37 5 1041 1049 中國生物防治學報 Chinese Journal of Biological Control 2021 年 10 月 收稿日期 2021 01 06 基金項目 甘肅省科技重大專項 18ZD2NA010 蘭州市科技局項目 2018 4 78 甘肅省農(nóng)牧廳項目 GNSW 2016 25 甘肅農(nóng)業(yè)大學學 科建設(shè)基金項目 GAU XKJS 2018 155 作者簡介 姜玉玲 碩士研究生 E mail 1301034480 通信作者 博士 教授 E mail liangql DOI 10 16409 ki 2095 039x 2021 06 002 幾種生物農(nóng)藥及其混配劑對蘭州百合貯存期 鱗莖腐爛病防治作用 姜玉玲 梁巧蘭 魏列新 孟秀鵬 藺 珂 岳 陽 甘肅農(nóng)業(yè)大學植物保護學院 甘肅省農(nóng)作物病蟲害生物防治工程實驗室 蘭州 730070 摘要 為了篩選出防治蘭州百合鱗莖腐爛病菌的高效低毒生物殺菌劑 延緩生產(chǎn)中病原菌對藥劑的抗性 采用生長速率法測定了幾種生物農(nóng)藥及其混配劑對尖孢鐮孢菌 Fusarium oxysporum 的抑菌率 活性及共毒 系數(shù) 結(jié)果表明 6 種生物農(nóng)藥對尖孢鐮孢菌抑菌率均在 69 以上 且活性從大到小依次為多粘類芽胞桿菌 綠色木霉 申嗪霉素 哈茨木霉 丁子香酚 香芹酚 獲得 4 種具有增效作用的混配藥劑 分別為多 丁 9 1 多 丁 8 2 多 百 8 2 和丁 百 4 6 其共毒系數(shù)分別為 347 88 129 73 440 60 和 641 66 這 4 種 混配劑對尖孢鐮孢菌引起的蘭州百合鱗莖腐爛病的防效均顯著高于單劑的防效 較單劑防效提高了 5 88 57 89 且在發(fā)病前 后施藥 混配劑及單劑的保護作用防治效果均高于治療作用防治效果 關(guān) 鍵 詞 百合 尖孢鐮孢菌 生物殺菌劑 活性 增效作用 防治 中圖分類號 S476 文獻識別碼 A 文章編號 1005 9261 2021 05 1041 09 Control Effect of Several Biological Fungicides and Their Mixtures on the Bulb Rot of Lanzhou Lily During Storage JIANG Yuling LIANG Qiaolan WEI Liexin MENG Xiupeng LIN Ke YUE Yang Biocontrol Engineering Laboratory of Crop Diseases and Pests of Gansu Province College of Plant Protection Gansu Agricultural University Lanzhou 730070 China Abstract In order to screen out biological fungicides with high efficiency and low toxicity against Lanzhou lily bulb rot disease and alleviate the resistance of pathogen to pesticides in production inhibition rate activity and co toxicity coefficient of several biological fungicides and their mixtures to Fusarim oxysporum were determined by the growth rate method The results showed that the inhibition rates of the six biological fungicides against F oxysporum were all above 69 and the values of EC 50 in descending order was Paenibacillus polymyxa Trichoderma viride phenazine 1 carboxylic acid Trichoderma harzianum eugenol and carvacrol Four kinds of mixtures agents with synergistic effects were obtained namely Paenibacillus polymyxa with eugenol 9 1 Paenibacillus polymyxa with eugenol 8 2 Paenibacillus polymyxa with chlorothalonil 8 2 and eugenol with chlorothalonil 4 6 and their co toxicity coefficients were 347 88 129 73 440 60 and 641 66 respectively Compared with the single agent control effects of these four kinds of mixtures to Lanzhou lily bulb rot disease increased by 5 88 57 89 The protective effects of mixture and single agents were higher than the treatment effects Key words lily Fusarium oxysporum biological fungicide virulence synergistic effect control 1042 中 國 生 物 防 治 學 報 第 37 卷 蘭州百合 Lilium davidii Duch 是百合科百合屬多年生草本球根植物 是全國唯一食用性甜百合 1 3 具 有較高的食用和藥用價值 由于其轄域分布 種植結(jié)構(gòu)單一化 復種指數(shù)大 重茬現(xiàn)象普遍等原因 造成 百合病害發(fā)生日益嚴重 4 5 其中 由尖孢鐮孢菌引起的百合鱗莖腐爛病是百合生產(chǎn)栽培和貯存期發(fā)生嚴重 的病害之一 造成植株枯萎 鱗莖腐爛 6 田間發(fā)病率高達 21 50 30 60 鱗莖軟化腐爛 平均感染率 在 50 以上 嚴重時感染率可達 100 如果將發(fā)病鱗莖作為種球播種會影響其發(fā)芽率 造成缺苗斷垅 影響百合的生產(chǎn) 在甘肅省定西市臨洮縣百合種植基地發(fā)現(xiàn)百合鱗莖腐爛病 從帶病鱗片上分離純化獲得 了具有強致病性鱗莖腐爛病菌 經(jīng)致病性測定 形態(tài)特征觀察及 rDNA ITS 序列分析將其鑒定為尖孢鐮孢 菌 F oxysporum GenBank 登錄號 MT824577 1 目前 多種化學藥劑可防治尖孢鐮孢菌引起的植物枯萎病 7 其中 多菌靈 代森錳鋅 百菌清 福 美雙 苯醚甲環(huán)唑 己唑醇 噁霉靈 烯唑醇 氟硅唑 咯菌腈等藥劑對百合枯萎病病原菌尖孢鐮孢菌表 現(xiàn)出較高的活性和防效 8 16 代森錳鋅 甲基托布津 多菌靈 代森錳鋅和多菌靈 甲基托布津 多菌靈 福 美雙 綠精靈和多菌靈 福美雙 21 過氧乙酸等化學農(nóng)藥復配劑均對百合枯萎病防效較好 16 17 但是化學 農(nóng)藥由于殘留污染及病原菌易產(chǎn)生抗藥性等問題 限制了其在百合病害防治中的應(yīng)用 18 篩選生物藥劑有 效防治百合病害已成為發(fā)展百合產(chǎn)業(yè) 提高百合品質(zhì)的有效舉措 據(jù)報道 尖孢鐮孢菌引起的植物枯萎病 常見的生防藥劑主要包括生防真菌 生防細菌 植物源和放線菌等 7 尖孢鐮孢菌非致病性菌株如 Fo47 和 CS 20 毛殼菌屬 叢生菌根 AM 芽胞桿菌屬 Bacillus spp 19 22 等生防真菌 枯草芽胞桿菌 Bacillus subtilis 和解淀粉芽胞桿菌 Bacillus amyloliquefaciens 等生防細菌 23 24 大蒜鱗莖粗提液 紫莖澤蘭提取液及 其與沼液混合液等植物源農(nóng)藥 23 25 放線菌發(fā)酵液 24 及申嗪霉素 中生菌素等抗生素類殺菌劑均可有效防 治尖孢鐮孢菌引起的百合枯萎病 生物農(nóng)藥由于防效慢 受環(huán)境因素限制等問題 影響其在生產(chǎn)實際中的應(yīng)用 由此 通過將不同作用 機理的生物農(nóng)藥或與化學農(nóng)藥混配來提高生物農(nóng)藥的速效性 拓寬防治譜 實現(xiàn)多種病害的有效兼治 并 且還可降低化學農(nóng)藥的使用量 減輕環(huán)境污染 延緩病原菌對化學藥劑抗藥性的產(chǎn)生 25 26 本試驗通過幾 種生物源農(nóng)藥對尖孢鐮孢菌的抑菌作用及活性的測定 并與化學農(nóng)藥進行比較 旨在篩選出對蘭州百合貯 存期鱗莖腐爛病防效較好的生物農(nóng)藥及其混配劑 研究結(jié)果對指導百合貯存期鱗莖腐爛病和預防帶病種球 播種后枯萎病的發(fā)生具有重要的意義 1 材料與方法 1 1 供試材料 供試菌株 引起蘭州百合鱗莖腐爛病病原菌尖孢鐮孢菌 F oxysporum 保存于甘肅農(nóng)業(yè)大學農(nóng)藥學實 驗室 4 冰箱中 供試培養(yǎng)基 馬鈴薯 200 g 葡萄糖 18 g 瓊脂粉 14 g 去離子水 1 L 供試藥劑見表 1 1 2 試驗方法 1 2 1 生物農(nóng)藥對尖孢鐮孢菌的抑菌活性測定 病原菌活化 挑取保存于 4 冰箱中的尖孢鐮孢菌 接種 于 PDA 培養(yǎng)基中央進行菌種活化 并置于 25 恒溫箱培養(yǎng) 4 d 備用 在超凈工作臺上用滅菌水將 12 種供試藥劑 表 1 分別配制成相應(yīng)濃度母液 取 1 mL 母液加入到滅 菌冷卻至 45 的 49 mL PDA 培養(yǎng)基中 充分混勻 使其達到表 1 中各藥劑的推薦濃度 將每個藥劑處理 分別倒入 4 個滅菌培養(yǎng)皿 90 mm 中制成含毒培養(yǎng)基平板 以分別加入 1 mL 百菌清母液和無菌水制備 的 PDA 平板為化學藥劑對照和空白對照 將上述培養(yǎng) 4 d 的病原菌 用打孔器從菌落邊緣打成直徑 5 mm 的菌餅 菌絲朝下接入含毒 PDA 平板和對照平板中央 置于 25 下恒溫培養(yǎng) 每個處理重復 4 次 4 d 后采用十字交叉法測量菌落直徑 并按下式計算藥劑抑菌率 抑菌率 對照菌落直徑 處理菌落直 徑 對照菌落直徑 菌餅直徑 100 1 2 2 生物農(nóng)藥對尖孢鐮孢菌的活性比較 采用生長速率法 27 將抑菌率在 60 以上的藥劑稀釋成 5 個系 列濃度 3 億 CFU 克哈茨木霉 WP 濃度分別為 1 00 10 6 2 50 10 5 6 25 10 4 1 56 10 4 和 3 91 10 3 孢子 mL 2 億 CFU 克綠色木霉 WP 濃度分別為 8 33 10 5 4 17 10 5 2 08 10 5 1 04 10 5 和 5 21 10 4 第 5 期 姜玉玲等 幾種生物農(nóng)藥及其混配劑對蘭州百合貯存期鱗莖腐爛病防治作用 1043 表 1 供試藥劑 Table 1 Tested fungicides 殺菌劑類型 Fungicide type 藥劑 Fungicide 劑型 Formulations 推薦濃度 Recommended concentration 生產(chǎn)廠家 Manufacturer 3 億 CFU g 哈茨木霉 T harzianum 可濕性粉劑 WP 1 00 10 6 CFU g 美國拜沃有限公司 真菌類 Fungal 2 億 CFU g 綠色木霉 T viride 可濕性粉劑 WP 8 33 10 5 CFU g 山東泰諾藥業(yè)有限公司 細菌類 Bacteria 0 1億 CFU g多粘類芽胞桿菌 P polymyxa 細粒劑 FG 3 33 10 4 CFU g 浙江省桐廬匯豐生物科技有限公司 0 3 丁子香酚 eugenol 可溶液劑 SL 4000 00 g mL 南通神雨綠色藥業(yè)有限公司 5 香芹酚 carvacrol 水劑 AS 3333 00 g mL 蘭州世創(chuàng)生物科技有限公司 1 蛇床子素 cnidiadin 水乳劑 EW 3333 00 g mL 江蘇省蘇科農(nóng)化有限責任公司 2 1 小檗堿 berberine 水劑 AS 7000 00 g mL 濰坊奧豐作物病害防治有限公司 植物源 Plant derived 1 3 苦參堿 matrine 水劑 AS 1333 00 g mL 恒源偉業(yè)生物科技 6 春雷霉素 kasugamycin 可濕性粉劑 WP 3333 00 g mL 延邊春雷生物藥業(yè)有限公司 1 申嗪霉素 phenazine 1 carboxylic acid 懸浮劑 SC 1000 00 g mL 上海農(nóng)樂生物制品股份有限公司 其他生物類 Other biological 3 多抗霉素 polyoxin 可濕性粉劑 WP 7000 00 g mL 延邊春雷生物藥業(yè)有限公司 化學類 Chemical 75 百菌清 chlorothalonil 可濕性粉劑 WP 3333 00 g mL 利民化學有限公司 孢子 mL 0 1 億 CFU g 多粘芽胞桿菌 FG 濃度分別為 3 33 10 4 8 33 10 3 2 08 10 3 5 21 10 2 和 1 30 10 2 孢子 mL 0 3 丁子香酚 SL 濃度分別為 4000 2000 1000 500 和 250 g mL 5 香芹酚 AS 濃度 分別為 3333 1666 50 833 25 416 63 和 208 31 g mL 1 申嗪霉素 SC 濃度分別為 1000 500 250 125 和 62 5 g mL 75 百菌清 WP 濃度分別為 3333 416 63 52 08 6 51 和 0 81 g mL 然后按 1 2 1 中 方法制成含毒培養(yǎng)基 接菌 置于 25 下恒溫培養(yǎng) 每個處理重復 4 次 4 d 后采用十字交叉法測量菌落 直徑 測定不同藥劑不同濃度的抑菌率 然后以濃度的對數(shù)為橫坐標 以抑菌率的幾率值為縱坐標 求出 毒力回歸方程和 EC 50 比較各藥劑的活性大小 1 2 3 生物農(nóng)藥混配劑對尖孢鐮孢菌的協(xié)同增效作用測定 采用 Horsfall 28 和王小藝等 29 方法測定混配藥 劑的最佳混配比例 即在單劑活性測定的基礎(chǔ)上 將 3 億 CFU 克哈茨木霉 WP 2 億 CFU 克綠色木霉 WP 0 1 億 CFU g 多粘類芽胞桿菌 FG 0 3 丁子香酚 SL 5 香芹酚 AS 1 申嗪霉素 SC 和 75 百菌清 WP 7 種藥劑分別按照 1 2 2 中測得的各藥劑的有效中濃度 擴大 50 倍配制母液 以體積比 0 10 1 9 2 8 3 7 4 6 5 5 6 4 7 3 8 2 9 1 10 0 不同配比進行二元混配 采用菌絲生長速率法 將以上不同配比的 混配劑按照 1 2 1 方法分別配成含毒培養(yǎng)基平板 并接菌 置于 25 下恒溫培養(yǎng) 每個處理重復 4 次 以 加入等量無菌水為空白對照 4 d 后采用十字交叉法測量菌落直徑 測得實際抑菌率 按照以下公式計算 各混劑預期抑制率和毒效比率 根據(jù)毒效比率 1 為增效作用 毒效比率 1 為相加作用 毒效比率 1 為 拮抗作用的標準進行混配劑協(xié)同增效作用評價 30 31 混劑預期抑制率 A 藥劑 EC 50 值實際抑制率 A 藥劑所占比例 B 藥劑 EC 50 值實際抑制率 B 藥劑所占比例 100 毒效比率 實際抑制率 混劑預期抑制率 100 將上述配比中毒效比率大于 1 的混配劑 采用 Sun 和 John 32 的共毒系數(shù)法 co toxicity coefficient CTC 對它們的增效作用進行進一步評價 按照上述方法將毒效比率大于 1 的混配劑配制成母液 稀釋成 5 個濃 度梯度 按照 1 2 2 中的方法測定各個混劑的抑制率 求出毒力回歸方程和 EC 50 以 A 藥劑作為標準藥劑 按下式分別計算各單劑 混劑的毒力指數(shù) 混劑的理論毒力指數(shù)及共毒系數(shù) 毒力指數(shù) TI 標準殺菌 劑 EC 50 單劑 EC 50 100 混配實測毒力指數(shù) ATI 標準殺菌劑 EC 50 混配劑 EC 50 100 混配理論毒力 指數(shù) TTI A 藥劑毒力指數(shù) A 藥劑在混配中的含量 B 藥劑毒力指數(shù) B 藥劑在混配中的含量 共毒系數(shù) CTC 混配實測毒力指數(shù) 混配理論毒力指數(shù) 100 共毒系數(shù) CTC 大于 120 為增效 作用 在 80 120 之間為相加作用 80 為拮抗作用 1 2 4 混配劑對鱗莖腐爛病的室內(nèi)防效測定 根據(jù)毒效比率和共毒系數(shù)法將 1 2 3 中篩選出具有明顯協(xié)同 1044 中 國 生 物 防 治 學 報 第 37 卷 增效作用的混配劑 采用離體鱗片法測定不同混配劑及其單劑對尖孢鐮孢菌引起的百合鱗莖腐爛病的防治 效果 選取大小一致且健康百合鱗片 放入 75 酒精中滅菌 1 min 經(jīng)無菌水清洗晾干 根據(jù)單劑的有效 中濃度配制母液以不同體積比配制具有增效作用的混配劑藥液 備用 保護作用防治效果測定 將上述滅菌處理的百合鱗片分別浸入 20 mL 的混配劑及單劑的藥液中 3 min 取出后用濾紙吸去多余藥液 待藥液稍干后放入滅菌培養(yǎng)皿中 培養(yǎng)皿底部墊有經(jīng)滅菌水浸濕的海綿 上 覆一層濾紙 中間用吸水的脫脂棉球保濕 每皿 4 片 在每個鱗片中間接入直徑 5 mm 的菌餅 每個處 理重復 3 次 以混配劑處理后的百合鱗片為處理組 以生物農(nóng)藥單劑 百菌清和滅菌水浸泡處理的百合鱗 片作為生物藥劑對照 化學藥劑對照和空白對照 然后置于氣候箱中 25 1 黑暗條件下培養(yǎng) 4 d 后 十字交叉法測量病斑直徑 并按下式計算防治效果 防治效果 對照病斑直徑 處理病斑直 徑 對照病斑直徑 菌餅直徑 100 治療作用防治效果測定 分別在滅菌處理的百合鱗片中間接入直徑 5 mm 的菌餅 然后置于氣候箱中 每皿 4 片 每個處理重復 3 次 黑暗條件下培養(yǎng) 36 h 去掉菌餅 進行藥液處理 參照上述方法設(shè)置處理 組和對照組進行治療作用測定 1 3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析 采用 Excel 和 SPSS 軟件對測定數(shù)據(jù)進行處理和統(tǒng)計 2 結(jié)果與分析 2 1 幾種生物農(nóng)藥對尖孢鐮孢菌的抑菌作用 通過試驗結(jié)果表明 幾種生物農(nóng)藥對尖孢鐮孢菌均有不同程度的抑菌作用 且菌落直徑和抑菌率之間 均存在極顯著差異 其中 香芹酚抑菌作用最好 抑菌率為 97 96 比百菌清高 9 18 多粘類芽胞桿菌 抑菌作用次之 抑菌率為 86 12 比百菌清低 2 66 丁子香酚 申嗪霉素 哈茨木霉和綠色木霉抑菌率 均在 60 以上 其他生物農(nóng)藥的抑菌率均在 50 以下 表 2 綜上 篩選出 3 億 CFU g 哈茨木霉 WP 2 億 CFU 克綠色木霉 WP 0 1 億 CFU g 多粘類芽胞桿菌 FG 0 3 丁子香酚 SL 5 香芹酚 AS 1 申嗪霉 素 SC 6 種抑菌率在 60 以上的生物農(nóng)藥供進一步篩選 表 2 生物農(nóng)藥和百菌清對尖孢鐮孢菌的抑制作用 4 d Table 2 Inhibition of biological Fungicides and chlorothalonil on F oxysporum 4 d 藥劑 Fungicide 推薦濃度 Recommended concentration 菌落直徑 Colony diameter mm 抑菌率 Inhibition rate 哈茨木霉 T harzianum 1 00 10 6 CFU g 20 20 0 10 H 69 05 0 04 F 綠色木霉 T viride 8 33 10 5 CFU g 23 20 0 10 G 62 93 0 02 G 多粘類芽胞桿菌 P polymyxa 3 33 10 4 CFU g 11 80 0 10 K 86 12 0 01 C 丁子香酚 eugenol 4000 00 g mL 14 20 0 10 J 81 22 0 01 D 香芹酚 carvacrol 3333 00 g mL 6 00 0 10 M 97 96 0 06 A 蛇床子素 cnidiadin 3333 00 g mL 30 20 0 10 F 48 64 0 01 H 小檗堿 berberine 7000 00 g mL 44 30 0 10 C 19 73 0 01 K 苦參堿 matrine 1333 00 g mL 45 20 0 10 B 18 03 0 01 L 春雷霉素 kasugamycin 3333 00 g mL 31 30 0 10 E 46 26 0 01 I 申嗪霉素 phenazine 1 carboxylic acid 1000 00 g mL 18 50 0 10 I 72 45 0 02 E 多抗霉素 polyoxin 7000 00 g mL 36 00 0 10 D 36 73 0 01 J 百菌清 chlorothalonil 3333 00 g mL 10 50 0 10 L 88 78 0 02 B 對照 CK 54 00 1 00 A 注 不同大寫字母表示處理之間差異極顯著 P 0 01 下同 Note Data with the different capital letters indicated significant difference at 0 01 level among treatments The same as below 第 5 期 姜玉玲等 幾種生物農(nóng)藥及其混配劑對蘭州百合貯存期鱗莖腐爛病防治作用 1045 活性比較結(jié)果表明 6 種生物農(nóng)藥對尖孢鐮孢菌活性有一定差異 表 3 其中多粘類芽孢桿菌對尖 孢鐮孢菌的活性最好 EC 50 值為 85 95 g mL 但比百菌清的 EC 50 值高 81 67 g mL 香芹酚對尖孢鐮孢菌 的活性最差 EC 50 值為 1080 69 g mL 其他生物農(nóng)藥對尖孢鐮孢菌的 EC 50 介于這二者之間 表 3 生物農(nóng)藥對尖孢鐮孢菌的室內(nèi)毒力測定 Table 3 Laboratory Toxicity Determination of Biological Fungicides to F oxysporum 藥劑 Fungicide 毒力回歸方程 Virulence regression equation EC 50 相關(guān)系數(shù) Correlation coefficient r 哈茨木霉 T harzianum y 0 421x 3 972 276 70 0 98 綠色木霉 T viride 0 450 x 4 075 114 82 0 99 多粘類芽胞桿菌 P polymyxa y 0 669x 3 706 85 95 0 99 丁子香酚 eugenol y 1 069x 2 138 478 63 0 96 香芹酚 carvacrol 3 408x 5 339 1080 69 0 93 申嗪霉素 phenazine 1 carboxylic acid y 1 819x 0 048 183 74 0 99 百菌清 chlorothalonil y 0 429x 4 729 4 28 0 98 2 2 生物農(nóng)藥混配劑對尖孢鐮孢菌的協(xié)同增效作用 2 2 1 幾種混配劑不同比例的毒效比率 通過混配劑毒效比率測定 結(jié)果表明不同配比下的混配劑對尖孢 鐮孢菌抑菌活性不同 其中多粘類芽胞桿菌與申嗪霉素在 9 1 和 8 2 多粘類芽胞桿菌與丁子香酚在 9 1 8 2 7 3 6 4 5 5 和 4 6 多粘類芽胞桿菌與百菌清在 8 2 和丁子香酚與百菌清在 4 6 的混配比例下 毒效比率均大于 1 表現(xiàn)為增效作用 多粘類芽胞桿菌與百菌清在 9 1 的混配下 毒效比率等于 1 表現(xiàn) 為相加作用 其他混配劑在不同混配比例下 毒效比率均小于 1 綜上 初步篩選出 10 種毒效比率大于 1 的增效配比 進一步篩選出具有協(xié)同增效作用混配劑 表 4 表 4 不同混配劑的毒效比率 Table 4 Toxicity ratio of different mixtures 多 申 P P 多 丁 P E 多 百 P C 丁 百 E C 體積比 v v 實際抑 菌率 預期抑 菌率 毒效比 實際抑 菌率 預期抑 菌率 毒效比 實際抑 菌率 預期抑 菌率 毒效比 實際抑 菌率 預期抑 菌率 毒效比 10 0 51 28 51 28 1 00 51 28 51 28 1 00 50 27 50 27 1 00 50 4 50 40 1 00 9 1 64 42 51 12 1 26 64 10 51 22 1 25 50 27 50 16 1 00 1 59 50 37 0 03 8 2 63 78 50 96 1 25 64 42 51 15 1 26 62 91 50 05 1 26 7 16 50 34 0 14 7 3 49 36 50 80 0 97 52 24 51 09 1 02 40 93 49 95 0 82 11 41 50 32 0 23 6 4 42 95 50 64 0 85 52 56 51 03 1 03 30 77 49 84 0 62 5 31 50 29 0 11 5 5 46 47 50 48 0 92 53 21 50 96 1 04 38 19 49 73 0 77 13 53 50 27 0 27 4 6 45 19 50 32 0 90 63 78 50 90 1 25 38 46 49 62 0 78 59 15 50 24 1 18 3 7 49 36 50 16 0 98 35 90 50 83 0 71 36 26 49 51 0 73 12 47 50 21 0 25 2 8 29 81 50 00 0 60 19 87 50 77 0 39 41 76 49 40 0 85 3 45 50 19 0 07 1 9 27 88 49 84 0 56 31 41 50 71 0 62 35 71 49 29 0 72 8 49 50 16 0 17 0 10 49 68 49 68 1 00 50 64 50 64 1 00 49 18 49 18 1 00 50 13 50 13 1 00 注 多 申 多粘類芽胞桿菌 申嗪霉素 多 丁 多粘類芽胞桿菌 丁子香酚 多 百 多粘類芽胞桿菌 百菌清 丁 百 丁子香酚 百 菌清 下同 Note P P Paenibacillus polymyxa phenazine 1 carboxylic acid P E Paenibacillus polymyxa eugenol P C Paenibacillus polymyxa chlorothalonil E C eugenol chlorothalonil The same as below 1046 中 國 生 物 防 治 學 報 第 37 卷 2 2 2 幾種混配劑對尖孢鐮孢菌的協(xié)同增效作用 共毒系數(shù)測定結(jié)果表明 生物農(nóng)藥多粘類芽胞桿菌與丁 子香酚以 9 1 和 8 2 混配和生物農(nóng)藥多粘類芽胞桿菌 丁子香酚分別與化學藥劑百菌清以 8 2 4 6 混配 后均表現(xiàn)為增效作用 EC 50 值和 CTC 分別為 26 92 g mL 79 26 g mL 347 88 129 73 和 4 05 g mL 0 95 g mL 440 60 641 66 這 4 種混配劑的 EC 50 值均小于多粘類芽胞桿菌 丁子香 酚和百菌清單劑的 EC 50 值 表明這 4 種混配劑對尖孢鐮孢菌的抑制活性明顯好于單劑 其他各混配劑在不同配比下表現(xiàn)為相 加或拮抗作用 表 5 綜上 篩選出 4 種具有協(xié)同增效作用的混配劑 用于對尖孢鐮孢菌引起的百合鱗 莖腐爛病的防治效果評價 表 5 混配劑對尖孢鐮孢菌的協(xié)同增效作用 Table 5 Synergistic effect of mixtures on F oxysporum 藥劑 Fungicide 體積比 v v 毒力回歸方程 Virulence regression equation EC 50 g mL 相關(guān)系數(shù) Correlation coefficient r CTC 評價 Evaluation 多 申 P P 9 1 y 0 469x 4 064 99 08 0 98 91 62 相加 Additive 多 申 P P 8 2 y 0 455x 4 112 89 47 0 98 107 52 相加 Additive 多 丁 P E 9 1 y 0 573x 4 181 26 92 0 94 347 88 增效 Synergistic 多 丁 P E 8 2 y 0 743x 3 589 79 26 0 97 129 73 增效 Synergistic 多 丁 P E 7 3 y 1 197x 1 483 851 14 0 98 13 40 拮抗 Antagonistic 多 丁 P E 6 4 y 1 139x 1 841 588 84 0 99 21 43 拮抗 Antagonistic 多 丁 P E 5 5 y 1 256x 1 263 944 71 1 00 15 43 拮抗 Antagonistic 多 丁 P E 4 6 y 1 209x 1 478 812 83 1 00 20 83 拮抗 Antagonistic 多 百 P C 8 2 y 0 260 x 4 842 4 05 0 99 440 60 增效 Synergistic 丁 百 E C 4 6 y 0 358x 5 008 0 95 0 99 641 66 增效 Synergistic 多粘類芽胞桿菌 P polymyxa y 0 669x 3 706 85 95 0 99 申嗪霉素 phenazine 1 carboxylic acid y 1 819x 0 048 183 74 0 99 丁子香酚 eugenol y 1 069x 2 138 478 63 0 96 百菌清 chlorothalonil y 0 429x 4 729 4 28 0 98 2 3 混配劑對百合鱗莖腐爛病離體防效 4 種混配劑對百合鱗莖腐爛病均有不同程度的防治效果 各混配劑的防效均高于 61 且混配劑的防 效明顯高于單劑 生物農(nóng)藥混配劑多 丁 9 1 8 2 對百合鱗莖腐爛病的保護作用和治療作用防效分別為 77 33 66 00 70 59 61 76 與多粘類芽胞桿菌和丁子香酚相比防效平均分別提高了 28 69 43 82 多 百和丁 百 8 2 4 6 對百合鱗莖腐爛病的保護作用和治療作用防效分別為 82 22 84 56 73 53 76 47 與多粘類芽胞桿菌 丁子香酚和百菌清相比防效平均分別提高了 38 97 54 10 9 82 與多 丁 9 1 和 8 2 相比防效評價提高了 5 24 和 15 32 混配劑與單劑防效之間存在極顯著差異 且各單劑 及混配劑的保護作用均高于其治療作用 表 6 圖 1 表 6 混配劑對鱗莖腐爛病的防治效果 Table 6 Control effect of mixtures on bulb rot 保護作用 Protective effect 治療作用 Therapeutic effect 藥劑 Fungicide 體積比 v v 病斑直徑 Lesion diameter mm 防治效果 Control efficacy 病斑直徑 Lesion diameter mm 防治效果 Control efficacy 多 丁 P E 9 1 6 70 0 10 F 77 33 0 01 C 6 70 0 10 EF 70 59 0 01 C 多 丁 P E 8 2 7 60 0 10 D 66 00 0 04 E 7 20 0 10 D 61 76 0 01 E 多 百 P C 8 2 6 30 0 10 G 82 22 0 01 B 6 50 0 10 FG 73 53 0 01 B 丁 百 E C 4 6 6 20 0 10 G 84 56 0 01 A 6 30 0 10 G 76 47 0 01 A 多粘類芽胞桿菌 P polymyxa 9 30 0 10 C 42 22 0 01 F 8 50 0 10 C 38 24 0 01 F 丁子香酚 eugenol 10 50 0 10 B 26 67 0 01 G 9 30 0 10 B 23 53 0 01 G 百菌清 chlorothalonil 7 20 0 10 E 71 11 0 01 D 6 80 0 10 E 67 65 0 01 D 對照 CK 12 50 0 10 A 10 70 0 10 A 第 5 期 姜玉玲等 幾種生物農(nóng)藥及其混配劑對蘭州百合貯存期鱗莖腐爛病防治作用 1047 a b c d h gf e A a B e B b c d hgf A A 保護作用 Protective effect B 治療作用 Therapeutic effect a 多 丁 Paenibacillus polymyxa eugenol 9 1 b 多 丁 Paenibacillus polymyxa Eugenol 8 2 c 多 百 Paenibacillus polymyxa chlorothalonil 8 2 d 丁 百 eugenol chlorothalonil 4 6 e 多粘類芽胞桿菌 Paenibacillus polymyxa f 丁子香酚 eugenol g 百菌清 chlorothalonil h 對照 Control 圖 1 混配劑對百合鱗莖腐爛病的防治效果 Fig 1 The control effect of mixtures on lily bulb rot 3 討論 在百合枯萎病防治中 多菌靈 代森錳鋅 百菌清 福美雙 苯醚甲環(huán)唑等化學藥劑常被采用 9 但 由于化學藥劑的不科學合理使用 使得病原菌產(chǎn)生抗藥性 防效逐年降低 殘留污染嚴重 嚴重影響百合 的產(chǎn)量和品質(zhì) 因此 篩選出防效較好的生物農(nóng)藥及其混配劑對防治百合病害 延緩病原菌抗藥性產(chǎn)生 促進百合產(chǎn)業(yè)綠色無公害發(fā)展具有重要意義 據(jù)報道 生物農(nóng)藥與化學農(nóng)藥混配施用 既能減少化學農(nóng)藥的用量 又能發(fā)揮化學農(nóng)藥防治速度快和 效果穩(wěn)定的優(yōu)勢 同時還保持了微生物農(nóng)藥在植物根 葉周圍定殖 分泌抗生素 誘導植物產(chǎn)生抗病性等 特點 改善植物源殺菌劑持效期短和速效性差的問題 33 35 生防細菌 NJ13 與丙環(huán)唑和苯醚甲環(huán)唑 生防 芽胞桿菌 Bacillus spp 與甲基硫菌靈 芽胞桿菌與咪鮮胺 枯草芽胞桿菌與吡唑醚菌酯 枯草芽胞桿菌與 戊唑醇 刀孢蠟蚧菌與百菌清等生物農(nóng)藥與化學農(nóng)藥混配后對人參鐮刀菌根腐病菌 Fusarium solani 香蕉 枯萎病菌 F oxysporum f sp cubense 茄腐鐮刀菌 Fusarium solani 草莓枯萎病 F oxysporum 均表現(xiàn)出增效 作用 抑菌率達 70 以上 36 39 同時與單劑相比有的混配劑對病害的防治效果提高 40 41 另外 擬康氏木 霉與枯草芽胞桿菌和放線菌與細菌 綠色木霉與芽胞桿菌 非致病尖孢鐮孢菌 Fo47 與惡臭假單胞 Pseudomonas putida WCS35 等生物農(nóng)藥之間混配后可有效地防治由黃瓜枯萎病菌 F oxysporum 西瓜枯萎 病菌 F oxysporum f sp niveum 亞麻枯萎病菌 F oxysporum f sp lini 42 45 等病原菌引起的枯萎病 防治效 果均在 71 以上 本研究也篩選出了對尖孢鐮孢菌抑菌率在 69 以上且作用機理不同的香芹酚 丁子香酚 1048 中 國 生 物 防 治 學 報 第 37 卷 申嗪霉素 多粘類芽胞桿菌 哈茨木霉 綠色木霉 6 種生物農(nóng)藥 通過將 6 種生物農(nóng)藥之間及其與化學農(nóng) 藥百菌清進行二元混配 初步篩出 10 種毒效比率大于 1 的混配劑 通過共毒系數(shù)法進一步進行協(xié)同增效 作用評價 獲得了具有協(xié)同增效作用的多 丁 9 1 多 丁 8