2021 年 第 62 卷 第 11 期 2169 收 稿 日 期 2021 09 22 基 金 項 目 金 華 市 科 技 重 大 項 目 2019 2 001b 作 者 簡 介 徐 金 晶 1982 女 浙 江 金 華 人 農(nóng) 藝 師 從 事 中 藥 材 栽 培 技 術(shù) 研 究 與 推 廣 工 作 E mail 2242359 qq com 通 信 作 者 鈄 凌 娟 1981 女 浙 江 金 華 人 高 級 農(nóng) 藝 師 碩 士 從 事 中 藥 材 栽 培 技 術(shù) 研 究 工 作 E mail nalanmyft 126 com 文 獻 著 錄 格 式 徐 金 晶 李 金 輝 鈄 凌 娟 等 靈 芝 栽 培 品 種 引 選 與 培 養(yǎng) 基 配 方 篩 選 J 浙 江 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 2021 62 11 2169 2170 2173 DOI 10 16178 j issn 0528 9017 20211117 靈 芝 栽 培 品 種 引 選 與 培 養(yǎng) 基 配 方 篩 選 徐 金 晶 1 李 金 輝 2 鈄 凌 娟 1 方 莉 1 1 金 華 市 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 研 究 院 浙 江 金 華 321017 2 浙 江 菇 爾 康 生 物 科 技 有 限 公 司 浙 江 金 華 321304 摘 要 以 泰 山 仙 芝 龍 泉 119 韓 芝 1 號 靈 芝 為 材 料 研 究 母 種 培 養(yǎng) 基 和 4 個 原 種 培 養(yǎng) 基 配 方 對 靈 芝 菌 絲 生 長 速 度 和 生 長 勢 的 影 響 篩 選 出 適 宜 本 地 的 靈 芝 品 種 為 龍 泉 119 研 究 4 個 袋 料 配 方 對 靈 芝 子 實 體 和 孢 子 粉 產(chǎn) 量 的 影 響 若 原 種 用 量 較 多 原 種 培 養(yǎng) 基 配 方 建 議 采 用 棉 籽 殼 78 麥 麩 20 蔗 糖 1 石 膏 1 及 雜 木 屑 78 麥 麩 20 蔗 糖 1 石 膏 1 栽 培 袋 料 建 議 采 用 雜 木 屑 83 麥 麩 15 蔗 糖 1 石 膏 1 栽 培 的 靈 芝 產(chǎn) 量 較 高 且 成 本 低 關(guān) 鍵 詞 靈 芝 品 種 培 養(yǎng) 基 篩 選 中 圖 分 類 號 S567 文 獻 標 志 碼 A 文 章 編 號 0528 9017 2021 11 2169 02 靈 芝 作 為 傳 統(tǒng) 的 滋 補 珍 品 我 國 最 早 的 藥 學(xué) 著 作 神 農(nóng) 本 草 經(jīng) 將 其 列 為 有 效 無 毒 的 上 上 品 也 是 本 草 綱 目 記 載 的 唯 一 入 五 臟 的 本 草 保 健 養(yǎng) 生 功 效 深 入 人 心 1 現(xiàn) 代 醫(yī) 學(xué) 表 明 靈 芝 在 防 治 腫 瘤 保 肝 護 肝 改 善 睡 眠 等 方 面 有 良 好 的 功 效 2 5 由 于 市 場 上 靈 芝 種 類 和 品 種 比 較 混 亂 加 上 人 為 命 名 隨 意 同 名 異 種 同 種 異 名 的 現(xiàn) 象 嚴 重 為 了 永 康 靈 芝 產(chǎn) 業(yè) 的 長 足 發(fā) 展 特 開 展 適 宜 本 地 栽 培 的 靈 芝 品 種 及 配 套 培 養(yǎng) 基 篩 選 的 試 驗 1 材 料 與 方 法 1 1 材 料 供 試 菌 株 為 泰 山 仙 芝 龍 泉 119 韓 芝 1 號 引 自 浙 江 龍 泉 培 養(yǎng) 基 材 料 有 玉 米 粉 麥 粒 棉 籽 殼 木 屑 馬 鈴 薯 麩 皮 葡 萄 糖 瓊 脂 石 膏 1 2 方 法 1 2 1 菌 種 篩 選 將 不 同 菌 種 接 種 在 母 種 培 養(yǎng) 基 上 考 察 其 菌 絲 生 長 情 況 篩 選 三 者 中 菌 絲 生 長 速 度 快 長 勢 好 的 品 種 然 后 針 對 篩 選 出 來 的 菌 種 進 行 原 種 培 養(yǎng) 基 和 栽 培 袋 料 培 養(yǎng) 基 配 方 篩 選 試 驗 1 2 2 母 種 制 作 母 種 培 養(yǎng) 基 馬 鈴 薯 200 g 葡 萄 糖 20 g 瓊 脂 20 g 木 屑 100 g 玉 米 粉 50 g 磷 酸 二 氫 鉀 3 g 硫 酸 鎂 1 5 g 水 1 000 mL 將 馬 鈴 薯 切 片 加 水 煮 沸 30 min 4 層 紗 布 過 濾 后 定 容 至 1 000 mL 在 濾 液 中 加 入 瓊 脂 玉 米 粉 磷 酸 二 氫 鉀 硫 酸 鎂 和 葡 萄 糖 調(diào) 節(jié) pH 至 6 5 并 不 斷 攪 拌 分 裝 到 18 mm 180 mm 試 管 中 121 滅 菌 0 5 h 后 擺 斜 面 分 離 接 種 3 5 d 可 見 菌 塊 周 圍 長 出 白 色 菌 絲 并 開 始 在 培 養(yǎng) 基 上 蔓 延 生 長 去 除 雜 菌 污 染 的 試 管 10 15 h 后 可 長 滿 試 管 斜 面 篩 選 出 菌 絲 潔 白 濃 密 氣 生 菌 絲 多 的 試 管 進 行 繼 代 培 養(yǎng) 菌 株 繼 代 培 養(yǎng) 基 棉 籽 殼 培 養(yǎng) 基 棉 籽 殼 100 g 麥 麩 10 g 葡 萄 糖 20 g 瓊 脂 20 g 水 1 000 mL 將 棉 籽 殼 麥 麩 文 火 煮 50 min 用 4 層 紗 布 過 濾 后 定 容 至 1 000 mL 其 他 步 驟 同 PDA 培 養(yǎng) 基 將 篩 選 出 的 分 離 菌 種 無 菌 分 割 成 5 mm 7 mm 的 菌 塊 將 其 接 種 到 繼 代 培 養(yǎng) 基 上 于 25 恒 溫 培 養(yǎng) 7 10 d 可 長 滿 試 管 斜 面 如 此 繼 代 培 養(yǎng) 2 3 次 每 次 都 去 除 雜 菌 污 染 的 菌 種 篩 選 出 長 勢 好 的 菌 種 可 作 為 栽 培 用 的 母 種 1 2 3 原 種 制 作 原 種 培 養(yǎng) 基 T1 為 棉 籽 殼 78 麥 麩 20 蔗 糖 1 和 石 膏 1 T2 為 雜 木 屑 78 麥 麩 20 蔗 糖 1 和 石 膏 1 T3 為 玉 米 粒 97 蔗 糖 1 石 膏 1 和 碳 酸 鈣 1 T4 為 麥 粒 97 2170 2021 年 第 62 卷 第 11 期 蔗 糖 1 石 膏 1 和 碳 酸 鈣 1 T1 和 T2 的 制 作 將 培 養(yǎng) 料 混 勻 按 料 水 m V 1 1 5 加 水 拌 勻 后 裝 入 500 mL 罐 頭 瓶 用 聚 丙 烯 薄 膜 封 口 121 滅 菌 1 5 h T3 和 T4 的 制 作 分 別 將 玉 米 粒 和 麥 粒 煮 至 無 白 心 撈 出 稍 晾 干 后 加 入 其 他 材 料 拌 勻 后 裝 入 500 mL 罐 頭 瓶 用 聚 丙 烯 薄 膜 封 口 121 滅 菌 1 5 h 原 種 瓶 滅 菌 冷 卻 后 在 超 凈 工 作 臺 內(nèi) 接 入 靈 芝 母 種 25 恒 溫 培 養(yǎng) 1 2 4 栽 培 袋 配 方 試 驗 配 方 棉 籽 殼 83 麥 麩 15 蔗 糖 1 石 膏 1 配 方 雜 木 屑 83 麥 麩 15 蔗 糖 1 石 膏 1 配 方 棉 籽 殼 45 雜 木 屑 38 麥 麩 15 蔗 糖 1 石 膏 1 配 方 將 含 水 量 在 38 45 的 直 徑 10 cm 的 闊 葉 樹 干 截 成 15 cm 的 木 段 栽 培 袋 料 可 用 33 cm 17 cm 0 05 cm 的 聚 丙 烯 塑 料 袋 裝 袋 121 滅 菌 2 h 冷 卻 后 在 超 凈 工 作 臺 內(nèi) 接 入 原 種 25 恒 溫 培 養(yǎng) 采 用 大 棚 覆 土 栽 培 將 發(fā) 菌 完 全 的 菌 袋 轉(zhuǎn) 移 至 大 棚 覆 土 栽 培 用 鐵 鍬 以 間 距 40 cm 開 深 度 為 35 cm 直 徑 為 15 cm 的 栽 培 穴 在 挖 好 的 坑 內(nèi) 撒 入 辛 硫 磷 防 蟲 將 菌 袋 塑 料 袋 去 除 取 出 菌 棒 豎 直 放 入 坑 內(nèi) 露 出 部 分 覆 土 全 部 完 成 后 打 開 噴 灌 設(shè) 備 進 行 噴 霧 使 菌 棒 吸 足 水 分 后 期 管 理 與 傳 統(tǒng) 大 棚 靈 芝 管 理 相 同 6 1 3 測 量 和 觀 察 指 標 分 別 在 第 7 天 母 種 和 原 種 測 量 菌 絲 生 長 速 度 并 觀 察 菌 絲 生 長 勢 菌 絲 的 生 長 勢 用 號 表 示 記 錄 菌 絲 長 滿 瓶 的 時 間 每 個 配 方 隨 機 各 選 100 袋 菌 包 采 集 子 實 體 曬 干 隨 機 選 100 袋 菌 包 收 集 孢 子 粉 稱 取 質(zhì) 量 1 4 數(shù) 據(jù) 統(tǒng) 計 與 分 析 使 用 Excel 2010 統(tǒng) 計 數(shù) 據(jù) 并 分 析 2 結(jié) 果 與 分 析 2 1 不 同 靈 芝 菌 種 母 種 培 養(yǎng) 過 程 中 菌 絲 比 較 由 表 1 可 知 不 同 菌 種 在 相 同 培 養(yǎng) 基 及 28 下 繼 代 培 養(yǎng) 7 d 后 日 均 長 速 對 比 為 龍 泉 119 泰 山 仙 芝 韓 芝 1 號 菌 絲 長 勢 龍 泉 119 韓 芝 1 號 泰 山 仙 芝 由 此 可 見 龍 泉 119 靈 芝 生 長 速 度 最 快 日 均 長 速 達 0 47 cm 菌 絲 長 勢 最 好 對 應(yīng) 的 菌 絲 潔 白 濃 密 健 壯 表 1 不 同 靈 芝 菌 種 母 種 培 養(yǎng) 過 程 中 菌 絲 比 較 靈 芝 菌 種 日 均 長 速 cm 菌 絲 色 澤 菌 絲 濃 度 菌 絲 長 勢 泰 山 仙 芝 0 43 純 白 色 濃 密 龍 泉 119 0 47 純 白 色 較 濃 密 韓 芝 1 號 0 39 純 白 色 濃 密 2 2 不 同 培 養(yǎng) 基 對 龍 泉 1 1 9 原 種 菌 絲 生 長 的 影 響 由 表 2 可 知 不 同 配 方 培 養(yǎng) 基 處 理 中 龍 泉 119 原 種 菌 絲 日 均 長 速 最 快 的 是 T4 為 0 56 cm 其 次 是 T3 而 T1 T2 較 差 滿 瓶 時 間 最 短 的 是 T3 其 次 是 T4 而 T1 T2 滿 瓶 時 間 較 長 在 污 染 率 方 面 T4 T3 高 于 T1 T2 表 2 不 同 原 種 培 養(yǎng) 基 菌 絲 生 長 速 度 對 比 培 養(yǎng) 基 萌 發(fā) 時 間 d 日 均 長 速 cm 滿 瓶 時 間 d 菌 絲 長 勢 污 染 率 T1 1 0 46 35 4 T2 1 0 47 34 3 T3 1 0 53 30 7 T4 1 0 56 32 8 2 3 不 同 栽 培 袋 料 配 方 對 龍 泉 1 1 9 產(chǎn) 量 的 影 響 由 表 3 可 知 4 種 栽 培 袋 料 生 產(chǎn) 配 方 的 龍 泉 119 靈 芝 子 實 體 和 孢 子 粉 產(chǎn) 量 以 配 方 為 最 高 其 次 是 配 方 而 配 方 最 低 表 3 不 同 栽 培 袋 料 配 方 子 實 體 孢 子 粉 產(chǎn) 量 比 較 袋 料 配 方 靈 芝 產(chǎn) 量 kg 孢 子 粉 產(chǎn) 量 kg 袋 料 成 本 kg 6 1 5 2 1 089 8 6 6 5 350 6 8 5 8 751 9 8 7 5 400 注 表 中 為 每 500 kg 干 料 的 數(shù) 據(jù) 比 較 2 4 栽 培 袋 料 主 料 成 本 當 前 棉 籽 殼 價 格 2 2 元 kg 1 刨 花 桑 枝 等 廢 棄 木 屑 價 格 0 42 元 kg 1 段 木 價 格 0 80 元 kg 1 麩 皮 約 2 2 元 kg 1 糖 約 1 2 元 kg 1 石 膏 約 1 元 kg 1 因 此 栽 培 袋 料 主 料 成 本 排 列 順 序 為 配 方 3 小 結(jié) 與 討 論 本 試 驗 引 進 泰 山 仙 芝 龍 泉 119 韓 芝 1 號 3 個 靈 芝 菌 種 龍 泉 119 日 均 長 速 和 菌 絲 生 長 勢 都 為 三 者 中 最 好 菌 絲 潔 白 濃 密 針 對 龍 泉 119 菌 種 若 生 產(chǎn) 原 種 數(shù) 量 不 多 可 用 玉 米 粒 培 養(yǎng) 基 和 麥 粒 培 養(yǎng) 基 若 原 種 用 量 較 多 建 議 采 用 棉 籽 殼 和 木 屑 作 為 培 養(yǎng) 基 較 適 宜 栽 培 袋 料 配 方 隨 著 棉 籽 殼 含 下 轉(zhuǎn) 第 2173 頁 王 宗 星 等 栽 培 方 式 對 七 葉 一 枝 花 光 合 及 生 物 特 性 的 影 響 2173 學(xué) 特 征 及 物 候 期 研 究 J 湖 南 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 2010 13 18 20 4 梁 娟 郭 澤 宇 葉 漪 不 同 土 壤 水 分 條 件 對 七 葉 一 枝 花 光 合 特 性 及 有 效 成 分 皂 苷 含 量 的 影 響 J 植 物 生 理 學(xué) 報 2014 50 1 56 60 5 梁 娟 易 濤 葉 漪 遮 陰 對 七 葉 一 枝 花 光 合 特 性 及 皂 苷 含 量 的 影 響 J 江 蘇 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 2016 44 4 265 267 6 王 嵐 張 宇 斌 李 建 新 土 壤 不 同 含 水 量 對 七 葉 一 枝 花 光 合 和 生 理 特 性 的 影 響 J 貴 州 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 2015 43 8 42 45 7 張 翠 虞 木 奎 王 宗 星 等 濱 海 圍 墾 地 紅 葉 椿 光 合 特 性 研 究 J 湖 南 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 2010 3 43 45 8 薛 垠 鑫 劉 根 紅 王 曉 鈺 滴 灌 條 件 下 氮 磷 鉀 肥 配 施 對 玉 米 株 高 光 合 速 率 及 產(chǎn) 量 的 影 響 J 甘 肅 農(nóng) 業(yè) 大 學(xué) 學(xué) 報 2020 55 6 77 85 9 徐 當 會 李 秋 霞 張 仁 懿 等 硅 氮 添 加 對 高 寒 草 甸 優(yōu) 勢 物 種 披 針 葉 黃 華 生 長 及 凈 光 合 速 率 的 影 響 J 草 業(yè) 科 學(xué) 2020 37 9 1681 1687 10 張 滿 利 陳 盈 王 彥 榮 等 氮 素 穗 肥 施 用 對 水 稻 光 合 速 率 和 產(chǎn) 量 的 影 響 J 農(nóng) 業(yè) 與 技 術(shù) 2020 40 13 1 4 11 王 培 娟 馬 玉 平 霍 治 國 等 土 壤 水 分 對 冬 小 麥 葉 片 光 合 速 率 影 響 模 型 構(gòu) 建 J 應(yīng) 用 氣 象 學(xué) 報 2020 31 3 267 279 12 賀 旺 龍 谷 瑤 袁 德 義 等 不 同 造 林 密 度 下 油 用 檸 檬 桉 光 合 速 率 日 變 化 研 究 J 林 業(yè) 科 技 2020 45 6 13 17 13 韓 金 龍 單 成 鋼 王 志 芬 不 同 遮 光 處 理 對 9 種 藥 用 植 物 光 合 速 率 及 產(chǎn) 量 的 影 響 J 農(nóng) 學(xué) 學(xué) 報 2018 8 10 57 60 14 陳 延 松 袁 華 玲 衛(wèi) 文 淵 等 夏 季 遮 陽 對 紅 陽 獼 猴 桃 凈 光 合 速 率 的 影 響 及 其 與 生 理 生 態(tài) 因 子 的 關(guān) 系 J 果 樹 學(xué) 報 2017 34 9 1144 1151 15 凌 悅 銘 張 亞 黎 王 震 等 高 溫 脅 迫 對 小 黑 麥 光 合 作 用 影 響 J 石 河 子 大 學(xué) 學(xué) 報 自 然 科 學(xué) 版 2020 38 2 172 178 16 呂 欽 楊 韋 獻 東 陳 鑫 等 八 角 林 不 同 郁 閉 度 對 金 花 茶 和 山 茶 生 長 及 光 合 特 性 的 影 響 J 熱 帶 作 物 學(xué) 報 2020 41 6 1138 1144 17 陳 鑫 李 桃 禎 王 凌 暉 等 不 同 郁 閉 度 下 山 茶 生 長 及 光 合 特 性 差 異 J 廣 西 林 業(yè) 科 學(xué) 2017 46 2 160 164 18 楊 先 裕 袁 紫 倩 顏 福 花 等 不 同 郁 閉 度 板 栗 林 下 套 種 香 榧 的 光 合 生 理 特 性 研 究 J 安 徽 農(nóng) 業(yè) 大 學(xué) 學(xué) 報 2016 43 3 400 404 19 徐 當 會 李 秋 霞 張 仁 懿 硅 氮 添 加 對 高 寒 草 甸 優(yōu) 勢 物 種 披 針 葉 黃 華 生 長 及 凈 光 合 速 率 的 影 響 J 草 業(yè) 科 學(xué) 2020 37 9 1681 1687 20 鄭 梅 霞 陳 宏 蘇 海 蘭 等 不 同 重 樓 資 源 的 重 樓 皂 苷 含 量 比 較 及 與 土 壤 養(yǎng) 分 的 相 關(guān) 性 分 析 J 福 建 農(nóng) 業(yè) 科 技 2020 8 58 66 21 宋 九 華 唐 瓊 成 英 等 栽 培 與 野 生 重 樓 藥 材 中 重 樓 皂 苷 與 無 機 元 素 含 量 的 比 較 分 析 J 樂 山 師 范 學(xué) 院 學(xué) 報 2014 29 12 54 56 22 李 碧 琴 王 春 濤 劉 帆 等 采 收 期 對 寶 興 縣 華 重 樓 皂 苷 含 量 的 影 響 J 現(xiàn) 代 農(nóng) 業(yè) 科 技 2018 1 56 58 23 王 躍 虎 牛 紅 梅 張 兆 云 等 重 樓 屬 植 物 的 藥 用 價 值 及 其 化 學(xué) 物 質(zhì) 基 礎(chǔ) J 中 國 中 藥 雜 志 2015 40 5 833 899 24 劉 帥 李 沙 沙 張 登 祿 等 重 樓 皂 苷 藥 理 作 用 及 作 用 機 制 的 研 究 進 展 J 現(xiàn) 代 中 藥 研 究 與 實 踐 2020 5 86 90 責 任 編 輯 張 才 德 上 接 第 2170 頁 量 的 減 少 靈 芝 子 實 體 和 孢 子 粉 產(chǎn) 量 逐 漸 提 高 這 可 能 與 棉 籽 殼 木 質(zhì) 素 含 量 較 低 有 關(guān) 棉 籽 殼 83 麥 麩 15 蔗 糖 1 石 膏 1 栽 培 成 本 最 高 段 木 栽 培 產(chǎn) 量 最 高 但 是 采 用 木 屑 作 為 袋 料 成 本 最 低 取 材 方 便 可 更 好 地 利 用 農(nóng) 業(yè) 廢 棄 物 變 廢 為 寶 因 此 雜 木 屑 83 麥 麩 15 蔗 糖 1 石 膏 1 配 方 作 為 龍 泉 119 栽 培 袋 料 配 方 適 宜 在 本 地 推 廣 應(yīng) 用 參 考 文 獻 1 林 志 彬 靈 芝 的 現(xiàn) 代 研 究 M 3 版 北 京 北 京 大 學(xué) 醫(yī) 學(xué) 出 版 杜 2007 11 12 2 蘇 保 洲 靈 芝 的 現(xiàn) 代 臨 床 應(yīng) 用 探 索 M 現(xiàn) 代 中 西 醫(yī) 結(jié) 合 雜 志 2019 28 5 567 3 張 華 斌 石 松 林 陳 春 美 靈 芝 多 糖 抗 腫 瘤 免 疫 機 制 的 研 究 進 展 J 醫(yī) 學(xué) 綜 述 2016 22 2 259 262 4 崔 月 花 章 克 昌 靈 芝 三 萜 皂 苷 GCTL1 的 體 外 抗 氧 化 作 用 J 食 品 科 學(xué) 2010 31 19 49 53 5 劉 維 虎 虓 真 朱 莉 等 靈 芝 三 萜 的 研 究 與 應(yīng) 用 進 展 J 食 品 科 學(xué) 2019 40 5 309 6 俞 巍 毅 浙 北 地 區(qū) 靈 芝 優(yōu) 良 品 種 的 引 種 和 選 育 J 浙 江 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 2016 57 4 486 489 責 任 編 輯 張 瑞 麟