北 方 園 藝 園林花卉 第一作者簡介 白艷榮 男 彝族 碩士 副教授 現 主要從事園林花卉植物等研究工作 責任作者 蔣亞蓮 女 碩士 研究員 現主要從事 花卉生產等研究工作 收稿日期 花毛茛組培快繁技術研究 白 艷 榮 蔣 亞 蓮 王 進 英 昆明學院 云南 昆明 云南省農業(yè)科學院 花卉研究所 云南 昆明 摘 要 以花毛茛初代培養(yǎng)無菌苗為試材 采用 培養(yǎng)基 分別向培養(yǎng)基中添加不同 配比的細胞分裂素 和細胞生長素 對花毛茛進行初代誘導 增殖培養(yǎng) 繼代生根 培養(yǎng) 并以不同比例泥炭 蛭石 珍珠巖 河沙為基質 對花毛茛進行煉苗移栽試驗 結果表 明 最佳初代誘芽培養(yǎng)基為 誘導率達 增殖誘導愈傷組織培養(yǎng)基為 增殖系 數為 繼代生根培養(yǎng)基為 生根率 移栽最適基質為 泥炭 河沙 蛭石 成活率 關鍵詞 花毛茛 增殖培養(yǎng) 生根培養(yǎng) 愈傷組織 中圖分類號 文獻標識碼 文章編號 花毛茛 屬毛茛科花毛茛屬多年生草本花卉 又名芹菜花 陸蓮花 花毛茛莖干直立 葉片碧綠 花色豐 富 有紅 黃 綠 白 觀賞價值較高 適宜南溫帶 和亞熱帶地區(qū)園林 庭院做綠化 美化栽培 也可 盆栽觀賞和鮮切花生產 花毛茛主要作為冬春季 鮮切花生產上市 受到廣大消費者的青睞 隨著 種植規(guī)模的逐年增加 花毛茛用于鮮切花生產的 種苗需求量日趨加大 而鮮切花生產的種苗主要 依靠進口 難以滿足市場需求 通過種子繁殖難 以獲得花色純一的切花種球 分球繁殖增殖較慢 種源引進成為生產者主要的成本投入和困難 目 前 花毛茛組培增殖已獲得成功 但由于增殖 較慢 大規(guī)模出苗存在著一定的難度 要保證組 培苗順利培育為切花種球 組培苗移栽成為組培 繁育花毛茛種球的又一障礙 該研究對花毛 茛組培快繁技術進行研究 以期為摸清云南當地 花毛茛組培快繁技術 建立完善 高效的花毛茛組 培快繁體系 為工廠化生產花毛茛優(yōu)質種苗和云 南花毛茛產業(yè)的發(fā)展提供參考依據 材料與方法 試驗材料 供試材料為英茂花卉公司組培室的花毛茛初 代培養(yǎng)無菌苗 供試儀器 高壓蒸汽滅菌鍋 電子天平 燒杯 酸度計 無菌培養(yǎng)皿 超凈工作臺 酒精燈 解剖 刀 鑷子 顯微鏡 記號筆 培養(yǎng)架 穴盤等 供試 試 劑 瓊 脂 蔗 糖 萘 乙 酸 泥炭 蛭石 珍珠巖 河沙 試驗方法 花毛茛初代培養(yǎng) 以 培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基 添加植物激素 和 共設置 個試驗組 個空 白對照組 采用單因素隨機試驗設計共 個組合 表 調至 將消毒好的花毛茛葉片沿 中部橫切 把 片葉切為 塊作外植體 外植體背 面再用刀輕輕劃一傷口 切好的外植體接種到培 養(yǎng)瓶 每瓶 塊外植體 瓶為 個處理 每個處 理設置 個重復 將接種后的花毛茛組培苗放到 瓶苗培養(yǎng)室中進行培養(yǎng) 其培養(yǎng)的溫度為 光強為 光照時間為 在培養(yǎng)的過程中每隔 觀察一次培養(yǎng)瓶中組 培苗的生長狀況 統(tǒng)計各處理的不定芽再生率和 愈傷誘導率 選出適合愈傷組織形成和不定芽再 生的激素配比 表 花毛茛初代培養(yǎng)基 與 濃度配比 處理 重復次數 次 接種數 個 花毛茛芽的增殖 以 培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基 添加植物激素 和 采用雙因素隨機正交實驗設計共 個組合 表 把高度在 以上的芽切下接 入增殖培養(yǎng)基 每瓶接 個芽 每個處理接 瓶 重復 次 接種后放在培養(yǎng)室內培養(yǎng) 后記 表 花毛茛增殖培養(yǎng)基 與 濃度配比 處理 重復次數 次 接種數 個 錄無菌苗的有效芽增殖數并選出最適宜增殖培 養(yǎng)基 這 個處理的培養(yǎng)基配方 均加入蔗糖 瓊脂 花毛茛無菌苗生根培養(yǎng) 以 培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基 培養(yǎng)基中添 加 濃度組合 配比 設 置 一 個 空 白 對 照 表 調 至 采用 增 殖 試 驗 得 到 的 無 菌 苗 選 取 株 高 以上 長勢良好 無污染無病的苗接入生根 培養(yǎng)基 每瓶接入 個無根苗 每個處理 瓶 重 復 次 接種后放在培養(yǎng)室內培養(yǎng) 后觀察 記錄無菌苗的生根情況選出最適生根培養(yǎng)基 隨 機每個處理選取 株長勢中等的花毛茛組培苗 用鑷子分別將組培苗取出 用清水對根系進行清 洗 統(tǒng)計花毛茛組培苗的生根率 根長 根粗 根的 數量 將組培苗培養(yǎng) 后 隨機每個處理取 株長勢中等的花毛茛組培苗 將組培苗取出 用清 水對根系進行清洗 測量每株的根長 然后取其平 均值 以組培苗根基 處的直徑作為根粗 表 花毛茛生根培養(yǎng)基 濃度配比 處理 濃度 重復次數 次 接種數 個 煉苗和移栽 以泥炭 蛭石 珍珠巖 河沙 火山巖為基本材 料 分別配置泥炭 河沙 珍珠巖為 泥 炭 河沙 蛭石為 火山巖 泥炭為 蛭石 泥炭為 的栽培基質 用 多菌靈 倍液可濕性粉劑將基質拌到潮濕狀 態(tài) 分裝在育苗盤里制成移栽苗床 將培養(yǎng)瓶移出培養(yǎng)室 置于常溫室內 利用自 然光照培養(yǎng) 周 打開瓶蓋 煉苗 煉苗 結束后把苗從培養(yǎng)瓶移出并洗凈根部的瓊脂 以 防移栽時爛根 洗干凈的全部根系用 倍 液 多菌靈浸泡 然后晾干準備移栽 第 期 北 方 園 藝 把苗移栽到穴盤 每個穴移栽 株 每個處理移栽 株 移栽完成后把苗放到塑料小棚內養(yǎng)護 每 隔 對棚內的苗噴霧一次 噴霧以基質濕潤 為宜 避免積水以防爛苗 另外每隔 周噴 次 倍液 多菌靈 后觀察記錄植 株生長勢 根生長情況 計算移栽成活率 選出最 適移栽的基質及配比 項目測定 不定芽再生率 再生不定芽的葉片數 接種總葉片數 愈傷誘導率 形成愈傷 的葉片數 總接種葉片數 增殖系數 增殖 芽的總數量 接種的外植體總數 生根率 生 根株數 誘導株數 平均根長 所有根 長之和 總根數 平均根數 所有根數之和 生根 苗數 數據分析 采用 軟件處理數據 用 軟件進行 差異顯著性分析 結果與分析 不同激素濃度配比對花毛茛初代培養(yǎng)的影響 培養(yǎng) 后觀察記錄結果 計算不同激素濃 度培養(yǎng)下外植體愈傷組織的誘導率和誘芽率 從 表 可以看出 處理 均能誘導外植 體形成愈傷 其中處理 誘導愈傷效果最好 能達 到 處理 和 與處理 之間差異不顯 著 但誘導愈傷組織的效果要差一些 因此誘導外 植體 形 成 愈 傷 組 織 以 效果最好 激素的濃度越高 越有利于愈傷的形成 從誘芽結果來看 處理 效果最好 當激素 濃度高于 時 誘芽效果都會變差 在濃度大于 外植體無法誘導出芽 外植體以形成愈傷組織為 主 因此 誘導外植體形成芽以 效果最好 不同激素濃度配比對花毛茛增殖的影響 把高度在 以上的芽切下接入增殖培養(yǎng) 基 接入的芽都形成了新芽 但增殖系數存在差 異 培養(yǎng) 后對芽的增殖系數進行統(tǒng)計分析 從表 可以看出 處理 之間差異不顯 著 但處理 的增殖系數最高 增殖效果最好 濃度為 時增殖效果要比濃度 在 和 時增殖效果好 的 配合適宜濃度的 對 增殖能起到一定的促進作用 表 不同激素濃度配比對花毛茛初代培養(yǎng)的影響 處理 激素濃度 愈傷誘導率 誘芽率 注 應用 法在 水 平 下 進 行 多 重 比 較 字 母 不 同 表 示 差 異 顯著 表 不同激素濃度配比對花毛茛芽增殖的影響 處理 激素濃度 新增芽數 個 增殖系數 不同激素濃度配比對花毛茛生根的影響 從表 可以看出 花毛茛的生根比較容易 在 濃度為 時生根率也可以達到 但生根數和平均根長與處理組相比要差 一些 當 濃度為 時生根效果 最好 從平均生根數和平均根長來看 與處理 和 處理 差異不 顯 著 與 和 處 理 及 處 理 北 方 園 藝 月 上 表 不同激素濃度配比對花毛茛生根的影響 處理 激素濃度 平均生根數 個 平均根長 根粗 生根率 植株生長狀況 根少 根系粗壯 紅白色 根多 根系纖細 紅白色 根多 較健壯 根系紅白色 根多 根系細弱紅白色 根較少 根系細弱黃綠色 差異顯著 說明 最有利 于生根 不同基質配比對花毛茛組培苗移栽成活率 的影響 泥炭富含腐殖質 能促進植株生根和生長 固 體顆粒體河沙 蛭石 珍珠巖和火山巖能改善基質 的透氣性 從表 可以看出 各處理中以處理 移栽效果最好 說明處理 的基質養(yǎng)分和透氣性 能都比較合理 所以生根情況最好 表 不同基質配比對花毛茛組培苗移栽成活率的影響 處理 基質 配比 生根率 平均生根數 個 成活率 泥炭 河沙 蛭石 泥炭 河沙 珍珠巖 泥炭 蛭石 火山巖 泥炭 討論 花毛茛的組培快繁通常采用葉片作為外植 體 花莖只有在花毛茛的生殖生長階段才能得到 并且花莖的生長情況不一致 過嫩和過老的花徑 都不適合作為外植體使用 因此用花莖作為外植 體會給挑選材料帶來一定困難 選用葉片作為外 植體就能避免以上問題 另外選用葉片作為外植 體不受時間 季節(jié)的限制 能靈活方便的進行組培 繁殖工作 對 花 毛 茛 進 行 芽 的 增 殖 發(fā) 現 最有利于 芽 的 增 殖 當 的 濃 度 提 升 為 時 芽的增殖系數會降低 并且在切 口處會形成大量的愈傷 芽的數量降低跟形成的愈 傷組織消耗大量養(yǎng)分有關 另外在 的濃度 為 時 適當降低 濃度也會提高 芽的增殖系數 說明在 濃度適宜時 相對提高 細胞分裂素和生長素的比值會提高芽的增殖系數 花毛茛愈傷組織的增殖目前還沒有相關的研究文 獻 如果想通過愈傷組織發(fā)生途徑來誘芽 那就需 要足夠量的愈傷組織 對愈傷組織進行增殖不僅要 求愈傷組織的產量高 還要求愈傷組織要健康生 長 從試驗結果中發(fā)現 能兼 顧 個指標的要求 高濃度的 會導致愈傷組 織玻璃化 另外當 濃度為 時 適當降低細胞分裂素與生長素的比值也會對愈 傷組織的增殖起到一定的促進作用 采用愈 傷組織發(fā)生途徑誘芽 在愈傷組織分化階段消耗的 時間比較長 導致了愈傷組織發(fā)生途徑誘芽的效率 比較低 另外愈傷組織長時間進行繼代培養(yǎng)容易玻 璃化 以上因素導致了愈傷發(fā)生途徑誘芽的效果 不如器官發(fā)生途徑的誘芽效果理想 花毛茛的生根采用 作為生根劑 處理結 果以 效果最好 處理結果與 處理結果 差 異 顯 著 處 理 結 果 與 處理結果差異不顯著 第 期 北 方 園 藝 對植物生根的濃度在 效果最 好 花毛茛的移栽從試驗結果來看比較容易 只要 在移栽的過程中做好基質消毒 保持較高的空氣濕 度和適宜的基質濕度移栽成活率非常高 另外 不同的移栽基質對移栽苗的生根會有一定的影響 基質以泥炭 河沙 蛭石 效果最好 結論 該試驗結果表明 最佳初代誘芽培養(yǎng)基為 誘導率達 增殖誘導愈傷組織培養(yǎng)基為 增殖系數 為 繼代生根培養(yǎng)基為 生根率 移栽最適基質為泥炭 河 沙 蛭石 成活率 參考文獻 王彩云 包滿珠 胡惠蓉 等 花卉學產學研相結合的探索與 實踐 華中農業(yè)大學學報 社會科學版 吳麗芳 田興山 花毛茛組培方法研究 云南農業(yè)科技 胡平 花毛茛栽培技術 中國花卉園藝 顧永華 劉科偉 潘春屏 花毛茛商品球根規(guī)模化生產技術 黑龍江農業(yè)科學 陳進友 易朝暉 花毛茛的繁殖及盆花生產栽培技術 北 方園藝 王其剛 柴衛(wèi)淑 低溫預處理對花毛茛種子萌發(fā)的影響 湖南農業(yè)大學學報 自然科學版 李洪忠 彭世勇 于艷 等 花毛茛葉片組織培養(yǎng)的初步探索 遼寧農業(yè)職業(yè)技術學院學報 盛玉婷 植物組織培養(yǎng)技術及應用進展 安徽農學通報 梁冰 楊愛馥 樊銳鋒 等 矮牽牛 組織培養(yǎng)技術研究 東北農業(yè)大學學報 李學磊 李娟 潘春屏 花毛茛育種技術 中國花卉園藝 祁宏英 徐洪國 張志 矮牽牛組織培養(yǎng)及不同基質對生根 的影響 北方園藝 肖林 花毛茛品種及切花生產技術 農村實用工程技術 溫室園藝 李丕睿 顧永華 花毛茛育種及繁殖栽培技術研究進展 安徽農學通報 黃建明 花毛茛栽培技術 河北林業(yè)科技 陳進友 王列富 花毛茛灰霉病的防治 中國花卉園藝 蔡祖國 徐小彪 周會萍 植物組織培養(yǎng)中的玻璃化現象及 其預防 生物技術通訊 陸從巍 趙震虎 王鵬 等 提高花卉組培苗移栽成活率的技 術 農業(yè)科技通訊 劉賓照 高紅梅 陶艷 不同濃度 種激素對花毛茛組培增 殖率的影響 安徽農學通報 王其剛 張素芳 陳敏 花毛茛組培苗移栽試驗初探 天 津農業(yè)科學 李玲 對花毛茛無根試管苗生根效應的研究 高等 繼續(xù)教育學報 鄒娜 李意 連芳青 等 優(yōu)良觀賞藥用地被植物 花毛茛組 織培養(yǎng)及快速繁殖研究 江西農業(yè)大學學報 柳娜 郭延秀 晉玲 等 甘肅省榆中縣毛茛科藥用植物資源 調查研究 甘肅中醫(yī)藥大學學報 北 方 園 藝 月 上 北 方 園 藝 園林花卉 作者簡介 李紅 女 碩士 副教授 現主要從事植 物栽培及植物組織培養(yǎng)等研究工作 基金項目 河北科技廳重點研發(fā)計劃資助項目 收稿日期 蝴蝶蘭組培苗對不同移栽基質的適應性 李 紅 保定職業(yè)技術學院 農林與生物工程系 河北 保定 摘 要 以蝴蝶蘭組培苗為試材 研究了炭基肥和椰糠 水苔以不同比例混合對移栽前 基質理化性質和移栽后基質理化性質 蝴蝶蘭組培苗的生長特性的影響 以期為蝴蝶蘭的栽 培提供參考依據 結果表明 在椰糠和水苔中加入炭基肥 顯著改變了基質的理化性質 提 高了有機質 全氮 全磷和全鉀含量 蝴蝶蘭成活率提高了 葉寬增加 葉綠素含量和凈光合速率顯著提高 其中 椰糠和炭基肥以 生長狀 況最好 水苔和炭基肥以 生長狀況最好 說明炭基肥在蝴蝶蘭組培苗基質中的應用有 顯著效果 關鍵詞 蝴蝶蘭 組培苗 移栽基質 中圖分類號 文獻標識碼 文章編號 蝴蝶蘭原產于亞洲南部熱帶地區(qū) 葉肉質 莖 短縮 色彩艷麗 花期持久 有 洋蘭皇后 的美譽 具有很高的經濟價值和觀賞價值 從 世紀 末開始 在我國迅速發(fā)展 由于蝴蝶蘭很難進行 分株繁殖 常規(guī)培養(yǎng)條件下種子發(fā)育不完全 極難 萌發(fā) 因此多采用組織培養(yǎng)來繁殖種苗 其具有 培育周期短 繁殖系數大 性狀穩(wěn)定等特點 但是 由于組培苗是在封閉無菌 養(yǎng)分充足 光溫適宜的 環(huán)境中生長的 一旦出瓶移栽 外界劇烈的環(huán)境變 化極易造成病毒侵染 因此創(chuàng)造良好的移栽條 件是保證幼苗生長的關鍵所在 其中培養(yǎng)基質是 最為關鍵且直接的影響因素 由于蝴蝶蘭氣生根 對根際氧氣含量要求較高 基質類型和質量直接 影響蝴蝶蘭生長及質量 因此 保肥水能力強 疏松透氣的基質能夠有效保證蝴蝶蘭的正常生長 發(fā)育 近年來 研究者對蝴蝶蘭組培苗移栽基質 的選擇做了一些探索 許明修等 研究表明 椰糠 可替代泥炭進行蝴蝶蘭栽培 馬春花 研究表 明 水苔 菇渣 和水苔 菇渣 的混 合基質均能保證 寸蝴蝶蘭植株正常生長 水 苔 鋸末 能保證 寸蝴蝶蘭植株正常 生長 張京偉等 對多種蝴蝶蘭基質理化性質進 行比較 研究發(fā)現 椰糠 椰塊以及泥炭可在蝴蝶 蘭栽培中廣泛使用 蝴蝶蘭組培苗對養(yǎng)分的需求 量較大 充足的養(yǎng)分對幼苗生長影響較大 炭基 肥含有生物炭和有機質 能夠起到調節(jié)基質理化 性質 供給養(yǎng)分的作用 且炭基肥具有肥料緩釋的 特點 能夠緩慢 持續(xù)供給養(yǎng)分 但是目前對于 蝴蝶蘭組培移栽基質的研究主要集中在不同基質