浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)Acta Agriculturae Zhejiangensis 2021 33 4 661 669 h p z nyxb cn 王國(guó)榮 馮曉曉 吳慧明 等 芹菜莖基腐病病原菌鑒定 消長(zhǎng)動(dòng)態(tài)調(diào)查與防治藥劑篩選 J 浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào) 2021 33 4 661 669 DOI 10 3969 issn 1004 1524 2021 03 11 收稿日期 2020 07 14 基金項(xiàng)目 浙江省 三農(nóng)六方 科技協(xié)作項(xiàng)目 CT B F180706LW SN 1 浙江省重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃 2020C02027 作者簡(jiǎn)介 王國(guó)榮 1970 男 浙江蕭山人 農(nóng)業(yè)推廣碩士 高級(jí)農(nóng)藝師 長(zhǎng)期從事植保技術(shù)推廣工作 E m il 595902466 qq com 通信作者 鄭永利 E m il yonglizheng ye h ne 芹菜莖基腐病病原菌鑒定 消長(zhǎng)動(dòng)態(tài)調(diào)查與防治藥劑篩選 王國(guó)榮1 馮曉曉2 吳慧明3 曹婷婷4 李 倩5 鄭永利6 1 浙江省杭州市蕭山區(qū)農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心 浙江杭州311203 2 浙江大學(xué)農(nóng)業(yè)試驗(yàn)站 浙江杭州310058 3 浙江農(nóng)林大學(xué)農(nóng)業(yè)與食 品科學(xué)學(xué)院 浙江杭州311300 4 浙江省植保檢疫與農(nóng)藥管理總站 浙江杭州310020 5 中國(guó)計(jì)量大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 浙江杭州 310018 6 浙江省農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全中心 浙江杭州310003 摘 要 為探明芹菜莖基腐病科學(xué)防控技術(shù) 于2017 2018年在浙江省杭州市系統(tǒng)觀測(cè)了芹菜莖基腐病田 間病情自然消長(zhǎng)動(dòng)態(tài) 采取組織分離 形態(tài)和系統(tǒng)發(fā)育分析 菌絲懸浮液接種等方法對(duì)病原菌進(jìn)行了分離鑒 定和致病性測(cè)定 采用菌絲生長(zhǎng)速率法測(cè)定了29種常用殺菌劑對(duì)芹菜莖基腐病病原菌的抑制率 并開(kāi)展了 相關(guān)田間藥效試驗(yàn) 結(jié)果表明 芹菜莖基腐病在芹菜上普遍發(fā)生 6 9月是該病的發(fā)病高峰期 引起芹菜莖 基腐病的病原菌為尖孢鐮刀菌 甲基硫菌靈和戊唑醇及其復(fù)配制劑對(duì)芹菜莖基腐病菌的菌絲生長(zhǎng)抑制效果 最佳 75 肟菌 戊唑醇WDG或70 甲基硫菌靈WP對(duì)芹菜莖基腐病的田間防效較好 關(guān)鍵詞 芹菜莖基腐病 尖孢鐮刀菌 殺菌劑 中圖分類號(hào) S436 36文獻(xiàn)標(biāo)志碼 A文章編號(hào) 1004 1524 2021 04 0661 09 Identification of causal agent and dynamics survey of celery stalk basal rot and screening of fungicides WANG Guorong1 FENG Xi oxi o2 WU Huiming3 CAO Ting ing4 LI Qi n5 HENG ongli6 1 Xiaoshan Agricultural Technology Extension Center Hangzhou 311203 China 2 Agricultural Experiment Sta tion Zhejiang University Hangzhou 310058 China 3 College of Agriculture and Food Science Zhejiang A 4 Zhejiang Plant Protection Quarantine and Pesticide Management Station Hangzhou 310020 China 5 College of Life Sciences China Jiliang University Hangzhou 310018 China 6 Zhe jiang Agricultural Products Quality and Safety Center Hangzhou 310003 China Abstract In order o ch r c erize he c us l gen nd occurrence of celery s lk b s l ro in H ngzhou he i ng province nd effec ive fungicides he dyn mic survey of celery s lk ro in field s inves ig ed in 2017 2018 he p hogen s isol ed nd iden ified by issue sep r ion morphologic l nd phylogene ic n lysis nd i s p hogenic i y s de ermined by myceli l suspension inocul ion he inhibi ion of 29 common fungicides ere de ermined by myceli l gro h r e me hod nd field con rol experimen ere conduc ed s ell The resul s sho ed h frequen occurrence of celery s lk b s l ro s during June o Sep ember Fusarium oxysporum s he p hogenic fungus h c used celery s lk b s l ro In vitro screening es sho ed h hioph n e me hyl nd ebucon zoles fungicides h d he bes inhibi ory effec on myceli l gro h of p hogenic F oxysporum nd field pplic ion of 75 rifloxys robin ebucon zole WDG nd 70 hioph n e me hyl WP h d be er con rol effec on celery s lk b s l ro Key words celery s lk b s l ro Fusarium oxysporum fungicide 芹菜 Apium graveolens L 是我國(guó)重要的蔬 菜作物之一 適應(yīng)性廣 全國(guó)均有栽培 浙江省 通過(guò)創(chuàng)建標(biāo)準(zhǔn)化示范園 品牌村 專業(yè)合作社等 芹菜種植面積逐年擴(kuò)大 為廣大農(nóng)戶帶來(lái)良好的 經(jīng)濟(jì)收益 已成為致富一方的優(yōu)勢(shì)產(chǎn)業(yè) 據(jù)文獻(xiàn) 報(bào)道 芹菜主要病害有斑枯病 軟腐病 早疫病 菌核病 根結(jié)線蟲病等 1 2 然而據(jù)近年來(lái)田間 調(diào)查發(fā)現(xiàn) 主要發(fā)生在近地面芹菜根莖部和葉柄 基部的芹菜莖基腐病發(fā)病十分普遍 嚴(yán)重田塊發(fā) 病率可達(dá)100 日益成為制約當(dāng)?shù)厍鄄水a(chǎn)業(yè)健 康持續(xù)發(fā)展的重要因子 對(duì)于芹菜莖基腐病的 病原菌 病情消長(zhǎng)動(dòng)態(tài)及防控技術(shù)的系統(tǒng)研究均 未見(jiàn)報(bào)道 本文在對(duì)浙江省杭州市芹菜莖基腐 病的病原菌分離鑒定和田間病情消長(zhǎng)動(dòng)態(tài)觀測(cè) 的基礎(chǔ)上 開(kāi)展了高效防控藥劑篩選與田間藥效 試驗(yàn) 以期為當(dāng)?shù)厍鄄饲o基腐病的科學(xué)防控提供 參考 1 材料與方法 1 1 材料 供試樣品 于2017 2018年在浙江省杭州市 蕭山區(qū)益農(nóng)鎮(zhèn)三圍村種植基地采集具有芹菜莖 基腐典型癥狀的樣品 芹菜種子購(gòu)自當(dāng)?shù)胤N子市 場(chǎng) 在溫室種植 取健康植株供回接試驗(yàn) 藥劑 培養(yǎng)基及儀器 29種市場(chǎng)常見(jiàn)農(nóng)藥制 劑分別為430 g L 1戊唑醇SC 40 丙硫菌唑 戊 唑醇SC 70 甲基硫菌靈WP 30 唑醚 戊唑醇 SC 20 氰烯 己唑醇SC 75 肟菌 戊唑醇 WDG 40 氟菌唑WP 125 g L 1氟環(huán)唑SC 35 氟菌 戊唑醇SC 43 氟菌 肟菌酯SC 12 苯 甲 氟酰胺SC 19 啶氧 丙環(huán)唑SC 10 苯醚甲 環(huán)唑WDG 25 氰烯菌酯SC 60 唑醚 代森聯(lián) WDG 30 己唑醇SC 400 g L 1氟唑菌酰羥胺 咯菌腈SC 16 二氰 吡唑酯WDG 30 苯甲 嘧 菌酯SC 250 g L 1吡唑醚菌酯EC 42 4 唑醚 氟酰胺SC 4 四氟醚唑EW 70 代森聯(lián)WDG 50 嘧菌環(huán)胺WDG 25 g L 1咯菌腈FS 41 7 氟吡菌酰胺SC 50 烯酰嗎啉WP 50 啶酰菌 胺WDG 15 噁霉靈AS 馬鈴薯葡萄糖瓊脂培 養(yǎng)基 PDA 購(gòu)于杭州微生物試劑有限公司 按廠 商建議用法配制滅菌備用 培養(yǎng)箱 寧波江南 GXM 358A 離心機(jī) Eppendorf 5424 全自動(dòng)樣 品快速研磨儀 上海凈信JXFSTPRP 24 PCR儀 AB veri i 顯微鏡 Leic DM2500 1 2 方法 1 2 1 病原菌分離鑒定和致病性測(cè)定 用鏟子挖取病株 帶土裝入樣品袋中 整體 帶回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行病原分離鑒定 經(jīng)表面消毒后 以組織分離法對(duì)病原菌進(jìn)行分離 將平板置于 25 恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)至感病組織邊緣長(zhǎng)出菌 絲 挑取小塊菌絲轉(zhuǎn)移至新的PDA平板上進(jìn)行純 化培養(yǎng) 挑取上述純化培養(yǎng)獲得的病原菌提取基因 組DNA 用引物ITS 1和ITS4 3 EF1 728F 4 和EF2 5 擴(kuò)增ITS和tef1序列 擴(kuò)增產(chǎn)物送浙 江尚亞生物技術(shù)有限公司測(cè)序 將測(cè)序結(jié)果在 NCBI GenB nk數(shù)據(jù)庫(kù)中進(jìn)行同源性比對(duì) 采用 MEGA 6 0中的鄰接法 neighbor oining n lysis NJ 建立病原菌系統(tǒng)發(fā)育樹(shù) 確定病原菌的分類 地位 將純培養(yǎng)并鑒定的病原菌菌株 JUP0120 JUP0130 JUP0130N和 JUP0141在PDB培養(yǎng) 基中培養(yǎng)5 d 過(guò)濾菌絲體 制成菌絲懸浮液 取 事先準(zhǔn)備好的盆栽芹菜 30 d苗齡 將菌絲懸浮 液接種至土壤中 每盆接種10 mL 每個(gè)菌株接種 5盆 以清水為對(duì)照 觀察和記錄芹菜發(fā)病情況 發(fā)病后的植株再次分離病原菌并鑒定 1 2 2 田間病情自然消長(zhǎng)動(dòng)態(tài)調(diào)查 在浙江省杭州市蕭山區(qū)益農(nóng)鎮(zhèn)三圍村芹菜 種植基地選擇兩個(gè)地塊 B1和B2 從幼苗移栽 定植后至收獲的整個(gè)生產(chǎn)期間進(jìn)行不定期調(diào)查 每塊地采用50 cm 50 cm的調(diào)查框隨機(jī)選取10 點(diǎn) 記錄調(diào)查日期 病株數(shù)及調(diào)查總株數(shù)等 分別 統(tǒng)計(jì)自然發(fā)病率 其中 B1地塊的B1 CH1 B1 CH2 B1 CH3 B1 CH4 B1 CH5和B2地塊的B2 CH1 B2 CH2 B2 CH3芹菜品種為黃心芹 B1地 塊的B1 CM1和B2地塊的B2 CM1芹菜品種為 266 浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào) 第33卷 第4期 梅芹 1 2 3 室內(nèi)藥劑篩選 采用菌絲生長(zhǎng)速率法 測(cè)定29種供試藥劑 對(duì)芹菜莖基腐病菌的菌絲生長(zhǎng)抑制作用 將供 試藥劑按推薦劑量 每667 m2兌水30 L 稀釋成 母液備用 在融化的PDA培養(yǎng)基中分別加入供 試藥劑母液 制成含1 50推薦劑量濃度的含藥 PDA平板 每個(gè)藥劑5個(gè)平板 冷卻后在平板中 央接種芹菜莖基腐病菌菌餅 5 mm 1塊 25 避光培養(yǎng)6 d后測(cè)量菌落直徑 需減去菌餅 直徑再進(jìn)行計(jì)算 計(jì)算菌絲生長(zhǎng)抑制率 用SPSS 22 0進(jìn)行方差分析 比較病原菌對(duì)不同藥劑的敏 感性差異 1 2 4 田間藥效試驗(yàn) 2019年6月在蕭山偉友蔬菜生產(chǎn)基地 選擇 室內(nèi)篩選具有較好防效的75 肟菌 戊唑醇 WDG和70 甲基硫菌靈WP進(jìn)行芹菜莖基腐病 田間藥效試驗(yàn) 供試品種為梅芹 試驗(yàn)設(shè)計(jì)見(jiàn)表 1 每處理3次重復(fù) 每個(gè)小區(qū)面積不小于50 m2 各小區(qū)隨機(jī)排列 用背負(fù)式電動(dòng)噴霧器 容 量16 L 噴霧 最后一次施藥后14 d調(diào)查病株 率 每小區(qū)用50 cm 50 cm調(diào)查框隨機(jī)取5點(diǎn) 統(tǒng)計(jì)總株數(shù)和病株數(shù) 計(jì)算防治效果 對(duì)有顯著 P 0 05 差異的 采用Dunc n s新復(fù)極差法進(jìn) 行多重比較 2 結(jié)果與分析 2 1 病原菌形態(tài)特征與致病性測(cè)定 調(diào)查結(jié)果表明 芹菜莖基腐病 圖1 主要發(fā) 生在近地面芹菜根莖部和葉柄基部 發(fā)病初期 病部呈灰褐色 擴(kuò)展后變成暗綠色至黑褐色 嚴(yán) 重時(shí)受害部位變黑腐爛 病株萎蔫發(fā)黃 嚴(yán)重者 死亡 有明顯發(fā)病中心 易傳播 夏季氣溫較高 連續(xù)陰雨天高濕時(shí)發(fā)病重 栽種病苗易引起該 病流行 高濕地 連作地易成發(fā)病重災(zāi)區(qū) 純培養(yǎng)的病原菌菌落形態(tài)粉白色 淺粉色至 紫色 圖2 A 挑取感病組織制片 顯微鏡下可 見(jiàn)大型分生孢子鐮刀形 兩端漸尖 圖2 B 小型 分生孢子鈍圓形 圖2 C D 病原菌ITS tef1在NCBI GenB nk數(shù)據(jù)庫(kù)中 進(jìn)行同源性序列分析 從基因數(shù)據(jù)庫(kù)中下載相似 度高的相應(yīng)基因序列 進(jìn)行同源性分析 對(duì)近緣 模式菌株的ITS tef1序列進(jìn)行系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)分析 以Nec ri ce e科菌株Fusicolla aquaeductuum CBS 837 85作為外群 選擇最佳堿基替代模型 2 G 利用自展法檢驗(yàn)各分支的支持率 boo s r p propor ions BP 1 000次重復(fù) 建立病原菌系統(tǒng)發(fā)育樹(shù) 圖3 可見(jiàn)菌株 JUP0130與尖孢鐮刀菌Fusari um oxysporum菌株CBS 133023聚類的分支 表1 芹菜莖基腐病田間藥效試驗(yàn)處理 Table 1 Tre men of fungicides con rol of celery s lk b se ro 處理 Tre men s 藥劑 Fungicide 使用方法 Me hods of use T1 70 甲基硫菌靈可濕性粉劑800倍液 70 Thioph n e me hyl WP 800 移栽前浸根 1 移栽緩苗后粗噴霧 2 封行前粗噴霧 Dipping roo before r nspl n ing 1 Spr ying on s em b se f er reviving 2 Spr ying on s em b se before se ling T2 70 甲基硫菌靈可濕性粉劑800倍液 70 Thioph n e me hyl WP 800 移栽緩苗后粗噴霧 封行前粗噴霧 Spr ying s em b se f er reviving Spr ying s em b se before se ling T3 75 肟菌 戊唑醇水分散粒劑2000倍液 75 Trifloxysporin Tebucon zole WDG 2000 移栽前浸根 移栽緩苗后粗噴霧 封行前粗噴霧 Dipping roo before r nspl n ing Spr ying on s em b se f er reviving Spr ying on s em b se before se ling T4 75 肟菌 戊唑醇水分散粒劑2000倍液 75 Trifloxysporin Tebucon zole WDG 2000 移栽緩苗后粗噴霧 封行前粗噴霧 Spr ying s em b se f er reviving Spr ying s em b se before se ling T5 W er噴霧Spr ying 1 芹菜移栽前用相應(yīng)的藥劑浸根1 min 2 芹菜移栽緩苗后 移栽后7 d 以推薦劑量用大容量 每667m2兌水60 L 針對(duì)莖基部粗 噴霧施藥 封行前 移栽后21 d 再用相應(yīng)的藥劑粗噴霧 1 Dip he roo of celery i h pes icide for 1 min before r nspl n ing 2 Af er reviving 7 d ys f er r nspl n ing spr ying i h l rge vol ume 900 L h 1 of recommended dos ge on he celery s em b se nd hen spr ying i h he dos ge on s em b se before se ling 21 d ys f er r nspl n ing 366 王國(guó)榮 等 芹菜莖基腐病病原菌鑒定 消長(zhǎng)動(dòng)態(tài)調(diào)查與防治藥劑篩選 圖1 芹菜莖基腐病田間發(fā)病癥狀 Fig 1 Field symp oms nd p hogen morphology of cel ery s lk b s l ro c used by Fusarium oxysporum 將分離的病原菌菌絲體懸液接種至培養(yǎng)30 d的盆栽健康黃心芹的土壤中 每盆接種10 mL 以清水為對(duì)照 發(fā)現(xiàn)4個(gè)菌株接種后芹菜均表現(xiàn) 出不同程度的發(fā)病癥狀 圖4 其中 JUP0130 和 JUP0130N較重 發(fā)病后的植株再次分離病原 菌 并得到與 JUP0120 JUP0130 JUP0130N和 JUP0141一致的菌株 證明 JUP0120 JUP0130 JUP0130N和 JUP0141是引起芹菜莖基腐病的 病原菌 2 2 田間病情消長(zhǎng)動(dòng)態(tài)調(diào)查 2018年9月蕭山區(qū)連作芹菜地調(diào)查結(jié)果 圖 5 表明 B1地塊 B1 CH1 B1 CH2 B1 CH3 B1 CH4 B1 CH5 平均發(fā)病率為56 00 以黃心芹 B1 CH5 的發(fā)病率最高 為66 63 B2號(hào)地塊 B2 CH1 B2 CH2 B2 CH3 B2 CM1 平均發(fā)病 率為40 61 以梅芹 B2 CM1 的發(fā)病率最高 為71 63 不同品種間 黃心芹的平均發(fā)病率 為50 23 梅芹的平均發(fā)病率為65 82 同 時(shí) 不同月份發(fā)病率差異較大 2018 2019年的 系統(tǒng)調(diào)查發(fā)現(xiàn) 圖6 6 9月芹菜莖基腐病的發(fā) 病率較嚴(yán)重 10月份后發(fā)病率逐漸趨輕 2 3 室內(nèi)藥劑篩選 從表2可見(jiàn) 29種常用殺菌劑對(duì)芹菜莖基腐 病菌的抑制效果差異較大 當(dāng)濃度為推薦劑量 1 50時(shí) 430 g L 1戊唑醇SC 40 丙硫菌唑 戊 唑醇SC 70 甲基硫菌靈WP 30 唑醚 戊唑醇 SC和75 肟菌 戊唑醇WDG對(duì)芹菜莖基腐病菌 的菌絲生長(zhǎng)抑制率均大于95 且顯著 P 0 05 大于其他藥劑 表現(xiàn)出強(qiáng)烈的生長(zhǎng)抑制活 性 40 氟菌唑WP 125 g L 1氟環(huán)唑SC 35 氟 菌 戊唑醇SC的菌絲生長(zhǎng)抑制率介于85 95 A 菌落 B 大型分生孢子 C和D 小型分生孢子 A Colonies on PDA B M croconidi C nd D Microconidi 圖2 芹菜莖基腐病病原菌形態(tài) Fig 2 Morphology of Fusarium oxysporum 466 浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào) 第33卷 第4期 圖3 基于ITS和tef1的芹菜莖基腐病菌尖孢鐮刀菌系統(tǒng)發(fā)育樹(shù) Fig 3 T o gene ITS nd tef1 phylogene ic ree of Fusarium oxysporum isol ed from celery s lk b s l ro 圖4 黃心芹接種不同菌株發(fā)病情況 Fig 4 The p hogenic es of Hu ngxin celery by differen s r ins 表現(xiàn)出較強(qiáng)的抑制活性 20 氰烯 己唑醇SC對(duì) 芹菜莖基腐病菌的菌絲生長(zhǎng)抑制率大于95 但 與40 氟菌唑WP和125 g L 1氟環(huán)唑SC無(wú)顯 著性差異 其余20種藥劑的菌絲生長(zhǎng)抑制率均 小于85 聚類分析結(jié)果表明 芹菜莖基腐病菌 對(duì)29種殺菌劑的敏感性分為四類 對(duì)430 g L 1 戊唑醇SC等9種藥劑的敏感性強(qiáng) 對(duì)43 氟菌 肟菌酯SC等10種藥劑的敏感性中等 對(duì)250 g L 1吡唑醚菌酯EC等5種藥劑的敏感性弱 對(duì)25 g L 1咯菌腈FS等5種藥劑的敏感性極弱 在5個(gè)對(duì)芹菜莖基腐病菌有強(qiáng)抑制作用的 殺菌劑中 除70 甲基硫菌靈WP外 其他4個(gè) 藥劑均為戊唑醇及其復(fù)配制劑 說(shuō)明戊唑醇對(duì)該 病菌具有較強(qiáng)的抑制作用 2 4 田間藥效試驗(yàn) 根據(jù)室內(nèi)藥劑篩選結(jié)果 結(jié)合當(dāng)?shù)夭宿r(nóng)用藥 圖5 不同地塊不同芹菜品種莖基腐病發(fā)病率調(diào)查 Fig 5 Dise se incidence inves ig ion in ypic l field 566 王國(guó)榮 等 芹菜莖基腐病病原菌鑒定 消長(zhǎng)動(dòng)態(tài)調(diào)查與防治藥劑篩選 圖6 芹菜莖基腐病田間病情消長(zhǎng)動(dòng)態(tài)調(diào)查 Fig 6 Celery s lk b s l ro dise se dyn mics in field inves ig ion 表2 二十九種常見(jiàn)殺菌劑對(duì)芹菜莖基腐病的抑制率 Table 2 T en y nine common fungicides inhibi ion es of p hogen of celery s lk b se ro 供試藥劑 Fungicide 生產(chǎn)企業(yè) M nuf c ure 試驗(yàn)濃度 Concen r ion mg L 1 抑制率 Inhibi ion 敏感性評(píng)價(jià) Sensi ivi y ev lu ion 430 g L 1戊唑醇SC 430 g L 1 Tebucon zole SC 拜耳 B yer 1 7 100 強(qiáng)Hypersensi ive 40 丙硫菌唑 戊唑醇SC 40 Pro hiocon zole Tebucon zole SC 海利爾 W ier 13 3 100 強(qiáng)Hypersensi ive 70 甲基硫菌靈WP 70 Thioph n e me hyl WP 日友 J pfou 17 5 100 強(qiáng)Hypersensi ive 30 唑醚 戊唑醇SC 30 Pyr clos robin Tebucon zole SC 明德立達(dá) Pil r 9 2 99 25 0 75 強(qiáng)Hypersensi ive 20 氰烯 己唑醇SC 20 Phen m cril Hex con zole SC 上格 Sunger 18 7 95 80 0 37 b強(qiáng)Hypersensi ive 75 肟菌 戊唑醇WDG 75 Triflox zole Tebucon zole WDG 拜耳 B yer 10 0 95 33 0 94 強(qiáng)Hypersensi ive 40 氟菌唑WP 40 Triflumizole WP 恒田生物 Heng i n Biologic l 4 3 90 40 0 75 bc強(qiáng)Hypersensi ive 125 g L 1氟環(huán)唑SC 125 g L 1Epoxicon zole SC 巴斯夫 BASF 2 5 87 80 0 49 bcd強(qiáng)Hypersensi ive 35 氟菌 戊唑醇SC 35 Fluopyr m Tebucon zole SC 拜耳 B yer 3 5 86 40 1 43 cd強(qiáng)Hypersensi ive 43 氟菌 肟菌酯SC 43 Fluopyr m Triflox zole SC 拜耳 B yer 4 3 78 60 0 81 de中Sensi ive 12 苯甲 氟酰胺SC 12 Difenocon zole Flux pyrox d SC 巴斯夫 BASF 5 6 76 60 0 68 ef中Sensi ive 19 啶氧 丙環(huán)唑SC 19 Picoxys robin Propicon zol SC 杜邦 DuPon 11 1 71 60 0 68 efg中Sensi ive 10 苯醚甲環(huán)唑WDG 10 Difenocon zole WDG 先正達(dá) Syngen 6 7 70 84 6 08 b中Sensi ive 25 氰烯菌酯SC 25 Phen m cril SC 蘇研 SU AN 2 5 69 53 2 54 bc中Sensi ive 666 浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào) 第33卷 第4期 續(xù)表2 Con inued T ble 2 供試藥劑 Fungicide 生產(chǎn)企業(yè) M nuf c ure 試驗(yàn)濃度 Concen r ion mg L 1 抑制率 Inhibi ion 敏感性評(píng)價(jià) Sensi ivi y ev lu ion 60 唑醚 代森聯(lián)WDG 60 Pyr clos robin Me ir m WDG 巴斯夫 BASF 48 0 68 00 0 32 fgh中Sensi ive 30 己唑醇SC 30 Hex con zole SC 上格 Sunger 1 0 65 80 0 58 gh中Sensi ive 400 g L 1氟唑菌酰羥胺 咯菌腈SC 400 g L 1 Pydiflume ofen Fludioxonil SC 先正達(dá) Syngen 5 0 63 36 1 55 bc中Sensi ive 16 二氰 吡唑酯WDG 16 Di hi non Pyr clos robin WDG 巴斯夫 BASF 17 8 59 80 4 84 h中Sensi ive 30 苯甲 嘧菌酯SC 30 Difenocon zole Azoxys robin SC 豐樂(lè) Fengle 10 0 56 82 2 18 c中Sensi ive 250 g L 1吡唑醚菌酯EC 250 g L 1Pyr clos robin EC 巴斯夫 BASF 8 3 46 00 0 84 i弱Hyposensi ive 42 4 唑醚 氟酰胺SC 42 4 Pyr clos robin Flux pyrox d SC 巴斯夫 BASF 8 5 45 80 1 32 i弱Hyposensi ive 4 四氟醚唑EW 4 Te r con zole EW 意賽格 Is gro 2 7 44 60 0 75 i弱Hyposensi ive 70 代森聯(lián)WDG 70 Me ir m WDG 巴斯夫 BASF 77 8 42 00 1 34 i 弱Hyposensi ive 50 嘧菌環(huán)胺WDG 50 Cyprodinil WDG 先正達(dá) Syngen 16 0 34 40 1 91 弱Hyposensi ive 25 g L 1咯菌腈FS 25 g L 1 Fludioxonil FS 先正達(dá) Syngen 24 0 21 5 3 17 d極弱Dull 41 7 氟吡菌酰胺SC 41 7 Fluopyr m SC 拜耳 B yer 2 8 18 60 1 21 k極弱Dull 50 烯酰嗎啉WP 50 Dime homorph WP 巴斯夫 BASF 13 3 11 80 3 22 k極弱Dull 50 啶酰菌胺WDG 50 Bosc lid WDG 巴斯夫 BASF 16 7 9 60 4 40 k極弱Dull 15 噁霉靈AS 15 Hymex zol AS 標(biāo)正 BIOGEN 3 0 6 32 3 77 l極弱Dull 同列數(shù)據(jù)后沒(méi)有相同小寫字母表示在0 05水平差異顯著 The v lues i h lo erc se le ers in he s me column indic ed he signific n difference he 0 05 level 習(xí)慣 選擇70 甲基硫菌靈WP和75 肟菌 戊 唑醇WDG進(jìn)行田間藥效試驗(yàn) 田間藥效試驗(yàn)結(jié) 果 圖7 表明 75 肟菌 戊唑醇WDG的2個(gè)處 理 T3和T4 對(duì)芹菜莖基腐病的防效分別為 82 6 和77 7 移栽前浸根處理略好于未浸根 處理 但無(wú)顯著性差異 70 甲基硫菌靈WP的 2個(gè)處理 T1和T2 對(duì)芹菜莖基腐病的防效分別 為78 8 和55 9 增加移栽前浸根處理的防效 顯著 P 0 05 高于未浸根處理 3 討論 在生產(chǎn)實(shí)踐中 芹菜莖基腐病發(fā)生嚴(yán)重 嚴(yán) 重影響產(chǎn)業(yè)健康持續(xù)發(fā)展 芹菜莖基腐病主要發(fā) 不同處理間沒(méi)有相同小寫字母表示差異顯著 P 0 05 The b rs i hou he s me le ers sho ed he signific n difference P 0 05 圖7 田間藥劑試驗(yàn)結(jié)果 Fig 7 The con rol effec of fungicides in field 766 王國(guó)榮 等 芹菜莖基腐病病原菌鑒定 消長(zhǎng)動(dòng)態(tài)調(diào)查與防治藥劑篩選 生在芹菜近地面的根莖部和葉柄基部 發(fā)病初期 病部呈灰褐色 擴(kuò)展后變成暗綠色至黑褐色 嚴(yán) 重時(shí)受害部位變黑腐爛 病原菌分離鑒定和致 病性測(cè)定表明 尖孢鐮刀菌Fusarium oxysporum 為芹菜莖基腐病的病原菌 芹菜莖基腐病在連 作條件下發(fā)病重 可能病原菌隨著病殘?bào)w進(jìn)入土 壤 造成土壤菌源積累 從而導(dǎo)致芹菜莖基腐病 發(fā)病越來(lái)越重 因此 對(duì)該病的防控首先應(yīng)從栽 培管理出發(fā) 提倡輪作 特別是水旱輪作 減少土 壤菌源積累 應(yīng)用殺菌劑是植物病害防治的重要手段 鐮刀菌是一種重要的土傳病原真菌 且因?yàn)榇嬖?不同?；?不同殺菌劑對(duì)鐮刀菌的毒力差異顯 著 本研究對(duì)芹菜莖基腐病菌尖孢鐮刀菌的室 內(nèi)藥劑篩選結(jié)果表明 430 g L 1戊唑醇SC 40 丙硫菌唑 戊唑醇SC 70 甲基硫菌靈WP 30 唑醚 戊唑醇SC 20 氰烯 己唑醇SC 75 肟菌 戊唑醇WDG 40 氟菌唑WP 125 g L 1氟環(huán)唑 SC和35 氟菌 戊唑醇SC按田間推薦使用濃度 再稀釋50倍后 仍對(duì)芹菜莖基腐病菌的菌絲生長(zhǎng) 有較強(qiáng)抑制 潘龍其等 6 室內(nèi)毒力測(cè)定表明 紫 花苜蓿根腐病菌擬枝孢鐮刀菌對(duì)咯菌腈 戊唑 醇 丙環(huán)唑和多菌靈較敏感 EC50分別為0 04 0 26 0 47和0 61 mg L 1 但對(duì)嘧菌酯和惡霉靈 的敏感性較差 EC50分別為42 91和53 64 mg L 1 田間藥效試驗(yàn)表明 250 g hm 2的50 咯 菌腈和43 戊唑醇對(duì)紫花苜蓿根腐病的防效分 別為69 42 和66 78 6 劉銘等 7 研究表 明 辣椒枯萎病菌尖孢鐮刀菌對(duì)氟硅唑 多菌靈 甲基硫菌靈較敏感 EC50分別為0 05 0 16和 1 36 mg L 1 肖榮鳳等 8 在2020年研究提出 6 6 嘧菌酯 1 1 咯菌腈 3 3 精甲霜靈FS 和25 吡唑醚菌酯SC稀釋至2 000倍液 對(duì)太 子參根腐病病原尖孢鐮刀菌的抑制率分別為 78 52 和75 36 王芳等 9 在2019年研究提 出 藥后72 h 殺菌劑丙環(huán)唑?qū)怄哏牭毒S瓜 ?；偷囊种菩Ч罴?EC50值為0 903 9 mg L 1 已有文獻(xiàn)資料表明 戊唑醇 10 甲基硫菌 靈 嘧菌酯等殺菌劑對(duì)鐮刀菌有良好抑制作用 與本研究所篩選得到的結(jié)果類似 同時(shí) 本研究 田間藥效試驗(yàn)表明 75 肟菌 戊唑醇WDG和 70 甲基硫菌靈WP對(duì)芹菜莖基腐病菌均有較 好防效 從減少農(nóng)藥使用量和節(jié)本省工的角度 優(yōu)先推薦選用75 肟菌 戊唑醇WDG在芹菜幼 苗移栽緩苗后及封行前各粗噴霧1次 70 甲基 硫菌靈WP可作為防控芹菜莖基腐病的合理輪 用藥劑 在芹菜幼苗移栽時(shí)浸根處理 并在移栽 緩苗后和封行前各粗噴霧1次 參考文獻(xiàn) References 1 李小龍 溫嶺市芹菜主要病害發(fā)生特點(diǎn)及綜合防治技術(shù) J 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技 2010 7 188 189 LI X L Occurrence ch r c eris ics nd comprehensive con rol echniques of celery dise ses in Wenling ci y J Modern Ag ricultural Sciences and Technology 2010 7 188 189 in Chinese 2 陳傳榮 芹菜栽培及主要病害防治技術(shù) J 園藝與種苗 2017 37 11 6 8 CHEN C R Cul iv ion echniques nd in egr ed con rol of m in dise ses of celery J Horticulture Seed 2017 37 11 6 8 in Chinese i h English bs r c 3 WHITE T J BRUNS S LEE S e l Amplific ion nd di rec sequencing of fung l genes for phylogene ics M INNIS M A GELFAND D H SNINS J J e l PCR pro ocols guide o me hods nd pplic ions Ne ork Ac demic Press 1990 4 CARBONE I OHN L M A me hod for designing primer se s for speci ion s udies in fil men ous scomyce es J Mycolo gia 1999 91 3 553 556 5 O DONNELL ISTLER H C CIGELNI E e l Mul i ple evolu ion ry origins of he fungus c using P n m dise se of b n n concord n evidence from nucle r nd mi ochondri l gene gene logies J Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 1998 95 5 2044 2049 6 潘龍其 張麗 袁慶華 等 不同殺菌劑對(duì)擬枝孢鐮刀菌 的毒力測(cè)定及田間防效 J 中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào) 2016 21 1 87 96 PAN L Q HANG L UAN Q H e l Toxici y me sure men nd field con rol of lf lf roo ro Fusarium sporotri chioide J Journal of China Agricultural University 2016 21 1 87 96 in Chinese i h English bs r c 7 劉銘 金容 尹福強(qiáng) 6種殺菌劑對(duì)辣椒枯萎病病原菌的 室內(nèi)毒力測(cè)定 J 現(xiàn)代園藝 2019 21 38 40 LIU M JIN R IN F Q Toxici y de ermin ion of six fungi cides g ins Fusarium il of pepper in l bor ory J Xian dai Horticulture 2019 21 38 40 in Chinese 8 肖榮鳳 陳燕萍 陳梅春 等 太子參根腐病病原菌的鑒 定及防治藥劑篩選 J 植物保護(hù)學(xué)報(bào) 2020 47 6 1333 1342 866 浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào) 第33卷 第4期 XIAO R F CHEN P CHEN M C e l P hogen iden ifi c ion of roo ro of Pseudostellaria heterophylla pl n nd fun gicide screening for i s efficien con rol J Journal of Plant Protection 2020 47 6 1333 1342 in Chinese i h Eng lish bs r c 9 王芳 王曉倩 王瑩 等 6種殺菌劑對(duì)黃瓜尖孢鐮刀菌 的毒力測(cè)定試驗(yàn) J 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào) 2019 35 9 143 148 WANG F WANG X Q WANG e l Toxici y es of six fungicides on Fusarium oxysporum infec ing cucumber J Chinese Agricultural Science Bulletin 2019 35 9 143 148 in Chinese i h English bs r c 10 韓青梅 康振生 黃麗麗 等 戊唑醇對(duì)赤霉病菌生長(zhǎng)發(fā) 育影響的細(xì)胞學(xué)和免疫細(xì)胞化學(xué)研究 J 菌物學(xué)報(bào) 2004 23 4 580 589 HAN Q M ANG S HUANG L L e l Cy ology nd immuno cy ochemis ry s udies of effec s of ebucon zole on he he d bligh p hogen in vitro J Mycosystema 2004 23 4 580 589 in Chinese i h English bs r c 責(zé)任編輯 張 韻 966 王國(guó)榮 等 芹菜莖基腐病病原菌鑒定 消