第15 卷 第4 期 Vol 15No 04 南 方 農(nóng) 業(yè) SouthChinaAgriculture 2021 年2 月 Feb 2021 收 稿 日 期 2020 11 02 基 金 項(xiàng) 目 江 蘇 省 大 學(xué) 生 實(shí) 踐 創(chuàng) 新 項(xiàng) 目 201913573017Z 南 京 市 現(xiàn) 代 種 業(yè) 發(fā) 展 項(xiàng) 目 2020118 6 作 者 簡(jiǎn) 介 朱 海 佳 1996 男 江 蘇 鹽 城 人 本 科 畢 業(yè) 于 金 陵 科 技 學(xué) 院 本 文 系 本 科 階 段 完 成 的 目 前 為 西 北 農(nóng) 林 科 技 大 學(xué) 在 讀 碩 士 研 究 生 研 究 方 向 為 蔬 菜 生 理 生 態(tài) E mail 1738628686 為 通 信 作 者 E mail 2717694017 朱 海 佳 崔 群 香 成 紅 林 等 單 倍 體 茄 子 雄 配 子 發(fā) 育 過 程 觀 察 及 育 性 分 析 J 南 方 農(nóng) 業(yè) 2021 15 04 6 12 單 倍 體 茄 子 雄 配 子 發(fā) 育 過 程 觀 察 及 育 性 分 析 朱 海 佳 1 崔 群 香 1 成 紅 林 1 趙 妍 1 何 蕓 1 邵 英 1 錢 麗 君 1 柏 文 軍 2 1 金 陵 科 技 學(xué) 院 江 蘇 南 京211169 2 江 寧 區(qū) 農(nóng) 業(yè) 農(nóng) 村 局 江 蘇 南 京211169 摘 要 以 茄 子 花 藥 培 養(yǎng) 再 生 的 單 倍 體 植 株D5 為 實(shí) 驗(yàn) 材 料 采 用 壓 片 法 和 冷 凍 切 片 法 對(duì) 其 花 粉 母 細(xì) 胞 的 減 數(shù) 分 裂 過 程 及 雄 配 子 體 的 形 態(tài) 和 活 力 等 進(jìn) 行 觀 察 綜 合 比 較 分 析 不 同 發(fā) 育 時(shí) 期 的 細(xì) 胞 學(xué) 及 形 態(tài) 特 征 并 用D4 D8 和D23 單 倍 體 植 株 對(duì) 減 數(shù) 分 裂 及 其 結(jié) 束 的 特 征 進(jìn) 行 了 驗(yàn) 證 結(jié) 果 表 明 D5 體 細(xì) 胞 染 色 體 數(shù) 目 為12 證 實(shí) 其 為 單 倍 體 植 株 茄 子 單 倍 體 花 粉 母 細(xì) 胞 的 胞 質(zhì) 分 裂 方 式 屬 于 同 時(shí) 型 四 分 體 以 正 四 面 體 型 或 十 字 交 叉 型 為 主 分 裂 末 期 常 形 成 大 小 不 一 的 小 孢 子 綜 合 證 實(shí) 單 倍 體 高 度 不 育 的 特 點(diǎn) D5 單 倍 體 植 株 花 粉 活 力 僅15 且 有 活 力 的 花 粉 形 狀 不 整 齊 其 果 實(shí) 褐 變 速 度 快 且 結(jié) 實(shí) 率 低 單 倍 體 植 株 花 粉 母 細(xì) 胞 減 數(shù) 分 裂 過 程 與 花 蕾 大 小 有 密 切 聯(lián) 系 當(dāng) 花 柄 基 部 至 合 抱 的 花 瓣 前 端 長(zhǎng) 度 較 花 萼 筒 長(zhǎng) 度 短1 2mm 時(shí) 是 觀 察D4 D5 D8 和D23 茄 子 花 粉 母 細(xì) 胞 減 數(shù) 分 裂 的 最 佳 時(shí) 期 此 期 的 花 蕾 形 態(tài) 特 征 是 花 瓣 筒 端 粗 度 明 顯 小 于 花 萼 片 基 部 的 花 蕾 粗 度 花 萼 前 端 的 個(gè) 別 裂 片 開 始 與 其 他 裂 片 分 離 當(dāng) 從 花 萼 側(cè) 面 觀 察 到 花 瓣 筒 時(shí) 減 數(shù) 分 裂 均 已 經(jīng) 完 成 關(guān) 鍵 詞 茄 子 單 倍 體 植 株 花 粉 母 細(xì) 胞 形 態(tài) 觀 察 減 數(shù) 分 裂 中 圖 分 類 號(hào) S641 1 文 獻(xiàn) 標(biāo) 志 碼 A DOI 10 19415 ki 1673 890 x 2021 04 002 茄 子 SolanummelongenaL 是 世 界 范 圍 內(nèi) 廣 泛 種 植 的 重 要 蔬 菜 作 物 在 亞 洲 蔬 菜 生 產(chǎn) 中 具 有 十 分 重 要 的 地 位 1 中 國 茄 子 栽 培 歷 史 久 遠(yuǎn) 是 茄 子 次 生 起 源 地 茄 子 類 型 和 品 種 眾 多 2 茄 子 果 實(shí) 營 養(yǎng) 豐 富 其 中 富 含 的 維 生 素E 維 生 素P 和 龍 葵 堿 等 成 分 可 以 起 到 抗 氧 化 等 保 健 作 用 3 自Guha 和Maheshwari 4 在1964 年 通 過 花 藥 培 養(yǎng) 獲 得 首 例 單 倍 體 植 株 以 來 運(yùn) 用 單 倍 體 技 術(shù) 逐 漸 成 為 育 種 上 的 熱 點(diǎn) 5 在 茄 子 上 Raina 和Iyer 6 首 次 通 過 花 藥 培 養(yǎng) 途 徑 獲 得 單 倍 體 植 株 研 究 表 明 單 倍 體 植 物 常 常 高 度 不 育 如 細(xì) 胞 學(xué) 鑒 定 表 明 甜 瓜 單 倍 體 植 株 的 雄 花 和 雌 花 均 敗 育 7 西 葫 蘆 單 倍 體 植 株 也 出 現(xiàn) 花 粉 敗 育 的 現(xiàn) 象 8 單 倍 體 具 有 較 高 的 研 究 價(jià) 值 但 有 性 繁 殖 保 存 困 難 需 要 加 倍 成 二 倍 體 后 才 能 有 效 保 存 和 研 究 利 用 茄 子 單 倍 體 植 株 加 倍 困 難 盡 管 能 夠 利 用 扦 插 等 方 式 進(jìn) 行 繁 殖 但 繁 殖 系 數(shù) 很 低 且 對(duì) 保 存 環(huán) 境 要 求 高 因 此 極 大 地 限 制 了 茄 子 單 倍 體 的 研 究 和 利 用 研 究 發(fā) 現(xiàn) 茄 子 單 倍 體 植 株 間 性 狀 差 異 明 顯 只 有 部 分 單 倍 體 植 株 能 夠 結(jié) 實(shí) 且 僅 極 少 量 植 株 的 果 實(shí) 中 有 成 熟 度 較 高 的 不 育 種 子 為 了 探 討 茄 子 單 倍 體 植 株 難 以 座 果 和 種 子 敗 育 的 原 因 從 而 有 針 對(duì) 性 地 采 取 措 施 提 高 花 粉 和 卵 細(xì) 胞 活 力 種 子 活 力 實(shí) 現(xiàn) 自 交 6朱 海 佳 崔 群 香 成 紅 林 趙 妍 何 蕓 邵 英 錢 麗 君 柏 文 軍 單 倍 體 茄 子 雄 配 子 發(fā) 育 過 程 觀 察 及 育 性 分 析 繁 殖 有 必 要 對(duì) 單 倍 體 植 株 的 小 孢 子 產(chǎn) 生 和 雄 配 子 體 發(fā) 育 過 程 進(jìn) 行 詳 細(xì) 觀 察 分 析 目 前 關(guān) 于 茄 子 單 倍 體 植 株 減 數(shù) 分 裂 雄 配 子 體 發(fā) 育 過 程 及 花 粉 活 力 的 研 究 未 見 文 獻(xiàn) 報(bào) 道 本 研 究 以 花 藥 培 養(yǎng) 再 生 的 茄 子 二 倍 體 植 株84 1 自 交 后 產(chǎn) 生 的 單 倍 體 植 株D5 為 試 材 采 用 冷 凍 切 片 法 和 壓 片 法 等 對(duì) 其 花 粉 母 細(xì) 胞 減 數(shù) 分 裂 和 雄 配 子 體 發(fā) 育 過 程 進(jìn) 行 觀 察 以 揭 示 其 花 粉 和 種 子 活 力 降 低 的 原 因 試 圖 為 單 倍 體 植 株 的 有 效 利 用 提 供 思 路 1 材 料 與 方 法 1 1 實(shí) 驗(yàn) 材 料 供 試 材 料 為 本 實(shí) 驗(yàn) 室 培 育 保 存 的 單 倍 體 植 株D5 該 植 株 春 夏 季 開 花 但 不 結(jié) 實(shí) 而 可 在 秋 季 低 溫 環(huán) 境 下 座 果 為 探 索 總 結(jié) 從D5 植 株 獲 得 的 減 數(shù) 分 裂 結(jié) 束 前 后 的 花 蕾 特 征 選 擇 由 花 藥 培 養(yǎng) 直 接 再 生 出 的 單 倍 體 植 株D4 D8 和D23 的 花 蕾 用 壓 片 法 和 染 色 法 進(jìn) 行 觀 察 1 2 花 蕾 形 態(tài) 觀 察 為 了 探 究 花 蕾 形 態(tài) 與 細(xì) 胞 發(fā) 育 階 段 間 的 聯(lián) 系 采 集D5 D8 和D23 植 株 上 不 同 大 小 的 花 蕾 并 將 其 編 號(hào) 用 游 標(biāo) 卡 尺 測(cè) 定D5 花 蕾 總 長(zhǎng) 萼 筒 長(zhǎng) 花 萼 基 部 至 抱 合 的 花 瓣 前 端 長(zhǎng) 度 花 萼 最 粗 部 位 的 直 徑 合 生 花 瓣 直 徑 等 并 通 過 冷 凍 切 片 法 觀 察 其 細(xì) 胞 發(fā) 育 時(shí) 期 根 據(jù) 實(shí) 驗(yàn) 結(jié) 果 總 結(jié)D5 植 株 的 花 蕾 減 數(shù) 分 裂 前 后 的 形 態(tài) 特 征 并 用D4 D8 和D23 植 株 上 的 花 蕾 進(jìn) 行 驗(yàn) 證 驗(yàn) 證 時(shí) 選 取 不 同 形 態(tài) 的 花 蕾 用 壓 片 法 方 法 見 1 5 觀 察 花 藥 中 與 生 殖 相 關(guān) 的 細(xì) 胞 發(fā) 育 時(shí) 期 然 后 進(jìn) 行 對(duì) 應(yīng) 分 析 方 法 見 1 5 1 3 細(xì) 胞 發(fā) 育 時(shí) 期 鑒 定 對(duì)D5 各 個(gè) 發(fā) 育 時(shí) 期 的 花 藥 進(jìn) 行 冷 凍 切 片 法 觀 測(cè) 冷 凍 切 片 法 采 用 新 鮮 的 花 藥 使 用 包 埋 劑 將 花 藥 覆 蓋 并 完 全 冷 凍 后 置 于 切 片 機(jī) 上 切 片 將 切 片 轉(zhuǎn) 移 到 載 玻 片 上 用 卡 寶 品 紅 染 色 隨 后 用Nikon80i 光 學(xué) 顯 微 鏡 觀 察 鑒 定 1 4 花 粉 活 力 的 測(cè) 定 取D5 植 株 上 盛 開 花 朵 的 花 粉 置 于 載 玻 片 上 參 照 申 書 興 9 的 方 法 用TTC 染 色 法 測(cè) 定 花 粉 的 活 力 其 中 被 染 成 紫 紅 色 的 花 粉 為 有 活 力 的 花 粉 無 法 被 染 色 的 花 粉 為 無 活 力 的 花 粉 計(jì) 數(shù)5 個(gè) 視 野 里 的 花 粉 粒 總 數(shù) 不 少 于1000 粒 根 據(jù) 染 色 結(jié) 果 計(jì) 算 花 粉 的 活 力 染 色 花 粉 粒 數(shù) 花 粉 粒 總 數(shù) 100 1 5 減 數(shù) 分 裂 鑒 定 和 染 色 體 計(jì) 數(shù) 使 用 壓 片 法 對(duì)D4 D8 和D23 各 個(gè) 發(fā) 育 時(shí) 期 的 花 藥 進(jìn) 行 觀 測(cè) 并 對(duì)D5 進(jìn) 行 減 數(shù) 分 裂 鑒 定 和 染 色 體 計(jì) 數(shù) 參 照 申 書 興 9 的 方 法 采 用 卡 諾 固 定 液 固 定 花 藥 卡 寶 品 紅 染 色 液 染 色 觀 察 2 結(jié) 果 與 分 析 2 1 花 蕾 形 態(tài) 及 細(xì) 胞 發(fā) 育 階 段 鑒 定 D5 花 蕾 測(cè) 定 結(jié) 果 見 表1 觀 察 發(fā) 現(xiàn) 4 號(hào) 和5 號(hào) 花 蕾 中 花 粉 母 細(xì) 胞 處 于 減 數(shù) 分 裂 時(shí) 期 6 號(hào) 之 后 的 花 蕾 都 處 于 小 孢 子 發(fā) 育 時(shí) 期 茄 子 花 粉 母 細(xì) 胞 減 數(shù) 分 裂 過 程 與 花 蕾 大 小 有 密 切 關(guān) 系 當(dāng) 花 萼 基 部 至 合 抱 的 花 瓣 前 端 長(zhǎng) 度 比 其 至 花 萼 筒 長(zhǎng) 度 短1 2mm 時(shí) 觀 察 減 數(shù) 分 裂 效 果 較 好 此 時(shí) 花 萼 裂 片 前 端 基 本 抱 合 僅 個(gè) 別 裂 片 與 其 他 裂 片 分 離 當(dāng) 多 數(shù) 花 萼 裂 片 開 始 分 離 時(shí) 則 減 數(shù) 分 裂 結(jié) 束 進(jìn) 入 小 孢 子 發(fā) 育 階 段 用D4 D8 和D23 驗(yàn) 證 的 結(jié) 果 見 圖1 和 表2 圖1 中 黑 色 箭 頭 所 示 的D4 花 蕾 中 的 母 細(xì) 胞 處 于 減 數(shù) 分 裂 時(shí) 期 而 其 余 花 蕾 均 已 經(jīng) 進(jìn) 入 小 孢 子 及 隨 后 的 發(fā) 育 階 段 白 色 箭 頭 所 示 的 花 蕾 盡 管 與D4 上 采 摘 的 最 小 花 蕾 大 小 相 似 但 其 已 經(jīng) 完 成 減 數(shù) 分 裂 仔 細(xì) 觀 察 發(fā) 現(xiàn) 其 花 瓣 筒 已 經(jīng) 露 出 花 萼 筒 其 余 所 有 花 瓣 筒 超 出 花 萼 筒 的 花 蕾 均 已 經(jīng) 完 成 減 數(shù) 分 裂 D8 植 株 上 采 摘 的1 號(hào) 2 號(hào) 3 號(hào) 7 號(hào) 和8 號(hào) 這5 個(gè) 花 蕾 中 花 粉 母 細(xì) 胞 處 于 減 數(shù) 分 裂 時(shí) 期 其 余11 個(gè) 花 蕾 均 完 成 分 裂 D23 植 株 上 的1 號(hào) 2 號(hào) 4 號(hào) 和10 號(hào) 這4 個(gè) 花 蕾 處 于 減 數(shù) 分 裂 時(shí) 期 其 余6 個(gè) 花 蕾 中 的 花 粉 母 細(xì) 胞 均 完 成 分 裂 形 態(tài) 特 征 與 發(fā) 育 時(shí) 期 的 相 關(guān) 性 D4 D8 D23 植 株 與 D5 植 株 類 似 花 萼 裂 片 前 端 基 本 抱 合 僅 個(gè) 別 裂 片 與 7第15 卷 第4 期 Vol 15No 04 南 方 農(nóng) 業(yè) SouthChinaAgriculture 2021 年2 月 Feb 2021 花 蕾 編 號(hào) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 花 蕾 總 長(zhǎng) mm 10 08 9 67 12 92 12 06 14 69 11 87 14 31 萼 筒 長(zhǎng) mm 7 35 6 74 8 56 8 95 11 52 8 69 9 67 8 06 8 39 11 29 8 69 10 30 12 18 合 生 花 瓣 長(zhǎng) mm 6 13 6 49 7 76 6 87 10 35 9 27 10 70 8 72 10 54 13 64 13 54 16 60 12 91 花 蕾 直 徑 mm 3 46 3 15 4 06 3 57 3 53 3 39 4 99 3 72 3 67 5 80 5 13 6 15 5 07 細(xì) 胞 發(fā) 育 階 段 造 孢 細(xì) 胞 花 粉 母 細(xì) 胞 分 裂 減 數(shù) 分 裂 減 數(shù) 分 裂 單 核 早 期 四 分 體 單 核 小 孢 子 小 孢 子 小 孢 子 小 孢 子 小 孢 子 小 孢 子 小 孢 子 成 熟 花 粉 粒 表1 茄 子 單 倍 體 植 株D5 不 同 發(fā) 育 時(shí) 期 的 花 蕾 性 狀 比 較 圖1 茄 子 單 倍 體 植 株D4 D8 和D23 的 花 蕾 形 態(tài) 植 株 代 號(hào) D8 花 蕾 編 號(hào) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 16 發(fā) 育 時(shí) 期 減 數(shù) 分 裂 減 數(shù) 分 裂 減 數(shù) 分 裂 小 孢 子 小 孢 子 小 孢 子 四 分 體 四 分 體 和 小 孢 子 小 孢 子 小 孢 子 植 株 代 號(hào) D23 花 蕾 編 號(hào) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 發(fā) 育 時(shí) 期 減 數(shù) 分 裂 減 數(shù) 分 裂 薄 壁 小 孢 子 四 分 體 較 厚 壁 小 孢 子 較 薄 壁 小 孢 子 較 薄 壁 小 孢 子 厚 壁 小 孢 子 厚 壁 且 較 大 小 孢 子 減 數(shù) 分 裂 表2 不 同 單 倍 體 茄 子 植 株 花 蕾 形 態(tài) 與 細(xì) 胞 發(fā) 育 時(shí) 期 的 關(guān) 系 其 他 裂 片 分 離 時(shí) 處 于 減 數(shù) 分 裂 時(shí) 期 當(dāng) 多 數(shù) 花 萼 裂 片 開 始 分 離 時(shí) 則 減 數(shù) 分 裂 結(jié) 束 進(jìn) 入 小 孢 子 發(fā) 育 階 段 該 指 標(biāo) 是 否 適 用 于 二 倍 體 茄 子 的 花 蕾 有 待 于 驗(yàn) 證 2 2 單 倍 體 花 藥 小 孢 子 和 花 粉 形 態(tài) 鑒 定 對(duì) 花 藥 和 花 粉 進(jìn) 一 步 觀 察 發(fā) 現(xiàn) 單 倍 體 的 花 藥 結(jié) 8朱 海 佳 崔 群 香 成 紅 林 趙 妍 何 蕓 邵 英 錢 麗 君 柏 文 軍 單 倍 體 茄 子 雄 配 子 發(fā) 育 過 程 觀 察 及 育 性 分 析 構(gòu) 正 常 圖2 1 但 花 粉 母 細(xì) 胞 由 于 減 數(shù) 分 裂 不 正 常 產(chǎn) 生 不 正 常 的 四 分 體 甚 至 二 分 體 圖2 2 2 4 2 5 小 孢 子 多 數(shù) 不 能 正 常 發(fā) 育 圖2 3 2 6 僅 觀 察 到 單 核 靠 邊 期 圖2 7 和 少 量 二 核 花 粉 多 數(shù) 小 孢 子 解 體 圖2 3 最 終 只 有 少 量 的 花 粉 發(fā) 育 成 具 有3 萌 發(fā) 溝 的 形 態(tài) 正 常 的 成 熟 花 粉 圖2 8 圖2 單 倍 體 茄 子 花 藥 小 孢 子 和 花 粉 粒 形 態(tài) 鑒 定 1 正 常 花 藥 2 減 數(shù) 分 裂 產(chǎn) 生 的 各 種 小 孢 子 3 大 小 不 同 的 花 粉 粒 4 5 四 分 體 6 大 小 不 同 的 小 孢 子 7 單 核 靠 邊 期 的 花 粉 粒 8 正 常 花 粉 粒 2 3 單 倍 體 植 株 的 花 粉 活 力 鑒 定 花 粉 經(jīng)TTC 染 色 后 在 光 學(xué) 顯 微 鏡 下 觀 察 發(fā) 現(xiàn) 花 粉 粒 的 大 小 和 形 狀 有 明 顯 的 不 同 其 中 有 活 力 的 花 粉 粒 邊 緣 為 紅 色 中 部 為 黃 褐 色 而 非 活 性 花 粉 則 全 部 為 黃 褐 色 見 圖3 箭 頭 示 有 活 力 的 花 粉 通 過 計(jì) 數(shù) 發(fā) 現(xiàn) 有 活 力 的 花 粉 占15 形 狀 和 大 小 差 異 較 大 其 結(jié) 出 果 實(shí) 數(shù) 量 少 果 實(shí) 褐 變 速 度 快 果 實(shí) 無 籽 不 能 產(chǎn) 生 后 代 2 4 單 倍 體 植 株D5 減 數(shù) 分 裂 過 程 及 染 色 體 數(shù) 目 鑒 定 由 于 冷 凍 切 片 采 取 的 花 蕾 僅 切 到 減 數(shù) 分 裂 前 期 四 分 體 和 小 孢 子 時(shí) 期 的 花 藥 因 此 鑒 定 染 色 體 數(shù) 目 及 對(duì) 減 數(shù) 分 裂 整 個(gè) 過 程 的 觀 察 主 要 依 據(jù) 壓 片 觀 察 的 結(jié) 果 壓 片 結(jié) 果 顯 示 單 倍 體 植 株D5 染 色 體 復(fù) 制 正 常 但 聯(lián) 會(huì) 開 始 即 出 現(xiàn) 與 二 倍 體 不 同 的 現(xiàn) 象 中 期 單 價(jià) 體 在 細(xì) 胞 中 的 排 列 位 置 分 散 見 圖4 4 但 能 夠 清 楚 地 區(qū) 分 出12 個(gè) 單 價(jià) 體 見 圖5 1 5 2 5 3 因 此 D5 植 株 的 體 細(xì) 胞 染 色 體 數(shù) 目 為12 證 明 該 植 株 確 實(shí) 為 單 倍 體 由 圖5 可 知 單 倍 體 植 株D5 減 數(shù) 分 裂 過 程 不 正 常 并 不 一 定 產(chǎn) 生 具 有4 個(gè) 細(xì) 胞 的 四 分 體 圖5 14 示5 核 花 粉 母 細(xì) 胞 可 能 產(chǎn) 生 各 種 類 型 的 四 分 體 圖5 18 2 5 D5 植 株 花 粉 敗 育 的 原 因 在 觀 察 單 倍 體 植 株D5 的 減 數(shù) 分 裂 過 程 中 發(fā) 現(xiàn) 中 期 細(xì) 胞 中 有12 個(gè) 單 價(jià) 體 證 實(shí) 該 植 株 確 實(shí) 為 單 倍 體 植 株 但 中 期 的12 個(gè) 單 價(jià) 體 并 未 排 列 在 赤 道 面 附 圖3 D5 植 株 的 花 粉 活 力 9第15 卷 第4 期 Vol 15No 04 南 方 農(nóng) 業(yè) SouthChinaAgriculture 2021 年2 月 Feb 2021 近 且 排 列 紊 亂 染 色 體 聚 成2 團(tuán) 或3 團(tuán) 或 各 自 分 散 見 圖5 1 至5 7 根 據(jù) 中 期 染 色 體 分 布 情 況 見 圖5 14 5 15 推 測(cè) 后 期I 以 單 價(jià) 體 分 離 為 主 見 圖5 7 至5 12 存 在 個(gè) 別 單 價(jià) 體 染 色 單 體 分 離 現(xiàn) 象 見 圖5 13 單 價(jià) 體 分 離 形 式 各 異 以5 7 分 離 多 見 圖5 15 表 示5 7 分 離 的 中 期 圖5 16 和 圖5 17 表 示 后 期 顯 示 后 期 存 在 非 染 色 單 體 分 離 現(xiàn) 象 導(dǎo) 致 四 分 體 中 染 色 體 數(shù) 目 嚴(yán) 重 失 衡 產(chǎn) 生 形 態(tài) 不 正 常 的 四 分 體 見 圖5 18 甚 至 是 二 分 體 從 減 數(shù) 分 裂 中 期 開 始 D5 植 株 的 減 數(shù) 分 裂 就 出 現(xiàn) 不 正 常 未 發(fā) 現(xiàn) 正 常 的 后 期 細(xì) 胞 說 明 植 株 敗 育 時(shí) 期 在 四 分 體 形 成 以 前 因 此 敗 育 比 較 徹 底 推 測(cè) 有 活 力 的 花 粉 主 要 來 源 于 后 期I 按 照12 0 或11 1 分 離 的 花 粉 母 細(xì) 胞 這 兩 類 分 離 方 式 占 花 粉 母 細(xì) 胞 的 比 例 為 2 7 約 產(chǎn) 生1 7 有 活 力 的 花 粉 與 觀 察 統(tǒng) 計(jì) 出 的 花 粉 活 力 數(shù) 值15 較 為 接 近 3 討 論 單 倍 體 是 進(jìn) 行 體 細(xì) 胞 遺 傳 研 究 和 突 變 育 種 的 理 想 材 料 花 藥 和 小 孢 子 培 養(yǎng) 技 術(shù) 則 是 獲 得 單 倍 體 的 重 要 途 徑 10 11 油 菜 小 孢 子 培 養(yǎng) 獲 得 的 單 倍 體 可 應(yīng) 用 于 雙 單 倍 體 育 種 誘 變 育 種 和 轉(zhuǎn) 基 因 育 種 等 研 究 12 相 對(duì) 于 正 常 植 株 單 倍 體 植 株 僅 含 有 半 數(shù) 的 染 色 體 因 此 單 倍 體 植 株 比 正 常 植 株 在 形 態(tài) 上 較 為 矮 小 且 生 育 率 低 同 時(shí) 在 后 代 遺 傳 及 生 理 生 化 上 也 表 現(xiàn) 出 一 定 的 差 異 13 14 張 新 宇 等 研 究 表 明 山 羊 豆 屬 植 物 減 數(shù) 分 裂 過 程 存 在 一 定 規(guī) 律 與 花 蕾 大 小 和 顏 色 密 切 相 關(guān) 15 草 本 圖4 單 倍 體 植 株D5 花 粉 母 細(xì) 胞 減 數(shù) 分 裂 過 程 1 偶 線 期 2 粗 線 期 3 雙 線 期 4 終 變 期 或 中 期 5 中 期 6 后 期I 7 末 期 8 中 期 9 11 后 期 12 14 末 期 15 四 分 體 圖5 D5 植 株 單 倍 體 減 數(shù) 分 裂 過 程 發(fā) 生 敗 育 1 6 終 變 期 或 中 期 7 8 單 價(jià) 體5 7 分 離 9 單 價(jià) 體12 0 分 離 10 單 價(jià) 體11 1 分 離 11 單 價(jià) 體10 2 分 離 12 單 價(jià) 體4 8 分 離 13 單 價(jià) 體 和 染 色 單 體 分 離 14 單 價(jià) 體6 6 分 離 15 中 期 單 價(jià) 體5 7 分 離 16 17 后 期 單 價(jià) 體 與 染 色 體 單 體 分 離 18 形 態(tài) 和 大 小 各 異 的 四 分 體 1 0朱 海 佳 崔 群 香 成 紅 林 趙 妍 何 蕓 邵 英 錢 麗 君 柏 文 軍 單 倍 體 茄 子 雄 配 子 發(fā) 育 過 程 觀 察 及 育 性 分 析 植 物 關(guān) 蒼 術(shù) 的 減 數(shù) 分 裂 與 花 蕾 大 小 有 密 切 關(guān) 系 在 花 蕾 長(zhǎng)4 12mm 時(shí) 花 粉 母 細(xì) 胞 進(jìn) 入 減 數(shù) 分 裂 時(shí) 期 16 本 研 究 發(fā) 現(xiàn) 茄 子 花 粉 母 細(xì) 胞 減 數(shù) 分 裂 過 程 也 與 花 蕾 大 小 有 密 切 關(guān) 系 當(dāng) 花 柄 基 部 至 合 抱 的 花 瓣 前 端 長(zhǎng) 度 比 花 柄 基 部 至 花 萼 筒 長(zhǎng) 度 短1 2mm 時(shí) 觀 察 減 數(shù) 分 裂 效 果 較 好 此 期 花 蕾 的 形 態(tài) 特 征 是 花 萼 裂 片 前 端 基 本 抱 合 僅 個(gè) 別 裂 片 與 其 他 裂 片 分 離 可 以 以 此 作 為 減 數(shù) 分 裂 觀 測(cè) 取 材 的 依 據(jù) 也 是 進(jìn) 行 秋 水 仙 素 處 理 花 蕾 誘 導(dǎo) 染 色 體 數(shù) 目 加 倍 的 最 佳 時(shí) 期 而 當(dāng) 多 數(shù) 花 萼 裂 片 開 始 分 離 時(shí) 則 減 數(shù) 分 裂 結(jié) 束 進(jìn) 入 小 孢 子 發(fā) 育 階 段 對(duì) 于 二 倍 體 或 多 倍 體 植 株 這 是 采 摘 花 蕾 進(jìn) 行 花 藥 或 小 孢 子 培 養(yǎng) 的 最 小 花 蕾 指 標(biāo) 但 該 指 標(biāo) 是 否 適 用 于 所 有 不 同 倍 性 的 茄 子 植 株 還 需 要 進(jìn) 一 步 驗(yàn) 證 研 究 發(fā) 現(xiàn) 單 倍 體 茄 子 植 株 由 于 減 數(shù) 分 裂 不 正 常 不 能 形 成 正 常 的 小 孢 子 因 此 不 適 宜 進(jìn) 行 花 藥 培 養(yǎng) 或 小 孢 子 培 養(yǎng) 本 研 究 所 用 的D5 單 倍 體 植 株 春 季 不 結(jié) 實(shí) 至 秋 季11 月 開 始 坐 果 其 花 粉 活 力 極 低 15 切 片 觀 察 顯 示 單 倍 體 茄 子 的 胞 質(zhì) 分 裂 方 式 屬 于 同 時(shí) 型 后 期 II 以 單 價(jià) 體 分 離 為 主 也 存 在 染 色 單 體 分 離 現(xiàn) 象 這 可 能 是 造 成 該 單 倍 體 植 株 不 育 的 主 要 原 因 分 裂 末 期 常 形 成 大 小 不 一 的 小 孢 子 且 多 數(shù) 小 孢 子 處 于 單 核 靠 邊 期 其 后 發(fā) 育 即 表 現(xiàn) 不 正 常 逐 漸 解 體 敗 育 證 實(shí) 單 倍 體 高 度 不 育 的 特 點(diǎn) 張 彩 霞 等 研 究 表 明 減 數(shù) 分 裂 過 程 中 多 分 孢 子 落 后 染 色 體 等 異 常 現(xiàn) 象 會(huì) 不 同 程 度 地 促 使 小 孢 子 中 遺 傳 物 質(zhì) 不 均 衡 從 而 形 成 沒 有 育 性 的 孢 子 這 是 引 起 花 粉 育 性 低 的 重 要 原 因 17 本 研 究 所 用 的D5 植 株 春 季 不 能 結(jié) 實(shí) 是 否 與 花 粉 活 力 更 低 有 關(guān) 需 要 測(cè) 定 全 生 育 期 花 粉 活 力 才 能 驗(yàn) 證 另 外 探 討 環(huán) 境 等 對(duì) 花 粉 活 力 的 影 響 并 采 取 措 施 提 高 花 粉 活 力 使 單 倍 體 植 株 能 夠 通 過 有 性 繁 殖 加 倍 為 二 倍 體 是 提 高 茄 子 單 倍 體 植 株 保 存 和 利 用 效 率 的 新 思 路 和 新 途 徑 值 得 進(jìn) 一 步 研 究 參 考 文 獻(xiàn) 1 孫 保 娟 黎 振 興 李 植 良 茄 子 分 子 生 物 學(xué) 研 究 進(jìn) 展 J 吉 林 蔬 菜 2010 04 42 46 2 劉 丹 崔 彥 玲 潛 宗 偉 茄 子 種 業(yè) 現(xiàn) 狀 及 遺 傳 育 種 研 究 進(jìn) 展 J 北 方 園 藝 2019 01 165 170 3 PlazasM And jarI VilanovaS etal Breeding for chlorogenic acid content in eggplant interest andprospects J NotulaeBotanicaeHortiAgrobo taniciCluj Napoca 2013 41 01 26 35 4 GuhaS MaheshwariSC Invitroproductionofem bryosfromanthersofdatura J Nature 1964 204 4957 497 497 5 石 江 鵬 張 春 芬 李 芙 蓉 等 園 藝 植 物 小 孢 子 培 養(yǎng) 技 術(shù) 研 究 進(jìn) 展 J 山 西 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 2017 45 04 669 673 6 RainaSK IyerRD Differentiationofdiploidplants from pollen callus in anther cultures of Solanum melongenaL J JournalofPlantBreeding 1973 70 04 275 280 7 張 永 兵 甜 瓜 細(xì) 胞 遺 傳 學(xué) 單 倍 體 創(chuàng) 制 及 抗 蔓 枯 病 分 子 標(biāo) 記 D 南 京 南 京 農(nóng) 業(yè) 大 學(xué) 2007 8 蘇 敏 張 國 裕 趙 尊 練 等 西 葫 蘆 單 倍 體 誘 導(dǎo) 及 分 子 檢 測(cè) 鑒 定 J 西 北 農(nóng) 業(yè) 學(xué) 報(bào) 2011 20 10 79 84 9 申 書 興 園 藝 植 物 育 種 學(xué) 實(shí) 驗(yàn) 指 導(dǎo) 書 M 北 京 中 國 農(nóng) 業(yè) 出 版 社 2000 10 馬 欣 申 書 興 連 勇 等 茄 子 花 藥 和 游 離 小 孢 子 培 養(yǎng) 技 術(shù) 研 究 進(jìn) 展 J 長(zhǎng) 江 蔬 菜 2006 07 39 41 11 盧 寶 榮 花 粉 單 倍 體 的 遺 傳 品 質(zhì) 花 藥 培 養(yǎng) 是 否 降 低 了 育 種 材 料 的 農(nóng) 藝 價(jià) 值 J 遺 傳 1993 02 42 44 12 星 曉 蓉 甘 藍(lán) 型 油 菜 小 孢 子 培 養(yǎng) 技 術(shù) 及 其 單 倍 體 應(yīng) 用 研 究 進(jìn) 展 J 中 國 種 業(yè) 2011 02 20 22 13 李 栒 染 色 體 遺 傳 導(dǎo) 論 M 長(zhǎng) 沙 湖 南 科 學(xué) 技 術(shù) 出 版 社 1991 14 王 葆 生 劉 湘 萍 廉 勇 等 單 倍 體 育 種 技 術(shù) 研 究 進(jìn) 展 J 北 方 農(nóng) 業(yè) 學(xué) 報(bào) 2018 46 05 44 49 15 張 新 宇 王 贊 趙 茂 林 等 兩 種 山 羊 豆 屬 植 物 花 1 1第15 卷 第4 期 Vol 15No 04 南 方 農(nóng) 業(yè) SouthChinaAgriculture 2021 年2 月 Feb 2021 粉 形 態(tài) 與 花 粉 母 細(xì) 胞 減 數(shù) 分 裂 行 為 觀 察 J 植 物 研 究 2008 28 05 540 546 16 樸 錦 具 紅 光 樸 鐘 云 關(guān) 蒼 術(shù) 花 粉 母 細(xì) 胞 減 數(shù) 分 裂 及 其 雄 配 子 體 發(fā) 育 研 究 J 西 北 植 物 學(xué) 報(bào) 2015 35 08 1547 1553 17 張 彩 霞 明 軍 劉 春 等 百 合 花 粉 母 細(xì) 胞 減 數(shù) 分 裂 異 常 現(xiàn) 象 觀 測(cè) 分 析 J 生 物 學(xué) 通 報(bào) 2010 45 05 45 47 責(zé) 任 編 輯 丁 志 祥 湖 南 省 做 大 做 強(qiáng) 創(chuàng) 品 牌 十 三 五 期 間 湖 南 省 大 力 推 進(jìn) 區(qū) 域 公 用 品 牌 一 縣 一 特 品 牌 兩 品 一 標(biāo) 建 設(shè) 小 而 美 農(nóng) 產(chǎn) 品 品 牌 建 設(shè) 農(nóng) 業(yè) 優(yōu) 勢(shì) 特 色 千 億 產(chǎn) 業(yè) 發(fā) 展 邁 出 了 新 步 伐 農(nóng) 業(yè) 品 牌 建 設(shè) 呈 現(xiàn) 良 好 的 發(fā) 展 態(tài) 勢(shì) 十 三 五 期 間 湖 南 品 牌 建 設(shè) 成 效 突 出 湘 贛 紅 品 牌 首 期 授 權(quán)57 個(gè) 農(nóng) 業(yè) 企 業(yè) 使 用 授 權(quán) 產(chǎn) 品 涵 蓋 茶 葉 茶 油 蔬 菜 水 果 糧 食 畜 牧 中 藥 材 加 工 制 品 等8 個(gè) 品 類80 個(gè) 單 品 其 中 獲 得 綠 色 食 品 認(rèn) 證 有 機(jī) 食 品 認(rèn) 證 和 國 家 農(nóng) 產(chǎn) 品 地 理 標(biāo) 志 認(rèn) 證 的 產(chǎn) 品 達(dá) 到28 個(gè) 湖 南 紅 茶 市 場(chǎng) 不 斷 擴(kuò) 大 2020 年 產(chǎn) 量 達(dá) 到7 萬 噸 產(chǎn) 值 達(dá) 到200 億 元 湘 江 源 蔬 菜 公 用 品 牌 已 授 牌66 家 企 業(yè) 種 植 面 積1 67 萬 公 頃 安 化 黑 茶 品 牌 估 價(jià)32 99 億 元 獲 評(píng) 中 國 十 大 茶 葉 區(qū) 域 公 用 品 牌 湖 南 十 大 農(nóng) 業(yè) 品 牌 湖 南 茶 油 獲 中 國 糧 油 十 大 影 響 力 公 共 品 牌 榮 譽(yù) 岳 陽 黃 茶 炎 陵 黃 桃 華 容 芥 菜 常 德 香 米 石 門 柑 橘 汝 城 朝 天 椒 臨 武 鴨 南 縣 小 龍 蝦 安 化 黑 茶 邵 陽 茶 油 洞 口 雪 峰 蜜 橘 等 特 色 公 用 品 牌 入 選 中 國 農(nóng) 業(yè) 品 牌 目 錄 2019 農(nóng) 產(chǎn) 品 區(qū) 域 公 用 品 牌 在 中 國 特 色 農(nóng) 產(chǎn) 品 優(yōu) 勢(shì) 區(qū) 創(chuàng) 建 方 面 湖 南 先 后 創(chuàng) 建 了 安 化 黑 茶 邵 陽 茶 油 華 容 芥 菜 汝 城 朝 天 椒 湘 潭 湘 蓮 衡 陽 茶 油 黔 陽 冰 糖 橙 邵 東 玉 竹 炎 陵 黃 桃 南 縣 小 龍 蝦 保 靖 黃 金 茶 等 十 三 五 期 間 全 省 兩 品 一 標(biāo) 工 作 以 提 升 品 質(zhì) 打 造 品 牌 為 主 線 嚴(yán) 格 認(rèn) 證 審 查 程 序 實(shí) 現(xiàn) 了 兩 品 一 標(biāo) 認(rèn) 證 數(shù) 量 產(chǎn) 品 質(zhì) 量 品 牌 效 應(yīng) 經(jīng) 濟(jì) 效 益 齊 頭 并 進(jìn) 截 至2020 年 底 湖 南 省 綠 色 食 品 有 機(jī) 農(nóng) 產(chǎn) 品 和 農(nóng) 產(chǎn) 品 地 理 標(biāo) 志 有 效 總 數(shù) 達(dá) 到2912 個(gè) 其 中 綠 色 食 品2554 個(gè) 有 機(jī) 農(nóng) 產(chǎn) 品242 個(gè) 農(nóng) 產(chǎn) 品 地 理 標(biāo) 志116 個(gè) 成 功 創(chuàng) 建 綠 色 食 品 原 料 基 地35 個(gè) 綠 色 食 品 原 料 基 地 總 面 積33 33 萬 公 頃 支 持 建 設(shè) 綠 色 食 品 示 范 標(biāo) 準(zhǔn) 化 基 地118 個(gè) 開 展 地 標(biāo) 工 程 建 設(shè) 茅 巖 莓 茶 湘 黃 雞 沙 子 嶺 豬 等 地 標(biāo) 產(chǎn) 品 已 成 為 貧 困 地 區(qū) 實(shí) 施 一 縣 一 品 戰(zhàn) 略 帶 領(lǐng) 脫 貧 致 富 助 推 鄉(xiāng) 村 振 興 的 支 柱 產(chǎn) 業(yè) 來 源 中 國 農(nóng) 業(yè) 信 息 網(wǎng) 1 2