北 方 園 藝 食 用 菌 第 一作者簡介 宋瑩 女 碩 士 副研究員 現(xiàn)主要 從事食用菌遺傳育種與栽培技術(shù)等研究工作 責(zé) 任作者 張敏 女 博 士 研究員 現(xiàn)主要從事食用 菌育種及栽培等研究工作 基 金項(xiàng)目 沈陽市中青年科技創(chuàng)新人才支持計(jì)劃資助項(xiàng)目 食用菌產(chǎn)業(yè)體系資助項(xiàng)目 收 稿日期 煙色離褶傘工廠化栽培菌株的初步篩選 宋 瑩 劉 娜 張 士 義 張 敏 馮 虎 于 鳳 臣 遼寧省農(nóng)業(yè)科學(xué) 院 食用菌研究所 遼寧 沈陽 彰武縣第二高級中學(xué) 遼 寧 彰武 新賓滿族自治縣葦子峪鎮(zhèn)政府農(nóng)經(jīng)站 遼 寧 撫順 摘 要 以 株 煙色離褶傘菌株為試材 按照拮抗 固體和液體菌落生長 農(nóng)藝性狀栽 培試驗(yàn)的方法 進(jìn)行不同煙色離褶傘菌株親緣關(guān)系和菌株生長特性研究 以期為煙色離褶傘 工廠化栽培提供參考依據(jù) 結(jié)果表明 通過拮抗試驗(yàn)初步判定出 菌株是各自獨(dú) 立菌株 菌株為同一菌株 菌株綜合性狀最佳 在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)時 菌絲 生長均勻 且生長速度最快 達(dá)到 在 液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)時 菌球密 度最大 為 個 菌 球直徑最小 單個菌球直徑為 生 物量為 在 出菇栽培試驗(yàn)中 菌株的污染率最低 出菇整齊 生物學(xué)效率顯著高于其它 菌株 達(dá)到 關(guān) 鍵詞 煙色離褶傘 拮抗 菌絲生長 栽培 中圖分類號 文 獻(xiàn)標(biāo)識碼 文章編號 煙 色離褶傘 屬 傘菌目 白 蘑科 離 褶傘屬 俗 稱檳榔菇或賓王菇 該 菇氨 基酸含量豐富 口感獨(dú)特 菌肉細(xì)膩 久燉不綿 被 當(dāng)?shù)匕傩找暈檎淦?近 年來 隨著野生煙色離 褶傘菌株的人工馴化和栽培成功 離褶傘規(guī)?；?工廠化栽培方向也逐漸明確 離褶傘工廠化栽培 是 利用現(xiàn)代工業(yè)設(shè)施設(shè)備 通過人為控制其不同 生長階段的環(huán)境條件 進(jìn)行規(guī)模化栽培 具有生產(chǎn) 周期短 子實(shí)體產(chǎn)量高 品質(zhì)好等特點(diǎn) 因 此 明確離褶傘種性及品種之間親緣關(guān)系 篩選菌絲 生長快 生長周期短的菌種是煙色離褶傘工廠化 栽培的基礎(chǔ)保障 該研究以收集到的 個 煙色 離褶傘菌株為試材 對其進(jìn)行生長特性及親緣關(guān) 系初步試驗(yàn)和分析 以期為煙色離褶傘工廠化栽 培的品種選擇提供參考依據(jù) 材 料與方法 試 驗(yàn)材料 供 試菌株 供試菌株共 株 編 號為 號 由 表 供試煙色離褶傘菌株 菌 株 編 號 原 始采集地點(diǎn) 撫 順市 彰 武縣 彰 武縣 彰 武縣 紫 外誘變 彰 武縣 彰 武縣 彰 武縣 黑 龍江省 彰 武縣 遼 寧省農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所提供 原始菌株 從煙色離褶傘原發(fā)地阜新彰武縣 撫順市 黑龍江 省采集 培 養(yǎng)基配方 改 良培養(yǎng)基 去 皮馬鈴薯 麥 芽 糖 大豆蛋白胨 玉米面 磷酸二氫 鉀 硫 酸鎂 瓊 脂 蒸餾水 液 體培養(yǎng)基 去 皮馬鈴薯 麥 芽 糖 大豆蛋白胨 玉米面 磷酸二氫鉀 硫 酸鎂 蒸餾水 栽 培培養(yǎng)基 培養(yǎng)基配方為草炭 玉 米 芯 玉 米秸稈 麥 麩 石 膏 石 灰 試 驗(yàn)方法 菌 株親緣關(guān)系分析 將供試菌株接入 改 良 培 養(yǎng)基 的平皿中 每個菌株接種 個菌塊 接種后置于 恒 溫箱中培養(yǎng) 觀察平皿上菌絲交接處的反 應(yīng) 判斷菌株之間的親緣關(guān)系 試 驗(yàn)設(shè)置 次 重復(fù) 固 體培養(yǎng)基菌絲培養(yǎng) 將 株 供試 菌 株 活 化 后 分 別 取 直 徑 為 的 菌種塊 接種于 改 良 培 養(yǎng)基 的平皿中央部位 接種后置于 恒 溫箱培養(yǎng) 記錄每天菌絲生長位置 顏色 長勢 濃密程度及 滿皿時間 采用十字劃線法計(jì)算菌絲生長速度 試 驗(yàn)設(shè)置 次重復(fù) 菌絲生長速度 菌 落直徑 培養(yǎng) 時間 液 體培養(yǎng)基菌絲培養(yǎng) 按照液體培養(yǎng)基配方制作培養(yǎng)基 分裝在容 量為 的 三角瓶中 每瓶裝 滅 菌 在無菌條件下接種 置于 恒 溫?fù)u床 振蕩培 養(yǎng) 轉(zhuǎn) 速 培 養(yǎng)結(jié)束后 記錄菌 絲球形態(tài)和培養(yǎng)液顏色 測量菌絲球大小和菌絲 密度 培養(yǎng)液經(jīng)過濾網(wǎng)過濾 所得菌絲體用蒸餾 水洗滌 次后 置于 干 燥箱烘干至恒質(zhì)量 電子天平稱量菌絲體質(zhì)量 并計(jì)算每 液 體 培養(yǎng)基中的菌絲體生物量 設(shè) 次 重復(fù) 出 菇栽培試驗(yàn) 模擬工廠化栽培條件 采用 聚 丙烯 瓶進(jìn)行生產(chǎn)栽培 每個菌株接種 瓶 觀 察各菌 株子實(shí)體的形態(tài)特征 并隨機(jī)抽取 個 子實(shí)體 測量菌蓋直徑 菌蓋厚度 菌柄長度 菌柄直徑 取 平均值 并計(jì)算生物學(xué)效率 生 物學(xué)效率 子實(shí)體鮮質(zhì)量 培養(yǎng)料干 質(zhì)量 數(shù) 據(jù)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用 數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)進(jìn)行分析 結(jié) 果與分析 菌 株間親緣關(guān)系 拮抗反應(yīng)的試驗(yàn)操作簡單 結(jié)果也比較容 易辨別 常被用于食用菌的菌種鑒別研究 從 表 和 圖 可以看出 大部分菌株之間拮抗現(xiàn)象 比較明顯 只有少數(shù)菌株拮抗現(xiàn)象不明顯或無拮 抗現(xiàn)象 菌株 和其它幾株菌株均存 在明顯拮抗現(xiàn)象 初步判定為區(qū)別于其它菌株的 株獨(dú)立菌株 菌株和 菌株無拮抗 與 菌株拮抗不明顯 菌株和 菌株無拮抗 與 菌株拮抗不明顯 菌株和 菌株無拮抗 與 菌株拮抗不明顯 可判定 菌 株為同一菌株 固 體培養(yǎng)基菌絲生長情況 從表 可以看出 不同煙色離褶傘菌株的母 種菌絲生長速度和長勢差異較大 菌株的菌絲 生長速度最快 為 且 菌絲長勢強(qiáng) 其次為 菌株 菌絲生長速度為 長 勢 強(qiáng) 生長速度最慢的為 菌 株 僅 為 長 勢相對弱 北 方 園 藝 月 上 表 菌株間拮抗反應(yīng) 菌 株編號 不 明顯 不明顯 不 明顯 不 明顯 注 拮 抗特別明顯 拮 抗明顯 無 拮抗 圖 部分菌株拮抗試驗(yàn)結(jié)果 液 體培養(yǎng)基菌絲生長情況 從表 可以看出 不同菌株在相同培養(yǎng)條件 下的液體培養(yǎng)基中 菌球密度 直徑 整齊度 菌絲 生物量及顏色表現(xiàn)不同 搖瓶 后 株 菌株 均有菌球出現(xiàn) 表現(xiàn)最好的為 菌株 菌球密度 最大 為 個 菌 球 直 徑 最 小 為 菌 球整齊度較好 菌球生物量最大 為 顏 色為深黃色 工 廠化栽培出菇情況 供試的 株 煙色離褶傘菌株 其中 和 菌株沒有出菇 出菇的 株菌株單菇質(zhì)量和菇質(zhì) 方面存在差異 表 其 中 菌株污染率最低 菇蓋較厚 菌柄最長 生物學(xué)效率顯著高于其它 株菌株 達(dá)到 且 出菇整齊度高 具有培養(yǎng) 為工廠化栽培品種的潛力 菌株生物 學(xué)效率與 菌株差異不顯著 為 其 中 菌 株污染率最高 為 菌 株單菇產(chǎn)量 最低 生物學(xué)效率僅為 污 染率最高 達(dá)到 在 株 菌株中 菌株特點(diǎn)較突出 單菇 質(zhì)量最大 菌蓋直徑最大 菌柄短而粗 較適宜 地栽 第 期 北 方 園 藝 表 固體培養(yǎng)基菌絲生長情況 菌 株編號 菌 絲長速 菌 絲長勢 注 菌 絲數(shù)據(jù)為 不同小寫英文字母表示菌株間差異顯著 下 同 表 液體培養(yǎng)基菌種生長情況 菌 株編號 菌 球密度 個 菌 球直徑 菌 球整齊度 菌 絲生物量 干質(zhì)量 培 養(yǎng)基顏色 金 黃色 淺 金黃色 金 黃色 淺 金黃色 金 黃色 深 黃色 金 黃色 金 黃色 淺 金黃色 金 黃色 注 表 示均勻 表 示不均勻 表 不同菌株農(nóng)藝性狀 菌 株編號 污 染率 單 菇質(zhì)量 菌 蓋直徑 菌 蓋厚度 菌 柄長度 菌 柄直徑 生 物學(xué)效率 討 論與結(jié)論 年 煙 色離褶傘首次被馴化成功 之 后 一 些學(xué)者對煙色離褶傘母種培養(yǎng)基配方進(jìn)行 了篩選和優(yōu)化 篩選出煙色離褶傘母種生長培養(yǎng) 基配方為葡萄糖 蛋 白 胨 硫 酸 鎂 課題組前期對煙色離褶傘液 體 菌種培養(yǎng)條件進(jìn)行了優(yōu)化并對栽培配方進(jìn)行了 北 方 園 藝 月 上 篩 選 菌絲生長周期縮短到 生 物學(xué)效率達(dá)到 煙 色離褶傘目前尚未突破規(guī)模工廠化 人工栽培的技術(shù)瓶頸 優(yōu)良菌株篩選 培養(yǎng)基優(yōu) 化 制種技術(shù) 縮短制種和栽培周期 提高生物學(xué) 效率 穩(wěn)定產(chǎn)品優(yōu)良性狀等方面依然是該菇種人 工栽培的重點(diǎn)研究方向 該研究從資源入手 對收集到的種質(zhì)開展親 緣關(guān)系 菌株的菌絲生長及栽培試驗(yàn) 通過拮抗 試驗(yàn)初步鑒定出 菌株是各自獨(dú)立菌 株 菌株為同一菌株 通過菌絲生長 速度 液體菌種生長情況及農(nóng)藝性狀等指標(biāo)篩選 出 菌株較適宜工廠化栽培 參考文獻(xiàn) 楊 軍 林文 王興龍 野生賓王菇人工馴化研究初報(bào) 食 用菌 劉 昆 宋小亞 蔣俊等 食用菌拮抗反應(yīng)的定量分析 食 藥用菌 趙 季 灰離褶傘液體發(fā)酵工藝研究及成分分析 重慶 西南大學(xué) 馮 云利 湯昕明 余金鳳 等 離褶傘屬真菌研究概況 蔬 菜 吳 漢瓊 陳躬國 趙光輝 等 秀珍菇菌株的拮抗與品比篩選 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué) 岳 萬松 郭相 馮云利 等 兩個離褶傘野生菌株的鑒定及其 液體培養(yǎng)基的初步篩選 北方園藝 田 夢媛 高原 杜雙田 等 個香菇菌株農(nóng)藝性狀比較研 究 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào) 程 繼紅 鄭慧芬 賁偉東 等 荷葉離褶傘工廠化栽培 食 用菌學(xué)報(bào) 張 金霞 食用菌種學(xué) 北京 中國農(nóng)業(yè)出版社 張 敏 李紅 蘇君偉 賓王菇母種培養(yǎng)基的篩選 食用菌 李 紅 張敏 劉俊杰 賓王菇母種培養(yǎng)基的優(yōu)化研究初報(bào) 食用菌 宋 瑩 呂立濤 楊鎮(zhèn) 等 煙色離褶傘液體菌種培養(yǎng)條件及栽 培基質(zhì)優(yōu)化 食用菌學(xué)報(bào) 第 期 北 方 園 藝