中 中 國 國 瓜 瓜 菜 菜 2021 34 9 1 6 專題綜述 收 稿 日 期 2021 02 22 修 回 日 期 2021 03 01 基 金 項 目 西 藏 地 區(qū) 優(yōu) 質(zhì) 特 色 瓜 菜 新 品 種 選 育 及 示 范 推 廣 202004e11020004 作 者 簡 介 楊 中 周 男 高 級 農(nóng) 藝 師 主 要 從 事 瓜 菜 品 種 選 育 與 栽 培 研 究 E mail 282552662 2018 年 我 國 辣 甜 椒 Capsicum spp 常 年 播 種 面 積 在 200 萬 hm 2 約 占 世 界 辣 椒 播 種 面 積 的 40 在 蔬 菜 作 物 中 穩(wěn) 居 第 一 成 為 我 國 蔬 菜 第 一 大 產(chǎn) 業(yè) 1 3 病 毒 病 是 制 約 我 國 辣 甜 椒 生 產(chǎn) 的 一 類 重 要 病 害 目 前 世 界 上 報 道 能 夠 感 染 辣 椒 的 病 毒 有 60 余 種 4 5 我 國 報 道 的 種 類 在30 種 以 上 黃 瓜 花 葉 病 毒 Cucumber mosaic virus CMV 和 煙 草 花 葉 病 毒 Tobacco mosaic virus TMV 仍 是 危 害 辣 椒 的 最 主 要 病 害 但 是 近 些 年 辣 椒 輕 斑 駁 病 毒 Pepper mild mottle virus PMMoV 在 一 些 地 區(qū) 已 經(jīng) 成 為 了 一 種 普 遍 發(fā) 生 的 病 害 特 別 是 在 江 蘇 地 區(qū) 其 平 均 檢 出 率 高 達(dá)62 28 6 在 北 京 地 區(qū) 市 場 上 銷 售 的 商 品 種 子 陽 性 檢 出 率 達(dá)61 11 該 病 毒 不 但 可 以 通 過 汁 液 摩 擦 傳 播 而 且 還 可 以 通 過 種 子 傳 播 所 以 具 有 很 大 的 潛 在 傳 播 性 7 近 幾 年 國 內(nèi) 外 在PMMoV 分 布 與 寄 主 范 圍 檢 測 方 法 基 因 序 列 分 析 與 親 緣 關(guān) 系 研 究 抗 病 性 品 種 選 育 等 方 面 取 得 諸 多 重 要 進(jìn) 展 筆 者 著 重 對 該 病 毒 上 述 方 面 進(jìn) 行 了 總 結(jié) 提 出 存 在 的 問 題 和 發(fā) 展 方 向 以 期 為 今 后 辣 椒 輕 斑 駁 病 毒病的研究提供理論參考 1 PMMoV 危害性與分布 PMMoV 屬 于 帚 狀 病 毒 科 Virgaviridae 煙 草 花 葉 病 毒 屬 Tobamovirus 的 無 包 膜 正 單 鏈 RNA 病 毒 是 在 世 界 范 圍 內(nèi) 造 成 辣 椒 重 要 經(jīng) 濟(jì) 損 失 的 一 個 重 要 病 原 8 辣 椒 葉 片 在 被 侵 染 后 或 表 現(xiàn) 癥 狀 不 明 顯 或 出 現(xiàn) 褪 綠 斑 駁 和 花 葉 癥 狀 植 株 生 長 明 顯 變 緩 發(fā) 病 越 早 長 勢 受 影 響 越 大 果 實 被 侵 染 后 的 癥 狀 較 為 明 顯 表 現(xiàn) 為 果 小 果 面 有 褪 綠 斑 駁 凹 凸 斑 點 甚 至 出 現(xiàn) 畸 形 與 壞 死 現(xiàn) 象 PMMoV 可 隨 帶 病 的 辣 椒 進(jìn) 入 人 體 經(jīng) 過 消 化 排 出 人 體 后 仍 具 有 侵 染 活 性 9 PMMoV 最 早 于 1964 年 在 美 國 被 發(fā) 現(xiàn) 10 其 后 在 西 班 牙 德 國 澳 大 利 亞 阿 根 廷 匈 牙 利 荷 蘭 加 拿 大 英 國 保 加 利 亞 韓 國 越 南 印 辣 椒 輕 斑 駁 病 毒 研 究 的 回 顧 與 展 望 楊 中 周 1 鄧 竹 根 1 李 曼 1 2 戴 祖 云 1 2 1 安徽江淮園藝種業(yè)股份有限公司 合肥 230031 2 安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院 合肥 230036 摘 要 近 年 來 辣 椒 生 產(chǎn) 中 辣 椒 輕 斑 駁 病 毒 Peppermildmottlevirus PMMoV 危 害 日 趨 嚴(yán) 重 并 影 響 到 辣 椒 的 品 質(zhì) 和 產(chǎn) 量 綜 述 了 辣 椒 輕 斑 駁 病 毒 的 危 害 性 與 分 布 寄 主 范 圍 在 寄 主 組 織 中 的 分 布 與 傳 播 途 徑 基 因 組 結(jié) 構(gòu) 致 病 型 及 親 緣 關(guān) 系 檢 測 方 法 防 治 方 法 等 方 面 的 研 究 進(jìn) 展 并 對 存 在 的 相 關(guān) 問 題 進(jìn) 行 分 析 與 展 望 以 期 為 今 后 的PM MoV 防治與抗性品種選育提供借鑒和參考 關(guān)鍵詞 辣椒 辣椒輕斑駁病毒 寄主范圍 抗病育種 防治方法 中圖分類號 S641 3 文獻(xiàn)標(biāo)志碼 A 文章編號 1673 2871 2021 09 001 06 ReviewandprospectofresearchonPeppermildmottlevirus PMMoV YANGZhongzhou 1 DENGZhugen 1 LIMan 1 2 DAIZuyun 1 2 1 AnhuiJianghuaiHorticultureSeedsCo Ltd Hefei230031 Anhui China 2 CollegeofHorticulture AnhuiAgriculturalUniversity Hefei230036 Anhui China Abstract In recent years Pepper mild mottle virus PMMoV has become more and more serious in pepper production and affects pepper s quality and yield For this reason we summarize the harmfulness geographic distribution host range distributioninhosttissues transmission genomestructure pathotype phylogeneticrelationship detectionmethod preventionandcontrolofPMMoV Theprospectsandanalysisoftheexistingproblemsarealsodiscussedinordertopro videreferenceforthecontrolofPMMoVandbreedingofresistantvarietiesinthefuture Keywords Pepper Peppermildmottlevirus PMMoV Hostrange Resistancebreeding Preventionandcontrol 1 DOI 10 16861 ki zggc 2021 0226中 國 瓜 菜 第34 卷 專題綜述 度 巴 基 斯 坦 塞 爾 維 亞 意 大 利 土 耳 其 捷 克 日 本 等 國 均 有 報 道 并 對 一 些 地 區(qū) 的 辣 椒 生 產(chǎn) 造 成 嚴(yán) 重 的 經(jīng) 濟(jì) 損 失 11 20 PMMoV 于1994 年 在 我 國 新 疆 石 河 子 地 區(qū) 被 首 次 報 道 21 至 今 黑 龍 江 哈 爾 濱 22 四 川 汶 川 23 安 徽 和 縣 24 遼 寧 葫 蘆 島 25 26 遼 寧 鳳 城 27 青 海 海 東 28 湖 南 29 吉 林 九 臺 30 上 海 奉 賢 31 貴 州 綏 陽 8 新 疆 巴 州 32 北 京 33 山 東 壽 光 34 35 江 蘇 南 京 36 河 北 保 定 37 廣 西 38 廣 東 39 海 南 40 云 南 41 寧 夏 42 西 藏 6 等 地 區(qū) 已 有 該 病 毒 的 相 關(guān) 報 道 2 PMMoV 的寄主范圍 在 自 然 條 件 下 PMMoV 會 侵 染 辣 椒 因 此 辣 椒 也 首 次 被 報 道 為 PMMoV 系 統(tǒng) 侵 染 的 一 個 自 然 寄 主 以 往 認(rèn) 為PMMoV 的 主 要 寄 主 包 括 茄 科 藜 科 和 莧 科 植 物 會 對 其 造 成 局 部 或 系 統(tǒng) 侵 染 43 近 些 年 隨 著 全 國 對 蔬 菜 病 毒 病 的 調(diào) 查 和 診 斷 明 確 PMMoV 還 能 自 然 侵 染 茄 科 的 番 茄 葫 蘆 科 的 南 瓜 黃 瓜 西 葫 蘆 甜 瓜 豆 科 的 豇 豆 等 作 物 而 且 在 江 蘇 葫 蘆 科 蔬 菜 樣 品 中 檢 出 率 為83 33 并 與 其 他 病 毒 發(fā) 生 復(fù) 合 侵 染 的 頻 率 高 且 范 圍 廣 未 發(fā) 現(xiàn) PM MoV 自 然 侵 染 十 字 花 科 的 蘿 卜 青 菜 大 白 菜 甘 藍(lán) 油 菜 花 椰 菜 牛 皮 菜 芥 菜 青 花 菜 白 菜 薹 菜 薹 和 豆 科 菜 豆 大 豆 的 現(xiàn) 象 6 44 45 在 中 藥 材 方 面 PMMoV 能 夠 侵 染 延 齡 草 科 的 滇 重 樓 Paris poly phyllavar yunnanensis 使 其 出 現(xiàn) 花 葉 斑 駁 和 褪 綠 癥狀 46 3 PMMoV 在 寄 主 組 織 中 的 分 布 及 傳 播途徑 在 侵 染 辣 椒 以 后 PMMoV 在 辣 椒 的 葉 片 花 瓣 花 藥 花 粉 粒 果 實 種 子 根 系 等 組 織 中 廣 泛 分 布 47 然 而 不 同 的 組 織 器 官 間 含 量 有 差 異 對 同 一 個 組 織 器 官 來 說 又 存 在 分 布 的 不 均 一 性 比 如 葉 片 組 織 中 的 PMMoV 含 量 明 顯 高 于 種 子 中 的 含 量 在 葉 肉 細(xì) 胞 中 的 含 量 明 顯 高 于 葉 脈 且 集 中 分 布 于 葉 肉 細(xì) 胞 的 柵 欄 組 織 中 其 次 是 海 綿 組 織 表 皮 組 織 中 僅 有 少 量 分 布 在 種 子 中 又 主 要 集 中 在 種 皮 其 次 是 胚 乳 靠 近 種 皮 的 部 分 而 胚 中 無 分 布 48 49 PMMoV 雖 在 植 物 間 不 易 介 體 傳 播 但 鑒 于 其 在 植 物 體 中 的 分 布 情 況 該 病 毒 很 容 易 通 過 種 傳 和 汁 液 摩 擦 傳 播 帶 毒 的 種 子 以 及 被 感 染 的 植 株 是 重 要 的 傳 染 源 其 中 種 子 和 花 粉 帶 毒 是 其 遠(yuǎn) 距 離 傳播的主要途徑 48 50 4 PMMoV 的基因組結(jié)構(gòu) PMMoV 病 毒 粒 體 呈 直 桿 狀 基 因 組 長6356bp 共 有4 個 開 放 閱 讀 框 Openreadingframes ORFs 編 碼4 個 蛋 白 質(zhì) ORF1 70 3423nt 編 碼1 個 全 長 1117 aa 分 子 質(zhì) 量 為 126 kDa 的 蛋 白 質(zhì) 包 含 甲 基 轉(zhuǎn) 移 酶 和 RNA 螺 旋 酶 區(qū) ORF2 70 4908 nt 編 碼 1 個 全 長1613aa 分 子 質(zhì) 量 為183kDa 的 蛋 白 質(zhì) 包 括 RNA 復(fù) 制 酶 區(qū) ORF3 4909 5682 nt 編 碼 一 個 257 aa 分 子 質(zhì) 量 約 為 28 kDa 與 病 毒 移 動 相 關(guān) 的 運 動 蛋 白 ORF4 5685 6158nt 編 碼1 個157aa 分 子 質(zhì) 量 約 為17kDa 用 于 保 護(hù) 病 毒 核 酸 且 參 與 侵 染 的 外 殼 蛋 白 ORF1 閱 讀 框 終 止 于 琥 珀 密 碼 子 UAG 約 有 10 的 概 率 可 通 讀 ORF2 ORF1 和 ORF2 所 編 碼 的 蛋 白 質(zhì) 與 病 毒 RNA 復(fù) 制 以 及 維 管 束 運 動 有 關(guān) PMMoV 的 3 末 端 和 煙 草 花 葉 病 毒 屬 的 其 他 成 員 一 樣 具 有 類 似 t RNA 狀 的 二 級 結(jié) 構(gòu) 29 46 51 5 PMMoV 的 致 病 型 及 各 分 離 物 之 間 的親緣關(guān)系 L 1 L 2 L 3 L 4 四 個L 系 列 等 位 基 因 是 辣 甜 椒 抗 煙 草 花 葉 病 毒 屬 病 毒 的 主 要 抗 性 基 因 52 根 據(jù) 煙 草 花 葉 病 毒 屬 病 毒 對 四 種 L 抗 性 基 因 的 致 病 性 可 將 該 屬 病 毒 劃 分 成P0 P1 P1 2 P1 2 3 P1 2 3 4 五 種 致 病 基 因 型 目 前 國 際 上 將 發(fā) 現(xiàn) 的PMMoV 致 病 基 因 型 分 為P1 2 P1 2 3 P1 2 3 4 三 種 而 中 國 大 陸 遼 寧 北 京 山 東 青 島 河 北 保 定 新 疆 等 地 的 分 離 物 都 屬 于P1 2 致 病 基 因 型 而 中 國 臺 灣 的 分 離 物 屬 于P1 2 3 致 病 基 因 型 從 臺 灣 進(jìn) 口 的 種 子 檢 測 的 結(jié) 果 也 證 實 了 這 點 32 51 53 54 P1 2 致 病 型 病 毒 株 系 能 夠 系 統(tǒng) 侵 染 帶 有L 1 L 2 抗 性 基 因 的 辣 甜 椒 而 帶 有L 3 L 4 抗 性 基 因 的 辣 甜 椒 對 該 病 毒 株 系 表 現(xiàn) 有 抗 性 P1 2 3 致 病 型 病 毒 株 系 能 夠 系 統(tǒng) 侵 染 帶 有 L 1 L 2 L 3 抗 性 基 因 的 辣 甜 椒 帶 有L 4 抗 性 基 因 的 辣 甜 椒 對 該 病 毒株 系表 現(xiàn)有 抗性 P1 2 3 4 致病 型病 毒株 系能 夠攻 克 L 4 基 因 抗 性 從 進(jìn) 化 關(guān) 系 來 看 P1 2 3 與 P1 2 3 4 分 別 是由P1 2 和P1 2 3 正向選擇進(jìn)化而來 近 幾 年 隨 著 越 來 越 多 分 離 物 的 全 基 因 序 列 在 GenBank 上 登 錄 更 多 的 基 礎(chǔ) 信 息 為 人 們 所 知 研 究 者 們 開 始 對 這 些 序 列 進(jìn) 行 同 源 性 分 析 和 系 統(tǒng) 進(jìn) 化 分 析 以 期 探 索 各 分 離 物 之 間 的 親 緣 關(guān) 系 解 決 更 深 層 次 的 進(jìn) 化 問 題 李 麗 麗 等 22 的 研 究 結(jié) 果 顯 示 PMMoV 中 國 分 離 物Hrb 與GenBank 中 已 報 道 2第9 期 等 辣椒輕斑駁病毒研究的回顧與展望 專題綜述 的 其 他 辣 椒 輕 斑 駁 病 毒 基 因 組 序 列 的 同 源 性 為 94 0 99 6 基 于 辣 椒 輕 斑 駁 病 毒 基 因 組 運 動 蛋 白 及 外 殼 蛋 白 序 列 的 系 統(tǒng) 進(jìn) 化 分 析 結(jié) 果 顯 示 Hrb 與 日 本 分 離 物 PMMoV J C 1421 Pa18 TPO 2 19 親 緣 關(guān) 系 較 近 與 西 班 牙 分 離 物 PM MoV Ia 親 緣 關(guān) 系 較 遠(yuǎn) 楊 林 毅 等 46 將 中 國 云 南 曲 靖 分 離 物 PMMoV QJ 與 10 個 PMMoV 分 離 物 基 因 全 序 列 進(jìn) 行 比 對 分 析 結(jié) 果 顯 示 同 源 性 為 99 42 99 81 同 源 性 較 高 PMMoV QJ 與 中 國 遼 寧 葫 蘆 島 分 離 物 PMMoV Huludao 2 個 韓 國 分 離 物 PMMoV LS 和 PMMoV RP 的 親 緣 關(guān) 系 較 近 韓 帥 等 23 的 研 究 結(jié) 果 顯 示 中 國 四 川 汶 川 分 離 物PMMoV WC 與 中 國 北 京 分 離 物PMMoV CN 親 緣 關(guān) 系 較 近 而 與 西 班 牙 分 離 物PMMoV Ia 親 緣 關(guān) 系 較 遠(yuǎn) 嚴(yán) 丹 侃 等 24 將 安 徽 和 縣 的 分 離 物 PM MoV AH 與12 個 國 內(nèi) 外PMMoV 分 離 物 的 外 殼 蛋 白 基 因 序 列 進(jìn) 行 系 統(tǒng) 發(fā) 育 分 析 發(fā) 現(xiàn) PMMoV AH 與 包 括 PMMoV CN 在 內(nèi) 的 9 份 亞 洲 分 離 物 的 親 緣 關(guān) 系 較 近 而 與 西 班 牙 分 離 物 PMMoV Ia 意 大 利 分 離 物PMMoV I 和 以 色 列 分 離 物PMMoV Is 親 緣 關(guān) 系 較 遠(yuǎn) 劉 湘 寧 等 29 通 過 一 致 性 分 析 發(fā) 現(xiàn) 湖 南 辣 椒 分 離 物 PMMoV HN1 與 17 種 PMMoV 病 毒 分 離 物 的 一 致 性 在94 2 99 7 之 間 系 統(tǒng) 進(jìn) 化 分 析 顯 示 PMMoV HN1 與 PMMoV CN 的 親 緣 關(guān) 系 最 近 與 PMMoV Ia 和 韓 國 分 離 物 PMMoV P3 親 緣 關(guān) 系 較 遠(yuǎn) 竹 懷 婷 等 27 的 研 究 表 明 遼 寧 鳳 城 分 離 物 的PMMoV FC 與9 個PMMoV 分 離 物 序 列 同 源 性 為 94 4 99 7 同 源 性 很 高 PMMoV FC 與 6 個 來 自 中 國 日 本 韓 國 和 美 洲 的 分 離 物 親 緣 關(guān) 系 較 近 而 與 PMMoV Ia 和 PMMoV P3 相 對 較 遠(yuǎn) 李 曉 冬 等 26 分 析 了 遼 寧 分 離 物PMMoV LN 與 13 個 國 內(nèi) 外 PMMoV 分 離 物 的 同 源 性 結(jié) 果 顯 示 其 同 源 性 為 94 100 系 統(tǒng) 進(jìn) 化 分 析 表 明 PM MoV LN 和10 份 來 自 于 亞 洲 的 分 離 物 親 緣 關(guān) 系 密 切 且 與 國 內(nèi) 分 離 物 具 有 相 同 的 進(jìn) 化 祖 先 而 與 PMMoV I PMMoV Is PMMoV Ia 親 緣 關(guān) 系 較 遠(yuǎn) 王 少 立 等 34 認(rèn) 為 中 國 山 東 分 離 物 SD60 與 中 國 貴 州 分 離 物 KC571248 的 相 似 性 最 高 且 親 緣 關(guān) 系 最 近 而 與 以 色 列 分 離 物 EF422083 土 耳 其 分 離 物 HE963028 和 西 班 牙 分 離 物HG514455 等 親 緣 關(guān) 系 較 遠(yuǎn) 總 體 而 言 中 國 分 離 物 之 間 普 遍 存 在 較 高 的 同 源 性 且 與 許 多 亞 洲 美 洲 分 離 物 之 間 的 親 緣 關(guān) 系 較 近 而 與 西 班 牙 意 大 利 以 色 列 的 分 離 物 之 間 的 親 緣 關(guān) 系 較 遠(yuǎn) 6 PMMoV 的檢測方法 國 內(nèi) 外 對PMMoV 檢 測 的 方 法 有 生 物 學(xué) 方 法 電 鏡 技 術(shù) 血 清 學(xué) 測 定 法 酶 聯(lián) 免 疫 吸 附 測 定 和 以 核 酸 為 基 礎(chǔ) 的 分 子 生 物 學(xué) 測 定 法 RT PCR 和 實 時 熒 光 RT PCR 法 目 前 以 酶 聯(lián) 免 疫 吸 附 測 定 法 ELISA 和RT PCR 法最為常用 通 過 鑒 定 寄 主 反 應(yīng) 與 范 圍 交 叉 保 護(hù) 反 應(yīng) 和 傳 毒 方 式 進(jìn) 行 植 物 病 毒 病 診 斷 的 生 物 學(xué) 方 法 是 植 物 病 毒 檢 測 的 傳 統(tǒng) 技 術(shù) 該 技 術(shù) 是 其 他 方 法 的 重 要 基 礎(chǔ) 具 有 直 觀 的 特 點 曾 被 廣 泛 應(yīng) 用 21 然 而 該 技 術(shù) 具 有 需 要 隔 離 溫 室 種 植 大 量 鑒 別 寄 主 檢 測 樣 品 數(shù) 量 有 限 耗 時 長 受 環(huán) 境 和 季 節(jié) 影 響 較 大 等 劣 勢 已 經(jīng) 無 法 滿 足 當(dāng) 前 大 批 量 的 快 速 診 斷 和 田 間 檢 測需求 結(jié) 合 超 薄 切 片 負(fù) 染 色 和 血 清 學(xué) 電 鏡 技 術(shù) 可 直 觀 地 觀 察 病 毒 粒 體 的 形 態(tài) 結(jié) 構(gòu) 和 寄 主 細(xì) 胞 的 結(jié) 構(gòu) 變 化 21 特 別 是 結(jié) 合 血 清 學(xué) 技 術(shù) 之 后 電 鏡 技 術(shù) 更 加 靈 敏 成 為 植 物 病 毒 研 究 的 一 個 重 要 手 段 然 而 該 項 技 術(shù) 需 要 人 員 具 有 較 強 的 專 業(yè) 知 識 背 景 且 設(shè) 備 昂 貴 在 實 際 檢 測 中 使 用 頻 率 也 相 較 ELISA 和 RT PCR 低 因 此 在 實 際 大 批 量 病 毒 檢 測 中 運 用 較 少 采 用 固 相 吸 附 將 免 疫 反 應(yīng) 和 酶 高 效 催 化 反 應(yīng) 有 機 結(jié) 合 的ELISA 具 有 操 作 簡 單 檢 測 時 間 短 靈 敏 性 高 特 異 性 強 等 特 點 目 前 在 蔬 菜 種 苗 的 PM MoV 檢 測 中 發(fā) 揮 重 要 作 用 8 27 32 46 54 在 野 外 工 作 中 也 可 使 用PMMoV 膠 體 金 免 疫 層 析 試 紙 條 對 樣 本進(jìn)行快速檢測 24 RT PCR 是 以PCR 為 基 礎(chǔ) 的 衍 生 技 術(shù) 該 項 技 術(shù) 相 較ELISA 具 有 更 高 的 靈 敏 度 7 更 強 的 特 異 性 同 時 可 以 突 破 血 清 學(xué) 方 法 的 局 限 能 夠 鑒 定 同 種 病 毒 的 不 同 株 系 目 前 該 項 技 術(shù) 已 被 大 量 地 運 用 到 PMMoV 檢 測 中 22 28 30 32 43 46 54 郭 京 澤 等 55 所 建 立 PMMoV 實 時 熒 光 PCR 檢 測 方 法 靈 敏 度 是 DAS ELISA 法 的100 倍 且 檢 測 簡 便 快 速 能 夠 很 好地滿足種苗快速診斷和進(jìn)出口檢驗檢疫需求 7 PMMoV 的防治方法 PMMoV 具 有 種 傳 特 性 帶 毒 種 子 是 病 毒 長 距 離 傳 播 的 重 要 途 徑 另 外 PMMoV 可 隨 辣 椒 制 品 進(jìn) 入 人 體 體 內(nèi) 經(jīng) 消 化 排 出 后 仍 具 有 侵 染 活 性 9 56 鑒 于 此 加 強 種 子 及 辣 椒 制 品 的 檢 疫 是 防 治 其 快 速 蔓 延 的 重 要 途 徑 開 展 抗 病 育 種 是 防 治 該 病 毒 的 最 有 效 方 式 之 一 L 系 列 等 位 基 因 L 1 L 2 楊中周 3中 國 瓜 菜 第34 卷 專題綜述 L 3 L 4 是 抗 煙 草 花 葉 病 毒 屬 Tobamovirus 的 主 要 抗 性 基 因 52 L 3 和 L 4 基 因 對 國 內(nèi) 的 PMMoV 致 病 型 P1 2 具有 抗性 已在 國內(nèi) 外辣 甜 椒抗 煙草 花葉 病毒 屬 育 種 上 得 到 應(yīng) 用 Hiroshi 等 57 發(fā) 現(xiàn)WA31 1500S 與L 4 緊 密 連 鎖 遺 傳 距 離 在1 5cM 以 內(nèi) 該 標(biāo) 記 可 以 用 于 抗 性 資 源 的 篩 選 張 寶 璽 等 41 58 59 構(gòu) 建 了 與 L 3 L 4 等 抗 性 性 狀 緊 密 連 鎖 的 分 子 標(biāo) 記 并 通 過 回 交 轉(zhuǎn) 育 結(jié) 合 分 子 標(biāo) 記 輔 助 選 擇 選 育 出 含 有L 3 抗 性 的 甜 椒 品 種 并 將 L 4 基 因 也 轉(zhuǎn) 育 到 多 份 自 交 系 材 料 中 以期望解決商業(yè)種植中的抗病問題 此 外 常 規(guī) 種 子 及 土 壤 消 毒 處 理 也 是 有 效 的 保 護(hù) 措 施 隨 著 溴 甲 烷 MeBr 用 于 包 括 PMMoV 在 內(nèi) 的 土 傳 病 毒 病 熏 蒸 消 毒 的 方 法 被 禁 止 一 些 新 的 方 法 被 挖 掘 出 來 如 Jarret 等 60 的 研 究 表 明 用 10 磷 酸 三 鈉 TSP 室 溫 下 處 理 PMMoV 感 染 的 辣 椒 種 子2 5h 可 以 鈍 化 病 毒 用10 TSP 處 理24h 可 使 2 3 的 供 試 材 料 去 除 PMMoV 由 于 PMMoV 能 侵 染 藜 科 莧 科 植 物 而 在 藜 科 和 莧 科 植 物 中 多 數(shù) 成 員 都 是 田 間 雜 草 故 而 很 可 能 田 間 雜 草 上 也 存 在 著PMMoV 因 此 對 田 間 雜 草 連 同 田 間 感 病 作 物 進(jìn) 行 清 理 消 毒 顯 得 尤 為 重 要 Aguilar 等 61 的 研 究 顯 示 在 西 班 牙 東 南 部 堆 肥 中 的 高 溫 范 圍 在61 9 73 8 長 時 間 的 高 溫 使 得 病 毒 和 真 菌 不 能 存 活 使 用 PMMoV 感 染 的 植 物 殘 體 作 為 有 機 改 良 劑 的 堆 肥 似 乎 沒 有 將 病 原 體 重 新 引 入 土 壤 的 風(fēng) 險 適 合 通 過 堆 肥 從 被 感 染 的 作 物 殘 體 中 充 分 清 除PMMoV 病原體 除 以 上 方 法 也 可 以 通 過 農(nóng) 事 操 作 中 的 一 些 措 施 來 減 少 PMMoV 感 染 的 概 率 巨 大 芽 孢 桿 菌 Bacillusmegaterium 和 皮 氏 羅 爾 斯 通 氏 菌 Ralsto nia pickettii 的 混 懸 液 浸 根 能 有 效 地 抑 制 土 傳 PM MoV 病 害 62 食 油 假 單 胞 菌 Pseudomonas oleov orans 菌 株KBPF 004 對 煙 草 病 毒 的 機 械 傳 播 具 有 抗 病 毒 活 性 63 Oka 等 64 發(fā) 現(xiàn) 商 業(yè) 纖 維 素 酶 對 植 物 PMMoV 感 染 有 很 強 的 抑 制 作 用 用 纖 維 素 酶 溶 液 對 甜 椒 葉 片 進(jìn) 行 預(yù) 處 理 可 大 大 減 少PMMoV 感 染 植 株 的 數(shù) 量 注 重 對 農(nóng) 事 操 作 的 機 械 器 具 的 消 毒 適 當(dāng) 減 少 移 栽 時 的 根 部 受 損 和 采 收 時 的 植 株 受 傷 能 夠 明 顯 降 低 病 毒 傳 播 概 率 65 Rie 等 66 利 用 減 毒PMMoV 分 離 物 的 交 叉 保 護(hù) 作 用 提 高 已 接 種 辣椒植株的抗性 獲得了較好的經(jīng)濟(jì)效益 8 問題與展望 隨 著 種 子 貿(mào) 易 和 種 質(zhì) 資 源 交 流 的 日 益 頻 繁 PMMoV 已 經(jīng) 成 為 一 個 世 界 性 病 害 嚴(yán) 重 威 脅 著 辣 椒 的 生 產(chǎn) 在 國 內(nèi) 其 分 布 范 圍 也 在 逐 年 擴(kuò) 大 在 一 些 地 區(qū) 已 上 升 為 主 要 病 毒 種 類 相 關(guān) 寄 主 越 來 越 多 的 被 報 道 出 來 之 前 認(rèn) 為 不 會 被 感 染 的 一 些 作 物 現(xiàn) 在 也 成 為 了 它 的 寄 主 如 番 茄 和 葫 蘆 科 的 南 瓜 西 葫 蘆 黃 瓜 甜 瓜 等 目 前 中 國 大 陸 的 致 病 型 是 P1 2 而 從 中 國 臺 灣 進(jìn) 口 的 種 子 里 檢 測 到 的 致 病 型 是P1 2 3 GenBank 中 更 能 查 詢 到 西 班 牙 意 大 利 以 色 列 的P1 2 3 致 病 型 和 以 色 列 的P1 2 3 4 致 病 型 鑒 于 此 應(yīng) 加 強 種 苗 的 檢 測 與 檢 疫 工 作 將 PMMoV 作 為 檢 疫 對 象 列 入 進(jìn) 境 植 物 檢 疫 性 有 害 生 物 名 錄 控 制 好 侵 染 源 頭 避 免 致 病 性 更 強 的 病 毒 擴(kuò) 散 蔓延 目 前 對 于 病 毒 病 最 常 用 的 種 子 消 毒 方 法 是 磷 酸三鈉 TSP 法 然而用TSP 處理種子 只能鈍化病 毒 不 能 消 除 病 毒 的 侵 染 性 長 時 間 的TSP 處 理 雖 可 使 部 分 種 子 去 除 PMMoV 卻 降 低 了 辣 椒 種 子 的 發(fā) 芽 率 顯 著 增 加 異 常 苗 數(shù) 量 60 當(dāng) 前 急 需 一 套 既 能 有 效 消 除 PMMoV 侵 染 能 力 又 不 至 于 明 顯 降 低 種 子 發(fā) 芽 勢 和 發(fā) 芽 率 的 消 毒 方 法 為 種 子 的 長 距 離 調(diào)運保駕護(hù)航 選 育 抗 病 品 種 無 疑 是 最 為 高 效 經(jīng) 濟(jì) 綠 色 環(huán) 保 便 于 推 廣 的 對 抗 病 毒 病 的 手 段 近 些 年 無 論 是 國 外 還 是 國 內(nèi) 辣 椒 抗PMMoV 的 研 究 從 病 害 檢 測 資 源 引 進(jìn) 標(biāo) 記 開 發(fā) 新 品 種 選 育 都 有 了 長 足 發(fā) 展 育 種 家 通 過 輪 回 選 擇 和 分 子 標(biāo) 記 輔 助 選 擇 培 育 出 一 批 含 有L 3 抗 性 基 因 的 商 業(yè) 品 種 L 3 抗 性 基 因 雖 然 對 P1 2 致 病 型 有 抗 性 但 因 有 抗 性 基 因 的 壓 力 P1 2 致 病 型 會 發(fā) 生 基 因 突 變 攻 克L 3 抗 性 使 得 原 先 的 抗 病 品 種 重 新 感 病 接 著 育 種 家 會 選 擇 利 用 抗 性 更 強 的L 4 抗 性 基 因 選 育 新 品 種 如 此 交 替 進(jìn) 行 如 何 使 品 種 獲 得 持 久 的 抗 病 性 是 需 要 育 種 家 認(rèn) 真 考 慮 的 問 題 一 方 面 需 要 尋 找 鑒 定 出 有 別 于 L 系 列 等 位 基 因 的 新 抗 源 拓 寬 遺 傳 背 景 并 加 以 利 用 另 一 方 面 可 以 將 更 多 不 同 背 景 的 抗 性 基 因 聚 到 一 個 品 種 中 使 得 病 原 株 系 很 難 通 過 一 個 位 點 的 突 變而攻克品種抗性 近 些 年 隨 著 國 內(nèi) 外 越 來 越 多 的PMMoV 分 離 物 的 基 因 組 全 序 列 被 公 布 開 展 分 子 變 異 特 點 等 基 礎(chǔ) 性 的 研 究 工 作 可 為 今 后 研 究 病 毒 擴(kuò) 散 和 有 效 防 控提供理論指 導(dǎo) 參考文獻(xiàn) 1 鄭 井 元 李 雪 峰 周 書 棟 等 2017 年 度 辣 椒 科 學(xué) 研 究 進(jìn) 展 J 中國蔬菜 2018 5 9 15 4第9 期 等 辣椒輕斑駁病毒研究的回顧與展望 專題綜述 2 王 立 浩 馬 艷 青 張 寶 璽 我 國 辣 椒 品 種 市 場 需 求 與 育 種 趨 勢 J 中國蔬菜 2019 8 1 4 3 楊 中 周 我 國 辣 椒 品 種 選 育 進(jìn) 展 與 展 望 J 中 國 瓜 菜 2017 30 5 1 6 4 MOURY B VERDIN E Viruses of pepper crops in the Medi terranean basin a remarkable stasis M Advances in Virus Research 2012 84 127 162 5 KENYON L TSAIWS SHIH S L et al Emergence and diver sity of begomoviruses infecting solanaceous crops in East and SoutheastAsia J VirusResearch 2014 186 104 113 6 劉 勇 李 凡 李 月 月 等 侵 染 我 國 主 要 蔬 菜 作 物 的 病 毒 種 類 分布與發(fā)生趨勢 J 中國農(nóng)業(yè)科學(xué) 2019 52 2 239 261 7 WANG Y LI X LIU Y et al Development of a simple and effective method for specific detection of Pepper mild mottle virus J ActaVirologica 2009 53 1 21 27 8 鄭 興 華 洪 鯤 楊 立 昌 等 貴 州 辣 椒 輕 斑 駁 病 毒 分 離 物 的 分 子 鑒定 J 貴州農(nóng)業(yè)科學(xué) 2013 41 5 30 32 9 COLSON P RICHET H DESNUES C et al Pepper mild mottle virus a plant virus associated with specific immune responses fever abdominal pains and pruritus in humans J PlosOne 2010 5 3 10041 10 GREENLEAF W H COOK AA HEYN A N J Resistance to Tobacco mosaic virus in Capsicum with reference to the Sam sunlatentstrain J Phytopathology 1964 54 11 1367 1371 11 KWON S J CHO I S YOON J Y et al Incidence and occur rencepatternofvirusesonpeppersgrowinginfieldsinKorea J ResearchinPlantDisease 2018 24 1 66 74 12 SYMONDSEM SINIGALLIANOC GIDLEYM etal Faecal pollution along the southeastern coast of Florida and insight into the use of Pepper mild mottle virus as an indicator J Journal of appliedmicrobiology 2016 121 5 1469 1481 13 SHARMA P N PATIYAL K RIALCH N et al Association of virus complex with Capsicum under protected cultivation in himachal pradesh and implications in their management J HimachalJournalofAgriculturalResearch 2016 42 1 47 51 14 AHMAD A TIBERINI A ASHFAQ M et al First report of Pepper mild mottle virus infecting chilli pepper in Pakistan J NewDiseaseReports 2015 32 1 31 15 MILOSEVIC D STANKOVIC I BULAJIC A et al Detection and molecular characterization of Pepper mild mottle virus in Serbia J Genetika 2015 47 2 651 663 16 CRESCENZI A VIGGIANO A FANIGLIULO A Resistance breaking Tomato spotted wilt virus isolates on resistant pepper varieties in Italy J Communications in Agricultural and AppliedBiologicalSciences 2013 78 3 609 612 17 BEHCETK HAKAN F TOUFIC E Detection and molecular characterization of Pepper mild mottle virus from Turkey J JournalofPhytopathology 2013 161 6 432 438 18 SVOBODAJ SVOBODOVA LEISOVAL Occurrenceofviruses on pepper plantations in the Czech Republic Short communica tion J HorticulturalScience 2012 39 3