a a a a a a 秦紫藝 陳雙雙 王華娣 等 繡球?qū)僦参锝M織培養(yǎng)研究進展 江蘇農(nóng)業(yè)科學 繡 球 屬 植 物 組 織 培 養(yǎng) 研 究 進 展 秦紫藝 陳雙雙 王華娣 鄧衍明 南京農(nóng)業(yè)大學園藝學院 江蘇南京 江蘇省農(nóng)業(yè)科學院休閑農(nóng)業(yè)研究所 江蘇省高效園藝作物遺傳改良重點實驗室 江蘇南京 摘 要 繡球?qū)僦参锸菆@林和家庭園藝中重要的觀賞植物 具有較高的生態(tài)和經(jīng)濟價值 開發(fā)應(yīng)用前景廣闊 開展 繡球?qū)僦参锓庇夹g(shù)研究對其資源開發(fā) 保護與應(yīng)用具有重要意義 與傳統(tǒng)扦插 壓條 分株等育苗技術(shù)相比 組織培 養(yǎng)技術(shù)能夠滿足種苗周年 批量生產(chǎn)的要求 可有力地促進繡球?qū)僦参锏漠a(chǎn)業(yè)化開發(fā)與利用 對國內(nèi)外繡球?qū)僦参锏?組織培養(yǎng)技術(shù)進行了綜述 包括外植體材料的選擇 外植體的消毒方法 植物生長調(diào)節(jié)劑的影響 培養(yǎng)條件等 旨在通 過總結(jié)前人經(jīng)驗和方法 為建立更多繡球?qū)賰?yōu)良植物資源的高效再生體系和遺傳轉(zhuǎn)化體系提供參考 關(guān) 鍵 詞 繡球?qū)?組織培養(yǎng) 再生 研究進展 中 圖 分 類 號 文 獻 標 志 碼 文 章 編 號 收稿日期 基金項目 國家自然科學基金 編號 蘇州市科技計劃項 目 編號 作者簡介 秦紫藝 女 內(nèi)蒙古鄂爾多斯人 碩士研究生 主 要從事觀賞園藝學研究 通信作者 鄧衍明 博士 研究員 主要從事觀賞園藝學研究 繡球?qū)?a a 又名八仙花屬 為虎耳 草科落葉灌木或小喬木 中國是繡球?qū)僦参锏馁Y 源分布中心和起源中心之一 具有豐富的種質(zhì)資 源 共有 種 變種 繡球?qū)僦参镞m應(yīng)性強 具 有耐寒 耐陰 抗性強和病蟲害少等優(yōu)點 種植范圍 和適應(yīng)區(qū)域較廣 繡球?qū)僦参锘ㄐ投鄻?花期較 長 花色豐富 包含了白色系 紅色系 藍色系等 被 廣泛應(yīng)用于園林景觀及盆花 鮮切花等產(chǎn)業(yè) 繡 球?qū)僦参镆蜉嗥缓Ｉ椒?繡球酚等物質(zhì)而可作 為抗瘧疾 降血糖 治療心悸煩躁的入藥良材 此外 很多繡球品種的花色可隨土壤酸堿度的變化 而變化 當土壤為強酸性時 花色呈藍色 而當土壤 為堿性時 花色為紅色 使其可以作為土壤酸堿度 的指示植物 總之 繡球?qū)僦参锞哂休^高的觀 賞 經(jīng)濟 藥用及生態(tài)價值 產(chǎn)業(yè)化開發(fā)前景十分 廣闊 繡球?qū)僦参锏幕ǘ酁椴辉谢?較難獲得種子 故關(guān)于繡球有性繁殖的報道較少 目前 繡球?qū)僦?物傳統(tǒng)繁殖方式主要是無性繁殖 包括扦插 分株 壓條等 但無性繁殖方式因其繁殖系數(shù)低 速度 慢 易受季節(jié)限制無法進行周年繁殖等缺點而不能 大規(guī)模生產(chǎn)種苗 植物組織培養(yǎng)技術(shù)可以在保持 母本優(yōu)良性狀的前提下實現(xiàn)周年 快速繁殖從而獲 得大量種苗 有效彌補傳統(tǒng)無性繁殖方式的不足 此外 組培的環(huán)境條件可控 獲得的組培苗在植物 江蘇農(nóng)業(yè)科學 年第 卷第 期 基因工程 分子育種等領(lǐng)域也具有重要作用 因 此 本綜述綜合了國內(nèi)外相關(guān)研究文獻 對繡球?qū)?植物組織培養(yǎng)的現(xiàn)狀進行了歸納和分析 并對下一 步研究方向進行了建議 旨在為今后更多繡球?qū)賰?yōu) 良植物資源的組織培養(yǎng)和高效遺傳轉(zhuǎn)化體系的建 立提供參考 無 菌 苗 的 獲 得 外植體材料的選擇 外植體的選擇是植物組織培養(yǎng)的第一步 也是 非常重要的一環(huán) 不同的外植體類型對植物組織培 養(yǎng)的影響差異甚大 繡球?qū)僦参锝M織培養(yǎng)中常用 的外植體材料有莖尖 莖段 葉片等 有學者用八 仙花葉片 莖段和莖尖為外植體 探究組織培養(yǎng)中 的污染率和死亡率 結(jié)果發(fā)現(xiàn) 利用葉片污染率較 低 但是難以形成愈傷組織 而利用莖尖污染率和 死亡率都較低 分別為 王紅 梅等比較了側(cè)芽 基部側(cè)芽 頂芽和帶頂芽的側(cè)芽 后 發(fā)現(xiàn)基部側(cè)芽的萌發(fā)率最高 同時 以葉柄 為外植體的研究發(fā)現(xiàn) 中部葉柄愈傷組織誘導率比 上部葉柄高 此外 也有很多學者以葉片作為外 植體 通過愈傷組織誘導建立高效的再生體 系 研究發(fā)現(xiàn) 由于生理狀態(tài)和年齡的不同 即使同一植株上的同一種器官 其誘導分化情況也 不同 通常外植體越幼嫩 分生能力越強 雖然 繡球?qū)僦参锝Y(jié)實率低 但也有以種子和花粉為外植 體進行組織培養(yǎng)的研究 陳爽等以種子為外植體 雖獲得了無菌苗 但僅限于 蠟蓮繡球 莼蘭繡球 等較易獲得種子的品種 周靜偉以花藥 花粉發(fā) 育處于單核靠邊期 為外植體 其愈傷組織誘導率 僅有 由此可見 繡球?qū)僦参锝M織培養(yǎng) 宜以葉片 莖尖和帶腋芽莖段作為外植體 污染率 低 誘導率高 外植體消毒 外植體消毒常用試劑有 乙醇 氯化汞 和次氯酸鈉溶液 乙醇因其穿透力強 可 以使菌體蛋白變性 還可以排除外植體表面的空氣 有利于其他消毒劑的進入 被廣泛用于外植體消毒 的第一步 但乙醇消毒時間長易導致外植體死 亡 時間短不能徹底消毒 因此要結(jié)合其他消毒劑 共同處理外植體 不同的消毒劑處理不同的時間 外植體的污染率及存活率也不同 對于莖尖 莖段的消毒 馮潤東等 和邢合龍 等 的研究中利用 乙醇浸泡 再用 對繡球花莖段和莖尖消毒 外植 體污染率最低 也有學者在 乙醇消毒 后 用 溶液分別滅菌 同樣可以達 到較好的消毒滅菌效果 因此 利用 乙 醇和 溶液結(jié)合使用時 滅菌時間 一般可控制在 消毒易引起外植 體的褐化 如王紅梅等對圓錐繡球 北極熊 的莖段 用 消毒 外植體褐化率較低 但由于外 植體表面密被表皮毛 會消毒不徹底導致外植體的 污染率比較高 而用 不間斷消毒 污染 率降低 但是褐化率會增加 故選擇采用 的 二次滅菌法 即用 分 次進行消毒 首次消毒 后 無菌水沖洗并用濾紙吸干外植 體表面的水分再進行第 次消毒 對于繡球?qū)?植物花藥和種子 利用 溶液可以得到較好的 消毒效果 由于 溶液毒性較大 使用不當會對繡球 外植體造成損傷 因此 也有研究采用多種消毒試 劑結(jié)合的方法進行滅菌 如對 的莖段利 用 滅菌 后 再用飽和漂白粉上清 液消毒 以及對 紅寶石 的莖段利用 滅菌 后 再利用 次氯酸鈉 滅菌 都可以獲得污染率較低的 無菌外植體 等利用 溶液和 溶液對 的莖段消 毒可以達到 滅菌率 但考慮到 廢液不 環(huán)保 認為選用 溶液浸泡 進行消 毒是最佳方案 等也認為應(yīng)避免使用 溶液 用活性氯濃度為 的次氯酸鈉并添加 潤濕劑浸泡 莖段可以取得較好的消毒效 果 是一種非離子型表面活性劑 在消 毒劑中添加 可以增強消毒效果 這些 研究表明 除 溶液外 次氯酸鈉溶液是使用最 廣泛的消毒劑 總之 對繡球?qū)僦参锿庵搀w的消 毒 要結(jié)合不同類型的外植體選擇合適的消毒試劑 和消毒時間以達到理想的消毒效果 基 本 培 養(yǎng) 基 的 選 擇 對于植物組織培養(yǎng)來說 培養(yǎng)基的成分對外植 體的生長發(fā)育具有直接的影響 近年來 國內(nèi)大部 分研究者都采用 培養(yǎng)基 作為繡球?qū)僦参锏幕九囵B(yǎng)基 江蘇農(nóng)業(yè)科學 年第 卷第 期 培養(yǎng)基最初被用于煙草的愈傷組織培養(yǎng) 后來 逐漸被廣泛用于其他植物的組織培養(yǎng) 但并不是 所有植物都適用于 培養(yǎng)基 王海娥比較了 基本培養(yǎng)基在啟動培養(yǎng)和增殖培養(yǎng) 階段的培養(yǎng)效果 發(fā)現(xiàn)對于朗姆系繡球不同品種最 適宜的基本培養(yǎng)基并不一樣 繡球 以 為 宜 柏林 和 蝴蝶戲珠 以 為宜 而 藍 星 則以 為宜 陳爽比較了 培養(yǎng)基和 培養(yǎng)基 對 莼蘭繡球 和 蠟蓮繡球 增殖的影響 發(fā)現(xiàn) 培養(yǎng)基更適合這 個品種繡球的增殖 分析認為可能是由于 培養(yǎng) 基中豐富的無機鹽和氮源對促進生長有利 李 楊麗研究發(fā)現(xiàn) 培養(yǎng)基并不適合其研究的繡球 品種 而 和 作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基 可促進增殖芽的伸長 采用 培養(yǎng)基時 外植體生根率較高 進一步研究 發(fā)現(xiàn) 與 和 相比 培養(yǎng)基的銨鹽濃度較 低 可促進 葉片外植體的不定芽形成 但在蔣夢煙的研究中 這 種基本 培養(yǎng)基對繡球品種 藍尼康 的愈傷組織誘導并無 明顯差異 比較 培養(yǎng)基的成分 可 以發(fā)現(xiàn)幾種培養(yǎng)基中的 的含量有 明顯差異 培養(yǎng)基和 培養(yǎng)基中 含 量較高 而 培養(yǎng)基中 含量較高 因 此 基本培養(yǎng)基的選擇不僅受外植體的基因型影 響 不同培養(yǎng)基中大量元素的差異也是需要考慮的 重要因素 植 物 生 長 調(diào) 節(jié) 劑 的 影 響 除了基本培養(yǎng)基的基礎(chǔ)成分外 培養(yǎng)基中添加 的植物生長調(diào)節(jié)劑種類和配比對于外植體的生長 增殖和分化也都具有不同的影響 直接再生途徑 直接再生途徑又叫不定芽誘導途徑 是指外植 體直接誘導分化產(chǎn)生器官的途徑 截至目前 該途 徑已廣泛用于繡球?qū)僦参镆垣@得再生植株 表 繡球?qū)僦参锊欢ㄑ空T導途徑多以 芐氨 基嘌呤 和 萘乙酸 或 吲哚丁 酸 為外源植物生長調(diào)節(jié)劑 在 等的研究中 當 值從 提高到 時 不 定芽再生頻率相應(yīng)增加 而在 和 范圍內(nèi)變化時 器官發(fā)生頻 率呈拋物線形變化 殷麗青在改良 培養(yǎng)基 中添加不同比例 和 處理繡球 發(fā)現(xiàn) 過高的 會抑制芽的發(fā)生 而過高的 會出現(xiàn)芽細 弱 基部產(chǎn)生愈傷組織等現(xiàn)象 這些結(jié)果表明 細 胞分裂素 生長素的值與不定芽再生頻率密切相 關(guān) 但也有學者認為生長調(diào)節(jié)劑的有無 種類 濃 度及配比對器官發(fā)生影響不顯著 但對新稍伸長影 響較大 此外 培養(yǎng)基中添加 赤霉素 也可以提高芽的誘導率 促進芽的伸長 表 部 分 經(jīng) 不 定 芽 誘 導 途 徑 再 生 的 繡 球 屬 植 物 品 種 繡球品種 外植體 基本培養(yǎng)基 生長調(diào)節(jié)劑 參考文獻 帶芽莖段 帶芽莖段 改良 籃邊繡球 帶芽莖段 柏林 帶芽莖段 藍星 帶芽莖段 帶芽莖段 紅寶石 帶芽莖段 間接再生途徑 間接再生途徑又被稱為愈傷組織誘導途徑 是 先使外植體脫分化成愈傷組織 愈傷組織再分化成 器官并最終形成完整植株的過程 近年來 國內(nèi)外 關(guān)于繡球?qū)僦参锿ㄟ^愈傷組織誘導途徑進行組織 培養(yǎng)的報道已有不少 表 在該途徑中 最主要 的影響因素是外源激素的類型和濃度 誘導愈傷 常用的外源激素有 二 氯苯氧乙酸 糠基氨基嘌呤 氯 吡啶基 苯基脲 等 在細胞分 裂素中 的使用率較高 通常以 為宜 楊寶明等認為 在相同濃度 的 條件下 配合 和 均能誘導出 愈傷組織 且 的誘導效果要比 好 但 江蘇農(nóng)業(yè)科學 年第 卷第 期 是 濃度過高則會造成愈傷組織結(jié)構(gòu)松散而 不易分化成不定芽 是一種人工合成的細 胞分裂素 其活性高且價格低廉 被廣泛應(yīng)用于植 物組織培養(yǎng)中 孫曉波等發(fā)現(xiàn) 大花繡球 無盡 夏 葉片在 或 激素組合培養(yǎng)基 上的愈傷誘導率高達 通常情況下 選擇 較高濃度的細胞分裂素和較低濃度的生長素 有利 于愈傷組織的分化 表 部 分 經(jīng) 愈 傷 組 織 誘 導 途 徑 再 生 的 繡 球 屬 植 物 品 種 繡球品種 外植體 基本培養(yǎng)基 生長調(diào)節(jié)劑 參考文獻 都山繡球 葉片 玫紅媽媽 花藥 無盡夏 葉片 葉片 葉片 增殖培養(yǎng) 增殖培養(yǎng)又叫繼代培養(yǎng) 是組織培養(yǎng)中實現(xiàn)快 速繁殖的重要步驟 細胞分裂素和生長素是增殖 培養(yǎng)中常用的生長調(diào)節(jié)劑組合 雷亞靈等認為 適 合芽增殖的培養(yǎng)基為 增殖系數(shù)為 有的研究在增 殖培養(yǎng)基中添加赤霉素 如王海娥發(fā)現(xiàn)以 為增殖培養(yǎng)基時 增殖系數(shù)可達 李楊麗 等以 為增殖 培養(yǎng)基時 增殖系數(shù)最高 但只有 除 外 細胞分裂素 也被用于增殖培養(yǎng) 如用 培 養(yǎng) 都山繡球 增殖率可達 倍 也有研究 發(fā)現(xiàn) 增殖培養(yǎng)基 中添加腺嘌呤可促進增殖 提高增 殖系數(shù) 雖然增殖培養(yǎng)基以細胞分裂素和生長 素組合作為外源激素的研究居多 但也有報道認為 增殖培養(yǎng)基中添加任意濃度的 都可以得到 較高的不定芽增殖率和鮮質(zhì)量 而且不定芽長度與 細胞分裂素濃度無關(guān) 根據(jù)以上研究可見 繡 球?qū)僦参镌鲋撑囵B(yǎng)使用的植物生長調(diào)節(jié)劑種類較 多 但常用的只有 等 生根培養(yǎng) 繡球?qū)僦参锷鄬θ菀?組織培養(yǎng)中較常用 的方法是瓶內(nèi)生根 生根培養(yǎng)一般選擇大量元素 減半的培養(yǎng)基 這是因為在生根過程中 植物對大 量元素的需求已明顯降低 不同類型不同濃度 的植物生長調(diào)節(jié)劑對繡球生根誘導的效果存在差 異 龔偉等在 培養(yǎng)基上添加 的 繡球生根率達 添加 或 時 生根率也較高 也有研究表 明 和 配合使用比單獨使用效果好 如利 用 為生 根培養(yǎng)基時 圓錐繡球生根率可達 且生根快 根數(shù)多 趙盈盈等認為最適宜繡球品種 的生根培養(yǎng)基為 蛭石 珍珠巖 即 使不添加激素 生根率也可達 且根系發(fā)達 生長健壯 等在含有珍珠巖的 培養(yǎng) 基上添加 繡球 的生根數(shù)達 每株 條 遠高于在瓊脂中培養(yǎng)的生根數(shù) 分 析認為 不僅是因為珍珠巖基質(zhì)相對于瓊脂更透 氣 而且瓊脂中的不定芽只在培養(yǎng)基以外的莖段處 生細小的根 這些根不接觸培養(yǎng)基 無法吸收營養(yǎng) 導致不定芽生長緩慢 也有文獻報道在生根培 養(yǎng)基中添加 活性炭可以促進生根 生根率達 活性炭可為組培苗提供生根暗環(huán)境 吸 附植物生長調(diào)節(jié)劑等有利于生根的物質(zhì) 但活性 炭的濃度不宜過高 否則將會抑制生根 除了瓶 內(nèi)生根方法外 還有瓶外生根法 龔偉等將組培苗 轉(zhuǎn)移到經(jīng)過福爾馬林消毒的基質(zhì) 珍珠巖 蛭石 中 在濕度大于 的條件下培養(yǎng) 生根率可 達 煉 苗 移 栽 組培苗葉綠素含量少 光合自養(yǎng)能力弱 根毛 細軟 適應(yīng)能力較差 需要經(jīng)過馴化煉苗逐漸改變 生長條件以提高其對外界環(huán)境的適應(yīng)能力 影 響繡球?qū)僦参锝M培苗移栽成活率的重要因素有組 培苗的質(zhì)量 空氣濕度 移栽基質(zhì)等 在移栽之 前 需將誘導獲得的生根苗在室溫散射光下培養(yǎng) 再打開封口膜于溫室大棚預煉苗 并于移栽 時洗去根部培養(yǎng)基 氣溫低時 煉苗時間可適當 延長 氣溫高時因培養(yǎng)基易污染 需縮短煉苗時 江蘇農(nóng)業(yè)科學 年第 卷第 期 間 另外 繡球?qū)僦参锝M培苗通常在高濕 恒溫 弱光條件下培養(yǎng) 若移出培養(yǎng)基后水分不足 將直 接導致幼苗失水死亡 所以除了每天向植株葉面噴 霧外 初期還應(yīng)用薄膜覆蓋保濕一段時間 移栽時 應(yīng)選擇根系發(fā)達 莖稈粗壯 葉片深綠 和木質(zhì)化程度較高的組培苗 有研究表明 繡球 藍尼康 已生根的健壯苗移栽成活率可達到 且根系生長快 根數(shù)量多 而無根苗的移栽成活率 僅為 很難成活 繡球?qū)僦参锝M培苗移栽 的基質(zhì)通常用泥炭土 珍珠巖 蛭石 腐殖土等 移栽 所用基質(zhì)應(yīng)先高溫滅菌再使用 等為了使櫟 葉繡球離體生根的植物適應(yīng)溫室條件 將櫟葉繡球組 培苗移栽到泥炭土 蛭石 珍珠巖 的基質(zhì) 中 然后覆蓋塑料薄膜 放回培養(yǎng)室 周后 再轉(zhuǎn)移 到溫室中 也有研究表明 將繡球組培苗移栽到 珍珠巖 蛭石 的基質(zhì)中 成活率為 移栽到蛭石 腐殖土 的基質(zhì)中 成活率達 栽入珍珠巖 腐殖土 的 培養(yǎng)缽中 成活率達 以上 但 等認 為組培苗的移栽成活率與移栽基質(zhì)比例無關(guān) 只要 移栽到泥炭 蛭石 珍珠巖的培養(yǎng)基質(zhì)中 其適應(yīng) 能力都很好且生長旺盛 此外 爐灰渣也是一種 優(yōu)良的移栽基質(zhì) 有學者比較用于移栽繡球的爐灰 渣和珍珠巖 蛭石 的基質(zhì) 發(fā)現(xiàn)爐灰渣的移 栽成活率達 且組培苗長勢良好 爐灰 渣取材方便 透氣性好 不僅是組培苗移栽的優(yōu)良 基質(zhì) 也是其他育苗方式的優(yōu)良基質(zhì) 培 養(yǎng) 條 件 除了上述因素外 組織培養(yǎng)所處的溫度 濕度 光照等培養(yǎng)條件也是保證整個培養(yǎng)過程順利進行 的重要因素 組培瓶內(nèi)的濕度一般能達飽和狀 態(tài) 通常不予考慮 在已有的繡球組織培養(yǎng)研究 中 培養(yǎng)溫度基本保持在 光 照條件對于繡球?qū)僦参锏牟欢ㄑ空T導 愈傷組織的 誘導和分化都有著顯著的影響 等將 外 植體經(jīng)暗培養(yǎng)之后 再置于光 暗周期 下孵育 冷白光照射 光照度為 芽誘導率高 達 周靜偉等將 玫紅媽媽 的花藥接種 到培養(yǎng)基后 先在弱光條件下培養(yǎng) 待誘導出愈 傷組織后轉(zhuǎn)入光照 下培養(yǎng) 每天光 照培養(yǎng) 愈傷誘導率為 還有學者將 葉片置于紅光和藍光下 發(fā)現(xiàn)不定芽被提前 誘導產(chǎn)生 且不定芽較白光下生長更健壯 由此 可見 繡球?qū)僦参锝M織培養(yǎng)中光照度 光 暗周期 及光質(zhì)等都發(fā)揮著重要作用 因此 在繡球組織培 養(yǎng)過程中 應(yīng)研究并優(yōu)化培養(yǎng)所需的溫度 光照等 培養(yǎng)條件 展 望 繡球?qū)僦参锏慕M織培養(yǎng)技術(shù)對于優(yōu)質(zhì)種苗生 產(chǎn) 新品種選育 遺傳轉(zhuǎn)化和種質(zhì)資源保護利用等 都具有重要意義 目前 國內(nèi)外研究人員圍繞大花 繡球 無盡夏 圓錐繡球 北極熊 等開展了大量的 組織培養(yǎng)相關(guān)研究 取得了較大的進展 但是 在 此過程中還有一些問題需要進一步深入研究 部分基因型建立無菌體系困難 污染率高 增殖 培養(yǎng)過程中玻璃化和褐化嚴重 影響增殖芽生長和 分化 甚至導致死亡 外植體類型較單一 以莖 段為主 其他器官高效再生體系尚不成熟 不定 芽分化率仍較低等 此外 目前的繡球組織培養(yǎng)研 究主要集中在無菌體系 再生體系的建立 而關(guān)于 繡球?qū)僦参镞z傳轉(zhuǎn)化體系 原生質(zhì)體培養(yǎng)與再生等 方面的研究報道較少 因此 未來針對繡球?qū)僦参?組織培養(yǎng)方面的研究應(yīng)重點聚焦于高效再生體系 和遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立 為培育優(yōu)良新品種 開展 基礎(chǔ)研究等奠定理論和技術(shù)基礎(chǔ) 參 考 文 獻 喬 謙 王江勇 陶吉寒 繡球?qū)僦参镅芯窟M展 農(nóng)學學報 中國科學院中國植物志編輯委員會 中國植物志 第三十五卷第 一分冊 北京 科學出版社 任倩倩 鄭建鵬 張京偉 等 繡球?qū)倏鼓嫘匝芯窟M展 安徽 農(nóng)業(yè)科學 閔祥鳳 姜衛(wèi)兵 魏家星 繡球 類觀賞植物資源探究及應(yīng)用開 發(fā) 中國城市林業(yè) 馮衛(wèi)生 張艷麗 鄭曉珂 等 繡球花的化學成分研究 中國 藥學雜志 鄧衍明 韓 勇 齊香玉 等 繡球?qū)僦参锓N質(zhì)資源分析及其花色 可調(diào)性和葉斑病抗性比較 植物資源與環(huán)境學報 曾 奕 楊偉權(quán) 郁書君 繡球花的育種研究進展 廣東農(nóng)業(yè) 科學 馮潤東 孫宏剛 八仙花組織培養(yǎng)繁殖技術(shù) 北華大學學報 自然科學版 邢合龍 原會營 馬 開 等 八仙花組織培養(yǎng)技術(shù)的研究 防護林科技 王紅梅 劉春風 孟紫蓮 等 圓錐繡球 北極熊 組培快繁體系 江蘇農(nóng)業(yè)科學 年第 卷第 期 的建立 分子植物育種 楊寶明 蘇 艷 黃玉玲 等 八仙花葉柄離體培養(yǎng)和植株再生 技術(shù)研究 山西農(nóng)業(yè)科學 a a a a 趙盈盈 彭盡暉 陳小超 等 八仙花葉片誘導再生技術(shù) 湖 南農(nóng)業(yè)科學 池景存 黃守印 楊福林 都山繡球的愈傷組織培養(yǎng)與植株再生 植物生理學通訊 朱大保 國外楊樹組培微繁技術(shù)的進展 北京林業(yè)大學學 報 陳 爽 李葉華 趙 冰 種野生繡球花組培及快繁技術(shù)研究 種子 周靜偉 吳曉夢 陳海霞 八仙花花藥培養(yǎng)誘導愈傷組織 分子植物育種 黃作喜 邱 超 曾楨迦 等 植物組織培養(yǎng)中消毒劑的應(yīng)用研 究進展 內(nèi)江師范學院學報 王忠武 建德鋒 八仙花莖尖離體培養(yǎng)技術(shù)研究 北方園 藝 孫曉波 蘇家樂 陳雙雙 等 大花繡球 無盡夏 組培苗葉片再 生植株的研究 中國農(nóng)學通報 殷麗青 胡永紅 湯桂鈞 等 優(yōu)良八仙花品種 a a a a 的離體培養(yǎng)與快速繁殖 上海農(nóng)業(yè)學報 雷亞靈 八仙花組織培養(yǎng)技術(shù)研究 楊凌 西北農(nóng)林科技 大學 a a a a a a a a a a 王海娥 朗姆系繡球的組織培養(yǎng)及植株再生體系研究 雅 安 四川農(nóng)業(yè)大學 李楊麗 八仙花離體快繁及盆栽生產(chǎn)相關(guān)技術(shù)研究 武 漢 華中農(nóng)業(yè)大學 a a a a 蔣夢煙 繡球品種 藍尼康 快繁技術(shù)研究 長沙 中南林 業(yè)科技大學 劉會超 賈文慶 基本培養(yǎng)基及植物生長調(diào)節(jié)劑對牡丹組培苗 生根的影響 河南科技學院學報 自然科學版 張瑞姿 植物生長調(diào)節(jié)劑在觀賞植物組織培養(yǎng)中的應(yīng)用 山西林業(yè) 金桂芳 蘇榮存 優(yōu)良繡球 a a 的組培快繁 技術(shù)研究 江蘇農(nóng)業(yè)科學 郭 超 種繡球花新引進品種的快繁技術(shù)研究 長沙 中 南林業(yè)科技大學 聶紹虎 劉江淼 張鑫靜 等 櫟葉繡球 雪花 再生體系的建立 分子植物育種 高金山 邊慶華 張永忠 等 細胞分裂素 的研究進展 農(nóng)藥 趙飛燕 王景燕 龔 偉 等 花椒屬植物組織培養(yǎng)研究進展 世界林業(yè)研究 龔 偉 王米力 石大興 八仙花離體培養(yǎng)和植株再生 植 物生理學通訊 孫占育 孫志強 曹 斌 活性炭在促進組培苗植物生根中的作 用 湖南農(nóng)業(yè)科學 金香花 郎賢波 李美蘭 等 活性炭 濃度及生長素對樹莓 試管苗生根及生長的影響 延邊大學農(nóng)學學報 孟維娜 岳東杰 程艷榮 等 觀賞植物無糖組培苗煉苗技術(shù)的 可行性分析 上海農(nóng)業(yè)科技 a a a a a a 姜 巍 張巍巍 潭 幸 等 變異繡球無性系建立的研究 內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)科技 田春英 張建文 盧 陽 等 日光溫室草莓基質(zhì)栽培新技術(shù) 特種經(jīng)濟動植物 曲繼松 張麗娟 朱倩楠 等 水分脅迫對檸條基質(zhì)栽培黃瓜幼 苗生長及光合特性的影響 江蘇農(nóng)業(yè)學報 張 倩 王華芳 牡丹試管苗生根與移栽技術(shù)研究進展 園 藝學報 陸乙卜 龔記熠 肖 松 等 圓錐繡球種子離體萌發(fā)的培養(yǎng)條 件 貴州農(nóng)業(yè)科學 趙盈盈 八仙花葉片高效再生體系的建立及暗培養(yǎng)下生理變化 的研究 長沙 湖南農(nóng)業(yè)大學 江蘇農(nóng)業(yè)科學 年第 卷第 期