 麩皮 煮汁 葡萄糖 硫酸鎂 磷酸二氫 鉀 瓊脂 加水至 液體培養(yǎng)基 去皮馬鈴薯 麩皮 碳 源 氮源 磷酸二氫鉀 硫酸鎂 菇農(nóng)之友 B 加純凈水至 H 自然 1 2 試驗(yàn)方法 母種制備 在超凈工作臺(tái)上進(jìn)行操作 挑取黑木耳木粒種 接種于 試管中 于 恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)避光培養(yǎng) 待菌絲長滿 試管斜面后 挑取邊緣 處 直徑為 的菌塊轉(zhuǎn)接于 平皿中進(jìn)行擴(kuò)繁 繼續(xù)于 恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)避光培養(yǎng) 待菌絲長滿平皿后待用 液體菌種培養(yǎng)方法 向 搖瓶中加入 液體培養(yǎng)基 接 入 塊直徑 大小的菌種塊 置于 恒溫?fù)u 床中 振蕩培養(yǎng) 黑木耳菌絲體生物量測定 將培養(yǎng)好的菌絲體裝入離心管 于 離心機(jī)內(nèi)離心 條件下烘干至恒重 記錄 黑木耳菌絲體生物量 進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析 不同碳源試驗(yàn) 分別以葡萄糖 果糖 蔗糖 麥芽糖 玉米粉 為碳源 以蛋白胨為氮源 其他成 分不變 去皮馬鈴薯 麩皮 磷酸二氫鉀 硫酸鎂 B 配制供試培養(yǎng)基 于 搖瓶中加入 供試液體培養(yǎng)基 高壓蒸汽滅菌 參照參考文 獻(xiàn) 的方法 待壓力降至 時(shí) 取出供試液體培養(yǎng) 基 冷卻至室溫 在超凈工作臺(tái)內(nèi)取 塊直徑 的活化母種塊 接種于搖瓶內(nèi) 后續(xù)試驗(yàn)方法同 培養(yǎng) 后測量菌絲體生物量 以不加碳源 的培養(yǎng)基為對照 每個(gè)處理 次重復(fù) 不同氮源試驗(yàn) 分別以蛋白胨 酵母粉 麩皮 豆粕 硫酸銨 為氮源 以葡萄糖為碳源 其余成 分不變 去皮馬鈴薯 麩皮 磷酸二氫鉀 硫酸鎂 B 配制供試培養(yǎng)基 以不加氮源的培養(yǎng)基為對照 試驗(yàn)方法同 無機(jī)鹽配比試驗(yàn) 選用最佳碳源 最佳氮源 使用磷酸二氫鉀和 硫酸鎂分別設(shè)置 個(gè)添加量配比 配比 為磷酸二 氫鉀 硫酸鎂 比例為 配比 為 磷酸二氫鉀 硫酸鎂 比例為 配 比 為磷酸二氫鉀 硫酸鎂 比例為 試驗(yàn)方法同 每個(gè)配比 次重復(fù) 培養(yǎng)基配方優(yōu)化試驗(yàn) 根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果 選用最佳碳源 最佳氮 源 硫酸鎂和磷酸二氫鉀為影響因子 采用 法進(jìn)行正交試驗(yàn) 接種量 恒 溫振蕩培養(yǎng) 測量黑木耳菌絲體生物量 確定黑 木耳液體培養(yǎng)基最優(yōu)配方 每個(gè)處理 次重復(fù) 搖床培養(yǎng)溫度試驗(yàn) 以篩選出的最優(yōu)碳源 氮源 無機(jī)鹽比例配制 好供試培養(yǎng)基 接種量 搖床轉(zhuǎn)速 培養(yǎng)溫度設(shè)置 共 個(gè)試驗(yàn)處理 每個(gè)處理 次重復(fù) 培養(yǎng) 搖瓶培養(yǎng)天數(shù)試驗(yàn) 試驗(yàn)以篩選的碳源 氮源和無機(jī)鹽比例配置供 試培養(yǎng)基 接種量 最優(yōu)培養(yǎng)溫度為 中篩 選所得 進(jìn)行搖床培養(yǎng) 試驗(yàn)設(shè)置為培 養(yǎng) 共 個(gè)試驗(yàn)處理 試驗(yàn)方法 同 每個(gè)處理 次重復(fù) 搖床轉(zhuǎn)速試驗(yàn) 試驗(yàn)以最佳的碳源 氮源和無機(jī)鹽比例配置好 供試培養(yǎng)基 接種量 按 培養(yǎng) 搖床轉(zhuǎn)速設(shè) 置 個(gè)處理 培養(yǎng) 試驗(yàn)方法同 每個(gè)處理 次重復(fù) 2 結(jié)果與分析 2 1 不同碳源對黑木耳菌絲生物量的影響 不同碳源對黑木耳菌絲生物量的影響見表 由表 可知 以玉米粉為碳源的試驗(yàn)組菌絲生 物量最高 平均達(dá)到 其次是麥 芽糖 蔗糖 菌絲生物量分別達(dá) 幾種碳源對黑木耳菌絲生物量 影響的排序依次為玉米粉 麥芽糖 蔗糖 果糖 葡萄 B 碳源 菌絲生物量 果糖 平均值 葡糖糖 B 玉米粉 對照 B B 蔗糖 麥芽糖 B 表 不同碳源對黑木耳菌絲生物量的影響 T Auricularia heimuer 注 不同小寫字母表示差異顯著 P 不同大寫字母表 示差異極顯著 P w P x P 盛立柱等 黑木耳液體菌種培養(yǎng)基配方及培養(yǎng)條件優(yōu)化 糖 其中葡萄糖和果糖效果較差 低于對照 2 2 不同氮源對黑木耳菌絲生物量的影響 不同氮源對黑木耳菌絲生物量的影響見表 由表 可知 以豆粕為碳源的試驗(yàn)組黑木耳菌 絲生物量最高 平均達(dá)到 其次 是酵母粉 麩皮 菌絲生物量達(dá) 幾種氮源對黑木耳菌絲生物量影 響的排序依次為豆粕 酵母粉 麩皮 蛋白胨 硫酸銨 其中只有硫酸銨效果較差 低于對照 2 3 無機(jī)鹽配比對黑木耳菌絲生物量的影響 不同無機(jī)鹽配比對黑木耳菌絲生物量的影響結(jié) 果見表 由表 可以看出 磷酸二氫鉀和硫酸鎂比例為 時(shí) 黑木耳菌絲生物量最高 平均達(dá) 其次是比例為 時(shí) 比例為 時(shí) 黑木耳菌絲生物量最低 2 4 黑木耳液體菌種培養(yǎng)基配方優(yōu)化正交試驗(yàn) 根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果 采用 設(shè)計(jì) 選 用最佳碳源 最佳氮源 硫酸鎂和磷酸二氫鉀為因 子 進(jìn)行 正交試驗(yàn) 正交試驗(yàn)因素水平見 表 優(yōu)化結(jié)果見表 菌絲生物量 平均值 無機(jī)鹽 配比 無機(jī)鹽添加量 磷酸二氫鉀硫酸鎂 水平 含量 磷酸二氫鉀 硫酸鎂 玉米粉 豆粕 B 菌絲生物量 試驗(yàn) 編號 因素 平均值 玉米粉 豆粕 B 磷酸二氫鉀 硫酸鎂 B B K K K R B 氮源 菌絲生物量 麩皮 平均值 酵母粉 B 蛋白胨 B 對照 B 豆粕 硫酸銨 B 表 不同氮源對黑木耳菌絲生物量的影響 T Auricularia heimuer 注 不同小寫字母表示差異顯著 P 不同大寫字母表 示差異極顯著 P w P x P 表 不同無機(jī)鹽添加量及配比對黑木耳菌絲生物量的影響 T Auricularia heimuer 注 不同小寫字母表示差異顯著 P w P 表 正交試驗(yàn)因素和水平 T x 表 正交試驗(yàn)結(jié)果 T 注 不同小寫字母表示差異顯著 P 不同大寫字母表示差異極顯著 P w P x P 下轉(zhuǎn)第 頁 由表 可知 在 個(gè)單因子之間 對黑木耳菌 絲生物量的影響排序依次為 B 玉米粉影響 最大 其次是豆粕 硫酸鎂 磷酸二氫鉀影響最小 從正交試驗(yàn)結(jié)果可以看出各因素水平的較理想培養(yǎng) 基配方為 B 培養(yǎng) 天后菌絲生物量達(dá) 結(jié)果較理想 2 5 搖床培養(yǎng)溫度試驗(yàn) 搖床培養(yǎng)溫度試驗(yàn)結(jié)果見表 由表 可知 搖床培養(yǎng)時(shí) 黑木耳菌絲生 物量最大 為 其次是 搖床 培養(yǎng)時(shí) 黑木耳菌絲生物量達(dá) 搖床培養(yǎng)時(shí) 黑木耳菌絲生物量最小 為 各溫度對黑木耳菌絲體生物量 影響排序依次 但試驗(yàn)所設(shè)溫度對 搖瓶黑木耳菌絲生物量影響不大 無顯著差異 2 6 搖床培養(yǎng)天數(shù)試驗(yàn) 搖床培養(yǎng)天數(shù)試驗(yàn)結(jié)果見表 由表 可知 搖床培養(yǎng)黑木耳液體菌種 培養(yǎng) 菌絲生物量最高 平均達(dá) 其 次是培養(yǎng) 和 培養(yǎng) 黑木耳菌絲生物量最 低 平均為 培養(yǎng)天數(shù)對黑木耳 菌絲生物量影響排序依次為 其中 培養(yǎng) 和 黑木耳的菌絲生物量差異不顯著 培 養(yǎng) 和 黑木耳菌絲生物量差異不顯著 培養(yǎng) 與培養(yǎng) 間黑木耳菌絲生物量差異顯著 搖床培養(yǎng) 和 對黑木耳菌絲生物量影響較大 2 7 搖床轉(zhuǎn)速試驗(yàn) 搖床轉(zhuǎn)速試驗(yàn)結(jié)果見表 由表 可以看出 在 個(gè)搖床轉(zhuǎn)速處理中 對 黑木耳菌絲生物量的影響排序依次為 其中 影響最 大 黑木耳菌絲生物量達(dá) 其 次是 影響最小 菌絲生物 量達(dá) 在設(shè)置的 個(gè)轉(zhuǎn)速處理 試驗(yàn)中 轉(zhuǎn)速對黑木耳菌絲生物量的影響不大 無 顯著差異 3 小結(jié) 從試驗(yàn)結(jié)果中可以看出碳源是影響黑木耳液體 菌種菌絲生物量的重要因素 不同碳源對黑木耳液 體菌種菌絲生物量影響程度不同 其中多糖 雙糖 單糖 黑木耳液體菌種制作較適宜的碳源為玉米粉 氮源為食用菌細(xì)胞生長必不可少的營養(yǎng) 可促 進(jìn)蛋白質(zhì)和核酸的合成 試驗(yàn)結(jié)果顯示 不同氮源 對黑木耳液體菌種菌絲生物量影響程度不同 其中 有機(jī)氮 無機(jī)氮 黑木耳液體菌種制作較適宜的氮源 為豆粕 酵母粉和麩皮 硫酸鎂是食用菌合成氨基酸過程中重要的酶激活 劑 磷酸鹽在培養(yǎng)基中起到緩沖作用 磷是蛋白質(zhì) 核酸和細(xì)胞膜的重要組成部分 因此不同無機(jī)鹽比 例對黑木耳液體菌種菌絲生物量影響不同 磷磷酸二 氧鉀與硫酸鎂的比例為 時(shí) 試驗(yàn)結(jié)果較理想 不同碳源 氮源 無機(jī)鹽比例 直接影響著黑 搖床培養(yǎng) 溫度 菌絲生物量 平均值 表 搖床培養(yǎng)溫度試驗(yàn) T T k 注 不同小寫字母表示差異顯著 P w P 搖床培養(yǎng) 天數(shù) 菌絲生物量 平均值 表 搖床培養(yǎng)天數(shù)試驗(yàn) T T k 注 不同小寫字母表示差異顯著 P w P 搖床轉(zhuǎn)速 菌絲生物量 平均值 表 搖床轉(zhuǎn)速試驗(yàn) T k 注 不同小寫字母表示差異顯著 P w P 盛立柱等 黑木耳液體菌種培養(yǎng)基配方及培養(yǎng)條件優(yōu)化 木耳液體菌種的菌絲生物量 試驗(yàn)結(jié)果顯示 玉米 粉對黑木耳液體菌種菌絲生物量影響最大 其次是 豆粕 硫酸鎂 磷酸二氫鉀影響最小 正交試驗(yàn)結(jié) 果顯示適宜的培養(yǎng)基配比為 玉米粉 豆粕 硫酸鎂 磷酸二氫鉀 培養(yǎng)條件是黑木耳液體菌種制作的關(guān)鍵 不同 培養(yǎng)條件對黑木耳菌絲生物量的影響不同 培養(yǎng)溫 度 時(shí)對黑木耳液體菌種菌絲生物量影響最大 但各溫度試驗(yàn)處理對黑木耳菌絲生物量影響差異不 顯著 培養(yǎng) 和 的黑木耳液體菌種菌絲生物量 和培養(yǎng) 和 的黑木耳液體菌種菌絲生物量差 異顯著 較理想的培養(yǎng)天數(shù)為 搖床培養(yǎng) 轉(zhuǎn)速 時(shí) 黑木耳液體菌種菌絲生物量最 大 但試驗(yàn)設(shè)置的 個(gè)轉(zhuǎn)速處理對黑木耳液體菌種 菌絲生物量影響差異不顯著 液體菌種具有生產(chǎn)周期短 菌齡一致 菌種 純度高 省工 生產(chǎn)成本低等優(yōu)點(diǎn) 大大提升了 黑木耳生產(chǎn)效益 故黑木耳液體菌種生產(chǎn)技術(shù)越 來越受歡迎 試驗(yàn)對黑木耳液體菌種培養(yǎng)基配方 及培養(yǎng)條件進(jìn)行優(yōu)化試驗(yàn) 但培養(yǎng)條件對菌絲生 物學(xué)活性的影響機(jī)制還有待進(jìn)一步研究 參考文獻(xiàn) 陳青 黃國洋 魯長根 等 菌棒場功能定位與科學(xué)發(fā)展 對策研究 J 中國食用菌 李玉 中國黑木耳 長春 長春出版社 應(yīng)國華 何建芬 呂明亮 等 龍泉市黑木耳產(chǎn)業(yè)態(tài)勢與 相關(guān)意見 J 食藥用菌 葉曉菊 葉松梅 何建芬 等 應(yīng)用液體菌種栽培黑木耳 技術(shù) J 食用菌 李超 李紅 張敏 黑木耳液體培養(yǎng)基配方優(yōu)化 J 北方園 藝 王慶武 李秀梅 蘭玉菲 等 黑木耳液體菌種配方優(yōu)化 試驗(yàn) J 食用菌 陳青 食用菌產(chǎn)業(yè)發(fā)展趨勢和研究方向的探討 J 中國食 用菌 邵坤 外源激素對茶樹菇液體培養(yǎng)胞外酶活性影響的研 究 重慶 西南大學(xué) 劉啟燕 戚俊 周紅英 等 食用菌液體菌種工廠化生產(chǎn) 應(yīng)用現(xiàn)狀及發(fā)展淺析 J 食用菌 本文編輯 李丹丹 上接第 頁 二潮菇培養(yǎng) 天后又產(chǎn)出第二潮菇 工廠化管理 一般采收 潮菇 每包平均產(chǎn)量 生物 學(xué)效率 左右 4 采收保鮮 4 1 鮮品保鮮 當(dāng)白參菌子實(shí)體葉片平展時(shí)達(dá)到采收標(biāo)準(zhǔn) 用 采菇刀從子實(shí)體基部割下 清理菇根基料 按照銷 售要求 稱重裝盒包好保鮮膜 放入泡沫箱中 轉(zhuǎn) 入 冷庫 貨架期為 4 2 干品烘干 將白參菌按照級別分好類 采用烘干箱進(jìn)行烘 干 溫度升至 直至白參菌烘干為止 烘干后 使用塑料袋包裝 置于干燥無蟲的房間 5 小結(jié) 白參菌作為一種食藥兼具的珍稀食用菌類 在 我國云南省采食野生白參菌較多 由于其獨(dú)特的香 味和較高的藥用價(jià)值 目前已作為高檔的食用菌走 進(jìn)百姓的餐桌 新鮮的白參菌價(jià)格在市場批發(fā)價(jià) 為 元 k 元 k 不等 白參菌干品價(jià)格在 元 k 元 k 對于生產(chǎn)廠家而言 經(jīng)濟(jì)效益較 為可觀 隨著消費(fèi)者的認(rèn)可與青睞 目前白參菌市 場呈供小于求趨勢 工廠化生產(chǎn)的白參菌大小均勻 朵型好 分類標(biāo)準(zhǔn) 更利于白參菌在市場的流通與 推廣 通過對白參菌的液體菌種制作 裝袋配方 養(yǎng)菌 催蕾出菇 采收 包裝冷藏等方面進(jìn)行研究 對白參菌工廠化生產(chǎn)具有一定的指導(dǎo)意義 但是白 參菌配方的優(yōu)化 產(chǎn)量的提高 品質(zhì)的提升仍需進(jìn) 行下一步探索 參考文獻(xiàn) 李玉 李泰輝 楊祝良 等 中國大型菌物資源圖鑒 鄭州 中原農(nóng)民出版社 卯曉嵐 中國大型真菌 鄭州 河南科技出版社 羅信呂 陳士瑜 中國菇業(yè)大典 北京 清華大學(xué)出版 社 郭孟壁 人工培養(yǎng)裂褶菌營養(yǎng)成分分析研究 J 現(xiàn)代儀器 曾素芳 裂褶菌的培養(yǎng)研究 J 中國食用菌 朱傳進(jìn) 白參菌的生物學(xué)特性及適用栽培技術(shù) J 食藥用 菌 陳志敏 陸北路 白參菌特性與人工栽培技術(shù) J 食藥用 菌 本文編輯 周 汐 王寶印 白參菌工廠化栽培技術(shù)