www caaj org 農學學報 2021 11 2 74 78 JournalofAgriculture 基 金 項 目 甘 肅 省 農 業(yè) 科 學 院 科 研 條 件 建 設 及 成 果 轉 化 項 目 黃 芩 根 腐 病 害 關 鍵 防 控 技 術 研 究 2020GAAS25 國 家 重 點 研 發(fā) 計 劃 特 色 經 濟 作 物 化 肥 農 藥 減 施 技 術 集 成 研 究 與 示 范 2018YFD0201100 甘 肅 省 重 點 人 才 項 目 黨 參 根 腐 病 綜 合 防 控 技 術 集 成 示 范 推 廣 與 人 才 培 養(yǎng) 2019RCXM072 嘉峪關市科技計劃 嘉峪關市設施蔬菜根腐病綜合治理技術研究與應用 18 20 第 一 作 者 簡 介 漆 永 紅 男 1978 年 出 生 甘 肅 秦 安 人 副 研 究 員 博 士 主 要 從 事 經 濟 作 物 病 害 研 究 通 信 地 址 730070 甘 肅 省 蘭 州 市 安 寧 區(qū) 農 科 院 新村1 號 甘肅省農業(yè)科學院植物保護研究所 Tel 0931 7614844 E mail qiyonghong920 通 訊 作 者 李 繼 平 男 1966 年 出 生 甘 肅 靜 寧 人 研 究 員 博 士 主 要 從 事 經 濟 作 物 病 害 研 究 通 信 地 址 730070 甘 肅 省 蘭 州 市 安 寧 區(qū) 農 科 院 新 村1 號 甘肅省農業(yè)科學院植物保護研究所 Tel 0931 7614844 E mail lijiping 收稿日期 2020 05 19 修回日期 2020 09 21 黨參莖基腐病鐮孢菌鑒定及其對殺菌劑的敏感性研究 漆永紅 1 李敏權 2 曹素芳 2 蔣晶晶 1 李雪萍 1 李青青 1 徐美蓉 3 李繼平 1 1 甘肅省農業(yè)科學院植物保護研究所 蘭州730070 2 甘肅省農業(yè)科學院林果花卉研究所 蘭州730070 3 甘肅省農業(yè)科學院農業(yè)質量標準與檢測技術研究所 蘭州730070 摘 要 為 明 確 黨 參 莖 基 腐 病 害 的 病 原 致 病 性 和 優(yōu) 勢 病 原 種 類 及 其 對 不 同 殺 菌 劑 的 敏 感 性 采 用 組 織 分 離 法 進 行 病 原 菌 分 離 并 根 據 其 培 養(yǎng) 性 狀 形 態(tài) 學 和 分 子 生 物 學 特 征 進 行 鑒 定 同 時 采 用 平 皿 菌 絲 生 長 抑 制 法 測 定 不 同 藥 劑 的 敏 感 性 結 果 表 明 該 病 害 的 病 原 為 尖 孢 鐮 孢 菌 Fusarium oxysporum 茄 病 鐮 孢 菌 F sonali 和 木 賊 鐮 孢 菌 F equiseti 其 中 尖 孢 鐮 孢 菌 為 優(yōu) 勢 種 室 內 致 病 性 測 試 結 果 表 明 3 種 鐮 孢 菌 均 可 引 起 黨 參 莖 基 腐 病 其 中 尖 孢 鐮 孢 菌 的 致 病 性 最 強 顯 著 高 于 其 他2 種 菌 供 試 藥 劑 對 菌 絲 生 長 均 有 抑 制 作 用 苯 醚 甲 環(huán) 唑 對3 種 鐮 孢 菌 具 有 很 強 的 抑 制 活 性 同 時3 種 鐮 孢 菌 對 吡 唑 醚 菌 酯 的 敏 感 性 較高 關鍵詞 黨參 莖基腐病 鐮孢菌 病原鑒定 殺菌劑 敏感性測定 中圖分類號 S436 429 文獻標志碼 A 論文編號 cjas2020 0052 Identification of Codonopsis pilosula Crown Rot Disease and Its Sensitivity to Fungicides Qi Yonghong 1 Li Minquan 2 Cao Sufang 2 Jiang Jingjing 1 Li Xueping 1 Li Qingqing 1 Xu Meirong 3 Li Jiping 1 1 Institute of Plant Protection Gansu Academy of Agricultural Sciences Lanzhou 730070 Gansu China 2 Institute of Fruit and Floriculture Research Gansu Academy of Agricultural Sciences Lanzhou 730070 Gansu China 3 Institute of Agricultural Quality Standards and Testing Technology Gansu Academy of Agricultural Sciences Lanzhou 730070 Gansu China Abstract To clarify the pathogen pathogenicity and dominant pathogen species of Codonopsis pilosula crown rot disease and their sensitivity to different fungicides the pathogen was isolated by tissue isolation method and identified according to its culture traits morphology and molecular biological characteristics Meanwhile the sensitivity of differ ent fun gicides was determined by mycelium growth inhibition method The results showed that the disease pathogens were identif ied as Fusarium oxysporum F sonali and F equiseti The dominant species was F oxysporum Pathogenicity testing showed that the three species could cause C pilosula crown rot disease F oxysporum had the strongest pathogenicity and its disease rate and disease index had a significant difference from those of the other two L aboratory toxicity test of different fungicides to the mycelia growth of the three species showed that difenoconazole fungicide had the strongest inhibition activity and the three Fusarium species had the highest sensitivity to p yraclostrobin fungicide Keywords Codonopsis pilosula Crown Rot Disease Fusarium spp Pathogen Identification Fungicides Sensitivity Testing0 引言 黨 參 Codonopsis pilosula 為 桔 梗 科 黨 參 屬 多 年 生 草 本 植 物 產 自 中 國 北 方 海 拔1560 3100 m 的 山 地 林 邊 及 灌 叢 中 黨 參 為 中 國 常 用 的 傳 統(tǒng) 補 益 藥 具 有 補 中 益 氣 健 脾 益 肺 的 功 效 主 要 有 增 強 免 疫 力 擴 張 血 管 降 壓 改 善 微 循 環(huán) 增 強 造 血 功 能 等 作 用 1 根 據 外 形 和 產 地 不 同 黨 參 分 為 西 黨 潞 黨 東 黨 和 條 黨 2 甘 肅 省 渭 源 縣 是 中 國 黨 參 之 鄉(xiāng) 主 要 生 產 白 條 黨 參 隨 著 黨 參 人 工 栽 培 面 積 的 逐 年 擴 大 生 長 環(huán) 境 的 改 變 和 病 原 菌 的 不 斷 積 累 病 害 已 成 為 制 約 黨 參 產 量和品質的重要因素之一 國 內 一 些 學 者 對 黨 參 的 病 害 進 行 了 研 究 王 艷 等 3 報 道 甘 肅 省 渭 源 和 隴 西 縣 黨 參 病 害 有 斑 枯 病 Septoria codonopsidis 白 粉 病 Sphaerotheca codonopisi 灰 霉 病 Botrytis cinerea 和 根 腐 病 Fusariumoxysporiums 共4 種 何 先 元 等 4 研 究 發(fā) 現(xiàn) 川 黨 的 根 腐 病 Fusarium sp 銹 病 Puccinia campanumoeae 紫 紋 羽 病 Helicobasidium mompa 和 霜 霉 病 Peronosporacorydalis 等 病 害 嚴 重 影 響 了 其 品 質 和 產 量 劉 春 葉 等 5 對 洛 黨 參 白 粉 病 銹 病 和 根 腐 病 的 田 間 發(fā) 生 動 態(tài) 進 行 了 調 查 結 果 發(fā) 現(xiàn) 銹 病 發(fā) 生 最 早 余 中 蓮 等 6 研 究 表 明 川 黨 參 主 要 病 害 有 銹 病 根 腐 病 紫 紋 羽 病 白 粉 病 和 斑 枯 病 共5 種 其 中 銹 病 根 腐 病 和 紫 紋 羽 病 發(fā) 生 嚴 重 近 年 來 黨 參 莖 基 腐 病 在 甘 肅 省 黨 參 種 植 區(qū) 普 遍 發(fā) 生 為 害 面 積 逐 年 呈 上 升 趨 勢 尤 其 以 重 茬 黨 參 發(fā) 病 嚴 重 7 據 調 查 一 般 田 間 發(fā) 病 率 為5 10 嚴 重 的 達30 以 上 該 病 害 已 成 為 制 約 當 地 黨 參 發(fā) 展 的 主 要 因 素 之 一 嚴 重 影 響 了 黨 參 的 產 量 與 品 質 給 種 植 戶 帶 來 巨 大 的 經 濟 損 失 8 關 于 該病害在甘肅省定西市臨洮縣 渭源縣 岷縣等地的病 原 種 類 等 未 見 報 道 故 本 研 究 擬 對 定 西 市 發(fā) 生 的 黨 參 莖基腐病的發(fā)生癥狀進行研究 以確定其病原 致病性 及其優(yōu)勢種群 同時進行室內藥劑篩選及敏感性測定 初 步 篩 選 出 化 學 防 治 的 最 佳 藥 劑 為 黨 參 莖 基 腐 病 的 田間防治提供理論依據 1 材料與方法 1 1 病樣采集與病原菌分離和純化 2018 年6 月 在 甘 肅 省 定 西 市 臨 洮 縣 渭 源 縣 岷 縣 等 主 要 黨 參 生 產 基 地 采 集 發(fā) 病 植 株 裝 入 塑 料 袋 帶 回 實 驗 室 采 用 常 規(guī) 組 織 分 離 法 9 剪 取 莖 基 部 病 健 交 界 處5 mm 5 mm 組 織 塊 在75 酒 精 中 浸 泡5 s 然 后 轉 移 至1 5 次 氯 酸 鈉 溶 液 中 消 毒1min 無 菌 水 漂 洗3 次 晾 干 置 于PDA 培 養(yǎng) 基 平 板 內 于25 培 養(yǎng)5 7 天 從 菌 落 邊 緣 切 取 菌 絲 塊 置 于 香 石 竹 葉 片 瓊 脂 CLA 培 養(yǎng) 基 瓊 脂15 20g 蒸 餾 水1000mL 每 皿 加 入 長 度1cm 的 無 菌 康 乃 馨 葉 片3 片 在25 培 養(yǎng)7 10 天 將 分 離 純化的菌株轉接至PDA 斜面 4 保存?zhèn)溆?1 2 致病性測定 采 用 牙 簽 刺 接 種 法 將 滅 菌 的 牙 簽 放 在 帶 菌 的 PDA 培 養(yǎng) 基 中 培 養(yǎng) 使 牙 簽 上 布 滿 菌 絲 用 帶 菌 牙 簽 穿 刺 黨 參 隴 黨1 號 幼 苗 莖 部 無 菌 土 掩 埋 接 種 部 位 每 菌 接 種15 株 黨 參 幼 苗 以 無 菌 牙 簽 穿 刺 黨 參 幼 苗 作 為 對 照 CK 接 種30 天 后 觀 察 黨 參 的 發(fā) 病 情 況 統(tǒng) 計 發(fā) 病 率 病 情 指 數 根 據 分 級 標 準 進 行 測 定 0 級 莖 基 部 沒 有 病 斑 1 級 莖 基 部 有 輕 微 病 斑 病 斑 面 積 占 5 3 級 莖 基 部 有 輕 微 病 斑 病 斑 面 積 占10 5 級 莖 基 部 有 輕 微 病 斑 病 斑 面 積 占25 7 級 莖 基 部 有 輕微病斑 病斑面積占50 以上 1 3 病原菌形態(tài)學鑒定 將 病 原 菌 分 別 接 種 在PDA 和CLA 培 養(yǎng) 基 上 25 下 培 養(yǎng)7 天 和10 天 后 觀 察 并 拍 照 記 錄 菌 落 形 態(tài) 顏 色 產 孢 結 構 與 分 生 孢 子 形 態(tài) 大 小 根 據 鐮 孢 菌 分 類 方法和標準進行病原菌種類鑒定 10 1 4 病原菌分子生物學鑒定 1 4 1 真 菌 基 因 組DNA 提 取 刮 取PDA 培 養(yǎng) 基 上 的 病 原 菌 菌 絲 采 用 真 菌 基 因 組DNA 快 速 抽 提 試 劑 盒E Z N ATM HP Fungal DNA Kit OMEGA 的 方 法 提 取 DNA 保存于 20 備用 1 4 2 分 子 鑒 定 的 引 物 本 試 驗 用 真 菌 通 用 引 物 和 鐮 孢 菌 特 異 性 引 物 11 12 通 用 引 物F1 和F2 的 序 列 分 別 為 ATTACTCCAGCATCCTTGC TTTACAACTCCCAAA CCCC 核 糖 體 內 部 轉 錄 間 隔 區(qū) internal transcribed spacer ITS ITS1 和 ITS4 的 序 列 分 別 為 TCCGTAGGTGAACCTGCGG TCCTCCGCTTATTG ATATGC 鐮 孢 菌 特 異 性 引 物TEF1 F 和TEF1 R 的 序 列 分 別 為 ATGGGTAAGGARGACAAGAC GGARGT ACCAGTSATCATGTT 1 4 3 PCR 擴 增 PCR 擴 增 體 系 25 L 10 Buffer2 5 L 2 5mol LdNTP4 L 10 mol L 正 反 向 引 物 各1 L T aq 酶0 5 L DNA 模 板1 L 用ddH2O 補 足 至25 L PCR 反 應 條 件 94 預 變 性10 min 94 變 性1 min 55 退 火1 min 72 延 伸2 min 25 個 循 環(huán) 72 延 伸 10 min 4 冰 箱 保 存 PCR 產 物 經1 瓊 脂 糖 凝 膠 電 泳檢測后 送生工生物工程 上海 股份有限公司測序 將 獲 得 的 序 列 與GenBank 核 酸 序 列 庫 進 行 同 源 性 比 對分析 1 5 病原菌對藥劑的敏感性測定 供 試 藥 劑 及 濃 度 10 苯 醚 甲 環(huán) 唑 水 分 散 粒 劑 山 75東 惠 民 中 聯(lián) 生 物 科 技 有 限 公 司 濃 度 為500 250 125 62 5 31 25 g mL 250g L 丙 環(huán) 唑 乳 油 中 國 農 科 院 植 保 所 農 藥 廠 濃 度 為800 400 200 100 50 g mL 70 代 森 錳 鋅 可 濕 性 粉 劑 四 川 國 光 農 化 有 限 公 司 濃 度 為1000 500 250 125 62 5 g mL 25 吡 唑 醚 菌 酯 懸 浮 劑 山 東 惠 民 中 聯(lián) 生 物 科 技 有 限 公 司 濃 度 為 1000 500 250 125 62 5 g mL 430g L 戊 唑 醇 懸 浮 劑 永 農 生 物 科 技 有 限 公 司 濃 度 為600 300 150 75 37 5 g mL 采用常規(guī)菌絲生長抑制法測定供試藥劑對病原菌 的 敏 感 性 在DNA 培 養(yǎng) 基 上 培 養(yǎng)3 種 真 菌 打 取 0 5cm 菌 餅 將 其 移 到 含 有 不 同 藥 劑 濃 度 的PDA 培 養(yǎng) 基 上 每 種 藥 設5 個 濃 度 以 無 藥 處 理 作 對 照 25 培 養(yǎng)5 天 后 十 字 交 叉 法 測 量 菌 落 直 徑 計 算 抑 制 率 采 用 唐 啟 義 和 馮 明 光 13 的 實 用 統(tǒng) 計 分 析 及 其DPS 數 據 處 理 系 統(tǒng) 軟 件 用 生 物 測 定 數 量 型 數 據 機 率 值 分 析 模 型 計 算 藥 劑 的 毒 力 回 歸 方 程 y a b x EC50 和 相 關 系 數 r 同時由平均 b 值確定不同病原菌對藥劑的敏感性 2 結果與分析 2 1 黨參莖基腐病發(fā)病癥狀 黨 參 地 上 部 的 部 分 葉 片 變 黃 植 株 由 下 而 上 變 黃 枯 死 靠 近 地 面 根 上 部 的 莖 基 部 受 害 后 起 初 產 生 紅 色的類似 鐵銹 病斑 逐漸變?yōu)楹稚梁诤稚“?最 后蔓延到整個莖部 圖1 2 2 病原菌在田間的分布及種類鑒定 共 采 集 到 黨 參 標 樣52 份 室 內 分 離 到 鐮 孢 菌 株 328 株 3 種 鐮 孢 菌 在 每 個 縣 區(qū) 均 有 分 布 對 分 離 到 的 菌 株 進 行 鑒 定 和 統(tǒng) 計 尖 孢 鐮 孢 菌217 株 占66 16 茄 病 鐮 孢 菌 和 木 賊 鐮 孢 菌 為63 株 和48 株 分 別 占 19 20 和14 64 其 中 尖 孢 鐮 孢 菌 為 黨 參 莖 基 腐 病 的 優(yōu)勢種群 各病原菌的培養(yǎng)性狀和形態(tài)學特征鑒定如下 1 菌 株 編 號HX 2 3 3 1 尖 孢 鐮 孢 菌 F oxysporum 在 PDA 培 養(yǎng) 基 上 菌 落 白 色 粉 色 至 紫 色 大 型 分 生 孢 子 鐮 孢 形 中 間 粗 兩 端 尖 細 具3 5 個 橫 隔 膜 多 為3 個 隔 大 小 為 23 5 32 9 m 2 4 3 5 m 足 胞 明 顯 小 型 分 生 孢 子 橢 圓 形 長 橢 圓 形 單 胞 無 色 假 頭 狀 大小為 3 5 14 1 m 1 8 2 9 m 2 菌 株 編 號 WDCJ 1 1 1 茄 病 鐮 孢 菌 F sonali 在PDA 培 養(yǎng) 基 上 菌 落 淡 藍 色 菌 表 白 色 較 繁 茂 或 致 密 大 型 分 生 孢 子 無 色 淡 綠 色 較 寬 兩 端 圓 馬 特 型 2 5 個 隔 膜 多 為3 個 隔 膜 大 小 為 21 2 37 6 m 3 9 4 8 m 小 型 分 生 孢 子 單 胞 橢 圓 形 腎 形 無 色 大小為 7 1 14 1 m 2 9 4 1 m 3 菌 株 編 號MCJ 2 1 1 木 賊 鐮 孢 菌 F equiseti 氣 生 菌 絲 棉 絮 狀 多 數 菌 株 后 期 變 黃 褐 色 大 型 分 生 孢 子 鐮 孢 形 頂 細 胞 延 長 漸 細 足 細 胞 明 顯 3 5 個 分 隔 大 小 為 26 0 52 5 m 3 0 5 0 m 小 型 分 生 孢 子 紡錘形或腎形 2 3 病原菌分子生物學鑒定結果 測 序 結 果 與GenBenk 數 據 庫 中 進 行Nucleotide Blast 比 對 與 該 病 原 菌 的ITS 片 段 同 源 性 達99 其 中 尖 孢 鐮 孢 菌 F oxysporum 茄 病 鐮 孢 菌 F sonali 和 木 賊 鐮 孢 菌 F equiseti 的 序 列 分 別 為543 546 596 bp 黨 參 莖 基 腐 病 與 F oxysporum F sonali 和 F equiseti 親 緣 關 系 最 近 結 合 形 態(tài) 學 特 征 將 從 甘 肅 省 定 西 市 臨 洮縣 渭源縣 岷縣采集的黨參中分離得到的莖基腐病 致 病 菌 鑒 定 為 尖 孢 鐮 孢 菌 F oxysporum 茄 病 鐮 孢 菌 F sonali 和木賊鐮孢菌 F equiseti 2 4 3 種鐮孢菌對黨參的致病性測定結果 與對照相比 尖孢鐮孢菌 茄病鐮孢菌和木賊鐮孢 菌 均 對 黨 參 有 致 病 性 但 發(fā) 病 率 和 病 情 指 數 不 同 表 1 尖 孢 鐮 孢 菌 的 致 病 性 最 強 發(fā) 病 率 和 病 情 指 數 最 高 分 別 為92 0 和45 2 顯 著 高 于 茄 病 鐮 孢 菌 和 木 賊 鐮 孢 菌 P 0 05 而 茄 病 鐮 孢 菌 和 木 賊 鐮 孢 菌 對 黨 參 的致病力較弱 兩者差異不顯著 A 地上部 B 莖基部發(fā)病 圖 1 黨參莖基腐病 漆永紅等 黨參莖基腐病鐮孢菌鑒定及其對殺菌劑的敏感性研究 762 5 不同病原菌對殺菌劑的敏感性測定結果 各 種 藥 劑 在 一 定 的 濃 度 處 理 下 均 對3 種 鐮 孢 菌 有 抑制作用 隨著處理濃度的增加 抑制效果增加 不同 藥 劑 對3 種 鐮 孢 菌 的 半 致 死 中 濃 度 EC50 值 不 同 其 中 苯 醚 甲 環(huán) 唑 對3 種 鐮 孢 菌 的 EC50 值 最 小 戊 唑 醇 次 之 而 代 森 錳 鋅 最 高 表 明 苯 醚 甲 環(huán) 唑 對3 種 鐮 孢 菌 具 有 很 強 的 抑 制 活 性 表2 從 毒 力 回 歸 方 程 可 以 看 出 各 藥 劑 在 不 同 鐮 孢 菌 中 的 b 值 不 同 吡 唑 醚 菌 酯 的 b 值 最 大 戊 唑 醇 次 之 而 苯 醚 甲 環(huán) 唑 的 b 值 最 小 經 統(tǒng) 計 分 析 吡 唑 醚 菌 酯 與 苯 醚 甲 環(huán) 唑 丙 環(huán) 唑 代 森 錳 鋅 相 比 差 異 顯 著 而 苯 醚 甲 環(huán) 唑 丙 環(huán) 唑 代 森 錳 鋅 和 戊 唑 醇 四 者 之 間 差 異 不 顯 著 表 明3 種 鐮 孢 菌 對 吡 唑 醚 菌酯的敏感性較高 表3 3 討論與結論 植 物 病 害 病 原 種 類 的 確 定 是 防 治 的 前 提 和 基 礎 明確病原種類對制定合理的防治策略和提高防治效果 有 重 要 的 指 導 作 用 14 本 試 驗 首 次 開 展 了 甘 肅 省 黨 參 莖 基 腐 病 害 研 究 初 步 明 確 了 該 病 害 的 病 原 為 尖 孢 鐮 孢 菌 F oxysporum 茄 病 鐮 孢 菌 F sonali 和 木 賊 鐮 孢 菌 F equiseti 其 中 尖 孢 鐮 孢 菌 為 優(yōu) 勢 種 這 表 明 黨 參 莖 基 腐 病 病 原 種 類 復 雜 存 在 多 種 鐮 孢 菌 復 合 侵 染 的 現(xiàn) 象 因 此 不 難 想 象 田 間 黨 參 莖 基 腐 病 為 害 的 普 遍 性 和嚴重性 尖孢鐮孢菌是農業(yè)生產中危害最嚴重的土傳病原 物 之 一 具 有 很 強 的 寄 生 和 腐 生 能 力 其 致 病 機 制 15 為 1 尖孢鐮孢菌產生毒素鐮孢菌酸對寄主植物抵抗 力 的 降 低 和 對 寄 主 植 物 細 胞 代 謝 的 影 響 16 17 2 尖 孢 鐮孢菌產生的細胞壁降解酶降解寄主植物的細胞壁防 御 和 保 護 組 織 致 使 寄 主 植 物 細 胞 內 的 營 養(yǎng) 物 質 釋 放 18 19 3 尖 孢 鐮 孢 菌 與 寄 主 植 物 互 作 過 程 中 產 生 一 些 蛋 白 物 質 影 響 病 原 菌 在 寄 主 植 物 根 部 定 植 和 萌 發(fā) 20 4 尖 孢 鐮 孢 菌 對 寄 主 植 物 防 衛(wèi) 物 質 解 毒 使 寄 主 植 物 失 去 防 御 機 制 21 本 試 驗 僅 明 確 了 黨 參 莖 基 腐 病的發(fā)病癥狀 不同鐮孢菌的種類和優(yōu)勢病原菌 但關 于不同鐮孢菌和黨參莖基腐病的致病機理有待于進一 步研究 化 學 防 治 在 鐮 孢 菌 的 防 治 中 起 到 很 重 要 的 作 用 22 23 本 試 驗 通 過 室 內 藥 劑 生 測 篩 選 出 苯 醚 甲 環(huán) 唑 對3 種鐮孢菌具有很強的抑制活性 同時3 種鐮孢菌對 吡 唑 醚 菌 酯 的 敏 感 性 較 高 為 黨 參 莖 基 腐 病 的 田 間 防 治提供理論依據 然而 在實際生產當中 長期用藥單 一 病原菌對此類藥劑產生抗性 應采取多種藥劑交替 使 用 的 方 法 來 防 治 黨 參 莖 基 腐 病 同 時 對 鐮 孢 菌 這 種 土 傳 病 原 引 起 植 株 根 部 發(fā) 病 選 擇 灌 根 藥 劑 的 劑 型 應 具 有 雙 向 內 吸 的 特 點 可 針 對 不 同 劑 型 這 一 可 控 變 量展開研究 篩選出防效更好的劑型 由 鐮 孢 菌 引 起 的 病 害 不 僅 通 過 化 學 方 法 還 可 利 用 綜 合 方 法 解 決 這 是 由 于 鐮 孢 菌 是 一 種 常 見 的 土 傳 病原菌 可通過帶菌種子和種苗進行遠距離傳病 同時 施 用 未 腐 熟 糞 肥 加 重 病 害 發(fā) 生 24 這 表 明 遏 制 病 原 菌 傳播和施用充分腐熟的農家肥是防治黨參莖基腐病最 直 接 和 最 有 效 的 農 業(yè) 防 治 措 施 此 外 病 原 菌 由 傷 口 侵 入 植 株 后 迅 速 在 植 株 的 維 管 束 內 繁 殖 并 堵 塞 導 管 嚴 重 阻 礙 植 株 的 物 質 運 輸 導 致 葉 片 黃 化 萎 蔫 及 枯 死 25 這 表 明 徹 底 清 除 土 壤 中 的 螻 蛄 蠐 螬 和 地 老 虎 等地下害蟲 以免其為害造成傷口 使病原菌更易從造 成 的 傷 口 侵 入 加 重 莖 基 腐 病 的 發(fā) 生 這 進 一 步 說 明 在 鐮孢菌 尖孢鐮孢菌 茄病鐮孢菌 木賊鐮孢菌 CK 接種數 25 25 25 25 發(fā)病率 92 0 88 0 80 0 0 0 病情指數 45 2a 21 2b 17 5b 0 0c 表 1 3 種鐮孢菌對黨參的致病性測定 真菌 尖孢鐮孢菌 茄病鐮孢菌 木賊鐮孢菌 殺菌劑 苯醚甲環(huán)唑 丙環(huán)唑 代森錳鋅 吡唑醚菌酯 戊唑醇 苯醚甲環(huán)唑 丙環(huán)唑 代森錳鋅 吡唑醚菌酯 戊唑醇 苯醚甲環(huán)唑 丙環(huán)唑 代森錳鋅 吡唑醚菌酯 戊唑醇 毒力回歸方程 y 2 5348 1 1085x y 2 3749 1 0447x y 2 0356 1 0980 x y 1 6043 1 3486x y 2 1997 1 1430 x y 3 4822 0 3781x y 3 4575 0 6907x y 2 8249 0 8293x y 3 3318 0 8891x y 2 9935 0 9932x y 3 6599 0 8312x y 3 1556 0 8572x y 3 3398 0 7003x y 1 8224 1 3759x y 3 1090 1 0058x EC50 g mL 167 39 325 72 500 99 329 60 281 74 55 24 171 05 419 46 75 21 104 81 40 93 141 83 234 81 203 89 75 88 相關系數 r 0 9970 0 9742 0 9764 0 9965 0 9833 0 9941 0 9886 0 9914 0 9955 0 9934 0 9971 0 9880 0 9852 0 9705 0 9642 表 2 5 種殺菌劑對鐮孢菌菌絲生長的抑制效果 殺菌劑 苯醚甲環(huán)唑 丙環(huán)唑 代森錳鋅 平均b 值 0 77b 0 86b 0 88b 殺菌劑 吡唑醚菌酯 戊唑醇 平均b 值 1 20a 1 05ab 表 3 3 種鐮孢菌對殺菌劑的敏感性測定 77黨參移栽時 選擇無蟲感染 無機械損傷和表皮光滑健 康種苗的重要性 參考文獻 1 國 家 藥 典 編 委 會 中 華 人 民 共 和 國 藥 典 M 北 京 化 學 工 業(yè) 出 版 社 2005 199 2 盧 燕 林 張 強 李 彩 萍 等 地 道 潞 黨 參 營 養(yǎng) 特 性 與 產 地 土 壤 特 征 研 究 J 山西農業(yè)科學 2007 35 5 42 45 3 王艷 陳秀蓉 王引權 等 甘肅省黨 參病害種 類調查及 病原鑒定 J 山西林業(yè)科學 2011 39 8 866 868 871 4 何 先 元 馬 發(fā) 者 前 喬 芝 川 黨 參 規(guī) 范 化 生 產 標 準 操 作 規(guī) 程 試 行 中國現(xiàn)代中藥 2007 9 9 39 43 5 劉 春 葉 張 盈 廖 國 會 等 貴 州 道 真 縣 洛 黨 參 主 要 病 害 發(fā) 生 動 態(tài) 及 防控對策 J 中國植保導刊 2018 38 9 53 57 6 余 中 蓮 雷 美 艷 蒲 盛 才 等 重 慶 黨 參 真 菌 病 害 種 類 調 查 及 病 原 鑒 定 J 中藥材 2015 38 6 1119 1122 7 陳 秀 蓉 甘 肅 省 藥 用 植 物 病 害 及 其 防 治 M 北 京 科 學 出 版 社 2015 72 73 8 龔 成 文 米 永 偉 漆 永 紅 等 甘 肅 中 藥 材 連 作 障 礙 問 題 探 析 J 甘 肅科技 2020 36 4 153 155 9 方中達 植病研究方法 M 北京 中國農業(yè)出版社 2001 6 13 10 王 拱 辰 鄭 重 葉 琪 明 等 常 見 鐮 孢 菌 鑒 定 指 南 M 北 京 中 國 農 業(yè) 科學技術出版社 1996 5 11 Murry M Thompson W Rapid isolation of high molecular weight plantDNA J NucleicAcidsRsearch 1980 8 19 4321 4326 12 Michielse C B Rep M Pathogen profile update Fusarium oxysporum J MolecularPlantPathology 2009 10 311 324 13 唐 啟 義 馮 明 光 實 用 統(tǒng) 計 分 析 及 其DPS 數 據 處 理 系 統(tǒng) M 北 京 科學出版社 2002 121 140 14 漆 永 紅 徐 冬 張 彥 梅 等 嘉 峪 關 市 洋 蔥 基 盤 腐 爛 病 病 原 鑒 定 及 藥 劑室內毒力測定 J 草業(yè)學報 2013 22 5 339 344 15 張 榮 姜 子 德 李 敏 慧 等 尖 孢 鐮 孢 菌 致 病 機 理 及 相 關 致 病 基 因 研 究進展 J 中國農學通報 2011 27 15 254 258 16 Marr MT Vergani P Albergoni F G Relationship between Fusaric acid uptake and its binding to cell structures in leaves of Egeria densaanditstoxiceffectsonmembranepermeabilityandrespiration J PhysiologicalandMolecularPlantPathology 1993 42 141 157 17 Bouizgarne B Brault M PennarumAM et al Electrophysiological responses to Fusaric acid of root hairs from seedlings of date palm susceptible and resistant to Fusarium oxysporum f sp Albedinis J JournalofPhytopathology 2004 152 321 324 18 Ye S F Yu J Q Peng Y H et al Incidence of Fusarium wilt in Cucumis sativus L is promoted by cinnamic acid an autotoxin in rootexudates J 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